一种治疗实体肿瘤的药物组合物及其制备方法和用途

摘要

本发明提供了一种治疗实体肿瘤的药物组合物，它是由下述重量配比的原料制备而成的制剂：Na131I 1-4份、Na125I 5份。本发明还提供了该药物组合物的制备方法和用途。本发明药物组合物中131I的作用强但较短暂，125I具有半衰期长(60天)的特点，125I的加入减少了131I的用量，降低了环境污染和防护的难度，可以长时间发挥局部辐射作用而抑制肿瘤的复发和转移。131I和125I的混合，在特定的用量配比下，增强了射线能量，延长了药物时效可达到定向和持续肿瘤内放射治疗及作为示踪剂的目的。

权利要求

1.一种治疗实体肿瘤的药物组合物，其特征在于：它是由下述重量配比的原料药制备而成的制剂：

131 125

Na I 1-4份、Na I 5份。

2.根据权利要求1所述的治疗实体肿瘤的药物组合物，其特征在于：它由下述重量配比的原料药制备而成的制剂：

131 125

Na I 2.5份、Na I 5份。

3.根据权利要求1或2所述的治疗实体肿瘤的药物组合物，其特征在于：所述的制剂是注射剂、微球。

4.根据权利要求3所述的治疗实体肿瘤的药物组合物，其特征在于：所述的微球是明胶微球。

5.根据权利要求4所述的治疗实体肿瘤的药物组合物，其特征在于：所述的明

131 125

胶微球中每mg微球含 I的放射性活度为0.02862-0.064mCi，I的放射性活度为

0.04064-0.0927mCi。

6.根据权利要求5所述的治疗实体肿瘤的药物组合物，其特征在于：所述的明

131 125

胶微球中每50mg微球含 I的放射性活度为1.744±0.171mCi，I的放射性活度为

2.477±0.243mCi。

7.根据权利要求5所述的治疗实体肿瘤的药物组合物，其特征在于：所述的明胶微

131 125

球中每20mg微球含 I的放射性活度为1.139069±0.109841Ci， I的放射性活度为

1.61775±0.155925mCi。

8.根据权利要求4-7任意一项所述的治疗实体肿瘤的药物组合物，其特征在于：所述的明胶微球的粒径为20-70μm。

9.一种制备权利要求4-8任意一项所述的治疗实体肿瘤的药物组合物的方法，其特征在于：所述的明胶微球的制备方法为：a.明胶微球：

取液体石蜡，加入司盘-80，置55℃水浴中；取10％的明胶溶液在550转/分的机械搅拌下以30滴/分的速度缓慢滴入石蜡液中；搅拌15分钟后将上述液体迅速冷却至4℃，搅拌加入戊二醛交联，再加入丙酮脱水后抽滤，所得微球用丙酮清洗，抽滤，室温风干后筛分保存备用；

b、微球标记

将0.2mmol/L磷酸二氢钠和0.2mmol/L磷酸氢二钠配制成pH＝7.0的缓冲溶液，配制

20mg/ml氯胺-T，15mg/ml偏重亚硫酸钠；取微球至反应试管，加入所述缓冲溶液溶胀；将

131 125

Na I和Na I按1-4份∶5的重量配比加入，再加入氯胺-T，常温磁力搅拌反应，加入偏重亚硫酸钠中止反应；4400转/ 分离心4分钟，弃上清液，所得标记微球用生理盐水清洗、风干，消毒备用。

10.权利要求1-8任意一项所述的药物组合物在制备治疗肝癌、肾癌、乳腺癌、甲状腺癌、胰腺癌、胃肠实体瘤或骨科肿瘤的药物中的用途。

11.权利要求1-8任意一项所述的药物组合物在制备肿瘤示踪剂中的用途。

说明书

一种治疗实体肿瘤的药物组合物及其制备方法和用途

技术领域

[0001] 本发明涉及一种治疗实体肿瘤的药物组合物。属药物领域。

背景技术

[0002] 据世界卫生组织(WHO)资料，全世界每年约有1000万新发肿瘤患者、600万人死于恶性肿瘤，而且恶性肿瘤的发病率还在以每年1.8-4％的幅度递增。恶性肿瘤已成为继心脑血管疾病，传染病之后居第三位的死亡原因。即使经过多年的努力，许多恶性肿瘤的预后仍未有显著的改善，在现在和今后很长一段时间内恶性肿瘤仍然是世界性的医学难题。在我国，由于过去乙型肝炎的流行，使乙型肝炎有直接病因病理联系的原发性肝癌的发病率极高，随着中国人民的生活水平提高，生活方式逐渐西化，胰腺癌和胆道癌及其他系统的恶性肿瘤的发病率也呈上升趋势，在现有的治疗手段下，大多数的肝胆胰系统的恶性肿瘤患者在发病一年内死亡，如中国的肝癌年发病30.6万人，年死亡30.0万人，美国的胰腺癌年发病3.3万人，年死亡3.2万人。如何治疗恶性肿瘤一直是医学研究的重点和难点。

[0003] 目前恶性肿瘤的治疗方法主要包括手术切除，放射疗法、化疗和各种综合治疗方法，其中手术切除为首选的治疗方法，但大多数恶性肿瘤患者被诊断时已经处于肿瘤的中晚期，手术切除肿瘤的机会小，例如原发性肝癌手术切除率不到10％，胰腺癌不到15％，而手术切除不仅费用高，痛苦大，术后的预后也不理想。目前肝癌的术后5年生存率在20-45％，而胰腺癌的术后5年生存率不到15％，多数患者只能通过非手术方法治疗，而肝胆胰系统的恶性肿瘤因位置深，常规的外放射因肋骨的屏蔽而效果较差，又因肝脏和消化道对放射线非常敏感而容易遭受放射线损伤，使肝胆胰系统成为外放射治疗的相对禁区，肝胆胰恶性肿瘤对大多数化疗药物的敏感性低，例如美国国家食品药品管理局批准用于治疗胰腺癌的标准药物吉西他滨，治疗原发性肝癌的新药格里非尼，其临床有效率均不到
20％。因此迫切需要寻求疗效显著的非手术治疗新方法。近年来国内部分大医院开始引
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进美国生产的 I金属包壳核素粒子，通过瘤内植入的方式治疗多种实体恶性肿瘤，特别是胰腺癌，肝癌，骨肿瘤等已经取得较好的效果，但该粒子十分昂贵，国内售价400多元人民币一颗，一个患者完成治疗通常总费用达到2-3万，该公司目前在中国的年销售额已达十
90 89
亿元以上。由于大多数核素具有强烈毒性，如 Y、Sr具有强烈的亲骨性，一旦释出将聚集
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于骨组织内，破坏骨髓组织，有导致再生障碍性贫血的可能性；P可被机体大多数组织吸收，而引起机体广泛的损伤，所以目前世界上近距离放射治疗的载体均采用金属、玻璃、陶瓷等，将核素烧结埋藏于其内，以减少核素的释放，在活体内不能降解，技术操作复杂，分布
90
性差，价格昂贵。目前国外用于治疗肿瘤的核素药物有：Y玻璃微球 于
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1999年通过美国食品药品监督管理局(FDA)认证，用于治疗无法手术切除的肝癌患者。 Y树脂微球 于2002年通过美国食品药品监督管(FDA)认证，与氟尿嘧啶联
合治疗结肠直肠癌的肝转移癌。125I核素粒子已经通过美国食品药品监督管(FDA)认证批转用于前列腺癌的治疗。上述核素粒子或微球均以金属或玻璃为载体，玻璃比重大，灌注相对困难，分布不佳，放射性瘤∶肝比(T∶N)相对较低。金属或玻璃无法降解，长期滞留于
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活体内，既影响再次灌注治疗，其远期的组织损伤效应也有待观察；比如 P玻璃微球能导
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致肝汇管区结缔组织增厚，临床上患者出现难以忍受的腹胀症状。 Y玻璃微球半衰期较短
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(64.1小时)，放射性比活度不高。 Y玻璃微球释放纯β射线无法体外监测，故必须同时
99m 90
使用锝-99( Tc)标记的蛋白微球来确定肿瘤的血供和放射性瘤肝比，Y玻璃微球必须在专用的直线加速器中活化后才能获得放射性活性，其较短的半衰期和昂贵的活化设备限制
90
了其只能在较大的医学中心使用。 Y玻璃微球为国外专利产品，价格昂贵，国内难以推广。

[0004] 目前用于肿瘤植入治疗的125I核素粒子，只能呈点状分布，分布不均和覆盖性差使其难以达到根治性效果。理论上粒径小的明胶微球组织间弥散效果好，注射后可呈条带状131
或柱状分布，从而增加内放射治疗的覆盖面和彻底性。有文献报道采用 I用于肿瘤植入
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治疗，但是 I具有能量高，对肿瘤细胞的杀伤作用强，环境污染大，必须在特殊的放射性防
131 125
护病房使用，且 I的半衰期短(8天)，而 I由于成像性不好，通常不能示踪。

发明内容

[0005] 本发明的技术方案是提供了一种治疗实体肿瘤的药物组合物。本发明提供了该药物组合物的制备方法和用途。

[0006] 本发明提供了一种治疗实体肿瘤的药物组合物，它是由下述重量配比的原料制备而成的制剂：

[0007] Na131I 1-4份、Na125I 5份。

[0008] 进一步优选地，它由下述重量配比的原料制备而成的制剂：

[0009] Na131I 2.5份、Na125I 5份。

[0010] 其中，所述的制剂是注射剂、微球。

[0011] 其中，所述的微球是明胶微球。

[0012] 其中，所述的明胶微球中每mg微球含131I的放射性活度为0.02862-0.064mCi，125I的放射性活度为0.04064-0.0927mCi。

[0013] 进一步优选地，所述的明胶微球中每50mg微球含131I的放射性活度为125
1.744±0.171mCi，I的放射性活度为2.477±0.243mCi。

[0014] 进一步优选地，所述的明胶微球中每20mg微球含131I的放射性活度为125
1.139069±0.109841Ci，I的放射性活度为1.61775±0.155925mCi。

[0015] 其中，所述的明胶微球的粒径为20-70μm。

[0016] 本发明还提供了一种制备所述的治疗实体肿瘤的药物组合物的方法，所述的明胶微球的制备方法为：

[0017] a.明胶微球：

[0018] 取液体石蜡，加入司盘-80，放入圆底烧瓶，置55℃水浴中；取10％的明胶溶液在550转/分的机械搅拌下以30滴/分的速度缓慢滴入石蜡液中；搅拌15分钟后将上述液体迅速冷却至4℃，搅拌加入戊二醛交联，再加入丙酮脱水后抽滤，所得微球用丙酮清洗两次，抽滤，室温风干后筛分保存备用；

[0019] b、微球标记

[0020] 将0.2mmol/L磷酸二氢钠和0.2mmol/L磷酸氢二钠配制成pH＝7.0的缓冲溶液(PBS)，配制20mg/ml氯安-T，15mg/ml偏重亚硫酸钠；取微球至反应试管，加入PBS溶胀；将131 125
Na I和Na I按1-4份∶5的重量配比加入，再加入氯安-T，常温磁力搅拌反应，加入偏重亚硫酸钠中止反应；4400转/分离心4分钟，弃上清液，所得标记微球用生理盐水清洗、风干，消毒备用。

[0021] 本发明还提供了该药物组合物在制备治疗肝癌、肾癌、乳腺癌、甲状腺癌、胰腺癌、胃肠实体瘤或骨科肿瘤的药物中的用途。

[0022] 本发明还提供了所述的药物组合物在制备肿瘤示踪剂中的用途。

[0023] 本发明采用的131I和125I是临床多年治疗肿瘤的核素；和其他核素比较，131I和125I的最大优点是毒性低：碘在体内主要被甲状腺组织吸收，在其他组织极少停留，血清中未被131
甲状腺摄取的碘主要经泌尿系统排出体外。临床治疗甲癌、甲亢时口服Na I(碘131化钠)上百毫居也没有严重的组织损伤。另一方面，术前给予碘化钠溶液(卢戈氏液)口服封闭甲状腺组织能够有效地阻止其再摄取放射性碘，从而防止甲状腺损伤。此外，甲状腺有较强的自身修复能力，一定范围的放射性损害能被其自身迅速修复，因此，放射性碘核素较其他核素更加安全。

[0024] 本发明将采用可降解的蛋白质明胶微球做为核素及药物载体，明胶是胶原蛋白部分水解的产物，有良好生物相容性、可生物降解、可稳定结合多种放射性核素和药物(如化疗药物、生物活性大分子等)；以明胶微球做为载体，与放射性碘核素相结合，采用组设给药途径，可对多种性质的恶性肿瘤进行近距离放射治疗，20-70μm的微球可通过瘤体注射的方法较均匀地分布肿瘤组织间，可以对各种实体瘤，包括肝癌，肾癌，乳腺癌，甲状腺癌，胰腺癌，胃肠实体瘤，骨科肿瘤进行瘤体植入近距离放疗等。核素衰变完后，明胶在体内逐渐降解，衰变完的核素经泌尿系统排出体外。明胶微球可高浓度结合放射性碘。

[0025] 131I的作用强但较短暂，125I的加入可减少了131I的用量，从而降低了环境污染和防125
护的难度，且 I具有半衰期长(60天)的特点，可以长时间的局部辐射作用而抑制肿瘤的
131 125
复发和转移。 I和 I的混合，在特定的用量配比下，两种同位素释放的射线特点相互补
131
充，使其更好的符合肿瘤治疗原理。 I的高能量γ射线能够在SPECT上清楚地显像，从而
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帮助医生准确了解植入的微球在瘤内和体内的分布；将 I和 I混合标记核素蛋白微球
131
通过介入行血管灌注栓塞或注射植入肝癌，胰腺癌肿瘤组织内，和微球比较稳定结合的 I
125
和 I在局部释放γ射线，可达到定向和持续肿瘤内放射治疗及作为示踪剂的目的。

附图说明

[0026] 图1：术后兔100ul血清γ计数

[0027] 图2：术后兔100ul尿液γ计数

[0028] 图3：术后131I能峰SPECT显像，306KeV，窗宽15％，显影时间2分钟。A：术后1天，B：术后8天，C：术后16天，D：术后24天，E：术后32天，F：术后48天是无突出背景的核素显像

[0029] 图4：术后双标记微球肝脏植入T-A曲线(131I的能峰)

[0030] 图5：术后48天采用125I的能峰行SPECT扫描，35KeV，窗宽15％，显影时间2分钟。发现兔肝部位显像。

[0031] 图6：病理切片，均为HE染色，200倍。A：术后1天，B：术后8天，C：术后16天，见到微球有降解，图上箭头所示；D：术后32天，注射部位被纤维包裹；E：术后48天，微球形态尚完整。

[0032] 图7兔CT扫描三维重建，图中“十”字所示，种植肿瘤呈低密度，边界清。

[0033] 图8肝动脉介入治疗后SPECT/CT融合三维图像，显示放射性核素浓集于肿瘤部位(图中十字所示)，A为16天，B为24天。

[0034] 图9本发明微球直接肝脏注射微球术后1天兔肝注射部位坏死情况

[0035] 图10本发明微球介入治疗结果：其中，A肝动脉造影，导管准确进入肝动脉。B：栓塞后造影，见细小动脉分行不显影(图中箭头所指)，说明其已被微球栓塞。

具体实施方式

[0036] 实施例1 请提供本发明微球的详细制备方法

[0037] 一、原料药：

[0038] Na131I，Na125I(碘化钠)

[0039] 医用B型明胶：

[0040] SigmaA型明胶标签

[0041] 50g LOT2011/04 BIOSHARP

[0042] 微球采用改良乳化冷凝法制备。将Na131I和Na125I按1∶5～4∶5的比例加入，氯胺-T法标记后装瓶。

[0043] 具体制备方法为：

[0044] 1.微球制作

[0045] 采用改良乳化冷凝法制备。取80ml液体石蜡，加入0.8ml司盘-80，放入圆底烧瓶，置55℃水浴中。取10％的明胶溶液10ml在550转/分的机械搅拌下以30滴/分的速度缓慢滴入石蜡液中。搅拌15分钟后将上述液体迅速冷却至4℃，继续搅拌8分钟加入3ml戊二醛交联，继续搅拌22分钟，再加入30ml丙酮脱水15分钟后抽滤，所得微球用丙酮清洗两次，抽滤，室温风干后筛分保存备用。

[0046] 2.微球标记

[0047] 采用氯胺-T法标记131I、125I。将0.2mmol/L磷酸二氢钠和0.2mmol/L磷酸氢二钠配制成PH＝7.0的缓冲溶液(PBS)，配制20mg/ml氯安-T，15mg/ml偏重亚硫酸钠。称取131 125
50mg微球至反应试管，加入190ul PBS溶胀10分钟。将Na I和Na I按1∶2的比例加入，再加入200ul氯胺-T，常温磁力搅拌反应30分钟，加入200ul偏重亚硫酸钠中止反应。
4400转/分离心4分钟，弃上清液，所得标记微球用生理盐水清洗7次后风干，Co60照射消毒备用。

[0048] 二、主要成分及毒副作用：

[0049] 明胶微球：由动物胶原蛋白组成，系长期应用于临床的生物材料。主要由人体内的蛋白酶水解吸收或被吞噬细胞吞噬处理。无明显毒副作用。

[0050] 131I：具有β和γ两种放射线。以β射线为主(占99％以上)，γ射线低于1％。

[0051] 125I：具有低能量γ和X射线，半衰期长，基本无环境污染。

[0052]

[0053] 三、药品的剂型和规格：

[0054] 剂型：安瓶装干燥粉末制剂，使用前用生理盐水浸泡后供注射

[0055] 干燥微球净重量；1000mg(毫克)131 125

[0056] 放射性活度：30+/-2mCi(毫居)( I和 I的放射性活度比例在20-30％：80-70％之间)

[0057] 四、主要适应症，用法，用量：

[0058] A)临床上主要应用于各期的肝癌，胰腺癌，乳腺癌，甲状腺癌，肾癌，妇科及泌尿系统恶性肿瘤等。

[0059] B)采用介入法经动脉栓塞(如肝癌和肾癌)，经CT或B超引导下注射法瘤内植入或开腹手术中直视下注射法瘤内植入(如胰腺癌，乳癌等)。使用前先将安瓶按常规消毒，用生理盐水10ml注入安培，浸泡10分钟使微球充分吸水膨胀。然后采用普通注射器动脉定点灌注或瘤内注射。3

[0060] C)植入的剂量以放射性活度为参照。以1毫居里/5cm(瘤组织)为有效剂量。根据肿瘤大小决定放射性活度总剂量。较大肿瘤可采用分次治疗的方式进行。

[0061] 实施例2 本发明双标记微球能峰测定

[0062] 表1：50mg双标记实验的标记数据。数据使用美国CAPINTEC.INC公司CRC-15R医用活度计测量。“初加”指放射性碘的初始加入量，单位mCi，“终测”指标记完成，洗涤完成后分别使用131I的能峰和125I的能峰测量的数据，单位mCi。

[0063]样品号 1 2 3 4 5 6
初加131I 2.14 2.139 2.234 1.786 2.214 2.226
初加125I 4.126 4.039 4.129 4.114 4.304 4.305
终测131I 1.431 1.492 1.732 1.893 1.634 1.578
终测125I 2.032 2.119 2.459 2.689 2.32 2.241
样品号 7 8 9 10 11 12
初加131I 2.229 2.23 2.226 2.227 2.219 2.222
初加125I 4.289 4.283 4.272 4.21 4.23 4.161
终测131I 1.894 1.771 1.734 1.839 1.594 1.974
终测125I 2.69 2.516 2.463 2.612 2.264 2.803
样品号 13 14 15 16 17 18
初加131I 2.226 2.228 2.222 2.222 2.233 2.158
初加125I 4.416 4.342 4.502 4.513 4.451 4.445
终测131I 2.006 1.906 1.869 1.819 1.66 1.614
终测125I 2.849 2.707 2.655 2.584 2.357 2.292
样品号 19 20 21
初加131I 2.174 2.182 2.192
初加125I 4.447 4.467 4.425
终测131I 1.497 1.971 1.718
终测125I 2.126 2.799 2.441

[0064] 由表可知，本发明50mg明胶微球中含131I的放射性活度为1.431-2.006mCi，125I的放射性活度为2.032-2.849mCi。

[0065] 通过药效学试验发明，所述的明胶微球中在131I的放射性活度为125
1.744±0.171mCi，I的放射性活度为2.477±0.243mCi的范围，同时具有最佳的药效及示踪作用。

[0066] 通过不同的初加量125I和131I标记20mg明胶微球，实验结果如下：

[0067] 20mg明胶微球标记实验：

[0068]样品号 1 2 3 4 5 6
初加131I 2.568 2.584 2.576 2.569 2.492 2.511
初加125I 5.52 5.418 5.517 5.669 5.124 5.192
终测131I 1.253 1.156 1.306 1.214 1.133 1.28
终测125I 1.779 1.642 1.854 1.724 1.61 1.818
样品号 7 8 9 10 11 12
初加131I 2.534 2.56 2.56 2.59 2.312 2.584
初加125I 5.187 5.752 5.108 5.44 5.462 5.419
终测131I 1.13 1.274 0.9895 1.128 0.9915 1.099
终测125I 1.605 1.81 1.405 1.602 1.408 1.561
样品号 13 14 15 16 均数 标准差
初加131I 2.613 2.494 2.503 2.527 2.536063 0.070234
初加125I 5.438 5.716 5.666 5.224 5.42825 0.211474
终测131I 1.11 1.102 0.9201 1.139 1.139069 0.109841
终测125I 1.576 1.566 1.307 1.617 1.61775 0.155925

[0069] 由表可知，每20mg微球含131I的放射线强度为0.9201-1.28mCi，125I的放131
射线强度为1.307-1.854mCi。进一步优选地，每20mg微球含 I的放射线强度为
125
1.139069±0.109841Ci，I的放射线强度为1.61775±0.155925mCi。

[0070] 以下通过具体药效实验证明本发明的有益效果。

[0071] 试验例1 本发明药物药效实验

[0072] 1.碘同位素双标记蛋白微球的动物体内分布

[0073] 每只实验动物兔均接受开腹手术。将实施例1制备的双标记明胶微球(131I为125
1.744±0.171mCi，I为2.477±0.243mCi)植入兔肝脏。

[0074] 1.1兔血清放射性监测

[0075] 术后每日随机选取4只兔耳缘静脉采血1ml，4400转/分离心后精确取上清液100μl，测定γ计数。结果如图1：

[0076] 根据血清时间-γ计数各点的数值，发现其符合药代动力学二室模型，采用1stOpt软件进行曲线拟合，求得其药代动力学放射线血中浓度公式为：

[0077] C＝6281.0321e-0.5382t+548.1884e-0.0411t

[0078] t(1/2)α＝1.2876(天)

[0079] t(1/2)β＝16.86(天)

[0080] K21＝0.0810

[0081] K10＝0.2731

[0082] K12＝0.2252

[0083] 1.2兔尿液放射性监测结果如图2：

[0084] 1.3SPECT全身显像

[0085] 术后4小时及第1、4、8、16、24、32、48天各组由华西医院核医学科采用飞利浦Skylight SPECT全身显像，能峰364KeV，窗宽15％，放大倍数1倍，距阵64×64，前位扫描，131
采集时间2分钟(图3：I SPECT显像)。各次成像使用ROI程序，勾画肝脏，测定其放射性计数(表3)，并以时间为横坐标，纵坐标值按以下计算：(各时间点肝脏计数-本底计数)/
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(第一天肝脏计数-本底计数)，绘制 I的时间-放射性(time-activity curve，T-A)曲线。以相同ROI测量甲状腺各时间点计数并绘制T-A曲线(图4)。术后85，96，105天，即
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I经过10个半衰期(80天)后，此时 I可以忽略不计，采用飞利浦Skylight SPECT显
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像，能峰35KeV，其余参数不变。此时可以发现 I依然在肝注射部位浓集(图5：I SPECT显像)。

[0086] SPECT显像提示，术后24天内均能清楚看到微球注入兔肝部位有放射性浓聚。术后第8天和第16天见到甲状腺区域微弱显影。

[0087] 时间-放射性曲线表明，肝脏部位的放射性随着时间的推移逐渐下降，至24天时接近本底。肝脏区域放射性计数在1-8天下降较快，16-32天下降相对缓慢。而甲状腺区域的放射性从一开始就很低。根据ROI各时间点数据进行曲线拟合，求的回归方程如下：

[0088] Y＝31875.51*0.832^x求出核素微球在肝脏组织中的131I的实际半衰期为4.449天。

[0089] 1.4病理学检查

[0090] 将处死动物的肝脏标本置于10％福尔马林溶液固定24～48小时，石蜡包埋、切片，HE染色，作病理学检查，见图6。

[0091] 2.碘同位素双标记蛋白微球在VX2兔肝移植癌模型中的应用

[0092] 将VX2兔肝移植癌模型的动物经股动脉插管至肝动脉，注入碘同位素双标记蛋白微球，具体方法为：

[0093] 家兔备皮，麻醉后固定于介入手术台上，解剖左侧或右侧腹股沟区，分离出股动脉。插入F-18导管，直至兔肝动脉，注入适量核素微球和25％葡萄糖的混悬液，即TAE(transcatheter arterial embolization，经导管动脉栓塞)术(图7A)。术后立即行造影发现肝动脉细小分支栓塞(图7B)。完成后行SPECT-CT检查，见图8、图9。

[0094] 实验表明碘同位素双标记蛋白微球植入动物体内后，能够定植于植入部位；在经肝动脉介入治疗VX2兔肝移植癌的模型中，能够很好的聚集于肿瘤部位。两项试验中同位素碘均不在其他组织中停留。由此认为碘同位素双标记蛋白微球用于实体肿瘤的治疗是安全有效的。

[0095] 试验例2 直接肝脏注射本发明微球的药效实验

[0096] 直接肝脏注射微球术后1天兔肝注射部位见坏死，如图10所示。因此，将本发明微球治疗肿瘤，能很快地引起肿瘤组织坏死。

[0097] 目前报道的131I和丝裂霉素C的明胶微球瘤内注射对小鼠实验性肝癌的治疗效131 3
果，其中 I的用量根据公知的换算公式，其用量为81.25μCi/cm，瘤内注药7天之后，
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I-MMC-GM对肿瘤生长的抑制率为58.7％，由于该剂量是针对小鼠，若是将该剂量用于兔，若按各动物及人之间药物等效剂量的换算系数，小鼠和兔的系数为2.7，则兔的用量应为
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81.25*2.7＝219.375μCi：本发明药物组合物中 I用于家兔的量约为82μCi/cm，与 I
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配伍使用， I的用量明显降低，发挥了协同增效作用，与现有技术报道的 I-MMC-GM明胶微球相比，起效明显加快。

[0098] 上述试验证明，本发明药物微球可同时达到定向、持续肿瘤内放射治疗和作为示踪剂的目的。