一种山豆根总生物碱软胶囊及其制备方法和用途

摘要

本发明公开了一种山豆根总生物碱软胶囊制剂，该软胶囊剂由内容物和囊壳两部分构成，其中内容物是由山豆根总生物碱、分散介质、稳定剂组成；囊壳是由明胶、甘油、水、防腐剂组成。本发明还公开了该软胶囊的制备方法。本发明生产工艺简单，生产的山豆根总生物碱软胶囊质量可控，稳定性好，服用方便，在抗肿瘤方面有很好的药用价值。

权利要求

1.一种具有抗肿瘤作用的山豆根总生物碱软胶囊，由内容物和囊壳两部分构成，其特征在于：所述的内容物的组成及其重量比例为：山豆根总生物碱∶分散介质∶稳定剂＝

0.8～1.2∶0.8～3.2∶0～0.2；所述稳定剂为蜂蜡；囊壳的组成及其重量比例为：明胶∶甘油∶水∶防腐剂＝0.8～1.2∶0.2～0.5∶0.8～1.2∶0～0.005，上述山豆根总生物碱按以下方法制备：提取：山豆根药材粉碎，用水或10％～40％乙醇提取；

浓缩：提取后减压浓缩，蒸去水或乙醇，得相对密度为1.10～1.15的浓缩液；

酸化：浓缩液用稀酸酸化至pH3～4之间，在4000r/min转速下离心10min，得上清液；

除杂：上清液经树脂柱吸附并用水或10％～50％乙醇淋洗除去杂质；

碱化：用稀碱碱化树脂柱；

洗脱：用10％～50％乙醇洗脱吸附于树脂柱上的山豆根总生物碱；

干燥：洗脱液经减压浓缩、干燥，得含山豆根总生物碱的粗品；

精制：上述粗品粉碎，溶解，过硅胶柱，乙酸乙酯洗脱进一步精制，得山豆根总生物碱，总碱含量≥85％，苦参碱的含量≥80％，提取率≥30％；

上述山豆根总生物碱中主要含有骨架为两个喹喏里西啶基核竖向稠和而成的苦参碱类生物碱，其代表成分为：苦参碱、氧化苦参碱，槐果碱和槐醇。

2.根据权利要求1所述的山豆根总生物碱软胶囊，其特征在于所述的分散介质选自聚乙二醇、丙二醇、甘油、大豆油、茶油或花生油中的一种或几种。

3.根据权利要求1所述的山豆根总生物碱软胶囊，其特征在于所述的防腐剂选自丁香油、山梨酸、山梨酸甲酯、泥泊金甲酯、泥泊金乙酯或泥泊金丙酯中的一种或几种。

4.根据权利要求1所述的山豆根总生物碱软胶囊的制备方法为：取山豆根总生物碱，于水浴65℃条件下，先与甘油混合后，分散均匀，再加入丙二醇进行搅拌，山豆根总生物碱：分散介质的重量配比为1.2∶3，所述分散介质中甘油∶丙二醇的重量配比为1∶2，使混合均匀，得软胶囊内容物；

囊壳组成及重量配比：明胶、甘油、水、山梨酸甲酯＝1.2∶0.2∶1∶0.005；

取上述比例的明胶、甘油、水混合均匀，过滤，滤液加入山梨酸甲酯，混匀，制备软胶囊囊材；采用压制法，压制6号软胶囊，定型，洗丸，干燥，即得山豆根总生物碱软胶囊。

5.根据权利要求1所述的山豆根总生物碱软胶囊的制备方法为：取蜂蜡置大豆油中，加热至溶解，加入山豆根总生物碱，山豆根总生物碱∶大豆油∶蜂蜡的重量配比为1∶0.8∶0.125，混合均匀，放冷至室温后，得软胶囊内容物；

囊壳由明胶∶甘油∶水∶泥泊金乙酯组成，按照0.8∶0.5∶1∶0.002的重量比，取明胶、甘油、水混合均匀，过滤，滤液加入泥泊金乙酯，混匀，制备软胶囊囊材；采用压制法，压制5号软胶囊，定型，洗丸，干燥，即得山豆根总生物碱软胶囊。

说明书

一种山豆根总生物碱软胶囊及其制备方法和用途

技术领域

[0001] 本发明属于中药新药研发领域。具体涉及一种山豆根总生物碱软胶囊制剂及其制备方法，同时本发明还涉及该制剂在制备抗肿瘤药物中的应用。

背景技术

[0002] 山豆根来源于豆科植物越南槐Sophora tonkinesis Gapnep的干燥根及根茎。其味苦、性寒，有毒。归肺、胃经。功能主治：可清热解毒，消肿利咽。用于火毒蕴结，咽喉肿痛，齿龈肿痛。为清利咽喉，消肿止痛之药。山豆根功效始载于《开宝本草》：“主解诸药毒、止痛、消疮肿毒，急黄发热咳嗽”。

[0003] 现代药理研究表明，山豆根具有抗肿瘤、抗实验性心律失常、抗溃疡、抗真菌、消炎镇痛等作用，对脑缺血再灌注损伤有明显保护作用。据文献报道，山豆根中含有多种生物碱类成分，另外还有黄酮、三萜、多糖、甾醇等。其中，以山豆根药材提取精制的山豆根总生物碱，具有抑制肿瘤生长的活性，是治疗肿瘤的有效部位，(山豆根总生物碱抗肿瘤作用的初步研究，南京中医药大学学报，2005，21(4)：253-254)。该文献还报道了山豆根总生物碱在100mg/kg剂量连续给药时出现了毒性反应，提示临床用药时应注意。因此提高有效成分的含量，降低给药剂量，能够降低毒副作用。公开号为CN1457778A的中国专利公开了山豆根口服制剂、制备方法及应用，主要涉及一种山豆根活性成分提取物制成的保肝护肝的口服制剂，该专利采用常规的酸碱调pH值法制备山豆根提取物，技术含量低，酸碱的使用量过大，对环境污染大；并且总生物碱提取率较低(提取率为1.3％)，没有确切说明山豆根总生物碱的含量，只是说明总生物碱中苦参碱的含量≥70％，使得用该提取物制成的制剂质量难以控制。也就增加了制剂使用的危险性。

发明内容

[0004] 本发明要解决的技术问题是提供一种山豆根总生物碱软胶囊剂，其中山豆根总生物碱的含量以苦参碱计≥85％，苦参碱的含量≥80％。使该制剂质量可控，能较好地保证疗效和药物稳定性。

[0005] 本发明要解决的另一个技术问题是提供上述山豆根总生物碱软胶囊的制备方法，及其在制备抗肿瘤药物中的应用。

[0006] 本发明所述的山豆根总生物碱的制备方法可采用本领域公知的方法制备。本发明在此提供一种可行的方法，包括以下步骤：

[0007] (1)提取：山豆根药材粉碎，用水或10％～40％乙醇提取；

[0008] (2)浓缩：提取后减压浓缩，蒸去水或乙醇，得相对密度为1.10～1.15的浓缩液；

[0009] (3)酸化：浓缩液用稀酸酸化至pH3～4之间，离心(4000r/min，10min)，得上清液；

[0010] (4)除杂：上清液经树脂柱吸附并用水或10％～50％乙醇淋洗除去杂质；

[0011] (5)碱化：用稀碱碱化树脂柱；

[0012] (6)洗脱：用10％～50％乙醇洗脱吸附于树脂柱上的山豆根总生物碱；

[0013] (7)干燥：洗脱液经减压浓缩、干燥，得含山豆根总生物碱的粗品；

[0014] (8)精制：上述粗品粉碎，溶解，过硅胶柱，乙酸乙酯洗脱进一步精制，得山豆根总生物碱，总碱含量≥85％，苦参碱的含量≥80％，提取率≥30％。

[0015] 上述山豆根总生物碱中主要含有骨架为两个喹喏里西啶基核竖向稠和而成的苦参碱类生物碱，其代表成分为：苦参碱、氧化苦参碱，槐果碱和槐醇。

[0016] 苦参碱：

[0017]

[0018] 氧化苦参碱：

[0019]

[0020] 槐醇：

[0021]

[0022] 本发明所采用的山豆根总生物碱含量较高，成分清楚，质量可控，适于工业化大生产，将其制成适合于临床需要的药物制剂，能够降低给药剂量，减少毒副作用，提高药物稳定性、生物利用度及疗效。

[0023] 本发明所述的山豆根总生物碱软胶囊，由内容物和囊壳两部分构成，其特征在于：所述内容物的组成及其重量比例为：山豆根总生物碱∶分散介质∶稳定剂＝0.8～1.2∶0.8～3.2∶0～0.2；囊壳的组成及其重量比例为：明胶∶甘油∶水∶防腐剂＝
0.8～1.2∶0.2～0.5∶0.8～1.2∶0～0.005。

[0024] 本发明所述的分散介质可选自聚乙二醇、丙二醇、甘油、植物油或矿物油中的一种或几种。所述的植物油可以是大豆油、花生油或者茶油等。

[0025] 本发明所述的稳定剂为蜂蜡。

[0026] 本发明所述的防腐剂可选自丁香油、山梨酸、山梨酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸丁酯钙、苯甲醇、苯甲酸、泥泊金甲酯、泥泊金乙酯或泥泊金丙酯中的一种或几种。

[0027] 上述山豆根总生物碱软胶囊的制备方法，包括以下步骤：

[0028] (1)取山豆根总生物碱，与分散介质混合，加或者不加稳定剂，混合均匀，得软胶囊内容物；

[0029] (2)按比例取明胶、甘油和水混合，加或者不加防腐剂，混合均匀，制备软胶囊囊壳；

[0030] (3)取上述内容物和囊壳，用软胶囊生产设备压制软胶囊，干燥，即得。

[0031] 上述山豆根总生物碱软胶囊的制备方法(2)中，根据内容物的理化性质及特征，还可以加入聚乙二醇增加软胶囊的稳定性。

[0032] 为了便于理解本发明所述的山豆根总生物碱软胶囊在抗肿瘤方面的药用价值，本发明人使用上述方法制备的软胶囊完成了以下药效学试验：

[0033] 1.山豆根总生物碱软胶囊对小鼠H22肝癌实体瘤的治疗作用

[0034] 山豆根总生物碱软胶囊：按照实施例1的方法制备，山豆根总生物碱的含量以苦参碱计为85％。苦参碱含量为81％。

[0035] 为研究山豆根总生物碱软胶囊的体内抗肿瘤活性，取状态良好的H22腹腔荷瘤小7
鼠，无菌抽取腹水(内含大量H22肿瘤细胞)，以生理盐水稀释成浓度5×10/ml，接种于正常小鼠前肢皮下，每只接种0.2ml。接种24h后，按体重随机分为荷瘤对照组、5-氟尿嘧啶注射液(5-FU)组(30mg/kg)、山豆根总生物碱软胶囊小(10mg/kg)、中(20mg/kg)、大(40mg/kg)剂量组。每组12只动物，接种后次日起，每天给药1次，连续给药10天。末次给药后
24h，小鼠称重后脱臼处死，剥瘤称重，计算抑瘤率(％)，试验结果见表1。

[0036] 表1山豆根总生物碱软胶囊给药10天对小鼠H22肝癌实体瘤的影响(x±s)[0037]

[0038] 注：与荷瘤对照组比较，明显降低，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。

[0039] 由表1结果可知，5-FU组与荷瘤对照组比较，药后体重明显降低，经统计学处理，差异具有非常显著性(P＜0.01)；山豆根总生物碱软胶囊小、中、大剂量组与荷瘤对照组比较，药后体重无明显变化，经统计学处理，差异未见显著性(P＞0.05)。

[0040] 5-FU组与荷瘤对照组比较，瘤重明显降低，经统计学处理，差异具有极显著性(P＜0.001)；山豆根总生物碱软胶囊小、中、大剂量组与荷瘤对照组比较，瘤重均明显降低，经统计学处理，差异具有显著性(P＜0.05，P＜0.01或P＜0.001)。5-FU组的抑瘤率为66.7％，山豆根总生物碱软胶囊小、中、大剂量组的抑瘤率分别为32.1％，44.1％，52.2％，具有较好的剂量-效应关系。以上结果提示山豆根总生物碱软胶囊可明显抑制小鼠H22肝癌实体瘤的增长。

[0041] 2.山豆根总生物碱软胶囊对裸鼠移植性胃癌的治疗作用

[0042] 山豆根总生物碱软胶囊：按照实施例2的方法制备，山豆根总生物碱的含量以苦参碱计为88％，苦参碱的含量为82％。

[0043] 为研究山豆根总生物碱软胶囊对裸鼠移植性胃癌人源性肿瘤是否具有治疗作用，6
采用注射浓度为5×10/ml的BGC-823细胞至裸鼠腋部皮下的方法，接种肿瘤细胞0.2ml/只，接种后24h，将动物随机分为荷瘤对照组(生理盐水)、阳性对照组(5-FU 30mg/kg)，山豆根总生物碱软胶囊小(10mg/kg)、中(20mg/kg)和大(40mg/kg)剂量组，另增设未接种肿瘤细胞的裸鼠作为空白对照组，除荷瘤对照组与5-FU组为13只动物以外，其余各组动物数均为11只。在可摸到肿瘤小块(即接种肿瘤后7天)，各组药物开始给药。阳性药采取腹腔注射途径，隔2日给药一次，其余各组均灌胃给药，每天一次，连续28天，3天称量一次体重，并于末次给药后取瘤称瘤重。试验结果见表2，表3。

[0044] 表2山豆根总生物碱软胶囊给药28天后对裸鼠移植性胃癌实体瘤瘤重的影响(x±s)

[0045]

[0046]

[0047] 山豆根总生物碱软胶囊小、中、大剂量组与荷瘤对照组比较，瘤重均明显降低(P＜0.05或P＜0.01)，且中、大剂量组的抑瘤率大于30％，山豆根总生物碱软胶囊各剂量组对裸鼠体重无明显影响(P＞0.05)。试验结果表明，山豆根总生物碱软胶囊对裸鼠移植性胃癌实体瘤具有明显的治疗作用。具体实施例

[0048] 以下通过实施例详细说明本发明技术方案的实施，但不应以此限定本发明的实施范围。

[0049] 实施例1：山豆根总生物碱软胶囊的制备方法

[0050] 内容物组成及重量配比：山豆根总生物碱∶分散介质(大豆油)∶蜂蜡＝1∶0.8∶0.125

[0051] 囊壳组成及重量配比：明胶∶甘油∶水∶泥泊金乙酯＝0.8∶0.5∶1∶0.002[0052] 取蜂蜡置大豆油中，加热至溶解，加入山豆根总生物碱，混合均匀，放冷至室温后，得软胶囊内容物；取上述比例的明胶、甘油、水混合均匀，过滤，滤液加入泥泊金乙酯，混匀，制备软胶囊囊材；采用压制法，压制5号软胶囊，定型，洗丸，干燥，即得山豆根总生物碱软胶囊。

[0053] 实施例2：山豆根总生物碱软胶囊的制备方法

[0054] 内容物组成及重量配比：山豆根总生物碱∶分散介质(甘油∶聚乙二醇＝1∶1.5)＝0.8∶2.5

[0055] 囊壳组成及重量配比：明胶∶甘油∶聚乙二醇∶水＝1∶0.35∶0.12∶1.2[0056] 取山豆根总生物碱，于水浴65℃条件下，先与甘油混合，分散均匀，再加入聚乙二醇进行搅拌，使混合均匀，得软胶囊内容物；取上述比例的明胶、甘油、水、聚乙二醇混合均匀，制备软胶囊囊材；采用压制法，压制6号软胶囊，定型，洗丸，干燥，即得山豆根总生物碱软胶囊。

[0057] 实施例3：山豆根总生物碱软胶囊的制备方法

[0058] 内容物组成及重量配比：山豆根总生物碱∶分散介质(甘油∶丙二醇＝1∶2)＝1.2∶3

[0059] 囊壳组成及重量配比：明胶∶甘油∶水∶山梨酸甲酯＝1.2∶0.2∶1∶0.005[0060] 取山豆根总生物碱，于水浴65℃条件下，先与甘油混合，分散均匀，再加入丙二醇进行搅拌，使混合均匀，得软胶囊内容物；取上述比例的明胶、甘油、水混合均匀，过滤，滤液加入山梨酸甲酯，混匀，制备软胶囊囊材；采用压制法，压制6号软胶囊，定型，洗丸，干燥，即得山豆根总生物碱软胶囊。

[0061] 实施例4：山豆根总生物碱软胶囊的制备方法

[0062] 内容物组成及重量配比：山豆根总生物碱∶分散介质(花生油)∶蜂蜡＝1.1∶1.8∶0.2

[0063] 囊壳组成及重量配比：明胶∶甘油∶水∶＝1.1∶0.4∶0.8

[0064] 取蜂蜡置花生油中，加入至溶解，加入山豆根总生物碱，混合均匀，放冷至室温后，得软胶囊内容物；取上述比例的明胶、甘油、水混合均匀，制备软胶囊囊材；采用压制法，压制8号软胶囊，定型，洗丸，干燥，即得山豆根总生物碱软胶囊。

[0065] 实施例5：山豆根总生物碱软胶囊的制备方法

[0066] 内容物组成及重量配比：山豆根总生物碱∶分散介质(甘油∶聚乙二醇＝1.2∶2)＝0.9∶3.2

[0067] 囊壳组成及重量配比：明胶∶甘油∶聚乙二醇∶水∶＝0.9∶0.5∶0.05∶1.2[0068] 取山豆根总生物碱，于水浴65℃条件下，先与甘油混合，分散均匀，再加入聚乙二醇进行搅拌，使混合均匀，得软胶囊内容物；取上述比例的明胶、甘油、聚乙二醇、水混合均