酶法制备鸡肝水解蛋白的工艺方法

摘要

本发明提供一种酶法制备鸡肝水解蛋白的工艺方法，解决了鸡肝因腥味重、胆固醇含量高而利用率不高的问题，本发明以鸡肝为主要原料，选取5种蛋白酶，以水解度为指标，采用单因素实验，考察了原料预处理方法、酶解温度、pH、酶用量(E/S)、底物浓度及酶解时间对各酶水解能力的影响，比较各酶在最佳条件下的酶解效果。并通过优化双酶复合酶解的条件以得到水解效果及风味均较佳的高蛋白酶解产物。本发明通过酶解制备水解蛋白，产品的主要成分是氨基酸和小分子多肽等，无苦味，经检测不含胆固醇，且具有一定抗氧化活性。

权利要求

1.一种酶法制备鸡肝水解蛋白的工艺方法，其特征在于：处理鸡肝，将处理后的鸡肝加水配制成鸡肝浆液，采用蛋白酶进行酶解；酶解完成后经过灭酶，离心分离，过滤得到蛋白质水解液，水解液经过浓缩或干燥制备得鸡肝水解蛋白；所述蛋白酶采用Alcalase碱性蛋白酶、Neutrase中性蛋白酶、Protamex复合蛋白酶、Flavourzyme风味蛋白酶或木瓜蛋白酶中的一种或两种复配；酶解条件为：控制反应温度为50-60℃，调整pH为5.5-8.5，蛋白酶用量为鸡肝原料干重的1.0wt%-3.0 wt%，反应时间为2-5.5h；原料处理为：将新鲜鸡肝去除苦胆和筋络，清洗后，用搅拌机搅碎，制成80-100目的鸡肝泥；将制得的鸡肝泥加水配成浓度为5 wt%-15 wt%的鸡肝浆液。

2.根据权利要求1所述的酶法制备鸡肝水解蛋白的工艺方法，其特征在于：所述酶解过程选用Neutrase中性蛋白酶进行单酶酶解，控制反应温度为50-60℃，调整pH为

6.5-7.5，Neutrase中性蛋白酶用量为鸡肝原料干重的1.0 wt%-1.5wt%，反应时间为2-3h。

3.根据权利要求1所述的酶法制备鸡肝水解蛋白的工艺方法，其特征在于：所述酶解过程选用Protamex复合蛋白酶进行单酶酶解时，控制反应温度为50-55℃，调整pH为

7.0-8.0，Protamex复合蛋白酶用量为鸡肝原料干重的2.0 wt%-2.5wt%，反应时间为3-4h。

4.根据权利要求1所述的酶法制备鸡肝水解蛋白的工艺方法，其特征在于：所述酶解过程选用Flavourzyme风味蛋白酶进行单酶酶解时，控制反应温度为50-55℃，调整pH为

5.5-6.5，Flavourzyme风味蛋白酶用量为鸡肝原料干重的2.5 wt%-3.0 wt%，反应时间为

4.5-5.5h。

5.根据权利要求1所述的酶法制备鸡肝水解蛋白的工艺方法，其特征在于：所述酶解过程选用木瓜蛋白酶进行单酶酶解时，控制反应温度为50-55℃，调整pH为5.5-6.5，木瓜蛋白酶用量为鸡肝原料干重的2.0 wt%-2.5 wt%，反应时间为2.5-3.5h。

6.根据权利要求1所述的酶法制备鸡肝水解蛋白的工艺方法，其特征在于：所述酶解过程选用Alcalase碱性蛋白酶和Flavourzyme风味蛋白酶进行双酶同步酶解反应，Alcalase碱性蛋白酶的用量为鸡肝原料干重的0.5 wt%-1.0 wt%，Flavourzyme风味蛋白酶用量为鸡肝原料干重的1.0 wt%-1.5 wt%；控制反应温度为50-60℃，调整pH为7.5-8.5，同时加入Alcalase碱性蛋白酶和Flavourzyme风味蛋白酶，反应3-4小时。

7.根据权利要求1所述的酶法制备鸡肝水解蛋白的工艺方法，其特征在于：所述酶解过程选用Protamex复合蛋白酶和Flavourzyme风味蛋白酶进行双酶同步酶解反应，Protamex复合蛋白酶的用量为鸡肝原料干重的1.0 wt%-1.5 wt%， Flavourzyme风味蛋白酶用量为鸡肝原料干重的1.0 wt%-1.5 wt%，控制反应温度为50-55℃，调整pH为7.0-8.0，同时加入Protamex复合蛋白酶和Flavourzyme风味蛋白酶，反应3-4小时。

8.根据权利要求1所述的酶法制备鸡肝水解蛋白的工艺方法，其特征在于：所述酶解过程选用木瓜蛋白酶和Flavourzyme风味蛋白酶进行双酶同步酶解反应，木瓜蛋白酶的用量为鸡肝原料干重的1.0 wt%-1.5 wt%，Flavourzyme风味蛋白酶用量为鸡肝原料干重的

1.0 wt%-1.5 wt%，控制反应温度为50-55℃，调整pH为5.5-6.5，同时加入木瓜蛋白酶和加入Flavourzyme风味蛋白酶，反应4-5小时。

9.根据权利要求1、2、3、4、5、6、7或8所述的酶法制备鸡肝水解蛋白的工艺方法，其特征在于：工艺的步骤包括：（1） 原料处理：将新鲜鸡肝去除苦胆和筋络，清洗后，用搅拌机搅碎，制成80-100目的鸡肝泥；

（2） 将步骤（1）项制得的鸡肝泥加水配成浓度为5 wt%-15 wt%的鸡肝浆液，按照w/w，以鸡肝干重计算百分含量，采用所述的蛋白酶和酶解条件进行恒温水解；

（3） 将步骤（2）项酶解反应结束后的溶液灭酶：即升高反应体系温度至

85℃-100℃保持10-20分钟；

（4） 将步骤（3）项灭酶后的溶液离心过滤：采用离心机，3000-4000转/分钟离心

10-20分钟，得到上层清液和底层的固形物废渣，上清液即为蛋白质水解液；

（5） 将步骤（4）项得到的蛋白质水解液进行浓缩或干燥：制成鸡肝水解蛋白。

10.根据权利要求9所述的酶法制备鸡肝水解蛋白的工艺方法，其特征在于：所述干燥采用冻干、喷雾干燥、真空干燥或加热干燥。

说明书

酶法制备鸡肝水解蛋白的工艺方法

技术领域

[0001] 本发明属于鸡肝的水解蛋白制备技术领域，更具体涉及一种酶法制备鸡肝水解蛋白的工艺方法。

背景技术

[0002] 美国农业部外国农业服务处(FAS)称，2008年全球的鸡肉产量达到近7,100万吨，其中中国的鸡肉产量排名第二，达1,015多万吨。鸡肝是一种营养丰富、可广泛利用的副产品，占每羽鸡体重的2.0％~2.5％，每年全国约有十几万吨鸡肝下脚料。鸡肝营养丰富，含有丰富的蛋白质、钙、磷、铁、锌、维生素A、B族维生素。在食品、饲料、药用方面得到一定的应用。但现有的鸡肝制品多采用传统方法加工，产品带较重的腥味和含有较高的胆固醇，使得鸡肝制品不受欢迎，并且是患严重动脉硬化、高血压、胆石症、痛风病的病人以及对胆固醇调节能力差的中老年人不宜多食的产品。故鸡肝的市场消费量不大。因而对鸡肝进行深度开发，不仅能使鸡肝中的营养成分得到充分的利用，还可以解决目前鸡肝消费的被动局面，为鸡肝的开发和利用提供了新的思路，促进了肉鸡加工的发展，也给养殖业以及肉鸡加工企业带来很大的利润。

[0003] 水解蛋白是一种优质的蛋白资源，蛋白质水解物的主要成分是氨基酸和小分子多肽，具有较高的营养价值及保健功能。而利用廉价的下脚料制备水解蛋白也受到越来越多研究者的关注，目前国内外研究者主要以各类鱼下脚料为原料酶解制备动物水解蛋白(HAP)，提高其利用价值。而利用鸡肝制备HAP，并对其水解产物进行营养价值及生物活性的研究，国内外还没有相关的报道。鸡肝中蛋白质含量占鸡肝干重的70％-80％，是理想的优质蛋白质来源。采用酶法制备鸡肝水解蛋白，能够提高鸡肝附加值，降低产品胆固醇含量，且产品营养价值更高，易于消化吸收。

发明内容

[0004] 本发明的目的是提供一种酶法制备鸡肝水解蛋白的工艺方法，解决现有技术中由于鸡肝制品多带腥味且胆固醇含量较高而产生的一系列问题，也没有有效的方法充分利用鸡肝得到高价值产品的问题，本发明通过单酶或复合蛋白酶对原料进行彻底水解，产品的主要成分是氨基酸、小分子多肽和呈味核苷酸等，不含胆固醇，且具有较高的营养价值及生物活性，提高了鸡肝的利用价值，制备工艺步骤简单，降低制作成本。

[0005] 本发明的技术方案：

[0006] 处理鸡肝，将处理后的鸡肝加水配制成鸡肝浆液，采用蛋白酶进行酶解；酶解完成后经过灭酶，离心分离，过滤得到蛋白质水解液，水解液经过浓缩或干燥制备得鸡肝水解蛋白；所述蛋白酶采用Alcalase碱性蛋白酶、Neutrase中性蛋白酶、Protamex复合蛋白酶、Flavourzyme风味蛋白酶或木瓜蛋白酶中的一种或两种复配；酶解条件为：控制反应温度为50-60℃，调整pH为5.5-8.5，蛋白酶用量为鸡肝原料干重的1.0wt％-3.0wt％，反应时间为2-5.5h。

[0007] 酶种类的选择：

[0008] Alcalase碱性蛋白酶(活力32.1万U/g)、Neutrase中性蛋白酶(活力4.5万U/g)、Protamex复合蛋白酶(活力10.6万U/g)、Flavourzyme风味蛋白酶(活力1.6万U/g)、木瓜蛋白酶(活力6.1万U/g)。以上5种蛋白酶均为诺维信酶制剂公司生产。

[0009] 本发明的显著优点是：

[0010] 本发明采用价格低廉的肉鸡加工下脚料鸡肝为原料，生产附加值较高的动物水解蛋白，大大降低了成本，且为鸡肝提供了新的利用途径。

[0011] 原料搅碎后过80-100目筛可去鸡肝皮，而且能使原料更好的与蛋白酶接触，达到更好的酶解效果。

[0012] Flavourzyme风味蛋白酶酶解鸡肝所得水解产物无苦味，风味较好，可用于单酶酶解鸡肝或与其它蛋白酶组合进行复合酶解，解决了水解蛋白的苦涩问题。

[0013] 双酶复合酶解鸡肝时同步酶解较分步酶解效果好，且操作更方便、省时。

[0014] 水解产物营养价值高，无苦味，不含胆固醇，易于消化吸收，大大提高鸡肝利用价值。

附图说明

[0015] 图1是本发明的制备流程图。

具体实施方式

[0016] 本发明以水解度为指标，优化各单酶及复合酶的酶解条件，得到水解效果较好以及氮回收率较高的水解产物，充分利用鸡肝。

[0017] 本发明选用Alcalase碱性蛋白酶、Neutrase中性蛋白酶、Protamex复合蛋白酶、Flavourzyme风味蛋白酶和木瓜蛋白酶分别对鸡肝进行单酶酶解，以水解度为评价水解效果指标，在各酶最适温度、pH范围内分别优化出各酶水解鸡肝的最适温度及最适pH，并进一步优化出最佳加酶量、底物浓度及酶解时间。选取单酶酶解效果较佳或水解产物风味较好的蛋白酶进行双酶组合，通过复合蛋白酶水解鸡肝得到水解效果较好且风味较好的水解产物。

[0018] 在本发明的工艺中，由于鸡肝进行不同温度预处理时，随温度的上升，水解度急剧下降。这是由于受热后，鸡肝中的内源酶失活，且蛋白质变性而凝集、聚合成团，不利于鸡肝中的蛋白质分子与酶的接触，水解度随之降低。故鸡肝酶解不需要预处理工序。本发明工艺制备的鸡肝水解液蛋白含量丰富，经检测不含胆固醇，且具有较高的抗氧化活性，可浓缩制成高蛋白营养液，或通过不同方式的干燥处理，制成食品营养强化剂或食品添加剂。

[0019] 以下是对本发明的具体描述：根据选用的不同酶解蛋白质采用不同的酶解条件，以达到最佳的酶解效果。

[0020] 本发明中所述的鸡肝原料干重是采用快速水分测定仪测定新鲜鸡肝的水分含量，除去水分后得到的重量即为干重。

[0021] 酶解过程选用Neutrase中性蛋白酶进行单酶酶解，控制反应温度为50-60℃，调整pH为6.5-7.5，Neutrase中性蛋白酶用量为鸡肝原料干重的1.0wt％-1.5wt％，反应时间为2-3h。

[0022] 酶解过程选用Protamex复合蛋白酶进行单酶酶解时，控制反应温度为50-55℃，调整pH为7.0-8.0，Protamex复合蛋白酶用量为鸡肝原料干重的2.0wt％-2.5wt％，反应时间为3-4h。

[0023] 酶解过程选用Flavourzyme风味蛋白酶进行单酶酶解时，控制反应温度为50-55℃，调整pH为5.5-6.5，Flavourzyme风味蛋白酶用量为鸡肝原料干重的2.5wt％-3.0wt％，反应时间为4.5-5.5h。

[0024] 酶解过程选用木瓜蛋白酶进行单酶酶解时，控制反应温度为50-55℃，调整pH为5.5-6.5，木瓜蛋白酶用量为鸡肝原料干重的2.0wt％-2.5wt％，反应时间为2.5-3.5h。

[0025] 酶解过程选用Alcalase碱性蛋白酶和Flavourzyme风味蛋白酶进行双酶同步酶解反应，Alcalase碱性蛋白酶的用量为鸡肝原料干重的0.5wt％-1.0wt％，Flavourzyme风味蛋白酶用量为鸡肝原料干重的1.0wt％-1.5wt％；控制反应温度为50-60℃，调整pH为7.5-8.5，同时加入Alcalase碱性蛋白酶和Flavourzyme风味蛋白酶，反应3-4小时。

[0026] 酶解过程选用Protamex复合蛋白酶和Flavourzyme风味蛋白酶进行双酶同步酶解反应，Protamex复合蛋白酶的用量为鸡肝原料干重的1.0wt％-1.5wt％，Flavourzyme风味蛋白酶用量为鸡肝原料干重的1.0wt％-1.5wt％，控制反应温度为50-55℃，调整pH为7.0-8.0，同时加入Protamex复合蛋白酶和Flavourzyme风味蛋白酶，反应3-4小时。

[0027] 酶解过程选用木瓜蛋白酶和Flavourzyme风味蛋白酶进行双酶同步酶解反应，木瓜蛋白酶的用量为鸡肝原料干重的1.0wt％-1.5wt％，Flavourzyme风味蛋白酶用量为鸡肝原料干重的1.0wt％-1.5wt％，控制反应温度为50-55℃，调整pH为5.5-6.5，同时加入木瓜蛋白酶和加入Flavourzyme风味蛋白酶，反应4-5小时。

[0028] 以上5种蛋白酶均为诺维信酶制剂公司生产。

[0029] 工艺的步骤包括：

[0030] (1)原料处理：将新鲜鸡肝去除苦胆和筋络，清洗后，用搅拌机搅碎，制成80-100目的鸡肝泥；

[0031] (2)将步骤(1)项制得的鸡肝泥加水配成浓度为5wt％-15wt％的鸡肝浆液，按照w/w，以鸡肝干重计算百分含量，采用所述的蛋白酶和酶解条件进行恒温水解；

[0032] (3)将步骤(2)项酶解反应结束后的溶液灭酶：即升高反应体系温度至85℃-100℃保持10-20分钟；

[0033] (4)将步骤(3)项灭酶后的溶液离心过滤：采用离心机，3000-4000转/分钟离心10-20分钟，得到上层清液和底层的固形物废渣，上清液即为蛋白质水解液；

[0034] (5)将步骤(4)项得到的蛋白质水解液进行浓缩或干燥(可以采用冻干、喷雾干燥、真空干燥或加热干燥等等)：制成鸡肝水解蛋白。

[0035] 采用以上本发明中单酶水解工艺，产品的水解度为30％-50％，氮回收率高达70％-80％，能有效去除鸡肝的腥味，且产品经检测不含胆固醇，大大提高了产品的品质，通过一系列抗氧化活性试验，结果显示鸡肝酶解产物具有较高的抗氧化活性；进一步通过双酶复合酶解，产品水解度高达50％-58％，氮回收率高达85％-90％，且双酶水解产物无苦味，鲜味较强。

[0036] 以下结合本发明的实施例，对本发明的制备工艺步骤及工艺方法作进一步的说明：

[0037] 实施例一：

[0038] 原料处理：将新鲜鸡肝去除苦胆和筋络，清洗后，用搅拌机搅碎，制成80目的鸡肝泥。

[0039] 水解：加水配成浓度为10.0wt％(w/w，以鸡肝干重计算百分含量)的鸡肝浆液，调pH8.0，控制反应温度为58℃，加入Alcalase碱性蛋白酶，加酶量(E/S)为1.25wt％，反应时间3.5h。

[0040] 灭酶：反应体系于90℃下保持15分钟。

[0041] 离心过滤：采用离心机，3000转/分钟离心20分钟，得到上层清夜和底层的固形物废渣，上清液过滤得水解蛋白液。

[0042] 将上清液浓缩制成高蛋白营养液。

[0043] 实施例二：

[0044] 原料处理：将新鲜鸡肝去除苦胆和筋络，清洗后，用搅拌机搅碎，制成100目的鸡肝泥。

[0045] 水解：加水配成浓度为15wt％(w/w，以鸡肝干重计算百分含量)的鸡肝浆液，调pH8.5，控制反应温度为60℃，加入Alcalase碱性蛋白酶，加酶量(E/S)为1.5wt％，反应时间2.5h。

[0046] 灭酶：反应体系于85℃下保持20分钟。

[0047] 离心过滤：采用离心机，4000转/分钟离心10分钟，得到上层清夜和底层的固形物废渣，上清液过滤得水解蛋白液。

[0048] 将上清液冻干制成具有一定生物活性的蛋白粉。

[0049] 实施例三：

[0050] 原料处理：将新鲜鸡肝去除苦胆和筋络，清洗后，用搅拌机搅碎，制成90目的鸡肝泥。

[0051] 水解：加水配成浓度为5wt％(w/w，以鸡肝干重计算百分含量)的鸡肝浆液，调pH7.5，控制反应温度为55℃，加入Alcalase碱性蛋白酶，加酶量(E/S)为1.0wt％，反应时间3h。

[0052] 灭酶：反应体系于100℃下保持10分钟。

[0053] 离心过滤：采用离心机，3500转/分钟离心15分钟，得到上层清夜和底层的固形物废渣，上清液过滤得水解蛋白液。

[0054] 将上清液通过喷雾干燥制成蛋白粉。

[0055] 实施例四：

[0056] 原料处理：将新鲜鸡肝去除苦胆和筋络，清洗后，用搅拌机搅碎，制成80目的鸡肝泥。

[0057] 水解：加水配成浓度为5.0wt％(w/w，以鸡肝干重计算百分含量)的鸡肝浆液，调pH6.5，控制反应温度为60℃，加入Neutrase中性蛋白酶，加酶量(E/S)为1.25wt％，反应时间2.5h。

[0058] 灭酶：反应体系于90℃下保持15分钟。

[0059] 离心过滤：采用离心机，3000转/分钟离心20分钟，得到上层清夜和底层的固形物废渣，上清液过滤得水解蛋白液。

[0060] 将上清液冻干制成具有一定生物活性的蛋白粉。

[0061] 实施例五：

[0062] 原料处理：将新鲜鸡肝去除苦胆和筋络，清洗后，用搅拌机搅碎，制成100目的鸡肝泥。

[0063] 水解：加水配成浓度为10wt％(w/w，以鸡肝干重计算百分含量)的鸡肝浆液，调pH7.5，控制反应温度为55℃，加入Neutrase中性蛋白酶，加酶量(E/S)为1.0wt％，反应时间3h。

[0064] 灭酶：反应体系于85℃下保持20分钟。

[0065] 离心过滤：采用离心机，4000转/分钟离心10分钟，得到上层清夜和底层的固形物废渣，上清液过滤得水解蛋白液。

[0066] 将上清液浓缩制成高蛋白营养液。

[0067] 实施例六：

[0068] 原料处理：将新鲜鸡肝去除苦胆和筋络，清洗后，用搅拌机搅碎，制成90目的鸡肝泥。

[0069] 水解：加水配成浓度为15wt％(w/w，以鸡肝干重计算百分含量)的鸡肝浆液，调pH7.0，控制反应温度为50℃，加入Neutrase中性蛋白酶，加酶量(E/S)为1.5wt％，反应时间2h。

[0070] 灭酶：反应体系于100℃下保持10分钟。

[0071] 离心过滤：采用离心机，3500转/分钟离心15分钟，得到上层清夜和底层的固形物废渣，上清液过滤得水解蛋白液。

[0072] 将上清液通过喷雾干燥制成蛋白粉。

[0073] 实施例七：

[0074] 原料处理：将新鲜鸡肝去除苦胆和筋络，清洗后，用搅拌机搅碎，制成100目的鸡肝泥。

[0075] 水解：加水配成浓度为10wt％(w/w，以鸡肝干重计算百分含量)的鸡肝浆液，调pH7.5，控制反应温度为50℃，加入Protamex复合蛋白酶，加酶量(E/S)为2.0wt％，反应时间3.5h。

[0076] 灭酶：反应体系于85℃下保持20分钟。

[0077] 离心过滤：采用离心机，4000转/分钟离心10分钟，得到上层清夜和底层的固形物废渣，上清液过滤得水解蛋白液。

[0078] 将上清液浓缩制成高蛋白营养液。

[0079] 实施例八：

[0080] 原料处理：将新鲜鸡肝去除苦胆和筋络，清洗后，用搅拌机搅碎，制成80目的鸡肝泥。

[0081] 水解：加水配成浓度为5.0wt％(w/w，以鸡肝干重计算百分含量)的鸡肝浆液，调pH8.0，控制反应温度为53℃，加入Protamex复合蛋白酶，加酶量(E/S)为2.25wt％，反应时间3h。

[0082] 灭酶：反应体系于90℃下保持15分钟。

[0083] 离心过滤：采用离心机，3000转/分钟离心20分钟，得到上层清夜和底层的固形物废渣，上清液过滤得水解蛋白液。

[0084] 将上清液通过喷雾干燥制成蛋白粉。

[0085] 实施例九：

[0086] 原料处理：将新鲜鸡肝去除苦胆和筋络，清洗后，用搅拌机搅碎，制成90目的鸡肝泥。

[0087] 水解：加水配成浓度为15wt％(w/w，以鸡肝干重计算百分含量)的鸡肝浆液，调pH7.0，控制反应温度为55℃，加入Protamex复合蛋白酶，加酶量(E/S)为2.5wt％，反应时间4h。

[0088] 灭酶：反应体系于100℃下保持10分钟。

[0089] 离心过滤：采用离心机，3500转/分钟离心15分钟，得到上层清夜和底层的固形物废渣，上清液过滤得水解蛋白液。

[0090] 将上清液冻干制成具有一定生物活性的蛋白粉。

[0091] 实施例十：

[0092] 原料处理：将新鲜鸡肝去除苦胆和筋络，清洗后，用搅拌机搅碎，制成100目的鸡肝泥。

[0093] 水解：加水配成浓度为10wt％(w/w，以鸡肝干重计算百分含量)的鸡肝浆液，调pH5.5，控制反应温度为50℃，加入Flavourzyme风味蛋白酶，加酶量(E/S)为2.5wt％，反应时间5h。

[0094] 灭酶：反应体系于85℃下保持20分钟。

[0095] 离心过滤：采用离心机，4000转/分钟离心10分钟，得到上层清夜和底层的固形物废渣，上清液过滤得水解蛋白液。

[0096] 将上清液冻干制成具有一定生物活性的蛋白粉。

[0097] 实施例十一：

[0098] 原料处理：将新鲜鸡肝去除苦胆和筋络，清洗后，用搅拌机搅碎，制成90目的鸡肝泥。

[0099] 水解：加水配成浓度为15wt％(w/w，以鸡肝干重计算百分含量)的鸡肝浆液，调pH6.0，控制反应温度为55℃，加入Flavourzyme风味蛋白酶，加酶量(E/S)为2.75wt％，反应时间5.5h。

[0100] 灭酶：反应体系于100℃下保持10分钟。

[0101] 离心过滤：采用离心机，3500转/分钟离心15分钟，得到上层清夜和底层的固形物废渣，上清液过滤得水解蛋白液。

[0102] 将上清液通过喷雾干燥制成蛋白粉。

[0103] 实施例十二：

[0104] 原料处理：将新鲜鸡肝去除苦胆和筋络，清洗后，用搅拌机搅碎，制成80目的鸡肝泥。

[0105] 水解：加水配成浓度为5.0wt％(w/w，以鸡肝干重计算百分含量)的鸡肝浆液，调pH6.5，控制反应温度为53℃，加入Flavourzyme风味蛋白酶，加酶量(E/S)为3.0wt％，反应时间4.5h。

[0106] 灭酶：反应体系于90℃下保持15分钟。

[0107] 离心过滤：采用离心机，3000转/分钟离心20分钟，得到上层清夜和底层的固形物废渣，上清液过滤得水解蛋白液。

[0108] 将上清液浓缩制成高蛋白营养液。

[0109] 实施例十三：

[0110] 原料处理：将新鲜鸡肝去除苦胆和筋络，清洗后，用搅拌机搅碎，制成80目的鸡肝泥。

[0111] 水解：加水配成浓度为5.0wt％(w/w，以鸡肝干重计算百分含量)的鸡肝浆液，调pH6.0，控制反应温度为55℃，加入木瓜蛋白酶，加酶量(E/S)为2.25wt％，反应时间2.5h。

[0112] 灭酶：反应体系于90℃下保持15分钟。

[0113] 离心过滤：采用离心机，3000转/分钟离心20分钟，得到上层清夜和底层的固形物废渣，上清液过滤得水解蛋白液。

[0114] 将上清液通过喷雾干燥制成蛋白粉。

[0115] 实施例十四：

[0116] 原料处理：将新鲜鸡肝去除苦胆和筋络，清洗后，用搅拌机搅碎，制成100目的鸡肝泥。

[0117] 水解：加水配成浓度为10wt％(w/w，以鸡肝干重计算百分含量)的鸡肝浆液，调pH5.5，控制反应温度为53℃，加入木瓜蛋白酶，加酶量(E/S)为2.0wt％，反应时间3h。

[0118] 灭酶：反应体系于85℃下保持20分钟。

[0119] 离心过滤：采用离心机，4000转/分钟离心10分钟，得到上层清夜和底层的固形物废渣，上清液过滤得水解蛋白液。

[0120] 将上清液冻干制成具有一定生物活性的蛋白粉。

[0121] 实施例十五：

[0122] 原料处理：将新鲜鸡肝去除苦胆和筋络，清洗后，用搅拌机搅碎，制成90目的鸡肝泥。

[0123] 水解：加水配成浓度为15wt％(w/w，以鸡肝干重计算百分含量)的鸡肝浆液，调pH6.5，控制反应温度为50℃，加入木瓜蛋白酶，加酶量(E/S)为2.5wt％，反应时间3.5h。

[0124] 灭酶：反应体系于100℃下保持10分钟。

[0125] 离心过滤：采用离心机，3500转/分钟离心15分钟，得到上层清夜和底层的固形物废渣，上清液过滤得水解蛋白液。

[0126] 将上清液浓缩制成高蛋白营养液。

[0127] 实施例十六：

[0128] 原料处理：将新鲜鸡肝去除苦胆和筋络，清洗后，用搅拌机搅碎，制成80目的鸡肝泥。

[0129] 水解：加水配成浓度为5wt％(w/w，以鸡肝干重计算百分含量)的鸡肝浆液，调pH8.0，控制反应温度为60℃，同时加入0.5wt％的Alcalase碱性蛋白酶和1.5wt％的Flavourzyme风味蛋白酶，反应时间3.0h。

[0130] 灭酶：反应体系于90℃下保持15分钟。

[0131] 离心过滤：采用离心机，3000转/分钟离心20分钟，得到上层清夜和底层的固形物废渣，上清液过滤得水解蛋白液。

[0132] 将上清液浓缩制成高蛋白营养液。

[0133] 实施例十七：

[0134] 原料处理：将新鲜鸡肝去除苦胆和筋络，清洗后，用搅拌机搅碎，制成100目的鸡肝泥。

[0135] 水解：加水配成浓度为10wt％(w/w，以鸡肝干重计算百分含量)的鸡肝浆液，调pH7.5，控制反应温度为55℃，同时加入0.75wt％的Alcalase碱性蛋白酶和1.25wt％的Flavourzyme风味蛋白酶，反应时间3.5h。

[0136] 灭酶：反应体系于85℃下保持20分钟。

[0137] 离心过滤：采用离心机，4000转/分钟离心10分钟，得到上层清夜和底层的固形物废渣，上清液过滤得水解蛋白液。

[0138] 将上清液冻干制成具有一定生物活性的蛋白粉。

[0139] 实施例十八：

[0140] 原料处理：将新鲜鸡肝去除苦胆和筋络，清洗后，用搅拌机搅碎，制成90目的鸡肝泥。

[0141] 水解：加水配成浓度为15wt％(w/w，以鸡肝干重计算百分含量)的鸡肝浆液，调pH8.5，控制反应温度为50℃，同时加入1.0wt％的Alcalase碱性蛋白酶和1.0wt％的Flavourzyme风味蛋白酶，反应时间4.0h。

[0142] 灭酶：反应体系于100℃下保持10分钟。

[0143] 离心过滤：采用离心机，3500转/分钟离心15分钟，得到上层清夜和底层的固形物废渣，上清液过滤得水解蛋白液。

[0144] 将上清液通过喷雾干燥制成蛋白粉。

[0145] 实施例十九：

[0146] 原料处理：将新鲜鸡肝去除苦胆和筋络，清洗后，用搅拌机搅碎，制成80目的鸡肝泥。

[0147] 水解：加水配成浓度为5wt％(w/w，以鸡肝干重计算百分含量)的鸡肝浆液，调pH8.0，控制反应温度为50℃，同时加入1.0wt％的Protamex复合蛋白酶和1.5wt％的Flavourzyme风味蛋白酶，反应时间3.5h。

[0148] 灭酶：反应体系于90℃下保持15分钟。

[0149] 离心过滤：采用离心机，3000转/分钟离心20分钟，得到上层清夜和底层的固形物废渣，上清液过滤得水解蛋白液。

[0150] 将上清液通过喷雾干燥制成蛋白粉。

[0151] 实施实二十：

[0152] 原料处理：将新鲜鸡肝去除苦胆和筋络，清洗后，用搅拌机搅碎，制成90目的鸡肝泥。

[0153] 水解：加水配成浓度为10wt％(w/w，以鸡肝干重计算百分含量)的鸡肝浆液，调pH7.0，控制反应温度为55℃，同时加入1.25wt％的Protamex复合蛋白酶和1.0wt％的Flavourzyme风味蛋白酶，反应时间3.0h。

[0154] 灭酶：反应体系于100℃下保持10分钟。

[0155] 离心过滤：采用离心机，3500转/分钟离心15分钟，得到上层清夜和底层的固形物废渣，上清液过滤得水解蛋白液。

[0156] 将上清液冻干制成具有一定生物活性的蛋白粉。

[0157] 实施实二十一：

[0158] 原料处理：将新鲜鸡肝去除苦胆和筋络，清洗后，用搅拌机搅碎，制成100目的鸡肝泥。

[0159] 水解：加水配成浓度为15wt％(w/w，以鸡肝干重计算百分含量)的鸡肝浆液，调pH7.5，控制反应温度为53℃，同时加入1.5wt％的Protamex复合蛋白酶和1.25wt％的Flavourzyme风味蛋白酶，反应时间4.0h。

[0160] 灭酶：反应体系于85℃下保持20分钟。

[0161] 离心过滤：采用离心机，4000转/分钟离心10分钟，得到上层清夜和底层的固形物废渣，上清液过滤得水解蛋白液。

[0162] 将上清液浓缩制成高蛋白营养液。

[0163] 实施例二十二：

[0164] 原料处理：将新鲜鸡肝去除苦胆和筋络，清洗后，用搅拌机搅碎，制成90目的鸡肝泥。

[0165] 水解：加水配成浓度为10wt％(w/w，以鸡肝干重计算百分含量)的鸡肝浆液，调pH5.5，控制反应温度为55℃，同时加入1.25wt％的木瓜蛋白酶和1.25wt％的Flavourzyme风味蛋白酶，反应时间4.0h。

[0166] 灭酶：反应体系于100℃下保持10分钟。

[0167] 离心过滤：采用离心机，3500转/分钟离心15分钟，得到上层清夜和底层的固形物废渣，上清液过滤得水解蛋白液。

[0168] 将上清液冻干制成具有一定生物活性的蛋白粉。

[0169] 实施例二十三：

[0170] 原料处理：将新鲜鸡肝去除苦胆和筋络，清洗后，用搅拌机搅碎，制成80目的鸡肝泥。

[0171] 水解：加水配成浓度为5wt％(w/w，以鸡肝干重计算百分含量)的鸡肝浆液，调pH6.0，控制反应温度为50℃，同时加入1.0wt％的木瓜蛋白酶和1.5wt％的Flavourzyme风味蛋白酶，反应时间4.5h。

[0172] 灭酶：反应体系于90℃下保持15分钟。

[0173] 离心过滤：采用离心机，3000转/分钟离心20分钟，得到上层清夜和底层的固形物废渣，上清液过滤得水解蛋白液。

[0174] 将上清液通过喷雾干燥制成蛋白粉。

[0175] 实施例二十四：

[0176] 原料处理：将新鲜鸡肝去除苦胆和筋络，清洗后，用搅拌机搅碎，制成100目的鸡肝泥。

[0177] 水解：加水配成浓度为15wt％(w/w，以鸡肝干重计算百分含量)的鸡肝浆液，调pH6.5，控制反应温度为53℃，同时加入1.5wt％的木瓜蛋白酶和1.0wt％的Flavourzyme风味蛋白酶，反应时间5h。

[0178] 灭酶：反应体系于85℃下保持20分钟。

[0179] 离心过滤：采用离心机，4000转/分钟离心10分钟，得到上层清夜和底层的固形物废渣，上清液过滤得水解蛋白液。

[0180] 将上清液浓缩制成高蛋白营养液。