一种宠物用活性乳酸菌饮料及其制备方法

摘要

本发明公开了一种宠物用活性乳酸菌饮料及其制备方法，所述乳酸菌饮料包含：1×109-1×1010CFU/100ml的乳酸菌、0.3-1％的乳化稳定剂、0.1-1％的增稠剂、0.1-1％的苯甲酸钠、0.2-1％的酸度调节剂、8-20％的乳糖、1-5％的香精，其余为纯净水。本发明还提供了所述的乳酸菌饮料在调节宠物肠道内有益微生物菌落的平衡、降低宠物体内有毒发酵产物及有害细菌酶的产生、调理宠物胃肠消化能力、调节机体免疫系统，提高宠物免疫力以及促进宠物体质中的用途。

权利要求

9 10

1.一种宠物用活性乳酸菌饮料，包括1×10-1×10 CFU/100ml的乳酸菌，其余各成分质量百分比含量为：0.3-1％的乳化稳定剂、0.1-1％的增稠剂、0.1-1％的苯甲酸钠、0.2-1％的酸度调节剂、8-20％的乳糖、0.5-3％的香精，其余为纯化水；该宠物用活性乳酸菌饮料的制备方法包括以下步骤：1)将乳化稳定剂、乳糖混合好后，用70-80℃的纯化水溶解完全，保温30分钟，然后冷却到30℃以下；

2)将冷却好的乳化稳定剂和乳糖溶液倒入搅拌均匀的乳酸菌中，再进行搅拌使之均匀，加入苯甲酸钠；

3)将酸度调节剂和纯化水配成3-5％的溶液，再慢慢加入乳酸菌中边加边搅拌；

4)用香精调香，加入增稠剂进行调理；

5)在压力为16-25MPa的高压均质机中进行高压均质处理；

6)将上述物料进行灭菌处理，冷却至20-30℃以下，在无菌车间灌装，最后在洁净车间中包装即得；

7)将制好的活性乳酸菌饮料置于2-8℃下冷藏保存。

2.根 据 权 利 要 求1 所 述 的 一 种 宠 物 用 活 性 乳 酸 菌 饮 料，包 括9 9

1.2×10-1.6×10CFU/100ml的乳酸菌，其余各成分质量百分比含量为：乳化稳定剂0.45-0.65％、增稠剂0.33-0.55％、苯甲酸钠0.5-0.7％、酸度调节剂0.45-0.55％、乳糖13-18％、香精0.5-1.0％。

3.根据权利要求1所述的一种宠物用活性乳酸菌饮料，其特征在于：所述增稠剂选自羧甲基纤维素钠、聚维酮K30、阿拉伯胶、明胶、黄原胶的任意一种或其任意组合。

4.根据权利要求3所述的一种宠物用活性乳酸菌饮料，其特征在于：所述增稠剂为羧甲基纤维素钠。

5.根据权利要求1所述的一种宠物用活性乳酸菌饮料，其特征在于：所述酸度调节剂选自：柠檬酸、乳酸、酒石酸、磷酸、乙酸、苹果酸的任意一种或其任意组合。

6.根据权利要求5所述的一种宠物用活性乳酸菌饮料，其特征在于：所述酸度调节剂为柠檬酸。

7.根据权利要求1所述的一种宠物用活性乳酸菌饮料，其特征在于：所述乳化稳定剂选自：L-奶乳化稳定剂、单硬脂酸甘油酯、聚甘油脂肪酸酯、吐温80的任意一种或其任意组合。

8.根据权利要求7所述的一种宠物用活性乳酸菌饮料，其特征在于：所述乳化稳定剂选自L-奶乳化稳定剂、吐温80中的一种。

9.权利要求1至8任一所述的一种宠物用活性乳酸菌饮料，在调节宠物肠道内有益微生物菌落的平衡、降低宠物体内有毒发酵产物及有害细菌酶的产生、调理宠物胃肠消化能力、调节机体免疫系统，提高宠物免疫力以及促进宠物体质中的用途。

说明书

一种宠物用活性乳酸菌饮料及其制备方法

技术领域

[0001] 本发明涉及一种宠物用活性乳酸菌饮料，属于动物保健品技术领域。本发明创新了宠物的乳酸菌饮品市场，调整宠物的肠道菌群平衡，提高机体免疫力。

背景技术

[0002] 随着人们对乳酸菌生理功能研究的深入，大多数研究结果表明，乳酸菌具有改善胃肠道功能、提高免疫能力、改善机体营养状况等。其中改善营养状况、免疫功能等特殊作用已在食品、医药方面广泛运用。

[0003] 乳酸菌(Lactic acid bacterium，LAB)是一群能从可发酵性碳水化合物中产生大量乳酸的革兰氏阳性细菌的通称。乳酸菌在动物体内能发挥许多的生理功能。大量研究资料表明，乳酸菌能调节胃肠道正常菌群、维持微生态平衡，从而改善胃肠道功能；提高食物消化率和生物效价；抑制肠道内腐败菌生长；提高机体免疫力等。动物服用乳酸菌后，可以改变肠道内环境，抑制有害菌繁殖，调整胃肠道菌群平衡。乳酸菌还能刺激腹膜巨噬细胞、诱导产生干扰素、促进细胞分裂、产生抗体及促进细胞免疫等，所以能增强机体的非特异性和特异性免疫反应，提高机体的抗病能力。

[0004] 乳酸菌饮料是目前国内市场上一种十分畅销的健康饮料，深受广大消费者的喜爱。现在随着生活水平的提高，人们对宠物的饮食营养和保健也越来越重视，如果开发动物用的乳酸菌饮品，可以发挥动物用(宠物用)药物无法具有的优势，例如当宠物饮用活性乳酸菌饮料时，这些有益于机体健康的乳酸菌就在消化道内发生作用。首先，饮料中含有大量乳酸，可以代偿老龄宠物慢性萎缩性胃炎的胃酸分泌不足，具有抑制异常发酵，促进消化的作用。乳酸菌能够降低肠道内的PH值，抑制腐败菌的生长和繁殖，促进肠道蠕动。对大量或不适当使用抗生素后出现的肠内正常菌群失调，乳酸菌具有帮助恢复肠内正常菌群的功能，即整肠作用。其次，乳酸菌的存在有利于钙和其它微量元素的吸收。

[0005] 然而，我们的宠物市场上还欠缺可供动物饮用的乳酸菌饮品，因此目前需要能给宠物提供高质量的营养保健品，增强机体的健康水平和免疫力的活性乳酸菌饮料。发明内容：

[0006] 本发明的第一个目的是提供一种宠物用活性乳酸菌饮料，其中乳酸菌饮料组合物9 10
中按各成分质量百分比含量为：1×10-1×10 CFU/100ml的乳酸菌、0.3-1％的乳化稳定剂、0.1-1％的增稠剂、0.1-1％的苯甲酸钠、0.2-1％的酸度调节剂、8-20％的乳糖、0.5-3％的香精，其余为纯净水。

[0007] 在一个具体实施方案中，乳酸菌优选是1.2×109-1.6×109CFU/100ml(其中，乳酸菌可选用常规菌株，或者发酵酸奶购自天津某乳液公司)、乳化稳定剂优选是0.45-0.65％、增稠剂优选是0.33-0.55％、苯甲酸钠优选是0.5-0.7％、酸度调节剂优选是
0.45-0.55％、乳糖优选是13-18％、香精优选是0.5-1％。

[0008] 在一个具体实施方案中，所述的增稠剂选自羧甲基纤维素钠、聚维酮K30、阿拉伯胶、明胶、黄原胶的任意一种或其任意组合，其中优选是羧甲基纤维素钠。

[0009] 在另一个具体实施方案中，所述的酸度调节剂选自：柠檬酸、乳酸、酒石酸、磷酸、乙酸、苹果酸的任意一种或其任意组合，其中优选是柠檬酸。

[0010] 还在另一个具体实施方案中，所述的乳化稳定剂选自：还原胶、PGA、耐酸CMC、L-奶乳化稳定剂、三聚甘油单硬脂酸酯、单硬脂酸甘油酯、聚甘油脂肪酸酯、吐温80的任意一种或其任意组合，其中优选是PGA、耐酸CMC或吐温80。

[0011] 本发明的第二个目的是提供上述宠物用活性乳酸菌饮料的制备方法，步骤包括：

[0012] 1)将乳化稳定剂、乳糖混合好后，用70-80℃的热水溶解完全，保温30分钟，然后冷却到30℃以下；

[0013] 2)将冷却好的乳化稳定剂和乳糖溶液倒入搅拌均匀的乳酸菌中，再进行搅拌使之均匀，加入苯甲酸钠；

[0014] 3)将柠檬酸和纯化水配成3-5％的溶液，再慢慢加入乳酸菌中边加边搅拌；

[0015] 4)用香精调香，加入0.3-1％的增稠剂进行调理；

[0016] 5)在压力为16-25MPA的高压均质机中进行高压均质处理；

[0017] 6)将上述物料进行灭菌处理，冷却至20-30℃以下，在无菌车间灌装，最后在洁净车间中包装即得；

[0018] 7)将置好的活性乳酸菌饮料置于2-8℃下冷藏保存。

[0019] 在 一 个 具 体 实 施 方 案 中，乳 酸 菌 优 选 是 乳 酸 菌 优 选 是9 9
1.2×10-1.6×10CFU/100ml、乳化稳 定剂优 选是0.45-0.65％、增 稠剂优选 是
0.33-0.55％、苯甲酸钠优选是0.5-0.7％、酸度调节剂优选是0.45-0.55％、乳糖优选是
13-18％、香精优选是0.5-1％。

[0020] 在一个具体实施方案中，所述的增稠剂选自羧甲基纤维素钠、聚维酮K30、阿拉伯胶、明胶、黄原胶的任意一种或其任意组合，其中优选是羧甲基纤维素钠。

[0021] 在另一个具体实施方案中，所述的酸度调节剂选自：柠檬酸、乳酸、酒石酸、磷酸、乙酸、苹果酸的任意一种或其任意组合，其中优选是柠檬酸。

[0022] 还在另一个具体实施方案中，所述的乳化稳定剂选自：PGA、耐酸CMC、L-奶乳化稳定剂、三聚甘油单硬脂酸酯、单硬脂酸甘油酯、聚甘油脂肪酸酯、吐温80的任意一种或其任意组合，其中优选是PGA、耐酸CMC或吐温80。

[0023] 本发明第三个目的提供上述乳酸菌饮料在调节宠物肠道内有益微生物菌落的平衡、降低宠物体内有毒发酵产物及有害细菌酶的产生、调理宠物胃肠消化能力、调节机体免疫系统，提高宠物免疫力以及促进宠物体质中的用途。

[0024] 本发明的有益效果

[0025] 1、本发明的乳酸菌饮料创新了宠物的乳酸菌饮品市场，是营养更均衡的宠物专用乳酸菌饮料。

[0026] 2、本发明的乳酸菌饮料能调节宠物肠道内有益微生物菌落的平衡，由于宠物对大量或不适当使用抗生素后出现的肠内正常菌群失调，乳酸菌具有帮助恢复肠内正常菌群的功能，即整肠作用。

[0027] 3、本发明的乳酸菌饮料能调理宠物胃肠消化能力，当宠物饮用活性乳酸菌饮料时，这些有益于机体健康的乳酸菌就在消化道内发生作用。饮料中含有大量乳酸，可以代偿老龄宠物慢性萎缩性胃炎的胃酸分泌不足，具有抑制异常发酵，促进消化的作用。

[0028] 4、大大降低宠物体内有毒发酵产物及有害细菌酶的产生，乳酸菌能够降低肠道内的PH值，抑制腐败菌的生长和繁殖，促进肠道蠕动。

[0029] 5、本发明的乳酸菌饮料能调节机体免疫系统，提高宠物免疫力，乳酸菌的存在有利于钙和其它微量元素的吸收。

[0030] 6、本发明的乳酸菌饮料能长期饮用，具有食疗的功能，对宠物健康大有益处。具体实施方式：

[0031] 下面结合实施例对本发明做进一步的描述。

[0032] 实施例1：乳酸菌饮料的制备

[0033] 原料(按重量百分比)：乳酸菌，1.5×109CFU/100ml、乳化稳定剂，0.5％、羧甲基纤维素钠，0.6％、苯甲酸钠，0.5％、柠檬酸，0.3％、乳糖，15％、香精，0.8％。

[0034] 制备过程如下：

[0035] 1)将乳化稳定剂、乳糖混合好后，用70-80℃的热水溶解完全，保温30分钟。然后冷却到30℃以下。

[0036] 2)将冷却好的乳化稳定剂和乳糖混合溶液倒入搅拌均匀的乳酸菌中，再进行搅拌使之均匀，加入苯甲酸钠。

[0037] 3)将柠檬酸和纯化水配成5％的溶液，再慢慢加入上述调配好的乳酸菌中边加边搅拌。

[0038] 4)用香精调香，加入羧甲基纤维素钠进行粘度调理。

[0039] 5)在压力为16-25Mpa的高压均质机中进行高压均质处理。

[0040] 6)将上述物料进行灭菌处理，冷却至20-30℃以下，在无菌车间灌装，最后在洁净车间中包装即得。

[0041] 7)将制好的活性乳酸菌饮料置于2-8℃下冷藏保存。

[0042] 实施例2：乳酸菌饮料的制备

[0043] 原料(按重量百分比)：乳酸菌，1×109CFU/100ml、乳化稳定剂，0.3％、羧甲基纤维素钠，0.5％、苯甲酸钠，0.5％、柠檬酸，0.25％、乳糖，12％、香精，0.8％。

[0044] 制备过程如下：

[0045] 1)将乳化稳定剂、乳糖混合好后，用70-80℃的热水溶解完全，保温30分钟。然后冷却到30℃以下。

[0046] 2)将冷却好的乳化稳定剂和乳糖混合溶液倒入搅拌均匀的乳酸菌中，再进行搅拌使之均匀，加入苯甲酸钠。

[0047] 3)将柠檬酸和纯化水配成4％的溶液，再慢慢加入上述调配好的乳酸菌中边加边搅拌。

[0048] 4)用香精调香，加入羧甲基纤维素钠进行粘度调理。

[0049] 5)在压力为16-25Mpa的高压均质机中进行高压均质处理。

[0050] 6)将上述物料进行灭菌处理，冷却至20-30℃以下，在无菌车间灌装，最后在洁净车间中包装即得。

[0051] 7)将制好的活性乳酸菌饮料置于2-8℃下冷藏保存。

[0052] 实施例3：乳酸菌饮料的动物毒理试验

[0053] 1.试验材料与方法

[0054] 1.1宠物活性乳酸菌饮料按照本发明的实施例1制得，主要成分为乳酸菌、乳化稳定剂、增稠剂、苯甲酸钠、酸度调节剂、乳糖、香精。使用前不用稀释，为口服饮料。

[0055] 1.2试验动物小白鼠20只，雌雄各半，体重为18g～22g，由瑞普公司研发实验动物中心提供。

[0056] 1.3毒理试验：将小鼠分成组，雌雄各半，10只为试验药物组，另外10只为阴性对照组，实验前禁食，不禁水12h后，取30mL乳酸菌宠物饮料，根据试验动物体重，按最大体积3mL/10g(相当成人饮用量的2倍)灌胃。试验药物组分别灌服不同剂量的药物，对照组灌服蒸馏水，与试验组同时对照观察。一次给药后，每半小时观察一次，密切观察，此后每天观察一次，连续观察7d，记录动物中毒反应和死亡情况。中毒症状为全身强直性抽搐为主的急性死亡，死亡发生在药后1h。

[0057] 1.4试验结果：给药观察后，各剂量组动物均存活，亦未见毒性表现。

[0058] 实施例4：乳酸菌饮料对动物肠道菌群的影响试验

[0059] 本试验为了研究活性乳酸菌饮料对动物肠道菌群的影响，进行了试食试验。

[0060] 1材料与方法

[0061] 1.1受试对象小型犬，食物结构和一般宠物饮食习惯基本相同。受试对象纳入标准为一个月内未患过胃肠疾病，且一个月内未服用过抗生素，年龄在3-8岁的小型犬。受试对象来源于天津市动物防控疾病中心的动物房。

[0062] 1.2试验设计及分组采用自身和组间两种对照设计。按受试小型犬的年龄和性别进行随机分组，分为试验组和对照组，再根据试食前受试对象的菌群状况进行均衡性检验，以保证组间的均衡性和可比性。

[0063] 1.3受试样品的剂量和使用方法试验组服用按照实施例1制备的宠物用乳酸菌饮料14d，1瓶/d(早晚各半瓶)，200ml/瓶，产品为乳黄色液体；对照组服用不含活乳酸菌的纯净水14d，1瓶/d(早晚各半瓶)，200ml/瓶。试验期间不改变原来的饮食习惯，正常饮食。

[0064] 1.4观察指标

[0065] 1.4.1功效性指标肠杆菌、肠球菌、双歧杆菌、乳杆菌、产气荚膜梭菌。

[0066] 1.5检验方法

[0067] 1.5.1乳酸菌菌落总数的测定采用中华人民共和国国家标准《食品卫生微生物学检验》GB/T4789.3522003乳酸菌饮料中乳酸菌检验进行测定。

[0068] 1.5.2调节肠道菌群功能检验方法采用卫生部《保健食品检验与评价技术规范》调节肠道菌群功能检验方法进行检验。肠道菌群检验所用的培养基及其稀释度的选择、培养条件和鉴定方法详见表1。

[0069] 1.6培养基TSC琼脂、伊红美蓝琼脂、叠氮钠-结晶紫-七叶苷琼脂、BBL琼脂和Lbs琼脂由北京陆桥技术有限责任公司提供，稀释液(0.5％L-半胱氨酸)由我公司研究中心无菌室自制。

[0070] 表1肠道菌群检验用培养基及其稀释度、培养条件、鉴定方法

[0071]目的菌 培养基 稀释度10-n 培养条件 鉴定方法
产气荚膜梭菌 TSC琼脂 1、2 (36±1)℃24h厌 计数所有在紫外光下有荧光
氧培养 的黑色菌落
肠杆菌 伊红美蓝琼脂 4、5、6 (36±1)℃24h 计数发酵乳糖、染色镜检为
G-杆菌的所有菌落
肠球菌 叠氮钠-结晶紫-七 4、5、6 (36±1)℃48h 计数有明显褐色圈、染色镜
叶苷琼脂 检为G-球菌的所有菌落
双歧杆菌 BBL琼脂 5、6、7 (36±1)℃48h 食品卫生微生物检验双歧杆
菌检验
乳杆菌 Lbs琼脂 4、5、6 (36±1)℃48h G+无芽胞杆菌、触酶阴性、
API CH50

[0072] 1.7肠道菌群功能试验步骤

[0073] 1.7.1在给予受试样品之前，用经灭菌的棉签挑取受试对象自然排出的新鲜粪便约3～5g，放入无菌干燥的采便盒内，立即送检分离，所需时间严格控制在30min之内。

[0074] 1.7.2无菌采取受试对象粪便，称取粪便重量，用灭菌稀释液(0.5％L-半胱氨酸)-7进行连续的10倍稀释，稀释至10 ，振荡混匀，制成均匀悬液。
-1 -2

[0075] 1.7.3产气荚膜梭菌采用平板倾注法，选择10 和10 两个稀释度，每个稀释度做两个平行样，分别吸取20μl的粪便混悬液放入直径为6cm的平板中，倾注培养基。其余4种菌均采用滴注法。先将培养基的种类与稀释度(一个平板平均分成6格)标明在9cm平板上，倾注培养基，待凝固后放入50℃温箱内烘干约30min。参照表1，分别选取3个稀释度，从高稀释度开始滴种，每个稀释度做两个平行样，接种量为20μl，待平板干后，(需厌氧培养的立即放入GENbag厌氧产气袋中)再放入温箱培养。

[0076] 1.7.4培养后，以菌落形态、革兰染色镜检、生化反应等鉴定计数菌落，并根据菌落的可数性来选择计数菌落的稀释度。每克湿便中的菌数＝平均菌落数×稀释倍数×500。

[0077] 1.7.5计算出每克湿便中的菌数，取对数换算后用SPSS 11.0进行统计分析。

[0078] 1.7.6最后一次给予受试样品之后24h再次检测，方法同上。

[0079] 1.8数据分析试验数据为计量资料，用t检验进行分析。自身对照资料采用配对t检验；两组均数比较采用成组t检验。后者需进行方差齐性检验，对非正态分布或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态方差齐后，用转换的数据进行t检验。7

[0080] 2结果：乳酸菌菌落总数：总数为7.5×10CFU/ml。

[0081] 3讨论：从肠道菌群的检测结果可知，试验前对照组与试验组间比较，各种菌的数量无明显变化，说明试食前受试对象的肠道菌群处于同一水平，均衡性好，组间具有可比性。对照组服用纯净水，试验前后自身比较，各种菌的数量无明显变化，说明纯净水对受试者的肠道菌群的调节无明显作用。而试验组服用活性乳酸菌饮料，试验前后自身比较和试验后组间比较，双歧杆菌和乳杆菌的数量明显增加，产气荚膜梭菌的数量减少，说明活性乳酸菌饮料可促使机体肠道内益生菌双歧杆菌和乳杆菌增殖，抑制有害菌产气荚膜梭菌的生长，具有调整机体肠道菌群的组成、改善肠道内环境的作用。活性乳酸菌饮料是把能够在机