用于治疗C型肝炎病毒的利托那韦组合物及其用途

摘要

本发明公开了具有改进的药物(或其药学可接受的盐、酯、前药)药代动力学的组合物与方法，所述药物通过细胞色素P450单氧化酶代谢，该组合物与方法包含共同施用利托那韦或其药学可接受的盐、酯、前药。

权利要求

1.一种共同施用的药物组合物，其包括3-[2-(3-叔-丁基-脲基)-3，3-二甲基-丁酰]-6，6-二甲基-3-氮杂-二环[3.1.0]己烷-2-羧酸(2-氨基甲酰-1-环丁基甲基-2-氧-乙基)-酰胺(SCH 503034)或其盐与利托那韦或其盐。

2.一种改进3-[2-(3-叔-丁基-脲基)-3，3-二甲基-丁酰]-6，6-二甲基-3-氮杂-二环[3.1.0]己烷-2-羧酸(2-氨基甲酰-1-环丁基甲基-2-氧-乙基)-酰胺(SCH 503034)或其盐之药代动力学的共同施用的药物组合物，其包括共同施用的3-[2-(3-叔-丁基-脲基)-3，3-二甲基-丁酰]-6，6-二甲基-3-氮杂-二环[3.1.0]己烷-2-羧酸(2-氨基甲酰-1-环丁基甲基-2-氧-乙基)-酰胺(SCH 503034)或其盐与利托那韦或其盐。

3.一种权利要求1所述的药物组合物，其还包括一种或多种选自由干扰素α-2a、干扰素α-2b、聚乙二醇化干扰素、聚乙二醇化干扰素α-2a、聚乙二醇化干扰素α-2b、复合干扰素α、聚乙二醇化复合干扰素α、融入蛋白质的干扰素、利巴韦林、以及维雷米啶组成的组的药物。

4.一种包括3-[2-(3-叔-丁基-脲基)-3，3-二甲基-丁酰]-6，6-二甲基-3-氮杂-二环[3.1.0]己烷-2-羧酸(2-氨基甲酰-1-环丁基甲基-2-氧-乙基)-酰胺(SCH

503034)或其盐与利托那韦或其盐的组合物在制备治疗丙型肝炎的药物中的用途。

5.一种包括3-[2-(3-叔-丁基-脲基)-3，3-二甲基-丁酰]-6，6-二甲基-3-氮杂-二环[3.1.0]己烷-2-羧酸(2-氨基甲酰-1-环丁基甲基-2-氧-乙基)-酰胺(SCH

503034)或其盐与利托那韦或其盐，并进一步包括一种或多种选自由干扰素α-2a、干扰素α-2b、聚乙二醇化干扰素、聚乙二醇化干扰素α-2a、聚乙二醇化干扰素α-2b、复合干扰素α、聚乙二醇化复合干扰素α、融入蛋白质的干扰素、利巴韦林、以及维雷米啶组成的组的药物的组合物在制备治疗丙型肝炎的药物中的用途。

6.一种包括3-[2-(3-叔-丁基-脲基)-3，3-二甲基-丁酰]-6，6-二甲基-3-氮杂-二环[3.1.0]己烷-2-羧酸(2-氨基甲酰-1-环丁基甲基-2-氧-乙基)-酰胺(SCH

503034)或其盐与利托那韦或其盐的组合物在制备抑制丙型肝炎的药物中的用途。

说明书

用于治疗C型肝炎病毒的利托那韦组合物及其用途

[0001] 相关申请

[0002] 本申请要求2006年3月6日提交、名称为“用于治疗C型肝炎病毒的利托那韦组合物及其用途”的美国专利申请系列NO.60/779,501的优先权。

[0003] 发明背景

[0004] C型肝炎是一种感染了全世界大约150-200百万患者的血液传染病。C型肝炎是一种由肝炎病毒HCV(C型肝炎病毒)引起的病毒性疾病。HCV的感染导致肝脏炎症，该炎症能最终导致肝硬化和肝癌。虽然许多患者未见有关感染C型肝炎病毒的症状，但它却是美国国内肝移植的主要原因。

[0005] 尽管科学上发现A型和B型肝炎病毒已有几十年，但C型肝炎病毒的发现直至1980年代末才被医学和科学机构公开。该发现确立了大多数输血后肝炎病例不是由A型或B型肝炎病毒，而是由新发现的C型肝炎病毒所致。由于C型肝炎病毒的发现，找到治疗病毒和弄清楚病毒进行非结构化与复制过程的方法的需求随之增加。

[0006] HCV是黄病毒家族中一种小型的、包膜的、单链的、RNA阳性病毒。HCV主要在肝细胞中复制。HCV粒子在肝细胞表面与受体结合并随之进入细胞。RNA基因组定义了含有大约3000个氨基酸的单链多肽。

[0007] C型肝炎病毒(HCV)的治疗方法

[0008] 存在若干不同类型的HCV治疗方法。最常见的治疗方法之一是采用α-干扰素和利巴韦林的组合。即便是这样的治疗，仍有很多患者的病毒活性未见减少。相应地，对于治疗HCV感染的新型有效治疗方法的研发需求却显然是长期受关注且悬而未决的。

[0009] 发明人在此研发出具有改进的药代动力学的HCV药物(或其药学可接受的盐、酯、前药)的组合物和方法，所述HCV药物通过细胞色素P450单氧化酶代谢，该组合物和方法包括共同施用利托那韦或其药学可接受盐、酯、前药与所述HCV化合物。

[0010] 发明概述

[0011] 根据本发明，公开了具有改进的药代动力学的药物(或其药学可接受的盐、酯、前药)的组合物和方法，所述药物通过细胞色素P450单氧化酶代谢，该组合物和方法包括共同施用的利托那韦或其药学可接受盐、酯、前药。

[0012] 图例说明

[0013] 图1显示VX-950和SCH503034的结构与化学名称。

[0014] 图2显示在大鼠体内共同施用利托那韦时血浆中VX-950水平的提高。

[0015] 图3显示在大鼠体内共同施用利托那韦时血浆中SCH503034水平的提高。

[0016] 发明详述

[0017] 根据本发明，公开了具有改进的药代动力学的药物(或其药学可接受的盐、酯、前药)的组合物和方法，所述药物通过细胞色素P450单氧化酶代谢，该组合物和方法包括共同施用的利托那韦或其药学可接受盐、酯、前药。

[0018] “共同施用的”或“共同施用”是指治疗剂可被配制成在同一时间或不同时间给药的单独的组合物，或者可选择地，治疗剂可联合配制并作为单一组合物给药。

[0019] 通过细胞色素P450单氧化酶代谢并且与利托那韦共同施用有益的药物包括2-(2-{2-环己基-2[(异烟酰胺-2-羰基)-氨基]-乙酰氨基)}-3，3-二甲基-丁酰)-八氢-环戊烷并[c]吡咯-1-羧基(1-环丙基氨基乙二酰-丁基)酰胺(VX-950)，和3-[2-(3-叔-丁基-脲基)-3，3-二甲基-丁酰]-6，6-二甲基-3-乙酰唑胺-二环[3.1.0]己烷-2-羧酸(2-氨基甲酰-1-环丁基甲基-2-氧-乙基)-酰胺(SCH503034)。

[0020] 在本发明的一个优选实施方案中，公开了一种组合物，其中2-(2-{2-环己基-2[(异烟酰胺-2-羰基)-氨基]-乙酰氨基)}-3，3-二甲基-丁酰)-八氢-环戊烷并[c]吡咯-1-羧基(1-环丙基氨基乙二酰-丁基)酰胺(VX-950)与利托那韦共同施用。

[0021] 在本发明的另一个优选实施方案中，公开了一种通过共同施用2-(2-{2-环己基-2[(异烟酰胺-2-羰基)-氨基]-乙酰氨基)}-3，3-二甲基-丁酰)-八氢-环戊烷并[c]吡咯-1-羧基(1-环丙基氨基乙二酰-丁基)酰胺(VX-950)与利托那韦从而改进HCV化合物之药代动力学的方法。

[0022] 在本发明的另一个优选实施方案中，公开了一种组合物，其中3-[2-(3-叔-丁基-脲基)-3，3-二甲基-丁酰]-6，6-二甲基-3-乙酰唑胺-二环[3.1.0]己烷-2-羧酸(2-氨基甲酰-1-环丁基甲基-2-氧-乙基)-酰胺(SCH503034)与利托那韦共同施用。

[0023] 在本发明的另一个优选实施方案中，公开了一种通过共同施用3-[2-(3-叔-丁基-脲基)-3，3-二甲基-丁酰]-6，6-二甲基-3-乙酰唑胺-二环[3.1.0]己烷-2-羧酸(2-氨基甲酰-1-环丁基甲基-2-氧-乙基)-酰胺(SCH503034)与利托那韦从而改进HCV化合物之药代动力学的方法。

[0024] 在本发明的另一个优选实施方案中，公开了一种抑制哺乳动物体内HCV的方法，包括共同施用2-(2-{2-环己基-2[(异烟酰胺-2-羰基)-氨基]-乙酰氨基)}-3，3-二甲基-丁酰)-八氢-环戊烷并[c]吡咯-1-羧基(1-环丙基氨基乙二酰-丁基)酰胺(VX-950)或其盐、酯、前药与利托那韦或其盐、酯、前药。

[0025] 在本发明的另一个优选实施方案中，公开了一种抑制HCV的方法，包括共同施用3-[2-(3-叔-丁基-脲基)-3，3-二甲基-丁酰]-6，6-二甲基-3-乙酰唑胺-二环[3.1.0]己烷-2-羧酸(2-氨基甲酰-1-环丁基甲基-2-氧-乙基)-酰胺(SCH503034)或其盐、酯、前药与利托那韦或其盐、酯、前药。

[0026] 利托那韦即(2S，3S，5S)-5-(N-甲基-N-((2-异丙基-4-噻唑)甲基)氨基)羰基)-L-valinyl)氨基)-2-(N-((5-噻唑)甲氧羰基)氨基)-1，6-联苯-3-羟基己烷。利托那韦可通过1994年7月7日公开的PCT专利申请No.WO94/14436和1996年7月30日授权的US5541206所描述的方法合成。

[0027] 2-(2-{2-环己基-2[(异烟酰胺-2-羰基)-氨基]-乙酰氨基)}-3，3-二甲基-丁酰)-八氢-环戊烷并[c]吡咯-1-羧基(1-环丙基氨基乙二酰-丁基)酰胺(VX-950)，可根据2002年3月7日公开的PCT申请WO02/18369所描述的方法合成。

[0028] 3-[2-(3-叔-丁基-脲基)-3，3-二甲基-丁酰]-6，6-二甲基-3-乙酰唑胺-二环[3.1.0]己烷-2-羧酸(2-氨基甲酰-1-环丁基甲基-2-氧-乙基)-酰胺(SCH503034)，可根据公开日为2003年11月20日的专利申请US2003/0216325所描述的方法合成。

[0029] 本发明的组合物用于治疗哺乳动物尤其是人体内的HCV感染。相应地，利托那韦可与VX-950或SCH503034共同施用以治疗HCV感染。进一步地，本发明组合物还可与一种或多种抗病毒剂共同施用，包括但不限于，侵入抑制剂(entry inhibitors)，蛋白酶抑制剂，聚合酶抑制剂，等等。特别地，本发明可与抗病毒剂例如干扰素和利巴韦林共同施用。适于与本发明利托那韦/VX950和利托那韦/SCH503034组合物使用的干扰素的例子包括但不限于，干扰素α-2a、干扰素α-2b、聚乙二醇化干扰素、聚乙二醇化干扰素α-2a、聚乙二醇化干扰素α-2b、复合干扰素α、聚乙二醇化复合干扰素α、融入蛋白质的干扰素例如但不限于融入人血清白蛋白。本发明的利托那韦/VX950和利托那韦/SCH503034组合物还可与其他抗病毒剂共同施用。在一个优选实施方案中，本发明的利托那韦/VX950和利托那韦/SCH503034组合物可与一种或多种药物例如利巴韦林和维雷米啶(viramidine)共同施用。

[0030] 下面的实施例是利托那韦改进HCV化合物药代动力学的能力的例证。

[0031] 实施例1.人肝微粒体内VX-950和SCH503034代谢的抑制

[0032] 在Tecan EVO机器人系统中进行液体处理。将1μM浓度的终试物与0.5mg/ml微粒体蛋白质和1mM NADPH进行三份相同的温孵(triplicate incubations)。在50mM的pH7.4磷酸缓冲液中备好总人肝微粒体(1mg/ml蛋白质)和NADPH辅助因子(2mM)。在DMSO中备好VX-950或SCH503034原液(10mM)并随后以1：1的乙腈/水稀释至100μM。将化合物溶液加入2ml96孔培养板中含有0，0.8或8μM利托那韦的NADPH辅助因子溶液里。所得溶液加入在37℃下预温孵10分钟的微粒体(1：1)中。Tecan4-slot温孵器37℃下在96孔培养板中温孵样品(0.1ml)0，10，20和30分钟。在每一个时间点，机器人臂移去一个复制板并且通过在每个孔中加入1个体积(100μl)具有内标物(0.05μM丁螺环酮)的乙腈来中止反应。所有的培养板以3500rpm离心30分钟，并将上清液转移到96孔注射板(injection plate)中。注射板4℃贮存至被分析。

[0033] LC-MS/MS分析：样品以正相模式采用具有Shimadzu HPLC系统的PE/Sciex API4000Q-Trap质谱仪的turbospray离子源进行分析。将样品(5μL)注入购自Analytical Sales and Services Inc.(Pompton Plains，NJ)的Lancer C18柱(5μm，30×2.1mm)，并按梯度分离：流速0.5mL/min；初始条件7.5％B，2.5％C，0.4min增长至30％和10％C。经过0.5min，B和C的百分比分别迅速增长至74和21％，并维持0.7min，然后经0.1min降回初始条件，并维持0.4min，总操作时间为2.5min。流动相A是具有10mM醋酸铵和60μL/L醋酸的95/5水/甲醇(v/v)。流动相B是含有10mM醋酸铵和60μL/L醋酸的甲醇。流动相C是乙腈。

[0034] 采用上述条件，利托那韦的存在以下列方式抑制了VX-950和SCH503034的代谢，如表1所示：

[0035]

[0036] 实施例2.大鼠肝微粒体内VX-950和SCH503034代谢的抑制

[0037] 采用实施例1的方法，但将人肝微粒体替换为大鼠肝微粒体，利托那韦的存在按下列方式抑制了VX-950和SCH503034的代谢，如表2所示：

[0038]

[0039] 实施例3.共同施用利托那韦后，大鼠VX-950血浆水平的提高

[0040] Sprague-Dawley大鼠(每组n＝3)静脉或口服5mg/kg单一剂量后，测量VX-950的药代动力学特征；另外一组的三只大鼠给予5mg/kg口服剂量的VX-950，与5mg/kg口服剂量的利托那韦共同施用。在10％DMSO：90％PEG-400溶媒中备好用于口服(±利托那韦)和静脉施用的5mg/mlVX-950(±利托那韦)溶液。大鼠在异氟烷麻醉下从颈静脉缓慢(～1分钟)1mL/kg剂量静脉给药；用灌饲法1ml/kg剂量(±利托那韦)口服给药。在给药0.1(仅IV)，0.25，0.5，1，1.5，2，3，4，6和8小时后从各动物的尾静脉获得一系列血样。采样后将加肝素的样品立即置于冰上。血浆通过离心分离并冷冻贮存以供随后的分析。

[0041] 母体药物(和利托那韦)的浓度在血浆样品的液-液提取后通过HPLC-MS/MS测定。在采用Turbo Ion Spray的Sciex API2000TM生物分子质量分析仪上进行分析。标的化TM合物和内标物的峰面积使用SciexMacQuan 软件测定。校准曲线通过用比例对理论浓度的最小二乘线性回归由加入血浆的标准品峰面积比(母体药物/内标物)而获得。最大血浆浓度(Cmax)和到达最大血浆浓度的时间(Tmax)直接通过观察血浆浓度-时间数据读出。血浆浓度数据通过采用WinNonlin交由多幂次方曲线拟合。给药后0至t小时(最后测得血浆浓度的时间点)血浆浓度-时间曲线以下的面积(AUC0-t)通过使用血浆-时间图的线性梯形法计算得出。趋近无穷的剩余面积，由最终测量的血浆浓度(Ct)除以最终消除速率常数(β)而测得，其被加入AUC0-t以得到曲线以下的全部面积(AUC0-∞)。体积分布，Vc，通过用剂量除以零时(C0)的血浆浓度而被估算。稳定状态的体积分布，Vss，作为血浆清除率(CLp)和平均驻留时间(MRT)的一个结果而被估算；最终相的体积分布，Vβ，由血浆清除率值(CLp)除以血浆清楚速率常数(β)得到。生物利用度通过用口服剂量的剂量标准化AUC0-∞除以由静脉剂量得到的相应值而算出。

[0042] 如下述图2所示，得到的下列平均(±标准差)血浆水平，表明共同施用利托那韦显著地提高了VX-950的血浆水平：

[0043] 得到下列平均(±标准平均偏差，n＝3)药代动力学参数：

[0044]

[0045] Mean(±SEM，n＝3)；t1/2(hr)；Vc(L/kg)；Vβ(L/kg)；Clp(L/hr·kg)；AUC(μg·hr/ml)。

[0046]

[0047] Mean(±SEM，n＝3)；t1/2(hr)；AUC(μg·hr/ml)；Cmax(μg/ml)；Tmax(hr)；F(％)；

[0048] 0-8hr AUC.PO+＝VX-950的口服溶液剂量+5mg/kg剂量的利托那韦；

[0049] nf-无法估算血浆清除的半衰期。

[0050] 实施例4.共同施用利托那韦后，大鼠SCH503034血浆水平的提高

[0051] 采用实施例3的方法，但是用SCH503034替换VX-950，如下面图3所示，获得下列平均(±标准差)血浆水平，表明共同施用利托那韦显著提高了SCH503034的血浆水平。

[0052] 得到下列平均(±标准平均偏差，n＝3)药代动力学参数：

[0053]

[0054] Mean(±SEM，n＝3)；t1/2(hr)；Vc(L/kg)；Vβ(L/kg)；Clp(L/hr·kg)；AUC(μg·hr/ml)。

[0055]

[0056] Mean(±SEM，n＝3)；t1/2(hr)；AUC(μg·hr/ml)；Cmax(μg/ml)；Tmax(hr)；F(％)；*
0-8hr AUC.

[0057] PO+＝SCH503034的口服溶液剂量+5mg/kg剂量的利托那韦；

[0058] nf-无法估算血浆清除的半衰期。