TACI-Ig融合蛋白如ATACICEPT用于制备治疗红斑狼疮的药物的用途

摘要

在多个实施方案中，本发明提供治疗自身免疫性疾病(包括系统性红斑狼疮(SLE))的方法、组合物、剂量和给药方案，例如包括：给需要这种治疗的患者施用TACI-Ig融合分子(如atacicept)。在一个实施方案中，将TACI-Ig融合分子以足以减缓、抑制或阻碍BLyS和APRIL的诱导增殖功能的量施用，特别是在治疗过程期间采用以相对低的剂量多次施用该融合分子。

权利要求

1.治疗患者SLE的方法，包括给患者施用包含一种融合分子的组合物，所述融合分子含：(i)TACI胞外域或其结合BIyS的片段；和(ii)人免疫球蛋白-恒定域

其中所述剂量为约1至约10mg/kg，且所述的施用在起始剂量之后以多次间隔进行。

2.权利要求1的方法，其中所述TACI胞外域具有包含SEQ ID NO：1的序列。

3.权利要求1的方法，其中所述TACI胞外域与SEQ ID NO：1有至少50％的同一性。

4.权利要求1的方法，其中所述人免疫球蛋白-恒定域具有包含SEQ IDNO：2的序列。

5.权利要求1的方法，其中所述融合分子为atacicept。

6.权利要求1的方法，其中所述组合物以约1至约9mg/kg的量施用。

7.权利要求6的方法，其中所述组合物每周以所述的量施用。

8.权利要求6的方法，其中所述组合物每三周以所述的量施用。

9.权利要求7的方法，其中所述组合物在一个月的间隔期间以所述量施用4次。

10.权利要求8的方法，其中所述组合物在一个月的间隔期间以所述量施用2次。

11.权利要求6的方法，其中所述治疗持续约2至约52周。

12.权利要求1的方法，其中所述方法进一步包括给患者共施用第二药物。

13.权利要求11的方法，其中所述第二药物选自：NSAIDS，抗疟疾药，皮质激素，免疫抑制剂，IVIg，DHEA和沙利度胺。

14.权利要求11的方法，其中所述融合分子为atacicept。

15.权利要求1的方法，其中将所述组合物皮下、口服或静脉施用。

16.权利要求1的方法，其中患者为人。

17.一种治疗患者SLE的方法，包括给患者施用包含atacicept的药物组合物，其中所述剂量为约1至约10mg/kg，且所述施用在起始剂量之后以多次间隔进行。

18.权利要求17的方法，其中所述施用为皮下施用，所述剂量为1mg/kg且所述多次间隔为每周进行。

19.权利要求17的方法，其中所述施用为皮下施用，所述剂量为3mg/kg且所述多次间隔为每周进行。

20.权利要求17的方法，其中所述剂量为9mg/kg且所述多次间隔为每三周进行。

说明书

TACI-Ig融合蛋白如ATACICEPT用于制备治疗红斑狼疮的

药物的用途

发明领域

[0001] 在多个实施方案中，本发明涉及治疗自身免疫性疾病或免疫系统失调的方法和组合物，包括采用特定的剂量方案施用TACI-Ig融合蛋白如atacicept，其中所述剂量方案最大限度地阻断TNF族配体的功能。

[0002] 发明背景

[0003] BIyS配体/受体族

[0004] 三种受体TACI(跨膜激活子或钙调节Cyclophylin配体-反应剂)、BCMA(B细胞成熟抗原)和BAFF-R(激活B细胞因子的受体，属于TNF族)，已经被确定为对两种生长因子BLyS(b-淋巴细胞刺激物)和APRIL(一种诱导增殖的配体)具有特异的结合亲和性(Marsters et al.Curr Biol2000；10(13)：785-788；Thompson et al.Science 200 1；293：21 08-21 11)。TACI和BCMA既结合BLyS又结合APRIL，而BAFF-R似乎只能高亲和性地结合BLyS(Marsters et al.CurrBiol2000；10(13)：785-788；Thompson et al.Science
2001；293：21 08-21 11.)。因此，BLyS 能通过所有三个受体进行信号转导，而APRIL似乎只能通过TACI和BCMA进行信号转导。此外，BLyS和APRIL的循环异源三聚体复合物(三种蛋白的组合，含BLyS和APRIL中每种的一个或两个拷贝)已经在取自患系统免疫型风湿病疾病的患者的血清样品中得到鉴定，并显示出体外诱导B细胞增殖作用(Roschke et al.J Immunol 2002；169：4314-4321)。在所有三个受体的Ig融合蛋白之中，只有TACI-Fc5，如atacicept，能阻断异源三聚体复合物的生物活性(Roschke et al.J Immunol 2002；169：
43 14-4321)。

[0005] BLyS和APRIL是B细胞成熟、增殖和存活的有效刺激物(Gross et al.Nature2000；404：995-999.Gross et al.Immunity 2001；15(2)：289-302.Groom etal.J Clin Invest 2002；109(1)：59-68)。BLyS和APRIL可能是自身免疫性疾病持续所必需的，尤其是与B细胞有关的自身免疫性疾病。经基因工程改造表达高水平BLyS的转基因小鼠表现出免疫细胞失调，且表现出与在系统性红斑狼疮(SLE)患者中观察到的类似症状(Cheson et al.Revised guidelines for diagnosisand treatment.Blood 1996；87：4990-4997.Cheema et al.Arthritis Rheum 2001；44(6)：13 13-1 319)。类似地，在取自SLE患者及其它患类似类风湿性关节炎的各种自身免疫性疾病的患者的血清样品中测到增加水平的BLyS和APRIL(Roschke et al.J Immunol 2002；169：43 14-4321；Mariette X.，Ann Rheum Dis2003；62(2)：168-171；Hahne et al.J Exp Med 1998；188(6)：1185-1190)，这就将BLyS和/或APRIL与B细胞介导的疾病之间的关联从动物模型延伸到人。

[0006] 系统性红斑狼疮

[0007] 系统性红斑狼疮(SLE)是一种自身免疫病，临床上以蜡白(waxing)和苍白的病程为特征，涉及多个器官包括皮肤、肾和中枢神经系统(Kammer G M andTsokos G C Eds.(1999)Lupus：Molecular and Cellular Pathogenesis 1st Ed，Human Press，N.J.；Lahita R G Ed.(1999)Systemic Lupus Erythromatosus，3rdEd，Academic Press，Amsterdam)。SLE的总体发病率为约1/2000，在700个高加索女性中约有一个在生命期间患SLE。(Lahita R G(1999)Curr.Opin.Rheumatol.Sep；l l(5)：352-6)。仅在美国，50万以上的人患SLE，大多数是怀孕期的女性(Hardin J A(2003)J.Exp.Med.185：1101-1111)。

[0008] 诊断SLE没有单一标准。美国风湿病学院(American College ofRheumatology)开发了11种诊断SLE的标准，跨越SLE在皮肤、全身试验、和实验室试验方面的临床范围。这些标准包括颊皮疹、圆盘形皮疹、日光敏感性、口腔溃疡、关节炎、浆膜炎、肾和中枢神经系统炎症、血液变化、以及抗核抗体的存在。患者必须满足这些标准中的4种才归入SLE患者类别。(Tan etal.(1982)Arthritis Rheumatol.25：1271-1277)。SLE通常由下列检验确认，这些检验包括但不限于检测抗核抗体的血液检验评价肾功能的血液和尿检验；检测通常与SLE相关的低水平补体存在的补体检验；测定炎症水平的沉降速率(ESR)或C反应蛋白(CRP)；评价肺损伤的X-射线以及评价心脏损伤的EKG。

[0009] SLE的标准治疗是施用类固醇糖皮质激素，一种普通的免疫应答抑制剂。它可用于缓解症状；然而，并不能治愈SLE。通常以低于0.5mg/kg/天的水平给予低剂量p.o.泼尼松。不幸的是，该治疗不足以保持患者症状缓解，疾病骤燃发作时常发生。病情骤然发作可用高剂量的糖皮质激素以30mg甲基强的松龙/kg/天静脉脉冲注射连续3天得到控制。然而，高剂量的类固醇治疗可能对患者存在严重的副作用。

[0010] 这些标准治疗通常是非特异性的，常常伴随严重的副作用，不能显著地影响疾病的进展或转为危及生命的肾并发症(狼疮肾炎或LN)。因此，需要在技术上发展治疗SLE的新方法已经很久了。

[0011] 发明概述

[0012] 在多个实施方案中，本发明涉及治疗自身免疫性疾病的方法。示例性地，本发明的方法包括给患者施用一种组合物，该组合物包含人免疫球蛋白-恒定域和TACI胞外域或其结合BIyS和/或APRIL的片段。

[0013] 在另一实施方案中，本发明包括治疗包括SLE的自身免疫性疾病的方法，该方法应用包含TACI胞外域或其任何保留结合BIyS和/或APRIL性能的片段的融合物的分子，如atacicept。

[0014] 在另一实施方案中，本发明包括治疗包括SLE的方法，包括给需要这种治疗的患者施用有效量的融合分子，该融合分子包含人免疫球蛋白恒定链和TACI胞外域或结合BIyS和/或APRIL的TACI胞外域的片段。在一个实施方案中，TACI胞外域的片段包含一个或两个半胱氨酸重复基序。在另一实施方案中，片段为包含TACI胞外域的氨基酸30-110的片段。在另一实施方案中，片段为包含TACI胞外域的氨基酸1-154的片段(SEQ ID NO：1)。

[0015] 在另一实施方案中，本发明包括通过给患者施用一种组合物治疗SLE的方法，所述组合物包含融合多肽TACI-Fc5，其包含具有SEQ ID NO：2所示的序列的人免疫球蛋白-恒定域Fc5和具有SEQ ID NO：1所示的序列的TACI胞外域。

[0016] 在另一实施方案中，本发明包括通过给患者施用包含一种融合多肽的组合物治疗SLE的方法，所述融合多肽包含具有SEQ ID NO：2所示的序列的人免疫球蛋白-恒定域和一种多肽，其中多肽结合BIyS和/或APRIL，且与SEQ IDNO：1具有至少约50％、至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％或至少约99％的同一性。

[0017] 其它的自身免疫性疾病可通过本发明的方法给患者施用一种融合多肽来治疗，该融合多肽包含人免疫球蛋白恒定链和TACI胞外域或结合BIyS和/或APRIL的TACI胞外域的片段。这类自身免疫性疾病包括但不限于类风湿关节炎(RA)、格雷夫氐症(Graves disease)、I型和II型糖尿病、多发性硬化症、舍格伦综合征、硬皮病、肾小球肾炎、移植排斥，例如，器官和组织同种移植和异种移植排斥以及移植物抗宿主疾病。

[0018] 在一实施方案中，本发明的方法包括以约0.01mg/kg患者体重至约25mg/kg患者体重的量给SLE患者施用atacicept融合分子。该atacicept分子可在预定的间隔时间重复施用。示例性地，该分子可在预定的剂量给药间隔期间多次施用。例如，剂量给药可以是每周或每三周间隔相对低的药物的剂量。可以在用Atacicept融合多肽的初期治疗之后，分别以每两周(每隔一周)或每三周(每到第三周)额外再施用所述多肽至少2或3周。例如，可将该多肽以每两周再施用2至30周。作为选择，可将该多肽每周或每天施用。

[0019] 根据本发明的方法，可将atacicept多肽与其它药物联合皮下、口服、或静脉施用于SLE患者。这类药物包括但不限于：非处方和处方药NSAIDS(非甾体抗炎药)如双氯芬酸钠、吲哚美辛二氟尼柳和萘丁美酮；抗疟疾药(如硫酸羟氯奎和氯喹)；皮质激素(如泼尼松、氢化可的松和甲基强的松龙)；以及免疫抑制剂(如硫唑嘌呤、环磷酰胺、甲氨蝶呤、环孢霉素和麦考酚酸吗乙酯)，以及IVIg、DHEA和沙利度胺。

[0020] 附图简述

[0021] 图1表示对于皮下给药所绘制的游离atacicept浓度对时间(天)的曲线图，图例药代动力学测量。图中的每条线代表一个剂量，如图例所示。

[0022] 图2表示对于皮下给药所绘制的atacicept：BLyS复合物浓度对时间天的曲线图，图例药代动力学测量。图中的每条线代表一个剂量，如图1的图例所示。

[0023] 图3A和3B表示皮下给药对各种免疫球蛋白水平和B细胞水平的生物作用图。

[0024] 图4表示对于atacicept的皮下给药和静脉给药通过游离atacicept测量所显示的生物利用度的差别。

[0025] 图5表示两种给药方法中所观察到的相对相似的生物活性图，以IgM浓度对时间表示。参见图4中的图例。

[0026] 图6用图显示皮下给药和静脉给药方法之间的相似性，以游离atacicept对时间表示。

[0027] 图7显示的是两种给药方法中所观察到的相对相似的靶点结合曲线，以atacicept：BLyS复合物对时间表示。参见图4中的图例。

[0028] 图8用图显示多剂量如何产生更高的生物活性，以IgM浓度对时间表示。

[0029] 图9用图显示在多剂量下靶点结合更高的原理，以atacicept：Blys复合物对时间表示。参见图8中的图例。

[0030] 图10表示对于静脉给药所绘制的游离atacicept浓度对时间(天)的曲线图，图例药代动力学测量。图中的每条线代表一个剂量，如图例标号所示。

[0031] 图11表示对于静脉给药所绘制的atacicept：BLyS复合物浓度对时间(天)的曲线图，图例药代动力学测量。图中的每条线代表一个剂量，如图10的图例所示。

[0032] 图12图示的是采用静脉给药的生物标记物测量，具体而言是免疫球蛋白水平和B细胞水平的测量。

[0033] 图13A和B图示的是对于皮下给药混合的atacicept浓度(定义为游离atacicept+atacicept-BLyS复合物)对时间图(研究1)。(A)单剂量组；(B)多次剂量组。
给出平均值±SE值。多剂量在第0、7、14和21天给药。在剂量给药期间的点没有连接，以表示在剂量之间没有获得浓度峰。

[0034] 图14A和B图示的是对于静脉给药混合的atacicept浓度(定义为游离atacicept+atacicept-BLyS复合物)对时间图(研究2)。(A)单剂量组；(B)多次剂量组。
给出平均值±SE值。多剂量在第0和21天给药。

[0035] 图15A、B和C为研究1(皮下给药)中按组别的免疫球蛋白总结曲线图(基线的％，平均值±SE)。(A)IgM；(B)IgA，(C)IgG。这些图扩展了图3A和3B中给出的数据。

[0036] 图16A、B和C为研究2(静脉给药)中按组别的免疫球蛋白总结曲线图(基线的％，平均值±SE)。(A)IgM；(B)IgA，(C)IgG。这些图扩展了图12中给出的数据。

[0037] 图17A、B和C为atacicept皮下给药剂量(研究1)与所观察到的免疫球蛋白最大应答值(以从基线降低的％表示)之间的关系图。棒表示平均值±SE。(A)IgM；(B)IgA，(C)IgG。

[0038] 图18A、B和C为atacicept静脉给药剂量(研究2)与所观察到的免疫球蛋白最大应答值(以从基线降低的％表示)之间的关系图。棒表示平均值±SE。(A)IgM；(B)IgA，(C)IgG。

[0039] 图19A和B显示的是在皮下给药和静脉给药研究中相同的单剂量组的IgM曲线(平均值±SE)。(A)3mg/kg；(B)9mg/kg。

[0040] 图20A和B显示的是在皮下给药和静脉给药研究中相同的单剂量组的Atacicept：BLyS复合物曲线(平均值±SE)。(A)3mg/kg；(B)9mg/kg。

[0041] 发明详述

[0042] 在各种实施方案中，本发明涉及通过抑制BIyS和/或APRIL与其受体的相互作用来治疗患者自身免疫病的方法。患者可以是哺乳动物，例如人。在一个实施方案中，该方法应用一种抑制剂，该抑制剂包含：1)一种多肽，其包含与TACI胞外域或其结合BIyS和/或APRIL的片段至少部分相同的区域；和2)人免疫球蛋白恒定链。在一个实施方案中，本发明的方法应用一种融合分子，其包含人免疫球蛋白恒定链和任何与TACI胞外域具有至少约50％、至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％或至少约99％序列同一性的多肽。美国专利5,969,102、6,316,222和6,500,428和美国专利申请091569,245和091627,206(其中的教导作为参考文献全文引入)公开了TACI胞外域的序列以及与TACI配体(包括BIyS和APRIL)相互作用的TACI胞外域的特定片段。一个示例性的TACI胞外域的片段包含一个或两个半胱氨酸重复基序。另一个示例性的片段为包含TACI胞外域的氨基酸30-110的片段或其片段。还有另一个示例性的片段为包含TACI胞外域的氨基酸1-154(SEQ ID NO：1)的片段或其片段。

[0043] 其它的可用于本发明方法中的融合分子包括：人免疫球蛋白恒定链和完整的TACI胞外域或其直系同源物(ortholog)之间的融合多肽，或人免疫球蛋白恒定链和任何能结合BIyS和APRIL配体的TACI胞外域的片段之间的融合多肽。用于本发明方法中的任何融合分子可称为TACI-Ig融合分子。

[0044] TACI-Fc5为可用于本发明的方法的TACI-Ig融合分子之一。TTACI-Fc5是一种包含受体TACI大约氨基酸1至大约氨基酸154的胞外的、结合配体的部分(SEQ ID NO：1)和人IgG的修饰的Fc部分Fc5(SEQ ID NO：2)的重组融合多肽。可用于本发明方法的其它TACI-Ig分子包括包含具有SEQ ID NO：2的多肽和一种可结合BIyS的多肽的融合分子，其中可结合BIyS的多肽与SEQID NO：1具有至少约50％、至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％或至少约99％的同一性。

[0045] 本发明的实施方案包括使用TACI-Ig融合分子治疗SLE的方法。可用本发明的方法治疗的其它自身免疫性疾病包括类风湿关节炎(RA)、格雷夫氏症(Graves disease)、I型和II型糖尿病、多发性硬化症、舍格伦综合征、硬皮病、肾小球肾炎、移植排斥，例如，器官和组织同种异体移植和异种移植排斥，移植物抗宿主疾病或任何可通过降低与这类疾病相关的循环的成熟B细胞和免疫球蛋白分泌细胞和可溶性免疫球蛋白的其它自身免疫病。

[0046] 实施方案还包括通过给患者施用一种融合分子的治疗方法，该融合分子包含人免疫球蛋白-恒定域和包含任何可结合BIyS和/或APRIL的TACI胞外域的片段的多肽。

[0047] TACI-Ig融合分子可按任何适宜的给药途径施用于患者，包括但不限于口服、静脉或皮下给药途径。

[0048] 可用于本发明方法的TACI-Ig制剂可以冷冻、灭菌、等张溶液的形式制备和保存。这类制剂可包含其它活性成分和赋形剂，例如，氯化钠、磷酸盐缓冲液和氢氧化钠或0-磷酸(pH6.0)。TACI-Ig制剂可与其它药物联合施用于患者。这类药物包括但不限于非处方和处方药NSAIDS(非甾体抗炎药)如双氯芬酸钠、吲哚美辛二氟尼柳和萘丁美酮；抗疟疾药如硫酸羟氯奎和氯喹；皮质激素如泼尼松、氢化可的松和甲基强的松龙；以及免疫抑制剂如硫唑嘌呤、环磷酰胺、甲氨蝶呤、环孢霉素和麦考酚酸吗乙酯，以及IVIg、DHEA和沙利度胺。

[0049] 本发明的方法可与其它的治疗自身免疫性疾病的方法联合使用。这类其它的治疗方法包括但不限于外科手术、针刺、理疗和基因治疗。TACI-Ig制剂可在其它治疗方法之前施用、与其同时施用或之后施用。

[0050] TACI-Fc5已经显示出体外抑制BLyS对B细胞增殖的活化作用。用TACI-Fc5处理小鼠导致B细胞发育的部分阻滞，该作用对骨髓中的B细胞前体以及其它细胞系(包括外周血液T细胞、单核细胞和嗜中性白细胞)具有极小的影响。经基因工程学加工在血液中过表达可溶形式的TACI受体的转基因小鼠产生较少的成熟B细胞，并显示出降低水平的循环抗体。TACI-Fc5转基因小鼠在胸腺、骨髓和肠系膜淋巴结中具有正常的细胞数。在胸腺、淋巴结和脾中的T细胞群没有显著的差别。(Gross et al.Immunity 2001；15(2)：289-302)。

[0051] 另外，TACI-Ig能够抑制小鼠的免疫应答中抗原-特异性抗体的产生，不管是在对抗原的初次应答还是再次应答期间施用。在这些研究中，发现对针对离体抗原攻击的T细胞应答的没有影响。在系统性红斑狼疮的动物模型中，用TACI-Ig融合蛋白治疗对限制疾病的发作和进展是有效的。(Gross et al.Nature2000；404：995-999)。类似地，在胶原蛋白诱发的关节炎的小鼠模型中，TACI-Ig还能抑制胶原蛋白特异性抗体的形成并减少炎症的发生率和发病率。(Gross et al.Immunity 2001；15(2)：289-302)。

[0052] 包含TACI-Ig融合分子的组合物可一次施用于患者，或者可在一定的时间内多次施用于患者。例如，患者可接受皮下注射TACI-Ig分子，之后可对其病症进行监测。证明有改善或至少其病症稳定的患者可再额外地多次施用TACI-Ig融合分子一段时间。额外的时间可以是约2至约52周。例如，患者可在4周的间隔期间施用三次剂量的TACI-Ig融合分子。作为选择，患者可在12周的间隔期间施用七次剂量的TACI-Ig融合分子。TACI-Ig分子可每天、每两天、每周、每两周、每三周、每月、每两月等给患者施用。

[0053] TACI-Ig融合分子可以有效治疗患者病症的量施用于患者。在一个实施方案中，术语“治疗”与给定的疾病或失调相关时，包括但不限于，抑制疾病或失调，例如，阻止疾病或失调的发展；缓解疾病或失调，例如，导致疾病或失调的消退；或缓解由疾病或失调所引起或所产生的病症，例如，缓解、预防或治疗疾病或失调的症状。在另一实施方案中，其量可以是每1kg患者的体重约0.01mg至每1kg患者的体重约20mg。

[0054] 融合TACI-Ig分子可以任何适宜的方式输送。在一个实施方案中，该分子通过腹膜注射输送。在另一实施方案中，腹膜注射经皮下注射进行。在另一实施方案中，腹膜注射施用至前腹壁内。当需要一次以上的注射给予剂量时，注射可相距几厘米施用且给药时间相对密集，例如尽可能合理地密集。至于重复给药，在前腹壁的给药部位可轮换或交替。皮下注射至前腹壁内的示例性的区域包括右上外区域、左下外区域、右下外区域、左上外区域、中下区域以及右左股和上臂。作为选择，本发明的TACI-Ig融合分子可经静脉注射输送或以片剂、锭剂(caplet)、液体组合物或凝胶剂等形式口服。

[0055] 目前认为B细胞在SLE发病机理中通过抗体依赖性机理和与抗体无关的机理两种机理发挥重要的作用。除产生抗体外，B细胞分泌大量的细胞因子，充当抗原递呈细胞，且提供多种效应器的功能。因此，B细胞作为SLE中药物开发的合理的靶点出现(Browning JL.，Nat Rev Drug Discov 2006；5：564-76)。

[0056] 若干B细胞指向的方案已经被建议作为SLE可能的治疗。这些方案中一些被设计成通过使用B细胞指向的单克隆抗体(mAb)来消除B细胞(Leandro MJ，Edwards JC，Cambridge GI Ehrenstein MR，lsenberg DA.Arthritis Rheum2002；46：2673-3；Looney RJ，Anolik JH，Campbell Dl Felgar RE，Young F，ArendLJ，et al.，Arthritis Rheum2004；50：2580-9；Leandro MJ，Cambridge G，EdwardsJC，Ehrenstein MR，lsenberg DA.，Rheumatology 2005；44：1542-5；Dorner T，Kaufman J，Wegener WA，Teoh N，Goldenberg DM，Burmester GR.，ArthritisRes Ther 2006；8：R74)。而其它方案是干扰B细胞刺激(Baker KP，Edwards BM，Main SH，Choi GH，Wager RE，Halpern WG，et al.Arthritis Rheum2003；48：3253-65；Wallace DJ，Lisse J，Stohl W，McKay J，Boling El Merrill JT，etal.，American College of Rheumatology Annual Scientific Meeting，2006；GrossJA，Dillon SR，Mudri S，Johnston J，Littau A，Roque R，et al.，Immunity 2001；15：289-302)或寻求选择性地靶向产生自身抗体的B细胞(Alarcon-Segovia D，Tumlin JA，Furie RA，McKay JD，Cardiel，MH，Strand V，et al.，Arthritis Rheum2003；48：442-54；Luger D，Dayan M，Zinger H，Liu JP，Mozes E.J Clin Immunol2004；24：579-90；Mauermann N，Sthoeger Z，Zinger H，Mozes E.，Clin ExpImmunol2004；137：513-20)。

[0057] 抑制B细胞刺激的尝试主要集中于与所谓的B淋巴细胞刺激物(BLyS)和诱导增殖的配体(APRIL)有关的受体-配体相互作用。BLyS和APRIL为细胞因子中肿瘤坏死因子(TNF)族的成员，它们对B细胞在脱离骨髓之后的存活和发育至关重要。BLyS和APRIL与普通受体和独特的受体结合。两种分子都能与跨膜激活剂和钙调节剂和cycolphilin配体(CAML)相互作用剂(TACI)和B细胞-成熟抗原(BCMA)结合，而BLyS还与属于TNF族-受体(BAFF-R)的B细胞-激活因子结合，而APRIL与蛋白多糖相互作用。

[0058] 在动物模型和人上的测定证据证明BLyS和APRIL在自身免疫病的发展过程中起重要的作用。过度表达BLyS的转基因小鼠表现出B细胞胀大和多克隆的高丙种球蛋白血症(Gross JA，Johnston J，Mudri S，Enselman R，Dillon S，Madden K，et al.，Nature 2000：404：995-9；Mackay F，Woodcock SA，Lawton P，Ambrose C，Baetscher M，Schneider P，et al.，J Exp Med 1999；190：1697-710；Khare SD，Sarosi I，Xia XZ，McCabe S，Miner K，Solovyev I，et al.，Proc NatlAcad Sci 2000；97：3370-5)。这些小鼠中一些发展成由抗双链DNA(dsDNA)抗体、免疫球蛋白在肾内沉积、以及肾小球疾病的加速发展构成的狼疮样表型，且BLyS的水平在易患狼疮的NZBINZW Fl(BIW)和MRL-lpr/lpr小鼠中升高(Stohl W，Xu D，Kim KS，Koss MN，Jorgensen TN，Deocharan B，et al.，ArthritisRheum 2005；52：
2080-91)。在人类中的研究也表明BLyS和APRIL在系统性自身免疫性疾病中起作用。患SLE的患者BLyS的血清水平升高，BLyS的血清水平与抗dsDNA抗体的水平正相关(Zhang J，Roschke V，Baker K，Wang Z，Alarcon GS，Fessler BJ，et al.，JImmunol 2001，166：
6-10；Cheema GS，Roschke V，Hubert DM，Stohl W.，Arthritis Rheum 2001；44：1313-19；
Stohl W，Metyas S，Tan SM，Cheema GS，Oamar B，Xu D，et al.，Arthritis Rheum 2003；
48：3475-86)。与健康的个体和患类风湿关节炎的患者相比，患SLE的患者的APRIL血清水平升高(Koyama T，Tsukamoto H，Miyagi Y，Himeji D，Otsuka J，Miyagawa H，et al.Ann Rheum Dis 2005；64：1065-7)。在患炎性关节炎患者的滑液中检测到BLyS和APRIL(Tan SM，Xu D，Roschke V，Perry JW，Arkfeld DG，EhresmannGR，et al.，Arthritis Rheum 2003；
48：982-92)。这些在小鼠和人类中引人注目的观察结果导致了几种BLyS拮抗剂的开发。这类试剂之一是包含与人IgGl Fc区域连接的TACl受体胞外域的重组融合蛋白(atacicept，以前称TACI-Ig)。Aatacicept通过BLyS和APRIL两者阻断B细胞刺激。一系列的研究证明了人们的预期：atacicept将在体内具有有效的作用。首先，表达atacicept的转基因小鼠几乎没有成熟的B细胞且免疫球蛋白浓度降低，在胶原蛋白诱发的关节炎的小鼠模型中用atacicept治疗能延迟发病和减少关节炎的严重程度。抗胶原蛋白抗体的产生也被抑制(Gross JA，Dillon SR，Mudri S，Johnston J，Littau A，Roque R，et al.，supra)。第三，用atacicept治疗易患狼疮的雌性B/W小鼠能延迟蛋白尿症的发展和增加存活率(Gross JA，Johnston J，Mudri S，Enselman R，Dillon S，Madden K，et al.，上文)。最后，在易患狼疮的雌性BIW小鼠中对鼠atacicept和BAFF-R Ig(一种BLyS的特异性抑制剂)的效力的直接比较中，只有atacicept降低IgM的血清水平，降低脾内浆细胞的频数，并抑制对T细胞依赖性抗原的IgM应答，表明APRIL在这些过程中起作用(Ramanujam M，Wang X，HuangW，Liu Z，Schiffer L，Tao H，et al.，J Clin Invest.2006；116：724-34)。根据这些支持性的临床前数据，本发明的申请人在患SLE患者的临床试验中进行了atacicept的生物效应、药代动力学、药效学以及安全性试验。

[0059] 在下文的实施例1和2中描述的两个探测性的I期试验中，atacicept在SLE患者中更好地局部和全身耐受。已经观察到在该预期的适应症中的atacicept生物活性的清晰体征，非常符合其作用机理(MoA)。

[0060] 根据目前关于atacicept的该作用机理(MoA)的概念且不受理论的束缚，抑制BLyS和APRIL导致对B细胞的影响，包括非特异性和特异性抗体的分泌，最终影响到多种SLE相关的生物标志物和临床效力标记物。这对于I期研究是典型的，目前分析的注意力集中在MoA级联的早期，具体而言集中在从BLyS和APRIL抑制的早期生物标志物开始的应答(如atacicept-BLyS复合物)、和生物作用(如Ig水平)。

[0061] atacicept显示出多相的、非线性PK，其特征是在游离的药物暴露中高于剂量-比例增长而在atacicept-BLyS复合物暴露中为饱和增长(低于剂量-比例增长)。这种行为是可预见的并在RA患者中曾有报道。它支持atacicept的PK由其配体介导的假说。所有atacicept的PK，虽然是非线性的，但在单剂量和多剂量之间是一致的且可根据剂量预测。这三种atacicept的PK标记物在RA和SLE患者中表现非常相似，这表明自身免疫病的类型不是atacicept PK的决定因素。

[0062] atacicept-BLyS复合物随着多剂量给药的继续累积(对于第5和6组至每周4次剂量，研究1)，与游离的atacicept的极小累积一起，提供了在全身和外周血液两者中可溶性游离BLyS和APRIL相当大的初始负载存在的证据。在这些研究测量到的升高的基线BLyS水平(与文献中的正常受试者相比)支持了该假说。

[0063] 也很有可能，一旦剂量前现有的可溶性配体和其受体之间的平衡被atacicept的给药打破，血液循环系统、淋巴系统和外围室之间的复杂动力学的再分布过程将启动。这种再分布涉及药物及其配体、以及给定的相关分子的大小，很可能进行至少几周直至新的平衡建立。

[0064] 另一方面，长时间的复杂的累积可能意味游离配体的内源性产生(再次在血液循环和外周组织中)的显著速度。所公开的关于在利妥昔单抗给药之后血清BLyS升高速度的数据(Cambridge et al.，Arthritis Rheum 2006；54：723-732)似乎提供了额外的证据：内源性BLyS的产生在BLyS抑制中起重要的作用，应当加以考虑。达到稳态的长时间(超过每周剂量给药一个月)支持了那些假说。

[0065] atacicept的可饱和的动力学首次在先前的I期研究中在atacicept的单剂量施用于健康志愿者和RA患者中被观察到和报道，表明BLyS(和APRIL)抑制是可饱和的，即增加atacicept暴露超过饱和点将产生BLyS(以及最后APRIL)结合递减的回应。当选择治疗剂量方案时这种现象应当被考虑和利用。

[0066] 应当强调的是BLyS(和APRIL)抑制的适当的饱和需要维持一定时间，并及时通过适宜的atacicept暴露方式来取得。后者将需要在复杂的和大量非常不典型的内源性BLyS和APRIL产生和重新分布过程与产生的atacicept动力学曲线的之间的动态平衡。这样一种平衡只能通过不仅根据剂量水平而且根据剂量给药频率对给药方案进行适当设计来取得。

[0067] atacicept累积剂量和Ig抗体应答之间的定义明确的关系已经通过非分区方法建立；这样一种关系在健康志愿者的atacicept单剂量中和在RA患者的atacicept单剂量和多剂量中首先被检测到。在目前的研究中，所有监测到的三种Ig标记物显示出在第一剂量的atacicept之后迅速降低。在每周4次剂量给药之后，在剂量给药期间所有三种抗体应答的生物标志物明显趋向稳态逐渐和不断地降低，而不达到稳态。

[0068] 在所有三种生物标记物的应答中剂量给药频率似乎与剂量水平一样至少起重要作用的观察结果，首先在RA研究中取得，得到皮下给药之后的SLE数据(研究1)的证实。通常，在SLE和RA人群中这些生物标记物在相似的剂量水平下表现非常相似，说明在基于BLyA(和APRIL)抑制的指标的MoA中存在共同的根源。

[0069] 另一个使感兴趣的事实从这两个研究的PK和生物活性结果之间的比较显露出来。虽然这两个研究没有一个是设计成考虑皮下给药的利用度问题，但游离atacicept和混合的atacicept在相似的皮下和静脉给药剂量之后的浓度时间曲线下的部分面积和总面积(AUCs)的比较(第3组研究1与第1组研究2比较、以及第4组研究1与第2组研究2比较)可以推导出“平均”生物利用度的粗略计算值。从表2ab和3ab可看出对于游离药物和复合药物这些计算值都为约35-40％-一个没有超出大分子量分子近似数的范围的数(Porter and Charman，JPharm Sci 2000；89：297-310)。

[0070] 不过，对生物活性标记物的检测揭示相似的剂量产生相似的生物活性，与给药途径无关，如图19中IgM所示。首先，2.5-3倍差异的全身暴露于药物能导致相似的生物作用的观察结果与已建立的模式相矛盾；然而，在atacicept情况下，这种现象可能有充分的根据。

[0071] 目前对大蛋白质分子在皮下给药之后的吸收的了解说明蛋白质从注射部位进入外周淋巴和毛细血管内的吸收以及进入淋巴管内的摄取将随着分子大小增大而增加。对于MW与atacicept相同的药物，可以预见到差不多70-80％的皮下给药剂量可能先进入外周淋巴内。不过，血液循环和淋巴系统如此密切地互相贯通和连接，以致血液和淋巴室之间的物质交换将相当迅速且不受阻碍，对于大分子亦是如此。后者在atacicept情况下被静脉和皮下给药的PK曲线相对快速(对于73.4KDa的MW)的平衡证实。

[0072] 这些原因导致对所观察到的现象至少两种可能的、相关的、因而决不是互相排斥的解释。“动力学”解释是假设：即使皮下给药，足量的药物转移进入血液循环内以确保对BLyS的足够抑制因而启动中央室中的MoA级联。根据基础的药物动力学原理许多生物作用被延迟是公知的。虽然在atacicept情况下PD滞后并不严重(这被在第一剂量之后Ig标记物迅速降低证明)，但似乎足以致使由于几乎无关的吸收而引起PK滞后。该假说得到在皮下给药和静脉给药研究的相同单剂量组中差不多相同的atacicept：BLyS复合物曲线的支持(图20)，其中尤其要注意到在给药后头7天中的这种相似性。

[0073] “药效学”解释是血液循环和淋巴系统两者都是BLyS(和APRIL)抑制的“作用部位”且本身代表atacicept的靶点。在静脉内途径给药时，药物首先注射到血流中并从那里分布到淋巴及其它(靶点和非靶点)外周组织中。在皮下途径给药时，药物首先吸收到淋巴室中同时吸收到血流中，并从后者分布到其它(靶点和非靶点)外周组织中。在两种情况下药物渗透进入两个作用部位内是立即的和迅速的，结果是它们各自有相似的生物活性曲线。

[0074] 这种令人感兴趣的情形支持如下的假说：通过系统或“血清”生物利用度参数对暴露于皮下给药的蛋白药物进行评价，规定这种评价的模式的机械应用可能是不恰当的，或至少不完善。“系统的生物利用度越大-作用也越大”的规律在这类药物中可能存在重要的例外。

[0075] 后者具有重要实际意义，其与atacicept的治疗方案的发展相关。显然，静脉途径可能仅仅是必要时将较大剂量药物输送至患者的一种途径，假定皮下给药剂量的量可能受到注射体积和剂量给药溶液浓度的限制。

[0076] atacicept治疗的良好耐受性、显著的生物活性符合其MoA，在两个SLE I期研究中所观察到的其它正性趋势为在SLE患者中药物的进一步研究提供了理论基础。根据每一步的现代药物发展科学模式，新产生的信息将增补到已经存在的信息中，而药物知识库会更新、扩展和改善以便在典型的‘学习和证实’循环中随后用于下一步的已知设计中。根据该模式，我们决定在以很复杂的设计(顺序的、剂量逐步升高)进行的两种早期研究中观察和分析大量的暴露(游离atacicept和混合的atacicept)、特异性结合(atacicept-BLyS复合物)、生物活性(Ig和免疫系统细胞计数)、以及某些疾病相关的标记物(抗dsDNA抗体)。分析在严谨的方法中得到的数据和提取它们包含的信息将使我们能够定义剂量范围和给药方案用于进一步的试验，进一步的试验将需要描绘atacicept的安全曲线图和提高对其MoA的认识、证实临床功效适应症、以及定义其最佳的临床用途。

[0077] 实施例1-Atacicept的皮下给药

[0078] 该Ib期、双盲、安慰剂对照、剂量逐步升高的试验包括六组(每组n＝8，除第5组n＝7外)用atacicept或安慰剂(比例为3∶1)治疗的患者。第1-4组接受单次的皮下给药剂量的安慰剂、或0.3、1、3或9mg/kg的atacicept。第5和6组接受每周4次剂量的安慰剂、或1或3mg/kg的atacicept(参见表1)。之后患者维持6周(第1-4组)或9周(第5和6组)。测量的结构包括：(i)atacicept的全身和局部的耐受性；(ii)不良反应的频数(AEs)；(iii)atacicept的药代动力学和药效学，包括对淋巴细胞亚群和Ig水平的影响；和(iv)SLE疾病活动的测量。

[0079] 轻微至中等程度的SLE患者参加试验。atacicept的生物活性通过免疫球蛋白水平以及成熟的B细胞和总B细胞的剂量依赖性的减少得到证明。该作用在多次剂量组中最显著，并且在整个跟踪访问期间维持。T细胞、天然杀伤细胞或单核细胞的数目没有变化。轻微的注射部位反应在atacicept组中比安慰剂组发生的频率更高。不良反应的频数或类型没有差别，并且在用atacicept治疗的患者中没有严重的不良反应。

[0080] 通过测量游离atacicept(表2a)、atacicept/BLyS复合物(表3a)、以及混合的atacicept(定义为游离atacicept+atacicept-BLyS复合物，表4a)的血清水平来对药代动力学进行评价。采用酶联免疫吸附试验对这些组中每一组的血清水平进行定量。血清与对atacicept特异的生物素缀合的小鼠mAb(游离atacicept或总atacicept检测)(ZymoGenetics，Inc.，Seattle，WA)或对BLyS或atacicept特异的生物素缀合的山羊多克隆抗体(atacicept/BLyS复合物检测)(R & D系统，Minneapolis，MN)温育，固定于抗生蛋白链菌素-覆盖的微量培养板(Adaltis，Montreal，Quebec)上。将这些抗体与以1∶10稀释的患者样品、标准样品或对照样品一起温育1小时。洗涤后，加入对atacicept特异的与辣根过氧化酶(HRP)缀合的小鼠mAb(以测量游离的atacicept或atacicept-BLyS复合物)，或在ELISA复合物的情况下加入抗atacicept的mAb和BLyS并在室温下温育1小时。在所有的三个试验中，采用标准的化学发光方法对atacicept血清水平进行检测和定量，即在洗涤之后加入三甲苯(TMB)作为HRP底物(Sigma-Aldrich，St.Louis，MO)。20分钟之后用0.5M硫酸停止反应并记录450nm处的吸光度。采用标准曲线运用多项二级拟合算法重新计算患者样品的分析物浓度。所有的样品重复三次测量。采取对标准样品的精确度＜15％变异系数(CV)和对患者样品的精确度＜20％的检测性能标准。该检测的定量下限值(LLOQ)，游离atacicept为15.6ng/ml，atacicept-BLyS复合物为5U/mL(1U/mL相当于摩尔比为3∶1的1.82ng/mL atacicept-0.44ng/mL BLyS)，混合分析物为25ng/mL。测试RA患者样品的低、中和高分析物浓度的准确性的平均峰值回收率，在三个检测中回收率分别对应82.5-97.0％，93.9％，和102.0-125.8％。血清PK标记物采样如下：(i)对单剂量的第1-4组-在基线时和在给药当天的4、8、12小时时采样，此后在研究的第2、3、4、8、15、22、29和43天采样；(ii)对多剂量的第5和6组-在基线时进样，此后在研究第8、15、22、
29、36、43、64天采样。在所有组中，将剂量给药当天的PK样品名称上指定为谷(troughs)。

[0081] 在基线时测量血清中非结合的BLyS浓度。BLyS通过ELISA测量。将对BLyS特异的生物素化的mAb与患者样品、标准样品或对照样品(以1∶10稀释)一起在抗生蛋白链菌素预覆盖的微量培养板中温育1小时。洗涤后，将抗BLyS、HRP缀合的小鼠mAb在室温下温育1小时。洗涤后，加入TMB作为HRP底物。20分钟之后用0.5M硫酸终止反应并记录450nm处的吸光度。运用多项二级拟合算法采用标准曲线重新计算患者样品的分析物浓度。所有的样品重复三次测量。精确度＜20％ CV的检测性能标准为患者样品的接受的测量值。LLOQ为血清中1.56ng/mL BLyS。RA患者样品的低、中和高浓度的分析物平均峰值回收率对应101-113％的回收率。

[0082] 通过测量免疫球蛋白(IgG，IgM，IgA)、补体-3(C3)和抗核抗体(ANA)的血清水平、和通过对淋巴细胞亚型进行流式细胞计量分析来评价药效学。采用标准方法测量免疫球蛋白和C3。采用Athena Multianalyte ANA测试系统(ZeusScientific Inc，Raritan，NJ，USA)测量ANA。评价血液中作为生物活性标记物的IgG、IgM和IgA。在基线和在给药当天的8小时测量这些生物标志物(仅第1-4组)，此后在研究的第8、15、22、29、36、43和64天测量。

[0083] 采用4色流式细胞计量法，评价抗体染色的外周血液样品中一组外周血单核细胞的类型(B细胞和T细胞亚型、天然杀伤细胞[NK]和单核细胞)。该分析包括：总T细胞(CD45+，CD3+)，T-辅助细胞(CD45+，CD3+，CB4+，CD8-)，T-细胞毒细胞/抑制细胞(CD45+，CD3+，CD4-，CD8+)，总B细胞(CDI 9+)，成熟B细胞(CDI9+，IgD+，CD27-)，单核细胞(CD45+，CD3-，CD14+，CD56-)，和NK细胞(CD45+，CD3-，CD14-，CD56+)。合同研究组织(Esoterix，Groningen，TheNetherlands)进行血样处理、抗体染色、以及数据的采集、分析和质量控制。我方对B细胞亚型进行进一步的分析和质量控制。对于B细胞亚型，扩大分析门控以包括小淋巴细胞和大淋巴细胞，后者在大小上与单核细胞相似。

[0084] 顺便收集病史并每周进行体格检查。每周检测血液学特性和血清化学特性，并采用国家癌症研究所的普通毒性标准(National Cancer Institute′s CommonToxicity Criteria)进行评价。对于多次剂量组每周收集用于药代动力学评测的血液样品并在第1天4小时和8小时、第2、3、4和8天测定，对于单剂量组每周收集血液样品。在多次剂量组中每周吸取用于药效学评测的血液样品并在第2、3、8天测定，在单剂量组中每周吸取血液样品用于药效学评测。

[0085] 在单剂量组中第4天之后每两周进行心电图检测，在接受多次剂量研究药物的患者中每周进行心电图检测。

[0086] 虽然该研究不是为了测定治疗对疾病活性的影响，但获得下列疾病活性测量是为了提供初步的效力数据。在基线时和在第29和43天(第1-4组)以及在第22和64天(第5和6组)测定SELENASLEDAI评分。在基线和在第15、29和43天(第1-4组)、以及在第15、22、29、43、和64天(第5和6组)测量抗dsDNA抗体和C3水平。

[0087] 数 据 分析 包 括 描 绘 浓 度-时 间 曲 线 图，进 行 非 分区 分 析 (NCA；WinNonLinsoftware，第5.0.1版)。用于NCA时所有低于LLOQ的测量值都被忽略。将生物标记物(IgM、IgG或IgA)数据转化为‘从基线的变化值’形式，然后将个别生物标记物-时间曲线图也进行NCA。随后将所得到的NCA导出的暴露(PK)和应答的测量值一起进行分析以探究现存的暴露-应答关系。

[0088] 非线性的药代动力学证据，符合配体-受体相互作用的可饱和结合的药代动力学，得到证明(图1和2)。游离atacicept和混合的atacicept浓度-时间曲线图显示出相当快速吸收的多相药代动力学，Tmax大约为在第一次剂量之后24小时，初始分布相持续7-14天。在多次剂量组中观察到游离atacicept的低累积；混合的atacicept的累积略更高，且发现atacicept-BlyS复合物在整个剂量给药期间累积。

[0089] 用atacicept治疗与成熟B细胞和总B细胞的最初、一过性的增加有关，之后是持续的、剂量相关性的减少(图3B)。在3mg/kg和9mg/kg的单次剂量组中和在多次剂量组中，在第29天观察到成熟B细胞从基线减少大约35％。在单剂量组中，这种减少持续到第43天；在多次剂量组中，在第43天观察到减少大约60％且以45-60％的水平持续到第64天的最后一次评价。所观察到的总B细胞的样式与成熟B细胞类似。在3mg/kg单剂量组中，在第29天观察到总B细胞从基线减少大约30％，并一直持续到第43天。在多次剂量组中，在第43天观察到减少约40-50％，且以35-60％的水平一直持续到第64天的最后一次评价(图3B)。总T细胞、辅助T细胞、或细胞毒性T细胞、NK细胞或单核细胞的数目没有显著变化。

[0090] 在atacicept治疗的患者中观察到免疫球蛋白水平剂量-依赖性的减少(图3A和3B，也可参见表5a)。在多次剂量组中该作用最显著。在3mg/kg多次剂量组中IgM水平显示出随治疗的极大降低，第43天达到将近50％。在3mg/kg多次剂量组中第29天IgA水平减少大约33％，在3mg/kg多次剂量组中第36天IgG水平减少大约16％。在单剂量组中在第15-29天之间出现最低点，在多次剂量组中在第29-43天之间出现最低点。

[0091] 此后，数值开始向基线返回。在单剂量组中最终的观测值为低于基线大约5-30％(除0.3mg/kg组，IgM值高出基线外)，在多次剂量组中低于基线8-65％。

[0092] 这些结果表明与低频繁的较高剂量的给药相比越是较小剂量atacicept的频繁给药产生越好的生物活性(图7和图8)。

[0093] 实施例2-atacicept的静脉给药

[0094] 该Ib期、双盲、安慰剂对照、剂量逐步升高的试验包括4组(每组n＝6)用atacicept或安慰剂(比例为3∶1)治疗的患者。第1-3组接受单次剂量的安慰剂、3、9或18mg/kg的atacicept。第4组接受两次剂量的安慰剂或9mg/kg atacicept，第二剂量在起始剂量之后三周进行(参见表1)。测量的结果包括：(i)静脉注射atacicept的全身和局部的耐受性；(ii)不良反应的频数(AEs)；(iii)静脉注射atacicept的药代动力学和药效学，包括对淋巴细胞亚群和Ig水平的影响；和(iv)SLE疾病活动的测量。对受试者进行
6周(第1-3组)或9周(第4组)的评价；第3和4组的受试者在研究的84和120天返回以进行PK和生物标志物采样。血清PK标记物取样如下：(i)对于单剂量组1-3-在基线时和在给药当天的0.25、0.5、4小时采样，此后在研究第2、3、4、8、15、22、29和43天采样；
(ii)对于多次剂量组4-在基线时和在第一次给药当天的0.25、0.5、4小时采样，此后在研究的第8、22、22天(在第二次剂量之前和在第二次剂量之后0.25和0.5h)、29、36、43、64天采样。第3和4组在研究的第85和120天进行PK测量。在所有的组中剂量给药当天的PK样品名称上指定为谷(troughs)。测量血清中未结合的BLyS在基线时的浓度。评价血液中作为生物活性标记物的IgG、IgM和IgA。测量在基线时这些生物标志物，此后在研究的第2、3、4、8、15(仅第1-3组)、22、29、36、43和64天(仅第4组)测量。第3和4组在研究的第85和120天也进行Ig测量。

[0095] 同实施例1一样，轻微至中等程度的SLE患者参加试验，并通过测量游离atacicept的血清水平(表2b)、atacicept/BLyS复合物(表3b)、和混合的atacicept(定义为游离atacicept+atacicept-BLyS复合物，表4b))对药代动力学进行评价。atacicept的生物活性通过免疫球蛋白水平以及成熟B细胞和总B细胞的剂量依赖性的减少得到证明(参见图11，也可参见图5b)。该作用在多次剂量组中最显著，并且在整个跟踪访问期间维持。T细胞、天然杀伤细胞或单核细胞的数目没有变化。轻微的给药部位反应在atacicept组中比安慰剂组发生的频率更高。不良反应的频数或类型没有差别，并且在用atacicept治疗的患者中没有严重的不良反应。皮下给药(参见实施例1)和静脉给药途径之间的比较显示非常相似的药代动力学(通过配体价导的非线性PK)和相似的PK，该结果可以预测且与单剂量和多次剂量一致(图9和10)。

[0096] 虽然静脉给药似乎并没有优点(尽管该给药途径有较高的生物利用度，参见图4)，但这些结果还是支持这样的结论：与较高剂量的低频次剂量给药相比，越是小剂量的atacicept的高频次给药产生越好的生物活性(图7和图8)。这些结果还表明尽管采用皮下给药生物利用度低，但这两种方法的结合特性非常类似(参见图7)。

[0097] 表1.在以atacicept进行的I期SLE研究中剂量给药供给。

[0098]

[0099] QW，每周

[0100] 表2a.非分区分析导出的游离atacicept的药代动力学参数，研究1。

[0101]

[0102] AUC336，从时间0小时到时间336小时之间的浓度时间曲线下面积；AUCINF，从时间0小时到无限的AUC；Cmax，最大浓度；SD，标准偏差；T1/2，终点的半衰期；Tmax，最大浓度的时间。

[0103] 最后的剂量给药在504h进行。

[0104] 每组N＝6SLE患者。

[0105] N.E-在最后一次剂量之后由于采样方案的原因未评估。

[0106] 表2b.非分区分析导出的游离atacicept的药代动力学参数，研究2。

[0107]

[0108] AUC336，从时间0小时到时间336小时之间的浓度时间曲线下面积；AUCINF，从时间0小时到无限的AUC；Cmax，最大浓度；SD，标准偏差；T1/2，终点的半衰期；Tmax，最大浓度的时间。

[0109] 最后的剂量给药在504h进行。

[0110] 每组N＝6SLE患者。

[0111] N.E-在第一次剂量之后由于采样方案的原因未评估

[0112] 表3a.非分区分析导出的混合的atacicept的药代动力学参数，研究1。

[0113]

[0114] AUC336，从时间0小时到时间336小时之间的浓度时间曲线下面积；AUCINF，从时间0小时到无限的AUC；Cmax，最大浓度；SD，标准偏差；T1/2，终点的半衰期；Tmax，最大浓度的时间。

[0115] 最后的剂量给药在504h进行。

[0116] 每组N＝6SLE患者；

[0117] N.E-在最后一次剂量之后由于采样方案的原因未评估。

[0118] 表3b.非分区分析导出的混合的atacicept的药代动力学参数，研究2。

[0119]

[0120] AUC336，从时间0小时到时间336小时之间的浓度时间曲线下面积；AUCINF，从时间0小时到无限的AUC；Cmax，最大浓度；SD，标准偏差；T1/2，终点的半衰期；Tmax，最大浓度的时间。

[0121] 最后的剂量给药在504h进行。

[0122] 每组N＝6SLE患者。

[0123] N.E.-在第一次剂量之后由于采样方案的原因未评估。

[0124] 表4a.非分区分析导出的BLyS-atacicept复合物的药代动力学参数，研究1。

[0125]

[0126] AUC336，从时间0小时到时间336小时之间的浓度时间曲线下面积；AUCINF，从时间0小时到无限的AUC；Cmax，最大浓度；SD，标准偏差；T1/2，终点的半衰期；Tmax，最大浓度的时间。

[0127] 最后的剂量给药在504h进行。每组N＝6SLE患者。＊

[0128] 由于曲线末端的形状，T1/2和AUCINF不是对于该变量可靠的评估值。

[0129] 表4b.非分区分析导出的BLyS-atacicept复合物的药代动力学参数，研究2。

[0130]

[0131] AUC336，从时间0小时到时间336小时之间的浓度时间曲线下面积；AUCINF，从时间0小时到无限的AUC；Cmax，最大浓度；SD，标准偏差；T1/2，终点的半衰期；Tmax，最大浓度的时间。

[0132] 最后的剂量给药在504h进行。每组N＝6SLE患者。

[0133] N.E.-未评估＊

[0134] 由于曲线末端的形状T1/2和AUCINF不是对于该变量可靠的评估值。

[0135] 表5a.对于免疫球蛋白(Ig)M、IgA和IgG生物标志物的非分区分析结果-研究1。

[0136]＊

[0137] 第1-6组(n＝6)的活性剂-剂量患者

[0138] 安慰剂组，所有安慰剂患者合并在一起(n＝12)。

[0139] Tmax，Ig最大消除的时间。

[0140] n.d.-无数据。

[0141] 表5b.对于免疫球蛋白(Ig)M、IgA和IgG生物标志物的非分区分析结果-研究2。

[0142]

[0143] ＊第1-4组(n＝5)的活性剂-剂量患者

[0144] 安慰剂组，所有安慰剂患者合并在一起(n＝4)。

[0145] Tmax，Ig最大消除的时间。

[0146] 参考文献

[0147] 本申请中引用的参考文献，包括专利、公开的申请及其它出版物通过引用并入本文。