本发明公开了一种高灌蓝莓组培新梢一步成苗方法，包括离体繁殖、新稍分离、新梢扩繁、新梢快速生根和新苗移栽等方法步骤，与常规组培育苗方法相比，可以使高灌蓝莓新梢的生根时间由150天提前到30天，新梢生根率山60％上升到95％以上，新苗成活率由50％上升到90％以上，育苗周期由12个月提高到6个月，同时新苗质量也有了显著提高。
1.一种高灌蓝莓组培新梢一步成苗方法，其特征在于包括以下方法步骤：(1)离体繁殖
把高灌蓝莓组织接种在装有营养液的培养皿中进行离体繁殖，经23-30天培养物繁殖出60-70mm长的新梢，营养液配方为WPM培养基加入0.5ppm玉米素，营养液的PH值为5.0，繁殖环境温度调控在22℃-35℃之间，相对湿度调控在90％-100％之间；
对高灌蓝莓新梢进行无菌化切割分离，将新梢切割成新梢小段并分皿定量移栽，新梢小段最佳长度为10-15mm；
将新梢小段平放在营养液内进行新梢扩繁，经24-35天新梢小段繁育出60-70mm新稍，营养液配方为WPM培养基加入0.5ppm玉米素和0.1ppm IBA生长素，扩繁环境温度调控在
20-35℃之间，相对湿度调控在70％-95％之间，光照和黑暗时间比为16/8；
把新梢垂直插入盛有生根基质的生根穴盘内进行快速生根，经25-30天生成新苗，生根基质配方为作为培养基的泥炭和苔藓中加入500ppm IBA生长素和2.0mM甘氨酸甜菜碱；
把新苗移栽入生长大棚，大棚内土壤的PH值为5.0，温度调控在20℃-35℃之间，相对湿度调控在60％-80％之间，遮阴透光率为40％-65％。
2.根据权利要求1所述的高灌蓝莓组培新梢一步成苗方法，其特征在于，步骤(1)中的培养皿采用材质为硅酸盐化合物无色光学玻璃的三角瓶，外加同材质密封盖。
3.根据权利要求1所述的高灌蓝莓组培新梢一步成苗方法，其特征在于，对步骤(2)中切割分离工具进行局部接触式高温消毒，每次消毒时间小于15秒。
4.根据权利要求1所述的高灌蓝莓组培新梢一步成苗方法，其特征在于，步骤(4)中的生根穴盘采用黑色PVC高强度薄板，由8行16列128个生根穴盘并排紧密连接在一起，组成一个生根穴盘单元。
高灌蓝莓组培新梢一步成苗方法
技术领域
[0001] 本发明涉及一种珍稀果树品种高灌蓝莓组培新梢成苗的方法，属于植物的组织培养领域。
背景技术
[0002] 高灌蓝莓果实中所含对人体有益的营养成分、经济价值和保健效果都是果品中的佼佼者，是一种世界公认的具有很强保健功能的珍贵果品资源，具有很高的经济价值和开发前景。1998年我国开始对高灌蓝莓进行深入研究与开发，由于高灌蓝莓的根系弱，吸收能力小，采用实生苗嫁接、枝条扦插等传统的繁殖方法以及常规组培育苗，都存在生根慢、成活率低、新苗质量差、育苗周期长的问题，严重阻碍了高灌蓝莓在我国的进一步发展。
发明内容
[0003] 为解决高灌蓝莓的根系弱，生根慢，繁殖困难的问题，本发明提供了一种高灌蓝莓组培新梢一步成苗方法，其所采取的技术方案为：
[0004] 该成苗方法包括以下步骤：
[0005] (1)离体繁殖
[0006] 把高灌蓝莓组织接种在装有培养液的培养皿中进行离体繁殖，经23-30天培养物繁殖出60-70mm长的新梢，营养液配方为WPM培养基加入0.5ppm玉米素，营养液的PH值为5.0，繁殖环境温度调控在22℃-35℃之间，相对湿度调控在90％-100％之间；
[0007] (2)新梢分离
[0008] 对高灌蓝莓新梢进行无菌化切割分离，将新梢切割成新梢小段并分皿定量移栽，新梢小段最佳长度为10-15mm；
[0009] (3)新梢扩繁
[0010] 将新梢小段平放在营养液内进行新梢扩繁，经24-35天新梢小段繁育出60-70mm新稍，营养液配方为WPM培养基加入0.5ppm玉米素和0.1ppm IBA生长素，扩繁环境温度调控在20-35℃之间，相对湿度调控在70％-95％之间，光照和黑暗时间比为16/8；
[0011] (4)新梢快速生根
[0012] 把新梢垂直插入盛有生根基质的生根穴盘内进行快速生根，经25-30天生成新苗，生根基质配方为作为培养基的泥炭和苔藓中加入500ppm IBA生长素和2.0mM甘氨酸甜菜碱；
[0013] (5)新苗移栽
[0014] 把新苗移栽入生长大棚，大棚内土壤的PH值为5.0，温度调控在20℃-35℃之间，相对湿度调控在60％-80％之间，遮阴透光率为40％-65％。
[0015] 培养皿采用材质为硅酸盐化合物无色光学玻璃的三角瓶，外加同材质密封盖。
[0016] 切割分离工具进行局部接触式高温消毒，每次消毒时间小于15秒。
[0017] 生根穴盘采用黑色PVC高强度薄板，由8行16列128个生根穴盘并排紧密连接在一起，组成一个生根穴盘单元。
[0018] 高灌蓝莓离体繁殖环境处于可调控恒温、恒湿、超净状态，培养皿筛选出适合的培养皿材质，设计出适合的形状和尺寸。离体繁殖和新梢扩繁中的营养液配制筛选出最适合高灌蓝莓生长的营养液配方。新梢快速生根环节将常规组培育苗的组培新梢试管诱导生根、组培试管苗温室锻炼和移栽试管苗快速生根三个环节有机融为一体，使新苗的生根时间由150天提前到30天，配制专用生根基质，设制专用生根穴盘，用专门的方法把新梢扦插入盛有专用生根基质的专用生根穴盘内，并动态调控其生长环境。新苗生长环境控制环节对大棚内温度、湿度、光照等环境因子进行动态调控。
[0019] 与常规组培育苗方法相比，可以使高灌蓝莓新梢的生根时间由150天提前到30天，新梢生根率由60％上升到95％以上，新苗成活率由50％上升到90％以上，育苗周期由12个月提高到6个月，同时新苗质量也有了显著提高。因此本发明使珍稀果树高灌蓝莓组培育苗的生根时间提前、成活率和新苗质量提高、育苗周期缩短、大幅度提高了繁殖速度和质量，该方法有利于高灌蓝莓在我国的快速推广普及，必将带来巨大的经济效益。
具体实施方式
[0020] 下面结合实施例对本发明做进一步说明：
[0021] 该高灌蓝莓成苗方法包括以下步骤：
[0022] (1)离体繁殖
[0023] 把高灌蓝莓组织接种在装有培养液的培养皿中进行离体繁殖，经23-30天培养物繁殖出60-70mm长的新梢，营养液配方为WPM培养基加入0.5ppm玉米素，营养液的PH值为5.0，繁殖环境温度调控在22℃-35℃之间，相对湿度调控在90％-100％之间。
[0024] 该步骤应用新型建筑和保温材料设制出保温性能良好的繁殖操作车间，并配置全自动温、湿度调控和空气净化设备，使繁殖操作车间长期处于可调控恒温、恒湿、超净状态。筛选出了适合高灌蓝莓离体繁殖的培养皿，其适合的材质是硅酸盐化合物无色光学玻璃，其特点是透明、耐高温、化学性质稳定.，最适合的形状和尺寸是100ml三角瓶，外加同材质密封盖，并对培养皿进行了高效灭菌处理。
[0025] (2)新梢分离
[0026] 对高灌蓝莓新梢进行无菌化切割分离，将新梢切割成新梢小段并分皿定量移栽，新梢小段长度为10-15mm，最好是13mm。
[0027] 该步骤所使用的刀子、镊子等切割分离工具要进行局部接触式高温消毒，每次消毒时间小于15秒。
[0028] (3)新梢扩繁
[0029] 将新梢小段平放在营养液内进行新梢扩繁，经24-35天新梢小段繁育出60-70mm新稍，营养液配方为WPM培养基加入0.5ppm玉米素和0.1ppm IBA生长素，扩繁环境温度调控在20-35℃之间，相对湿度调控在70％-95％之间，光照和黑暗时间比为16/8；
[0030] (4)新梢快速生根
[0031] 把新梢垂直插入盛有生根基质的生根穴盘内进行快速生根，经25-30天生成新苗，此时新梢生根率为95％以上，生根基质配方为的作为培养基的泥炭和苔藓中加入500ppm IBA生长素和2.0mM甘氨酸甜菜碱。
