一种银杏内酯B注射剂及其制备方法

摘要

本发明涉及一种银杏内酯B注射剂及其制备方法，以银杏内酯B为原料，加入乙醇、甘油和PEG600；其中，银杏内酯B与乙醇之比为1∶25～200、银杏内酯B与PEG600之比为1∶25～600、银杏内酯B与甘油之比为1∶12.5～50。本发明制剂的稳定性好，成本低廉，各项指标达均到制剂要求，制备工艺具有溶解原料快，过程简单的特点，适于工业化生产。

权利要求

1.一种银杏内酯B注射剂，其特征在于以银杏内酯B为原料，加入乙醇、甘油和PEG600；其中，银杏内酯B与乙醇之比为1∶25～200g/ml、银杏内酯B与PEG600之比为

1∶25～600g/ml、银杏内酯B与甘油之比为1∶12.5～50g/ml；按上述配方比例取银杏内酯B加乙醇、甘油和PEG600在60℃条件下溶解，再加入注射用水至银杏内酯B浓度为

0.5mg/ml～4mg/ml得注射溶液，按每1L注射溶液中添加0.1～1g的活性炭，加热至80～

100℃充分搅拌15～30min，脱炭、过滤，滤液按常规注射剂制备方法得到银杏内酯B注射剂。

2.一种权利要求1所述的银杏内酯B注射剂的制备方法，其特征在于该方法包括以下步骤：按配方比例取银杏内酯B、乙醇、甘油和PEG600在60℃条件下溶解，再加入注射用水至银杏内酯B浓度为0.5mg/ml～4mg/ml得注射溶液，每1L注射溶液中添加0.1～1g的活性炭，加热至80～100℃充分搅拌15～30min，脱炭、过滤，滤液按常规注射剂制备方法得到银杏内酯B注射剂。

说明书

一种银杏内酯B注射剂及其制备方法

技术领域

[0001] 本发明属于中药制药领域，具体涉及一种银杏内酯B注射剂及其制备方法。

[0002] 技术背景

[0003] 银杏内酯是目前强有力的特异性血小板活化因子(PAF)受体阻断剂之一，银杏内脂B是银杏内酯中对PAF受体阻断作用最强的，可剂量依赖性的消除PAF所引起的血小板聚集作用，从而防止血栓的形成，而对由二磷酸腺苷、花生四烯酸、胶原和肾上腺素诱导的血小板聚集无作用。最新药理研究表明银杏内酯B具有抗过敏、抗炎症、抗休克作用，对缺血损伤及器官移植的排斥反应也有保护作用。

[0004] 银杏内酯B在银杏叶和银杏叶提取物中含量很低，目前市场上出现的银杏类制剂主要以银杏总内酯和总黄酮为有效部位，尚未出现单体的银杏类制剂，目前银杏内酯B单体的获取主要通过液相制备，难以形成产业化。同时银杏内酯B在水中的溶解性差，可用于助溶的司盘、吐温-80等已明确被国家局专家定为引起注射液不良反应的辅料。目前，银杏内酯B制成注射剂困难，故难以充分发挥其治疗的优势。

发明内容

[0005] 本发明的目的在于提供一种成本低、稳定性好的银杏内酯B注射剂。

[0006] 本发明的另一目的在于提供该银杏内酯B注射剂的制备工艺。

[0007] 一种银杏内酯B注射剂，其特征在于以银杏内酯B为原料，加入乙醇、甘油和PEG600(聚乙二醇600)；其中，银杏内酯B与乙醇之比为1∶25～200(g/ml)、银杏内酯B与PEG600之比为1∶25～600(g/ml)、银杏内酯B原料与甘油之比为1∶12.5～50(g/ml)。

[0008] 所述的银杏内酯B注射剂，可以由以下步骤制备：

[0009] 按上述配方比例取银杏内酯B加乙醇、甘油和PEG600在60℃条件下溶解，再加入注射用水至银杏内酯B浓度为0.5mg/ml～4mg/ml得注射溶液，按每1L注射溶液中添加0.1～1g的活性炭，加热至80～100℃充分搅拌15～30min，脱炭、过滤，滤液按常规注射剂制备方法得到银杏内酯B注射剂。

[0010] 上述银杏内酯B注射剂的制备方法，其特征在于该方法包括以下步骤：

[0011] 按上述比例取银杏内酯B加乙醇、甘油和PEG600在60℃条件下溶解，再加入注射用水至银杏内酯B浓度为0.5mg/ml～4mg/ml得注射溶液，按每1L注射溶液中添加0.1～1g的活性炭，加热至80～100℃充分搅拌15～30min，脱炭、过滤，滤液按常规注射剂制备方法得到银杏内酯B注射剂。

[0012] 本发明银杏内酯B注射液用于治疗瘀血阻络引起的胸痹、心痛、缺血性脑中风。

[0013] 本发明所用银杏内酯B可为市售。

[0014] 本发明的有益效果：

[0015] 银杏内酯B作为一中内酯，其在水中的溶解性差，将其作为注射剂使用仍是个难题。本发明通过长期摸索得到的制剂组方，可以将银杏内酯B做成性质稳定的水溶液。银杏内酯B溶解后其随温度变化容易从溶液中析出，故添加甘油作为稳定剂。乙醇可和PEG600作为银杏内酯B助溶剂，乙醇具有快速溶解银杏内酯B的优点，但其易挥发；通过添加助溶剂PEG600可以增加银杏内酯B的溶解，对银杏内酯B助溶效果弱于乙醇，但弥补乙醇易挥发的缺点。本发明的银杏内酯B注射剂工艺具有溶解原料快，过程简单的特点，同时制剂的稳定性好，成本低廉，各项指标达均到制剂要求，适于工业化生产。

[0016] 试验例1

[0017] 采用不同辅料制成银杏内酯B注射剂稳定性的比较数据表：

[0018]辅料 溶解温度 溶解时间 常温保存 注射入生理盐水后
乙醇 40℃ 20min 稳定 10min后出现析晶
乙醇、甘油 40℃ 25min 稳定 20min后出现析晶
PEG600、乙醇、甘油 80℃ 30min 稳定 24h未出现析晶出现

[0019] 注：配制的银杏内酯B浓度均为20mg/10ml；注入250ml生理盐水中。

[0020] 结果：在临床使用过程中银杏内酯B为静脉滴注，所以要将银杏内酯注射液加入生理盐水后使用，本发明的产品在24小时内未出现析晶，从而保证了正常的临床使用。

[0021] 结论：PEG600油状物，无毒性，可以将银杏内酯B包裹在其中，形成稳定的微乳剂。在临床使用过程中需要将银杏内酯B注射剂注入生理盐水中，此时乙醇和甘油的浓度被稀释，会导致银杏内酯B的析晶，而添加PEG600后的注射液为微乳剂，在银杏内酯B注射剂注入生理盐水的过程中保证了银杏内酯B完好地溶解在溶液中而不会有晶体析出，因此本发明的银杏内酯B注射液在使用过程中具有更优异的稳定性，并且成本低廉。

[0022] 试验例2银杏内酯B注射液药效学研究

[0023] 地点：山东大学

[0024] 1、对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型的影响

[0025] 目的：观察银杏内酯B注射液对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用，探讨其治疗缺血性脑病及脑血栓的疗效，为临床试验研究提供参考。

[0026] 方法：取健康雄性Wistar大鼠，适应性喂养一周后进行试验。设假手术组、模型组、银杏内酯B注射液低、中、高剂量组和金纳多注射液阳性对照组，共9组。采用改进的Zea Longa’s大脑中动脉内栓线阻断法(MCAO)制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型，并于缺血1.5h后进行再灌注。各组分别于脑缺血即刻尾静脉注射(iv)相应药物，假手术组和模型组给予相应体积0.9％氯化钠注射液，银杏内酯B注射液低、中、高组给药剂量分别-1 -1为1.5、3和6mg·kg ，金纳多注射液阳性对照组给药剂量为3ml·kg ，空白对照组给予等体积0.9％氯化钠注射液。

[0027] 脑缺血1.5h再灌注24h后，各组动物进行神经病学检查，继而取脑进行TTC染色，拍照后测定缺血侧脑梗死体积。实验过程中，MCAO手术失败、造模不成功及24h内死亡的动物均弃之不用，不足预定数额者按照随机抽样原则补齐动物并重新造模。

[0028] 表1银杏内酯B注射液对大鼠神经行为学改变的影响(n＝10)

[0029]

[0030] *P＜0.05，**P＜0.01，与模型对照组比较；△P＜0.05，△△P＜0.01，与金钠多组比较。

[0031] 表2银杏内酯B注射液对大鼠脑梗死体积的影响

[0032]

[0033] *P＜0.05，**P＜0.01，与模型对照组比较；△P＜0.05，△△P＜0.01，与金纳多组比较。

[0034] 结果：

[0035] (1)神经行为学的影响：大鼠缺血1.5h再灌注24h后，假手术组无明显神经功能缺损，神经功能学评分均为0。模型组则出现不同程度的神经功能缺损体征，银杏内酯B注射液和金纳多注射液组神经功能缺损症状有明显改善。缺血1.5h再灌注24h后，各用药组神经功能评分与模型组相比，银杏内酯B注射液中、高剂量组具有显著统计学差异(P＜0.01)，金纳多注射液组有明显统计学差异(P＜0.05)。

[0036] (2)脑大体形态学变化：大鼠缺血1.5h再灌注24h后，假手术组大鼠大脑外观光洁，颜色、形态正常，无苍白、水肿、充血等变化，双侧脑组织结构对称；模型组缺血侧大脑半球明显水肿，体积较对侧明显增大，中线向右侧偏移。缺血侧大脑半球顶叶呈脂肪样苍白色，脑组织软化易碎，脑膜血管高度充血；各用药组缺血侧大脑半球水肿减轻或明显减轻，脑膜血管充血减轻，梗死体积较模型组有明显减小。

具体实施方式

[0037] 以下通过实施例，对本发明作进一步说明，下述实施例对本发明没有限制。

[0038] 实施例1

[0039] 1、银杏内酯B注射剂制备：

[0040] 处方：

[0041] 银杏内酯B 2g

[0042] 乙醇 150ml

[0043] PEG600 200ml

[0044] 甘油 50ml

[0045] 注射用水 600ml

[0046] 制法：取上述处方量的银杏内酯B(太原兴远生化有限公司)，加乙醇150ml、PEG600200ml、甘油50ml，加热到60℃搅拌，使银杏内酯B充分溶解，再加入注射用水600ml，加热至100℃搅拌混匀，加入0.3g活性炭，搅拌15min，脱炭、过滤、灌封、灭菌、灯检、包装，即得到银杏内酯B水针。

[0047] 实施例2

[0048] 1、银杏内酯B的制备：称取银杏叶10kg，加入500L1％的盐酸浸煮30min，过滤，得到滤液480L，用480L正丁醇萃取，将萃取液浓缩到适量，加入适量100～200目硅胶，混匀烘干，上硅胶柱(径高比为1∶1，硅胶用量3kg)，以乙酸乙酯∶丙酮为4∶6的比例配制流动相，控制流速210ml/min，收集含银杏内酯B的40L流出液，浓缩干得到6g干膏，加180ml95％乙醇结晶，得到2.3g银杏内酯B原料，其中，银杏内酯B含量为91.5％。

[0049] 2、银杏内酯B注射剂制备：

[0050] 处方：

[0051] 银杏内酯B 4g

[0052] 乙醇 400ml

[0053] PEG600 100ml

[0054] 甘油 50ml

[0055] 注射用水 450ml

[0056] 制法：取处方量的银杏内酯B，加乙醇400ml、PEG600 100ml、甘油50ml，加热到60℃搅拌混匀，使银杏内酯B充分溶解，再加入注射用水450ml，搅拌混匀，加入0.5g活性炭，加热至80℃搅拌30min，脱炭、过滤、灌封、灭菌、灯检、包装，即得到银杏内酯B水针。

[0057] 实施例3

[0058] 1、银杏内酯B的制备：称取银杏叶提取物(符合《中国药典2000版要求，太原兴远生化有限公司)1kg，加入5L0.1％的盐酸浸煮30min，过滤，得到滤液4.8L，用4.8L乙酸乙酯萃取，将萃取液浓缩到适量，加入适量100～200目硅胶，混匀烘干，上硅胶柱(径高比为1∶1，硅胶用量2.5kg)，以正丁醇∶石油醚为8∶2的比例配制流动相，控制流速360ml/