一种以黄藤素为主药的滴鼻剂及制备方法

摘要

本发明是一种以黄藤素为主药的滴鼻剂及其制备方法。原料组分的重量配比为：黄藤素0.1％～2％，其余为辅料。辅料采用羟丙基甲基纤维素用冲浆法溶解，并使其形成均匀的不溶性糊状物，然后等量的室温水，搅拌至完全溶解；将黄藤素粉末加生理盐水，加热溶解，抽滤，得到上清液；将羟丙基甲基纤维素溶液与黄藤素上清液搅拌混匀，再加生理盐水定容至所需量，搅匀，调pH值到5.5～6.5过滤，分装即可。本发明的滴鼻剂经实验验证无刺激性炎症反应，鼻剂对炎症的较好的抑制作用，并且具有较好的稳定性。

权利要求

1.一种以黄藤素为主药的滴鼻剂，其特征在于原料组分的重量配比为：黄藤素

0.1％～2％，其余为辅料；按以下方法制备：

按量称取黄藤素粉末和羟丙基甲基纤维素，羟丙基甲基纤维素采用冲浆法溶解，取

80-90℃处方量1/5～1/3的热水膨润、分散，边加羟丙基甲基纤维素边搅拌15～25min，使其形成均匀的不溶性糊状物，然后加入等量的室温水，搅拌15～25min，即完全溶解；将黄藤素粉末、羟苯乙酯加生理盐水，加热溶解，趁热抽滤，得到上清液；将羟丙基甲基纤维素溶液与黄藤素上清液搅拌混匀，再加生理盐水定容至所需量，搅匀，用适量0.5mol/L的NaOH溶液将其pH值调到5.5～6.5，过滤，分装即可。

说明书

一种以黄藤素为主药的滴鼻剂及制备方法

技术领域：

[0001] 本项发明涉及医药新产品的研制，具体为一种以黄藤素为主药的滴鼻剂及制备方法。

背景技术

[0002] 一、慢性鼻炎简介

[0003] 慢性鼻炎(chronic rhinitis)是鼻腔粘膜和粘膜下层的慢性炎症。表现为鼻粘膜的慢性充血肿胀，称慢性单纯性鼻炎(chronic simple rhinitis)。发展为鼻粘膜和鼻甲骨的增生肥厚，称慢性肥厚性鼻炎(chronic hypertrophic rhinitis)。

[0004] 慢性鼻炎、鼻窦炎的患者鼻粘膜的深层动脉呈慢性扩张状态，失去收缩功能，下鼻甲海绵组织也呈慢性扩张，血管和腺体周围有淋巴细胞和浆细胞为主的炎性浸润，粘液腺功能活跃，分泌物增多，粘膜固有层水肿，引起炎症最常见的病原体有流感杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、大肠杆菌、脓杆菌等。

[0005] 二、慢性单纯性鼻炎

[0006] 病理：粘膜深层血管慢性扩张，尤以下鼻甲海绵状血窦变化最明显。粘液腺功能活跃，分泌增多。鼻甲粘膜肿胀，但粘膜下组织无明显增生性改变。

[0007] 三、慢性肥厚性鼻炎

[0008] 慢性肥厚性鼻炎(chronic hypertrophyc rhinitis)为鼻粘膜、粘膜下层及鼻甲骨的增生肥厚性改变，一般由慢性单纯性鼻炎发展而来。

[0009] 病理：粘膜上皮纤毛脱落，变为复层立方上皮，粘膜下层由水肿继而发生纤维组织增生而使粘膜肥厚，久之，可呈桑椹状或息肉样变，骨膜及骨组织增生，鼻甲骨骨质也可呈肥大改变。

[0010] 目前用于治疗的药物滴鼻剂多为西药制剂，临床反应疗效差且有副反应。因为西药滴鼻剂主要成份是麻黄素，其作用往往是先收缩后扩张，易产生“麻黄素样”反应，因而使鼻塞、鼻粘膜肿胀得不到根本治疗，长期使用易引起萎缩性鼻炎。为此本试验采用纯中药制剂——黄藤素滴鼻剂。

[0011] 黄藤素具有清热解毒、消炎等功能。以黄藤为原料生产的黄藤素，成分以巴马汀(palmaine)为主，已形成黄藤素片、胶囊、注射液等制剂，具有广谱抗菌、抗病毒等药理作用，对泌尿系统感染疗效确切，特别对妇科感染疗效尤为显著。

[0012] 黄藤素，又名盐酸巴马汀，是一种中药来源的生物碱类物质，自传统中药黄藤Fibraureatinctoria当中提取分离得到。黄藤素属于卞基四氢异喹琳类生物碱中的原小檗碱类，具有较为广泛的生物学作用。目前的研究表明，黄藤素具有显著的抗多种病原微生物和原虫的作用；对多种革兰氏阳性及阴性菌具有显著的抑制作用，对多种真菌如白色念珠菌、石膏样毛菌、裴氏着色菌等亦有较强的抑制作用。此外，研究发现黄藤素还具有免疫调节作用，能够增强白细胞的吞噬作用从而加强机体防卫机能。目前黄藤素的口服制剂、针剂在临床上广泛用于妇科炎症、痢疾、肠炎、呼吸道及泌尿道感染、外科感染以及结膜炎等。但是，目前黄藤素尚未有用于治疗鼻炎、鼻窦炎等鼻科疾病应用制剂的研究和应用，仅有口服制剂或针剂有用于治疗结膜炎。

发明内容

[0013] 本发明的目的是提供一种具有较好效果治疗慢性鼻炎、鼻窦炎的黄藤素滴鼻剂及制备方法。

[0014] 本发明的技术方案为：

[0015] 治疗慢性鼻炎、鼻窦炎的黄藤素滴鼻剂的原料组分的重量配比为：黄藤素0.1％～2％，其余为辅料。

[0016] 治疗慢性鼻炎、鼻窦炎的黄藤素滴鼻剂的原料组分的重量配比为：黄藤素0.7％，其余为辅料。

[0017] 治疗慢性鼻炎、鼻窦炎的黄藤素滴鼻剂的制备方法按以下步骤进行：

[0018] 按量称取黄藤素粉末和羟丙基甲基纤维素，羟丙基甲基纤维素羟丙基甲基纤维素采用冲浆法溶解，取80-90℃处方量1/5～1/3的热水膨润、分散，边加羟丙基甲基纤维素边搅拌15～25min，使其形成均匀的不溶性糊状物，然后等量的室温水，搅拌15～25min，即完全溶解；将黄藤素粉末、羟苯乙酯加生理盐水，加热溶解，趁热抽滤，得到上清液；将羟丙基甲基纤维素溶液与黄藤素上清液搅拌混匀，加入生理盐水定容至1000mL，搅匀，用适量0.5mol/L的NaOH溶液将其pH值调到5.5-6.5，分装即可。

[0019] 采用慢性鼻窦炎模型对其鼻炎疗效进行试验和验证，并对其进行体外抑菌试验、刺激性试验、抗炎试验与稳定性试验。

[0020] 1、黄藤素滴鼻剂慢性鼻窦炎的治疗作用

[0021] 取健康成年雄性新西兰白兔，采用窦口不完全堵塞加窦腔留置棉絮的建模方法，整个过程必须无菌操作。将兔鼻背正中的毛剪短，刮光。氯氨酮50mg/kg肌注麻醉，麻醉成功后，常规消毒，铺巾，1％利多卡因术区浸润麻醉，沿鼻背正中线切一纵长切口，随机选取一侧上额窦前壁，分离皮下组织及骨膜。用显微电钻在上领窦前壁钻开一直径大约1.5mm大小的孔。用生理盐水冲洗窦腔，取少量棉絮通过上额窦前壁所钻的小孔，将其置放在窦口及窦腔里，不必完全堵塞窦口。将骨膜、皮肤逐层缝合。造成慢性鼻窦炎动物模型，黄藤素滴鼻剂的对照药物分别为生理盐水、呋麻滴鼻剂，受试动物分为：不给药空白对照组、生理盐水阴性对照组、呋麻滴鼻剂组、黄藤素滴鼻剂2mg/kg组、黄藤素滴鼻剂0.2mg/kg组、黄藤素滴鼻剂0.02mg/kg组，每组10只动物，受试动物造模后，除空白对照组外，分别以药液滴鼻。

[0022] 观察受试各组动物病状体征并根据在光镜下观察到的病理现象划分成半定量化等级病理结果(-/1+2+)。见表1

[0023] 表1黄藤素滴鼻剂对兔感染上额窦黏膜病症治疗半量化等级结果[0024]病理征象 空白对 阴性对 呋麻滴 2mg/kg 0.2mg/kg 0.02mg/kg
照组 照组 鼻剂组 黄藤素滴 黄藤素滴 黄藤素滴
鼻剂组 鼻剂组 鼻剂组
上皮增生(-/+) + + + - - +
腺体增生(-/+) + + + - + +
骨质增生(-/+) - - - - - -
纤维增生(-
++ + + - - +
/1+2+)
溃疡程度(-
++ ++ - - - +
/1+2+)
炎症细胞浸润程
+ + - - - -
度(-/+)
纤毛脱落(-
++ ++ - - - +
/1+2+)
杯状细胞增多情
+ + - - - -
况(-/+)

[0025] 2、黄藤素滴鼻剂的体外抑菌试验

[0026] 菌悬液的制备先将流感杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、表皮葡萄球菌6种冻干菌株分别接种至血清肉汤中，37℃培养18h，从各增菌液中分别挑取一环细菌接种至5mL血清肉汤中，37℃18h，离心(2000r/min，10min)，弃去上清；以无菌生理盐水洗涤，再次离心；各管沉淀以无菌生理盐水稀释。采用比浊法使5种菌悬液浓度均为1×105CFU/mL，备用。

[0027] 样品稀释采用试管系列稀释法，将质量百分浓度为0.7％的黄藤素鼻炎滴剂样品用血清肉汤稀释成6个不同的稀释度，即1/2、1/4、1/8、1/16、1/32和1/64。

[0028] 细菌接种将比浊后的菌悬液接种至含药肉汤中，接种量为50μL/管。同时设立阳性、阴性和空白对照组，其中阳性对照：不加药，加菌；阴性对照：加80μg/mL的氨苄西林，加菌；空白对照：加药，不加菌。

[0029] 细菌培养结果37℃温箱中培养24h后，观察各细菌生长的情况。以澄清管所含药物的最低浓度确定为最低抑菌浓度(MIC)。从澄清管中各挑取一环肉汤，分别划线接种至不含药物的平板上。37℃培养24h，观察有无菌落形成以确定药物的最低杀菌浓度(MBC)。

[0030] 表2黄藤素滴鼻剂的抗菌作用

[0031]

[0032] 由以上抑菌试验可知，质量百分浓度为0.7％的黄藤素鼻炎滴剂样品的抗菌最低显效剂量为1/8稀释度，此时样品浓度为0.0875％。

[0033] 3、刺激性试验

[0034] 取18-22g小鼠6只，随机分成2组。一组是空白对照组(蒸馏水)，一组是质量百分浓度为2％的黄藤素滴鼻剂药物组，每2h滴1次，每次2-3滴，并观察动物活动情况，24h 后用空气栓塞法处死小鼠并取鼻咽部粘膜，立即用10％甲醛浸洗送病理活检。

[0035] 刺激性试验结果：观察小鼠行为，鼻粘膜、鼻咽部粘膜对照组和药物组无组织形态学改变，结果显示黄藤素滴鼻剂无刺激性炎症反应。

[0036] 4、抗炎试验

[0037] 通过动物炎症模型，观察黄藤素滴鼻剂对炎症的抑制作用。

[0038] (1)黄藤素滴鼻剂对琼脂所致大鼠足跖肿胀的影响

[0039] 采用黄藤素滴鼻剂的浓缩液，将其分为3个剂量组，每组含生药量分别为2mg/kg，0.2mg/kg，0.02mg/kg；选用健康Wister大鼠50只。体重130～190g，雌雄不限，随机分生理盐水对照组、呋麻滴鼻剂组、黄藤素滴鼻剂2mg/kg组、黄藤素滴鼻剂0.2mg/kg组、黄藤素滴鼻剂0.02mg/kg组。于致炎前用药品反复涂抹大鼠足跖及关节以下部位。每日5次，连续3d。最后一次给药后30min在大鼠足跖皮下注射1％琼脂溶液0.05mL致炎，测量致炎前后大鼠足跖关节以下的体积变化。随后分别于1、3、5、24h各各测1次右后肢踝关节周长，记录结果，按下式计算肿胀度：

[0040] 肿胀度(％)＝(致炎后周长-致炎前周长)/致炎前周长×100％

[0041] 表3黄藤素滴鼻剂对琼脂所致大鼠足跖肿胀的影响(x±s)

[0042]

[0043] 黄藤素滴鼻剂治疗效果显著，与对照组比较，P＜0.01，差异有统计学意义。黄藤素滴鼻剂治疗组与呋麻滴鼻剂组之间无明显差别。

[0044] (2)黄藤素滴鼻剂对二甲苯所致小鼠耳肿的影响

[0045] 采用黄藤素滴鼻剂的浓缩液，将其分为3个剂量组。选用体重18～22g昆明种小鼠50只，雌雄不限。随机分为5组，即生理盐水对照组、呋麻滴鼻剂组、黄藤素滴鼻剂2mg/kg组、黄藤素滴鼻剂0.2mg/kg组、黄藤素滴鼻剂0.02mg/kg组。每日涂抹小鼠左右耳5次，连续3d。最后一次给药后30min，将二甲苯滴于小鼠右耳，15min后处死动物，用6mm打孔器沿左右耳廓相同部位打孔，两侧耳片分别称重，以两片重量差值作为肿胀程度指标。比较药物组与对照组的差异。黄藤素滴鼻剂对二甲苯所致小鼠耳肿的影响结果是对小鼠两侧耳片分别称重，以两片重量差值作为肿胀程度指标，并通过比较药物组与对照组的差异，求出肿胀抑制率来判断黄藤素滴鼻剂的抗炎作用。抑制率＝(模型组肿胀度均值-用药组肿胀度均值)/模型组肿胀度均值×100％。

[0046] 表4黄藤素滴鼻剂对二甲苯所致小鼠耳肿的影响

[0047]组别 剂量(mg/kg) 动物数(只) 肿胀度(mg) 抑制率％
生理盐水组 10 6.9±3.26 /
呋麻滴鼻剂组 10 3.3±2.69 52％
黄藤素滴鼻剂组 2mg/kg 10 2.2±1.63 68％
黄藤素滴鼻剂组 0.2mg/kg 10 3.9±2.73 43％
黄藤素滴鼻剂组 0.02mg/kg 10 5.1±2.45 26％

[0048] 黄藤素滴鼻剂治疗效果显著，与对照组比较，P＜0.01，差异有统计学意义。黄藤素滴鼻剂治疗组与呋麻滴鼻剂组之间无明显差别。

[0049] 通过黄藤素滴鼻剂的鼻炎疗效验证结果和体外抑菌试验、刺激性试验、抗炎试验实验结果可以推断出黄藤素滴鼻剂的显效剂量为0.1％～2％。

[0050] 5、稳定性试验

[0051] (1)加速试验

[0052] 将样品放在温度40℃±2℃，相对湿度75％±5％的孵育箱中，按1、2、3、6月进行检查。

[0053] 结果：样品的颜色、澄清度和pH值，含量均未发生改变。

[0054] 表5样品在加速试验三个月内的稳定情况

[0055]样品放置时间 样品的颜色 样品的澄清度 样品的pH值 样品的标示量
0月 淡黄色 澄清 6.0 100％
1月 淡黄色 澄清 6.0 100％
2月 淡黄色 澄清 6.0 98％
3月 淡黄色 澄清 5.9 94％
6月 淡黄色 澄清 5.9 93％

[0056] 本品药品微生物限度检查符合2005年版药典中鼻给药制剂的微生物限度标准，产品标示物含量均在合格范围内，表明产品是稳定的。

[0057] (2)长期留样考察

[0058] 将本品灌封于10mL瓶中封口，置温度25℃±2℃，相对湿度60％±10％的下作留样观察，分别于0、3、6、9、12个月时，对其颜色、澄明度、pH值、沉淀等进行观察测定。

[0059] 结果标示量分别为：100％，100％，98％，97％，95％。其外观及pH及含量无明显变化。

[0060] 表6样品在十二个月内的稳定情况

[0061]样品放置时间 样品的颜色 样品的澄清度 样品的pH值 样品的标示量
0月 淡黄色 澄清 6.0 100％
3月 淡黄色 澄清 6.0 100％
6月 淡黄色 澄清 5.9 98％
9月 淡黄色 澄清 5.9 97％
12月 淡黄色 澄清 5.9 95％

[0062] 本品药品卫生检查符合2005年版药典中鼻给药制剂的微生物限度标准，产品标示物含量均在合格范围内，表明产品是稳定的。

具体实施方式

[0063] 实施例1：

[0064] 药物配方：

[0065] 黄藤素7mg 羟丙基甲基纤维素10g

[0066] 0.5mol/L的NaOH溶液 羟苯乙酯0.3g

[0067] 质量百分浓度为0.9％的生理盐水1000mL

[0068] 制备方法：

[0069] 称取黄藤素粉末7mg，羟丙基甲基纤维素10g；羟丙基甲基纤维素采用冲浆法溶解，取250ml 80-90℃的热水膨润、分散，边加羟丙基甲基纤维素边搅拌15min，使其形成均匀的不溶性糊状物，然后等量的室温水，搅拌15min，即完全溶解；将黄藤素粉末、羟苯乙酯加生理盐水600mL，加热溶解，趁热抽滤，得到上清液。将羟丙基甲基纤维素溶液与黄藤素上清液搅拌混匀，再加生理盐水定容至1000mL，搅匀，用适量0.5mol/L的NaOH溶液将其pH值调到6.0，分装即可。

[0070] 实施例2：

[0071] 药物配方：

[0072] 黄藤素20mg 羟丙基甲基纤维素5g

[0073] 0.5mol/L的NaOH溶液 羟苯乙酯0.3g

[0074] 质量百分浓度为0.9％的生理盐水1000mL

[0075] 制备方法：

[0076] 称取黄藤素粉末20mg，羟丙基甲基纤维素5g；羟丙基甲基纤维素采用冲浆法溶解，取200ml 80-90℃的热水膨润、分散，边加羟丙基甲基纤维素边搅拌20min，使其形成均匀的不溶性糊状物，然后等量的室温水，搅拌20min，即完全溶解；将黄藤素粉末、羟苯乙酯加生理盐水600mL，加热溶解，趁热抽滤，得到上清液。将羟丙基甲基纤维素溶液与黄藤素上清液搅拌混匀，再加生理盐水定容至1000mL，搅匀，用适量0.5mol/L的NaOH溶液将其pH值调到6.5，分装即可。

[0077] 实施例3

[0078] 药物配方：

[0079] 黄藤素1mg 羟丙基甲基纤维素15g

[0080] 0.5mol/L的NaOH溶液 羟苯乙酯0.3g