粘膜给药的大麻素类液体制剂转让专利
申请号 : CN03824097.1
文献号 : CN100594897C
文献日 : 2010-03-24
发明人 : B·A·怀特尔
申请人 : GW药品有限公司
摘要 :
本发明涉及药物制剂，且更特别是涉及经过泵作用喷雾剂给药的含有大麻素类的制剂。详细地说，本发明涉及用于经粘膜表面给予亲脂性药物的药物制剂，所述亲脂性药物包括一种或多种大麻素类，所述制剂含有：至少一种包括一种或多种大麻素类的亲脂性药物、溶剂和助溶剂，其中溶剂和助溶剂在制剂中的总量大于制剂的55%wt/wt，所述制剂不含自乳化剂和/或含氟抛射剂，并且大麻素类以大于10mg/ml的量存在于所述制剂中。
权利要求 :
1.一种用于经粘膜表面给予亲脂性药物的液体药物制剂，它包含： 一种或多种大麻素类、乙醇和丙二醇，其中存在于所述制剂中的乙醇 和丙二醇的总量大于该制剂的55％wt/wt，该液体药物制剂中的含水量 低于5％体积，且所述制剂不含自乳化剂且不含氟抛射剂，并且所述 液体药物制剂被包装成以喷雾剂进行传递，所述喷雾剂在传递时具有 20-40微米的平均空气动力学粒度。
2.一种权利要求1要求的液体药物制剂，其中传递时的所述平均 粒度在25-35微米的范围内。
3.一种权利要求1要求的液体药物制剂，其中传递时的所述平均 粒度在30-35微米的范围内。
4.一种权利要求1要求的液体药物制剂，其中乙醇/丙二醇以60/40 到40/60范围内的相对重量比存在。
5.一种权利要求1～3中任一项要求的液体药物制剂，其中所述 大麻素类为至少一种来自至少一种大麻属植物的提取物。
6.一种权利要求5要求的液体药物制剂，其中所述来自至少一种 大麻属植物的提取物为植物药物质。
7.一种权利要求6要求的液体制剂，其中所述植物药物质经历提 取步骤，以便除去存在于植物原料中的大部分蜡状物和其它溶剂不溶 的原料。
8.一种权利要求1～3中任一项要求的液体药物制剂，该制剂基 本由一种或多种大麻素类、乙醇和丙二醇组成，或者还含有调味剂和/ 或阿片剂。
9.一种权利要求1～3中任一项要求的液体药物制剂，其中所述 大麻素类包含四氢大麻酚、Δ9-四氢大麻酚、Δ8-四氢大麻酚、Δ9-四 氢次大麻酚、大麻二酚、次大麻二酚、大麻酚、大麻环萜酚、大麻萜 酚或其任何混合物。
10.一种权利要求9要求的液体药物制剂，其中所述大麻素类包 括四氢大麻酚和/或大麻二酚。
11.一种权利要求10要求的液体药物制剂，其中四氢大麻酚和大 麻二酚以0.9∶1.1到1.1∶0.9的比率(w/w)存在。
12.一种权利要求9要求的液体药物制剂，所述制剂包含大麻二 酚和四氢大麻酚两种大麻素类，或四氢次大麻酚和次大麻二酚两种大 麻素类。
13.一种根据权利要求12的药物制剂，所述制剂包含大麻二酚和 四氢大麻酚两种大麻素类，其中大麻二酚存在的重量大于四氢大麻酚 的重量。
14.一种根据权利要求13的制剂，其中大麻二酚对四氢大麻酚的 重量比大于2.5∶1。
15.一种根据权利要求13或14的制剂，其中大麻二酚对四氢大 麻酚的重量比在5∶1到3∶1的范围内。
16.一种根据权利要求13或14的制剂，所述制剂不含除了大麻 二酚和四氢大麻酚之外的大麻素类。
17.一种根据权利要求12的液体药物制剂，所述制剂含有大麻二 酚和四氢大麻酚两种大麻素类，其中四氢大麻酚存在的重量大于大麻 二酚的重量。
18.一种根据权利要求17的制剂，其中大麻二酚对四氢大麻酚的 重量比在1∶99和1∶1.5之间。
19.一种根据权利要求12的药物制剂，所述制剂含有四氢次大麻 酚和次大麻二酚两种大麻素类，其中次大麻二酚存在的重量大于四氢 次大麻酚的重量。
20.一种根据权利要求19的制剂，其中次大麻二酚对四氢次大麻 酚的重量比大于1.5∶1。
21.大麻二酚和四氢大麻酚或者四氢次大麻酚和次大麻二酚在制 备权利要求12所述液体药物制剂中的用途，其中所述液体药物制剂用 于治疗炎性疾病或氧化应激参与其发病过程的任何疾病或病症。
22.大麻二酚和四氢大麻酚在制备权利要求16所述液体药物制剂 中的用途，其中所述液体药物制剂用于治疗类风湿性关节炎或炎性肠 道疾病或克罗恩氏病。
23.重量比为51至31的大麻二酚和四氢大麻酚在制备权利要求 15所述液体药物制剂中的用途，其中所述液体药物制剂用于治疗精神 病、癫痫症、运动障碍、中风、头部损伤或需要抑制食欲的疾病。
24.大麻二酚和四氢大麻酚在制备权利要求11所述液体药物制剂 中的用途，其中所述液体药物制剂用于治疗多发性硬化、脊髓损伤、 外周神经病或其它神经性疼痛。
25.重量比为39.1至99.1的大麻二酚和四氢大麻酚或者四氢次大 麻酚和次大麻二酚在制备权利要求12所述液体药物制剂中的用途，其 中所述液体药物制剂用于治疗癌症疼痛或偏头痛或用于刺激食欲。
26.一种液体药物制剂，该制剂在1ml体积中含有以下成分：四 氢大麻酚27mg/ml、大麻二酚25mg/ml、丙二醇0 5ml/ml、薄荷油 0 0005ml/ml和无水乙醇适量补足至1ml。
27.一种液体药物制剂，该制剂在1ml体积中含有以下成分：四 氢大麻酚27mg/ml、丙二醇0.5ml/ml、薄荷油0 0005ml/ml和无水乙 醇适量补足至1ml。
28.一种液体药物制剂，该制剂在1ml体积中含有以下成分：大 麻二酚25mg/ml、丙二醇0.5ml/ml、薄荷油0.0005ml/ml和无水乙醇 适量补足至1ml。
29.一种权利要求1～3中任一项要求的液体制剂，其中所述大麻 素类在惰性气氛中被包装。
说明书 :
发明领域
本发明涉及药物制剂，而且更具体地说，涉及经过泵作用喷雾给 药的含有大麻素类的制剂。
发明背景
长时间以来已知通过接触粘膜将药物引入全身循环系统以增加活 性的起效和效价等作用。
例如，US 3,560,625公开了将烷氧基苯甲酰胺引入全身循环系统 的气雾剂。公开了两种不同类型的气雾剂：
a)含有2％重量的烷氧基苯甲酰胺，18％乙醇和80％抛射剂的氟 烃类型；和
b)含有0.5％重量的烷氧基苯甲酰胺，含10.3％乙醇和31.4％丙二 醇的混合溶剂系统和57.8％去离子水的喷雾器类型。
US 3,560,625在寻找适宜的溶剂系统以便产生用于吸入邻乙氧基 苯甲酰胺的气雾喷雾中发现了一个问题，即由于这样一个事实，虽然 乙醇无疑是最好的溶剂，但含有超过18％重量的乙醇的混合物产生令 人不愉快的口感，抵消甚至超过了口服途径的效果。
WO 01/13866公开δ-9-四氢大麻酚(Δ9THC)的半水(semiaqueous) 溶液。该溶液含有乙醇，10-30％的水和药学上可接受的甘油。为了通 过吸入传递药物配制所述溶液，并且为此具有小于10微米的粒度。水 改善分散和气雾化。作为比较性的实例，显示了在50/50乙醇和丙二 醇混合物中的Δ9THC的溶液。
US 4704406涉及适于局部应用的含芳基链烷酸的可喷雾的药用 组合物。
当本申请人打算生产含有一种或多种大麻素类的植物药物质 (botanical drug substance)的喷雾制剂时，他们意识到大麻素类的高亲脂 性在配制所述活性成分时可能存在的问题。
本申请人首先探索开发一种口腔粘膜制剂，优选舌下，以加压气 雾剂或喷雾剂的形式传递给药，正如在公布的国际专利申请WO 01/66089(PCT/GB01/01027)中所公开的。它们最初的关注是具有 HFC-123a和HFC-227体系的抛射剂，但是这些抛射剂证明并不适宜 作为所述大麻素类的溶剂。所述制剂含有从0.164到0.7％重量比的量 的合成Δ9THC和最高可达20.51％重量的量的作为主要溶剂的乙醇。 一种具体的组合物含有0.164％合成Δ9-THC，4.992％乙醇，4.992％丙 二醇和89.582％p134a(抛射剂)。
本申请人发现乙醇的水平甚至在制剂总体积的20％体积时，它们 也不能在标准喷雾剂剂量中溶解足够水平的Δ9THC，以满足临床需 要，因为所述大麻素类在所述抛射剂中的溶解性很差。他们也发现不 能增加乙醇的水平，因为当较低挥发性溶剂增加超过临界比率时，装 置喷嘴的传递特性基本改变。HFC-123a和HFC-227抛射剂喷雾传递 最大量为7mg/ml，然而，最初的临床研究建议所述制剂需要含有最高 可达50mg大麻素类/ml。
因此，在European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics 50 (2000)179-188的一篇综述文章中详细讨论了本申请人关注的自乳化 药物传递系统，其结论是许多化学实体的差的水溶性是对旨在提高口 服生物利用度的适当的制剂设计的一个真正挑战。
在同时待审的国际申请WO 02/064109(PCT/GB02/00620)中，该 申请人公开了众多的含大麻素类的制剂，所述制剂含有至少一种自乳 化剂。为了得到可粘附到粘膜表面以便实现足够的大麻素类的吸收的 所述制剂，在该制剂中包含至少一种自乳化剂被认为是必须的。一种 具体的制剂含有2％重量的甘油单油酸酯、得到THC的G1大麻的5％ CBME、得到CBD的G5大麻(cannabis)5％的CBME、44％乙醇Bp和 44％丙二醇。
令人惊奇地，本申请人已经发现在通过口腔粘膜，特别是舌下和 颊的粘膜应用从而实现令人满意的剂量水平的液体制剂中并不绝对要 求存在一种自乳化剂。
的确，与US 3,560,625和European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics 50(2000)179-188的教导相反，他们能够生产一种简 单而有效的溶媒用于在液体喷雾剂中传递亲脂性药物。
发明概述
按照本发明的第一方面，提供一种液体药物制剂，用于经过粘膜 表面给予包含一种或多种大麻素类的亲脂性药物，该制剂含有：包含 一种或多种大麻素类的亲脂性药物、溶剂和助溶剂，其中溶剂和助溶 剂在所述制剂中的总量大于所述制剂的55％重量比，所述制剂不存在 自乳化剂和/或含氟抛射剂，并且存在于该制剂中的所述大麻素类的量 大于10mg/ml。
优选一种或多种大麻素类以来自至少一种大麻(cannabis)植物的 至少一种提取物的形式存在。所述大麻属植物优选包括至少一种大麻 (cannabis chemovar(大麻化学变种))。最优选所述植物提取物为一种如 此中定义的植物药物质(BDS)。
所述制剂可任选另外含有调味剂，如薄荷油。
除了大麻素类之外，所述制剂也可含有另外的活性成分，优选其 为一种阿片剂，如吗啡。因此，打算提供基本上含有一种或多种大麻 素类、乙醇、丙二醇和阿片剂(优选为吗啡)的制剂。
以实施例的方式给出的并且不打算限制本发明范围的按照本发明 的典型的液体药物制剂在1ml体积中可含有：THC 25-50mg/ml，优选 25mg/ml或27mg/ml(基于植物药中大麻素类的量计算)、CBD 25-50 mg/ml，优选25mg/ml(基于植物药中大麻素类的量计算)、丙二醇0.5 ml/ml、薄荷油0.0005ml/ml及适量乙醇(无水)至1ml。
其它优选的制剂包括“高THC”制剂，所述制剂在1ml体积中含 有：THC 25mg/ml或27mg/ml(基于植物药中大麻素类的量计算)、丙 二醇0.5ml/ml、薄荷油0.0005ml/ml，以及适量乙醇(无水)至1ml；及 “高CBD”制剂，其在1ml体积中含有：CBD 25mg/ml(基于植物药 中大麻素类的量计算)、丙二醇0.5ml/ml、薄荷油0.0005ml/ml，以及 适量乙醇(无水)至1ml。
在这些优选的制剂中，加入来源于大麻属植物的植物药物质，提 出的大麻素类的量相对于存在于1ml最终制剂中的大麻素类的总量 (重量)。有专业知识的读者将明白为了在最终制剂中达到所需量的大 麻素类必须加入的BDS总量将取决于在BDS中存在的大麻素类的浓 度，所述浓度将因不同批次的BDS而发生变化。
一种或多种大麻素类、乙醇和丙二醇的简单组合可有效地用于泵 作用的喷雾剂，该发现是出乎意料的。
本申请人已经发现，所述溶剂/助溶剂系统为乙醇/丙二醇而亲脂 性的药物包含一种或多种植物药(BDS)形式的大麻素类，溶剂/助溶剂 有效工作的限度是十分狭窄的，讨论如下。
溶剂/助溶剂的量优选大于80％，更优选在90到98％的范围内。
所述制剂优选含水量低于10％，或低于9％，或低于8％，或低于 7％，或低于6％，或低于5％，或低于4％，或低于3％，或低于2％， 或低于1％，或低于0.5％。
所述制剂优选不含有任何类型的抛射剂。
所述制剂也不含任何自乳化剂。此中将“自乳化剂”定义为当存 在带有所要求的最小能量的交替相(alternate phase)时形成一种乳状液 的试剂。相反，与自乳化剂相对应，乳化剂为一种要求额外的能量才 能形成乳状液的试剂。通常自乳化剂为可溶性的肥皂、盐或硫酸化醇 酯，尤其为非离子的表面活性剂或四价化合物。示范性的自乳化剂包 括，但不限于甘油单油酸酯(特别是SE级)、甘油单硬脂酸酯(特别是 SE级)、聚乙二醇(macrogols)和聚氧化氢化的(polyoxyhydrogenated)蓖 麻油如聚氧乙烯蓖麻油。
所述制剂可另外含有调味剂。优选的调味剂为薄荷油，优选以最 高可达0.1％体积的量存在，一般为0.05％体积比。
所述溶剂优选选自C1-C4醇。优选的溶剂为乙醇。
所述助溶剂优选为允许使用较低量的“初级”溶剂的溶剂。在含 有“初级”溶剂的组合中，它应该溶解足够的亲脂性药物，即溶解医 学上有效量的亲脂性药物。医学上的有效量将因药物而发生变化，但 是对于大麻素类，其医学上的有效量将为至少并优选大于1.0mg/0.1ml 溶剂/助溶剂。
优选的助溶剂选自二醇、糖醇、碳酸酯和氯化烃。
所述二醇优选选自丙二醇和甘油，最优选丙二醇。所述碳酸酯优 选碳酸丙二酯。
最优选的组合为乙醇作为溶剂而丙二醇作为助溶剂。
制备口咽传递大麻素类的液体制剂带来了许多问题。首先，必须 在每0.1ml液体制剂中传递至少1.0mg，或至少1.5mg，或至少2.0 mg，更优选至少2.5mg，甚至更优选至少5mg的大麻素类以便在一 个单位剂量中达到治疗作用。在这点上患者可能需要服用最高可达120 mg大麻素类/天，平均约为40mg/天，最多6个剂量。
在舌下或颊传递的情况下，如果经粘膜吸收所述活性成分，意味 着以制剂量传递活性成分的量将是患者所不能忍受的。
虽然可通过溶解所述大麻素类于作为溶剂的乙醇中达到所述剂 量，但是高浓度的乙醇引起刺激感觉并且超出了忍受的限度。
因此，需要使用一种助溶剂以便减少乙醇的量，同时还能够使足 够量的大麻素类溶解。
本申请已经发现助溶剂的选择是有限的。优选的助溶剂应该具有 充分的溶解作用，使足够的大麻素类溶解于一个单位剂量中，也就是 至少并优选大于1.0mg/0.1ml制剂，并且使存在的溶剂的量降低到患 者可以耐受的限度内。达到这些标准的特别适宜的助溶剂为丙二醇和 甘油。
在优选的实施方案中，存在于所述制剂中的溶剂和助溶剂的总量 大于所述制剂的65％重量比，更优选大于70％重量比，更优选大于75％ 重量比，更优选大于80％重量比，更优选大于85％重量比。存在于所 述制剂中的溶剂和助溶剂的总量最优选在所述制剂的80％重量比到 98％重量比的范围内。
在优选的实施方案中，按照本发明的制剂为液体制剂，该制剂通 过泵作用喷雾给药。泵作用喷雾的特征在于要求采用外部的压力刺 激，例如外部的手动、机械或电力启动的压力。这与加压系统相反， 例如抛射剂-驱动的气雾喷雾，其中致动(actuation)是通过控制压力的释 放，例如通过控制阀门的打开而实现的。
发现当传递大麻素类时泵作用喷雾特别有益。的确，人们从前一 直关注溶剂系统包括抛射剂。
同时承认此类系统有缺陷，包括传递速度，本领域的技术人员一 直试图通过减少抛射剂或通过改变喷嘴解决该问题。本申请人发现在 它们的制剂中使用泵喷雾他们能够产生喷雾，其中的微粒具有在15和 45微米之间的平均的空气动力学的粒度，更具体地说在20和40微米 之间并且平均约33微米。这与当采用加压系统传递时具有在5和10 微米之间的平均空气动力学的粒度的颗粒形成对比。
事实上，本申请人进行的对比实验已经显示泵作用喷雾系统具有 优势，能够传递所述活性成分到靶区域内更大的表面面积上。该实验 阐述参阅随后的实施例3。
粒子分布和喷雾面积的变化通过直接实验证实。如随后的实施例 4所述将制剂填充到泵作用的喷雾装置中(致动的Valois vial type VP7100)。将同样的制剂填充到用HFA 134a产生动力的加压容器中。
两个容器皆在离一张放在喷射的传播方向成直角(即正前面)的薄 纸50mm距离处射出。然后对光显现在两种情况下射出100ul所产生 的喷雾图案。在两种情况下，射出的图案为圆形并测量如下：
平均直径(mm) 平均面积(mm2) 泵作用喷雾 23 425.5 加压喷雾 16 201.1
加压的喷雾在区域的中心产生集中的液体。泵作用喷雾给出更均 匀的喷雾图案并且较少“反弹”。通过泵作用喷雾也有显著的较大的 覆盖面积。进行实验的条件与实际使用的装置有关。相对加压喷雾而 言泵作用喷雾可达到较大面积的口腔粘膜。
对于泵喷雾的应用，所述溶剂/助溶剂组合必定具有在优选的溶剂 /助溶剂组合所定义的粘度范围内的粘度。因此，对于乙醇/丙二醇组合 而言，粘度应在以下之间：其中乙醇/丙二醇以60/40和40/60，更优选 以55/45到45/55而最优选以约50/50的相对体积比存在。
当为了泵作用传递通过一个机械泵如VP7致动阀(actuator valve) (Valois)包装时产生的制剂的粘度允许产生的气雾传递具有20-40微米 的平均空气动力学粒度，更优选25-35而最优选30-35微米的平均粒 度。对于舌下/颊传递这使得与靶粘膜的接触最大化。
按照本发明的制剂优选含有一种或多种大麻素类作为亲脂性药 物。
优选所述亲脂性药物至少为一种来自至少一种大麻属植物的提取 物。所述大麻属植物优选包括至少一种大麻(cannabis chemovar)。最优 选所述植物提取物为一种如此中定义的植物药物质(BDS)。
“植物提取物”为来自植物原料的提取物，如在Guidance for Industry Botanical Drug Products Draft Guidance，August 2000，US Department of Health and Human Services，Food and Drug Administration Centre for Drug Evaluation and Research中定义。
“植物原料”被定义为植物或植物部分(如树皮、树木、叶子、茎、 根、花、果、种子、浆果或其局部)以及渗出物。
术语“大麻属植物”包含野生型的大麻(Cannabis sativa)及其变 种，包括天然含有不同量的单一大麻素类的大麻(cannabis chemovars)、 印度大麻亚种(Cannabis sativa subspecies indica)包括变种印度大麻变 种(var.Indica)和kafiristanica变种(var.Kafiristanica)，印度大麻 (Cannabis indica)和发生遗传杂交(genetic crosses)的、自交(self-crosses) 或其杂种(hybrids)的植物。因此术语“大麻属植物原料”被认为是来源 于一种或多种大麻属植物的植物原料。因此为避免疑问规定“大麻属 植物原料”包括干燥的大麻生物量(biomass)。
在本申请的上下文中术语“大麻提取物”或可互换使用的术语“来 源于大麻属植物的提取物”包括来源于大麻属植物原料的“植物药物 质”。在Guidance for Industry Botanical Drug Products Draft Guidance， August 2000，US Department of Health and Human Services，Food and Drug Administration Centre for Drug Evaluation and Research中定义植物 药物质为：“来源于一种或多种植物、藻类，或肉眼可见的真菌类的 药物物质。用以下一种或多种方法由植物原材料进行制备：粉碎、煎 煮、榨出、水提、醇提或其它类似的方法。”植物药物质不包括高纯 度的或化学修饰的来源于天然资源的物质。因此，在大麻的情形下， 来源于大麻属植物的“植物药物质”不包括高纯度的、药典级 (Pharmacopoeial grade)的大麻素类。
按照在Guidance for Industry Botanical Drug Products Draft Guidance，August 2000，US Department of Health and Human Services， Food and Drug Administration Centre for Drug Evaluation and Research中 的定义，“基于大麻的药物提取物(CBMEs)”，如用随后的实施例所 述的方法制备的CBMEs，被分类为“植物药物质”。
来源于大麻属植物的“植物药物质”包括用此类方法制备的初级 提取物，所述方法有例如浸渍、渗滤、用如C1到C5的醇(如乙醇)、 诺氟烷(HFA134a)、HFA227和在次临界或超临界的液态二氧化碳溶剂 提取。所述初级提取物可进一步通过超临界或次临界的溶剂提取、蒸 发或层析进行纯化。当使用以上列出的那些溶剂时，得到的提取物含 有非特异性的脂溶性物质。这可通过各种方法除去，包括“冬化”， 所述冬化包括急剧冷却到-20℃，随后过滤出蜡状的沉淀、用液态二氧 化碳提取并蒸馏。
在其中大麻素类以BDS提供的实施方案中，该BDS优选通过在 次临界或超临界的条件下用CO2提取，随后再次提取，如乙醇沉淀， 以便移出大部分的蜡状物及其它沉淀(ballast)而获得。这是因为所述沉 淀包括在所选择的溶剂/助溶剂，特别是优选的助溶剂丙二醇中不能很 好溶解并且将沉淀出来的蜡酯和甘油酯、不饱和的脂肪酸残基、萜、 胡罗卜素和flavenoids。最优选所述BDS通过这样的方法制备，该方 法包括脱羧、用液体二氧化碳提取，然后进一步提取以便除去大量的 沉淀物。最优选通过乙醇沉淀充分除去所述沉淀物。
最好，将大麻属植物原料加热至规定的温度长达规定的时间，以 便在提取BDS前使大麻素类酸(cannabinoid acids)脱去羧基游离出大麻 素类。
优选的“植物药物质”包括那些可通过使用此中公开的从大麻属 植物原料制备提取物的任何方法或步骤获得的植物药物质。所述提取 物优选基本不含蜡状物和其它非特异性的脂溶性物质，但优选充分含 有所有天然存在于所述植物中的大麻素类，最优选以在完整大麻属植 物中基本相同的比率存在。
将植物药物质配制为“植物药产品”，如在Guidance for Industry Botanical Drug Products Draft Guidance，August 2000，US Department of Health and Human Services，Food and Drug Administration Centre for Drug Evaluation and Research中将其定义为：“一种打算作为药物使用 的植物产品；一种由植物药物质制备的药品。”
“大麻属植物”包括野生型大麻(Cannabis sativa)及其变种，包括 天然含有不同量的各单一大麻素类的大麻(cannabis chemovars)。
术语“大麻素类”也包括可通过纯化天然来源的物质或经过合成 手段获得的高纯度的、药用级的物质。因此，按照本发明的制剂可用 于传递大麻属植物提取物和单一的大麻素类，或其合成的类似物，无 论是否来源于大麻属植物，以及大麻素类的组合。
优选的大麻素类包括，但不限于，四氢大麻素类，它们的前体， 烷基(特别是丙基)类似物，大麻二酚，它们的前体，烷基(特别是丙基) 类似物和大麻酚。在优选的实施方案中，所述制剂可包含任何选自以 下的大麻素类：四氢大麻酚、Δ9-四氢大麻酚(THC或Δ9-THC)、Δ8- 四氢大麻酚、Δ9-四氢大麻酚丙基类似物(THCV)、大麻二酚(CBD)、 大麻二酚丙基类似物(CBDV)、大麻酚(CBN)、大麻环萜酚(CBC)、大 麻环萜酚丙基类似物和大麻萜酚(CBG)，或这些大麻素类中的两种或 多种的任何组合。众所周知THCV和CBDV(分别为THC和CBD的丙 基类似物)在特殊的大麻属植物品种中是占主导地位的大麻素类并且 发现THCV比THC和CBD性质上更具有优良特性。摄取THCV的患 者报告THCV引起的情绪激动比THC引起的情况激动要小。它也较 少引起严重的后遗症(hangover)。
最优选按照本发明的制剂含有THC和/或CBD。
在优选的实施方案中，所述制剂可含有具体的、不同大麻素类的 预定重量比率，如CBD对THC的具体比率或四氢次大麻酚 (tetrahydrocannabinovarin，THCV)对次大麻二酚(cannabidivarin， CBDV)，或THCV对THC的比率。已经发现大麻素类的某些具体比 率临床上用于治疗或处理特殊的疾病或医学情形。详细地说，已经发 现某些此类制剂可特别用于减轻疼痛和刺激食欲的领域。
本申请人特别观察到特殊大麻素类的组合比任何一种单一的大麻 素类更加有益。优选的实施方案为那些其中CBD的重量大于THC的 重量的制剂。此类制剂被称为“反比率”制剂并且此类制剂是新的和 不寻常的，因为在世界范围内可获得的许多医疗的和娱乐的 (recreational)大麻属植物中，CBD相对THC而言是次要的成分。在其 它实施方案中THC和CBD或THCV和CBDV以几乎相等的量存在， 或THC或THCV为主要成分并最高可达到存在的总大麻素类的 95.5％。
优选的制剂含有确定的重量比的THC和CBD。最优选的制剂含 有THC∶CBD在0.9∶1.1到1.1∶0.9重量比范围内的THC和CBD，甚 至更优选THC∶CBD的比率基本上为1∶1。其它优选的制剂含有下列 重量比的THC和CBD：大于或等于19∶1的THC∶CBD、大于或等于 19∶1的CBD∶THC、4.5∶1的THC∶CBD、1∶4的THC∶CBD和1∶2.7 的THC∶CBD。对于其中THC∶CBD比率基本上为1∶1的制剂而言， 优选所述制剂分别含有大约25mg/ml的THC和CBD。
许多年来医学上一直使用大麻，并且在维多利亚时代(Victorian times)是一种广泛使用的处方药成分。使用其作为催眠镇静剂治疗“癔 病、精神错乱、癫痫症、神经性失眠症、偏头痛、疼痛和痛经”。大 麻的使用持续到二十世纪中叶，而其作为处方药的效用目前正在重新 评估。特异性大麻素类受体和新的给药方法的发现使基于大麻的药物 的使用扩大到传统适应症的和新的适应症成为可能。
大麻的娱乐用途促使立法，从而导致禁止其使用。历史上许多医 师认为在脊髓受伤和其它形式的神经病性疼痛包括多发性硬化的疼痛 和痉挛的情况下，大麻是独特的具有消除对阿片样物质止痛剂耐药的 疼痛的能力。
在美国和加勒比海，因娱乐用途而种植的大麻一直是有选择性的 以便其含有高含量的四氢大麻酚(THC)，以其它大麻素类的损失为代 价。在Merck Index(1996)中，其它已知存在于大麻中的大麻素类如大 麻二酚和大麻酚被认为是无活性的物质。虽然大麻二酚从前被认为是 一种无活性的成分，有证据表明在几个方面其具有不同于THC的药理 学活性。仅用一种或其它“活性”成分不能满意地解释大麻的治疗作 用。
已经显示单独使用四氢大麻酚(THC)比给出相同量的THC的大麻 提取物产生较低程度的疼痛减轻。研究了在这种现象之下的药理学基 础。在某些情形下，在相同的临床前试验中，THC和大麻二酚(CBD) 具有相反作用的药理特性，而在其它试验中具有相同作用的药理特 性。例如，在某些临床研究中和轶事报道中，有一种感觉CBD改善了 THC对神经所起的显著作用。这两种大麻素类的光谱活性可帮助解释 生长在世界上不同区域的大麻的一些治疗益处。它也指出由THC和 CBD组合产生的有益作用。本申请人一直在研究这些方面。下表1显 示这两种大麻素类的药理性质的差异。
表1
作用T HC THCV CBD CBDV 文献
CB1(大脑受体) ++ ± Pertwee等，1998
CB2(外周受体) + -
CNS作用
抗惊厥 -- ++ Carlini等，1973
抗卡地阿唑 - - GW数据
(Antimetrazol)
抗电休克 - ++ GW数据
肌肉松弛 -- ++ Petro，1980
抗感受伤害作用 ++ + GW数据
僵硬症 ++ ++ GW数据
对神经起显著作用 ++ - GW数据
抗精神病 - ++ Zuardi等，1991
神经保护性抗氧化剂 + ++ Hampson A J等，
行为* ++ - 1998
止吐 + +
镇静(减少自发行为) ++ Zuardi等，1991
刺激食欲 ++
抑制食欲 - ++
抗焦虑 GW数据
心血管作用
心搏徐缓 - + Smiley等，1976
心动过速 + -
高血压§ + -
血压过低§ - + Adams等，1977
抗炎作用 ± ±
免疫调节/抗炎活性
擦伤(Raw)爪水肿试验 - ++ GW数据
Cox 1 GW数据
Cox 2 GW数据
TNFa拮抗作用 + + ++ ++
青光眼 ++ +
*作用不依赖于CB1受体.
THC为原惊厥剂(pro convulsant)。
§THC对血压具有双向作用；在首次进行试验的(naive)患者中其 引起血压过低的情况并且也报道对于长期使用者引起高血压。GW Internal Report No 002/000159。
这些药理特征和本申请进行的直接的实验已经出乎意料地显示不 同比例的THC和CBD的组合在某些病症的治疗中是特别有用的。临 床上进一步发现THC和CBD混合物的毒性小于单独使用THC的毒 性。
因此，本发明提供具有以上所述基本特征的药物制剂，其含有作 为活性药物的大麻素类并且所述大麻素类具有特定比例的CBD比 THC，已经发现所述制剂临床上用于治疗或处理特殊的疾病或医学病 症。
在另一方面，本发明也涉及具有所有以上定义的基本特征的药物 制剂，并且其含有特定比例的四氢次大麻酚(THCV)或次大麻二酚 (CBDV)。THCV和CBDV(分别为THC和CBD的丙基类似物)为已知 的大麻素类，主要在特殊的大麻属植物品种中表达(expressed)并且已经 发现，分别与THC和CBD比较时THCV具有优良的品质特性。摄取 THCV的患者报告THCV引起的情绪激动比THC引起的小。它也较少 引起严重的后遗症。
本发明还进一步涉及具有如上定义的所有基本特征的药物制剂， 并且含有特定比例的THCV比THC，已经发现此类制剂在缓解疼痛和 刺激食欲方面特别有用。
本申请人特别观察到特殊的大麻素类的组合比任何一种单独使用 的单一大麻素类具有更多的优点。优选的实施方案为那些其中CBD的 重量大于THC的重量的制剂。此类制剂被称为“反比例”制剂并且是 新的和不寻常的，因为在世界范围内可获得的各种医学的和娱乐的大 麻属植物中，相对THC而言CBD是次要的大麻素类成分。在其它实 施方案中，THC和CBD或THCV和CBDV以近乎相等的量存在，或 者THC或THCV为主要的成分并且最高可达到存在的总大麻素类的 95.5％。
特别优选的大麻素类的比率和它们适宜的靶医学病症显示于下表 2。
表2.不同比率的大麻素类的靶治疗组
产品组 THC∶CBD比 率靶治疗领域
高THC ＞95∶5 癌症疼痛，偏头痛，刺激食欲
平均比率 50∶50 多发性硬化，脊髓受伤，外周神经
病，其它神经性疼痛。
反比率/主要比率CBD ＜25∶75 风湿性关节炎，炎性肠道疾病
高CBD ＜5∶95 精神病(精神分裂症)，癫痫症和运
动障碍，休克，头部损伤，Disease
modification in RA和其它炎性疾
病，食欲抑制
含有具体的、规定比率的大麻素类的制剂可用纯的大麻素类与本 领域技术人员所熟知的药用载体和赋形剂一起配制。也可从供应商处 购买药用级“纯”的大麻素类，例如CBD和THC可从Sigma-Aldrich Company Ltd，Fancy Road，Poole Dorset，BH12 4QH购买或可经化学合 成。或者，大麻素类可采用本领域技术人员所熟知的技术从大麻属植 物中提取。
其它优选的THC∶CBD、THCV∶CBDV和THC∶TCHV的比率以 及此类制剂的优选的治疗用途在随后的权利要求中阐述。具体地说， 本发明打算包括，但不限于，以下实施方案：
(A)按照本发明的第一方面的液体药物制剂包含大麻二酚(CBD) 和四氢大麻酚(THC)两种大麻素类，其中存在的CBD的重量比大于 THC的重量。详细地说，本发明包括其中CBD对THC的重量比大于 2.5∶1的制剂，或其中CBD对THC的重量比在99∶1和2.5∶1之间， 优选在约20∶1和约2.5∶1之间的制剂，或其中CBD对THC的重量比 约为19∶1的制剂，或其中CBD对THC的重量比在约5∶1到约3∶1范 围内的制剂。
优选的实施方案包括，但不限于，基本上不含不同于CBD和THC 的大麻素类的制剂、基本上不含在大麻(Cannabis sp)中发现的其它大 麻素类的制剂、其中CBD和THC为基本纯形式的制剂、进一步包含 一种或多种其它大麻素类的制剂、特别是其中一种或多种其它大麻素 类为四氢次大麻酚(THCV)和/或次大麻二酚(CBDV)的制剂、其中CBD 和THC构成来自至少一种大麻属植物的至少一种提取物的部分，所述 至少一种提取物含有所述植物中所有天然存在的大麻素类，以及含有 来自两种或多种不同大麻品种的提取物的制剂，其中在最后制剂中 CBD的重量大于THC的重量。
(B)按照本发明的第一方面的液体药物制剂包含大麻二酚(CBD) 和四氢大麻酚(THC)两种大麻素类，其中存在的THC的重量大于CBD 的重量。
优选的实施方案包括，但不限于，其中预定的CBD对THC的重 量比在1∶99和1∶1.5之间的制剂、其中预定的CBD对THC的重量比 约为1∶39的制剂和其中预定的CBD对THC的重量比约为1∶2的制 剂。
(C)按照本发明的第一方面的液体制剂包含四氢次大麻酚(THCV) 和/或次大麻二酚(CBDV)两种大麻素类，其中存在的CBDV的重量大 于THCV的重量。
优选的实施方案包括，但不限于，进一步含有CBD和/或THC的 制剂、其中CBDV对THCV的重量比大于1.5∶1的制剂、其中CBDV 对THCV的重量比在约99∶1到约1.5∶1范围内，优选在约20∶1到2.5∶ 1范围内的制剂、其中CBDV对THCV的重量比为约9∶1的制剂、其 中CBDV对THCV的重量比在约5∶1到3∶1之间的制剂、基本上不含 发现于大麻(Cannabis sp)中的其它大麻素类(CBDV和THCV除外)的制 剂，以及其中CBDV和THCV构成来自大麻属植物的提取物的一部分 的制剂，所述提取物含有所述植物中所有天然存在的大麻素类。
(D)按照本发明的第一方面的液体药物制剂包含四氢次大麻酚 (THCV)和四氢大麻酚(THC)两种大麻素类，其中THCV对THC的重 量比在99∶1和1.5∶1之间。
优选的实施方案包括，但不限于，其中THCV对THC的重量比 为约17∶3的制剂、也含有CBD和/或CBDV的重量小于THCV的重 量的制剂、其中THCV和THC构成来自大麻属植物的提取物的一部 分的制剂，所述提取物含有所述植物中所有天然存在的大麻素类。
在本发明的优选实施方案中，所述制剂包含全部大麻属植物中的 一种或多种品种的提取物，特别是大麻(Cannabis sativa)，印度大麻或 遗传杂交的、自交或其杂种的植物。任何特殊的大麻品种中准确的大 麻素类的含量可用本领域技术人员所熟知的方法如TLC或HPLC定性 和定量测量。因此，人们可选择大麻品种以便从中制备将产生CBD对 THC或CBDV对THCV或THCV对THC的所需比率的提取物。或者， 来自两种或多种不同品种的提取物可混合或掺合在一起，以便产生具 有优选的大麻素类比率的材料，以配制为药物制剂。
通过种植特殊的大麻(chemovars of cannabis)制备含有满意的 THC-和CBD-比率的药物是有可能的。可通过本领域技术人员所熟悉 的多种植物种植技术种植这些chemovars(通过产生的大麻素类鉴别， 而不是通过该植物的形态特征鉴别该植物)。通过剪接插条(cuttings)生 产材料繁殖所述植物确保基因型被固定并且确保每次收获的植物含有 基本上相同比率的大麻素类。
另外，发现通过园艺选择的方法，也可获得其它chemovars，表示 为其大麻素类含量主要为四氢次大麻酚(THCV)或次大麻二酚 (CBDV)。
园艺上，种植由剪接插条产生THC、THCV、CBD和CBDV作为 主要大麻素类的chemovars是很方便的。这确保在每次收获中基因型 相同并且定性制剂(每种大麻素类的生物量的比例)相同。由这些 chemovars，通过类似的提取方法可制备提取物。制备初级提取物的便 利的方法包括浸渍、渗滤、用诸如C1到C5的醇(乙醇)、诺氟烷 (HFA134a)、HFA227和在压力下的液态二氧化碳的溶剂提取。所述初 级提取物可进一步通过超临界或次临界的提取、蒸发或层析进行纯 化。当使用以上列出的那些溶剂时，得到的提取物含有非特异性的脂 溶性物质或“沉淀物”。可通过各种方法除去，包括急剧冷却到-20℃， 随后过滤除去蜡状的沉淀、用液态二氧化碳提取并蒸馏。优选的植物 栽培和提取物的制备方法显示在实施例中。得到的提取物适宜掺入到 药物制剂中。
有许多可有效地用大麻治疗的医疗病症，包括例如癌症疼痛、偏 头痛、刺激食欲、多发性硬化、脊髓损伤、外周神经病、其它神经性 疼痛、类风湿性关节炎、炎性肠道疾病、精神病(精神分裂症)、癫痫 症和运动障碍、休克、头部损伤、食欲抑制。在所给出的制剂中不同 的大麻素类的比例决定了最适治疗的有特殊的疗效的病症(如表2中概 述和所附的权利要求书中所述)。
详细地说，本发明打算包括，但不限于，以下实施方案：
(A)按照本发明的第一方面的药物制剂，所述制剂含有预定重量 比的大麻二酚(CBD)和四氢大麻酚(THC)，或大麻素类四氢次大麻酚 (THCV)和次大麻二酚(CBDV)，用于治疗炎性疾病或任何在其发病过 程中氧化应激起作用的疾病或病症。
(B)按照本发明的第一方面的药物制剂，所述制剂包含大麻二酚 (CBD)和四氢大麻酚(THC)两种大麻素类并且基本不含除了CBD和 THC之外的大麻素类，或所述制剂包含大麻素类四氢次大麻酚(THCV) 和次大麻二酚(CBDV)，其中CBDV对THCV的重量比从约5∶1到3∶ 1，用于治疗类风湿性关节炎，或炎性肠道疾病或Crohn’s疾病。
(C)按照本发明的第一方面的药物制剂，所述制剂包含大麻二酚 (CBD)和四氢大麻酚(THC)两种大麻素类，其中CBD对THC的重量比 在约5∶1到约3∶1的范围内，或所述制剂包含大麻素类四氢次大麻酚 (THCV)和次大麻二酚(CBDV)，其中CBDV对THCV的重量比约为9∶ 1，用于治疗精神性疾病、癫痫症、运动障碍、休克、头部损伤或需要 抑制食欲的疾病。
(D)按照本发明的第一方面的药物制剂，所述制剂包含几乎等量 的CBD和THC或THCV和CBDV，用于治疗多发性硬化、脊髓损伤、 外周神经病或其它神经性疼痛。
(E)按照本发明的第一方面的药物制剂，所述制剂含有的THC对 CBD或THCV对CBDV的重量比为从约39∶1到约99∶1，用于治疗癌 症疼痛或偏头痛或用于刺激食欲。具体的实施方案包括在所述制剂中 采用重量比约为39∶1的THC对CBD或THCV对CBDV，在所述制 剂中采用的THC和CBD和/或THCV和CBDV组成来自大麻属植物 的提取物的一部分，该提取物含有在所述植物中的所有天然存在的大 麻素类。
本发明还进一步涉及按照本发明的液体制剂的形式，其中所述制 剂，或至少其亲脂性药物成分被包装在涂色的容器中，以避免紫外光 和光谱的蓝色区域的光，优选波长在200-500nm范围的光。在一个优 选的实施方案中，所述容器涂成琥珀色。
另一方面，本发明也涉及按照本发明的液体制剂的形式，其中所 述制剂，或至少其亲脂性药物成分是在惰性气氛下被包装。在优选的 实施方案中，所述制剂，或至少其亲脂性药物成分在氮气下被包装。
含有一种或多种大麻素类的按照本发明的制剂优选包装在玻璃小 瓶中。该小瓶最好在惰性气氛如氮气下填充至稍微超压，以防止/减缓 大麻素类的氧化分解，并以阻止光进入，从而防止大麻素类的光化学 降解的形式进行包装。采用琥珀色小瓶可最有效地达到这一目的，因 为本申请人已经确定紫外光和蓝色光谱的光，特别是在200-500nm波 长范围内的光会引起光降解。由于大麻素类对氧化分解和光化学降解 敏感，在惰性气氛中包装和/或包装在涂色容器(如琥珀色容器)中以避 免紫外光和光谱的蓝色区域的光，优选波长在200-500nm范围的光的 优点同样适用于包含一种或多种大麻素类的亲脂性药物的包装，所述 大麻素类并未配制成按照本发明的制剂(例如含大麻素类的植物药物 质，如随后的实施例所述)。
适用于给予大麻提取物和大麻素类的制剂原则也适用于其它药 物如生物碱、碱和酸。必要的条件是如果所述药物不溶于唾液，则应 通过加入缓冲盐溶液和调节pH使其增溶和/或使其成为适宜的未离子 化的(unionised)形式。
其它可包含在本发明的普通制剂中的亲脂性药物可包括，但不限 于，吗啡、哌鱼替啶、可待因、美沙酮、海洛因、芬太奴、阿芬太尼、 丁丙诺啡、羟基安定、亲脂性止痛剂和成瘾性药物。术语“成瘾性药 物”包括可使病人产生依赖性的化合物，特别是可作为止痛剂的化合 物，通常为阿片剂或其合成衍生物。
因此，按照本发明的另一方面，提供一种液体制剂，用于经粘膜 表面给予至少一种亲脂性药物，该制剂包含：一种选自以下的亲脂性 药物：吗啡、哌鱼替啶、可待因、美沙酮、海洛因、芬太奴、阿芬太 尼、羟基安定、丁丙诺啡、亲脂性止痛剂和成瘾性药物，溶剂和助溶 剂，其中存在于所述制剂中的溶剂和助溶剂的总量大于制剂的55％ wt/wt，所述制剂不含自乳化剂和/或含氟抛射剂。
仅仅通过实施例的方式，用以下实验数据和示范性制剂，加上附 图进一步阐述本发明，其中：
图1a和1b显示在将高CBD(图1a)和高THC(图1b)的大麻提取物 给予病人后大麻素类CBD、THC和11-羟基THC的平均血浆浓度。
图2显示在将含有1∶1比率的THC∶CBD的大麻提取物给予病人 后大麻素类CBD、THC和11-羟基THC的平均血浆浓度。
图3显示相对于丙二醇/乙醇液体喷雾剂中的丙二醇％的气雾剂雾 流覆盖面积。
图4显示粘性与丙二醇/乙醇液体喷雾剂中的丙二醇含量的函数 的关系。
图5显示气相对于丙二醇/乙醇液体喷雾剂的粘性的气雾剂雾流 覆盖面积。
图6和6a显示从贮存的、暴露于光的THC的溶液样品在活性炭 处理前和后的HPLC分析结果。
图7和7a显示从贮存的、暴露于光的CBD的溶液样品在活性炭 处理前和后的HPLC分析结果。
泵作用的喷雾剂的开发
最初本申请人着眼于采用舌下滴剂(BDS溶解于甘油/丙二醇和乙 醇的混合物中)THC 5mg/ml、CBD 5mg/ml和THC/CBD 5mg/ml加5 mg/ml时，患者对大麻素类的吸收。
结果显示于下表3中：
表3
最初吸收20分钟 T最长约2小时 C最大6ng/ml THC，2ng/ml CBD 在给予约20mg的每种大麻素类之后AUC 0-12大约16ng.h/ml THC， 8ng.h/ml CBD 在6小时后血浆水平大约为1ng/ml THC和0.5ng/ml CBD
11羟基四氢大麻酚对THC(AUC 0-12)的比率大约为1.9，表明已 经发生了大量的口服摄取。
当转移到泵作用舌下喷雾剂(随后的问题是用hydroflurocabon抛 射剂系统增溶大麻素类)时，本申请人获得显示于表4的结果。该溶剂 系统含有50∶50的乙醇∶丙二醇(v/v比)及分别含有THC 25mg/ml；CBD 50mg/ml和THC/CBD 25mg/ml加50mg/ml。
表4
最初吸收60分钟 T最长约3小时 C最大6ng/mlTHC，8ng/ml CBD 在给予约21mg THC和35mg CBD之后AUC 0-12大约16ng.h/ml THC，22ng.h/ml CBD 在6小时后血浆水平大约为1ng/ml THC和1ng/ml CBD
11羟基四氢大麻酚对THC(AUC 0-12)的比率大约为1.6。每种大 麻素类的分布类似而与制剂无关(THC、CBD、THC加CBD)。
在考虑不同的剂量之后，虽然吸收的程度可与滴剂相比，但吸收 速度比较缓慢并且代谢的比例降低。
尽管吸收的速度较慢，所述泵喷雾机制和乙醇/丙二醇载体系统提 供了在灵活的剂量形式中精确地给予足够的大麻素类并有效地降低代 谢的机会。
获得的数据示于图1a、1b和2中，所述图显示了与参照表3和4 一致的制剂的平均血浆浓度。
大麻素类的有效传递可用含有乙醇和丙二醇的溶媒来实现，通过 显示于图1a、1b和2中的血浆水平进行阐述。在图1a和1b中分别显 示含有高THC和高CBD的制剂。类似地，确定比率的制剂(THC∶CBD 1∶1)阐述于图2中。
值得注意地是，发现所述乙醇/丙二醇系统仅与泵作用喷雾剂在相 当狭窄的限度内工作。
将导致泵喷雾剂开发的发现阐述如下，如在以下制剂1-4中举例 说明：
实施例1-粒度的重要性
申请人观察到他们正在开发的抛射剂气雾剂有“弹回”的缺点， 这似乎是传递速度和粒度的作用。
他们确定与抛射剂驱动系统相反，泵喷雾可传递可控制粒度的气 雾剂雾流，以便产生在20和40微米之间的粒度(从而药物击中舌下/ 口腔粘膜的量和可吸收的大麻素类的量最大)。为了产生适宜粒度的微 粒需要小心地控制所述制剂的粘度。如果所述制剂太粘稠，则防碍小 滴形成，形成喷射并堵塞阀门；如果所述制剂不够粘稠，则它们过量 雾化，形成广泛的覆盖面的气雾并且该气雾剂不再单独地直接到舌下/ 口腔粘膜上。这可能导致所述制剂集中并且一些制剂被吞下。在这两 种情况下，结果都是令人不满意的。
事实上，证明对优选的溶剂乙醇和优选的助溶剂丙二醇而言，如 下证实工作范围是相当狭窄的：
研究了乙醇/丙二醇的不同组合的粘度并且用vp7/100阀门(Valois) 进行比较喷雾。将结果制成表格列于下表5中：
表5
丙二醇/乙醇 相对粘度(运行时间以秒计) 进行喷雾 100/0 442 形成喷射 80/20 160 形成喷射 60/40 80 一些喷射 50/50 62 好的气雾剂雾流 40/60 44 好的气雾剂雾流 20/80 26 好的气雾剂雾流 0/100 16 好的气雾剂雾流
从所述数据看，显示在大于60/40时将不接受额外的丙二醇。当 一并阅读US 3,560,625时，这些结果可能已经暗示所述溶剂/助溶剂组 合是不好的。可是，申请人发现当存在给定的制剂时患者可忍受该预 定的乙醇的水平。
通过将不同的制剂喷雾到0.5cm的标准距离的暴露的纸上对粘度 对气雾剂雾流的作用进行量化。该距离代表在正常使用时泵作用喷雾 单位的喷嘴和舌下腔之间的通常距离。所述纸为影印纸并且所述雾流 的图象被剪切下来并称重以便得到相对的覆盖面积。然后通过用该值 除以每cm2影印纸的重量(通过称量已知面积的纸的重量进行确定)将 该相对值转换为真实的覆盖面积。在下表6中给出结果。
丙二醇/乙醇 气雾流的覆盖面积 100/0 3.5cm2 80/20 14.2cm2 60/40 17.9cm2 50/50 20.7cm2 40/60 29.4cm2 20/80 54.4cm2 0/100 93.8cm2
所述数据显示于图3中。
另外给出混合物中乙醇和丙二醇含量与粘度的关系图(图4)以及 作为粘度的函数的雾流覆盖面积的图(图5)。
所述图强调很大的和不受欢迎的性质变化，该变化出现在60/40 至40/60的乙醇/丙二醇重量比的狭窄范围外，并且更特别是在55/45 到45/55范围内，最优选重量比为约50/50。
为确保在狭窄的范围内使用所述组合，其它因素也是重要的。增 加乙醇水平超过60％体积将引起刺激并且丙二醇水平达到60％和低至 55％时，在BDS情况下存在于BDS中的非极性衍生物在延长的环境 贮存期间开始沉淀出来。
预期其它可使用的助溶剂具有类似的限制。助溶剂越粘稠，产生 形成喷雾的雾流的问题就越大，并且极性越大，沉淀增加的危险就越 大。
可是，因为乙醇/丙二醇的组合能够溶解最多可达50mg/ml(即治 疗上所需要的大麻素类水平)，是非刺激性的、药学上可接受的，且丙 二醇也发挥渗透促进剂的作用使大麻素类的生物利用度最大化，因此 是特别有利的。
当用Malvern Marsteriser试验时，所述的优选组合物的平均粒度 已经显示为33μm。所述雾滴比5μm大得多，因此减少吸入气雾剂的 危险。
实施例2-大麻素类存在于BDS中时水的作用
如描述于下表7的研究所述，在所述制剂中水的存在超过5％则 显示将引起BDS的沉淀：
表7-在乙醇/丙二醇(50/50)中连续加入水以配制5ml 25mg/ml THC和5ml 25mg/ml CBD
加入水的 体积ml 终体积ml 最终溶剂比％体积， 水/丙二醇/乙醇 观察 0 5 0/50/50 溶液 0.05 5.05 1/49.5/49.5 Ppt形成但是混合时再溶解 0.21 5.26 5/47.5/47.5 Ppt形成。在混合后溶液仍浑浊
当然根据所述观察优选使用无水乙醇。
按照本发明的示例性制剂(非限制)如下：
组合物1(普通)
成分 每单位(1ml)的量 作用 活性成分 THC(BDS) CBD(BDS) 25-50mg/ml 25-50mg/ml 活性 赋形剂 丙二醇薄荷油 乙醇(无水) 0.5ml/ml 0.0005ml/ml 适量至1ml 助溶剂 调味剂 溶剂
组合物2(高THC)
成分 每单位(1ml)的量 作用 活性成分 THC(BDS) 25mg/ml 活性 赋形剂 丙二醇薄荷油 乙醇(无水) 0.5ml/ml 0.0005ml/ml 适量至1ml 助溶剂 调味剂 溶剂
组合物3(高CBD)
成分 每单位(1ml)的量 作用 活性成分 CBD(BDS) 25mg/ml 活性 赋形剂 丙二醇薄荷油 乙醇(无水) 0.5ml/ml 0.0005ml/ml 适量至1ml 助溶剂 调味剂 溶剂
组合物4(THC/CBD基本上为1∶1)
成分 每单位(1ml)的量 作用 活性成分 THC(BDS) CBD(BDS) 25mg/ml 25mg/ml 活性 活性 赋形剂 丙二醇薄荷油 乙醇(无水) 0.5ml/ml 0.0005ml/ml 适量至1ml 助溶剂 调味剂 溶剂
实施例3
以下实施例阐述本申请的口腔粘膜液体喷雾剂的运用和与舌下 给药相比较通过口腔吸收所产生的血液水平。
以下适宜于口腔给药的液体制剂含有自乳化剂，因此不能包含在 本发明的范围内。然而，通过这些组合物的用途阐述的通则同样适用 于传递按照本发明的制剂。通过溶解(在不超过50℃的温度下)以下成 分(定量的详细资料按照重量份表示)制备溶液：
A B C D E
甘油单硬脂酸酯(自乳化剂) 2 - 2 - 2
甘油单油酸酯(自乳化剂) - 2 - 2 -
Cremophor RH40 20 30 30 20 30
CBME-G1给出THC 5 10 - - -
CBME-G5给出CBD - - 5 10 -
CBME-G1和G5给出THC&CBD - - - - 各10
α-生育酚 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1
抗坏血酸棕榈酸酯 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1
乙醇BP以得到 100 100 100 100 100
基于大麻的药物提取物(CBME)为大麻提取物，其可通过例如用液 态二氧化碳浸渍，通过急剧冷却浓缩的乙醇溶液到-20℃移出沉淀物并 通过过滤或离心移出沉淀的惰性植物成分制备。
将通过混合这些成分形成的产物到以6ml的量分装玻璃小瓶中并 用泵作用喷雾器关闭。在使用时，通过分散(break-up)按钮或常规的设 计释放剂量。适用于该目的的专利装置(Proprietary devices)为Valois生 产的VP7型，但是可从其它生产商处获得类似的装置。所述小瓶可装 入二级包装(secondary packaging)中以便允许直接喷雾到口腔粘膜的特 殊区域。或者，可使用具有伸出部分的专利按钮以便直接喷雾到口腔 粘膜的首选区域。
每1ml产品含50-100mgΔ9-四氢大麻酚(THC)和/或大麻二酚 (CBD)。每按一次泵传递一次喷雾，可直接到达口腔粘膜。在上述制 剂中使用已知浓度的大麻素类。CBME-G1为来自THC高产率的大麻 株的提取物，而CBME-G5为来自CBD高产率的大麻品种的提取物。 本领域的技术人员明白纯化的大麻素类和含有大麻素类的提取物可通 过定量调节如上所述进行配制。
虽然CBME的乙醇溶液可单独用作喷雾剂，但是由于作为溶剂的 高浓度纯乙醇的强刺激性(aggressive nature)限制了可传递的大麻素类 的量。这限制了可在粘膜上使用而不使患者产生不舒服的感觉的量。 当一组患者接受在上述类型溶液中的THC或CBD，对舌下或口腔粘 膜直接喷雾时，患者都报告舌下应用具有刺激感，但是当同样的溶液 喷雾到口腔粘膜时感觉轻微或无不舒服感。将少量的该类型的制剂喷 雾到口腔粘膜上为明显地刺激吞咽反射。这为制剂与口腔表面接触提 供了更多的停留时间。
将制剂给予一组患者13人，使他们通过舌下片剂、舌下泵作用喷 雾或口腔途径接受4mg THC、4mg CBD或安慰剂(仅含溶媒)。
测定在给药后抽取的血液样品中大麻素类的吸收[在吸收曲线下 的面积(AUC)]和初级代谢物。在下表8中给出了标准化的平均值。
表8
这些结果显示舌下和口腔(口咽)途径吸收的大麻素类总量是类似 的，但是在口咽(口腔)给药后测到的11-羟基(11-OH)代谢物的量有实质 性降低(大约25％)。这个发现与减少口腔制剂的吞因(和随后减少肝) 代谢不矛盾。
众所周知THC的11-羟基代谢物(11-OH THC)可能比母体化合物 具有对神经的更显著的作用。因此在给药期间尽量减少该代谢物的量 是符合需要的，并且这可通过使用本申请的制剂和方法减少口腔和舌 下吞咽的量来实现。所述泵作用喷雾剂显然提供了减少吞咽和由口咽 水平下的肠道吸收产生的代谢物的量的简单方法。
实施例4-药用大麻属的种植
象克隆一样从发芽的种子，在25±1.5℃的温度下、在玻璃杯下种 植植物3周，24小时日光照射；保持植物处于生长状态。通过暴露12 小时的昼长(day length)8-9周导致开花。
使用非人造的杀虫剂、除草剂、农药或薰剂。有机地种植植物， 用生物学控制昆虫有害物。
在生产中从种子种植到干燥药用大麻的基本步骤概述如下：
种子种植(accession)
↓
在G-Pharm(UK)种子发芽
↓
对大麻素类含量和活力(vigour)的选择
↓
母体植物
↓
剪接插条生根
在泥炭土柱上25℃，24小时昼长14-21天
↓
将生根的剪接插条物盆栽在装有预定堆肥的5升盆中
↓
安置克隆植物幼苗
3周，24小时昼长，25℃
↓
在3周末去掉较低的分枝
常用于生产新一代的剪接插条物
↓
诱导开花
植物再经12小时昼长以便诱导开花
↓
花形成并成熟
在25℃下8-9周
↓
收获
90％的花和叶开始衰败
↓
干燥
在避光条件下
↓
药用大麻
实施例5-测定植物和提取物中大麻素类的含量
通过TLC鉴别
a)原料和方法
设备采用能够传递精确地控制的溶液体积的设备即1μl毛细管或微
升注射器；
带盖子的TLC展开槽；
热鼓风机；
硅胶G薄层层析(TCL)板(SIL N-HR/UV254)，200um厚，在聚酯 载体上含有荧光指示剂；
显色剂(visualisation reagent)的浸渍槽；
流动相80％石油醚60∶80/20％乙醚；
显色剂0.1％w/v坚牢蓝B水溶液(100mg在100ml去离子水中)。可 选择的方法为在UV254和365nm下扫描。
b)样品制备
i)草药原料
称取大约200mg精细磨碎的、干燥的大麻放入10ml测定体积的烧 瓶中。用甲醇∶氯仿(9∶1)的提取溶剂补足体积。
超声提取15分钟。轻轻倾出上清液并直接用于层析。
ii)草药提取物
称取约50mg提取物，放入25ml测定体积的烧瓶中。用甲醇补足体 积。剧烈振摇至溶解，然后直接用于层析。
c)标准品
0.1mg/ml δ-9-THC的甲醇溶液
0.1mg/ml CBD的甲醇溶液。
在使用期间将该标准溶液在-20℃以下冷冻贮存并且在最初的制 备后可使用长达12个月。
d)试验溶液和方法
用最小10mm应用到各分开的点。
i)5μl草药提取物或1μl草药的提取物溶液是适当的
ii)10μl 0.1mg/ml δ-9-THC的甲醇标准溶液
iii)10μl 0.1mg/ml CBD的甲醇标准溶液
洗脱8cm距离的TLC板，然后移走该板。使溶剂从该板上蒸发， 然后第二次重复洗脱(双展开)。
将所述板简单地浸入坚牢蓝B试剂中直到大麻素类的特征颜色/橙 色开始出现。移走该板并在黑暗的环境条件下干燥。
通过数码扫描仪(优选选项)复制该图象或通过在描图纸上注明斑 点的位置和颜色永久地记录该结果。
通过HPLC分析THC、THCA、CBD、CBDA和CBN
a)材料和方法
设备：带二极管阵列检测器和自动进样器的HP 1100 HPLC。按照内部 的标准操作程序装配和操作该设备(SOPlab037)
HPLC柱：Discovery C8 5μm，15x0.46cm加Kingsorb ODS2预柱5 μm 3x0.46cm。
流动相：乙腈(acetonotrile)：甲醇∶0.25％乙酸水溶液(16∶7∶6体积比)
柱操作温度：25℃
流速：1.0ml/分钟
注射体积：10μl
运行时间：25分钟
检测：中性和酸性大麻素类220nm(带宽16nm)
参比波长：400nm./带宽16nm
狭缝：4nm
在310nm处(带宽16nm)常规地监测酸性大麻素类，仅仅为了 定性证实和鉴别的目的。
数据俘获：带A7.01版本软件的HP Chemistation
b)样品制备
将40mg基于大麻的药物提取物溶解于25ml的甲醇中并用甲醇 稀释该溶液至1-10。
该稀释液用于层析。
用玻璃吸液管吸取0.5ml填充溶液作为样品，其包含在泵作用的 舌下喷雾单位中。将该溶液稀释到25ml烧瓶中并用甲醇补足到 刻度。
用800μl甲醇稀释200μl的所述溶液。
通过取100mg样品并用5或10ml甲醇/氯仿(9∶1w/v)处理制备草 药或树脂样品。在一个密封的试管中超声处理该分散液10分钟， 让其冷却，将等份样品离心并在层析前用甲醇进行适当的稀释。
c)标准
该方法采用外标法。制备THC、CBD和CBN的贮备标准液在甲 醇或乙醇中的稀释液，得到大致精确的0.1mg/ml的最终的工作标准 液。将该工作标准液贮存在-20℃并且在最初的制备后可使用长达12 个月。
在注射任何测试溶液之前按一式三份注射每种标准液。在处理测 试溶液期间以适宜的间隔重复注射标准液。在缺少可靠的CBDA和 THCA标准品时，分别采用CBD和THC标准响应因素分析这些化合 物。
已经确定洗脱顺序为CBD、CBDA、CBN、THC和THCA。采用 所述方法可检测其它大麻素类并可根据需要鉴别和测定其它大麻素 类。
d)测试溶液
用甲醇制备稀释的测试溶液并且其应含有在线性工作范围0.02- 0.2mg/ml内的分析物。
e)层析方法可接受的标准
以下可接受的标准适用于每种程序的结果，因为发现这些标准会 引起所有的分析物的充分的拆分(包括两种最接近洗脱的分析物CBD 和CBDN)。
i)每种分析物的保留时间窗口
CBD 5.4-5.9分钟
CBN 7.9-8.7分钟
THC 9.6-10.6分钟
ii)峰型(按照BP方法的对称因素)
CBD＜1.30
CBN＜1.25
THC＜1.35
iii)已经开发了许多标准方法的修改方法，以处理含有较后洗脱 的杂质峰的那些样品如方法CBD2A延长洗脱时间到50分 钟。所有溶液在转移到自动进样器的小瓶之前应通过离心使 其澄清，所述小瓶用特氟纶面的隔膜封条和盖密封。
iv)对于层析方法的质量，预柱是重要的，并且当反压上升到71 巴以上和/或关于保留时间和拆分可接受的标准落在它们的 指定的限度外时应该更换预柱。
f)数据处理
大麻素类可细分为中性的和酸性的-可用DAD双波长模式进行 定性鉴别。酸性大麻素类在220-310nm区域有强吸收。中性大麻素类 仅在220nm区域有强吸收。
通常仅采用在220nm处记录的数据进行定量分析。
也可采用DAD进行每个峰的UV光谱扫描，然后可贮存在光谱 库中并用于鉴别。
在Hewlett Packard Chemstation上利用批处理软件进行定量的数 据处理。
g)样品层析图
THC和CBD草药提取物的HPLC样品层析图在随后的附图中提 供。
实施例6-草药提取物的制备
以下给出显示从高THC和高CBD的chemovars生产提取物的过 程的流程图：
药用大麻(高THC或高CBD)
↓
切成主要为2-3mm的大小
↓
在100到150℃加热足够的时间以便使大麻素类的酸形式脱羧，
以产生中性的大麻素类
↓
用指定体积的的液体二氧化碳提取6到8小时
↓
通过减压除去二氧化碳得到粗提物
↓
“冬化处理”-将粗提物溶解于乙醇Ph.Eur.中，随后急剧冷却该 溶液(-20℃/48小时)至沉淀出不需要的蜡状物
↓
通过冷过滤除去不需要的蜡状物
↓
通过在减压下的薄膜蒸发从滤液中除去乙醇
所得到的提取物被称为基于大麻的医药提取物，并且按照US Food and Drug Administration Guidance for Industry Botanical Drug Products也分类为植物药物质。
实施例7
在平均温度21+2℃、RH 50-60％下，于玻璃瓶中种植高THC大 麻。在黑暗中、室温和40-50％的RH下收获和干燥草药。当干燥时， 从茎上剥离叶和头状花序并且该干燥的生物量被称为“药用大麻”。
将药用大麻粉碎为粗粉(可通过3mm目筛的颗粒)并装入超临界 流体提取器的室中。装入的密度为0.3并且在35℃的温度下使在600 巴压力下的液态二氧化碳通过该物质。进行超临界提取4小时并通过 逐步减压将提取物回收到收集容器中。进一步纯化所产生的棕绿色油 状的树脂状提取物。当溶解于乙醇BP(2份)中并使其经历-20℃的温度 24小时时，沉淀物(含脂溶性的、蜡状物质)在溶液中出现并通过过滤 除去。在低压下于旋转蒸发器中除去溶剂。所产生的提取物为软浸膏， 其含有大约60％的THC和大约6％的其它大麻素类，其中大麻二酚占 1-2％而其余为次要的大麻素类包括大麻酚。基于干燥的药用大麻的重 量计，定量收率为9％w/w。
对高CBD的chemovar进行类似的处理，得到含有大约60％的 CBD和最高可达4％的四氢大麻酚，其它大麻素类的总量在6％以内的 提取物。采用上述通用方法用THCV和CBDV chemovar制备提取物。
本领域的技术人员将理解在超临界和次临界的条件下可使用温 度和压力的其它组合(例如在+10℃到35℃和60-600巴范围内)制备提 取物。
实施例8-光对THC、CBD或THCV的醇溶液的稳定性的影响
以下实施例包括支持在琥珀色玻璃瓶中液体剂型的包装的数 据，该包装可提供一些保护防止光对大麻素类的降解影响。
对于含有大麻活性成分的溶液的最低的可能的贮存温度的选择 也提供了进一步的证明。
背景和概述：
已知光为许多物质，包括大麻素类的降解反应的引发剂。这一知 识已经被用于选择液体制剂的包装，在药物展示中广泛地使用琥珀色 玻璃瓶作为避光屏障。
建立实验以便跟踪白光对THC、CBD或THCV的甲醇溶液稳定 性的影响。根据不同波长的光对化合物的稳定性可具有不同影响(viz. 维A酸仅在红光或黑暗中稳定)的初步知识，将样品包装在有色的醋酸 纤维素膜中或避光的箔中。并行(concurrent)试验采用活性炭处理 CBME以便研究除去植物色素对降解过程的影响。
材料和方法
大麻素类：在AR甲醇中制备1mg/ml的CBME溶液。使CBME 的甲醇溶液(100mg/ml)通过活性炭柱(Biotage Flash 12AC 7.5cm Cartridges，b/no.273012S)，然后稀释到1mg/ml。将溶液贮存在苏打玻 璃瓶中，紧紧地拧紧该玻璃瓶的盖子并在上面用缠绕膜密封。将管子 包装在以下有色的醋酸纤维素膜中：
红、黄、绿和蓝绿色。
也将溶液填充到琥珀色玻璃U-save瓶中；用隔膜密封并密封上 面。将每个系列样品的一支管子紧紧地包装在铝箔中以便达到完全避 光的目的。这作为“黑暗”控制以便监测环境温度对降解行为的作用。 将所有上述管子放置在具有2x 40瓦特白炽光(white Osram)荧光管的 盒子中。在该盒子的壁上衬以能够产生反射的箔并且内部的温度以频 繁的间隔进行监控。
将每个系列的另一支管子贮存在-20℃以下，作为一种假的参比样 品；另外，将一支管子直接暴露在光下而没有保护。在开始研究后以 直到长达112天的间隔收回样品进行层析分析。该研究被称为 AS01201/AX282。
抽取测试溶液的样品，并按照适于用PLC和TLC分析的要求进行 稀释。按照TM GE.004.V1(SOPam058)进行HPLC。在硅胶(MN SilG/UV)板上按照TM GE.002.V1(SOPam056)进行TLC。
为了分离降解产品，利用其它TLC系统：
a)SilG/UV，固定相，己烷/丙酮8/2v/v流动相
b)RPC18固定相，乙腈/甲醇/0.25％乙酸水溶液16/7/6体积比 用坚牢蓝B盐作为大麻素类显色剂。
结果和讨论：
HPLC定量分析：
将取自贮存的、暴露在光下的溶液的样品的HPLC分析结果绘 图，见图6、6a(活性炭处理前和后的THC)和7、7a(活性炭处理前和 后的CBD)。
从图6和6a可观察到在所有溶液中THC的稳定性皆有显著改 善，除了那些在黑暗中贮存的(在环境温度下)和在-20℃贮存的样品(因 此不是在光化学应力下)之外。当未处理的提取物与活性炭处理的提取 物相比时，就是贮存在琥珀色的玻璃瓶中也显示了改善。可是这可能 在活性炭处理的提取物的热稳定性的改善中得到反映。
图7和7a显示对含有CBD的提取物存在类似的数据，从中可观 察到该大麻素类显然比THC对光的影响更敏感。在没有活性炭的情况 下，所有暴露，除了在琥珀色玻璃瓶中之外，避光(箔)和在-20℃下贮 存，在40天前皆降解到不可检测的CBD水平。在活性炭处理后，在 42和62天之间的图得到改善。保护CBD的琥珀色玻璃瓶显示一种改 善，从没有活性炭脱色在112天的38％残余化合物到活性炭处理后在 同一时间的大约64％的残余化合物。也显示了在活性炭处理后的避光 溶液中CBD稳定性的改善。这可能仅仅反映减少了热氧化降解，或在 CBME和溶液制备期间由光(和/或空气)引发的残余的光化学降解。
薄层层析定性分析：
用薄层层析法评估光降解的溶液，采用现有的正相系统(即硅胶固 定相和己烷/乙醚作为流动相)和两种另外的系统，能够溶解在降解过程 中形成的更大极性的或聚合的产物。
因此，采用己烷/乙醚系统的层析显示对THC而言经过112天， 所有颜色的滤光器中THC和次要的CBD斑点的强度降低(未显示数 据)。同时，流动或接近原点的坚牢蓝B着色物的强度增加。箔保护的 溶液显示未有这些影响。
结论和建议：
已知大麻素类由于许多天然的挑战，即光、热、氧、酶等而降解。 在没有经过广泛的清洁程序的草药植物原料的提取中，很可能这些过 程中的一些可能还能够继续。有疑问的是，也可能从植物组织中存在 的任何保护剂中移出大麻素类，这很可能使提取物经历特殊的降解途 径。
包装在琥珀色玻璃小瓶中，在琥珀色的滤光器中进行制剂生产， 并且将植物提取物和药物制剂贮存在尽可能低并兼备生产和分配要求 及患者的依从性的温度下，消除或至少降低光对大麻素类降解的影 响。这些作用极大地改善了植物提取物和终产品的贮存稳定性。
有趣的是，注意到当经历光化学应力时CBD似乎比THC更不稳 定。这与相对的热氧化的稳定性的发现相反，其中THC更不稳定。这 似乎表明虽然聚合的降解产物可能是光化学和热氧化降解的共同结 果，对于这两种过程而言，确切的详细机制是不同的。
可得出如下结论：
1)选择琥珀色玻璃瓶包装药剂溶液提供了改善的稳定性，而且可 通过另外的避光措施进行次要的改善。
2)干燥过程和随后的提取及大麻提取物的配制应该在低亮度、琥 珀色过滤光下进行。
3)应该考虑将提取物覆盖在惰性气氛(如氮气)下。
4)在冬化后通过简单的活性炭过滤清洁大麻提取物，对产品的保 存期可得到根本的改善。
例如，US 3,560,625公开了将烷氧基苯甲酰胺引入全身循环系统 的气雾剂。公开了两种不同类型的气雾剂：
a)含有2％重量的烷氧基苯甲酰胺，18％乙醇和80％抛射剂的氟 烃类型；和
b)含有0.5％重量的烷氧基苯甲酰胺，含10.3％乙醇和31.4％丙二 醇的混合溶剂系统和57.8％去离子水的喷雾器类型。
US 3,560,625在寻找适宜的溶剂系统以便产生用于吸入邻乙氧基 苯甲酰胺的气雾喷雾中发现了一个问题，即由于这样一个事实，虽然 乙醇无疑是最好的溶剂，但含有超过18％重量的乙醇的混合物产生令 人不愉快的口感，抵消甚至超过了口服途径的效果。
WO 01/13866公开δ-9-四氢大麻酚(Δ9THC)的半水(semiaqueous) 溶液。该溶液含有乙醇，10-30％的水和药学上可接受的甘油。为了通 过吸入传递药物配制所述溶液，并且为此具有小于10微米的粒度。水 改善分散和气雾化。作为比较性的实例，显示了在50/50乙醇和丙二 醇混合物中的Δ9THC的溶液。
US 4704406涉及适于局部应用的含芳基链烷酸的可喷雾的药用 组合物。
当本申请人打算生产含有一种或多种大麻素类的植物药物质 (botanical drug substance)的喷雾制剂时，他们意识到大麻素类的高亲脂 性在配制所述活性成分时可能存在的问题。
本申请人首先探索开发一种口腔粘膜制剂，优选舌下，以加压气 雾剂或喷雾剂的形式传递给药，正如在公布的国际专利申请WO 01/66089(PCT/GB01/01027)中所公开的。它们最初的关注是具有 HFC-123a和HFC-227体系的抛射剂，但是这些抛射剂证明并不适宜 作为所述大麻素类的溶剂。所述制剂含有从0.164到0.7％重量比的量 的合成Δ9THC和最高可达20.51％重量的量的作为主要溶剂的乙醇。 一种具体的组合物含有0.164％合成Δ9-THC，4.992％乙醇，4.992％丙 二醇和89.582％p134a(抛射剂)。
本申请人发现乙醇的水平甚至在制剂总体积的20％体积时，它们 也不能在标准喷雾剂剂量中溶解足够水平的Δ9THC，以满足临床需 要，因为所述大麻素类在所述抛射剂中的溶解性很差。他们也发现不 能增加乙醇的水平，因为当较低挥发性溶剂增加超过临界比率时，装 置喷嘴的传递特性基本改变。HFC-123a和HFC-227抛射剂喷雾传递 最大量为7mg/ml，然而，最初的临床研究建议所述制剂需要含有最高 可达50mg大麻素类/ml。
因此，在European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics 50 (2000)179-188的一篇综述文章中详细讨论了本申请人关注的自乳化 药物传递系统，其结论是许多化学实体的差的水溶性是对旨在提高口 服生物利用度的适当的制剂设计的一个真正挑战。
在同时待审的国际申请WO 02/064109(PCT/GB02/00620)中，该 申请人公开了众多的含大麻素类的制剂，所述制剂含有至少一种自乳 化剂。为了得到可粘附到粘膜表面以便实现足够的大麻素类的吸收的 所述制剂，在该制剂中包含至少一种自乳化剂被认为是必须的。一种 具体的制剂含有2％重量的甘油单油酸酯、得到THC的G1大麻的5％ CBME、得到CBD的G5大麻(cannabis)5％的CBME、44％乙醇Bp和 44％丙二醇。
令人惊奇地，本申请人已经发现在通过口腔粘膜，特别是舌下和 颊的粘膜应用从而实现令人满意的剂量水平的液体制剂中并不绝对要 求存在一种自乳化剂。
的确，与US 3,560,625和European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics 50(2000)179-188的教导相反，他们能够生产一种简 单而有效的溶媒用于在液体喷雾剂中传递亲脂性药物。
发明概述
按照本发明的第一方面，提供一种液体药物制剂，用于经过粘膜 表面给予包含一种或多种大麻素类的亲脂性药物，该制剂含有：包含 一种或多种大麻素类的亲脂性药物、溶剂和助溶剂，其中溶剂和助溶 剂在所述制剂中的总量大于所述制剂的55％重量比，所述制剂不存在 自乳化剂和/或含氟抛射剂，并且存在于该制剂中的所述大麻素类的量 大于10mg/ml。
优选一种或多种大麻素类以来自至少一种大麻(cannabis)植物的 至少一种提取物的形式存在。所述大麻属植物优选包括至少一种大麻 (cannabis chemovar(大麻化学变种))。最优选所述植物提取物为一种如 此中定义的植物药物质(BDS)。
所述制剂可任选另外含有调味剂，如薄荷油。
除了大麻素类之外，所述制剂也可含有另外的活性成分，优选其 为一种阿片剂，如吗啡。因此，打算提供基本上含有一种或多种大麻 素类、乙醇、丙二醇和阿片剂(优选为吗啡)的制剂。
以实施例的方式给出的并且不打算限制本发明范围的按照本发明 的典型的液体药物制剂在1ml体积中可含有：THC 25-50mg/ml，优选 25mg/ml或27mg/ml(基于植物药中大麻素类的量计算)、CBD 25-50 mg/ml，优选25mg/ml(基于植物药中大麻素类的量计算)、丙二醇0.5 ml/ml、薄荷油0.0005ml/ml及适量乙醇(无水)至1ml。
其它优选的制剂包括“高THC”制剂，所述制剂在1ml体积中含 有：THC 25mg/ml或27mg/ml(基于植物药中大麻素类的量计算)、丙 二醇0.5ml/ml、薄荷油0.0005ml/ml，以及适量乙醇(无水)至1ml；及 “高CBD”制剂，其在1ml体积中含有：CBD 25mg/ml(基于植物药 中大麻素类的量计算)、丙二醇0.5ml/ml、薄荷油0.0005ml/ml，以及 适量乙醇(无水)至1ml。
在这些优选的制剂中，加入来源于大麻属植物的植物药物质，提 出的大麻素类的量相对于存在于1ml最终制剂中的大麻素类的总量 (重量)。有专业知识的读者将明白为了在最终制剂中达到所需量的大 麻素类必须加入的BDS总量将取决于在BDS中存在的大麻素类的浓 度，所述浓度将因不同批次的BDS而发生变化。
一种或多种大麻素类、乙醇和丙二醇的简单组合可有效地用于泵 作用的喷雾剂，该发现是出乎意料的。
本申请人已经发现，所述溶剂/助溶剂系统为乙醇/丙二醇而亲脂 性的药物包含一种或多种植物药(BDS)形式的大麻素类，溶剂/助溶剂 有效工作的限度是十分狭窄的，讨论如下。
溶剂/助溶剂的量优选大于80％，更优选在90到98％的范围内。
所述制剂优选含水量低于10％，或低于9％，或低于8％，或低于 7％，或低于6％，或低于5％，或低于4％，或低于3％，或低于2％， 或低于1％，或低于0.5％。
所述制剂优选不含有任何类型的抛射剂。
所述制剂也不含任何自乳化剂。此中将“自乳化剂”定义为当存 在带有所要求的最小能量的交替相(alternate phase)时形成一种乳状液 的试剂。相反，与自乳化剂相对应，乳化剂为一种要求额外的能量才 能形成乳状液的试剂。通常自乳化剂为可溶性的肥皂、盐或硫酸化醇 酯，尤其为非离子的表面活性剂或四价化合物。示范性的自乳化剂包 括，但不限于甘油单油酸酯(特别是SE级)、甘油单硬脂酸酯(特别是 SE级)、聚乙二醇(macrogols)和聚氧化氢化的(polyoxyhydrogenated)蓖 麻油如聚氧乙烯蓖麻油。
所述制剂可另外含有调味剂。优选的调味剂为薄荷油，优选以最 高可达0.1％体积的量存在，一般为0.05％体积比。
所述溶剂优选选自C1-C4醇。优选的溶剂为乙醇。
所述助溶剂优选为允许使用较低量的“初级”溶剂的溶剂。在含 有“初级”溶剂的组合中，它应该溶解足够的亲脂性药物，即溶解医 学上有效量的亲脂性药物。医学上的有效量将因药物而发生变化，但 是对于大麻素类，其医学上的有效量将为至少并优选大于1.0mg/0.1ml 溶剂/助溶剂。
优选的助溶剂选自二醇、糖醇、碳酸酯和氯化烃。
所述二醇优选选自丙二醇和甘油，最优选丙二醇。所述碳酸酯优 选碳酸丙二酯。
最优选的组合为乙醇作为溶剂而丙二醇作为助溶剂。
制备口咽传递大麻素类的液体制剂带来了许多问题。首先，必须 在每0.1ml液体制剂中传递至少1.0mg，或至少1.5mg，或至少2.0 mg，更优选至少2.5mg，甚至更优选至少5mg的大麻素类以便在一 个单位剂量中达到治疗作用。在这点上患者可能需要服用最高可达120 mg大麻素类/天，平均约为40mg/天，最多6个剂量。
在舌下或颊传递的情况下，如果经粘膜吸收所述活性成分，意味 着以制剂量传递活性成分的量将是患者所不能忍受的。
虽然可通过溶解所述大麻素类于作为溶剂的乙醇中达到所述剂 量，但是高浓度的乙醇引起刺激感觉并且超出了忍受的限度。
因此，需要使用一种助溶剂以便减少乙醇的量，同时还能够使足 够量的大麻素类溶解。
本申请已经发现助溶剂的选择是有限的。优选的助溶剂应该具有 充分的溶解作用，使足够的大麻素类溶解于一个单位剂量中，也就是 至少并优选大于1.0mg/0.1ml制剂，并且使存在的溶剂的量降低到患 者可以耐受的限度内。达到这些标准的特别适宜的助溶剂为丙二醇和 甘油。
在优选的实施方案中，存在于所述制剂中的溶剂和助溶剂的总量 大于所述制剂的65％重量比，更优选大于70％重量比，更优选大于75％ 重量比，更优选大于80％重量比，更优选大于85％重量比。存在于所 述制剂中的溶剂和助溶剂的总量最优选在所述制剂的80％重量比到 98％重量比的范围内。
在优选的实施方案中，按照本发明的制剂为液体制剂，该制剂通 过泵作用喷雾给药。泵作用喷雾的特征在于要求采用外部的压力刺 激，例如外部的手动、机械或电力启动的压力。这与加压系统相反， 例如抛射剂-驱动的气雾喷雾，其中致动(actuation)是通过控制压力的释 放，例如通过控制阀门的打开而实现的。
发现当传递大麻素类时泵作用喷雾特别有益。的确，人们从前一 直关注溶剂系统包括抛射剂。
同时承认此类系统有缺陷，包括传递速度，本领域的技术人员一 直试图通过减少抛射剂或通过改变喷嘴解决该问题。本申请人发现在 它们的制剂中使用泵喷雾他们能够产生喷雾，其中的微粒具有在15和 45微米之间的平均的空气动力学的粒度，更具体地说在20和40微米 之间并且平均约33微米。这与当采用加压系统传递时具有在5和10 微米之间的平均空气动力学的粒度的颗粒形成对比。
事实上，本申请人进行的对比实验已经显示泵作用喷雾系统具有 优势，能够传递所述活性成分到靶区域内更大的表面面积上。该实验 阐述参阅随后的实施例3。
粒子分布和喷雾面积的变化通过直接实验证实。如随后的实施例 4所述将制剂填充到泵作用的喷雾装置中(致动的Valois vial type VP7100)。将同样的制剂填充到用HFA 134a产生动力的加压容器中。
两个容器皆在离一张放在喷射的传播方向成直角(即正前面)的薄 纸50mm距离处射出。然后对光显现在两种情况下射出100ul所产生 的喷雾图案。在两种情况下，射出的图案为圆形并测量如下：
平均直径(mm) 平均面积(mm2) 泵作用喷雾 23 425.5 加压喷雾 16 201.1
加压的喷雾在区域的中心产生集中的液体。泵作用喷雾给出更均 匀的喷雾图案并且较少“反弹”。通过泵作用喷雾也有显著的较大的 覆盖面积。进行实验的条件与实际使用的装置有关。相对加压喷雾而 言泵作用喷雾可达到较大面积的口腔粘膜。
对于泵喷雾的应用，所述溶剂/助溶剂组合必定具有在优选的溶剂 /助溶剂组合所定义的粘度范围内的粘度。因此，对于乙醇/丙二醇组合 而言，粘度应在以下之间：其中乙醇/丙二醇以60/40和40/60，更优选 以55/45到45/55而最优选以约50/50的相对体积比存在。
当为了泵作用传递通过一个机械泵如VP7致动阀(actuator valve) (Valois)包装时产生的制剂的粘度允许产生的气雾传递具有20-40微米 的平均空气动力学粒度，更优选25-35而最优选30-35微米的平均粒 度。对于舌下/颊传递这使得与靶粘膜的接触最大化。
按照本发明的制剂优选含有一种或多种大麻素类作为亲脂性药 物。
优选所述亲脂性药物至少为一种来自至少一种大麻属植物的提取 物。所述大麻属植物优选包括至少一种大麻(cannabis chemovar)。最优 选所述植物提取物为一种如此中定义的植物药物质(BDS)。
“植物提取物”为来自植物原料的提取物，如在Guidance for Industry Botanical Drug Products Draft Guidance，August 2000，US Department of Health and Human Services，Food and Drug Administration Centre for Drug Evaluation and Research中定义。
“植物原料”被定义为植物或植物部分(如树皮、树木、叶子、茎、 根、花、果、种子、浆果或其局部)以及渗出物。
术语“大麻属植物”包含野生型的大麻(Cannabis sativa)及其变 种，包括天然含有不同量的单一大麻素类的大麻(cannabis chemovars)、 印度大麻亚种(Cannabis sativa subspecies indica)包括变种印度大麻变 种(var.Indica)和kafiristanica变种(var.Kafiristanica)，印度大麻 (Cannabis indica)和发生遗传杂交(genetic crosses)的、自交(self-crosses) 或其杂种(hybrids)的植物。因此术语“大麻属植物原料”被认为是来源 于一种或多种大麻属植物的植物原料。因此为避免疑问规定“大麻属 植物原料”包括干燥的大麻生物量(biomass)。
在本申请的上下文中术语“大麻提取物”或可互换使用的术语“来 源于大麻属植物的提取物”包括来源于大麻属植物原料的“植物药物 质”。在Guidance for Industry Botanical Drug Products Draft Guidance， August 2000，US Department of Health and Human Services，Food and Drug Administration Centre for Drug Evaluation and Research中定义植物 药物质为：“来源于一种或多种植物、藻类，或肉眼可见的真菌类的 药物物质。用以下一种或多种方法由植物原材料进行制备：粉碎、煎 煮、榨出、水提、醇提或其它类似的方法。”植物药物质不包括高纯 度的或化学修饰的来源于天然资源的物质。因此，在大麻的情形下， 来源于大麻属植物的“植物药物质”不包括高纯度的、药典级 (Pharmacopoeial grade)的大麻素类。
按照在Guidance for Industry Botanical Drug Products Draft Guidance，August 2000，US Department of Health and Human Services， Food and Drug Administration Centre for Drug Evaluation and Research中 的定义，“基于大麻的药物提取物(CBMEs)”，如用随后的实施例所 述的方法制备的CBMEs，被分类为“植物药物质”。
来源于大麻属植物的“植物药物质”包括用此类方法制备的初级 提取物，所述方法有例如浸渍、渗滤、用如C1到C5的醇(如乙醇)、 诺氟烷(HFA134a)、HFA227和在次临界或超临界的液态二氧化碳溶剂 提取。所述初级提取物可进一步通过超临界或次临界的溶剂提取、蒸 发或层析进行纯化。当使用以上列出的那些溶剂时，得到的提取物含 有非特异性的脂溶性物质。这可通过各种方法除去，包括“冬化”， 所述冬化包括急剧冷却到-20℃，随后过滤出蜡状的沉淀、用液态二氧 化碳提取并蒸馏。
在其中大麻素类以BDS提供的实施方案中，该BDS优选通过在 次临界或超临界的条件下用CO2提取，随后再次提取，如乙醇沉淀， 以便移出大部分的蜡状物及其它沉淀(ballast)而获得。这是因为所述沉 淀包括在所选择的溶剂/助溶剂，特别是优选的助溶剂丙二醇中不能很 好溶解并且将沉淀出来的蜡酯和甘油酯、不饱和的脂肪酸残基、萜、 胡罗卜素和flavenoids。最优选所述BDS通过这样的方法制备，该方 法包括脱羧、用液体二氧化碳提取，然后进一步提取以便除去大量的 沉淀物。最优选通过乙醇沉淀充分除去所述沉淀物。
最好，将大麻属植物原料加热至规定的温度长达规定的时间，以 便在提取BDS前使大麻素类酸(cannabinoid acids)脱去羧基游离出大麻 素类。
优选的“植物药物质”包括那些可通过使用此中公开的从大麻属 植物原料制备提取物的任何方法或步骤获得的植物药物质。所述提取 物优选基本不含蜡状物和其它非特异性的脂溶性物质，但优选充分含 有所有天然存在于所述植物中的大麻素类，最优选以在完整大麻属植 物中基本相同的比率存在。
将植物药物质配制为“植物药产品”，如在Guidance for Industry Botanical Drug Products Draft Guidance，August 2000，US Department of Health and Human Services，Food and Drug Administration Centre for Drug Evaluation and Research中将其定义为：“一种打算作为药物使用 的植物产品；一种由植物药物质制备的药品。”
“大麻属植物”包括野生型大麻(Cannabis sativa)及其变种，包括 天然含有不同量的各单一大麻素类的大麻(cannabis chemovars)。
术语“大麻素类”也包括可通过纯化天然来源的物质或经过合成 手段获得的高纯度的、药用级的物质。因此，按照本发明的制剂可用 于传递大麻属植物提取物和单一的大麻素类，或其合成的类似物，无 论是否来源于大麻属植物，以及大麻素类的组合。
优选的大麻素类包括，但不限于，四氢大麻素类，它们的前体， 烷基(特别是丙基)类似物，大麻二酚，它们的前体，烷基(特别是丙基) 类似物和大麻酚。在优选的实施方案中，所述制剂可包含任何选自以 下的大麻素类：四氢大麻酚、Δ9-四氢大麻酚(THC或Δ9-THC)、Δ8- 四氢大麻酚、Δ9-四氢大麻酚丙基类似物(THCV)、大麻二酚(CBD)、 大麻二酚丙基类似物(CBDV)、大麻酚(CBN)、大麻环萜酚(CBC)、大 麻环萜酚丙基类似物和大麻萜酚(CBG)，或这些大麻素类中的两种或 多种的任何组合。众所周知THCV和CBDV(分别为THC和CBD的丙 基类似物)在特殊的大麻属植物品种中是占主导地位的大麻素类并且 发现THCV比THC和CBD性质上更具有优良特性。摄取THCV的患 者报告THCV引起的情绪激动比THC引起的情况激动要小。它也较 少引起严重的后遗症(hangover)。
最优选按照本发明的制剂含有THC和/或CBD。
在优选的实施方案中，所述制剂可含有具体的、不同大麻素类的 预定重量比率，如CBD对THC的具体比率或四氢次大麻酚 (tetrahydrocannabinovarin，THCV)对次大麻二酚(cannabidivarin， CBDV)，或THCV对THC的比率。已经发现大麻素类的某些具体比 率临床上用于治疗或处理特殊的疾病或医学情形。详细地说，已经发 现某些此类制剂可特别用于减轻疼痛和刺激食欲的领域。
本申请人特别观察到特殊大麻素类的组合比任何一种单一的大麻 素类更加有益。优选的实施方案为那些其中CBD的重量大于THC的 重量的制剂。此类制剂被称为“反比率”制剂并且此类制剂是新的和 不寻常的，因为在世界范围内可获得的许多医疗的和娱乐的 (recreational)大麻属植物中，CBD相对THC而言是次要的成分。在其 它实施方案中THC和CBD或THCV和CBDV以几乎相等的量存在， 或THC或THCV为主要成分并最高可达到存在的总大麻素类的 95.5％。
优选的制剂含有确定的重量比的THC和CBD。最优选的制剂含 有THC∶CBD在0.9∶1.1到1.1∶0.9重量比范围内的THC和CBD，甚 至更优选THC∶CBD的比率基本上为1∶1。其它优选的制剂含有下列 重量比的THC和CBD：大于或等于19∶1的THC∶CBD、大于或等于 19∶1的CBD∶THC、4.5∶1的THC∶CBD、1∶4的THC∶CBD和1∶2.7 的THC∶CBD。对于其中THC∶CBD比率基本上为1∶1的制剂而言， 优选所述制剂分别含有大约25mg/ml的THC和CBD。
许多年来医学上一直使用大麻，并且在维多利亚时代(Victorian times)是一种广泛使用的处方药成分。使用其作为催眠镇静剂治疗“癔 病、精神错乱、癫痫症、神经性失眠症、偏头痛、疼痛和痛经”。大 麻的使用持续到二十世纪中叶，而其作为处方药的效用目前正在重新 评估。特异性大麻素类受体和新的给药方法的发现使基于大麻的药物 的使用扩大到传统适应症的和新的适应症成为可能。
大麻的娱乐用途促使立法，从而导致禁止其使用。历史上许多医 师认为在脊髓受伤和其它形式的神经病性疼痛包括多发性硬化的疼痛 和痉挛的情况下，大麻是独特的具有消除对阿片样物质止痛剂耐药的 疼痛的能力。
在美国和加勒比海，因娱乐用途而种植的大麻一直是有选择性的 以便其含有高含量的四氢大麻酚(THC)，以其它大麻素类的损失为代 价。在Merck Index(1996)中，其它已知存在于大麻中的大麻素类如大 麻二酚和大麻酚被认为是无活性的物质。虽然大麻二酚从前被认为是 一种无活性的成分，有证据表明在几个方面其具有不同于THC的药理 学活性。仅用一种或其它“活性”成分不能满意地解释大麻的治疗作 用。
已经显示单独使用四氢大麻酚(THC)比给出相同量的THC的大麻 提取物产生较低程度的疼痛减轻。研究了在这种现象之下的药理学基 础。在某些情形下，在相同的临床前试验中，THC和大麻二酚(CBD) 具有相反作用的药理特性，而在其它试验中具有相同作用的药理特 性。例如，在某些临床研究中和轶事报道中，有一种感觉CBD改善了 THC对神经所起的显著作用。这两种大麻素类的光谱活性可帮助解释 生长在世界上不同区域的大麻的一些治疗益处。它也指出由THC和 CBD组合产生的有益作用。本申请人一直在研究这些方面。下表1显 示这两种大麻素类的药理性质的差异。
表1
作用T HC THCV CBD CBDV 文献
CB1(大脑受体) ++ ± Pertwee等，1998
CB2(外周受体) + -
CNS作用
抗惊厥 -- ++ Carlini等，1973
抗卡地阿唑 - - GW数据
(Antimetrazol)
抗电休克 - ++ GW数据
肌肉松弛 -- ++ Petro，1980
抗感受伤害作用 ++ + GW数据
僵硬症 ++ ++ GW数据
对神经起显著作用 ++ - GW数据
抗精神病 - ++ Zuardi等，1991
神经保护性抗氧化剂 + ++ Hampson A J等，
行为* ++ - 1998
止吐 + +
镇静(减少自发行为) ++ Zuardi等，1991
刺激食欲 ++
抑制食欲 - ++
抗焦虑 GW数据
心血管作用
心搏徐缓 - + Smiley等，1976
心动过速 + -
高血压§ + -
血压过低§ - + Adams等，1977
抗炎作用 ± ±
免疫调节/抗炎活性
擦伤(Raw)爪水肿试验 - ++ GW数据
Cox 1 GW数据
Cox 2 GW数据
TNFa拮抗作用 + + ++ ++
青光眼 ++ +
*作用不依赖于CB1受体.
THC为原惊厥剂(pro convulsant)。
§THC对血压具有双向作用；在首次进行试验的(naive)患者中其 引起血压过低的情况并且也报道对于长期使用者引起高血压。GW Internal Report No 002/000159。
这些药理特征和本申请进行的直接的实验已经出乎意料地显示不 同比例的THC和CBD的组合在某些病症的治疗中是特别有用的。临 床上进一步发现THC和CBD混合物的毒性小于单独使用THC的毒 性。
因此，本发明提供具有以上所述基本特征的药物制剂，其含有作 为活性药物的大麻素类并且所述大麻素类具有特定比例的CBD比 THC，已经发现所述制剂临床上用于治疗或处理特殊的疾病或医学病 症。
在另一方面，本发明也涉及具有所有以上定义的基本特征的药物 制剂，并且其含有特定比例的四氢次大麻酚(THCV)或次大麻二酚 (CBDV)。THCV和CBDV(分别为THC和CBD的丙基类似物)为已知 的大麻素类，主要在特殊的大麻属植物品种中表达(expressed)并且已经 发现，分别与THC和CBD比较时THCV具有优良的品质特性。摄取 THCV的患者报告THCV引起的情绪激动比THC引起的小。它也较少 引起严重的后遗症。
本发明还进一步涉及具有如上定义的所有基本特征的药物制剂， 并且含有特定比例的THCV比THC，已经发现此类制剂在缓解疼痛和 刺激食欲方面特别有用。
本申请人特别观察到特殊的大麻素类的组合比任何一种单独使用 的单一大麻素类具有更多的优点。优选的实施方案为那些其中CBD的 重量大于THC的重量的制剂。此类制剂被称为“反比例”制剂并且是 新的和不寻常的，因为在世界范围内可获得的各种医学的和娱乐的大 麻属植物中，相对THC而言CBD是次要的大麻素类成分。在其它实 施方案中，THC和CBD或THCV和CBDV以近乎相等的量存在，或 者THC或THCV为主要的成分并且最高可达到存在的总大麻素类的 95.5％。
特别优选的大麻素类的比率和它们适宜的靶医学病症显示于下表 2。
表2.不同比率的大麻素类的靶治疗组
产品组 THC∶CBD比 率靶治疗领域
高THC ＞95∶5 癌症疼痛，偏头痛，刺激食欲
平均比率 50∶50 多发性硬化，脊髓受伤，外周神经
病，其它神经性疼痛。
反比率/主要比率CBD ＜25∶75 风湿性关节炎，炎性肠道疾病
高CBD ＜5∶95 精神病(精神分裂症)，癫痫症和运
动障碍，休克，头部损伤，Disease
modification in RA和其它炎性疾
病，食欲抑制
含有具体的、规定比率的大麻素类的制剂可用纯的大麻素类与本 领域技术人员所熟知的药用载体和赋形剂一起配制。也可从供应商处 购买药用级“纯”的大麻素类，例如CBD和THC可从Sigma-Aldrich Company Ltd，Fancy Road，Poole Dorset，BH12 4QH购买或可经化学合 成。或者，大麻素类可采用本领域技术人员所熟知的技术从大麻属植 物中提取。
其它优选的THC∶CBD、THCV∶CBDV和THC∶TCHV的比率以 及此类制剂的优选的治疗用途在随后的权利要求中阐述。具体地说， 本发明打算包括，但不限于，以下实施方案：
(A)按照本发明的第一方面的液体药物制剂包含大麻二酚(CBD) 和四氢大麻酚(THC)两种大麻素类，其中存在的CBD的重量比大于 THC的重量。详细地说，本发明包括其中CBD对THC的重量比大于 2.5∶1的制剂，或其中CBD对THC的重量比在99∶1和2.5∶1之间， 优选在约20∶1和约2.5∶1之间的制剂，或其中CBD对THC的重量比 约为19∶1的制剂，或其中CBD对THC的重量比在约5∶1到约3∶1范 围内的制剂。
优选的实施方案包括，但不限于，基本上不含不同于CBD和THC 的大麻素类的制剂、基本上不含在大麻(Cannabis sp)中发现的其它大 麻素类的制剂、其中CBD和THC为基本纯形式的制剂、进一步包含 一种或多种其它大麻素类的制剂、特别是其中一种或多种其它大麻素 类为四氢次大麻酚(THCV)和/或次大麻二酚(CBDV)的制剂、其中CBD 和THC构成来自至少一种大麻属植物的至少一种提取物的部分，所述 至少一种提取物含有所述植物中所有天然存在的大麻素类，以及含有 来自两种或多种不同大麻品种的提取物的制剂，其中在最后制剂中 CBD的重量大于THC的重量。
(B)按照本发明的第一方面的液体药物制剂包含大麻二酚(CBD) 和四氢大麻酚(THC)两种大麻素类，其中存在的THC的重量大于CBD 的重量。
优选的实施方案包括，但不限于，其中预定的CBD对THC的重 量比在1∶99和1∶1.5之间的制剂、其中预定的CBD对THC的重量比 约为1∶39的制剂和其中预定的CBD对THC的重量比约为1∶2的制 剂。
(C)按照本发明的第一方面的液体制剂包含四氢次大麻酚(THCV) 和/或次大麻二酚(CBDV)两种大麻素类，其中存在的CBDV的重量大 于THCV的重量。
优选的实施方案包括，但不限于，进一步含有CBD和/或THC的 制剂、其中CBDV对THCV的重量比大于1.5∶1的制剂、其中CBDV 对THCV的重量比在约99∶1到约1.5∶1范围内，优选在约20∶1到2.5∶ 1范围内的制剂、其中CBDV对THCV的重量比为约9∶1的制剂、其 中CBDV对THCV的重量比在约5∶1到3∶1之间的制剂、基本上不含 发现于大麻(Cannabis sp)中的其它大麻素类(CBDV和THCV除外)的制 剂，以及其中CBDV和THCV构成来自大麻属植物的提取物的一部分 的制剂，所述提取物含有所述植物中所有天然存在的大麻素类。
(D)按照本发明的第一方面的液体药物制剂包含四氢次大麻酚 (THCV)和四氢大麻酚(THC)两种大麻素类，其中THCV对THC的重 量比在99∶1和1.5∶1之间。
优选的实施方案包括，但不限于，其中THCV对THC的重量比 为约17∶3的制剂、也含有CBD和/或CBDV的重量小于THCV的重 量的制剂、其中THCV和THC构成来自大麻属植物的提取物的一部 分的制剂，所述提取物含有所述植物中所有天然存在的大麻素类。
在本发明的优选实施方案中，所述制剂包含全部大麻属植物中的 一种或多种品种的提取物，特别是大麻(Cannabis sativa)，印度大麻或 遗传杂交的、自交或其杂种的植物。任何特殊的大麻品种中准确的大 麻素类的含量可用本领域技术人员所熟知的方法如TLC或HPLC定性 和定量测量。因此，人们可选择大麻品种以便从中制备将产生CBD对 THC或CBDV对THCV或THCV对THC的所需比率的提取物。或者， 来自两种或多种不同品种的提取物可混合或掺合在一起，以便产生具 有优选的大麻素类比率的材料，以配制为药物制剂。
通过种植特殊的大麻(chemovars of cannabis)制备含有满意的 THC-和CBD-比率的药物是有可能的。可通过本领域技术人员所熟悉 的多种植物种植技术种植这些chemovars(通过产生的大麻素类鉴别， 而不是通过该植物的形态特征鉴别该植物)。通过剪接插条(cuttings)生 产材料繁殖所述植物确保基因型被固定并且确保每次收获的植物含有 基本上相同比率的大麻素类。
另外，发现通过园艺选择的方法，也可获得其它chemovars，表示 为其大麻素类含量主要为四氢次大麻酚(THCV)或次大麻二酚 (CBDV)。
园艺上，种植由剪接插条产生THC、THCV、CBD和CBDV作为 主要大麻素类的chemovars是很方便的。这确保在每次收获中基因型 相同并且定性制剂(每种大麻素类的生物量的比例)相同。由这些 chemovars，通过类似的提取方法可制备提取物。制备初级提取物的便 利的方法包括浸渍、渗滤、用诸如C1到C5的醇(乙醇)、诺氟烷 (HFA134a)、HFA227和在压力下的液态二氧化碳的溶剂提取。所述初 级提取物可进一步通过超临界或次临界的提取、蒸发或层析进行纯 化。当使用以上列出的那些溶剂时，得到的提取物含有非特异性的脂 溶性物质或“沉淀物”。可通过各种方法除去，包括急剧冷却到-20℃， 随后过滤除去蜡状的沉淀、用液态二氧化碳提取并蒸馏。优选的植物 栽培和提取物的制备方法显示在实施例中。得到的提取物适宜掺入到 药物制剂中。
有许多可有效地用大麻治疗的医疗病症，包括例如癌症疼痛、偏 头痛、刺激食欲、多发性硬化、脊髓损伤、外周神经病、其它神经性 疼痛、类风湿性关节炎、炎性肠道疾病、精神病(精神分裂症)、癫痫 症和运动障碍、休克、头部损伤、食欲抑制。在所给出的制剂中不同 的大麻素类的比例决定了最适治疗的有特殊的疗效的病症(如表2中概 述和所附的权利要求书中所述)。
详细地说，本发明打算包括，但不限于，以下实施方案：
(A)按照本发明的第一方面的药物制剂，所述制剂含有预定重量 比的大麻二酚(CBD)和四氢大麻酚(THC)，或大麻素类四氢次大麻酚 (THCV)和次大麻二酚(CBDV)，用于治疗炎性疾病或任何在其发病过 程中氧化应激起作用的疾病或病症。
(B)按照本发明的第一方面的药物制剂，所述制剂包含大麻二酚 (CBD)和四氢大麻酚(THC)两种大麻素类并且基本不含除了CBD和 THC之外的大麻素类，或所述制剂包含大麻素类四氢次大麻酚(THCV) 和次大麻二酚(CBDV)，其中CBDV对THCV的重量比从约5∶1到3∶ 1，用于治疗类风湿性关节炎，或炎性肠道疾病或Crohn’s疾病。
(C)按照本发明的第一方面的药物制剂，所述制剂包含大麻二酚 (CBD)和四氢大麻酚(THC)两种大麻素类，其中CBD对THC的重量比 在约5∶1到约3∶1的范围内，或所述制剂包含大麻素类四氢次大麻酚 (THCV)和次大麻二酚(CBDV)，其中CBDV对THCV的重量比约为9∶ 1，用于治疗精神性疾病、癫痫症、运动障碍、休克、头部损伤或需要 抑制食欲的疾病。
(D)按照本发明的第一方面的药物制剂，所述制剂包含几乎等量 的CBD和THC或THCV和CBDV，用于治疗多发性硬化、脊髓损伤、 外周神经病或其它神经性疼痛。
(E)按照本发明的第一方面的药物制剂，所述制剂含有的THC对 CBD或THCV对CBDV的重量比为从约39∶1到约99∶1，用于治疗癌 症疼痛或偏头痛或用于刺激食欲。具体的实施方案包括在所述制剂中 采用重量比约为39∶1的THC对CBD或THCV对CBDV，在所述制 剂中采用的THC和CBD和/或THCV和CBDV组成来自大麻属植物 的提取物的一部分，该提取物含有在所述植物中的所有天然存在的大 麻素类。
本发明还进一步涉及按照本发明的液体制剂的形式，其中所述制 剂，或至少其亲脂性药物成分被包装在涂色的容器中，以避免紫外光 和光谱的蓝色区域的光，优选波长在200-500nm范围的光。在一个优 选的实施方案中，所述容器涂成琥珀色。
另一方面，本发明也涉及按照本发明的液体制剂的形式，其中所 述制剂，或至少其亲脂性药物成分是在惰性气氛下被包装。在优选的 实施方案中，所述制剂，或至少其亲脂性药物成分在氮气下被包装。
含有一种或多种大麻素类的按照本发明的制剂优选包装在玻璃小 瓶中。该小瓶最好在惰性气氛如氮气下填充至稍微超压，以防止/减缓 大麻素类的氧化分解，并以阻止光进入，从而防止大麻素类的光化学 降解的形式进行包装。采用琥珀色小瓶可最有效地达到这一目的，因 为本申请人已经确定紫外光和蓝色光谱的光，特别是在200-500nm波 长范围内的光会引起光降解。由于大麻素类对氧化分解和光化学降解 敏感，在惰性气氛中包装和/或包装在涂色容器(如琥珀色容器)中以避 免紫外光和光谱的蓝色区域的光，优选波长在200-500nm范围的光的 优点同样适用于包含一种或多种大麻素类的亲脂性药物的包装，所述 大麻素类并未配制成按照本发明的制剂(例如含大麻素类的植物药物 质，如随后的实施例所述)。
适用于给予大麻提取物和大麻素类的制剂原则也适用于其它药 物如生物碱、碱和酸。必要的条件是如果所述药物不溶于唾液，则应 通过加入缓冲盐溶液和调节pH使其增溶和/或使其成为适宜的未离子 化的(unionised)形式。
其它可包含在本发明的普通制剂中的亲脂性药物可包括，但不限 于，吗啡、哌鱼替啶、可待因、美沙酮、海洛因、芬太奴、阿芬太尼、 丁丙诺啡、羟基安定、亲脂性止痛剂和成瘾性药物。术语“成瘾性药 物”包括可使病人产生依赖性的化合物，特别是可作为止痛剂的化合 物，通常为阿片剂或其合成衍生物。
因此，按照本发明的另一方面，提供一种液体制剂，用于经粘膜 表面给予至少一种亲脂性药物，该制剂包含：一种选自以下的亲脂性 药物：吗啡、哌鱼替啶、可待因、美沙酮、海洛因、芬太奴、阿芬太 尼、羟基安定、丁丙诺啡、亲脂性止痛剂和成瘾性药物，溶剂和助溶 剂，其中存在于所述制剂中的溶剂和助溶剂的总量大于制剂的55％ wt/wt，所述制剂不含自乳化剂和/或含氟抛射剂。
仅仅通过实施例的方式，用以下实验数据和示范性制剂，加上附 图进一步阐述本发明，其中：
图1a和1b显示在将高CBD(图1a)和高THC(图1b)的大麻提取物 给予病人后大麻素类CBD、THC和11-羟基THC的平均血浆浓度。
图2显示在将含有1∶1比率的THC∶CBD的大麻提取物给予病人 后大麻素类CBD、THC和11-羟基THC的平均血浆浓度。
图3显示相对于丙二醇/乙醇液体喷雾剂中的丙二醇％的气雾剂雾 流覆盖面积。
图4显示粘性与丙二醇/乙醇液体喷雾剂中的丙二醇含量的函数 的关系。
图5显示气相对于丙二醇/乙醇液体喷雾剂的粘性的气雾剂雾流 覆盖面积。
图6和6a显示从贮存的、暴露于光的THC的溶液样品在活性炭 处理前和后的HPLC分析结果。
图7和7a显示从贮存的、暴露于光的CBD的溶液样品在活性炭 处理前和后的HPLC分析结果。
泵作用的喷雾剂的开发
最初本申请人着眼于采用舌下滴剂(BDS溶解于甘油/丙二醇和乙 醇的混合物中)THC 5mg/ml、CBD 5mg/ml和THC/CBD 5mg/ml加5 mg/ml时，患者对大麻素类的吸收。
结果显示于下表3中：
表3
最初吸收20分钟 T最长约2小时 C最大6ng/ml THC，2ng/ml CBD 在给予约20mg的每种大麻素类之后AUC 0-12大约16ng.h/ml THC， 8ng.h/ml CBD 在6小时后血浆水平大约为1ng/ml THC和0.5ng/ml CBD
11羟基四氢大麻酚对THC(AUC 0-12)的比率大约为1.9，表明已 经发生了大量的口服摄取。
当转移到泵作用舌下喷雾剂(随后的问题是用hydroflurocabon抛 射剂系统增溶大麻素类)时，本申请人获得显示于表4的结果。该溶剂 系统含有50∶50的乙醇∶丙二醇(v/v比)及分别含有THC 25mg/ml；CBD 50mg/ml和THC/CBD 25mg/ml加50mg/ml。
表4
最初吸收60分钟 T最长约3小时 C最大6ng/mlTHC，8ng/ml CBD 在给予约21mg THC和35mg CBD之后AUC 0-12大约16ng.h/ml THC，22ng.h/ml CBD 在6小时后血浆水平大约为1ng/ml THC和1ng/ml CBD
11羟基四氢大麻酚对THC(AUC 0-12)的比率大约为1.6。每种大 麻素类的分布类似而与制剂无关(THC、CBD、THC加CBD)。
在考虑不同的剂量之后，虽然吸收的程度可与滴剂相比，但吸收 速度比较缓慢并且代谢的比例降低。
尽管吸收的速度较慢，所述泵喷雾机制和乙醇/丙二醇载体系统提 供了在灵活的剂量形式中精确地给予足够的大麻素类并有效地降低代 谢的机会。
获得的数据示于图1a、1b和2中，所述图显示了与参照表3和4 一致的制剂的平均血浆浓度。
大麻素类的有效传递可用含有乙醇和丙二醇的溶媒来实现，通过 显示于图1a、1b和2中的血浆水平进行阐述。在图1a和1b中分别显 示含有高THC和高CBD的制剂。类似地，确定比率的制剂(THC∶CBD 1∶1)阐述于图2中。
值得注意地是，发现所述乙醇/丙二醇系统仅与泵作用喷雾剂在相 当狭窄的限度内工作。
将导致泵喷雾剂开发的发现阐述如下，如在以下制剂1-4中举例 说明：
实施例1-粒度的重要性
申请人观察到他们正在开发的抛射剂气雾剂有“弹回”的缺点， 这似乎是传递速度和粒度的作用。
他们确定与抛射剂驱动系统相反，泵喷雾可传递可控制粒度的气 雾剂雾流，以便产生在20和40微米之间的粒度(从而药物击中舌下/ 口腔粘膜的量和可吸收的大麻素类的量最大)。为了产生适宜粒度的微 粒需要小心地控制所述制剂的粘度。如果所述制剂太粘稠，则防碍小 滴形成，形成喷射并堵塞阀门；如果所述制剂不够粘稠，则它们过量 雾化，形成广泛的覆盖面的气雾并且该气雾剂不再单独地直接到舌下/ 口腔粘膜上。这可能导致所述制剂集中并且一些制剂被吞下。在这两 种情况下，结果都是令人不满意的。
事实上，证明对优选的溶剂乙醇和优选的助溶剂丙二醇而言，如 下证实工作范围是相当狭窄的：
研究了乙醇/丙二醇的不同组合的粘度并且用vp7/100阀门(Valois) 进行比较喷雾。将结果制成表格列于下表5中：
表5
丙二醇/乙醇 相对粘度(运行时间以秒计) 进行喷雾 100/0 442 形成喷射 80/20 160 形成喷射 60/40 80 一些喷射 50/50 62 好的气雾剂雾流 40/60 44 好的气雾剂雾流 20/80 26 好的气雾剂雾流 0/100 16 好的气雾剂雾流
从所述数据看，显示在大于60/40时将不接受额外的丙二醇。当 一并阅读US 3,560,625时，这些结果可能已经暗示所述溶剂/助溶剂组 合是不好的。可是，申请人发现当存在给定的制剂时患者可忍受该预 定的乙醇的水平。
通过将不同的制剂喷雾到0.5cm的标准距离的暴露的纸上对粘度 对气雾剂雾流的作用进行量化。该距离代表在正常使用时泵作用喷雾 单位的喷嘴和舌下腔之间的通常距离。所述纸为影印纸并且所述雾流 的图象被剪切下来并称重以便得到相对的覆盖面积。然后通过用该值 除以每cm2影印纸的重量(通过称量已知面积的纸的重量进行确定)将 该相对值转换为真实的覆盖面积。在下表6中给出结果。
丙二醇/乙醇 气雾流的覆盖面积 100/0 3.5cm2 80/20 14.2cm2 60/40 17.9cm2 50/50 20.7cm2 40/60 29.4cm2 20/80 54.4cm2 0/100 93.8cm2
所述数据显示于图3中。
另外给出混合物中乙醇和丙二醇含量与粘度的关系图(图4)以及 作为粘度的函数的雾流覆盖面积的图(图5)。
所述图强调很大的和不受欢迎的性质变化，该变化出现在60/40 至40/60的乙醇/丙二醇重量比的狭窄范围外，并且更特别是在55/45 到45/55范围内，最优选重量比为约50/50。
为确保在狭窄的范围内使用所述组合，其它因素也是重要的。增 加乙醇水平超过60％体积将引起刺激并且丙二醇水平达到60％和低至 55％时，在BDS情况下存在于BDS中的非极性衍生物在延长的环境 贮存期间开始沉淀出来。
预期其它可使用的助溶剂具有类似的限制。助溶剂越粘稠，产生 形成喷雾的雾流的问题就越大，并且极性越大，沉淀增加的危险就越 大。
可是，因为乙醇/丙二醇的组合能够溶解最多可达50mg/ml(即治 疗上所需要的大麻素类水平)，是非刺激性的、药学上可接受的，且丙 二醇也发挥渗透促进剂的作用使大麻素类的生物利用度最大化，因此 是特别有利的。
当用Malvern Marsteriser试验时，所述的优选组合物的平均粒度 已经显示为33μm。所述雾滴比5μm大得多，因此减少吸入气雾剂的 危险。
实施例2-大麻素类存在于BDS中时水的作用
如描述于下表7的研究所述，在所述制剂中水的存在超过5％则 显示将引起BDS的沉淀：
表7-在乙醇/丙二醇(50/50)中连续加入水以配制5ml 25mg/ml THC和5ml 25mg/ml CBD
加入水的 体积ml 终体积ml 最终溶剂比％体积， 水/丙二醇/乙醇 观察 0 5 0/50/50 溶液 0.05 5.05 1/49.5/49.5 Ppt形成但是混合时再溶解 0.21 5.26 5/47.5/47.5 Ppt形成。在混合后溶液仍浑浊
当然根据所述观察优选使用无水乙醇。
按照本发明的示例性制剂(非限制)如下：
组合物1(普通)
成分 每单位(1ml)的量 作用 活性成分 THC(BDS) CBD(BDS) 25-50mg/ml 25-50mg/ml 活性 赋形剂 丙二醇薄荷油 乙醇(无水) 0.5ml/ml 0.0005ml/ml 适量至1ml 助溶剂 调味剂 溶剂
组合物2(高THC)
成分 每单位(1ml)的量 作用 活性成分 THC(BDS) 25mg/ml 活性 赋形剂 丙二醇薄荷油 乙醇(无水) 0.5ml/ml 0.0005ml/ml 适量至1ml 助溶剂 调味剂 溶剂
组合物3(高CBD)
成分 每单位(1ml)的量 作用 活性成分 CBD(BDS) 25mg/ml 活性 赋形剂 丙二醇薄荷油 乙醇(无水) 0.5ml/ml 0.0005ml/ml 适量至1ml 助溶剂 调味剂 溶剂
组合物4(THC/CBD基本上为1∶1)
成分 每单位(1ml)的量 作用 活性成分 THC(BDS) CBD(BDS) 25mg/ml 25mg/ml 活性 活性 赋形剂 丙二醇薄荷油 乙醇(无水) 0.5ml/ml 0.0005ml/ml 适量至1ml 助溶剂 调味剂 溶剂
实施例3
以下实施例阐述本申请的口腔粘膜液体喷雾剂的运用和与舌下 给药相比较通过口腔吸收所产生的血液水平。
以下适宜于口腔给药的液体制剂含有自乳化剂，因此不能包含在 本发明的范围内。然而，通过这些组合物的用途阐述的通则同样适用 于传递按照本发明的制剂。通过溶解(在不超过50℃的温度下)以下成 分(定量的详细资料按照重量份表示)制备溶液：
A B C D E
甘油单硬脂酸酯(自乳化剂) 2 - 2 - 2
甘油单油酸酯(自乳化剂) - 2 - 2 -
Cremophor RH40 20 30 30 20 30
CBME-G1给出THC 5 10 - - -
CBME-G5给出CBD - - 5 10 -
CBME-G1和G5给出THC&CBD - - - - 各10
α-生育酚 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1
抗坏血酸棕榈酸酯 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1
乙醇BP以得到 100 100 100 100 100
基于大麻的药物提取物(CBME)为大麻提取物，其可通过例如用液 态二氧化碳浸渍，通过急剧冷却浓缩的乙醇溶液到-20℃移出沉淀物并 通过过滤或离心移出沉淀的惰性植物成分制备。
将通过混合这些成分形成的产物到以6ml的量分装玻璃小瓶中并 用泵作用喷雾器关闭。在使用时，通过分散(break-up)按钮或常规的设 计释放剂量。适用于该目的的专利装置(Proprietary devices)为Valois生 产的VP7型，但是可从其它生产商处获得类似的装置。所述小瓶可装 入二级包装(secondary packaging)中以便允许直接喷雾到口腔粘膜的特 殊区域。或者，可使用具有伸出部分的专利按钮以便直接喷雾到口腔 粘膜的首选区域。
每1ml产品含50-100mgΔ9-四氢大麻酚(THC)和/或大麻二酚 (CBD)。每按一次泵传递一次喷雾，可直接到达口腔粘膜。在上述制 剂中使用已知浓度的大麻素类。CBME-G1为来自THC高产率的大麻 株的提取物，而CBME-G5为来自CBD高产率的大麻品种的提取物。 本领域的技术人员明白纯化的大麻素类和含有大麻素类的提取物可通 过定量调节如上所述进行配制。
虽然CBME的乙醇溶液可单独用作喷雾剂，但是由于作为溶剂的 高浓度纯乙醇的强刺激性(aggressive nature)限制了可传递的大麻素类 的量。这限制了可在粘膜上使用而不使患者产生不舒服的感觉的量。 当一组患者接受在上述类型溶液中的THC或CBD，对舌下或口腔粘 膜直接喷雾时，患者都报告舌下应用具有刺激感，但是当同样的溶液 喷雾到口腔粘膜时感觉轻微或无不舒服感。将少量的该类型的制剂喷 雾到口腔粘膜上为明显地刺激吞咽反射。这为制剂与口腔表面接触提 供了更多的停留时间。
将制剂给予一组患者13人，使他们通过舌下片剂、舌下泵作用喷 雾或口腔途径接受4mg THC、4mg CBD或安慰剂(仅含溶媒)。
测定在给药后抽取的血液样品中大麻素类的吸收[在吸收曲线下 的面积(AUC)]和初级代谢物。在下表8中给出了标准化的平均值。
表8
这些结果显示舌下和口腔(口咽)途径吸收的大麻素类总量是类似 的，但是在口咽(口腔)给药后测到的11-羟基(11-OH)代谢物的量有实质 性降低(大约25％)。这个发现与减少口腔制剂的吞因(和随后减少肝) 代谢不矛盾。
众所周知THC的11-羟基代谢物(11-OH THC)可能比母体化合物 具有对神经的更显著的作用。因此在给药期间尽量减少该代谢物的量 是符合需要的，并且这可通过使用本申请的制剂和方法减少口腔和舌 下吞咽的量来实现。所述泵作用喷雾剂显然提供了减少吞咽和由口咽 水平下的肠道吸收产生的代谢物的量的简单方法。
实施例4-药用大麻属的种植
象克隆一样从发芽的种子，在25±1.5℃的温度下、在玻璃杯下种 植植物3周，24小时日光照射；保持植物处于生长状态。通过暴露12 小时的昼长(day length)8-9周导致开花。
使用非人造的杀虫剂、除草剂、农药或薰剂。有机地种植植物， 用生物学控制昆虫有害物。
在生产中从种子种植到干燥药用大麻的基本步骤概述如下：
种子种植(accession)
↓
在G-Pharm(UK)种子发芽
↓
对大麻素类含量和活力(vigour)的选择
↓
母体植物
↓
剪接插条生根
在泥炭土柱上25℃，24小时昼长14-21天
↓
将生根的剪接插条物盆栽在装有预定堆肥的5升盆中
↓
安置克隆植物幼苗
3周，24小时昼长，25℃
↓
在3周末去掉较低的分枝
常用于生产新一代的剪接插条物
↓
诱导开花
植物再经12小时昼长以便诱导开花
↓
花形成并成熟
在25℃下8-9周
↓
收获
90％的花和叶开始衰败
↓
干燥
在避光条件下
↓
药用大麻
实施例5-测定植物和提取物中大麻素类的含量
通过TLC鉴别
a)原料和方法
设备采用能够传递精确地控制的溶液体积的设备即1μl毛细管或微
升注射器；
带盖子的TLC展开槽；
热鼓风机；
硅胶G薄层层析(TCL)板(SIL N-HR/UV254)，200um厚，在聚酯 载体上含有荧光指示剂；
显色剂(visualisation reagent)的浸渍槽；
流动相80％石油醚60∶80/20％乙醚；
显色剂0.1％w/v坚牢蓝B水溶液(100mg在100ml去离子水中)。可 选择的方法为在UV254和365nm下扫描。
b)样品制备
i)草药原料
称取大约200mg精细磨碎的、干燥的大麻放入10ml测定体积的烧 瓶中。用甲醇∶氯仿(9∶1)的提取溶剂补足体积。
超声提取15分钟。轻轻倾出上清液并直接用于层析。
ii)草药提取物
称取约50mg提取物，放入25ml测定体积的烧瓶中。用甲醇补足体 积。剧烈振摇至溶解，然后直接用于层析。
c)标准品
0.1mg/ml δ-9-THC的甲醇溶液
0.1mg/ml CBD的甲醇溶液。
在使用期间将该标准溶液在-20℃以下冷冻贮存并且在最初的制 备后可使用长达12个月。
d)试验溶液和方法
用最小10mm应用到各分开的点。
i)5μl草药提取物或1μl草药的提取物溶液是适当的
ii)10μl 0.1mg/ml δ-9-THC的甲醇标准溶液
iii)10μl 0.1mg/ml CBD的甲醇标准溶液
洗脱8cm距离的TLC板，然后移走该板。使溶剂从该板上蒸发， 然后第二次重复洗脱(双展开)。
将所述板简单地浸入坚牢蓝B试剂中直到大麻素类的特征颜色/橙 色开始出现。移走该板并在黑暗的环境条件下干燥。
通过数码扫描仪(优选选项)复制该图象或通过在描图纸上注明斑 点的位置和颜色永久地记录该结果。
通过HPLC分析THC、THCA、CBD、CBDA和CBN
a)材料和方法
设备：带二极管阵列检测器和自动进样器的HP 1100 HPLC。按照内部 的标准操作程序装配和操作该设备(SOPlab037)
HPLC柱：Discovery C8 5μm，15x0.46cm加Kingsorb ODS2预柱5 μm 3x0.46cm。
流动相：乙腈(acetonotrile)：甲醇∶0.25％乙酸水溶液(16∶7∶6体积比)
柱操作温度：25℃
流速：1.0ml/分钟
注射体积：10μl
运行时间：25分钟
检测：中性和酸性大麻素类220nm(带宽16nm)
参比波长：400nm./带宽16nm
狭缝：4nm
在310nm处(带宽16nm)常规地监测酸性大麻素类，仅仅为了 定性证实和鉴别的目的。
数据俘获：带A7.01版本软件的HP Chemistation
b)样品制备
将40mg基于大麻的药物提取物溶解于25ml的甲醇中并用甲醇 稀释该溶液至1-10。
该稀释液用于层析。
用玻璃吸液管吸取0.5ml填充溶液作为样品，其包含在泵作用的 舌下喷雾单位中。将该溶液稀释到25ml烧瓶中并用甲醇补足到 刻度。
用800μl甲醇稀释200μl的所述溶液。
通过取100mg样品并用5或10ml甲醇/氯仿(9∶1w/v)处理制备草 药或树脂样品。在一个密封的试管中超声处理该分散液10分钟， 让其冷却，将等份样品离心并在层析前用甲醇进行适当的稀释。
c)标准
该方法采用外标法。制备THC、CBD和CBN的贮备标准液在甲 醇或乙醇中的稀释液，得到大致精确的0.1mg/ml的最终的工作标准 液。将该工作标准液贮存在-20℃并且在最初的制备后可使用长达12 个月。
在注射任何测试溶液之前按一式三份注射每种标准液。在处理测 试溶液期间以适宜的间隔重复注射标准液。在缺少可靠的CBDA和 THCA标准品时，分别采用CBD和THC标准响应因素分析这些化合 物。
已经确定洗脱顺序为CBD、CBDA、CBN、THC和THCA。采用 所述方法可检测其它大麻素类并可根据需要鉴别和测定其它大麻素 类。
d)测试溶液
用甲醇制备稀释的测试溶液并且其应含有在线性工作范围0.02- 0.2mg/ml内的分析物。
e)层析方法可接受的标准
以下可接受的标准适用于每种程序的结果，因为发现这些标准会 引起所有的分析物的充分的拆分(包括两种最接近洗脱的分析物CBD 和CBDN)。
i)每种分析物的保留时间窗口
CBD 5.4-5.9分钟
CBN 7.9-8.7分钟
THC 9.6-10.6分钟
ii)峰型(按照BP方法的对称因素)
CBD＜1.30
CBN＜1.25
THC＜1.35
iii)已经开发了许多标准方法的修改方法，以处理含有较后洗脱 的杂质峰的那些样品如方法CBD2A延长洗脱时间到50分 钟。所有溶液在转移到自动进样器的小瓶之前应通过离心使 其澄清，所述小瓶用特氟纶面的隔膜封条和盖密封。
iv)对于层析方法的质量，预柱是重要的，并且当反压上升到71 巴以上和/或关于保留时间和拆分可接受的标准落在它们的 指定的限度外时应该更换预柱。
f)数据处理
大麻素类可细分为中性的和酸性的-可用DAD双波长模式进行 定性鉴别。酸性大麻素类在220-310nm区域有强吸收。中性大麻素类 仅在220nm区域有强吸收。
通常仅采用在220nm处记录的数据进行定量分析。
也可采用DAD进行每个峰的UV光谱扫描，然后可贮存在光谱 库中并用于鉴别。
在Hewlett Packard Chemstation上利用批处理软件进行定量的数 据处理。
g)样品层析图
THC和CBD草药提取物的HPLC样品层析图在随后的附图中提 供。
实施例6-草药提取物的制备
以下给出显示从高THC和高CBD的chemovars生产提取物的过 程的流程图：
药用大麻(高THC或高CBD)
↓
切成主要为2-3mm的大小
↓
在100到150℃加热足够的时间以便使大麻素类的酸形式脱羧，
以产生中性的大麻素类
↓
用指定体积的的液体二氧化碳提取6到8小时
↓
通过减压除去二氧化碳得到粗提物
↓
“冬化处理”-将粗提物溶解于乙醇Ph.Eur.中，随后急剧冷却该 溶液(-20℃/48小时)至沉淀出不需要的蜡状物
↓
通过冷过滤除去不需要的蜡状物
↓
通过在减压下的薄膜蒸发从滤液中除去乙醇
所得到的提取物被称为基于大麻的医药提取物，并且按照US Food and Drug Administration Guidance for Industry Botanical Drug Products也分类为植物药物质。
实施例7
在平均温度21+2℃、RH 50-60％下，于玻璃瓶中种植高THC大 麻。在黑暗中、室温和40-50％的RH下收获和干燥草药。当干燥时， 从茎上剥离叶和头状花序并且该干燥的生物量被称为“药用大麻”。
将药用大麻粉碎为粗粉(可通过3mm目筛的颗粒)并装入超临界 流体提取器的室中。装入的密度为0.3并且在35℃的温度下使在600 巴压力下的液态二氧化碳通过该物质。进行超临界提取4小时并通过 逐步减压将提取物回收到收集容器中。进一步纯化所产生的棕绿色油 状的树脂状提取物。当溶解于乙醇BP(2份)中并使其经历-20℃的温度 24小时时，沉淀物(含脂溶性的、蜡状物质)在溶液中出现并通过过滤 除去。在低压下于旋转蒸发器中除去溶剂。所产生的提取物为软浸膏， 其含有大约60％的THC和大约6％的其它大麻素类，其中大麻二酚占 1-2％而其余为次要的大麻素类包括大麻酚。基于干燥的药用大麻的重 量计，定量收率为9％w/w。
对高CBD的chemovar进行类似的处理，得到含有大约60％的 CBD和最高可达4％的四氢大麻酚，其它大麻素类的总量在6％以内的 提取物。采用上述通用方法用THCV和CBDV chemovar制备提取物。
本领域的技术人员将理解在超临界和次临界的条件下可使用温 度和压力的其它组合(例如在+10℃到35℃和60-600巴范围内)制备提 取物。
实施例8-光对THC、CBD或THCV的醇溶液的稳定性的影响
以下实施例包括支持在琥珀色玻璃瓶中液体剂型的包装的数 据，该包装可提供一些保护防止光对大麻素类的降解影响。
对于含有大麻活性成分的溶液的最低的可能的贮存温度的选择 也提供了进一步的证明。
背景和概述：
已知光为许多物质，包括大麻素类的降解反应的引发剂。这一知 识已经被用于选择液体制剂的包装，在药物展示中广泛地使用琥珀色 玻璃瓶作为避光屏障。
建立实验以便跟踪白光对THC、CBD或THCV的甲醇溶液稳定 性的影响。根据不同波长的光对化合物的稳定性可具有不同影响(viz. 维A酸仅在红光或黑暗中稳定)的初步知识，将样品包装在有色的醋酸 纤维素膜中或避光的箔中。并行(concurrent)试验采用活性炭处理 CBME以便研究除去植物色素对降解过程的影响。
材料和方法
大麻素类：在AR甲醇中制备1mg/ml的CBME溶液。使CBME 的甲醇溶液(100mg/ml)通过活性炭柱(Biotage Flash 12AC 7.5cm Cartridges，b/no.273012S)，然后稀释到1mg/ml。将溶液贮存在苏打玻 璃瓶中，紧紧地拧紧该玻璃瓶的盖子并在上面用缠绕膜密封。将管子 包装在以下有色的醋酸纤维素膜中：
红、黄、绿和蓝绿色。
也将溶液填充到琥珀色玻璃U-save瓶中；用隔膜密封并密封上 面。将每个系列样品的一支管子紧紧地包装在铝箔中以便达到完全避 光的目的。这作为“黑暗”控制以便监测环境温度对降解行为的作用。 将所有上述管子放置在具有2x 40瓦特白炽光(white Osram)荧光管的 盒子中。在该盒子的壁上衬以能够产生反射的箔并且内部的温度以频 繁的间隔进行监控。
将每个系列的另一支管子贮存在-20℃以下，作为一种假的参比样 品；另外，将一支管子直接暴露在光下而没有保护。在开始研究后以 直到长达112天的间隔收回样品进行层析分析。该研究被称为 AS01201/AX282。
抽取测试溶液的样品，并按照适于用PLC和TLC分析的要求进行 稀释。按照TM GE.004.V1(SOPam058)进行HPLC。在硅胶(MN SilG/UV)板上按照TM GE.002.V1(SOPam056)进行TLC。
为了分离降解产品，利用其它TLC系统：
a)SilG/UV，固定相，己烷/丙酮8/2v/v流动相
b)RPC18固定相，乙腈/甲醇/0.25％乙酸水溶液16/7/6体积比 用坚牢蓝B盐作为大麻素类显色剂。
结果和讨论：
HPLC定量分析：
将取自贮存的、暴露在光下的溶液的样品的HPLC分析结果绘 图，见图6、6a(活性炭处理前和后的THC)和7、7a(活性炭处理前和 后的CBD)。
从图6和6a可观察到在所有溶液中THC的稳定性皆有显著改 善，除了那些在黑暗中贮存的(在环境温度下)和在-20℃贮存的样品(因 此不是在光化学应力下)之外。当未处理的提取物与活性炭处理的提取 物相比时，就是贮存在琥珀色的玻璃瓶中也显示了改善。可是这可能 在活性炭处理的提取物的热稳定性的改善中得到反映。
图7和7a显示对含有CBD的提取物存在类似的数据，从中可观 察到该大麻素类显然比THC对光的影响更敏感。在没有活性炭的情况 下，所有暴露，除了在琥珀色玻璃瓶中之外，避光(箔)和在-20℃下贮 存，在40天前皆降解到不可检测的CBD水平。在活性炭处理后，在 42和62天之间的图得到改善。保护CBD的琥珀色玻璃瓶显示一种改 善，从没有活性炭脱色在112天的38％残余化合物到活性炭处理后在 同一时间的大约64％的残余化合物。也显示了在活性炭处理后的避光 溶液中CBD稳定性的改善。这可能仅仅反映减少了热氧化降解，或在 CBME和溶液制备期间由光(和/或空气)引发的残余的光化学降解。
薄层层析定性分析：
用薄层层析法评估光降解的溶液，采用现有的正相系统(即硅胶固 定相和己烷/乙醚作为流动相)和两种另外的系统，能够溶解在降解过程 中形成的更大极性的或聚合的产物。
因此，采用己烷/乙醚系统的层析显示对THC而言经过112天， 所有颜色的滤光器中THC和次要的CBD斑点的强度降低(未显示数 据)。同时，流动或接近原点的坚牢蓝B着色物的强度增加。箔保护的 溶液显示未有这些影响。
结论和建议：
已知大麻素类由于许多天然的挑战，即光、热、氧、酶等而降解。 在没有经过广泛的清洁程序的草药植物原料的提取中，很可能这些过 程中的一些可能还能够继续。有疑问的是，也可能从植物组织中存在 的任何保护剂中移出大麻素类，这很可能使提取物经历特殊的降解途 径。
包装在琥珀色玻璃小瓶中，在琥珀色的滤光器中进行制剂生产， 并且将植物提取物和药物制剂贮存在尽可能低并兼备生产和分配要求 及患者的依从性的温度下，消除或至少降低光对大麻素类降解的影 响。这些作用极大地改善了植物提取物和终产品的贮存稳定性。
有趣的是，注意到当经历光化学应力时CBD似乎比THC更不稳 定。这与相对的热氧化的稳定性的发现相反，其中THC更不稳定。这 似乎表明虽然聚合的降解产物可能是光化学和热氧化降解的共同结 果，对于这两种过程而言，确切的详细机制是不同的。
可得出如下结论：
1)选择琥珀色玻璃瓶包装药剂溶液提供了改善的稳定性，而且可 通过另外的避光措施进行次要的改善。
2)干燥过程和随后的提取及大麻提取物的配制应该在低亮度、琥 珀色过滤光下进行。
3)应该考虑将提取物覆盖在惰性气氛(如氮气)下。
4)在冬化后通过简单的活性炭过滤清洁大麻提取物，对产品的保 存期可得到根本的改善。