一种口服液的制备方法，属于保健食品领域。以蜂蜜、食用糖为原料，经啤酒酵母菌Saccharomyces cerevisiae和EM原露依次培养发酵，pH值降至3.6左右时，加入蜂蜜、矫味剂、防腐剂及适量水，经过滤、封装、热处理灭菌，即得。本发明制备方法所得口服液，适用于修复抗生素引起的粘膜损伤、治疗肠道菌群紊乱引起的腹泻、便秘以及提高免疫力，安全有效，且味道酸甜，尤其适合儿童服用。
(1)以菌种编号为CGMCC2.610的啤酒酵母Saccbaromycescerevisiae为菌株，常规方法接种于三角瓶制备二级液体菌种；新开封的EM原露无菌条件下以净化水稀释10倍，备用；
(2)按重量份将蜂蜜1-10份、食用糖1-10份、蛋白胨0.1-2份、硫酸镁0.01-0.2份、硫酸锰0.01-0.2份、磷酸氢二钾0.01-1份、氯化钠0.1-2份混合，加入净化的水75-96份溶解，热处理方法进行灭菌，作为培养基；
(3)待灭菌后的培养基冷却后，接种培养好的啤酒酵母二级液体菌种，接种量为0.1-2重量份；26-32℃培养16-24小时，然后接入10％EM原露0.1-2重量份，在35～40℃继续培养24-30小时，pH值降至3.3-4.5即可；
(4)将(3)所得药液，加入适量蜂蜜、矫味剂、少量防腐剂以及净化水，混合均匀；
(5)将(4)所得液体过滤，封装，热处理灭菌，即得。
2.权利要求1所述的口服液制备方法，其特征在于步骤(2)所述的食用糖为红糖、白糖、葡萄糖中的一种或几种。
3.权利要求1或2所述的口服液制备方法，其特征在于步骤(4)所述的矫味剂为食用糖或木糖醇，其中食用糖选自红糖、白糖或葡萄糖的一种或几种，防腐剂指苯甲酸钠或山梨酸钾或二者的结合。
4.权利要求3所述的口服液制备方法，其特征在于步骤(4)中各组分的配比为：步骤(3)所得药液70-85份、蜂蜜1-5份净化水10-25份、矫味剂0.5-2份、防腐剂0.3-0.8份。
5.权利要求1或2所述的口服液的制备方法，其特征在于步骤(2)或(5)中所述的热处理方法是在110-128℃温度下灭菌25-180分钟。
6.权利要求1所述方法制备得到的口服液在制备用于修复抗生素引起的粘膜损伤、治疗肠道菌群紊乱引起的腹泻、便秘或提高免疫力的口服液制剂中的应用。
口服液的制备方法
(一)技术领域
[0001] 本发明涉及一种用于修复抗生素引起的粘膜损伤、治疗肠道菌群紊乱引起的腹泻、便秘以及提高免疫力的口服液保健品的制备方法，属于保健食品领域。(二)背景技术
[0002] 有效微生物群(effective microorganisms，EM)是日本学者比嘉照夫于20世纪80年代研制而成的复合微生物群，主要由五大微生物菌群，即光合菌群、乳酸菌群、酵母菌群、革兰氏阳性放线菌群和发酵系丝状菌群复合培养而成。EM中的各种微生物在其生长过程中产生有用物质及其分泌物，成为各自或相互生长的基质和原料，通过这种共生增殖关系，形成一个复杂而稳定的微生态系统。目前市售的EM广泛应用于农业(种植)、畜牧(养殖)、水产、环保(水处理)和人体保健等领域。
[0003] 据统计，EM在人体上的功能已见对消化系统(肝腹水、胃肠炎症及溃疡、便秘、腹泻等)、循环系统(高低血压、血管硬化、冠心病等)、呼吸系统(气管炎、肺气肿、哮喘、咽炎、喉干口苦等)、糖尿病、妇科炎症(内服外用)、多数癌症(包括正在放疗或化疗者)、风湿病、神经衰弱、失眠、胶原病、消除皮肤斑痕、花粉病、灰指甲等均有功效。
[0004] 目前上市的EM口服产品多为饮料，主要以天然植物为原料，经EM发酵工艺提取的有效成分制成保健饮料，具有抗氧化功能；有报道直接饮用经过稀释的EM活菌制剂治疗腹泻等疾病。天然植物原料制备的EM制剂效果好，但成本较高；而活菌制剂在保存、运输、使用过程中易受环境条件变化的影响导致细菌失活，稳定性差。(三)发明内容
[0005] 本发明目的在于提供一种原料廉价，工艺简单，安全有效，质量稳定的能够修复抗生素引起的粘膜损伤、治疗肠道菌群紊乱引起的腹泻、便秘以及提高免疫力的口服液制剂的制备方法。
[0006] 本发明的口服液的制备方法，概括地说，是以廉价易得的蜂蜜、食用糖为原料，经啤酒酵母菌Saccharomyces cerevisiae(菌种编号：CGMCC2.610)和EM原露(江西省天意生物技术开发有限公司销售的综合型EM原露产品)依次发酵转化，生成药液，再配以营养剂蜂蜜、矫味剂、防腐剂及适量水，经过滤和灭菌后即得。具体包括如下步骤：
[0007] (1)以啤酒酵母为菌株，常规方法接种于三角瓶制备二级液体菌种；新开封的EM原露无菌条件下以净化水稀释10倍，备用；
[0008] (2)按重量份将蜂蜜1-10份、食用糖1-10份、蛋白胨0.1-2份、硫酸镁0.01-0.2份、硫酸锰0.01-0.2份、磷酸氢二钾0.01-1份、氯化钠0.1-2份混合，加入净化的水75-96份溶解，热处理方法进行灭菌，作为培养基；
[0009] (3)待灭菌后的培养基冷却后，接种培养好的啤酒酵母二级液体菌种，接种量为0.1-2份重量份；26-32℃培养16-24小时，然后接入10％EM原露0.1-2重量份，在35～
40℃继续培养24-30小时，pH值降至3.3-4.5即可；
[0010] (4)将(3)所得药液，加入适量营养剂(蜂蜜)、矫味剂、少量防腐剂以及净化水，混合均匀；
[0011] (5)将(4)所得液体过滤，封装，热处理灭菌，即得。
[0012] 步骤(2)所述食用糖为红糖、白糖或葡萄糖中的一种或几种，优选为红糖；
[0013] 步骤(2)所述热处理灭菌方法为在110-128℃温度下灭菌25-180分钟；
[0014] 步骤(4)所述矫味剂为食用糖或木糖醇，其中食用糖包括红糖、白糖或葡萄糖的一种或几种；防腐剂指苯甲酸钠或山梨酸钾或二者的结合；各组分的配比为：(3)所得药液70-85份、蜂蜜1-5份，净化水10-25份、矫味剂0.5-2份、防腐剂0.3-0.8份。
[0015] 本发明应用啤酒酵母菌与EM菌协同作用，分解蜂蜜及食用糖形成对身体有益的成分，本发明的口服液为棕色澄明液体，用于改善抗生素引起的黏膜损伤如口腔溃疡、刺激性咳嗽，肠道菌群紊乱引起的腹泻、便秘，以及提高机体免疫力，味道酸甜，尤其适合适合儿童服用。与现有技术相比，本发明的口服液保健品原料廉价易得，制备方法简单，且效果显著，使用安全，质量稳定。
[0016] 为验证本发明口服液的安全性，进行了小鼠经口急性毒性试验。
[0017] 本发明口服液饲喂昆明小鼠54只，体重18-22g，雌雄各半。将小鼠随机分为6组，每组9只，雌雄各半，禁食12小时后，经口灌胃，剂量分别为40ml/kg、32ml/kg、25.6ml/kg、20.5ml/kg、16.4ml/kg、13.1ml/kg(r＝0.8)。小鼠给药后连续观察14天，记录小鼠中毒症状和死亡数，根据各组死亡率，以Bliss法计算LD50和95％可信限，结果显示，经口给药后各组小鼠无死亡现象，表明小鼠一次经口给药半数致死量LD50大于40ml/kg。
[0018] 本发明口服液治疗儿童腹泻的临床预试资料如下：
[0019] 临床预试病例全部来自门诊。80例中，男性44例，女性36例，年龄在2-14岁之间。其中急性腹泻54例，慢性迁延性腹泻45例，所有患者均通过血常规、大便常规镜检及部分细菌培养确诊。给药方式5ml/次，一日三次，急性腹泻3天一疗程，慢性迁延性腹泻10天一疗程，疗效标准参考《小儿内科学》。
[0020] 治愈：大便次数正常，体重增加，镜检无脓细胞、红细胞，潜血试验阴性；
[0021] 好转：大便次数减少，体重增加，镜检脓细胞、红细胞吞噬细胞明显减少，潜血实验阴性；
[0022] 无效：大便次数、体重、镜检无明显变化。
[0023] 治疗结果表明，本发明口服液治愈68例，好转9例，无效3例，总有效率为96.25％。
(四)具体实施方式
[0024] 以下结合具体实施例对本发明作进一步说明，但不限于此。
[0025] 实施例1.
[0026] 将啤酒酵母菌株以常规方法接种于三角瓶制备二级液体菌种；新开封的EM原露无菌条件下以净化水稀释10倍，备用；按重量份称取蜂蜜2份、红糖7份、蛋白胨0.2份、硫酸镁0.01份、硫酸锰0.01份、磷酸氢二钾0.01份、氯化钠0.2份混合，加入净化的水80份溶解，120℃蒸汽灭菌25分钟；灭菌后的培养基冷却后，接种培养好的啤酒酵母二级液体菌种1份，于32℃培养24小时，然后接入10％EM原露0.5重量份，在37℃继续培养约24小
