一种地衣芽孢杆菌202及其应用

摘要

本发明公开了一种地衣芽孢杆菌202，Bacillus？licheniformis202，于2007年7月2日在湖北武汉武昌珞珈山武汉大学中国典型培养物保藏中心保藏，保藏号为CCTCC？NO：M207093。本发明同时公开了其制备方法以及应用，所述地衣芽孢杆菌202菌株经平板对峙、盆栽试验筛选获得，能够有效抑制香蕉枯萎病菌的生长，抑菌谱广，对棉花枯萎病菌、棉花黄萎病菌、西瓜枯萎病菌、番茄枯萎病菌、弯孢叶斑病菌或香蕉炭疽病菌等多种病原真菌都有拮抗作用，环境安全性好，具有良好的开发应用前景。

权利要求

1.一种地衣芽孢杆菌202，于2007年7月2日在湖北武汉武昌珞珈山武汉大学中国典型培养物保藏中心保藏，保藏号为CCTCC NO：M207093。

2.权利要求1所述地衣芽孢杆菌202的应用，其特征在于对香蕉枯萎病菌4号小种的平板拮抗作用。

3.权利要求1所述地衣芽孢杆菌202的应用，其特征在于防止香蕉植株主根部及维管束褐化或腐烂方面的应用。

4.权利要求1所述地衣芽孢杆菌202的应用，其特征在于对番茄枯萎病菌、玉米弯孢叶斑病菌、胶孢炭疽病菌、棉花黄萎病菌、小麦赤霉病菌或西瓜枯萎病菌的拮抗作用。

说明书

一种地衣芽孢杆菌202及其应用

技术领域

[0001] 本发明涉及植物保护领域，尤其涉及一种内生生防菌株，具体地说涉及一种高效防治香蕉枯萎病的地衣芽孢杆菌202及应用。

背景技术

[0002] 香蕉枯萎病是由尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusarium oxysporum f.sp.cubense)侵染引起的一种毁灭性病害，是香蕉生产的毁灭性土传病害。病原菌从受伤的根茎侵入，通过维管束向假茎及叶部蔓延，堵塞木质部导管，直至植株枯萎死亡。香蕉枯萎病菌是土壤习居菌，其厚垣孢子能够在土壤中存活8～10年。香蕉枯萎病在在珠江三角洲香蕉产区的多个县市均有分布，近年有迅速发展的趋势。该病病园病株率一般约为10％～40％，严重的达90％以上，以致蕉园丢荒，危害极大。

[0003] 目前对香蕉枯萎病的防治尚无理想药剂和抗病菌种，一些栽培管理措施只能起到局部的控制作用，寻找一种经济、安全、有效的防治方法是当务之急，近年来，根际有益细菌的研究为香蕉枯萎病的生物防治提供了新途径，许多根际有益细菌也能够诱导植物产生系统抗性，使植物获得广谱抗病能力。根际有益细菌诱导植物产生的防护作用安全而有效，在植物病害生物防治中具有重要的应用价值。

[0004] 从香蕉植株内分离筛选获得对香蕉枯萎病菌具有拮抗作用的生防细菌菌株，对香蕉枯萎病的防治具有重要意义，但目前相关技术仍旧很薄弱甚至空白。

发明内容

[0005] 本发明的目的是针对现有技术的空白，提供一种地衣芽孢杆菌202，是一种从香蕉植株内分离筛选获得对香蕉枯萎病菌具有拮抗作用的生防细菌菌株，低浓度下能够有效抑制香蕉枯萎病菌的生长，对香蕉枯萎病的防治具有重要意义。

[0006] 本发明的另一个目的是提供了所述高效防治香蕉枯萎病的地衣芽孢杆菌202的制备方法。

[0007] 本发明还有一个目的是提供了所述高效防治香蕉枯萎病的地衣芽孢杆菌202在防止香蕉病灾害方面的多种应用。

[0008] 本发明的技术方案是提供一种高效防治香蕉枯萎病的地衣芽孢杆菌202，所述地衣芽孢杆菌202，Bacillus licheniformis 202，于2007年7月2日在湖北武汉武昌珞珈山武汉大学中国典型培养物保藏中心保藏，保藏号为CCTCC NO：M207093。

[0009] 所述高效防治香蕉枯萎病的地衣芽孢杆菌202经平板对峙筛选获得。

[0010] 本发明还提供了所述的高效防治香蕉枯萎病的地衣芽孢杆菌202的应用，其一是对香蕉枯萎病菌4号小种的平板拮抗作用。

[0011] 其二是防止香蕉植株主根部及维管束褐化或腐烂方面的应用。

[0012] 其三是对番茄枯萎病菌、玉米弯孢叶斑病菌、胶孢炭疽病菌、棉花枯萎病菌、棉花黄萎病菌、小麦赤霉病菌或西瓜枯萎病菌的拮抗作用。

[0013] 本发明的有益效果是：

[0014] (1)地衣芽孢杆菌202为植物内生菌，对香蕉枯萎病菌抑制作用强，对多种病原真菌具有拮抗作用，具有拮抗细菌在植物病害生物防治中所起到的非常重要的作用，例如种类和数量众多，在植物根际根内、根际大量存在；对病原菌的作用方式多种多样；繁殖速度快等优点，本发明通过大量实验证明地衣芽孢杆菌202菌株能够有效抑制香蕉枯萎病菌的生长，抑菌谱广，对棉花枯萎病菌、棉花黄萎病菌、西瓜枯萎病菌、番茄枯萎病菌、弯孢叶斑病菌、香蕉炭疽病菌等多种病原真菌都有拮抗作用；环境安全性好，具有良好的开发应用前景，尤其是对香蕉枯萎病的防治具有重要意义。

[0015] (2)本发明所述菌株培养条件简单、容易保存，易于工业化生产，具有良好的开发应用前景。

附图说明

[0016] 图1地衣芽孢杆菌202对FOC4菌丝的抑制作用

[0017] 图2接种30天后香蕉苗维管束症状

[0018] 图3地衣芽孢杆菌202对番茄枯萎病菌的抑制作用

[0019] 图4地衣芽孢杆菌202对胶胞炭疽菌的抑制作用

[0020] 图5地衣芽孢杆菌202对香蕉炭疽病菌的抑制作用

[0021] 图6地衣芽孢杆菌202对棉花枯萎病的抑制作用

具体实施方式

[0022] 下面结合具体实施例及附图对本发明作进一步详细的描述。

[0023] 所述地衣芽孢杆菌202，Bacillus licheniformis 202，于2007年7月2日在湖北武汉武昌珞珈山武汉大学中国典型培养物保藏中心保藏，保藏号为CCTCC NO：M207093。

[0024] 实施例1 地衣芽孢杆菌202对香蕉枯萎病菌4号小种FOC4的平板拮抗作用实验[0025] 在马铃薯蔗糖培养基PDA平板中央接入直径为5mm的FOC4菌丝块，随后在等距离FOC4菌丝块的三角上放入直径为5mm的灭菌滤纸片，每片滤纸片上接入地衣芽孢杆菌202培养液10μL，以不接地衣芽孢菌202培养液的平板为对照，25～28℃培养箱中培养5～7天，测定抑菌圈直径，有附图1可见地衣芽孢杆菌202对香蕉枯萎病菌抑制作用强。

[0026] 实施例2 地衣芽孢杆菌202防止香蕉植株主根部及维管束褐化或腐烂实验，温室盆栽防效。

[0027] 选择株高15cm左右的巴西香蕉幼苗，进行3种不同处理：(1)清水健株对照：香蕉苗根部浸泡在无菌水中后直接移栽在营养钵中生长；(2)将香蕉苗根部浸泡在地衣芽孢杆菌202培养液中30min后，移栽至营养钵中，再将20mL的FOC4孢子悬浮液灌根接入营养钵土壤中；(3)发病对照：香蕉苗根部灌根接种20mLFOC4的孢子悬浮液，不接种地衣芽孢杆菌202培养液。以上处理，每处理组20株。之后26℃培养，分别于接种后10d、20d、30d调查发病率和病情指数，三次重复。与对照相比，地衣芽孢杆菌202能有效地降低香蕉枯萎病的发生程度，接种30d后效果最明显，根部及维管束褐化、腐烂程度明显减轻，见附图2，其中A：清水接种对照，无褐变、无腐烂现象；D、E：同时接种地衣芽孢杆菌202接种液和FOC4孢子悬浮液，轻微褐变、无腐烂；F、G、H、I：只接种FOC4孢子悬浮液，严重褐变、腐烂。

[0028] 实施例3 地衣芽孢杆菌202对多种病原菌的拮抗作用

[0029] 采用平板对峙法，测试地衣芽孢杆菌202对番茄枯萎病菌、玉米弯孢叶斑病菌、胶孢炭疽病菌、棉花枯萎病菌、棉花黄萎病菌、小麦赤霉病菌、西瓜枯萎病菌等7种病原菌的拮抗效果，在PDA平板中央接入直径为5mm的靶标菌丝块，随后在等距离FOC4菌丝块的三角上放入直径为5mm的灭菌滤纸片，每片滤纸片上接入地衣芽孢杆菌202培养液10μL，以不接地衣芽孢菌202培养液的平板为对照，28℃培养箱中培养5～7d，测定抑菌圈直径。地衣芽孢杆菌202抑菌谱较广，对棉花枯萎病菌等多种病原真菌具有拮抗作用，见表1以及附图3。从附图3中可看到地衣芽孢杆菌202对番茄枯萎病菌的抑制作用；附图4中可观察到地衣芽孢杆菌202对胶胞炭疽菌的抑制作用；附图5中可观察到地衣芽孢杆菌202对香蕉炭疽病菌的抑制作用；附图6中可观察到地衣芽孢杆菌202对棉花枯萎病的抑制作用。

[0030] 表1：地衣芽孢杆菌202对多种病原菌的抑制作用

[0031]

[0032]

[0033] -：无抑制作用 +：抑菌圈直径1～4mm

[0034] ++：抑菌圈直径4～8mm +++：抑菌圈直径>8mm