草乌药材的炮制工艺

摘要

本发明公开一种草乌药材的炮制工艺，包括有如下步骤，(1)选取草乌药材；(2)炮制：将所选草乌药材用清水喷润至内无干心，切成2～4mm厚片，置烘箱108℃～130℃恒温烘制3小时以上，即可制得草乌炮制品。优点在于：本炮制方法具有蒙医文献依据，符合蒙医基本理论，炮制效果好，实用性强。现代化程度提高，便于规模化生产，质量可控，更是安全有效。

权利要求

1.草乌药材的炮制工艺，其特征在于，其包括有如下步骤，(1)、选取草乌药材，选取毛茛科多年野生植物北乌头(Aconitumkusnezoffii Reichb.)干燥块根，筛选、去杂质；

(2)、炮制：将所选草乌药材用清水喷润至内无干心，切成2～4mm厚片，置烘箱

110℃～130℃恒温烘制3小时-8小时，即可制得草乌炮制品。

2.根据权利要求1所述的一种草乌药材的炮制工艺，其特征在于，所述步骤(2)中的炮制工艺，将所选草乌药材用清水喷润至内无干心，忌水泡。

3.根据权利要求1所述的一种草乌药材的炮制工艺，其特征在于，所述步骤(2)中的炮制工艺，将所选草乌药材用清水喷润至内无干心，切成2～4mm厚片，草乌片必须防锈。

说明书

草乌药材的炮制工艺

技术领域：

[0001] 本发明涉及一种炮制工艺，尤其是涉及一种草乌药材的炮制工艺。背景技术：

[0002] 草乌为毛茛科多年野生植物北乌头(Aconitum kusnezoffiiReichb.)干燥块根。是最常用蒙药材，中药很少用。蒙医方剂经典巨著《方海》记有550首方中98首入有草乌，占17.82％；蒙药部颁标准收载145首成方中21首入有草乌，7首入有草乌叶，占19.31％。
蒙医常用方约15％中入有草乌。草乌主要成分多为双酯型类生物碱，是属于剧毒品。草乌的蒙药名为泵嘎或漫钦，味辛、性温，有大毒；具有杀“粘”，燥“协日乌素”，止痛等功能。主要用于“粘”病(类似于感染性、传染性疾病)、“协日乌素”病(类似于风湿、类风湿性病和皮肤病)、“萨”病(半身不遂、中风)、白脉病(周围神经系统及骨骼系统疾病)等病症的治疗，疗效显著。由于毒性大，必须经过炮制加工后才能入方服用。草乌炮制方法据蒙药本草记载，传统炮制方法有童尿制、酸奶制、酒泡、烟熏、研磨后置铁器里加童尿搅致发锈等；还现执行的有诃子汤或甘草汤浸泡、高压蒸等多种。但是，由于炮制辅料，炮制条件，或规模化生产等原因，有些传统炮制方法不能提倡延用，有些炮制方法缺乏科学依据。所以，到目前还没有一个权威的，符合时代发展和规模化生产要求，安全有效、质量可控而稳定，且工艺规范的炮制方法。其制剂在临床应用当中草乌中毒现象时有发生，用药安全不能保障。从而蒙成药的临床应用受到一定程度的限制，影响了蒙药作用的正常发挥，也影响了蒙医药整体的现代化发展。所以，草乌炮制的规范化研究，被提到蒙药产业化事业的工作日程。
发明内容：

[0003] 本发明的目的在于提供一种有效的草乌药材的炮制工艺。

[0004] 本发明的目的由如下技术方案实施：草乌药材的炮制工艺，包括有如下步骤，[0005] (1)、选取草乌药材：选取毛茛科多年野生植物北乌头(Aconitumkusnezoffii Reichb.)干燥块根，筛选、去杂质；

[0006] (2)、炮制：将所选草乌药材用清水喷润至内无干心，切成2～4mm厚片，置烘箱108℃～130℃恒温烘制3小时以上，即可制得草乌炮制品。

[0007] 所述的一种草乌药材的炮制工艺，所述步骤(2)中的炮制工艺，将所选草乌药材用清水喷润至内无干心，忌水泡。

[0008] 所述的一种草乌药材的炮制工艺，所述步骤(2)中的炮制工艺，将所选草乌药材用清水喷润至内无干心，切成2～4mm厚片，草乌片必须防锈。

[0009] 所述恒温烘制优选为3小时-8小时。

[0010] 本发明的优点在于：本炮制方法具有蒙医文献依据，符合蒙医基本理论，炮制效果好，实用性强。现代化程度提高，便于规模化生产，质量可控，更是安全有效。附图说明：

[0011] 图1为本发明的工艺流程图。

[0012] 实施方式：

[0013] 实施例1：草乌药材的炮制工艺，包括有如下步骤，

[0014] (1)、选取草乌药材，即选取毛茛科多年野生植物北乌头(Aconitumkusnezoffii Reichb.)干燥块根，筛选、去杂质；

[0015] (2)、炮制：将所选草乌药材用清水喷润至内无干心，忌水泡，切成2mm厚片，草乌片必须防锈，置烘箱110℃恒温烘制8小时，即可制得草乌炮制品。

[0016] 实施例2：草乌药材的炮制工艺，包括有如下步骤，

[0017] (1)、选取草乌药材，即选取毛茛科多年野生植物北乌头(Aconitumkusnezoffii Reichb.)干燥块根，筛选、去杂质；

[0018] (2)、炮制：将所选草乌药材用清水喷润至内无干心，忌水泡，切成4mm厚片，草乌片必须防锈，置烘箱120℃恒温烘制3小时，即可制得草乌炮制品。

[0019] 实施例3：草乌药材的炮制工艺，包括有如下步骤，

[0020] (1)、选取草乌药材，即选取毛茛科多年野生植物北乌头(Aconitumkusnezoffii Reichb.)干燥块根，筛选、去杂质；

[0021] (2)、炮制：将所选草乌药材用清水喷润至内无干心，忌水泡，切成3mm厚片，草乌片必须防锈，置烘箱130℃恒温烘制15小时，即可制得草乌炮制品。

[0022] 实施例4：炮制方法的研究

[0023] 1.炮制方法的比较

[0024] 1.1样品的炮制

[0025] (1)诃子制：根据部颁标准，取诃子颗粒，加水煎煮，待2/3蒸发时滤过，药渣再煮，滤过，滤液合并，投生草乌厚片浸泡3天，取出低温干燥。

[0026] (2)童尿制：取生草乌厚片，浸泡于健康8岁男童新鲜便液中3天，每天搅拌一次，到时取出用少量水冲洗，低温干燥。

[0027] (3)酸奶制：取生草乌厚片，置酸牛奶中浸泡3天，每天搅拌一次，到时取出用少量水冲洗，低温干燥。

[0028] (4)酒制：取生草乌厚片，分别置高度白酒和黄酒中，浸泡24小时，取出低温干燥。

[0029] (5)发锈制：取草乌粗粉置铁器内，加适量童便液，间断搅拌发锈3天，待呈漆黑色时取出，低温干燥。

[0030] (6)去皮去尖：将草乌的外皮刮去，从尖0.5cm处切掉。

[0031] (7)本发明烘制方法：取草乌厚片，用清水喷润，润至内无干心时，放入烘干箱内，用110℃恒温烘制，分别第3小时、8小时留样。

[0032] 1.2炮制品的有效成分及毒性成分的测定

[0033] 参照《中国药典》(2005年版一部)制川乌项下测定法测定。

[0034] (1)总生物碱含量测定取本品中粉，乙醚、乙醚-三氯甲烷混合液提取，无水乙醇溶解，加硫酸滴定液，用氢氧化钠滴定液返滴定。对各样品的测定结果见表1。

[0035] (2)酯型生物碱含量的测定以乌头碱标准品作对照，乙醚提取草乌炮制品酯型生物碱，参照《中国药典》(2005年版一部)紫外-可见分光光度法(附录VA)在520nm的波长处依法测定吸收度，并从标准曲线上读出供试品溶液中酯型生物碱的重量。对各样品的测定结果见表1。

[0036] 表1草乌传统炮制方法和本发明方法对总生物碱及酯型生物碱含量的影响[0037] 总 生

[0038] 物 碱 酯型生物碱 总生物碱流 酯型生物碱[0039] 样品

[0040] 水分(％)[0041] 含 量 含量(％) 失量(％) 降低率(％)[0042] (％)

[0043] 生草乌 1.12 0.2850 - - 7.05[0044] 诃子制 0.46 0.2758 56.90 3.23 8.00[0045] 童尿制 0.74 0.1162 33.93 59.22 7.63[0046] 白酒制 0.64 0.1232 42.86 56.77 5.54[0047] 黄酒制 0.62 0.1045 44.64 63.33 8.21[0048] 搅拌发绣 1.04 0.1679 7.144 1.09 7.89[0049] 酸奶制 0.63 0.1302 43.75 54.32 8.56[0050] 去皮、去尖 1.04 0.1793 7.143 7.09 5.57[0051] 本发明烘制3h 1.23 0.1057 - 62.91 5.87[0052] 本发明烘制8h 1.11 0.1077 0.896 2.11 6.20[0053] 本发明烘制15h 0.91 0.1000 18.75 64.91 6.20[0054] 中医煮制 0.33 0.0699 ... ... ...[0055] 从表1可见，除诃子制外其它传统炮制方法的酯型生物碱含量均不同程度的降低。其中，本发明烘制法不但总生物碱含的丢失少，而且酯型生物碱含量降低均在62％以上，经多指标简易试验评分法处理结果：采用本发明方法烘制3h以上，使酯型生物碱降低60％以上；总生物碱丢失不显著(见表2)。炮制品经口尝符合蒙医传统炮制标准(略有麻舌感)。从降低毒性角度，本发明烘制法为最好。

[0056] 表2草乌诸炮制品经多指标简易试验评分法评分结果按优劣顺序排序[0057] 试验指标

[0058]

[0060] 经多指标简易试验评分法评分，采用本发明烘制3h以上的分数与其它传统方法相比较的分数要高一个数量级，其余依次为搅拌发锈制、去皮去尖、童尿制、黄酒制、白酒制、酸奶制、分数最低的是诃子制，为-3.3647。所以，选择本发明烘制法作为草乌的常规炮制方法，为最合理。

[0061] 2.炮制工艺研究

[0062] 2.1烘制法工艺优选

[0063] 从规模化生产需求出发，为找出生产周期短，节省资源，炮制简便易行，方法科学的工艺路线，对烘制法进行了工艺条件的优选研究。实验以总生物碱和酯型生物碱的含量变化为客观指标，对影响因素进行正交设计优选。以烘干温度、烘干时间、切片厚度为三个4
因素，每个因素选三个水平，选用正交表L9(3)作正交试验。因素水平见表4。正交试验结果见表5；方差分析见表6。

[0064] 表4因素水平表

[0065]

[0067] 表5L9(3)4正交实验方案及结果分析

[0068]

[0069] 23.221 24.394 22.46 23.402

[0070] I3

[0071] 组合数G＝9 水平数L＝3

[0072] 25.125 23.68 26.086* 26.082*

[0073] II3

[0074] 25.886* 26.158* 25.686 24.748

[0075] III3

[0076] R 2.665 2.478 3.626 2.68

[0077] SS 0.41606 0.36155 0.87833 0.39902

[0078] 从表中可知，最佳工艺条件温度为130℃-110℃，时间为3h以上，切片厚度为2mm-4mm。

[0079] 表6 方差分析结果

[0080] 方差来源 离差平方和 自由度 方差 F值 显著性[0081] A 0.416061 2 0.2080305 1.15075 P＞0.05[0082] C 0.878331 2 0.4391655 2.42932 P＞0.05[0083] 误差B 0.361554 2 0.180777

[0084] F(0.01)＝99.0 F(0.05)＝19.0 F(0.1)＝9.0

[0085] 从表中可知，所设立的三个因素对综合评分法结果没有显著性意义(P＞0.05)，从上综合考虑烘制的工艺条件定为：将草乌润至内无干心，切成2～4mm的厚片，在110℃-130℃烘制3小时以上。

[0086] 最佳工艺验证试验为了验证本工艺的稳定性和可行性，作了验证试验(以同一产地样品，分3批次实验)。结果见表7，说明该方法稳定可行：总生物碱RSD(％)值为为0.49，酯型生物碱含量RSD(％)值为1.02。

[0087] 表7三批验证实验结果

[0088] 总碱含量 酯型碱

[0089] 批次 X±SD RSD(％) X±SD RSD(％)[0090] (％) 含量(％)

[0091] 第一批 1.18 0.1221

[0092] 第二批 1.18 1.18±0.005 0.49 0.1217 0.123±0.0012 1.02[0093] 第三批 1.17 0.124

[0094] 3.炮制工艺的不同批次重现性考察

[0095] 为考察其重现性作了重现性实验。取不同产地3批样品进行上述炮制实验。结果：三批生草乌和烘草乌的总生物碱和酯型生物碱含量批次间差异较大，即对不同产地样品间重现性差。结果见表8。

[0096] 表8不同产地3批样品重现性实验结果

[0097]

[0098] 说明本炮制方法受生草乌药材性质的影响较大。当生草乌药材形状饱满时炮制效果相对好，例如第一批样品；反之，药材形状瘦干时炮制效果相对差，例如第二批样品(见图4～9)。这可能与炮制前的润湿时的吸水量和所含乌头碱种类有关。形状饱满的生草乌药材往往含淀粉量多，吸水性强，润湿时吸水量相对多，炮制过程中干燥所需时间稍长一些；形状瘦干的药材，润湿时吸水量相对少，炮制过程中干燥快。认为影响了乌头碱的水解过程，应当视为不合格药材。有待进一步研究探讨。

[0099] 但是，无论生草乌药材形状如何；酯型生物碱含量多少，本炮制方法将其含量降低50％以上，而总生物碱损失26％以下，远远优于目前采用的草乌炮制方法，炮制品符合蒙医“必须有略有麻舌感”的炮制标准。

[0100] 4.炮制品毒性的比较结果

[0101] 为了考察草乌炮制品的毒性与酯型生物碱含量是否有良好的线性关系，对草乌生品和诃子制、童尿制、烘制等四个样品作了小鼠急性毒性试验，结果见表9。

[0102] 表9对部分样品的酯型碱与LD50值的关系

[0103] 样品 酯型碱含量 LD50(g/kg) 可信区间(g/kg)

[0104] (％)

[0105] 生草乌 0.2850 2.406 1.890～3.060

[0106] 诃子制 0.2758 2.483 1.847～2.822

[0107] 童尿制 0.1162 2.643 2.199～3.175

[0108] 本发明烘制方法 0.1077 5.490 4.102～7.349

[0109] 从表中可以看出，随酯型碱含量的下降其毒性趋于变小(即LD50在增加)。准确评价草乌炮制品的毒性，还须通过毒理实验。表中还可以看到本发明烘制方法LD50的增加两倍以上，毒性非常低。因此可以断定：本发明烘制法是个理想的草乌炮制方法。

[0110] 5.炮制品药效学研究结果

[0111] 蒙药草乌有杀“粘”，燥“协日乌素”，止痛之功能。味辛，性温、轻；有大毒。炮制的目的是减低其毒性，童便液炮制还可以增强其杀“粘”功效。经烘制法炮制的草乌除降毒性外，还应当保证有效。为此，完成了下列药效学实验。

[0112] 为了验证止痛、燥“协日乌素”(相当于炎性渗出物)功能，做了冰乙酸致痛模型止痛试验(小鼠扭体实验，以盐酸曲马哆作阳性对照，连续给药四日后比较)、毛细血管通透性试验(以地塞米松灌胃作阳性对照，连续给药四日后比较)和大鼠纸片肉芽肿试验(以地塞米松灌胃作阳性对照，连续给药五日后比较)，结果见表10～12；针对杀“粘”功能，选择了体外抑菌试验(钢管法，用青霉素和红霉素作对照)，结果见表13。

[0113] 表10烘草乌对小鼠冰乙酸致痛的影响(X±SD)

[0114]

[0115] 注：与模型组比较▲：P＜0.05，▲▲：P＜0.001

[0116] 从表中可知，阳性组与模型组比较有非常显著性差异(P＜0.001)，生草乌药组和本发明烘制药组与模型组比较均有显著性差异(P＜0.05)，生草乌药组和本发明烘制药组比较没有统计学意义(P＞0.05)，说明生草乌药组和本发明烘制药组具有抑制冰醋酸引起的疼痛作用，而且作用强度相近。

[0117] 表11本发明烘草乌对大鼠纸片肉芽肿湿重的影响(X±SD)

[0118]

[0119] 注：1.与模型组比较▲：P＜0.05，▲▲：P＜0.01，▲▲▲：P＜0.001；

[0120] 2.为了说明蒙医的燥“协日乌素”药效，测肉芽肿干重改为测湿重。

[0121] 从表中可知阳性组与模型组比较有极非常显著性差异(P＜0.001)，给生草乌药组和本发明烘制药组与模型组比较有非常显著和显著性差异(P＜0.01和P＜0.05)，生草乌药组和本发明烘制药组比较没有统计学意义(P＞0.05)。说明生草乌和本发明烘草乌均可明显抑制大鼠纸片引起的肉芽肿湿重，且作用强度相近。

[0122] 表12本发明烘草乌对小鼠毛细血管通透性的影响(X±SD)

[0123]

[0124] 注：与模型组比较▲：P＜0.05

[0125] 各处理组与模型组比较，均有显著性差异(P＜0.05)，生草乌组与本发明烘制药组比较没有统计学意义(P＞0.05)。说明生草乌和烘制草乌均有抗炎作用。

[0126] 表13草乌六种炮制品的对实验菌的抑菌作用(单位：mm)

[0127]

[0128] 注：表中数据为抑菌圈的直径，带“*”号表示达到杀菌作用，其余表示抑菌作用；“-”号代表无作用。

[0129] 表中显示：草乌生品和本发明烘制品对金黄色葡萄球菌均有杀菌作用，本发明烘制品还对大肠杆菌、痢疾杆菌均有抑菌作用，说明草乌经过包括烘制法的传统方法炮制之后抗菌功效增强，抗菌谱增宽。

[0130] 小结

[0131] 草乌炮制中，本发明烘制法不但总生物碱含丢失少，降酯型生物碱量均在50％以上。经多指标简易试验评分法评分结果烘制3h以上均可以，酯型生物碱降低62.91％；总生物碱几乎没有丢失，经口尝符合蒙医炮制标准(略有麻舌感)。经综合评价，传统炮制方法中烘制法(烟熏法)最为好。

[0132] 经以上药效学实验间接的证明了烘草乌的杀“粘”，燥“协日乌素”，止痛功效。因此，草乌入药经烘制，可确保安全有效性。此法具有生产周期短，不使用辅料，简便，易行，适合与工业化大规模生产。