垂盆草制剂的检测方法转让专利
申请号 : CN200810106150.5
文献号 : CN101574387B
文献日 : 2012-07-11
发明人 : 付立家 , 付建家
申请人 : 北京亚东生物制药有限公司
摘要 :
权利要求 :
1.一种垂盆草制剂的检测方法,其特征在于该方法包括如下步骤:
所述制剂按如下方法制备:取鲜垂盆草加水煎煮1小时,滤过,减压浓缩至60~65℃测相对密度1.24的清膏;加一倍量92%的乙醇,搅匀,静置8~12小时;吸取上清液,减压浓缩至相对密度1.36~1.38的浸膏;取浸膏加入辅料,制成颗粒剂、片剂、胶囊剂、软胶囊剂、滴丸剂;
所述检测方法包括以下两种检测:
a.取本制剂,粉碎,加乙醚超声处理,用布氏漏斗抽滤,滤液挥干,残渣加氯仿1毫升作为供试品溶液;另取垂盆草,加水煎煮,放凉,滤过,滤液浓缩,放凉后加95%乙醇,摇匀,用布氏漏斗抽滤,滤液至水浴上蒸去乙醇,残液加乙醚萃取,醚液挥干,残渣加氯仿1毫升作为对照药材溶液;吸取上述两种溶液点于同一硅胶G薄层板上,以正己烷-乙酸乙酯为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%香草醛硫酸溶液,105℃加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与垂盆草对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的斑点;
b.取本制剂,粉碎,精密称定,置250毫升圆底烧瓶中,精密加入无水乙醇,密塞,称定重量,静置1小时后,水浴回流,放凉,称定重量,用无水乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液置蒸发皿中,蒸干,105℃干燥,移置干燥器中,冷却,迅速精密称定重量,计算,即得。
2.如权利要求1所述的盆草颗粒剂的检测方法,其特征在于该方法包含下述两种检测:
a.取本制剂,粉碎,称取20克,加乙醚50毫升,超声处理30分钟,用布氏漏斗抽滤,滤液挥干,残渣加氯仿1毫升作为供试品溶液;另取垂盆草5克,加水100毫升煎煮1小时,放凉,滤过,滤液浓缩至约20毫升,放凉后加95%乙醇20毫升,摇匀,用布氏漏斗抽滤,滤液至水浴上蒸去乙醇,残液加乙醚30毫升萃取,醚液挥干,残渣加氯仿1毫升作为对照药材溶液;吸取上述两种溶液各5~10μl点于同一硅胶G薄层板上,以8∶3比例的正己烷-乙酸乙酯为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%香草醛硫酸溶液,105℃加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与垂盆草对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的斑点;
b.取本制剂,粉碎,取4克,精密称定,置250毫升圆底烧瓶中,精密加入无水乙醇
100ml,密塞,称定重量,静置1小时后,水浴回流1小时,放凉,称定重量,用无水乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液25毫升置蒸发皿中,蒸干,105℃干燥3小时,移置干燥器中,冷却30分钟,迅速精密称定重量,计算,即得;本品含无水乙醇浸出物不得低于
2.0%。
说明书 :
垂盆草制剂的检测方法
技术领域
背景技术
114页,公布了垂盆草冲剂的质量标准,但该标准缺少该制剂的质量控制方法;“垂盆草苷
的含量测定与药理研究”(《中医药学刊》2003年8月第21卷第8期)公开了垂盆草苷的
含量测定方法,但垂盆草苷不稳定,易分解,不宜作为该制剂质量控制的指标;而且垂盆草
中还含有三萜类等成分亦具有保肝活性,因此单纯以垂盆草苷的含量为质量控制指标不能
科学反映垂盆草制剂的疗效。因此,该制剂需要建立快速、灵敏、可靠的质量控制方法,以确保临床疗效的稳定、安全。
发明内容
静置8~12小时。吸取上清液,减压浓缩至相对密度1.36~1.38的浸膏。取浸膏加入辅
料,制成颗粒剂、片剂、胶囊剂、软胶囊剂、滴丸剂;其特征在于,该制剂的质量控制方法包括以下两种检测:
时,放凉,滤过,滤液浓缩至约20毫升,放凉后加95%乙醇20毫升,摇匀,用布氏漏斗抽滤,滤液至水浴上蒸去乙醇,残液加乙醚30毫升萃取,醚液挥干,残渣加氯仿1毫升作为对照药
材溶液。吸取上述两种溶液各5~10μl点于同一硅胶G薄层板上,以8∶3比例的正己
烷-乙酸乙酯为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%香草醛硫酸溶液,105℃加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与垂盆草对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的斑点。
干燥器中,冷却30分钟,迅速精密称定重量,计算,即得。本品含无水乙醇浸出物不得低于
2.0%。
速、灵敏、可靠的特点,能够全面反映药品质量。
具体实施方式
升萃取,醚液挥干,残渣加氯仿1毫升作为对照药材溶液。
展开效果 斑点分离不好,有干扰 斑点较清晰,分离较好 斑点不清晰,颜 色较浅[0022] 由上述结果可以看出,选择方法b作为该供试品溶液的制备方法。
酸-水(4∶1∶5)、乙酸乙酯-甲醇-水(8∶1∶1),取出,晾干,喷以5%香草醛硫酸溶
液,105℃加热,观察供试品色谱中,在与垂盆草对照药材色谱相应的位置上斑点显色情况。
结果见表2
(8∶3) (4∶1∶5) (8∶1∶1)
展开效果 分离不好,有托尾现象 斑点清晰,分离较好 斑点显色较浅 斑点显色较浅[0027] 从表2可以看出展开剂配比为正己烷-乙酸乙酯(8∶3)时,供试品溶液展开效
果最好,没有出现拖尾、主斑点分离不好等现象。
结果见表3:
效果 供试品在相应对照 供试品在相应对照品 供试品在相应对照品 供试品在相应对照品 供试品在相应对照品品位置无斑点 位置斑点显色很浅 位置斑点显色清晰 位置斑点显色清晰 位置斑点分离不好
时,放凉,滤过,滤液浓缩至约20毫升,放凉后加95%乙醇20毫升,摇匀,用布氏漏斗抽滤,滤液至水浴上蒸去乙醇,残液加乙醚30毫升萃取,醚液挥干,残渣加氯仿1毫升作为对照药
材溶液。吸取上述两种溶液各5~10μl点于同一硅胶G薄层板上,以8∶3比例的正己
烷- 乙酸乙酯为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%香草醛硫酸溶液,105℃加热至斑点显
色清晰,供试品色谱中,在与垂盆草对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的斑点。
1 0.5 134.4 3.36
2 1.0 174.8 4.37
3 2.0 175.2 4.38
度40℃±2℃、相对湿度75%±5%的条件下放置4个月,温度25℃±2℃、相对湿度60%
±10%的条件下再放置4个月;将实施例4所得样品在温度40℃±+2℃、相对湿度75%
±5%的条件下放置8个月。对进行完稳定性试验后的该三批样品用上述试验例1和试验
例2所得方法进行定性和定量检测,结果见下表:
实施例2 供试品色谱中,在与垂盆草对照药材色谱 3.86%
相应的位置上显相同颜色的斑点。
实施例3 供试品色谱中,在与垂盆草对照药材色谱 3.43%
相应的位置上未显示相同颜色的斑点。
实施例4 供试品色谱中,在与垂盆草对照药材色谱 1.52%
相应的位置未显示相同颜色的斑点。
组动物适应性喂养3d后,除正常对照组外,每只小鼠1次尾静脉注射卡介苗5×10 个活菌,
于注射BCG后第12d静脉注射脂多糖7.5μg/鼠,于16h后处死取材,正常对照组2次都以
相同方法注射等量生理盐水。
莲清肝颗粒,3.9g/kg剂量给药;本发明药物治疗组,3.9g/kg剂量给药。正常对照组于第
12d注射生理盐水后16h,眼球后静脉丛取血,并处死动物取肝组织送检;其余组于静脉注
射脂多糖后16h,眼球后静脉丛取血,并处死动物取肝组织送检。
条件下,3000转/min,离心10min,取上清液。③内皮素(ET)检测:采用放射免法直接测定
血浆ET浓度。④病理观察:持续灌胃12d后,全部小鼠眼球采血处死,立即剖取肝组织,大
体观察肝脏质地、色泽、有无结节、出血等,并取肝脏组织同一部位作病理切片,用10%的甲醛溶液固定,常规脱水,石蜡包埋切片,HE染色,光镜下观察肝脏病理形态学变化。结果见下表
药。正常对照组于第12d注射生理盐水后16h,眼球后静脉丛取血,并处死动物取肝组织送
检;其余组于静脉注射脂多糖后16h,眼球后静脉丛取血,并处死动物取肝组织送检。
A 10 \ 42.17±20.04 109.12±14.07 1.63±0.25
B 10 \ 277.84±99.22 363.14±72.47 2.07±0.28
C 10 2.7g/kg 48.48±29.15** 118.53±19.18** 1.86±0.62
D 10 2.7g/kg 37.36±14.92** 66.17±16.26**Δ 1.52±0.26
E 10 2.7g/kg 142.27±23.64* 182.39±33.17 1.78±0.22
F 10 2.7g/kg 223.35±12.16 293.75±32.54 1.97±0.42
差异,并且,通过D、E、F组的比较发现,定性和定量检测结果都与本发明所述药品的疗效相关,将两方法联合应用,可以有效控制药品的内在质量,能够保证药品的疗效。
的浸膏。低温减压干燥,按浸膏粉1份、聚乙二醇4000 2份的比例滴制成丸,制成5000粒,
即得。
1小时,放凉,滤过,滤液浓缩至约20毫升,放凉后加95%乙醇20毫升,摇匀,用布氏漏斗抽滤,滤液至水浴上蒸去乙醇,残液加乙醚30毫升萃取,醚液挥干,残渣加氯仿1毫升作为对
照药材溶液。吸取上述两种溶液各10μl点于同一硅胶G薄层板上,以正己烷-乙酸乙酯
(8∶3)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%香草醛硫酸溶液,105℃加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与垂盆草对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的斑点。
浸膏。按浸膏1份、蔗糖4份、糊精1份的比例制成颗粒3000g,干燥,分装,即得。
1小时,放凉,滤过,滤液浓缩至约20毫升,放凉后加95%乙醇20毫升,摇匀,用布氏漏斗抽滤,滤液至水浴上蒸去乙醇,残液加乙醚30毫升萃取,醚液挥干,残渣加氯仿1毫升作为对
照药材溶液。吸取上述两种溶液各5μl点于同一硅胶G薄层板上,以正己烷-乙酸乙酯
(8∶3)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%香草醛硫酸溶液,105℃加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与垂盆草对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的斑点。
膏。按浸膏1份、淀粉2份、硬脂酸镁0.1份的比例制成颗粒,压片,制成5000片,即得。
材溶液。吸取上述两种溶液各5μl点于同一硅胶G薄层板上,以正己烷-乙酸乙酯(8∶3)
为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%香草醛硫酸溶液,105℃加热至斑点显色 清晰,供试品色谱中,在与垂盆草对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的斑点。
浸膏。按浸膏1份、糊精3份的比例制成颗粒,装胶囊,制成4500粒,即得。
1小时,放凉,滤过,滤液浓缩至约20毫升,放凉后加95%乙醇20毫升,摇匀,用布氏漏斗抽滤,滤液至水浴上蒸去乙醇,残液加乙醚30毫升萃取,醚液挥干,残渣加氯仿1毫升作为对