一种抗糖尿病中药制剂

摘要

本发明属于药物技术领域，特别涉及一种抗糖尿病中药制剂，本中药制剂由翻白草总萜和茶叶多糖按一定的比例组合而成，经动物试验发现这种治疗糖尿病中药制剂能极为有效地降低链脲佐菌素诱发实验性II型糖尿病小鼠的摄食量、体重、血糖和血液中糖化血红蛋白的含量(P

权利要求

1.一种抗糖尿病中药制剂，其特征在于：由翻白草总萜和茶叶多糖组成，翻白草总萜和茶叶多糖的重量比为：1∶1～1∶10，该抗糖尿病中药制剂由以下步骤制备：第一步：翻白草总萜干粉末的制备

a)、将新鲜的翻白草洗净、晒干、切片和粉碎为25～50目；

b)、将粉碎好的翻白草加入80％乙醇回流提取3次，回收乙醇；浓缩提取物得膏状物；

c)、用90号石油醚溶解并悬浮上述膏状物进行脱脂工艺，离心沉淀，分离90号石油醚溶剂部分；

d)、完全将残留的90号石油醚挥发干净，取沉淀部分，干燥，得翻白草总萜干粉末；

第二步：茶叶多糖干粉末的制备

a)、在4℃～25℃温度条件下，用水浸泡茶叶1～24小时，浸泡后用2层沙布过滤除茶叶药渣；

b)、将过滤后的茶叶水用80％的乙醇沉淀茶叶多糖，并将茶叶多糖真空干燥，干燥温度为-140℃，得茶叶多糖干粉末；

第三步：抗糖尿病中药制剂的制备：

将上述第一步所得的翻白草总萜干粉末和第二步所得的茶叶多糖干粉末按比例混合均匀，得到抗糖尿病中药干粉。

说明书

一种抗糖尿病中药制剂

技术领域：

[0001] 本发明属于药物技术领域，特别涉及一种抗糖尿病中药制剂。背景技术：

[0002] 糖尿病(全名：diabetes mellitus)是由于遗传和环境因素相互作用，引起胰岛素绝对或相对分泌不足以及靶组织细胞对胰岛素敏感性降低，引起蛋白质、脂肪、水和电解质等一系列代谢紊乱综合征，其中以高血糖为主要标志。临床典型病例可出现多尿、多饮、多食、消瘦等表现，即“三多一少”症状。糖尿病是最常见的慢性病之一。随着人们生活水平的提高，人口老龄化以及肥胖发生率的增加，糖尿病的发病率呈逐年上升趋势。糖尿病在中国的发病率达到2％，据统计，中国已确诊的糖尿病患者达4000万，并以每年100万的速度递增。其中，I型糖尿病患者占10％，II型糖尿病患者占90％。I型糖尿病患者在确诊后的5年内很少有慢性并发症的出现，相反，II型糖尿病患者在确诊之前就已经有慢性并发症发生。据统计，有50％新诊断的II型糖尿病患者已存在一种或一种以上的慢性并发症，有些患者是因为并发症才发现患糖尿病的。1985年全球糖尿病患者估计约3000万人。到1995年该数字突破13500万。目前WHO预测2025年将上升到惊人的30000万。该现状使专用于糖尿病的健康护理资源不断增加(www.who.int)。美国大约有1570万人患有糖尿病，占人口总数5.9％，其中2/3患II型糖尿病。每天约有2200人被诊断为糖尿病。2001年大约有798,000人被诊断患有糖尿病(American Diabetes Association，www.diabetes.org)。在美国，糖尿病是疾病导致死亡的第六大原因。根据死亡证明资料，1996年因糖尿病导致198140人死亡。在美国，糖尿病是花费最多的健康问题之一。与糖尿病治疗直接相关的健康护理和其它花费，以及丧失生产力的代价，每年达98亿美元。1999年全球抗糖尿病药物销售总计约12.7亿美元，预期每年增长率为15％。

[0003] 糖尿病是一种难以治愈的慢性疾病。对糖尿病的治疗主要采取以饮食治疗和体育锻炼为基础，根据不同病情予以降糖药治疗的综合治疗措施。目前广泛采用的胰岛素、磺酰脲类、双胍类药物，虽降糖作用明显，但也存在诸多的副作用。所以目前急需研制和开发选择性强，无副作用，高效绿色抗糖尿病新药。发明内容：

[0004] 本发明的目的在于改善现有治疗糖尿病药物带来的诸多副作用，开发一种选择性强，无副作用，高效绿色抗糖尿病新药。

[0005] 为了实现本发明的目的，我们作了以下研究：我们在研究时发现翻白草是一种天然野生草药，它遍及全国各地，广泛分布于我国东北地区。据《本草纲目》记载，它有清热、解毒、止血、消肿之功效，近几年民间发现，用翻白草治疗糖尿病有一定的疗效。而茶作为中国的传统饮品由来已久，最近据学者报道，将茶叶冷浸一日，用其浸液口服，可以降低糖尿病患者的高血糖值。茶叶中含有促进胰岛素合成的物质，还含有能除去血液中糖分的多糖类物质。

[0006] 本发明的技术方案为

[0007] 1、原料配比：本发明抗糖尿病新药中药制剂是由翻白草总萜和茶叶多糖两味中药所组成。翻白草总萜和茶叶多糖的比例为：1:1～1:10或10:1。

[0008] 2、原料制备：

[0009] 1)原料翻白草总萜干粉末的制备

[0010] 原料翻白草总萜的制备工艺为：先将采集生长在湖北省的翻白草洗净，晒干，切片和粉碎，粉碎为25—50目。称取50克粉碎后的翻白草加500毫升80％乙醇回流提取3次，回收乙醇并浓缩提取物得膏状物，然后采用90号石油醚溶解并悬浮上述膏状物进行脱脂工艺，离心沉淀，分离90号石油醚溶剂部分，取沉淀部分并完全将残留的90号石油醚挥发干净，经干燥后得100毫克翻白草总萜干粉末。

[0011] 2)原料茶叶多糖干粉末的制备

[0012] 茶叶多糖干粉末的制备工艺为：在4℃～25℃条件下用2000毫升水浸泡50克茶叶1至24小时，浸泡完毕后用2层沙布过滤除茶叶药渣。然后用80％浓度的乙醇沉淀茶叶多糖并经真空茶叶多糖干燥(—140℃)得500毫克茶叶多糖干粉末。

[0013] 3)本发明药剂的制备

[0014] 称取100毫克翻白草总萜干粉末和500毫克茶叶多糖干粉末溶解在25毫升生理盐水中，经0.2微米孔径滤膜过滤、灭菌；制备成本发明抗糖尿病口服液。其浓度每毫升含4毫克翻白草总萜和20毫克茶叶多糖干重物。本发明抗糖尿病原药干粉末可作为糖尿病药物的原料药，与可药用载体或赋形剂制成抗糖尿病片剂、冲剂、胶囊制剂、滴丸制剂和口服液制剂。

[0015] 本发明的优点及积极效果：一种抗糖尿病中药制剂由翻白草总萜和茶叶多糖按一定的比例组合而成。经动物试验发现这种治疗糖尿病中药制剂能极为有效地降低链脲佐菌素诱发实验性II型糖尿病小鼠的摄食量、体重、血糖和血液中糖化血红蛋白的含量(P<0.01)，并提高葡萄糖耐受性。同时，这种治疗糖尿病中药制剂极为显著地降低四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠模型血糖水平。这些结果显示本发明中药制剂具有抗I型糖尿病和II型糖尿病的能力，并且治疗能力明显优于单一的翻白草总萜和单一的茶叶多糖，从试验中证明翻白草总萜和茶叶多糖联合使用具有强大的协同性抗糖尿病作用。附图说明：

[0016] 图1为本发明抗糖尿病口服液、翻白草总萜口服液和茶叶多糖口服液对II型糖尿病小鼠血糖的影响

[0017] 图2为本发明抗糖尿病口服液、翻白草总萜口服液和茶叶多糖口服液对小鼠糖耐量的影响

[0018] 图3为本发明抗糖尿病口服液、翻白草总萜口服液和茶叶多糖口服液对小鼠糖化血红蛋白的影响具体实施方式：

[0019] 下面是本发明的最佳实施例，通过实施例进一步说明本发明，并不是把本发明的实施范围限制于此。

[0020] 实施例1

[0021] 第一步：原料翻白草总萜干粉末的制备

[0022] 将新鲜的翻白草洗净、晒干、切片和粉碎为35目；称取50克粉碎后的翻白草加入500ml80％乙醇回流提取3次，回收乙醇；浓缩提取物得膏状物；用90号石油醚溶解并悬浮上述膏状物进行脱脂工艺，离心沉淀，分离90号石油醚溶剂部分；完全将残留的90号石油醚挥发干净，取沉淀部分，经干燥后得100毫克翻白草总萜干粉末。

[0023] 第二步：原料茶叶多糖干粉末的制备

[0024] 在温度为4℃温度条件下，用400ml冷水浸泡10克茶叶5小时，浸泡后用2层沙布过滤除茶叶药渣；将过滤后的茶叶水用80％的乙醇沉淀茶叶多糖，并将茶叶多糖真空干燥。干燥温度为-140℃，得100毫克茶叶多糖干粉末。

[0025] 第三步：抗糖尿病中药制剂的制备

[0026] 称取100毫克翻白草总萜干粉末和100毫克茶叶多糖干粉末将上述第一步所得的翻白草总萜干粉末和第二步所得的茶叶多糖干粉末按比例混合均匀，得到抗糖尿病中药干粉末，将抗糖尿病中药干粉末与药用载体或赋形剂制成片剂、冲剂、胶囊制剂、滴丸制剂和口服液剂型。

[0027] 实施例2

[0028] 第一步：原料翻白草总萜干粉末的制备

[0029] 将新鲜的翻白草洗净、晒干、切片和粉碎为25目；称取50克粉碎后的翻白草加入500ml80％乙醇回流提取3次，回收乙醇；浓缩提取物得膏状物；用90号石油醚溶解并悬浮上述膏状物进行脱脂工艺，离心沉淀，分离90号石油醚溶剂部分；完全将残留的90号石油醚挥发干净，取沉淀部分，经干燥后得100毫克翻白草总萜干粉末。

[0030] 第二步：原料茶叶多糖干粉末的制备

[0031] 在温度为4℃温度条件下，用2000ml冷水浸泡50克茶叶10小时，浸泡后用2层沙布过滤除茶叶药渣；将过滤后的茶叶水用80％的乙醇沉淀茶叶多糖，并将茶叶多糖真空干燥。干燥温度为-140℃，得500毫克茶叶多糖干粉末。

[0032] 第三步：抗糖尿病中药口服液的制备

[0033] 称取100毫克翻白草总萜干粉末和500毫克茶叶多糖干粉末，溶解在25毫升生理盐水中，经0.2微米孔径滤膜过滤、灭菌，制备成抗糖尿病口服液。其浓度每毫升含4毫克翻白草总萜和20毫克茶叶多糖干重物。

[0034] 实施例3

[0035] 第一步：原料翻白草总萜干粉末的制备

[0036] 将新鲜的翻白草洗净、晒干、切片和粉碎为50目；称取50克粉碎后的翻白草加入500ml80％乙醇回流提取3次，回收乙醇；浓缩提取物得膏状物；用90号石油醚溶解并悬浮上述膏状物进行脱脂工艺，离心沉淀，分离90号石油醚溶剂部分；完全将残留的90号石油醚挥发干净，取沉淀部分，经干燥后得100毫克翻白草总萜干粉末。

[0037] 第二步：原料茶叶多糖干粉末的制备

[0038] 在温度为10℃温度条件下，用4000ml冷水浸泡100克茶叶20小时，浸泡后用2层沙布过滤除茶叶药渣；将过滤后的茶叶水用80％的乙醇沉淀茶叶多糖，并将茶叶多糖真空干燥。干燥温度为-140℃，得500毫克茶叶多糖干粉末。

[0039] 第三步：抗糖尿病中药口服液的制备

[0040] 称取100毫克翻白草总萜干粉末和500毫克茶叶多糖干粉末，溶解在25毫升生理盐水中，经0.2微米孔径滤膜过滤、灭菌，制备成抗糖尿病口服液。其浓度每毫升含4毫克翻白草总萜和20毫克茶叶多糖干重物。

[0041] 对比研究：

[0042] 本发明抗糖尿病口服液，翻白草总萜口服液和茶叶多糖口服液对小鼠的急性毒性研究：对比样品制备：

[0043] 1)翻白草总萜口服液

[0044] 称取100毫克翻白草总萜干粉末溶解在25毫升生理盐水中，经0.2微米孔径滤膜过滤灭菌，从而制备成翻白草总萜口服液。其浓度每毫升含4毫克翻白草总萜干重物。

[0045] 2)茶叶多糖口服液

[0046] 称取500毫克茶叶多糖干粉末溶解在25毫升生理盐水中，经0.2微米孔径滤膜过滤灭菌，从而制备成茶叶多糖口服液。其浓度每毫升含20毫克的干重物。

[0047] 取六组8周龄的昆明小鼠(购买于南方医科大学动物研究中心)，第一组和第二组各10只(5只雄性和5只雌性)，分别以单次剂量1.2g/kg和多次剂量0.24g/kg(QD X15)本发明抗糖尿病口服液灌胃，然后分别观察1周和4周。第三组和第四组各10只(5只雄性和5只雌性)，分别以单次剂量1g/kg和多次剂量0.2g/kg(QDX15)翻白草总萜口服液，然后分别观察1周和4周。第五组和第六组各10只(5只雄性和5只雌性)，分别以单次剂量1g/kg和多次剂量0.2g/kg(QD X15)茶叶多糖口服液灌胃给予水提取物口服液，然后分别观察1周和4周。在此试验中，每两天称体重。试验结束后，将受试小鼠处死，进行病理分析。

[0048] 1、本发明抗糖尿病口服液、翻白草总萜口服液和茶叶多糖口服液对链脲佐菌素诱导II型糖尿病小鼠的影响研究：

[0049] 1)II型糖尿病小鼠模型的建立:26-28克体重的小鼠(购买于南方医科大学实验动物中心)先以普通饲料喂养1周以适应环境，从中随机选取足够数量生长正常的小鼠80只，饲喂高脂高糖饲料4周，然后腹腔注射购买于Sigma公司的链脲佐菌素(STZ)，每只小鼠的注射量分别为100mg/kg(链脲佐菌素稀释在0.05mol/L的柠檬酸注射溶液中)，同时继续饲喂高脂高糖饲料4周(高糖高脂饲料：基础饲料中加入10％蛋黄粉、10％熟猪油、1％胆固醇、0.5％脱氧胆酸钠)，模型对照组注射0.05mol/L的柠檬酸溶液，每周监测小鼠血糖值。以第4周测得值为准，选取血糖达到糖尿病级数并具有相似血糖水平的小鼠作为II型糖尿病模型小鼠。

[0050] 2)本发明抗糖尿病口服液、翻白草总萜口服液和茶叶多糖口服液对链脲佐菌素诱导II型糖尿病小鼠的影响研究：

[0051] 将模型小鼠随机分为A、B、C、D四组，每组10只，其中A组为模型对照组，每天每只小鼠灌胃0.2ml生理盐水，B、C、D三组分别每天每只灌胃0.2ml本发明抗糖尿病口服液(0.24g/kg体重)，翻白草总萜口服液(0.2g/kg体重)和茶叶多糖口服液(0.2g/kg体重)。各组小鼠连续灌胃36天，然后禁食过夜(15h)，眼球取血，测定各小鼠的血糖和糖化血红蛋白含量。在灌胃11天后，各组小鼠禁食过夜，眼内眦取血，测定血糖，然后各组小鼠按2g/kg体重腹腔注射葡萄糖水溶液，分别于注射后0、10、30、60、90、120分钟测定小鼠的血糖值，测定小鼠葡萄糖耐受性。

[0052] 2、本发明抗糖尿病口服液、翻白草总萜口服液和茶叶多糖口服液对链四氧嘧啶诱导I型糖尿病小鼠的影响研究：

[0053] 1)动物实验I型糖尿病模型的建立：26-28克体重的小鼠(购买于南方医科大学实验动物中心)，禁食16h，准备给予四氧嘧啶造模。四氧嘧啶溶液临用前配制，浓度为12mg/ml。给药方式为腹腔注射，剂量120mg/(kg体重)，一周后，于第8天断食3小时后，眼眶内眦采血，离心取上层血清在24小时内用葡萄糖氧化酶法测定血糖。取血糖值>12mmol/L的糖尿病模型小鼠分组进行本发明抗糖尿病口服液降血糖实验。

[0054] 2)动物实验分组及处理：取血糖值>12mmol/L的糖尿病模型小鼠40只，将模型小鼠随机分为A、B、C、D四组，每组10只，其中A组为模型对照组，每天每只小鼠灌胃0.2ml生理盐水，B、C、D三组分别每天每只灌胃0.2ml本发明抗糖尿病口服液(0.24g/kg体重)，翻白草总萜口服液(0.2g/kg体重)和茶叶多糖口服液(0.2g/kg体重)。正常小鼠10只作为对照组。给药方式为灌胃，每天1次，时间30天。30天后，测血糖值，条件和方法同前。30天内每周称各组小鼠空腹体重，观察体重变化。

[0055] 对比试验结果

[0056] 1、本发明抗糖尿病口服液，翻白草总萜口服液和茶叶多糖口服液对小鼠的急性毒性研究：

[0057] 取六组8周龄的昆明小鼠(购买于南方医科大学动物研究中心)，第一组和第二组各10只(5只雄性和5只雌性)，分别以单次剂量1.2g/kg和多次剂量0.24g/kg(QD X15)本发明抗糖尿病口服液灌胃，然后分别观察1周和4周。第三组和第四组各10只(5只雄性和5只雌性)，分别以单次剂量1g/kg和多次剂量0.2g/kg(QDX15)翻白草总萜口服液，然后分别观察1周和4周。第五组和第六组各10只(5只雄性和5只雌性)，分别以单次剂量1g/kg和多次剂量0.2g/kg(QD X15)茶叶多糖口服液灌胃给予水提取物口服液，然后分别观察1周和4周。在此试验中，均未观察到毒性，所有受试小鼠生长良好，无一死亡。因此给予本发明抗糖尿病口服液是具有很大开发前景的抗糖尿病新药。

[0058] 2、本发明抗糖尿病口服液，翻白草总萜口服液和茶叶多糖口服液对链脲佐菌素诱导II型糖尿病小鼠的影响研究：

[0059] 1)本发明抗糖尿病口服液，翻白草总萜口服液和茶叶多糖口服液对II型糖尿病小鼠小鼠血糖的影响：本发明抗糖尿病口服液，翻白草总萜口服液和茶叶多糖口服液对糖尿病小鼠血糖的影响结果见图1。由图中可见，本发明抗糖尿病口服液，翻白草总萜口服液和茶叶多糖口服液灌胃36天后，本发明抗糖尿病口服液组(B组)，翻白草总萜口服液组(C组)和茶叶多糖口服液组(D组)与模型对照组(A组)相比较发现，A组小鼠血糖有轻微的增加，但喂食前后差异无显著性(P>0.05)；B、C、D三组小鼠喂食前后血糖浓度有显著降低(P<0.01)，且B组较C、D组小鼠血糖下降更低，之间差异有显著(P<0.01)。

[0060] 2)本发明抗糖尿病口服液，翻白草总萜口服液和茶叶多糖口服液对小鼠糖耐量的影响：本发明抗糖尿病口服液，翻白草总萜口服液和茶叶多糖口服液对糖尿病小鼠糖耐量的影响见图2。小鼠注射葡萄糖后120分钟内，B、C、D三组小鼠血糖浓度显著低于A组(P<0.01)，且B组最低。

[0061] 3)本发明抗糖尿病口服液，翻白草总萜口服液和茶叶多糖口服液对小鼠糖化血红蛋白的影响：本发明抗糖尿病口服液，翻白草总萜口服液和茶叶多糖口服液对糖尿病小鼠糖化血红蛋白的影响见图3。B、C、D三组小鼠糖化血红蛋白的含量均显著低于A组(P<0.01)，而且B组最低(P>0.05)。以上这些结果按示本发明抗糖尿病口服液是一种很有前景的抗痛风新药临床侯选者，其抗II型糖尿病明显优于单一的翻白草总萜口服液和单一的茶叶多糖口服液。

[0062] 3、本发明抗糖尿病口服液，翻白草总萜口服液和茶叶多糖口服液对链四氧嘧啶诱导I型糖尿病小鼠的影响研究：

[0063] 表1显示本发明抗糖尿病口服液，翻白草总萜口服液和茶叶多糖口服液组与糖尿病模型组比较，血糖降低差异有统计学意义(P<0.01)，而且本发明抗糖尿病口服液组降血糖能力最强。实验期间，通过对动物体重的观察可知，糖尿病模型组动物体重增长缓慢，其余各组动物体重均稳定增长，但各组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)，可认为翻白草总萜和茶叶多糖对糖尿病小鼠的体重没有影响。这一结果进一步证明本发明抗糖尿病口服液是一种极为有效的治疗I型糖尿病的新药候选者。

[0064] 表1：本发明抗糖尿病口服液，翻白草总萜口服液和茶叶多糖口服液对链四氧嘧啶诱导I型糖尿病小鼠的影响(X±S)对比列表

[0065]组别 动物数 实验前 实验后
正常对照组 15 7.7±1.2 8.6±1.7
阴性对照组(A) 15 17.1±3.1 15.8±2.3
本发明抗糖尿病口服液(B) 15 17.0±2.5 8.5±1.9
翻白草总萜口服液 15 16.9±2.6 13.2±1.71
茶叶多糖口服液 15 16.8±3.1 11.3±2.1

[0066] 以上所述仅是本发明的较佳实施方式，故凡依本发明专利申请范围所述的构造、特征及原理所做的等效变化或修饰，均包括于本发明专利申请范围内。