一种前列地尔注射液的制备方法

摘要

本发明涉及一种前列地尔注射液的制备方法。前列地尔注射液由前列地尔，注射用油，乳化剂，稳定剂，等张剂，pH调节剂和注射用水制成。所制得的产品比市售品质量标准有显著的提高，增加了临床用药的安全性。

权利要求

1. 一种前列地尔注射液的制备方法，由前列地尔，注射用油，乳化剂，稳定剂，等 张剂，pH调节剂和注射用水制成，其特征在于，包括以下步骤：(1)水相的制备：将等张剂加入水中溶解，加热至55〜70°C，备用；(2)油相的制备：将注射用油加热至55〜70°C，分别加入乳化剂，稳定剂溶解，加 入前列地尔，搅拌使其溶解；(3)初乳的制备：将步骤（2)油相加入步骤（1)水相中，温度55〜70°C，高速剪切 分散，形成初乳；(4)pH值调节：将步骤（3)初乳快速降温至15〜30°C，调节pH值4.0〜6.0 ；(5)高压勻化：将步骤（4)初乳经微射流仪高压勻化，温度控制15〜30°C ；(6)无菌过滤：将步骤（5)制得乳剂经0.45 μ m无机陶瓷膜初滤，然后经0.22 μ m囊 式过滤器过滤除菌，无菌灌封，即得前列地尔注射液；(7)步骤（1)至（6)均在氮气保护下操作，全过程采用无菌万级和局部百级非终端灭 菌注射剂的生产工艺流程。

2.根据权利要求1所述的前列地尔注射液的制备方法，其特征在于，所述的高速剪切 分散时间为15〜60分钟，剪切速度为3000〜lOOOOrpm。

3.根据权利要求1所述的前列地尔注射液的制备方法，其特征在于，所述的高压勻化 压力为600〜2000bar，勻化次数3〜6次。

4.根据权利要求1〜3任一所述的前列地尔注射液的制备方法，其特征在于，所述的 注射用油为精制大豆油、花生油、红花油、中链甘油单酯、中链甘油双酯、中链甘油三 酯、棉籽油、橄榄油、椰子油、油酸乙酯、乙酰化单甘油酯、丙二醇双酯、亚油酸甘油 酯、麻油聚乙二醇月桂酸甘油酯中的一种或多种。

5.根据权利要求1〜3任一所述的前列地尔注射液的制备方法，其特征在于，所述的 乳化剂为大豆卵磷脂或蛋黄卵磷脂，其中磷脂酰胆碱的含量为85%以上。

6.根据权利要求1〜3任一所述的前列地尔注射液的制备方法，其特征在于，所述的 稳定剂为油酸、胆酸、脱氧胆酸中的一种或多种。

7.根据权利要求1〜3任一所述的前列地尔注射液的制备方法，其特征在于，所述的 等张剂为甘油、甘露醇、山梨醇、葡萄糖中的一种或多种。

8.根据权利要求1〜3任一所述的前列地尔注射液的制备方法，其特征在于，所述的 pH调节剂为氢氧化钠，盐酸，柠檬酸，柠檬酸钠，醋酸，醋酸钠中的一种。

9.根据权利要求1〜3任一所述的前列地尔注射液的制备方法，其特征在于，所述的 囊式过滤器材质为亲水性微孔滤膜。

10.根据权利要求9所述的前列地尔注射液的制备方法，其特征在于，所述的亲水性 微孔滤膜为聚偏氟乙烯膜、聚丙烯膜，聚醚砜膜中的一种。

说明书

一种前列地尔注射液的制备方法

技术领域

[0001] 本发明涉及一种前列地尔注射液的制备方法。 背景技术

[0002] 前列地尔，又称前列腺素E1 (PGE1),是一种活性极强的生理活性物质，具有抑 制血小板聚集、血栓素A2生成、动脉粥样脂质斑块形成及免疫复合物的作用，并能扩张 外周和冠脉血管的药理作用，主要用于治疗慢性动脉闭塞症（血栓闭塞性脉管炎、闭塞 性动脉硬化症等）引起的四肢溃疡及微小血管循环障碍引起的四肢静息疼痛，改善心脑 血管微循环障碍以及慢性肝炎的辅助治疗。目前上市的品种为前列地尔注射液，其性状 为一种白色乳状液体。已上市的前列地尔注射液中降解产物前列腺素A1的含量限度为 3yg/ml,占主药含量的60%。

[0003] 前列腺素A1的含量，溶血磷脂的含量与处方和制备工艺都有很大关系，现有 技术中，主要通过改变产品的剂型或增加辅料种类（如助乳化剂、增溶剂、抗氧化剂） 来改善产品的质量，如专利申请200910058187.x公开了一种稳定的前列地尔注射液及 其制备方法，处方中含有前列地尔，注射用油，卵磷脂，泊洛沙姆（助乳化剂），甘油 等。专利申请200310102253.1公开了一种含有前列地尔的注射剂及生产工艺，处方包 括前列地尔，无水乙醇，聚乙二醇，二甲基甲酰胺，2-羟丙基-β-环糊精（增溶剂）、 半胱氨酸。专利申请200610067746.x公开了一种前列地尔小输液及其制备方法，处方 含有前列地尔，乳化剂，甘油三酯类化合物，渗透压调节剂，稳定剂，抗氧剂，ρΗ调节 剂。专利申请200710011921.8公开了一种静脉输液用前列地尔乳剂及制备方法，其处 方含有前列地尔，注射用油，乳化剂，稳定剂，等张剂，抗氧剂，ρΗ调节剂。专利申 请200610034259.3公开了一种前列地尔纳米乳注射剂及其制备方法，其辅料包括注射用 油，亲水性乳化剂，亲油性乳化剂，等张剂，稳定剂，属于四元体系，属于热力学稳定 体系，已本质上不同于乳剂。专利申请200910010165.6公开了一种荷电性的前列腺素 E1脂微球注射液及其制备方法，其所用辅料为注射用油，乳化剂，助乳化剂，等渗调节 剂，抗氧剂，和ρΗ调节剂，其制备的脂微球注射液与上市的前列地尔注射液具有本质的 不同，具体主要在于两者载药方式完全不一致，已上市的前列地尔注射液中的药物主要 包封于油性基质中，该发明的脂微球中的药物主要分布于油水界面中。因此，上述专利 公开的处方与本发明的剂型有着本质上的不同，上述现有技术主要是通过调整处方来提 高产品的质量，而且并未给出如下的技术启示：将其制备方法用于现有上市产品前列地 尔注射液可以提高现有产品的质量。从注射剂安全性角度考虑，增加辅料的种类在提高 制剂外在质量的同时，也增加了体内的安全性隐患。最好的方式，是在现有的剂型处方 条件下，通过优化工艺参数来提高产品的质量。

[0004] 注射剂的无菌工艺可分为两种：一种是采用终端灭菌的生产工艺流程，全过程 可在万级生产条件下制备前列地尔注射液，经微孔滤膜过滤后，灌封，采用过度杀灭法 或残存概率法灭菌，即得；另一种是采用非终端灭菌注射剂生产方法，包括过滤除菌和无菌操作。常规的过滤除菌是全过程可在有菌万级和局部百级生产条件下进行，产品的 无菌度主要靠过滤及后续的无菌灌封控制步骤控制。为了更好的控制无菌条件，可将整 个生产过程控制在无菌万级和局部百级生产条件下，通过多个点来控制产品的无菌度。

[0005] 常规的过滤除菌过程中，不能通过的物质沉积后留在了滤材上，随着过滤的继 续进行，压差会逐渐增大，通量明显降低，即大家俗称的“死端过滤”。而陶瓷膜则不 同，陶瓷膜是错流过滤，又称切向流方式过滤。料液在压力驱动下进入系统，并在膜管 内高速流动，方向不是压向膜的表面，而是切向流过膜面形成所谓的切向流。小分子小 粒径物质透过膜，大分子物质或大颗粒被膜截留，从而达到分离、浓缩、纯化的目的。 其与传统工艺相比，可提高产品收率，缩短工时。近年来多用于中药口服液注射液的除 杂，除菌以及热源的去除。尚未见将其应用于乳剂、亚微乳，微乳等特殊剂型的过滤。

[0006] 本发明中的前列地尔注射液剂型为亚微乳，常规注射剂采用的无菌过滤器较难 完成前列地尔注射液的除菌过滤，因为滤器表面会粘附一层极稠的粘液（乳剂的局部浓 缩液），导致未滤乳剂无法到达滤膜表面，从而是除菌过滤无法完成。

发明内容

[0007] 本发明提供一种前列地尔注射液的制备方法，由前列地尔，注射用油，乳化 剂，稳定剂，等张剂，pH调节剂和注射用水制成，其特征在于，包括以下步骤：

[0008] (1)水相的制备：将等张剂加入水中溶解，加热至55〜70°C，备用；

[0009] (2)油相的制备：将注射用油加热至55〜70°C，分别加入乳化剂，稳定剂溶 解，加入前列地尔，搅拌使其溶解；

[0010] (3)初乳的制备：将步骤（2)油相加入步骤（1)水相中，温度55〜70°C，高速 剪切分散，形成初乳；

[0011] (4)pH值调节：将步骤（3)初乳快速降温至15〜30°C，调节pH值4.0〜6.0 ；

[0012] (5)高压勻化：将步骤（4)初乳经微射流仪高压勻化，温度控制15〜30°C ；

[0013] (6)无菌过滤：将步骤（5)制得乳剂经0.45μιη无机陶瓷膜初滤，然后经 0.22 μ m囊式过滤器过滤除菌，无菌灌封，即得前列地尔注射液；

[0014] (7)步骤（1)至（6)均在氮气保护下操作，全过程采用无菌万级和局部百级非终 端灭菌注射剂的生产工艺流程。

[0015] 步骤（3)所述的高速剪切分散时间为15〜60分钟，剪切速度为3000〜 IOOOOrpmo

[0016] 步骤（5)所述的高压勻化方法为，压力600〜2000bar，高压勻化3〜6次。

[0017] 本发明所述的注射用油为精制大豆油、花生油、红花油、中链甘油单酯、中链 甘油双酯、中链甘油三酯、棉籽油、橄榄油、椰子油、油酸乙酯、乙酰化单甘油酯、丙 二醇双酯、亚油酸甘油酯、麻油聚乙二醇月桂酸甘油酯中的一种或一种以上。

[0018] 本发明所述的乳化剂为大豆卵磷脂或蛋黄卵磷脂，其中磷脂酰胆碱的含量为 85%以上。

[0019] 本发明所述的稳定剂为油酸、胆酸、脱氧胆酸中的一种或一种以上。

[0020] 本发明所述的等张剂为甘油、甘露醇、山梨醇、葡萄糖中的一种或一种以上。

[0021] 本发明所述的pH调节剂为氢氧化钠，盐酸，柠檬酸，柠檬酸钠，醋酸，醋酸钠中的一种。

[0022] 所述的囊式过滤器材质为亲水性微孔滤膜。所述的亲水性微孔滤膜为聚四氟乙 烯，醋酸纤维素，硝酸纤维素，混合纤维素，活性炭纤维素，玻璃纤维素，聚偏氟乙烯 膜、聚丙烯膜，聚醚砜膜中的一种。

[0023] 本发明首次将陶瓷膜过滤技术应用于前列地尔注射液的初滤，惊奇的发现，与 常规的微孔滤膜的初滤方式相比，经陶瓷膜过滤，不仅使得药液的外观得以很大的改 善，而且也加快了后续过滤除菌的速度，缩短了整个工序的操作时间，提高了产品的收 率，更重要的是对降低降解产物的含量也有明显的效果，可以更好的保证产品的质量均一稳定。

[0024] 本发明的生产条件是在全程无菌万级和局部百级的条件下，全过程控制产品的 无菌度，更好的保证产品的质量。

[0025] 综上所述，本发明通过优化工艺参数，采用陶瓷膜过滤技术以及全过程控制产 品的无菌度，取得了预料不到的技术效果，其不仅改善了产品的外观，缩短了过滤工序 的时间，而且显著降低了降解杂质和溶血磷脂含量，提高了产品的质量标准，同时产品 的稳定性也由现在的12个月延长到18个月，临床验证结果表明，本发明的产品在保证疗 效的基础上，明显降低了不良反应的发生率，提高了临床用药的安全性。具体实施例

[0026] 实施例1 ：

[0027] 为方便考察工艺，本发明拟定处方如下，但本发明的工艺不仅限于适应该具体 处方。

[0028] 前列地尔注射液处方

[0029]前列地尔（PGE1) 5mg

[0030] 精制大豆油 IOOg

[0031] 蛋黄卵磷脂 12g

[0032]油酸 1.8g

[0033]甘油 22.5g

[0034] 氢氧化钠 适量

[0035] 注射用水加至 IOOOml

[0036] 工艺过程：（1)水相的制备：将甘油加入水中溶解，加热至55〜70°C，备用；

[0037] (2)油相的制备：将精制大豆油加热至55〜70°C，分别加入蛋黄卵磷脂，油酸 溶解，加入前列地尔，搅拌使其溶解；

[0038] (3)初乳的制备：将步骤（2)油相加入步骤（1)水相中，温度55〜70°C，高速 剪切分散，剪切速度8000rpm，时间15分钟，形成初乳；

[0039] (4)pH值调节：将步骤（3)初乳快速降温至15〜30°C，用氢氧化钠调节pH值 4.0 〜6.0 ；

[0040] (5)高压勻化：将步骤⑷初乳经微射流仪高压勻化3〜6次，压力600〜 2000bar,温度控制15〜30°C ；

[0041] (6)无菌过滤：将步骤（5)制得乳剂经0.45μιη无机陶瓷膜初滤，然后经0.22 μ m囊式过滤器过滤除菌，无菌灌封，即得前列地尔注射液；

[0042] (7)步骤（1)至（6)均在氮气保护下操作，全过程采用无菌万级和局部百级非终 端灭菌注射剂的生产工艺流程。

[0043] 实施例2 ：初乳的制备温度

[0044] 分别设置三个温度考察点，在其他工艺条件相同的情况下，以乳化效果、前列 腺素E1 (PGE1)和降解产物前列腺素A1 (PGA1)的含量为指标，分别在50、55、70、90°C 进行考察，结果见表1。

[0045] 表1乳化剂分散温度的考察（制成IOOmL)

[0046]

[0047] 试验结果表明，50°C的乳化效果较差，有明显的油滴，不适合进行下一步的高 压勻化；含量测定结果表明，过高的分散温度不利于药物的稳定性，综合考虑，选择初 乳化温度55〜70°C可以满足产品的质量要求。

[0048] 实施例3 ：高压乳勻温度的选择

[0049] 取实施例2中55°C条件下制备的初乳，考察了在两种温度范围值高压勻化后的 成品，以平均粒径、前列腺素E1和降解产物前列腺素A1的含量为指标。结果见下表2。

[0050] 粒径分布测定方法：取样品，用纯化水（经0.22 μ m微孔滤膜滤过），分别稀释 至5000倍，混勻，作为供试品溶液，用动态激光散射粒径仪测定。

[0051] 表2高压乳勻分散温度的考察（制成IOOmL)

[0052]

[0053] 结果表明，与25°C条件相比，高压勻化温度在65°C能得到粒径更小且分布均勻 的脂肪乳液，但同时造成药物含量的下降和降解产物A1的升高。因此，本发明最终选择 较低温条件下（15〜30°C )进行高压勻化。温度低于15°C时，对药物含量和讲解产物没 有进一步明显的改善，而且使得药液粘度增加，粒径分布不均勻性增加，同时增加了仪 器设备的负荷。

[0054] 实施例4 ：乳化工艺时的压力与勻化次数的关系

[0055] 用纳米超高压勻质机将粗乳液在一定压力、勻化次数条件下进行精乳化时，压 力大，勻化次数就少，但压力超过一定值时，就可能发生破乳。因此在保证乳剂稳定的 前提下，选择一定的工作压力和勻化次数，可以提高工作效率和降低仪器损耗和成本。 制备本品所用的纳米超高压勻质机最大工作压力可达2000bar，试验考察过程中，发现工 作压力约为IOOObar时，仅勻化3次就可达到所需的粒径大小，且工艺重现性良好，质量 稳定。先低压600〜800bar勻化2次；然后高压1200〜1400bar勻化2次。或者先低压800〜IOOObar勻化1次；然后高压1300〜1500bar勻化2次。都可以制备质量稳定的产品。

[0056] 实施例5 ： pH值的选择

[0057] 脂质纳米球稳定性下降的主要表现有可逆性絮凝和不可逆性合并。当脂质纳米 球表面荷负电时，酸性药物能增大表面电荷，有助于提高稳定性。本品使用的磷脂为表 面荷负电的磷脂酰胆碱，前列腺素E1为氧代环戊烷庚酸，是弱酸性药物，其降解受酸催 化；当本品的脂质纳米球液滴带负性荷电时，在pH较低的介质中，H+富集于油/水界 面，不利于前列腺素E1的稳定。因此，用氢氧化钠调节pH值为4.0〜6.0之间。经稳 定性考察，本品的各项指标均符合规定。

[0058] 实施例6 ：本发明产品与市售品的质量比较

[0059] 以产品外观、pH值、乳粒、溶血磷脂、PGAp PGE1含量测定等项目为指标， 与市售的前列地尔注射液进行比较，结果见表3

[0060] 表3产品质量比较

[0061]

[0062] 产品比较结果表明，本发明产品降解产物PGA1低于市售品的三分之一，本发明 产品的质量标准制定降解产物的限度为30%，仅为为市售产品质量标准限度的一半。溶 血磷脂的含量测定结果表明，本发明产品溶血磷脂含量限度制定为5%，市售品溶血磷脂 含量限度为7.5%。并经稳定性试验考察结果表明，本品在与市售品在同样的条件下放 置，本品放置18个月各项指标均符合要求，本品有效期可达18个月，市售品的有效期仅 为12个月。

[0063] 实施例7产品的初滤方式比较

[0064] 取本发明的高压乳勻后乳液，分别采用传统微孔滤膜过滤（混合纤维素材质， 孔径0.45 μ m)和无机陶瓷膜过滤（孔径0.45 μ m)，结果，后者的过滤时间仅是前者的 1/2，产品收率比前者提高了近10%，后者所得滤液的外观明显优于前者。传统微孔滤膜 过滤后，降解产物与过滤前相比，增加了 32.2%，而无机陶瓷滤膜过滤后降解产物与过 滤前相比增加了仅7.1%，具有明显差异。

[0065] 实施例8产品的无菌度比较

[0066] 其他条件不变，分别按终端灭菌、有菌万级和局部百级、无菌万级和局部百级 制备前列地尔注射液，进行无菌度检测。三者无菌度均合格，但采用终端灭菌的前列地 尔注射液导致药物的含量下降，降解产物升高超出标准限度。无菌万级和局部百级生产 方式，采用的是全过程的无菌控制（多点控制），与有菌万级和局部百级方式（单点控 制）相比，安全性保证更高。

[0067] 实施例9

[0068] 前列地尔 5mg

[0069] 精制大豆油 50g[0070] 中链甘油三酯50g

[0071] 蛋黄卵磷脂12g

[0072] 油酸1.8g

[0073] 甘油22.5g

[0074] 氢氧化钠适量

[0075] 注射用水加至1000ml

[0076] 工艺过程：（1)水相的制备：将甘油加入水中溶解，加热至60°C，备用；

[0077] (2)油相的制备：将精制大豆油，中链甘油三酯混合后，加热至60°C，分别 加入蛋黄卵磷脂（磷脂酰胆碱含量98%以上），油酸溶解，加入前列地尔，搅拌使其溶 解；

[0078] (3)初乳的制备：将步骤（2)油相加入步骤（1)水相中，温度60°C，高速剪切分 散，剪切速度3500rpm，时间60分钟，形成初乳；

[0079] (4)pH值调节：将步骤（3)初乳快速降温至20°C，用氢氧化钠调节pH值4.2 ；

[0080] (5)高压勻化：将步骤⑷初乳经微射流仪高压勻化3次，压力1000〜 1500bar,温度控制20〜25°C ；

[0081] (6)无菌过滤：将步骤（5)制得乳剂经0.45μιη无机陶瓷膜初滤，然后经 0.22 μ m囊式过滤器（聚四氟乙烯材质）过滤除菌，无菌灌封，即得前列地尔注射液；

[0082] (7)步骤（1)至（6)均在氮气保护下操作，全过程采用无菌万级和局部百级非终 端灭菌注射剂的生产工艺流程。

[0083] 结果，所制备的乳剂各项指标均符合规定。

[0084] 实施例10

[0085] 前列地尔 5mg

[0086]棉籽油 IOOg

[0087] 大豆卵磷脂 15g

[0088]油酸 1.8g

[0089]甘油 22.5g

[0090] 氢氧化钠 适量

[0091] 注射用水加至 IOOOml

[0092] 工艺过程：（1)水相的制备：将甘油加入水中溶解，加热至65°C，备用；

[0093] (2)油相的制备：将棉籽油加热至65°C，分别加入大豆卵磷脂（磷脂酰胆碱含量 85%以上），油酸溶解，加入前列地尔，搅拌使其溶解；

[0094] (3)初乳的制备：将步骤（2)油相加入步骤（1)水相中，温度65°C，高速剪切分 散，剪切速度6000rpm，时间30分钟，形成初乳；

[0095] (4)pH值调节：将步骤（3)初乳快速降温至15°C，用氢氧化钠调节pH值5.8 ；

[0096] (5)高压勻化：将步骤（4)初乳经微射流仪高压勻化，低压600〜1000bar2次， 高压1200〜1500bar2次，温度控制15〜20°C ；

[0097] (6)无菌过滤：将步骤（5)制得乳剂经0.45μιη无机陶瓷膜初滤，然后经 0.22 μ m囊式过滤器（醋酸纤维素材质）过滤除菌，无菌灌封，即得前列地尔注射液；

[0098] (7)步骤（1)至（6)均在氮气保护下操作，全过程采用无菌万级和局部百级非终端灭菌注射剂的生产工艺流程。

[0099] 结果，所制备的乳剂各项指标均符合规定。

[0100] 实施例11产品的临床评价

[0101] 以下肢慢性动脉闭塞症为适应症，以市售的前列地尔注射液为阳性平行对照， 将本发明的制备的产品进行了的随机双盲、多中心临床有效性及安全性观察，217例 患者入组，本发明产品组108例，市售品对照组109例。给药方法为前列地尔注射液 2ml(IOyg)缓慢静脉推注10〜20分钟，每日一次，连续给药2周。主要评价指标为踝肱 比（ABI)，间歇性跛行，疼痛，麻木感，缺血性溃疡和溃疡面积。结果表明，市售品和 本发明制备的产品总体疗效临床有效率分别为62.55 % (其中显效38.42 %，良好24.13 % ) 和60.95% (其中显效37.14%，良好23.81%)，经CMH_x2检验差别亦无统计学意义（P >0.5)，两组疗效等同。市售品和本发明制备的产品患者不良事件发生率分别为11.11% 禾口 7.34%。