草药提取物及含有所述草药提取物的组合物

摘要

本发明涉及白芥籽、延胡索块茎、牵牛子和吕宋果种子的草药提取物，以及含有所述草药提取物的用于治疗和预防胃肠活动紊乱的组合物。通过HT3受体拮抗和/或HT4受体激动，本发明的提取物具有促进胃肠活动的显著效果。

权利要求

1.草药提取物，其是由延胡索块茎和牵牛子的草药提取物组成的混合物。

2.权利要求1的草药提取物，其中所述草药提取物从水、C1～C4的低级醇、或其混合溶剂提取。

3.权利要求1的草药提取物，其中所述草药提取物从选自己烷、氯仿、乙酸乙酯和水的非极性溶剂提取。

4.权利要求1的草药提取物，其中所述混合物具有的延胡索块茎的草药提取物：牵牛子的草药提取物的混合比例为从1∶1到10∶1(w/w)。

5.用于预防和治疗胃肠道活动紊乱的组合物，其中所述组合物含有权利要求1-4中任一项的草药提取物作为活性成分。

6.权利要求5的组合物，其中所述胃肠道活动紊乱是源自5-HT3受体和/或5-HT4受体拮抗作用的过兴奋的紊乱。

7.权利要求6的组合物，其中所述胃肠道活动紊乱选自功能性消化不良；溃疡性消化不良、非溃疡性消化不良；反流性食管炎、胃能动性麻痹；便秘；肠易激综合征；过敏性结肠炎；糖尿病型胃肠道活动紊乱；源自化疗的胃肠道活动紊乱；以及源自消化道活动紊乱的肠闭锁和源自胃肠道紊乱的强直性肌营养不良。

8.用于预防和改善胃肠道活动紊乱的保健食品，其含有权利要求1-4的草药提取物作为活性成分。

9.权利要求8的保健食品，其中所述食品是粉末、颗粒、片剂、胶囊、糖浆或饮料。

10.用于制备权利要求1的草药提取物的方法，其包括将干燥的延胡索块茎和牵牛子用水、C1～C4的低级醇或其混合物于45～75℃提取1-5次，65～80小时。

11.用于制备延胡索块茎和牵牛子的草药提取物、可溶于极性溶剂的提取物、以及可溶于非极性溶剂的提取物的方法，该方法包括用水、低级醇或其混合物对延胡索块茎和牵牛子进行提取，过滤并浓缩以获得草药提取物的第一个步骤；顺序用己烷、氯仿和乙酸乙酯处理第一个步骤的草药提取物，从而收集可溶于非极性溶剂中的提取物的第二个步骤；以及用水、甲醇、丁醇或其混合物处理第二个步骤的可溶于非极性溶剂中的提取物，从而获得可溶于极性溶剂中的草药提取物的第三个步骤。

说明书

草药提取物及含有所述草药提取物的组合物

技术领域

[0001] 本发明涉及选自白芥籽(Sinapis Semen)、延胡索块茎(CorydalisTuber)、牵牛子(Pharbitidis Seed)和吕宋果种子(Strychni IgnatiiSemen)的一或多种草药提取物，以及含有所述草药提取物的用于治疗和预防胃肠活动紊乱的组合物。

背景技术

[0002] 功能性消化不良并不是病理性或生化器质性损伤，而是伴随有上腹部区域持续不适或疼痛的功能性症状。从医学上讲，这意味着与限于上腹部的持续的和反复的不适或疼痛相关的各种症状。特别地，非溃疡性消化不良(一种功能性消化不良)包括了消化系统的全部症状包括餐后厌腻、厌食、腹胀、早饱感、嗳气、上腹部不适或疼痛、胃灼热、恶心、呕吐、胃返流、烧心等等。其病理生理学目前尚不明确(Panganamamulaet al.，Functional(Nonulcer)Dyspepsia，Current Treatment Options inGastroenterology，5，pp.153-160，2002)。

[0003] 功能性消化不良是基于没有明显的器质性损伤的各种消化不良症状而诊断，因此治疗并不简单而且大多数症状会在受饮食和应激严重影响的改善和恶化之间交替出现。这些病理学机制共同作用从而显示一或通常多种症状。

[0004] 典型的功能性消化不良治疗包括促运动药物，例如多潘立酮、甲氧氯普胺、左舒必利(levosulpride)、莫沙必利、伊托必利和红霉素。因为胃灼热和溃疡是功能性消化不良的典型症状，因此可以将胃酸抑制剂和抗酸剂用于治疗，但却包括通常具有临时功效的H2拮抗药物(VincenzoStanghellini et al.，Delayed Gastric Emptying in Functional Dyspepsia，Current Treatment Options in Gastroenterology，7，259-264，2004)。

[0005] 由于血清素(5-羟色胺，5-HT)在胃肠蠕动中起主要作用，而且80％的血清素存在于胃肠道中，尤其是95％的血清素都分布在小肠的肠内分泌细胞中，所以最近新的促运动药物的开发集中于5-羟色胺能调节药物。

[0006] 用于5-HT相关受体的特异性激动药物和拮抗药物正在开发过程中；且因为5-HT4激动剂能促进促运动功能并伴随增强的胃收缩力和推进压力，其也处于用于治疗功能性消化不良以及便秘的药物的开发过程之中。5-HT3拮抗剂能够有效地抑制呕吐并减轻内脏高敏性，5-HT1p激动剂则由于其在胃底的放松机制而正被开发用于治疗功能性消化不良(Robinspiller，Serotonergic modulating drugs for functional gastrointestinal disease，J Clin Pharmacol，54，pp.11-20，2002)。

[0007] 特别地，5-HT3受体拮抗剂，格拉司琼，能够减轻肠易激综合征患者体内的直肠敏感性，虽然昂丹司琼对肠易激综合征患者无效但却能够在脂肪进入健康人体十二指肠时降低由扩张导致的呕吐和胃敏感性。西兰司琼能够改善胃肠道敏感性调节以及消化道对胃扩张的适应性，阻断与蠕动相关的可兴奋5-HT3受体，并增加空肠液体吸收。然而，虽然托烷司琼、昂丹司琼和大多数其他的5-HT3受体拮抗剂能改善大鼠中的胃肠道禁食迟发症状(gastrointestinal fasting delay symptom)，但这一效果在包括人类的其他物种中却并非是结论性的。

[0008] 西沙必利是可有效用于治疗功能性消化不良的促运动药物之一，是5-HT4受体激动剂和5-HT3受体拮抗剂，并被公认为与其他药物相比具有统计学上的显著效果。西沙必利的应答率是50-82％，高于安慰剂27-53％的应答率，且当给药4-8周时，有报道表明其在超过70％的病例中是有效的。还有报道指出西沙必利对肠易激综合征的伴发疾病也有效，并能够改善那些对使用左旋舒必利和多潘立酮的多巴胺拮抗剂的治疗无应答的患者的症状。当其在1993年被批准为治疗胃-食管反流疾病的药物之后，其导致了年收入为400亿的市场(国际市场：13亿美元)，但其销售却在2000年7月被禁止。

[0009] 另一方面，另一种血清素受体5-HT1B/D激动剂，triptan，在用于因胃肠道运动和敏感性胃-肠而产生的偏头痛的剂量下是有效的。据报道，舒马普坦能够延缓胃内容物的排空，但其效果已知能够改善上腹部症状，因为其能够改善胃底的调节并能够在实际的功能性消化不良患者中减轻胃肠道扩张反应。

[0010] 5-HT4受体激动剂，是一种新近采用的用于功能性消化不良治疗的促运动药物，其能够在不增加胃底张力的情况下改善症状。

[0011] 西沙必利，一种5-HT4受体激动剂，能够有效地促进胃排空，且对于十二指肠或胃内压波长(>6cm)，识别胃扩张的阈值不仅在患者中也同样在健康人体中有所增加。5-HT4受体激动剂药物包括替加色罗和普卢卡必利，但它们仍处于临床研究阶段并且是下消化道系统中的靶向病症(Fraser RJ，Postprandial antropyloroduodenal motility and gastric emptying ingastroparesis-effects of cisapride，Gut，35(2)，p.172-8，1994；Talley NJ.，New and emerging treatments for irritable bowel syndrome and functionaldyspepsia，Expert OpinEmerg Drugs，7(1)，p.91-8，2002)。

[0012] 同时，白芥籽的韩国芥子(Korean mustard)是十字花科的芥菜的成熟种子，其含有白白芥籽苷、白白芥籽碱和脂肪油，并可有效地祛痰和刺激皮肤(The Korean Pharmacopoedia V Part2 pp453-454)。

[0013] 延胡索块茎是三裂延胡索和罂粟科的其他块茎类植物，其含有小蘖碱、1-坎那定、前托品和1-四氢黄连碱，并具有止痛、镇静、止痉挛、止呕吐和ACTH分泌过多的作用(The Korean Pharmacopoedia V Part2pp664)。

[0014] 牵牛子是旋花科裂叶牵牛的种子，含有大约11％的脂肪油和2％的牵牛子甙，牵牛子甙是一种树脂状糖苷，已知具有易于通便、利尿和杀虫的效果(The Korean Pharmacopoedia V Part2pp651)。

[0015] 吕宋果种子是马钱科吕宋果的种子，含有番木鳖碱、番木鳖次碱、α-可鲁比因、β-可鲁比因和番木鳖苷(Loganine)，并具有刺激CNS、健胃、抗真菌、抗炎和镇痛作用(Oriental Herb(galenicals)Standard Annotation，pp175，The Korean Pharmacopoedia V Part2 pp633-634)。

[0016] 然而，这些草药已被用作与其他各种草药混合的东方药物，因此还没有关于其特异性的促运动作用机制的报道。

[0017] 在这样的背景下，为了鉴定对功能性消化不良和肠易激综合征具有治疗和预防效果的促运动草药，本发明人进行了用于5-HT3和5-HT5受体(对应于促运动触发点)的激活检测，并鉴定了激活所述受体的候选的草药。据此，通过动物模型实验已找到了用于功能性消化不良的适当的草药提取物。

[0018] 本发明人还发现本发明的草药提取物是5-HT3拮抗剂，其能够促进止呕吐和胃排空，并抑制内脏高敏性；其也是5-HT4受体激动剂，对伴随有便秘和慢性结肠炎的肠易激综合征显示出促运动和治疗效果。通过确认所述草药单独或组合都能够对功能性消化不良和肠易激综合征具有治疗效果这一事实使得本发明得以完成。

发明内容

[0019] 技术问题

[0020] 本发明的目的是提供草药提取物；以及含有所述草药提取物作为活性成分，用于预防和治疗胃肠道活动紊乱的组合物。

[0021] 技术方案

[0022] 本发明提供了白芥籽、延胡索块茎、牵牛子和吕宋果种子的一或多种草药提取物。

[0023] 如果所述草药提取物未经其他词语或短语修饰的话，在本发明中，“草药提取物”指草药提取物和/或草药提取物的混合物。

[0024] 以下，将对本发明进行详细地解释。

[0025] 本发明提供了白芥籽、延胡索块茎、牵牛子和吕宋果种子的草药提取物[0026] 同样，本发明还提供了白芥籽、延胡索块茎、牵牛子和吕宋果种子中的两种或更多种草药提取物的混合物。

[0027] 本发明的混合物包括白芥籽和延胡索块茎的草药提取物的混合物。优选地，所述混合物中白芥籽草药提取物:延胡索块茎草药提取物的混合比例为从1:1到10:1的重量比(w/w)。

[0028] 本发明的混合物包括白芥籽和牵牛子的草药提取物的混合物。优选地，所述混合物中白芥籽草药提取物:牵牛子草药提取物的混合比例为从1:1到30:1的重量比(w/w)。

[0029] 本发明的混合物包括延胡索块茎和牵牛子的草药提取物的混合物。优选地，所述混合物中延胡索块茎草药提取物:牵牛子草药提取物的混合比例为从1:1到10:1的重量比(w/w)。

[0030] 本发明的混合物包括延胡索块茎和吕宋果种子的草药提取物的混合物。优选地，所述混合物中延胡索块茎草药提取物：吕宋果种子草药提取物的混合比例为从3:1到1:3的重量比(w/w)。

[0031] 本发明的混合物包括牵牛子和吕宋果种子的草药提取物的混合物。优选地，所述混合物中牵牛子草药提取物：吕宋果种子草药提取物的混合比例为从1:1到1:10的重量比(w/w)。

[0032] 本发明的混合物包括白芥籽、延胡索块茎和牵牛子的草药提取物的混合物。优选地，所述混合物中白芥籽草药提取物:延胡索块茎草药提取物:牵牛子草药提取物的混合比例为(1～30):(1～10):1的重量比(w/w)。

[0033] 本发明的混合物包括白芥籽、延胡索块茎、牵牛子和吕宋果种子的草药提取物的混合物。优选地，所述混合物中白芥籽草药提取物：延胡索块茎草药提取物：吕宋果种子草药提取物:牵牛子草药提取物的混合比例为(1～30):(1～10):1:(1～10)的重量比(w/w)。

[0034] 本发明的草药还包括本领域所已知的可用于预防和治疗如本发明中特别说明的相同病症的同属草药。

[0035] 本发明还提供了本发明的草药提取物的制备方法，其特征在于将选自白芥籽、延胡索块茎、牵牛子和吕宋果种子的草药通过水、C1～C4的低级醇或其混合物进行提取。优选地，将所选择的草药于45～75℃提取1-5次，65～80小时。

[0036] 本发明还提供了选自白芥籽、延胡索块茎、牵牛子和吕宋果种子的一或多种提取物、可溶于极性溶剂的提取物、以及可溶于非极性溶剂的提取物的制备方法，该方法包括用水、C1～C4的低级醇或其混合物对选自白芥籽、延胡索块茎、牵牛子和吕宋果种子的一或多种草药进行提取，过滤并浓缩以获得草药提取物的第一个步骤；顺序用己烷、氯仿和乙酸乙酯处理第一个步骤的草药提取物，从而收集可溶于非极性溶剂中的提取物的第二个步骤；以及用水、甲醇、丁醇或其混合物处理第二个步骤的可溶于非极性溶剂中的提取物，从而获得可溶于极性溶剂中的草药提取物的第三个步骤。

[0037] 本发明的提取物包括提取物、可溶于极性溶剂的提取物、或可溶于非极性溶剂中的提取物。所述提取物可通过选自水、C1～C4的低级醇、或其混合物(优选乙醇)的溶剂进行提取。而且，可通过选自水、甲醇、丁醇或其混合物(优选丁醇)的溶剂对可溶于极性溶剂的提取物进行提取。可使用选自己烷、氯仿和乙酸乙酯的溶剂对可溶于非极性溶剂的提取物进行提取。

[0038] 在本发明中，可通过以下方法获得选自白芥籽、延胡索块茎、牵牛子和吕宋果种子的一或多种草药提取物。

[0039] 首先，在将白芥籽、延胡索块茎、牵牛子和吕宋果种子进行洗涤和干燥之后，用磨对所述干燥草药进行研磨从而获得碾碎的草药，然后通过研磨机将碾碎的草药研磨成粉末。将干燥的草药或粉末放入1-25倍(优选5-15倍)干燥的草药或粉末重量的量的水、低级醇(例如乙醇或甲醇(优选乙醇))或其混合物中。然后对其进行水热提取、冷沉淀提取、回流-冷却提取、或超声波提取(优选使用水热提取于20～100℃(优选45～75℃)提取1-5次，约1～100小时(优选65～80小时))、真空过滤、冷冻干燥以获得来自白芥籽的草药提取物、来自延胡索块茎的草药提取物、来自牵牛子的草药提取物、以及来自吕宋果种子的草药提取物。

[0040] 将来自白芥籽的草药提取物、来自延胡索块茎的草药提取物、来自牵牛子的草药提取物、以及来自吕宋果种子的草药提取物的每一种提取物都悬浮于水中，并以氯仿、乙酸乙酯和丁醇的顺序使用溶剂进行提取以获得本发明的可溶于极性溶剂的提取物和可溶于非极性溶剂的提取物。特别地，通过这样的方法获得本发明的可溶于极性溶剂的提取物和可溶于非极性溶剂的提取物，所述方法包括将选自白芥籽草药提取物、延胡索块茎草药提取物、牵牛子草药提取物以及吕宋果种子草药提取物(通过水热提取获得的提取物)的每一种草药提取物加入己烷以获得可溶于己烷的提取物和可溶于水的提取物的第一个步骤；通过氯仿提取第一个步骤中所获得的可溶于水的提取物以获得可溶于氯仿的提取物和可溶于水的提取物的第二个步骤；通过乙酸乙酯提取第二个步骤中所获得的可溶于水的提取物以获得可溶于乙酸乙酯的提取物和可溶于水的提取物的第三个步骤；以及通过丁醇提取第三个步骤中所获得的可溶于水的提取物以获得可溶于丁醇的提取物和可溶于水的提取物的第四个步骤。

[0041] 本发明提供了用于预防和治疗胃肠道活动紊乱的组合物，其包含作为活性成分的本发明的草药提取物，以及药物可接受的载体、稀释剂或填充剂。

[0042] 本发明的组合物含有占所述组合物总重量0.01-80％的提取物(优选1-50％(w/w))。

[0043] 在本发明的组合物的制备过程中，需要向本发明的草药提取物中加入或从中取出一些元素，且混合比率可以改变。

[0044] 在本发明中，胃肠道活动紊乱被表征为由5-HT3受体和/或5-HT4受体拮抗性作用的过兴奋引起的疾病。

[0045] 在本发明中，胃肠道活动紊乱包括功能性消化不良(例如早饱、疼痛、上腹部疼痛、饱感的假象、烧心、恶心和呕吐)、溃疡性消化不良、非溃疡性消化不良、反流性食管炎、胃能动性麻痹、便秘、肠易激综合征、过敏性结肠炎、糖尿病型胃肠道活动紊乱、源自化疗的胃肠道活动紊乱、以及源自消化道活动紊乱的肠闭锁和源自胃肠道活动紊乱的强直性肌营养不良。

[0046] 易激性结肠炎包括一般性结肠炎、伴随有便秘或腹泻的易激性结肠炎。

[0047] 包括所述草药提取物的本发明的组合物还可包括适当的载体、赋形剂和稀释剂。

[0048] 可包括于本发明的组合物中的载体、赋形剂和稀释剂包括乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、木糖醇、赤藓糖醇、麦芽糖醇、淀粉、阿拉伯橡胶、藻酸盐、明胶、磷酸钙、硅酸钙、纤维素、甲基纤维素、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、水、羟苯甲酯、羟苯丙酯(prophylhydroxybenzoate)、滑石、硬脂酸镁或矿物油。

[0049] 本发明所述组合物还可被制成口服药物(例如粉末、颗粒、片剂、胶囊、悬浮液、乳剂、糖浆和气溶胶)、外用药、或栓剂或无菌注射溶液。

[0050] 特别地，当制成药物时，也可以加入稀释剂或赋形剂，例如常用的引发剂、膨胀剂、粘合剂、保湿剂、崩解剂或去污剂。用于口服施用的固体制品包括片剂、丸剂、粉末、颗粒、胶囊等。所述草药组合物可与至少一或多种赋形剂(例如淀粉、碳酸钙、蔗糖、乳糖或明胶)相混合。可使用的不仅有简单的赋形剂还可包括润滑剂(例如硬脂酸镁或滑石)。对于液体口服制品而言，可使用悬浮液、内容剂(contents agent)、乳剂和糖浆，但通常使用的简单稀释剂(例如水和液体石蜡)以及各种赋形剂(例如保湿剂、甜味剂、芳香剂或防腐剂)也可使用。非口服施用制品包括无菌水悬液、非水溶剂、悬浮液、乳剂、冻干制品、以及栓剂。对于非水溶剂和悬浮液而言，可以使用丙二醇、聚乙二醇、植物油(例如橄榄油)、或可注射酯(例如油酸乙酯)。对栓剂的基质而言，可以使用witepsol、聚乙二醇、吐温61(tween61)、可可脂、月桂精、甘油明胶等。

[0051] 本发明还提供了将本发明的草药提取物用于治疗和预防胃肠道活动紊乱的用途。

[0052] 此外，本发明提供了通过对哺乳动物(包括人类)施用有效剂量的本发明的草药提取物的药物组合物来治疗胃肠道活动紊乱的方法。

[0053] 包括所述草药提取物的本发明的组合物的施用剂量可根据患者的年龄、性别或体重变化。然而，一般地，所述提取物的干燥粉末可以单剂或多剂，以0.01-10g/kg(优选5g/Kg/天)的量进行施用。所述剂量可根据施用途径、疾病的严重程度、性别、体重、年龄、健康状况、饮食、施用时间和方法、以及排泄率进行调节。因此，以上剂量并不限制本发明的范围。

[0054] 本发明的药物组合物可通过多种途径施用给哺乳动物例如大鼠、小鼠、牛或人。例如，其可口服施用、通过直肠、或通过静脉、肌肉、皮下、子宫、硬膜或侧脑室内注射。

[0055] 由于几乎没有毒性或副作用，本发明的草药提取物可为预防目的安全地长期使用。

[0056] 为了确认所述草药提取物的促运动和抗消化不良功效，本发明人检测了它们对5-HT3和5-HT4的受体的亲和力、拮抗作用和激动作用，并证实了其选择性和显著的功效。同样，为了鉴定所述草药提取物的合适的比例，利用多种功能性消化不良病理学，在动物模型上进行各种体内试验，并确证了所述提取物的显著效果。

[0057] 为了预防和改善胃肠道活动紊乱，本发明提供了具有一或多种选自韩国芥子、延胡索块茎、牵牛子和吕宋果种子提取物，以及营养学所允许食品添加剂的健康功能性食品。

[0058] 用于本发明的健康功能性食品具有基于功能性和在人上的安全性新修订的2002健康功能食品法案的韩国FDA通告2004-12中所列的健康功能食品成分的特征。

[0059] 本发明还提供了用于预防和改善胃肠道活动紊乱的含有两种或更多种选自白芥籽、延胡索块茎、牵牛子和吕宋果种子提取物，以及营养学上可接受的添加剂的保健食品。

[0060] 本发明提供了用于预防和改善肠胃道活动紊乱的保健食品，其含有白芥籽草药提取物、延胡索块茎草药提取物和牵牛子草药提取物的混合物，以及营养学上可接受的添加剂。优选地，在所述混合物中，白芥籽草药提取物:延胡索块茎草药提取物:牵牛子草药提取物的混合比例为(1～30):(1～10):1的重量比(w/w)。

[0061] 本发明提供了用于预防和改善肠胃道活动紊乱的保健食品，其含有白芥籽草药提取物、延胡索块茎草药提取物、牵牛子草药提取物和吕宋果种子草药提取物的混合物，以及营养学上可接受的添加剂。优选地，在所述混合物中，白芥籽草药提取物:延胡索块茎草药提取物:吕宋果种子草药提取物:牵牛子草药提取物吕宋果种子的混合比例为(1～30):(1～10):1:(1～10)的重量比(w/w)。

[0062] 本发明提供了用于预防和改善肠胃道活动紊乱的保健食品，其含有白芥籽草药提取物和延胡索块茎草药提取物的混合物，以及营养学上可接受的添加剂。优选地，在所述混合物中，白芥籽草药提取物:延胡索块茎草药提取物的混合比例为1:1到10:1的重量比(w/w)。

[0063] 本发明提供了用于预防和改善肠胃道活动紊乱的保健食品，其含有白芥籽草药提取物和牵牛子草药提取物的混合物，以及营养学上可接受的添加剂。优选地，在所述混合物中，白芥籽草药提取物:牵牛子草药提取物的混合比例为1:1到30:1的重量比(w/w)。

[0064] 本发明提供了用于预防和改善肠胃道活动紊乱的保健食品，其含有延胡索块茎草药提取物和牵牛子草药提取物的混合物，以及营养学上可接受的添加剂。优选地，在所述混合物中，延胡索块茎草药提取物:牵牛子草药提取物的混合比例为1:1到10:1的重量比(w/w)。

[0065] 本发明提供了用于预防和改善肠胃道活动紊乱的保健食品，其含有延胡索块茎草药提取物和吕宋果种子草药提取物的混合物，以及营养学上可接受的添加剂。优选地，在所述混合物中，延胡索块茎草药提取物:吕宋果种子草药提取物的混合比例为3:1到1:3的重量比(w/w)。

[0066] 本发明提供了用于预防和改善肠胃道活动紊乱的保健食品，其含有牵牛子草药提取物和吕宋果种子草药提取物的混合物，以及营养学上可接受的添加剂。优选地，在所述混合物中，牵牛子草药提取物:吕宋果种子草药提取物的混合比例为1:1到1:10的重量比(w/w)。

[0067] 另一方面，包括本发明的草药提取物的组合物还可以药物、食品、以及饮料的多种形式进行使用以实施其促运动效果。本发明的草药提取物可加入各种食品，例如饮料、口香糖、茶、维生素复合物以及健康补充食品中，并可以丸剂、粉末、颗粒、浸剂(infusion)、片剂、胶囊或饮料的形式进行使用。

[0068] 在用于本发明的健康食品组合物的食品或饮料中，所述草药提取物的剂量一般占食品总重量的0.01-15％，优选0.1-10％。对健康饮料组合物而言，在100ml中可加入0.1-30g，优选0.2-5g的草药提取物。

[0069] 对健康饮料组合物而言，只有草药提取物是具有特定比率的必需成分，而对液体成分则没有特定的限制。类似于常规的饮料，还可以加入各种调味剂和天然碳水化合物。

[0070] 上面提及的天然碳水化合物的例子可以是单糖、双糖(如葡萄糖和果糖)、多糖(如麦芽糖和蔗糖)、总糖(general sugar)(如糊精和环糊精)、以及糖醇(如木糖醇、山梨醇以及赤藓糖醇)。除了上述的调味剂，可使用天然调味剂(奇异果甜蛋白、甜菊提取物(即，新蛇菊甙A(rebaudiosidA)、甘草皂苷)和合成调味剂(即糖、阿斯巴甜)。对上述的天然碳水化合物组合物而言，通常每100ml可使用1-20g，优选5-12g。

[0071] 除以上所述，本发明的组合物还可含有各种营养素、维生素、矿物质(电解质)、合成和天然调味剂、色素、膨胀剂(例如奶酪、巧克力)、果胶酸和果胶酸盐、褐藻酸和藻酸盐、有机酸、保护性胶体增稠剂、pH调节剂、稳定剂、防腐剂、甘油、醇、以及用于碳酸饮料的碳酸化剂等。此外，本发明的组合物可含有果肉以制成天然果汁、果汁饮料和植物饮料。这些成分可单独或组合使用。这些添加剂的比例并不是关键的，但通常所使用的比率为本发明的组合物重量0-20％。

[0072] 有益效果

[0073] 本发明的提取物或其混合物可用作用于预防和治疗胃肠道活动紊乱的药物组合物以及健康功能食品以通过HT3受体拮抗作用和/或HT4受体激动作用促进胃肠活动。

附图说明

[0074] 图1所示为使用H2SO4对白芥籽、延胡索块茎、牵牛子和吕宋果种子的乙醇提取物进行薄层液相色谱(TLC)的分析结果的示意图。

[0075] 图2所示为使用KMnO4对白芥籽、延胡索块茎、牵牛子和吕宋果种子的乙醇提取物进行薄层液相色谱(TLC)的分析结果的示意图。

[0076] 图3所示为说明5-HT3受体激动剂的多种活性的示意图。

具体实施方式

[0077] 通过以下实施例和实验性实施例更详细地对本发明进行解释。

[0078] 以下实施例旨在对本发明进行进一步阐明，而非以任何方式对本发明范围进行限制。

[0079] r.t在本发明中指室温。

[0080] 实施例1本发明草药提取物的制备

[0081] 1-1白芥籽的提取物的制备

[0082] 白芥籽购自kyung dong市场的中药材店，洗涤去杂，干燥待用于试验。用磨研磨干燥的草药，将20g碾碎的白芥籽放入0％、15％、30％、50％、70％、85％和96％的乙醇-水(160ml)中并在室温搅拌72小时。然后，将所得混合物进行提取、过滤、于55～65℃低压浓缩、并冷冻干燥以获得白芥籽的提取物(1.04～3.1g)(表1：作为溶剂的白芥籽的提取物的产率)。

[0083] 表1

[0084]草药的 提取 提取 产率
溶剂 溶剂的量 洗涤 获得量(g)
量 温度 时间 (％)
20g 96％EtOH 160ml 20ml r.t 3天 1.24 6.2
20g 85％EtOH 160ml 20ml r.t 3天 1.93 9.7
20g 70％EtOH 160ml 20ml r.t 3天 1.96 9.8
20g 50％EtOH 160ml 20ml r.t 3天 2.28 11.4
20g 30％EtOH 160ml 20ml r.t 3天 2.37 11.9
20g 15％EtOH 160ml 20ml r.t 3天 3.1 15.5
20g 100％水 160ml 20ml r.t 3天 1.04 5.2

[0085] 1-2延胡索块茎的提取物的制备

[0086] 延胡索块茎购自Kyung-dong市场的中药材店，水洗去杂，干燥待用于试验。用磨研磨干燥的草药，将20g碾碎的延胡索块茎放入0％、15％、30％、50％、70％、85％和96％的乙醇-水(160ml)中并在室温下搅拌72小时。然后，使用与实施例1-1中相同的方法对所得混合物进行提取、过滤、于55～65℃低压浓缩、并进行冷冻干燥以获得延胡索块茎的提取物(0.36～2.94g)(表2:作为溶剂的延胡索块茎的提取物的产率)。

[0087] 表2

[0088]提取 提取 产率
草药 溶剂 溶剂的量 洗涤 获得量(g)
温度 时间 (％)
20g 96％EtOH 160ml 20ml r.t 3天 0.36 1.8
20g 85％EtOH 160ml 20ml r.t 3天 0.84 4.2
20g 70％EtOH 160ml 20ml r.t 3天 1.3 6.5
20g 50％EtOH 160ml 20ml r.t 3天 1.65 8.3
20g 30％EtOH 160ml 20ml r.t 3天 1.92 9.6
20g 15％EtOH 160ml 20ml r.t 3天 2.16 10.8
20g 100％水 160ml 20ml r.t 3天 2.94 14.7

[0089] 1-3牵牛子的提取物的制备

[0090] 牵牛子购自Kyung-dong市场的中药材店，水洗去杂，干燥待用于试验中。用磨研磨干燥草药，将20g碾碎的牵牛子放入0％、15％、30％、50％、70％、85％和96％的乙醇-水(160ml)中并在室温下搅拌72小时。然后，使用与实施例1-1中相同的方法对所得混合物进行提取、过滤、于55～65℃低压浓缩、并进行冷冻干燥以获得牵牛子的提取物(0.92～3.85g)(表3：作为溶剂的牵牛子的提取物的产率)。

[0091] 表3

[0092]提取 提取 产率
草药 溶剂 溶剂的量 洗涤 获得量(g)
温度 时间 (％)
20g 96％EtOH 160ml 20ml r.t 3天 0.92 4.6
20g 85％EtOH 160ml 20ml r.t 3天 1.03 5.2
20g 70％EtOH 160ml 20ml r.t 3天 1.27 6.4
20g 50％EtOH 160ml 20ml r.t 3天 2.13 10.7
20g 30％EtOH 160ml 20ml r.t 3天 2.14 10.7
20g 15％EtOH 160ml 20ml r.t 3天 3.85 19.3
20g 100％水 160ml 20ml r.t 3天 3.77 18.9

[0093] 1-4 Strychnos ignatii Semen的提取物的制备

[0094] Strychnos ignatii Semen购自Kyung-dong市场的中药材店，水洗去杂，干燥待用于试验中。用磨研磨干燥的草药，将20g碾碎的Strychnos ignatiiSemen放入0％、15％、30％、50％、70％、85％和96％的乙醇-水(160ml)中并在室温下搅拌72小时。然后，使用与实施例1-1中相同的方法对所得混合物进行提取、过滤、于55～65℃低压浓缩、并进行冷冻干燥以获得Strychnos ignatii Semen的提取物(0.59～5.41g)(表3：作为溶剂种类的Strychnos ignatii Semen的提取物的产率)。

[0095] 表4

[0096]提取 提取 获得量 产率
草药 溶剂 溶剂的量 洗涤
温度 时间 (g) (％)
20g 96％EtOH 160ml 20ml r.t 3天 0.59 3.0
20g 85％EtOH 160ml 20ml r.t 3天 2.26 11.3
20g 70％EtOH 160ml 20ml r.t 3天 3.69 18.5
20g 50％EtOH 160ml 20ml r.t 3天 3.88 19.4
20g 30％EtOH 160ml 20ml r.t 3天 4.3 21.5
20g 15％EtOH 160ml 20ml r.t 3天 4.96 24.8
20g 100％水 160ml 20ml r.t 3天 5.41 27.1

[0097] 实施例2可溶于极性溶剂的提取物和可溶于非极性溶剂的提取物

[0098] 2-1可溶于己烷的提取物的制备

[0099] 将来自实施例1的10g50％乙醇提取物分别溶解于100ml蒸馏水和80ml甲醇中，放入分液漏斗，剧烈混合以分离出水层和己烷层。向水层再加入180ml己烷，进行混合和分离从而获得可溶于己烷的提取物和不溶于己烷的提取物。

[0100] 2-2可溶于氯仿的提取物的制备

[0101] 将不溶于己烷的提取物(水层)与160ml氯仿混合从而分离出氯仿层和水层。然后，将水层中加入160ml氯仿中，并进行混合从而获得可溶于氯仿的提取物和不溶于氯仿的提取物。

[0102] 2-3可溶于乙酸乙酯的提取物的制备

[0103] 将不溶于氯仿的提取物(水层)与140ml乙酸乙酯混合从而分离出乙酸乙酯层和水层。然后，将水层加入140ml乙酸乙酯中，并进行混合从而获得可溶于乙酸乙酯的提取物和不溶于乙酸乙酯的提取物。

[0104] 2-4溶于丁醇的提取物的制备

[0105] 将不溶于乙酸乙酯的提取物(水层)与40ml丁醇混合从而分离出丁醇层和水层。然后，将水层加入20ml丁醇中，并进行混合从而获得到可溶于丁醇的提取物和不溶于丁醇的提取物。

[0106] 将可溶于己烷、氯仿、乙酸乙酯和丁醇的提取物和不溶于己烷、氯仿、乙酸乙酯和丁醇的提取物在低压下浓缩，然后冷冻干燥从而获得可溶于己烷的提取物(0.2～0.4g)、可溶于氯仿的提取物(0.1～0.3g)、可溶于乙酸乙酯的提取物(0.3～0.6g)、可溶于丁醇的提取物(0.8～1.6g)、以及可溶于水的提取物(1.5～3.0g)。结果如表5中所示(可溶于极性溶剂和非极性溶剂的各种草药提取物的产率)。

[0107] 表5

[0108]*

[0109] r.t指室温。

[0110] 实施例3本发明的草药提取物的混合物的制备

[0111] 3-1白芥籽、延胡索块茎和牵牛子的提取物的混合物的制备

[0112] 将实施例1中所得50％乙醇提取物按照白芥籽提取物:延胡索块茎提取物:牵牛子提取物为30:10:1、30:3:1、10:10:1、10:3:1、10:1:1、3:3:1和3:1:1的重量比(w/w)的比例混合以制备3-1-A、3-1-B、3-1-C、3-1-D、3-1-E、3-1-F和3-1-G的碾碎混合物。

[0113] 3-2白芥籽和延胡索块茎的提取物的混合物的制备

[0114] 将实施例1中所得50％乙醇提取物按白芥籽提取物与延胡索块茎提取物为10:1、3:1和1:1的重量比(w/w)的比例混合以制备3-2-A、3-2-B、3-2-C的碾碎混合物。

[0115] 3-3白芥籽和牵牛子的提取物的混合物的制备

[0116] 将实施例1中所得50％乙醇提取物按白芥籽提取物与牵牛子提取物为30:1、10:1和3:1的重量比(w/w)的比例混合以制备3-3-A、3-3-B、3-3-C的碾碎混合物。

[0117] 3-4延胡索块茎和牵牛子的提取物的混合物的制备

[0118] 将实施例1中所得50％乙醇提取物按延胡索块茎提取物与牵牛子提取物为10:1、3:1和1:1的重量比(w/w)的比例混合以制备3-4-A、3-4-B、3-4-C的碾碎混合物。

[0119] 3-5延胡索块茎和吕宋果种子提取物的混合物的制备

[0120] 将实施例1中所得50％乙醇提取物按延胡索块茎提取物与吕宋果种子提取物为3:1、1:1和1:3的重量比(w/w)的比例混合以制备3-5-A、3-5-B、3-5-C的碾碎混合物。

[0121] 3-6牵牛子和吕宋果种子提取物的混合物的制备

[0122] 将实施例1中所得50％乙醇提取物按牵牛子提取物与吕宋果种子提取物为1:1、1:3和1:10的重量比(w/w)的比例混合以制备3-6-A、3-6-B、3-6-C的碾碎混合物。

[0123] 3-7白芥籽、延胡索块茎、牵牛子和吕宋果种子的提取物的混合物的制备[0124] 将实施例1中所得50％乙醇提取物按白芥籽提取物:延胡索块茎提取物:牵牛子提取物:吕宋果种子提取物为30:10:1:10、30:10:1:3、30:3:1:10、30:3:1:3、10:3:1:3、10:10:1:10、10:10:1:3、10:3:1:10和3:3:1:3的重量比(w/w)的比例混合以制备3-7-A、
3-7-B、3-7-C、3-7-D、3-7-E、3-7-F、3-7-G、3-7-H和3-7-I的碾碎混合物。

[0125] <实验性实施例1>对实施例1中的提取物进行5-HT3受体结合测定

[0126] 本发明进行了针对于人源5-HT3受体的结合测定从而选择对5-HT3受体具有亲和力的草药提取物[Nagakura Y et al.，Pharmacology propertiesof a novel gastrointestinal prokinetics benzamide selective for human-5-HT4receptor versus human5-HT3receptor.Pharma.Research，39(5)，pp.375-382，1999；Miyake et al.，Molecular cloning of human5-hydroxytamine3receptor：heterogeneity in distribution and function among species.Mol.Pharmacology，pp.407-416，1995]。

[0127] 1-1白芥籽的提取物

[0128] 将SEQ ID NO.1的5-HT3受体基因(HTR03A0000，UMR cDNAResource Center)转染入Cos-7细胞以制备发育受体的细胞膜。将所述膜(蛋白：20μg)接种至96孔板，然后向板中加入同位素标记的配体和白芥籽的提取物，并混合。在将所述板在25℃孵育40分钟后，通过β放射性测量装置(顶部计数器)测量所述板的放射活性。通过下述的数学式1计算抑制率。

[0129] 数学式1

[0130] 抑制率(％)＝100-[(搜索底物CPM-非特异性结合CPM)/(总CPM-非特异性结合CPM)x100]

[0131] (*CPM：每分钟计数)

[0132] 如表6所示，来自50～96％的乙醇-水的白芥籽提取物表现出对5-HT3受体最强的亲和力。来自于50％乙醇-水的白芥籽提取物的50％抑制浓度(IC50)为79.2μg/ml(表7)。

[0133] 表6

[0134]

[0135]

[0136] 表7

[0137]

[0138] 1-2吕宋果种子的提取物

[0139] 吕宋果种子提取物对于5-HT3受体的亲和力是通过使用与实验性实施例1-1相同的方法测定的。所得结果如表8和9所示。如表8和9所示，从30～85％的乙醇-水所得的吕宋果种子的提取物表现出对5-HT3受体最强的亲和力。来自于50％乙醇-水的吕宋果种子的提取物的50％抑制浓度(IC50)是144.9μg/ml(表9)。

[0140] 表8

[0141]

[0142]

[0143] 表9

[0144]

[0145] <实验性实施例2>对实施例1中的提取物的5-HT4受体结合测定

[0146] 本发明进行了针对人源5-HT4受体的结合测定以选择对5-HT4受体具有亲和力的草药提取物[Nagakura Y et al.，Pharmacology properties of anovel gastrointestinal prokinetics benzamide selective for human-5-HT4receptor versus human5-HT3receptor.Pharma.Research，39(5)，pp.375-382，1999；Wyngaert IV et al.，Cloning and expression of a human serotonin5-HT4receptor cDNA.JNeurochemistry.69(5)，PP.1810-1819，1997].

[0147] 2-1延胡索块茎的提取物

[0148] 将SEQ ID 2的5-HT4受体基因(HTR0400000，UMR cDNA ResourceCenter)转染入Cos-7细胞制备作为发育受体的细胞膜。将所述膜(蛋白：20μg)接种于96孔板，然后向板中加入同位素标记的配体和延胡索块茎的提取物，并混合。将所述板于25℃孵育40分钟后，通过β放射性测量装置(顶部计数器)测量所述板的放射活性。通过下述的数学式2计算抑制率。

[0149] 数学式2

[0150] 抑制率(％)＝100-[(搜索底物CPM-非特异性结合CPM)/(总CPM-非特异性结合CPM)x100]

[0151] (*CPM：每分钟计数)

[0152] 如表10和11中所示，来自50～96％的乙醇-水的延胡索块茎的提取物显示出对5-HT4受体最强的亲和力。来自50％乙醇-水的延胡索块茎的提取物的50％抑制浓度(IC50)为43.4μg/ml。

[0153] 表10

[0154]

[0155] 表11

[0156]

[0157] 2-2牵牛子的提取物

[0158] 通过使用与实验性实施例2-1相同的方法测定牵牛子的提取物对5-HT3受体的亲和力。所得结果如表12和13所示。如表12和13中所示，来自50～96％的乙醇-水的牵牛子的提取物显示出对5-HT4受体最强的亲和力。来自50％的乙醇-水的牵牛子的提取物的50％抑制浓度(IC50)是65.6μg/ml。

[0159] 表12

[0160]

[0161] 表13

[0162]

[0163] <实验性实施例3>对实施例2中的可溶于极性溶剂和非极性溶剂的提取物的5-HT3受体和5-HT4受体结合测定

[0164] 3-1白芥籽和吕宋果种子

[0165] 通过针对人源5-HT3受体的结合测定测量实施例2中从己烷、氯仿、乙酸乙酯和水提取的提取物对5-HT3受体的亲和力。实验方法与实验性实施例1-1的相同，得自极性溶剂和非极性溶剂的提取物浓度如表14所示。如表14所示，得自氯仿的提取物(级份)是最有效的。

[0166] 表14

[0167]

[0168]

[0169] 3-2延胡索块茎和牵牛子

[0170] 比较实施例2中提取自己烷、氯仿、乙酸乙酯和水的提取物对5-HT4受体的亲和力。实验方法与实验性实施例1-1的相同。如表15所示，得自氯仿的提取物(级份)是最有效的。

[0171] 表15

[0172]

[0173] <实验性实施例4>使用豚鼠结肠研究实施例1的提取物对5-HT3受体的拮抗效应[0174] 通过使用豚鼠结肠和得自50％乙醇的实施例1的提取物进行器官浴槽实验以测量所述提取物对5-HT3受体的拮抗效应(Briejer M et al.，Thein vitro pharmacological profile of prucalopride，a novel enterokineticcompound.European Journal of Pharmacology423，pp.71-83，2001)。

[0175] 在CO2窒息之后进行剖腹术以摘除豚鼠的结肠。固定具有平行的两个U型夹(stirrup)的所摘除的结肠。

[0176] 在使用提取物进行处理之前，将所述结肠稳定至少30分钟，逐渐地，所述结肠的张力变为1g(在上样之前所述张力为0.0g)。对于所述提取物的应答而言，向结肠中加入乙酰甲胆碱(3μM)从而诱导结肠收缩。将结肠稳定15分钟，用提取物进行处理使每个样本都具有相同的浓度，培养15分钟。用0.1μM血清素(5-HT)进行处理之后，检测结肠的收缩，然后将所述结肠洗净，重复使用所述提取物进行处理从而制备样本和0.3μM的血清素(5-HT)。重复使用所述方法以0.1、0.3、1、3、10和30μM血清素(5-HT3)进行处理之后，所述样本的抑制效果如下表16中所示。得自50％的乙醇-水的牵牛子提取物的IC50的值为27.8μg/ml，得自50％的乙醇-水的延胡索块茎提取物的所述值为76.5μg/ml，得自50％的乙醇-水的吕宋果种子提取物的所述值为138.7μg/ml。

[0177] 表16

[0178]

[0179] <实验性实施例5>使用Wister雄性大鼠的食管部分研究实施例1提取物对5-HT4受体的激动效应

[0180] 通过对Wister雄性大鼠的食管部分和得自50％乙醇的实施例1的提取物进行器官浴槽实验从而测量所述提取物对于5-HT4受体的激动效应。测量方法公开于Briejer M等人的文件中。(The in vitro pharmacologicalprofile of prucalopride，a novel enterokinetic compound.European Journal ofPharmacology423，pp.71-83，2001；Sonda S et al.，Synthesis andpharmacological properties of benzamide derivatives as selective serotonin 4receptor agonists.Bioorganic & Medicinal Chemistry，12，pp.2737-2747，2004)。

[0181] 在CO2窒息之后进行剖腹术以摘除SD大鼠的食管。将具有平行的两个U型夹的所摘除的结肠固定。

[0182] 在使用提取物进行处理之前将所述结肠稳定至少60分钟，逐渐地，所述食管在早期的30分钟的张力变为1g(在上样之前所述张力为0.0g)。对于所述提取物的应答而言，向食管加入卡巴胆碱(3μM)从而诱导收缩，并稳定所述食管，然后用0.1、0.3、1、3、10和30μM血清素(5-HT)进行处理从而将在该时间的最大松弛力设定为100％。将食管洗净之后，以15分钟间隔更换溶液进行稳定1小时。然后，用卡巴胆碱(3μM)处理所述食管从而诱导收缩，并进行稳定。用3、10、30、100、300μg/ml的提取物处理后，测量食管的收缩效果。此时，在经过GR13808(30nM)处理之后，只对那些显示对食管具有收缩效果的提取物进行处理，并测定所述提取物对5-HT4受体的激动效应。所得结果如下表17中所示。

[0183] 得自50％的乙醇-水的延胡索块茎提取物的EC50(中间有效浓度)的值为12.1μg/ml，得自50％的乙醇-水的牵牛子提取物的所述值为67.4μg/ml，得自50％的乙醇-水的吕宋果种子提取物的所述值为38.8μg/ml。

[0184] 表17

[0185]

[0186] <实验性实施例6>本发明的提取物的胃排空延迟效应的确认

[0187] 通过使用胃排空延迟模型测量实施例1中得自50％的乙醇-水的提取物和实施例3中的混合物的胃排空延迟效应(Ozaki A and Sukamoto et al.，Improvement of cisplatin-induced emesis and delayed gastric emptying byKB-R6933，a novel5-HT3 receptor antagonist.General pharmacology，33，pp.283-288，1999)。

[0188] 将200～250g的雄性SD大鼠在供给标准食物和水，于22-24℃和60～80RH％(相对湿度％)的条件下饲养一周。根据重量将所述大鼠分开，饥饿24小时。将每种提取物溶解于生理盐溶液固定剂量或羟丙基甲基纤维素(HPMC，3％)，并将所述溶液口服施用于所述大鼠。60分钟后，向所述大鼠的腹腔施用10mg/kg的顺铂(在50℃溶解于生理盐溶液并在施用时冷却到37℃)。向每只大鼠口服施用1.5ml半固体检测餐(含有1.5％MC的0.05％酚红溶液)。15～30分钟之后，处死大鼠移除胃，测定胃中残留的酚红的量。将胃和内容物在100ml的0.1N NaOH溶液中溶解20秒，然后在室温下放置1小时。将5ml匀浆转移至试管中。然后，向所述试管中加入0.5ml三氯乙酸(20％)用于蛋白质沉淀，将所述试管以2500xg离心20分钟。再加入作为平衡液的2ml的0.5N NaOH溶液，在560nm测定吸光度(ABS560nm)。根据以下数学式3计算胃排空率。

[0189] 数学式3

[0190] 胃排空(％)＝[1-(B/A)]X100

[0191] A：在施用酚红后立刻从胃中回收的酚红的总量

[0192] B：在施用酚红后残留在胃中的酚红的量

[0193] 关于所述提取物及其混合物的胃排空延迟效应的结果如下表18和19中所示。每种提取物都显示出胃排空延迟效应(表18)，所述提取物的混合物也显示出胃排空延迟效应(表19)。特别地，延胡索块茎和牵牛子提取物的混合物，以及延胡索块茎和吕宋果种子提取物的混合物最有效。

[0194] 1)所述提取物的胃排空延迟效应

[0195] 表18

[0196]

[0197] 在上表中，‘正常’代表没有顺铂和本发明的提取物的正常组，‘对照’代表具有生理盐溶液的阳性对照组。

[0198] 2)提取物混合物的胃排空延迟效应

[0199] 表19

[0200]

[0201]

[0202] 在上表中，‘正常’代表没有顺铂和本发明的提取物的正常组，‘对照’代表具有生理盐溶液的阳性对照组。

[0203] <实验性实施例7>本发明的提取物的半固体胃排空延迟效应的确认[0204] 通过使用半固体胃排空模型测定实施例1中得自50％的乙醇-水的提取物和实施例3中的混合物的半固体胃排空效应(Calatayud S，Garcia-Zaragoza E，Hernandez C，Quintana E，Felipo V，Esplugues JV，Barrachina MD.Downregulation of nNOS and synthesis of PGs associatedwith endotoxin-induced delay in gastric emptying.Am J Physiol GastrointestLiver Physiol.2002Dec；283(6)：Gl 360-7)。

[0205] 将200～250g的雄性SD大鼠在供给标准食物和水，于22-24℃和60～80RH％(相对湿度％)的条件下饲养一周。根据重量将所述大鼠分开，饥饿24小时。在饥饿期间，供给饮水，但在实验前3小时停止供给。将每种提取物溶解于生理盐溶液固定剂量或羟丙基甲基纤维素(HPMC，3％)，并将所述溶液口服施用给所述大鼠。45分钟后，向每只大鼠口服施用2ml半固体检测餐(含有1.5％MC的0.05％的酚红溶液)，所述检测餐通过压碎溶解于水中的动物饲料制得。35分钟之后，处死大鼠移除胃，对具有半固体检测餐的胃称重。根据以下的数学式4计算胃排空率。

[0206] 数学式4

[0207] 胃排空(％)＝[1-(残留在胃中的半固体餐重/残留于0小时的胃中的半固体餐重)]X100

[0208] (“残留于0小时的胃中的半固体餐重”是从在其施用后立即从所述胃获得的残留的半固体餐测定)

[0209] 关于所述提取物及它们的混合物的胃排空延迟效应的结果可见于下表20和21。每种提取物都显示出胃排空延迟效应(表20)，且所述提取物的混合物显示出比所述提取物更有效的胃排空延迟效应(表21)。特别地，延胡索块茎和牵牛子提取物的混合物，以及延胡索块茎和吕宋果种子提取物的混合物是最有效的。

[0210] 1)所述提取物的半固体胃排空效应

[0211] 表20

[0212]

[0213] 在上表中，‘对照’指用施用生理盐溶液而非所述提取物的对照组[0214] 2)提取物混合物半固体胃排空效应

[0215] 表21

[0216]

[0217]

[0218] 在上表中，‘对照’指施用生理盐溶液而非所述提取物的对照组。

[0219] <实验性实施例8>本发明的提取物的上胃肠道活动效果的确认

[0220] 测量实施例1中得自50％的乙醇-水的提取物和实施例3中的混合物的上胃肠道活动效果。

[0221] 将220～230g的雄性SD大鼠在供给标准食物和水，于22-24℃和60～80RH％(相对湿度％)的条件下饲养一周。根据重量将所述大鼠分开，饥饿24小时。为了抑制上胃肠道活动效果，向所述大鼠的腹腔施用1mg/kg的阿托品(在50℃溶解于生理盐溶液并在施用时冷却到37℃)。然后，将每种提取物的固定剂量溶解于生理盐溶液或羟丙基甲基纤维素(HPMC，3％)，并将所述溶液口服施用给所述大鼠。1小时后，向每只大鼠施用1ml异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖(FITC)(在生理盐溶液中将5mM FITC溶液稀释10倍)。15分钟之后，对大鼠进行尸体解剖。将来自portio pyorica ventriculi至阑尾的小肠等切为10段。将所述组织浸泡于1ml生理盐溶液中，然后放置于冰箱中。1天后，检测每等份溶液的荧光。使用数学式5可从所检测值获得在所述小肠中异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖的分配比例，且胃肠道的运动也在异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖分配的几何中心。同时，将胃分离并称重从而测量胃排空。

[0222] 数学式5

[0223] 1)每段的荧光分数＝(每段的荧光/总体)X100

[0224] 2)几何中心＝[∑(每段的荧光分数X段数)]/100

[0225] 每种草药提取物及其混合物对胃肠运动的效果如下表22(本发明的提取物的胃肠运动延迟效应)和表23(在本发明的提取物的胃肠运动效果的延迟模型中的胃排空效应)中所示。可以确认草药提取物的混合物比草药提取物更有效。

[0226] 表22

[0227]

[0228] 在上表中，‘对照’指用生理盐溶液而非所述提取物处理的阳性对照组。

[0229] 表23

[0230]

[0231] 在上表中，‘对照’指用生理盐水而非所述提取物处理的阳性对照组。

[0232] 以下制备实施例中含有选自本发明的白芥籽、延胡索块茎、牵牛子和吕宋果种子的一或多种提取物。但是，所述制备实施例仅旨在以具体的方式对本发明进行解释，而非旨在以任意的方式对本发明的范围进行限制。

[0233] 制备实施例1 注射剂型的制备

[0234] 实施例1的提取物 100mg

[0235] 焦亚硫酸钠 3.0mg

[0236] 羟苯甲酯 0.8mg

[0237] 羟苯丙酯 0.1mg

[0238] 注射用蒸馏水 适量

[0239] 通过本领域已知的方法将所述成分混合并制成2ml的总体积。将所述混合物填充入2ml剂量的安瓿，灭菌从而制成注射剂形。

[0240] 制备实施例2 注射剂型的制备

[0241] 实施例2的提取物 10～30mg

[0242] 焦亚硫酸钠 3.0mg

[0243] 羟苯甲酯 0.8mg

[0244] 羟苯丙酯 0.1mg

[0245] 注射用蒸馏水 适量

[0246] 通过本领域已知的方法将所述成分混合并制成2ml的总体积。将所述混合物填充入2ml剂量的安瓿，灭菌从而制成注射剂形。

[0247] 制备实施例3 注射剂型的制备

[0248] 实施例3的提取物 100～300mg

[0249] 焦亚硫酸钠 3.0mg

[0250] 羟苯甲酯 0.8mg

[0251] 羟苯丙酯 0.1mg

[0252] 注射用蒸馏水 适量

[0253] 通过本领域已知的方法将所述成分混合并制成2ml的总体积。将所述混合物填充入2ml剂量的安瓿，灭菌从而制成注射剂形。

[0254] 制备实施例4 片剂的制备

[0255] 实施例1的提取物 100～300mg

[0256] 乳糖 100mg

[0257] 淀粉 100mg

[0258] 硬脂酸镁 适量

[0259] 将所述成分混合并根据本领域已知的片剂制备方法制成片剂。

[0260] 制备实施例5 片剂的制备

[0261] 实施例2的提取物 10～30mg

[0262] 乳糖 100mg

[0263] 淀粉 100mg

[0264] 硬脂酸镁 适量

[0265] 将所述成分混合并根据本领域已知的片剂制备方法制成片剂。

[0266] 制备实施例6 片剂的制备

[0267] 实施例3的提取物 100～1000mg

[0268] 乳糖 100mg

[0269] 淀粉 100mg

[0270] 硬脂酸镁 适量

[0271] 将所述成分混合并根据本领域已知的片剂制备方法制成片剂。

[0272] 制备实施例7 胶囊的制备

[0273] 实施例1的提取物 100～300mg

[0274] 乳糖 50mg

[0275] 淀粉 50mg

[0276] 滑石 2mg

[0277] 硬脂酸镁 适量

[0278] 将所述成分混合并根据本领域已知的胶囊制备方法填充入明胶胶囊从而制成胶囊。

[0279] 制备实施例8 胶囊的制备

[0280] 实施例2的提取物 10～30mg

[0281] 乳糖 50mg

[0282] 淀粉 50mg

[0283] 滑石 2mg

[0284] 硬脂酸镁 适量

[0285] 将所述成分混合并根据本领域已知的胶囊制备方法填充入明胶胶囊从而制成胶囊。

[0286] 制备实施例9 胶囊的制备

[0287] 实施例3的提取物 100～1000mg

[0288] 乳糖 50mg

[0289] 淀粉 50mg

[0290] 滑石 2mg

[0291] 硬脂酸镁 适量

[0292] 将所述成分混合并根据本领域已知的胶囊制备方法填充入明胶胶囊从而制成胶囊。

[0293] 制备实施例10 液体制剂的制备

[0294] 实施例1的提取物 100～300mg

[0295] 糖 20g

[0296] 异构化糖 20g

[0297] 柠檬香料 适量

[0298] 纯化水 使得所述液体制剂的总体积为100ml的量[0299] 根据本领域已知的液体制剂制备方法将所述成分混合，填充入100ml棕色瓶中，灭菌从而制备成液体制剂。

[0300] 制备实施例11 液体制剂的制备

[0301] 实施例2的提取物 10～30mg

[0302] 糖 20g

[0303] 异构化糖 20g

[0304] 柠檬香料 适量

[0305] 纯化水 使得所述液体制剂的总体积为100ml的量[0306] 根据本领域已知的液体制剂制备方法将所述成分混合，填充入100ml棕色瓶中，灭菌从而制备成液体制剂。

[0307] 制备实施例12 液体制剂的制备

[0308] 实施例3的提取物 100～1000mg

[0309] 糖 20g

[0310] 异构化糖 20g

[0311] 柠檬香料 适量

[0312] 纯化水 使得所述液体制剂的总体积为100ml的量[0313] 根据本领域已知的液体制剂制备方法将所述成分混合，填充入100ml棕色瓶中，灭菌从而制备成液体制剂。

[0314] 工业实用性

[0315] 本发明的述提取物或其混合物可用作用于预防和治疗胃肠道活动紊乱的药物组合物；并且由于其HT3受体拮抗作用和/或HT4受体激动作用，其还能够促进胃肠道活动而用作健康功能性食品。