乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液及其制备方法

摘要

本发明提供一种乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液及其制备方法。所述的乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液，其特征在于由如下重量份组分制成：乳酸左氧氟沙星1份，磷脂5～15份，胆固醇0.5～1.5份，脱氧胆酸钠0.5～2份，氯化钠2～10份，抗氧剂0.5～1.5份。本发明通过特定辅料和原辅料配比，采用逆相蒸发法制成本发明的乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液，解决了现有技术乳酸左氧氟沙星注射剂澄明度和不溶性微粒不合格，而且溶液颜色变黄的问题，本发明提供了一种稳定的、可长期放置的乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液。

权利要求

1.一种乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液，其特征在于由如下重量份组分制成：乳酸左氧氟沙星1份，磷脂5～15份，胆固醇0.5～1.5份，脱氧胆酸钠0.5～2份，氯化钠

2～10份，抗氧剂0.5～1.5份，通过包括如下步骤制成的：(1)将磷脂、胆固醇、脱氧胆酸钠和抗氧剂溶于有机溶剂中成油相；(2)将乳酸左氧氟沙星和氯化钠溶于水或缓冲盐溶液中成水相；(3)将上述油相和水相混合，搅拌形成水/油型乳剂，加热搅拌蒸发，当达到粘稠状态时，再加入水或缓冲盐溶液，继续加热搅拌蒸发除去残留有机溶剂，超声，转移至高速匀质搅拌机中，搅拌匀质，即得乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液。

2.根据权利要求1所述的乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液，其特征在于由如下重量份组分制成：乳酸左氧氟沙星1份，磷脂6～13份，胆固醇0.5～1份，脱氧胆酸钠0.85～

2份，氯化钠3～9份，抗氧剂0.5～1份。

3.根据权利要求1或2所述的乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液，其特征在于所述的缓冲盐溶液选自磷酸盐缓冲液、枸橼酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液中的一种或几种，使pH值调节至4.6～5.0。

4.根据权利要求1或2所述的乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液，其特征在于所述的磷脂选自天然磷脂或者合成磷脂，其中天然磷脂为蛋黄卵磷脂、氢化蛋黄磷脂、蛋黄磷脂酰甘油、蛋黄磷脂酰丝氨酸、蛋黄磷脂酰肌醇、大豆磷脂、氢化大豆磷脂、大豆磷脂酰甘油、大豆磷脂酰丝氨酸或大豆磷脂酰肌醇中的一种或几种，合成磷脂为二油酰磷脂酰胆碱、二硬脂酸磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、二月桂酰磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰甘油、二硬脂酸磷脂酰甘油、二棕榈酰磷脂酰甘油、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油或二月桂酰磷脂酰甘油中的一种或几种。

5.根据权利要求1或2所述的乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液，其特征在于所述的抗氧剂选自亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、L-半胱氨酸、硫脲、甲醛合亚硫酸氢钠、维生素E、抗坏血酸棕榈酸酯、叔丁基对羟基茴香醚中的一种或几种。

6.根据权利要求1或2所述的乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液，其特征在于所述的有机溶剂选自氯仿、乙醇、甲醇、叔丁醇、正丁醇、异丙醇、丙酮、乙醚、苯甲醇、正己烷中的一种或几种。

7.根据权利要求1所述的乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液，其特征在于由如下组分制成100瓶乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液：乳酸左氧氟沙星10g，大豆卵磷脂60g，胆固醇5g，脱氧胆酸钠15g，抗坏血酸棕榈酸酯10g，氯化钠90g，pH值5.0的磷酸二氢钾-磷酸氢二钾缓冲液10L。

8.根据权利要求1所述的乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液，其特征在于由如下组分制成100瓶乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液：乳酸左氧氟沙星20g，二硬脂酸磷脂酰甘油200g，胆固醇20g，脱氧胆酸钠40g，亚硫酸氢钠20g，氯化钠90g，pH值4.6的醋酸-醋酸钠缓冲液2L。

9.根据权利要求1所述的乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液，其特征在于由如下组分制成100瓶乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液：乳酸左氧氟沙星30g，蛋黄磷脂酰丝氨酸400g，胆固醇15g，脱氧胆酸钠25g，维生素E15g，氯化钠90g，pH值4.8的枸橼酸-枸橼酸钠缓冲液10L。

说明书

乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液及其制备方法

技术领域

[0001] 本发明涉及一种脂质体制剂，具体涉及乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液及其制备方法，属于医药技术领域。

背景技术

[0002] 乳酸左氧氟沙星，化学名称为：其化学名称为：(-)-(s)-9-氟-2，3-二氢-3-甲基-10-(4-甲基-1-哌嗪基)-7-氧-7h-吡啶并[1，2，3，-de]-[1，4]苯并噁嗪-6-羧酸乳酸盐半水合物，分子式：C18H20FN3O4·C3H6O3·1/2H2O，分子量：460.41，结构式为：

[0003]

[0004] 乳酸左氧氟沙星为氧氟沙星的左旋体，其抗菌活性约为氧氟沙星的2倍，它的主要作用机制为抑制细菌DNA旋转酶活性，抑制细菌DNA复制。具有抗菌谱广、抗菌作用强的特点，对多数肠杆菌科细菌，如肺炎克雷白菌、变形杆菌属、伤寒沙门菌属、志贺菌属、流感杆菌、部分大肠杆菌、绿脓杆菌、淋球菌等有较强的抗菌活性；对部分葡萄球菌、肺炎链球菌、化脓性链球菌、溶血性链球菌等革兰氏阳性菌和军团菌、支原体、衣原体也有良好的抗菌作用，但对厌氧菌和肠球菌的作用较差。

[0005] 目前，乳酸左氧氟沙星注射剂已有注射液和粉针剂批准上市，但均存在长期放置存在澄明度和不溶性微粒不合格的问题，而且溶液颜色变黄，不符合质量标准要求，严重影响了临床使用的安全性。中国专利CN101292985A公开了一种乳酸左氧氟沙星冻干粉针剂的制备方法，其并没有从根本上改变上述存在的问题。

[0006] 本发明人经过研究，意想不到的发现将靶向给药系统的一种新剂型脂质体应用于乳酸左氧氟沙星注射制剂中，不仅取得了脂质体制剂效果，而且还解决了乳酸左氧氟沙星注射剂的澄明度和不溶性微粒不合格、溶液颜色变黄的问题，取得令人意外的发明效果，从而完成了本发明。

[0007] 脂质体(liposomes)最初是由英国学者Bangham和Standish将磷脂分散在水中进行电镜观察时发现的。磷脂分散在水中自然形成多层泡囊，每层均为脂质的双分子层；囊泡中央和各层之间被水相隔开，双分子层厚度约4nm，后来将这种类似生物膜结构的双分子小囊成为脂质体。

[0008] 脂质体研究是当前一个十分活跃的领域，脂质体最早是指天然脂类化合物悬浮在水中形成的具有双层封闭结构的泡囊，现在也可以由人工合成的磷脂化合物来制备。20世纪60年代末Rahman等人首先将脂质体作为药物载体应用，脂质体适合体内降解、无毒性和无免疫原性，特别是大量试验数据证明脂质体作为药物载体可以提高药物治疗指数、降低药物毒性和减少药物副作用，并减少药物剂量等优点。

发明内容

[0009] 针对现有技术乳酸左氧氟沙星注射剂澄明度和不溶性微粒不合格，而且溶液颜色变黄的问题，本发明的目的在于提供一种稳定的、可长期放置的乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液，具体地说，通过特定辅料和原辅料配比，通过逆相蒸发法用制成本发明的乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液，解决了上述存在的问题。

[0010] 本发明解决的技术方案如下：

[0011] 本发明提供一种乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液，其特征在于由如下重量份组分制成：乳酸左氧氟沙星1份，磷脂5～15份，胆固醇0.5～1.5份，脱氧胆酸钠0.5～2份，氯化钠2～10份，抗氧剂0.5～1.5份。

[0012] 作为本发明优选实施方式，上述所述的乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液，其特征在于由如下重量份组分制成：乳酸左氧氟沙星1份，磷脂6～13份，胆固醇0.5～1份，脱氧胆酸钠0.85～2份，氯化钠3～9份，抗氧剂0.5～1份。

[0013] 上述所述的乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液，如果需要的话，其还可以包括使pH值调节至4.6～5.0的药学上可接受的缓冲盐溶液，例如缓冲盐溶液选自磷酸盐缓冲液、枸橼酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液中的一种或几种。

[0014] 本发明上述所述的乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液，其中的磷脂，可以选自天然磷脂或者合成磷脂，天然磷脂例如为蛋黄卵磷脂、氢化蛋黄磷脂、蛋黄磷脂酰甘油、蛋黄磷脂酰丝氨酸、蛋黄磷脂酰肌醇、大豆磷脂、氢化大豆磷脂、大豆磷脂酰甘油、大豆磷脂酰丝氨酸或大豆磷脂酰肌醇中的一种或几种；合成磷脂例如为二油酰磷脂酰胆碱、二硬脂酸磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、二月桂酰磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰甘油、二硬脂酸磷脂酰甘油、二棕榈酰磷脂酰甘油、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油或二月桂酰磷脂酰甘油中的一种或几种。

[0015] 本发明上述所述的乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液，其中所述的抗氧剂，没有特别限制，可以是药学上常用的抗氧化剂，例如选自亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、L-半胱氨酸、硫脲、甲醛合亚硫酸氢钠、维生素E、抗坏血酸棕榈酸酯、叔丁基对羟基茴香醚中的一种或几种。

[0016] 本发明上述所述的乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液，其通过包括如下步骤制成的：(1)将磷脂、胆固醇、脱氧胆酸钠和抗氧剂溶于有机溶剂中成油相；(2)将乳酸左氧氟沙星和氯化钠溶于水或缓冲盐溶液中成水相；(3)将上述油相和水相混合，搅拌形成水/油型(W/O型)乳剂，加热搅拌蒸发，当达到粘稠状态时，再加入水或缓冲盐溶液，继续加热搅拌蒸发除去残留有机溶剂，超声，转移至高速匀质搅拌机中，搅拌匀质，即得乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液。

[0017] 其中，上述所述有机溶剂，例如可以选自氯仿、乙醇、甲醇、叔丁醇、正丁醇、异丙醇、丙酮、乙醚、苯甲醇、正己烷中的一种或几种。

[0018] 作为本发明最优选的一个具体实施方案，上述所述的乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液，其特征在于由如下组分制成100瓶乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液：乳酸左氧氟沙星10g，大豆卵磷脂60g，胆固醇5g，脱氧胆酸钠15g，抗坏血酸棕榈酸酯10g，氯化钠90g，pH值5.0的磷酸二氢钾-磷酸氢二钾缓冲液10L。

[0019] 作为本发明最优选的另一个具体实施方案，上述所述的乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液，其特征在于由如下组分制成100瓶乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液：乳酸左氧氟沙星20g，二硬脂酸磷脂酰甘油200g，胆固醇20g，脱氧胆酸钠40g，亚硫酸氢钠20g，氯化钠90g，pH值4.6的醋酸-醋酸钠缓冲液2L。

[0020] 作为本发明最优选的第三个具体实施方案，上述所述的乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液，其特征在于由如下组分制成100瓶乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液：乳酸左氧氟沙星30g，蛋黄磷脂酰丝氨酸400g，胆固醇15g，脱氧胆酸钠25g，维生素E 15g，氯化钠90g，pH值4.8的枸橼酸-枸橼酸钠缓冲液10L。

[0021] 作为本发明另一发明目的，提供一种制备上述所述乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液的方法，制备步骤为：

[0022] (1)将磷脂、胆固醇、脱氧胆酸钠和抗氧剂溶于有机溶剂中成油相；

[0023] (2)将乳酸左氧氟沙星和氯化钠溶于水或缓冲盐溶液中成水相；

[0024] (3)将上述油相和水相混合，搅拌形成水/油型(W/O型)乳剂，加热搅拌蒸发，当达到粘稠状态时，再加入水或缓冲盐溶液，继续加热搅拌蒸发除去残留有机溶剂，超声，转移至高速匀质搅拌机中，搅拌匀质，即得乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液。

[0025] 上述所述的制备方法，其中所述的有机溶剂，例如可以选自氯仿、乙醇、甲醇、叔丁醇、正丁醇、异丙醇、丙酮、乙醚、苯甲醇、正己烷中的一种或几种。

[0026] 本发明提供的乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液，进行稳定性试验考察，在高温60℃、光照4500Lx条件下放置10天，各项检测指标均无明显变化；在高温40℃、相对湿度75％±5％条件下加速试验6个月，各项检测指标没有明显变化；在高温25℃、相对湿度60％±10％条件下长期试验18个月，各项检测指标没有明显变化。

[0027] 本发明提供的乳酸左氧氟沙星脂质体制剂，进行急性毒性试验、异常毒性试验和热源检查，均符合规定，安全性得到证明。

[0028] 本发明提供的乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液，与现有技术相比，具有意想不到的效果，主要优点如下：

[0029] (1)乳酸左氧氟沙星被包裹于脂质体内，解决了长期放置不溶性微粒和澄明度不合格，溶液颜色变黄的问题，保证了产品质量；

[0030] (2)药物载体脂质体体内降解、无毒性和无免疫原性，而且可以提高药物治疗指数、降低药物毒性和减少药物副作用；

[0031] (3)采用常规的工艺设备，可工业规模、高效率生产，产品质量稳定，是一种独特和普遍适用的，低成本的工业化制备方法。

具体实施方式

[0032] 以下通过实施例进一步说明本发明，但不应理解为对本发明的限制。

[0033] 实施例1 乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液的制备

[0034] 处方(100瓶)：乳酸左氧氟沙星 10g

[0035] 大豆卵磷脂 60g

[0036] 胆固醇 5g

[0037] 脱氧胆酸钠 15g

[0038] 抗坏血酸棕榈酸酯 10g

[0039] 氯化钠 90g

[0040] 制备工艺

[0041] (1)将60g大豆卵磷脂、5g胆固醇、15g脱氧胆酸钠和10g抗坏血酸棕榈酸酯溶于500ml的乙醇中；

[0042] (2)将乳酸左氧氟沙星10g和氯化钠90g溶于8000mlpH值5.0的磷酸二氢钾-磷酸氢二钾缓冲溶液中；

[0043] (3)将二者混合，搅拌，形成W/O型乳剂，加热搅拌蒸发，当混合物达到粘稠状态时，再加入2000mlpH值5.0的磷酸盐缓冲液，继续加热搅拌蒸发除去残留乙醇，超声30min，转移至高速匀质搅拌机中，搅拌匀质30min，得乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液。

[0044] 对比例1 乳酸左氧氟沙星脂质体的制备

[0045] 处方(100瓶)：乳酸左氧氟沙星 10g

[0046] 大豆卵磷脂 45g

[0047] 胆固醇 4g

[0048] 脱氧胆酸钠 22g

[0049] 抗坏血酸棕榈酸酯 18g

[0050] 氯化钠 90g

[0051] 制备工艺

[0052] (1)将45g大豆卵磷脂、4g胆固醇、22g脱氧胆酸钠和18g抗坏血酸棕榈酸酯溶于500ml的乙醇中；

[0053] (2)将乳酸左氧氟沙星10g和氯化钠90g溶于8000mlpH值5.0的磷酸二氢钾-磷酸氢二钾缓冲溶液中；

[0054] (3)将二者混合，搅拌，形成W/O型乳剂，加热搅拌蒸发，当混合物达到粘稠状态时，再加入2000mlpH值5.0的磷酸盐缓冲液，继续加热搅拌蒸发除去残留乙醇，超声30min，转移至高速匀质搅拌机中，搅拌匀质30min，得乳酸左氧氟沙星脂质体注射液。

[0055] 实施例2 乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液的制备

[0056] 处方(100瓶)：乳酸左氧氟沙星 20g

[0057] 二硬脂酸磷脂酰甘油 200g

[0058] 胆固醇 20g

[0059] 脱氧胆酸钠 40g

[0060] 亚硫酸氢钠 20g

[0061] 氯化钠 90g

[0062] 制备工艺

[0063] (1)将200g二硬脂酸磷脂酰甘油、20g胆固醇、40g脱氧胆酸钠和20g亚硫酸氢钠溶于2000ml的异丙醇中；

[0064] (2)将乳酸左氧氟沙星20g和氯化钠90g溶于8000ml水中；

[0065] (3)将二者混合，搅拌，形成W/O型乳剂，加热搅拌蒸发，当混合物达到粘稠状态时，再加入2000mlpH值4.6的醋酸-醋酸钠缓冲液，继续加热搅拌蒸发除去残留异丙醇，超声30min，转移至高速匀质搅拌机中，搅拌匀质30min，得乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液。

[0066] 对比例2 乳酸左氧氟沙星脂质体的制备

[0067] 处方(100瓶)：乳酸左氧氟沙星 20g

[0068] 二硬脂酸磷脂酰甘油 310g

[0069] 胆固醇 32g

[0070] 脱氧胆酸钠 4g

[0071] 亚硫酸氢钠 4.5g

[0072] 氯化钠 90g

[0073] 制备工艺

[0074] (1)将310g二硬脂酸磷脂酰甘油、32g胆固醇、4g脱氧胆酸钠和4.5g亚硫酸氢钠溶于2000ml的异丙醇中；

[0075] (2)将乳酸左氧氟沙星20g和氯化钠90g溶于8000ml水中；

[0076] (3)将二者混合，搅拌，形成W/O型乳剂，加热搅拌蒸发，当混合物达到粘稠状态时，再加入2000mlpH值4.6的醋酸-醋酸钠缓冲液，继续加热搅拌蒸发除去残留异丙醇，超声30min，转移至高速匀质搅拌机中，搅拌匀质30min，得乳酸左氧氟沙星脂质体注射液。

[0077] 实施例3 乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液的制备

[0078] 处方(100瓶)：乳酸左氧氟沙星 30g

[0079] 蛋黄磷脂酰丝氨酸 400g

[0080] 胆固醇 30g

[0081] 脱氧胆酸钠 25g

[0082] 维生素E 15g

[0083] 氯化钠 90g

[0084] 制备工艺

[0085] (1)将400g蛋黄磷脂酰丝氨酸、30g胆固醇、25g脱氧胆酸钠和15g维生素E溶于2000ml的苯甲醇中；

[0086] (2)将乳酸左氧氟沙星30g和氯化钠90g溶于8000mlpH值4.8的枸橼酸-枸橼酸钠缓冲溶液中；

[0087] (3)将二者混合，搅拌，形成W/O型乳剂，加热搅拌蒸发，当混合物达到粘稠状态时，再加入2000ml水，继续加热搅拌蒸发除去残留苯甲醇，超声30min，转移至高速匀质搅拌机中，搅拌匀质30min，得乳酸左氧氟沙星脂质体氯化钠注射液。

[0088] 验例1 包封率的测定

[0089] 取实施例制备的脂质体制剂，高效液相色谱法检测乳酸左氧氟沙星的总含量为M，选用柱色谱法分离脂质体。

[0090] 取1.5g葡聚糖凝胶G-50，用pH6.8磷酸盐缓冲液浸泡溶胀12h以上，装入层析柱内(200×10mm)，用上述磷酸盐缓冲液冲洗平衡，分别取实施例1-2和对比例1-2得到的乳酸左氧氟沙星脂质体制剂1.1ml，加入层析住顶部，用磷酸盐缓冲液50ml洗脱，流速1.3ml/min，收集的洗脱液加入破膜剂(乙醇∶苯甲醇＝6∶1)50ml，混匀，高效液相色谱法检测乳酸左氧氟沙星的含量M1。

[0091] 包封率％＝M1/M×100％.

[0092] 表1包封率测定结果

[0093]

[0094] 由以上结果可知，本发明范围内的实施例处方配比制得的脂质体包封率很高，基本符合实际生产要求；而本发明范围外的对比例处方配比制得的脂质体包封率很低，和实施例相比有明显的差距，不适合生产要求。

[0095] 试验例2 粒径的检测

[0096] 取实施例1-3和对比例1-2制备的脂质体制剂，采用显微图像分析仪测定脂质体的粒径分布，结果如表2：

[0097] 表2粒径检测结果

[0098]

[0099] 由以上结果可知，实施例1-3制得的脂质体显球状，粒径均匀，范围为100-200nm；对比例1-2制得的脂质体形状不定，杂乱无章，大小不一，粒径不均匀，范围为300-900nm。

[0100] 稳定性考察

[0101] 将以上各实施例制备的样品与上市的乳酸左氧氟沙星注射液(山东长富洁晶药业有限公司生产，批号20081116)在高温60℃、光照4500Lx条件下放置10天进行影响因素试验考察，结果见表1；在高温40℃、相对湿度75％±5％条件下6个月，进行加速试验考察，结果见表2；在高温25℃、相对湿度60％±10％条件下18个月，进行长期试验考察，检测各项质量指标的变化，结果见表3。

[0102] 表1影响因素结果

[0103]

[0104] 表2加速试验结果

[0105]

[0106]