一种紫叶白桦的微繁方法转让专利
申请号 : CN200910071345.5
文献号 : CN101502237B
文献日 : 2011-06-15
发明人 : 杨玲 , 沈海龙 , 梁立东
申请人 : 东北林业大学 , 沈海龙 , 杨玲
摘要 :
权利要求 :
1.一种紫叶白桦的微繁方法,其特征在于紫叶白桦的微繁方法按以下步骤实现:一、将清洗后的紫叶白桦外植体在超净工作台上用质量浓度为75%的乙醇溶液浸泡60s后再用另一份质量浓度为75%的乙醇溶液浸泡60s,然后用无菌水冲洗3~5次,再用质量浓度为0.1%的氯化汞溶液消毒12~15min,然后用无菌水冲洗3~5次;二、将消毒后的外植体切割成带有顶芽或2~3个腋芽、且长度为1.5~3cm的茎段,然后接种于诱导培养基-2 -1中,在温度为22~26℃、湿度为70%~80%、光照强度为100~200μmol·cm ·s 、每天光照12~24h、每20~30天更换新鲜的诱导培养基的条件下培养4~6个月,获得微枝;三、将微枝的叶片去掉,切割成带有顶芽或1~2个腋芽、且长度为1~1.5cm的茎段,然后接种于增殖培养基中,在温度为22~26℃、湿度为70%~80%、光照强度为100~-2 -1
200μmol·cm ·s 、每天光照12~24h、每20~25天更换新鲜的增殖培养基的条件下培养至微枝生长长度为0.5~1.5cm;四、将增殖后的微枝接种于增壮培养基中,在温度为-2 -1
22~26℃、湿度为70%~80%、光照强度为100~200μmol·cm ·s 、每天光照12~
24h的条件下培养至微枝生长长度为2.5~4.5cm,再扦插于生根基质中进行生根培养后即完成紫叶白桦的微繁;其中步骤二中诱导培养基是以WPM培养基为基本培养基,且还包含
0.2~0.5mg/L的6-苄基氨基嘌呤、20~30g/L的蔗糖和6~7g/L的琼脂,pH值为5.2;
步骤三中增殖培养基是以WPM培养基为基本培养基,且还包含0.5~1.5mg/L的6-苄基氨基嘌呤、20~30g/L的蔗糖和6~7g/L的琼脂,pH值为5.2;步骤四中增壮培养基是以WPM培养基为基本培养基,且还包含0.1~0.5mg/L的6-苄基氨基嘌呤、20~30g/L的蔗糖和
6~7g/L的琼脂,pH值为5.2;步骤四中生根基质按体积份数比由5份的草炭、4份的蛭石和4份的珍珠岩组成,生根基质含水量为50%~60%。
2.根据权利要求1所述的一种紫叶白桦的微繁方法,其特征在于步骤二中外植体切割成带有顶芽或2个腋芽、且长度为2cm的茎段。
3.根据权利要求2所述的一种紫叶白桦的微繁方法,其特征在于步骤二中在温度为-2 -1
24℃、湿度为75%、光照强度为160μmol·cm ·s 、每天光照16h、每25天更换新鲜的诱导培养基的条件下培养5个月。
4.根据权利要求3所述的一种紫叶白桦的微繁方法,其特征在于步骤三中切割成带有顶芽或2个腋芽、且长度为1.2cm的茎段。
5.根据权利要求4所述的一种紫叶白桦的微繁方法,其特征在于步骤三中在温度为-2 -1
25℃、湿度为78%、光照强度为140μmol·cm ·s 、每天光照18h、每22天更换新鲜的增殖培养基的条件下培养至微枝生长长度为1cm。
6.根据权利要求5所述的一种紫叶白桦的微繁方法,其特征在于步骤四中在温度为-2 -1
23℃、湿度为76%、光照强度为180μmol·cm ·s 、每天光照20h的条件下培养至微枝生长长度为3cm。
说明书 :
一种紫叶白桦的微繁方法
技术领域
背景技术
发明内容
70%~80%、光照强度为100~200μmol·cm ·s 、每天光照12~24h、每20~30天更换新鲜的诱导培养基的条件下培养4~6个月,获得微枝(无根试管苗);三、将微枝的叶片去掉,切割成带有顶芽或1~2个腋芽、且长度为1~1.5cm的茎段,然后接种于增殖培-2 -1
养基中,在温度为22~26℃、湿度为70%~80%、光照强度为100~200μmol·cm ·s 、每天光照12~24h、每20~25天更换新鲜的增殖培养基的条件下培养至微枝生长长度为0.5~1.5cm;四、将增殖后的微枝接种于增壮培养基中,在温度为22~26℃、湿度为-2 -1
70%~80%、光照强度为100~200μmol·cm ·s 、每天光照12~24h的条件下培养至微枝生长长度为2.5~4.5cm,再扦插于生根基质中进行生根培养后即完成紫叶白桦的微繁;
其中步骤二中诱导培养基是以WPM培养基为基本培养基,且还包含0.2~0.5mg/L的6-苄基氨基嘌呤(6-BA)、20~30g/L的蔗糖和6~7g/L的琼脂,pH值为5.2;步骤三中增殖培养基是以WPM培养基为基本培养基,且还包含0.5~1.5mg/L的6-苄基氨基嘌呤(6-BA)、
20~30g/L的蔗糖和6~7g/L的琼脂,pH值为5.2;步骤四中增壮培养基是以WPM培养基为基本培养基,且还包含0.1~0.5mg/L的6-苄基氨基嘌呤(6-BA)、20~30g/L的蔗糖和
6~7g/L的琼脂,pH值为5.2;步骤四中生根基质按体积份数比由5份的草炭、4份的蛭石和4份的珍珠岩组成,生根基质含水量为50%~60%。
50%费用,且生根率和移苗成活率均可达100%,实现了紫叶白桦的快速、高效繁殖及大规模推广种植的目标。
具体实施方式
在温度为22~26℃、湿度为70%~80%、光照强度为100~200μmol·cm ·s 、每天光照12~24h、每20~30天更换新鲜的诱导培养基的条件下培养4~6个月,获得微枝(无根试管苗);三、将微枝的叶片去掉,切割成带有顶芽或1~2个腋芽、且长度为1~1.5cm的茎段,然后接种于增殖培养基中,在温度为22~26℃、湿度为70%~80%、光照强度为-2 -1
100~200μmol·cm ·s 、每天光照12~24h、每20~25天更换新鲜的增殖培养基的条件下培养至微枝生长长度为0.5~1.5cm;四、将增殖后的微枝接种于增壮培养基中,在-2 -1
温度为22~26℃、湿度为70%~80%、光照强度为100~200μmol·cm ·s 、每天光照
12~24h的条件下培养至微枝生长长度为2.5~4.5cm,再扦插于生根基质中进行生根培养后即完成紫叶白桦的微繁;其中步骤二中诱导培养基是以WPM培养基为基本培养基,且还包含0.2~0.5mg/L的6-苄基氨基嘌呤(6-BA)、20~30g/L的蔗糖和6~7g/L的琼脂,pH值为5.2;步骤三中增殖培养基是以WPM培养基为基本培养基,且还包含0.5~1.5mg/L的6-苄基氨基嘌呤(6-BA)、20~30g/L的蔗糖和6~7g/L的琼脂,pH值为5.2;步骤四中增壮培养基是以WPM培养基为基本培养基,且还包含0.1~0.5mg/L的6-苄基氨基嘌呤(6-BA)、20~30g/L的蔗糖和6~7g/L的琼脂,pH值为5.2;步骤四中生根基质按体积份数比由5份的草炭、4份的蛭石和4份的珍珠岩组成,生根基质含水量为50%~60%。