一种酚类纳米硅胶表面分子印迹材料的制备方法

摘要

一种酚类纳米硅胶表面分子印迹材料的制备方法，制备步骤为：将纳米级SiO2加入到致孔剂中，超声分散均匀；向上步所得含有SiO2的致孔剂中加入模板分子、功能单体和交联剂正硅酸四乙酯，搅拌反应液后离心，将离心后所得固体烘干；将烘干所得固体用有机溶剂和无机酸的混合溶液洗涤，去除未反应的功能单体、模板份子和交联剂，再用稀碱液和超纯水洗涤固体至洗脱液为中性，离心后所得固体在80～100℃烘干，得到酚类纳米硅胶表面分子印迹材料。本发明采用纳米级SiO2作为印迹的载体，故所合成纳米硅胶表面分子印迹材料具有极高的比表面积，因此吸附容量大，特异性最大表观结合数Qmax可达16.43μmol/g。

权利要求

1.一种酚纳米硅胶表面分子印迹材料的制备方法，其特征在于制备步骤为：

a.将纳米级SiO2加入到致孔剂中，超声分散均匀；所述SiO2的质量与致孔剂的体积比例g/mL为0.01～0.02∶1；

b.向上步所得含有SiO2的致孔剂中加入模板分子、功能单体和交联剂正硅酸四乙酯，所述纳米级SiO2的质量与模板分子的摩尔比例g/mmol为0.05～0.5∶1，交联剂与功能单体的体积比为2～4∶1，模板分子与功能单体的摩尔比例为0.1～0.33∶1；在温度10～40℃下搅拌反应液10～24h后离心，将离心后所得固体烘干；将烘干所得固体用有机溶剂和无机酸的混合溶液洗涤，去除未反应的功能单体、模板分子和交联剂，再用稀碱液和超纯水洗涤固体至洗脱液为中性，离心后所得固体在80～100℃烘干，得到酚纳米硅胶表面分子印迹材料；所述模板分子为：双酚A、联苯二酚、四溴双酚A、叔丁基苯酚、己烯雌酚、壬基酚或己烷雌酚；所述功能单体为：氨丙基三乙氧基硅烷、氨丙基三甲氧基硅烷或N-(2-氨乙基)-氨丙基三甲氧基硅烷。

2.根据权利要求1所述一种酚纳米硅胶表面分子印迹材料的制备方法，其特征在于所述纳米级SiO2粒径范围为100～400nm。

3.根据权利要求1所述一种酚纳米硅胶表面分子印迹材料的制备方法，其特征在于所述致孔剂为甲醇、乙醇或者两者任意比例混合。

4.根据权利要求1所述一种酚纳米硅胶表面分子印迹材料的制备方法，其特征在于所述有机溶剂和无机酸的混合溶液，有机溶剂为甲醇，无机酸为盐酸，所述盐酸浓度为1.0～6mol/L，二者混合体积比为1∶0.5～1∶3。

5.根据权利要求1所述一种酚纳米硅胶表面分子印迹材料的制备方法，其特征在于所述稀碱液为NaOH、KOH或者两者任意比例混合的水溶液，碱浓度为0.05～0.2mol/L。

说明书

一、技术领域

本发明属于一种对酚类环境激素具有专一识别性能的聚合物的技术领域，特别涉及一种酚类纳米硅胶表面分子印迹材料的制备方法。

二、背景技术

环境激素，又称为外因性干扰内分泌的化学物质(environmental endocrinedisruptors，EEDs)，是由于人类的生产和活动而释放到环境中的微量化学物质。它们通常经由食物链进入生物体内，模拟或阻断内源性雌激素的作用，干扰内源激素或其受体的合成和代谢，造成内分泌失调，危害生物体生殖机能或引发恶性肿瘤。自然界中EEDs的含量虽然极微，但其稳定性极强，一旦摄入生物体，就很难分解和排除，只能随着生态系统的食物链传递，而人类正处在食物链的顶端，是污染的最后集结地。因此，EEDs研究是关系到人类健康繁衍、生存和发展的重大课题。

目前EEDs的监测分析方法主要是气相色谱、液相色谱、色谱与质谱联用。由于大部分EEDs样品基质复杂、含量甚微(pg或ng级)、种类较多，因此在通常情况下，样品的预处理成为EEDs监测分析工作中的关键步骤。目前，EEDs样品预处理常用的方法有液-液萃取和固相萃取。固相萃取较传统的液-液萃取具有更多的优点：富集速度较快、有机溶剂消耗较少，对环境污染小，操作简单，易于自动化等。传统固相萃取小柱都是采用非极性的C18、改性的二氧化硅(SiO2)颗粒作为填料，对中等极性的酚类化合物的富集效果及选择性都比较差。因此，设计和合成对酚类环境激素具有高选择性和高富集倍数的吸附材料具有十分重要的意义。

近年来分子印迹聚合物(molecular imprinted polymers，MIP)的研究可望解决上述问题。MIP是一种具有分子识别能力的新型高分子材料。在模板分子的存在下，功能单体和交联剂发生共聚合，由于模板分子与功能单体之间的共价或非共价作用，使功能单体按照一定的顺序排列在模板分子周围。聚合之后洗去模板分子，这样，在聚合物中就留下与模板分子大小、形状、功能团互补的孔穴，使得MIP与模板分子的亲和力大大增强，表现出分子识别效应。MIP自问世以来，在样品预处理中的应用(E.Caro，R.M.Marcé，F.Borrull et al.Sherrington.Trendsin Analytical Chemistry，2006，25(2)：143-154)令人瞩目。

目前，MIP用于痕量物质的萃取分离还普遍存在模板分子渗漏，对模板分子的特异性结合力低、结合速率慢的问题。由于大多数MIP为本体或微米级材料，使得大量的印迹结合点处于材料的内部，MIP合成后清除其中全部模板分子十分困难，同时也大大降低了模板分子在材料表面的传输速率和亲和能力。通常有大约5％的模板分子残留(P.A.G.Cormack，K.Mosbach.React.Funct.Polym.，1999，41(123)：115-124.)。这样对于痕量或超痕量分析物，聚合物中若有1％的模板分子没有被清除并在萃取时渗漏，则对测定会产生较大干扰。而纳米表面印迹材料由于比表面积极大，印迹位点位于表面，模板分子洗脱较彻底，可很大程度减少模板分子渗漏，同时模板分子的去除和再结合也比较迅速。

三、发明内容

技术问题：本发明的目的是提供一种酚类纳米硅胶表面分子印迹材料的制备方法，得到的纳米硅胶表面分子印迹材料对酚类环境激素具有高选择性，高吸附容量，同时能够解决以往模板分子渗漏、结合速率慢的问题。

技术方案：一种酚类纳米硅胶表面分子印迹材料的制备方法，其特征在于制备步骤为：将纳米级SiO2加入到致孔剂中，超声分散均匀；所述SiO2的质量与致孔剂的体积比例g/ml为(0.01～0.02)∶1；向上步所得含有SiO2的致孔剂中加入模板分子、功能单体和交联剂正硅酸四乙酯，所述纳米SiO2的质量与模板分子的摩尔比例g/mmol为(0.05～0.5)∶1，交联剂与功能单体的体积比为(2～4)∶1，模板分子与功能单体的摩尔比例为(0.1～0.33)∶1；在温度10～40℃下搅拌反应液10～24h后离心，将离心后所得固体烘干；将烘干所得固体用有机溶剂和无机酸的混合溶液洗涤，去除未反应的功能单体、模板份子和交联剂，再用稀碱液和超纯水洗涤固体至洗脱液为中性，离心后所得固体在80～100℃烘干，得到酚类纳米硅胶表面分子印迹材料。

所述SiO2粒径范围为100～400nm。

所述所用致孔剂为甲醇、乙醇或者两者任意比例混合。

所述模板份子为：双酚A(BPA)、联苯二酚(BPDP)、四溴双酚A(TBBPA)、叔丁基苯酚(BP)、己烯雌酚、壬基酚或己烷雌酚。

所述功能单体为：氨丙基三乙氧基硅烷、氨丙基三甲氧基硅烷或N-(2-氨乙基)-氨丙基三甲氧基硅烷。

所述有机溶剂和无机酸的混合溶液，有机溶剂为甲醇，无机酸为盐酸，盐酸浓度为1.0～6mol/L，二者混合体积比为1∶0.5～1∶3。

所述稀碱液为NaOH，KOH，或者两者任意比例混合的水溶液，碱浓度为0.05～0.2mol/L。

有益效果：本发明选择3-氨基丙基三乙氧基硅烷或其它的活性乙氧基硅烷作为功能单体，探索经过适当的化学反应，将酚类EEDs的羟基与功能单体结合，合成出功能化的反应前体，即功能单体和酚类EEDs的复合物，然后，在可控的反应条件下，与四乙氧基硅(TEOS)共聚凝胶化，以纳米硅胶为载体，获得结合酚类EEDs的硅胶。通过酸洗脱除去酚类EEDs分子，从而在硅胶中产生带有残基的结合位点和形状匹配的结合“空穴”，制备出对酚类EEDs具有高选择性和高度亲和力的功能化硅胶材料。

本发明采用纳米级SiO2作为印迹的载体，故所合成纳米硅胶表面分子印迹材料具有极高的比表面积，因此吸附容量大，特异性最大表观结合数Qmax可达16.43μmol/g；由于大量的识别位点处于纳米结构的表面，从而大大地提高分子印迹的效率，使得模板分子的去除和模板分子的再结合迅速，特异性平衡结合常数KB为125490M-1，非特异性平衡结合常数KB为1096.5M-1，40min即可以达到吸附平衡，为高效快速分离和富集样品提供基础。试验结果证明，用本方法合成的酚类纳米硅胶表面分子印迹聚合物(MIP)填充的固相萃取小柱(MIP-SPE)，饱和载样量可达100μmol/g，穿漏体积大于250mL(填料100mg时)，富集倍数高，回收率98％以上，重现性好，且较传统C18-SPE对模板分子有较高的选择性。

以纳米SiO2小球作为分子印迹的载体，由于印迹位点位于纳米SiO2小球表面，所以模板分子的去除和模板分子的再结合比较迅速；由于所合成的分子印迹材料比表面积大，故吸附容量大；合成的印迹材料颗粒均匀，用来填充固相萃取小柱，分离、富集重现性好。

四、附图说明

图1为纳米SiO2，纳米硅胶表面分子印迹材料扫描电镜图。其中图1-a为100nmSiO2扫描电镜图；图1-b为400nm SiO2扫描电镜图。

图2为100nm硅胶表面分子印迹材料扫描电镜图。

图3为纳米SiO2和纳米硅胶表面分子印迹聚合物的红外图谱。曲线1代表纳米SiO2的红外图谱；曲线2代表双酚A分子印迹聚合物(BPA-MIP)。

图4为BPA-MIP和空白聚合物(NMIP)的静态吸附曲线。分别采用50mgBPA-MIP和NMIP吸附剂，底物为浓度范围为0.5～5000umolL-1的双酚A(BPA)甲苯溶液；曲线1代表BPA-MIP对BPA的吸附容量随浓度变化图，曲线2代表NMIP对BPA的吸附容量随浓度变化图。

图5为BPA-MIP和NMIP的吸附动力学曲线。分别采用50mgBPA-MIP和NMIP吸附剂，底物为1000umolL-1的BPA甲苯溶液；曲线1代表BPA-MIP对BPA的吸附容量随时间变化图，曲线2代表NMIP对BPA的吸附容量随时间变化图。

图6为选择性吸附BPA的色谱图。分别采用100mg BPA-MIP、NMIP和C18为固相萃取填料，制成MIP-SPE、NMIP-SPE和C18-SPE小柱。上样10mL标准混合酚类甲苯溶液(BPA、BPDP、BP和TBBPA浓度均为5umolL-1)，2mL甲醇洗脱，收集洗脱液，高效液相分析。流动相为甲醇-水(65/35，v/v)；waters2487双波长紫外检测器，λ1为278nm，λ2为292nm；色谱柱为Hipersil BDS-C18(Yilite)，5μm，4.6×150mm。图6-a为C18-SPE的洗脱液色谱图，图6-b为MIP-SPE洗脱液色谱图，图6-c为NMIP-SPE洗脱液色谱图。A、B、C、D色谱峰分别对应物质BPDP、BPA、BP和TBBPA。

五、具体实施方式

实施例1

精密称定0.4gBPA，0.4g100nm SiO2加入100mL圆底烧瓶中，加40mL甲醇，搅拌10min。再加入氨丙基三乙氧基硅烷2mL，搅拌10min。再加TEOS4mL，搅拌5min后加入1.0mol/L HAc 1.0mL，室温搅拌反应24h。

将反应混合物10000r/min离心15min，弃去上清，将下层固体在一个大气压下100℃干燥12h。将干燥好的固体用甲醇-盐酸混合溶液超声清洗，所述甲醇-盐酸混合溶液由6.0mol/L的盐酸与甲醇按体积比1∶1混合制得，再用0.05mol/LKOH和超纯水超声-离心清洗至pH近中性。将最后一次离心所得的固体在一个大气压下100℃干燥12h后备用。空白聚合物(NMIP)的制备和处理除不加BPA外其他相同。

精密称取50mg BPA-MIP于50mL具塞离心管中，加入浓度为0.250mmol/L的BPA甲苯溶液10mL超声3min混匀后放入室温(25℃)恒温水浴振荡器中振荡24h后，10000r/min离心15min，取上清液紫外分光光度法测定吸光度，计算分配系数Kd(mL/g)。NMIP作对照试验。结果见表1。

实施例2

精密称定0.4gBPA，0.4g400nm SiO2加入100mL圆底烧瓶中，加40mL甲醇，搅拌10min。再加入氨丙基三乙氧基硅烷2mL，搅拌10min。再加TEOS4mL，搅拌5min后加入1.0mol/L HAc 1.0mL，室温搅拌反应24h。

将反应混合物10000r/min离心15min，弃去上清，将下层固体在一个大气压下100℃干燥12h。将干燥好的固体用甲醇-盐酸混合溶液超声清洗，所述甲醇-盐酸混合溶液由6.0mol/L的盐酸与甲醇按体积比1∶1混合制得，再用0.05mol/LKOH和适量超纯水超声-离心清洗至pH近中性。将最后一次离心所得的固体在一个大气压下100℃干燥12h后备用。空白聚合物(NMIP)的制备和处理除不加BPA外其他相同。

精密称取50mg BPA-MIP于50mL具塞离心管中，加入浓度为0.250mmol/L的BPA甲苯溶液10mL超声3min混匀后放入室温(25℃)恒温水浴振荡器中振荡24h后，10000r/min离心15min，取上清液紫外分光光度法测定吸光度，计算分配系数Kd(mL/g)。NMIP作对照试验。结果见表1。

实施例3

精密称定0.4gBPA，0.4g400nm SiO2加入100mL圆底烧瓶中，加40mL甲醇，搅拌10min。再加入氨丙基三乙氧基硅烷2mL，搅拌10min。再加TEOS8mL，搅拌5min后加入1.0mol/L HAc 1.0mL，室温搅拌反应24h。

将反应混合物10000r/min离心15min，弃去上清，将下层固体在一个大气压下100℃干燥12h。将干燥好的固体用甲醇-盐酸混合溶液超声清洗，所述甲醇-盐酸混合溶液由6.0mol/L的盐酸与甲醇按体积比1∶2混合制得，再用0.05mol/LKOH和适量超纯水超声-离心清洗至pH近中性。将最后一次离心的固体在一个大气压下100℃干燥12h后备用。空白聚合物(NMIP)的制备和处理除不加BPA外其他相同。

精密称取50mg BPA-MIP于50mL具塞离心管中，加入浓度为0.250mmol/L的BPA甲苯溶液10mL超声3min混匀后放入室温(25℃)恒温水浴振荡器中振荡24h后，10000r/min离心15min，取上清液紫外分光光度法测定吸光度，计算分配系数Kd(mL/g)。NMIP作对照试验。结果见表1。

实施例4

精密称定0.2gBPA，0.4g400nm SiO2加入100mL圆底烧瓶中，加40mL甲醇，搅拌10min。再加入氨丙基三乙氧基硅烷2mL，搅拌10min。再加TEOS4mL，搅拌5min后加入1.0mol/L HAc 1.0mL，室温搅拌反应24h。

将反应混合物离心(10000r/min)15min，弃去上清，将下层固体在一个大气压下100℃干燥12h。将干燥好的固体用甲醇-盐酸混合溶液超声清洗，所述甲醇-盐酸混合溶液由6.0mol/L的盐酸与甲醇按体积比1∶0.5混合制得，再用0.05mol/L KOH和适量超纯水超声-离心清洗至pH近中性。将最后一次离心的固体在一个大气压下100℃干燥12h后备用。空白聚合物(NMIP)的制备和处理除不加BPA外其他相同。

精密称取50mg BPA-MIP于50mL具塞离心管中，加入浓度为0.250mmol/L的BPA甲苯溶液10mL超声3min混匀后放入室温(25℃)恒温水浴振荡器中振荡24h后，10000r/min离心15min，取上清液紫外分光光度法测定吸光度，计算分配系数Kd(mL/g)。NMIP作对照试验。结果见表1。

实施例5

精密称定0.6gBPA，0.4g400nm SiO2加入100mL圆底烧瓶中，加40mL甲醇，搅拌10min。再加入氨丙基三乙氧基硅烷2mL，搅拌10min。再加TEOS8mL，搅拌5min后加入1.0mol/L HAc 1.0mL，室温搅拌反应24h。

将反应混合物10000r/min离心15min，弃去上清，将下层固体在一个大气压下100℃干燥12h。将干燥好的固体用甲醇-盐酸混合溶液超声清洗，所述甲醇-盐酸混合溶液由1.0mol/L的盐酸与甲醇按体积比1∶3混合制得，再用0.05mol/LKOH和适量超纯水超声-离心清洗至pH近中性。将最后一次离心的固体在一个大气压下100℃干燥12h后备用。空白聚合物(NMIP)的制备和处理除不加BPA外其他相同。

精密称取50mg BPA-MIP于50mL具塞离心管中，加入浓度为0.250mmol/L的BPA甲苯溶液10mL超声3min混匀后放入室温(25℃)恒温水浴振荡器中振荡24h后，10000r/min离心15min，取上清液紫外分光光度法测定吸光度，计算分配系数Kd(mL/g)。NMIP作对照试验。结果见表1。

实施例6

精密称定0.4gBPA，0.4g400nm SiO2加入100mL圆底烧瓶中，加40mL乙醇，搅拌10min。再加入氨丙基三乙氧基硅烷2mL，搅拌10min。再加TEOS4mL，搅拌5min后加入1.0mol/L HAc 1.0mL，室温搅拌反应24h。

将反应混合物10000r/min离心15min，弃去上清，将下层固体在一个大气压下100℃干燥12h。将干燥好的固体用甲醇-盐酸混合溶液超声清洗，所述甲醇-盐酸混合溶液由6.0mol/L的盐酸与甲醇按体积比1∶1混合制得，再用0.05mol/LKOH和适量超纯水超声-离心清洗至pH近中性。将最后一次离心的固体在一个大气压下100℃干燥12h后备用。空白聚合物(NMIP)的制备和处理除不加BPA外其他相同。

精密称取50mg BPA-MIP于50mL具塞离心管中，加入浓度为0.250mmol/L的BPA甲苯溶液10mL超声3min混匀后放入室温(25℃)恒温水浴振荡器中振荡24h后，10000r/min离心15min，取上清液紫外分光光度法测定吸光度，计算分配系数Kd(mL/g)。NMIP作对照试验。结果见表1。

实施例7

精密称定1.05gTBBPA，0.4g400nm SiO2加入100mL圆底烧瓶中，加40mL甲醇，搅拌10min。再加入氨丙基三乙氧基硅烷2mL，搅拌10min。再加TEOS4mL，搅拌5min后加入1.0mol/L HAc 1.0mL，室温搅拌反应24h。

将反应混合物10000r/min离心15min，弃去上清，将下层固体在一个大气压下100℃干燥12h。将干燥好的固体用甲醇-盐酸混合溶液超声清洗，所述甲醇-盐酸混合溶液由6.0mol/L的盐酸与甲醇按体积比1∶1混合制得，再用0.05mol/LKOH和适量超纯水超声-离心清洗至pH近中性。将最后一次离心的固体在一个大气压下100℃干燥12h后备用。空白聚合物(NMIP)的制备和处理除不加BPA外其他相同。

精密称取50mg TBBPA-MIP于50mL具塞离心管中，加入浓度为0.250mmol/L的TBBPA甲苯溶液10mL超声3min混匀后放入室温(25℃)恒温水浴振荡器中振荡24h后，10000r/min离心15min，取上清液紫外分光光度法测定吸光度，计算分配系数Kd(mL/g)。NMIP作对照试验。结果见表1。

实施例8

精密称定0.36gBPDP，0.4g400nm SiO2加入100mL圆底烧瓶中，加40mL甲醇，搅拌10min。再加入氨丙基三乙氧基硅烷2mL，搅拌10min。再加TEOS4mL，搅拌5min后加入1.0mol/L HAc 1.0mL，室温搅拌反应24h。

将反应混合物10000r/min离心15min，弃去上清，将下层固体在一个大气压下100℃干燥12h。将干燥好的固体用甲醇-盐酸混合溶液超声清洗，所述甲醇-盐酸混合溶液由1.0mol/L的盐酸与甲醇按体积比1∶3混合制得，再用0.05mol/LKOH和适量超纯水超声-离心清洗至pH近中性。将最后一次离心的固体在一个大气压下100℃干燥12h后备用。空白聚合物(NMIP)的制备和处理除不加BPA外其他相同。

精密称取50mg BPDP-MIP于50mL具塞离心管中，加入浓度为0.250mmol/L的BPDP甲苯溶液10mL超声3min混匀后放入室温(25℃)恒温水浴振荡器中振荡24h后，10000r/min离心15min，取上清液紫外分光光度法测定吸光度，计算分配系数Kd(mL/g)。NMIP作对照试验。结果见表1。

实施例9

采用100mg实施例2合成的BPA-MIP为固相萃取填料，制成MIP-SPE。先用10mL甲醇淋洗MIP-SPE，0.5mL/min，再用2mL甲苯淋洗，0.5mL/min。分别上样含有12.5nmol BPA的不同体积2，25，100，250，350，500mL甲苯溶液，再用2mL甲醇洗脱，0.2mL/min，收集洗脱液，高效液相分析。计算不同上样体积的回收率，结果见图7。流动相为甲醇-水(甲醇∶水为65∶35，v/v)；waters2487双波长紫外检测器，λ为278nm；色谱柱为Hipersil BDS-C18(Yilite)，5μm，4.6×150mm。

表1

实施例1、2分别采用不同粒径的SiO2为载体合成的BPA-MIP对模板分子均具有选择性吸附性能。由于大粒径BPA-MIP分散性好，静态吸附试验显示其吸附性能较100nmMIP稍优。但是小粒径MIP可用于涂渍传感器或者固相微萃取(SPME)纤维针头，大粒径可用来填充固相萃取柱(SPE)。可根据实际需要调整载体粒径，以满足使用需要。

实施例2、7、8，分别以BPA、TBBPA、BPDP为模板分子合成MIP，对各自的模板分子均显示出较优的选择性。说明以本发明所述方法以此类酚类为模板分子合成的MIP对各自的模板均具有较佳的选择性和吸附性能。本发明具有广泛的应用范围。

实施例2、3、4、5调整TEOS、功能单体氨丙基三乙氧基硅烷，SiO2和BPA的量，静态吸附试验实验显示在其他试剂量不变的情况下，增加TEOS的量，吸附性能有所降低；减少BPA的量，选择性有所降低，但选择效果仍较佳；增加SiO2的量，选择性稍降低。

实施例9，BPA-MIP-SPE穿漏体积可达250mL，说明此SPE基本无模板渗漏，非常适合于痕量分析。

实施例10

利用现有技术，对不同粒径SiO2的制备方法举例：

100nm SiO2的制备：量取100mL无水乙醇于250mL圆底烧瓶中，再加入1.8mL超纯水和3.85mL浓氨水(25％体积分数)，搅拌(500r/min)5min后，搅拌(500r/min)的同时加入3.7mLTEOS(80μL/min)，搅拌(500r/min)室温反应15～18h。将反应混合物离心(10000r/min)15min，弃去上清，加入适量无水乙醇超声分散均匀，离心(10000r/min)15min，弃去上清，如此反复三次。将最后一次离心所得固体在一个大气压下60℃干燥8h。所得产物的透射电镜图如图1-a。

400nm SiO2的制备：量取44mL无水乙醇于250mL圆底烧瓶中，再加入5.95mL浓氨水(25％体积分数)，搅拌(500r/min)5min后，搅拌(500r/min)的同时加入1.8mLTEOS(80μL/min)，搅拌(500r/min)室温反应15～18h。将反应混合物离心(10000r/min)15min，弃去上清，加入适量无水乙醇超声分散均匀，离心(10000r/min)15min，弃去上清，如此反复三次。将最后一次离心所得固体在一个大气压下60℃干燥8h。所得产物的透射电镜图如图1-b。

通过控制超纯水、浓氨水(25％体积分数)和TEOS的加入比例来制备颗粒均匀不同粒径的SiO2。