一种节杆菌产β-呋喃果糖苷酶的发酵培养基及发酵方法

摘要

一种节杆菌产β-呋喃果糖苷酶的发酵培养基和发酵方法，属生物技术工程领域，发酵培养基组成成份为：蔗糖3～7g/L，牛肉膏25～40g/L，酵母膏2～3g/L，(NH4)2HPO48～12g/L，KH2PO4 0.5～1g/L，MgSO4·7H2O 0.1～0.5g/L，余为水；先将菌种活化、培养，然后加入上述发酵培养基，初始pH值为6.0～8.0，发酵温度为25～45℃，接种量为1～4％；本发明大大优于现有技术的培养基配方，菌株生物量高、产酶量高、酶活性高。

权利要求

1.一种节杆菌产β-呋喃果糖苷酶的发酵培养基，其特征是其组成成份为：蔗糖3～

7g/L，牛肉膏25～40g/L，酵母膏2～3g/L，(NH4)2HPO48～12g/L，KH2PO40.5～1g/L，MgSO4·7H2O 0.1～0.5g/L，余为水。

2.一种权利要求1所述的发酵培养基用于节杆菌产β-呋喃果糖苷酶的发酵方法，其特征是将菌种活化、培养，然后加入上述发酵培养基，初始pH值为7.0，发酵温度为30～

37℃，接种量为1～4％。

说明书

一种节杆菌产β-呋喃果糖苷酶的发酵培养基及发酵方法

技术领域

[0001] 本发明属生物技术工程领域，特别涉及微生物发酵培养基及其发酵方法。

[0002] 背景资料

[0003] β-呋喃果糖苷酶广泛地存在于生物界，不同微生物来源的β-呋喃果糖苷酶的性质不同，其中节杆菌β-呋喃果糖苷酶主要用于转移果糖至单糖或寡糖上，在以蔗糖和乳糖为原料下，将蔗糖分解产生的果糖基转移至乳糖还原性末端的C1位羟基上，生成半乳糖基蔗糖即低聚乳果糖(Lactosucrose，LS)。低聚乳果糖几乎不被人体消化吸收，摄入后不会引起体内血糖水平和血液胰岛素水平的波动，可供糖尿病人食用；该糖也是双歧杆菌增殖因子，与其它双歧杆菌增殖因子如低聚果糖、低聚异麦芽糖等相比，低聚乳果糖的双歧杆菌增殖活性更高，甜味特性也更接近于蔗糖。

[0004] 节杆菌(Arthrobacter sp.10138)是从土壤中分离出来的一种革兰氏阳性菌，严格需氧，属化能异养型。使用不同的发酵培养基，节杆菌所产的β-呋喃果糖苷酶的酶活不一样。据“节杆菌10137产β-呋喃果糖苷酶条件及酶学性质”报道(无锡轻工大学学报，2004(23))，β-呋喃果糖苷酶的酶活力为177.78u/ml。生产出的β-呋喃果糖苷酶活性比较低。

发明内容

[0005] 本发明的目的是提供一种用于生产β-呋喃果糖苷酶的发酵培养基，使培养基的菌株生物量高、产酶量高、酶活性高、生产成本低。

[0006] 本发明所述的发酵培养基为：蔗糖3～7g/L，牛肉膏25～40g/L，酵母膏2～3g/L，(NH4)2HPO4 8～12g/L，KH2PO4 0.5～1g/L，MgSO4·7H2O 0.1～0.5g/L，余为水。

[0007] 本发明所述的发酵方法如下：

[0008] 用现有技术，将菌种活化、培养，然后加入上述发酵培养基，初始pH值为6.0～8.0，发酵温度为25～45℃，接种量为1～4％。

[0009] 本发明所述的发酵温度最佳为30～37℃。

[0010] 本发明所述的现有技术的菌种活化、培养，可以是以下步骤：

[0011] 1、活化：将保藏的节杆菌接入平板培养基中，于培养箱内30～37℃恒温培养36～48h，得到活化的菌种。

[0012] 2、一级种子培养：挑一环生长良好的活化菌种接入250ml摇瓶的一级种子培养基中，于摇床中培养24～36h。温度设定为27～37℃，摇速为100～150r/min。

[0013] 3、二级种子培养：将培养好的一级种子按5～10％的接种量接入250ml摇瓶的二级种子培养基中，于摇床内培养。温度设定为27～37℃，摇速为100～150r/min。培养时间由节杆菌的生长曲线确定。

[0014] 本发明培养基用于微生物发酵产酶大大优于现有技术的培养基配方。本发明培养基培养的菌株生物量高、产酶量高、酶活性高。