一种无毒无色无味的生物诱杀果实蝇的水剂及制备方法转让专利

申请号 : CN201010131326.X

文献号 : CN101785486A

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发明人 : 赵璋

申请人 : 赵璋

摘要 :

本发明公开了一种无毒无色无味的生物诱杀果实蝇的水剂及制备方法。采用性信息素和聚集信息素,按照比列互配,加抑制酶经过复杂工艺研制而成,属生物制药领域。解决了有效期的问题,最长效果可达到60天,大大降低了农民朋友的使用成本,另外使用非常方便,直接喷洒在果树树叶后即可,无毒,无残留,不影响水果品质。因为采用抑制酶,靶向作用单一,对靶标以外的昆虫和生物无任何毒副作用。

权利要求 :

1.一种无毒无色无味的生物诱杀苍蝇和瓜果实蝇的水剂及制备方法,其特征在于它主要是由下列重量份的原材料制成:100克中含80克白糖,1克性信息素(顺-9-二十三碳烯),1克聚集信息,10克抑制酶,8克提取物(印楝素、野菊花各2克)。

2.根据权利要求1的药物,其中各原料药的用量为:白糖80克、性信息素(顺-9-二十三碳烯)1克、聚集信息1克、抑制酶10克、印楝素提取物2克、野菊花2克。

3.根据权利要求1或2所述药物的制备方法,它包括下列步骤:1)抑制酶制取工艺流程为:感染源分离纯化----扩大培养-----浓缩灭活,加佐剂-----昆虫群体感染----酶检测-----昆虫体液采集---离心分离-----灭活---精滤出菌-----冻干-制粉-----分装待检----抑制酶成品入库,抑制酶能抑制果实蝇体内的保护酶的活性从而造成酶断裂;

2)信息素的添加:信息素是生物体之间起化学通讯作用的化合物的统称,是昆虫交流的化学分子语言,在自然界中,害虫雌成虫在性成熟后,会释放一种叫性信息素的化合物,它释放至空气中后随气流扩散,刺激雄虫触角中的化学感觉器官,引起雄性个体性冲动及引诱雄虫向释放源定向飞行,并与释放雌成虫交配以繁衍后代,因此,昆虫性诱剂产品是仿生高科技产品,通过诱芯释放人工合成的性信息素,性诱剂是模拟自然界的昆虫性信息素,通过释放器释放到田间来诱杀异性害虫的仿生高科技产品,该技术诱杀害虫不接触植物和农产品,没有农药残留之忧,是现代农业生态防治害虫的首选方法之一;

性信息素作为同种异性昆虫之间生殖阶段的化学通讯工具,其化学结构的高度复杂性和特殊性是昆虫种间生殖隔离的重要保证,因此,不同昆虫之间的性信息素相互不能替代,也不会引起混淆,这在昆虫的区域性调查、植物检疫以及诱杀防治等方面具有较大的实用价值;

3)中草药植物提取物:

利用超声波的空化作用加速植物有效成分的浸出提取,另外超声波的次级效应,如机械振动、乳化、扩散。击碎、化学效应等也能加速欲提取成分的扩散释放并充分与溶剂混合,利于提取。验法,用超临界流体萃取技术对印楝素、野菊花萃取条件进行了优化选择,结果最佳萃取条件为压力34.smPa,温度60℃,改性剂乙醇0.3ml,静态萃取时间10min,动态萃取量10ml,以水作为吸收。印楝素、野菊花对哺乳动物等非靶标生物非常安全。

说明书 :

技术领域

本发明涉及一种无毒无色无味的生物诱杀果实蝇的水剂及制备方法,属于生物制药领域。

背景技术

果实蝇是我国二类检疫性害虫,俗称金苍蝇、针蜂、东方果实蝇。该蝇外形与苍蝇近似,但体形比苍蝇小,全体金黄色带黑色斑纹,繁殖速度快,暴发性强,危险性大。成虫产卵于果皮内,幼虫在果肉内蛀食,造成番荔枝、番石榴、香蕉、芒果、木瓜、杨桃、柑桔、蜜柚、油柰等水果的腐烂与落果,严重影响品质和产量,被誉为水果的“头号杀手”。
果实蝇分布于澳大利亚、新西兰、美国的夏威夷、环太平洋岛屿,我东南沿海各省区以及缅甸、柬埔寨、老挝、越南、中国台湾、日本、印尼、马来西亚、泰国、文莱、印度、孟加拉国、尼泊尔、斯里兰卡、巴基斯坦、伊朗、阿富汗、阿塞拜疆、非洲的埃及、肯尼亚、坦桑尼亚、毛里求斯、巴布亚新几内亚、新爱尔兰等等各国,全球气候变暖加剧了这钟小昆虫的蔓延。长期以来一直被世界各国列为重要检疫昆虫。果实蝇对瓜果产业的危害主要有以下两方面:一方面直接危害瓜果产业的生产果实蝇侵害瓜果后会造成果实腐烂、落果,严重影响瓜果的产量和质量。严重时会使产量下降40%以上。另一方面,严重影响市场准入:由于果实蝇的严重危害性因而一直以来是世界各国作为外来生物入侵的强势类群和口岸检疫的防范重点。甚至于即便水果本身没有被果实蝇侵害过但由于产地临近果实蝇灾区而即会被进口国列入限制进口产品予以严加防范进而失去进入国际市场的机会。由此果实蝇的防范成了全世界各国特别是水果产业发达国家的重要课题。
果实蝇已在水果种植区较普遍发生,目前人们找到的防治措施有:1化学防治技术的应用,包括直接喷洒农业,用浸药的毒果诱杀等,该防治技术效果不明显,农药残留期长且大,易造成人畜中毒。2物理防范包括覆盖防虫网、套袋防虫保果等技术,该技术施工复杂,成本高,效果一般。3用放出无孕雄虫的方法防止果实蝇的繁殖,该技术理论可行,实际操作非常困难,基本无效。4化学农药直接加性信息素引诱剂来杀成虫,该技术为现阶段普遍采用,效果明显,但只能诱杀雄虫,且有效期短(3-5天),布点复杂,化学农药药物残留高,直接影响到瓜果的食用。随着环保意识的提高,市场已在呼唤无公害的纯绿色诱杀剂。

发明内容

因此,人们对防治效果更好、有效期更长、能双性诱杀的纯绿色无公害诱杀剂期望需求越来越大,尤其是在国家提倡绿色食品、绿色种植的环境下,抑制酶与昆虫性信息素的应用前景必将更加广阔。至今为止,还没有发现任何有关本发明药物组合物的报道。本发明人经过反复研究,并通过动物临床试验的反复验证,终于找到了有更好防治果实蝇的药物,从而完成了本发明。
本发明的目的就是提供一种更为有效防治果实蝇的一种纯绿色无公害诱杀剂组合物。
本发明的另外一个目的是提供了该诱杀剂组合物的制备方法。
诱杀剂是采用性信息素和聚集信息素,按照比列互配,加抑制酶经过复杂工艺研制而成。首先解决了有效期的问题,最长效果可达到60天,大大降低了农民朋友的使用成本,另外使用非常方便,直接喷洒在果树树叶后即可,无毒、无残留,不影响水果品质。因为采用抑制酶,靶向作用单一,对靶标以外的昆虫和生物无任何毒副作用。
1)抑制酶制取工艺流程为:感染源分离纯化----扩大培养-----浓缩灭活,加佐剂---昆虫群体感染----酶检测---昆虫体液采集---离心分离---灭活---精滤出菌---冻干---制粉---分装待检----抑制酶成品入库。抑制酶能抑制果实蝇体内的保护酶的活性从而造成酶断裂
2)信息素的添加:信息素是生物体之间起化学通讯作用的化合物的统称,是昆虫交流的化学分子语言。在自然界中,害虫雌成虫在性成熟后,会释放一种叫性信息素的化合物,它释放至空气中后随气流扩散,刺激雄虫触角中的化学感觉器官,引起雄性个体性冲动及引诱雄虫向释放源定向飞行,并与释放雌成虫交配以繁衍后代。因此,昆虫性诱剂产品是仿生高科技产品,通过诱芯释放人工合成的性信息素。性诱剂是模拟自然界的昆虫性信息素,通过释放器释放到田间来诱杀异性害虫的仿生高科技产品。该技术诱杀害虫不接触植物和农产品,没有农药残留之忧,是现代农业生态防治害虫的首选方法之一。
性信息素作为同种异性昆虫之间生殖阶段的化学通讯工具,其化学结构的高度复杂性和特殊性是昆虫种间生殖隔离的重要保证,因此,不同昆虫之间的性信息素相互不能替代,也不会引起混淆,这在昆虫的区域性调查、植物检疫以及诱杀防治等方面具有较大的实用价值。本发明在制剂中按照比例添加性信息素和聚集信息素,是只针对靶向单一的瓜果实蝇引诱,对其他非靶向的生物及天敌无任何影响。
3)中草药植物提取物:
利用超声波的空化作用加速植物有效成分的浸出提取,另外超声波的次级效应,如机械振动、乳化、扩散、碎、化学效应等也能加速欲提取成分的扩散释放并充分与溶剂混合,利于提取。验法,用超临界流体萃取技术对印楝素、野菊花的萃取条件进行了优化选择,结果最佳萃取条件为压力34.smPa,温度60℃,改性剂乙醇0.3ml,静态萃取时间10min,动态萃取量10ml,以水作为吸收。印楝素、野菊花对哺乳动物等非靶标生物非常安全。
本发明药物对人及动物无毒害,不污染环境,是一种符合环保要求的绿色产品。该诱剂具有醇和浓厚的芳香气味,对果实蝇有较强的引诱灭杀作用,而且本药剂原料采购方便,生产成本低廉,工艺简单,因此低成本和环保无毒害的优势具有很强的市场竞争力。

具体实施方式

以下通过试验例来进一步阐述本发明所述药物的有益效果,这些试验例包括了本发明药物(以下称杀手1号)的安全性试验(急性毒性试验和亚慢性毒性试验)和临床观察试验。
[试验例1]本发明药物对小白鼠的急性毒性试验
1试验材料
1.1供试药物
杀手1号,湖南威亚药业科技有限公司生产,批号:20090610
1.2供试动物
健康小白鼠50只,雌雄各半,体重为18-22g,购自中南大学实验室动物部。
2试5验方法
将50只小白鼠随机分成5组,每组10只,雌雄各半,分别按1g/kg体重、2g/kg体重、5g/kg体重、8g/kg体重、12g/kg体重五个剂量组的药量将杀手1号一天分5次灌胃小鼠。给药后,观察并记录7d内动物所出现的毒性反应,统计死亡动物数并对死亡动物及时尸检,如有病变组织则进行组织学就检,用改良寇氏法计算LD50及95%平均可信限。
3结果与分析
表1杀手1号的急性毒性试验结果
  组别   剂量g/kg体重   动物数/只   死亡数/只   死亡率/%   存活率/%   1   1   10   0   0   100   2   2   10   0   0   100   3   5   10   0   0   100   4   8   10   1   10   90   5   12   10   2   20   80
急性毒性试验结果见表1。结果表明:小白鼠灌胃药物后,第一组、第二组和第三组全部成活,临床表现正常;第四组在24h内死亡1只;第五组在12h内死亡2只。中毒小白鼠主要症状为精神沉郁、呼吸困难,以腹式呼吸为主,对死亡小白鼠剖检,发现有胃胀和鼓起现象,其余组织均未见异常。
按改良寇氏法计算杀手1号内服半数致死量(LD50)为72g/kg体重,95%平均可信限为68.4-80g/kg体重,按毒性标准判断基本为无毒制剂。
4结论
杀手1号给小白鼠灌胃的半数致死量(LD50)为72g/kg体重,按药物安全毒理学评价标准为基本无毒制剂,在药物防治范围内(1-12g/kg体重)是安全的。
[试验例2]本发明药物对大白鼠的亚慢性毒性试验
1试验材料
1.1供试药物
杀手1号,湖南威亚药业科技有限公司生产,批号:20090610
1.2供试动物
健康大白鼠50只,雌雄各半,体重为120-128g,购自中南大学实验动物部。
2试验方法
给大白鼠分别灌胃杀手1号0.5g/kg·d、2g/kg·d(相当于临床给药剂量的5倍、20倍),连续四个月,观察并记录动物所出现的毒性反应,试验结束时对大白鼠的血常规检查、肝功能检查、心电图检查等生理指标检查,并解剖观察各组织脏器的病理变化。
3结果与分析
3.1两剂量组大白鼠给药后的一般活动,精神状态、毛发、粪便等均未见明显差异。
3.2给药前后外周血象,包括红细胞、白细胞、血红细胞、红细胞压积均在正常范围内波动。
3.3对三项肝(SGPT、SGOT)、肾(尿素氮、肌酐)功能指标均未见明显影响。
3.4试验结束时,动物血清中总蛋白、白蛋白、碱性磷酸酶的含量与对照组相比无明显差异。
3.5心电图检查均未发现异常。
3.6各主要脏器肉眼检查未明显肿大、充血、坏死等病理形态学变化。
3.7心、肝、脾、肺、肾、胸腺、肾上腺、子宫、睾丸的重量系数与对照组相比,无显著差异。
3.8病理组织学检查,均未见异常。
3.9以上结果说明该药比较安全,在所试剂量范围内。
4结论
亚慢性毒性试验研究结果表明:给大白鼠分别灌胃杀手1号0.5g/kg·d、2g/kg·d(相当于临床给药剂量的5倍、20倍),连续四个月,两个剂量组大白鼠给药后的一般活动,血常规检查、肝功能检查、心电图检查等生理指标检查,各组织脏器的病理变化均未见异常,按毒性标准判断基本为无毒制剂,在药物防治范围内(0.1-2g/kg体重)是安全的。
[试验例3]本发明药物防治果实蝇的临床疗效试验
试验单位:广东省某植保站
近几年我国瓜果类受果实蝇危害较为严重,通过采取相关的技术措施已得到初步控制,其中雄性诱杀是一项主要防治措施。为寻求更好的诱杀剂,2009年9月11日湖南威亚与广东某植保站共同生产的雌雄双杀引诱剂“稳黏”进行田间试验。现将试验结果报告如下。
1材料与方法
1.1试材
“杀手1号”雌雄双杀果实蝇诱杀剂,威亚药业有限公司产品;诱蝇醚(性引诱剂,诱杀雄虫),广东省昆虫研究所产品。试验在广东省汕头市澄海区莲下镇槐泽管理区4年生杨桃园进行,杨桃园面积4028m2。
1.2试验设置
“杀手1号”与诱蝇醚效果对比试验。设两个处理:A.每667m2设置“杀手1号”诱杀15个点,将“杀手1号”6~7ml喷撒在树叶和果实表面;B.每667m2设置诱蝇醚诱杀瓶4个,每瓶加诱蝇醚2ml及敌敌畏2ml。将诱杀瓶悬挂在树冠下面离地面1.5m处,每瓶相隔10米。试验期间天气晴好,气温20~28℃。
2结果与分析
试验结果看出,“杀手1号”诱杀剂诱杀果实蝇效果比性诱剂诱蝇醚好,5天累计每个点平均诱杀果实蝇107.25头(以掉在树叶下放放置的塑料收纳膜上死亡的虫数为准),是诱蝇醚诱杀13头的8.25倍,按雌雄虫性比1∶1计,“杀手1号”的诱杀雄蝇的数量是诱蝇醚的4倍。