一种药物组合物及其制备方法和制药用途

摘要

本发明公开了一种预防和治疗心脑血管疾病的药物组合物及其制备方法。本发明药物为中药和西药的复方，中药由人参、水蛭、全蝎、土鳖虫、蜈蚣、蝉蜕、赤芍、檀香、降香、乳香、酸枣仁、冰片组成，西药含有HMG-CoA还原酶选择性抑制剂及阿司匹林；药物经现代制药工艺精制而成，通过试验证明该药物组合物在抗凝、抗脂，保护内皮功能作用增强的同时，具备对心脑血管病急性事件的最佳防治作用。

权利要求

1.一种预防和治疗心脑血管疾病的药物组合物，其特征在于，该药物组合物由如下重量份的原料药制成：人参39.6 水蛭72.6 土鳖虫46.2 制乳香13.2 赤芍33 降香13.2檀香13.2 全蝎19.8 蝉蜕46.2 蜈蚣6.6 冰片10 炒酸枣仁33阿托伐他汀钙2 阿司匹林7.5。

2.如权利要求1所述的药物组合物的制剂，其特征在于，该药物组合物的药物制剂为胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂或丸剂。

3.如权利要求2所述的胶囊剂的制备方法，其特征在于所述胶囊剂由如下步骤制成：a)按比例称取原料药物；

b)药材粉碎工艺：

将全蝎、水蛭、蜈蚣、土鳖虫和蝉蜕五种虫药经净选、水洗处理后和净选炮制后的乳香按处方配料，由粉碎机进行粉碎，药粉细度达到80目以上；粗粉后的药粉经各种超微粉碎技术进行超微粉碎，使药粉平均粒径为30-40μm，得超微粉碎粉A；

c)提取浓缩工艺：

降香和檀香先加水提取挥发油后再用水提取，得挥发油B和水溶液C，赤芍、炒酸枣仁，加水煎煮二次，每次3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度在60℃测定为1.20-1.25的清膏，得水提液D，人参用70％乙醇加热回流提取二次，每次3小时，合并提取液，回收乙醇至无醇味，浓缩至相对密度在60℃测定为0.9-1.1的浸膏，得醇提浸膏E；人参药渣、降香和檀香药渣与提油水溶液C合并提取，得水提液F，水提液D与水提液F混和后浓缩成水提浸膏G；

d)制剂工艺：

将超微粉碎粉A以及西药成分阿托伐他汀钙和阿司匹林加入沸腾制粒干燥机中，喷入醇提浸膏D与水提浸膏G制粒，整粒，加入冰片细粉，喷入挥发油B混匀，由胶囊充填机充填，制成胶囊。

4.如权利要求1所述药物组合物的应用，其特征在于，该药物组合物在制备预防和治疗心肌缺血性疾病药物中的应用。

5.如权利要求1所述药物组合物的应用，其特征在于，该药物组合物在制备预防和治疗脑缺血性疾病药物中的应用。

说明书

一种药物组合物及其制备方法和制药用途

技术领域

[0001] 本发明涉及一种药物组合物及其制备方法和制药用途，具体地，本发明涉及一种治疗心脑血管疾病的药物组合物及其制备方法，属药物技术领域。

背景技术

[0002] 血管内皮是循环血液与血管平滑肌间的机械屏障，同时具有接受、传递信息和分泌血管活性物质等功能，维持血管内皮的完整和功能的正常对于确保血管壁的光滑和血流的通畅具有重要意义。血管内皮损伤，引起血管内皮功能障碍。血管内皮功能障碍与高血压、高脂血症、动脉粥样硬化、心力衰竭、糖尿病等心脑血管疾病和代谢疾病的发生发展密切相关，应高度引起关注的是，内皮受损所致的内皮功能障碍是代谢综合征的重要的组成成分之一[薛建峰，赵成军，贾如意.血管内皮损伤标志物[J]医学综述，2006，(08).]。内皮功能的障碍系血管内皮细胞在病理因素(如高血脂、氧自由基、吸烟、高血流切应力)等作用下，失去正常功能的病理过程，是各种心脑血管疾病和代谢疾病的发生发展的潜在危险因素及关键环节。抗血管内皮损伤，保护内皮功能已成为治疗心血管疾病和代谢疾病的重要目标之一。

[0003] HMG-CoA(羟甲基戊二酸单酰辅酶A)还原酶选择性抑制剂，通过抑制HMG-CoA还原酶和胆固醇在肝脏的生物合成而降低血浆胆固醇和脂蛋白水平，并能通过增加肝细胞表面低密度脂蛋白(LDL)受体数目而增加LDL的摄取和分解代谢。本品也能减少LDL的生成和其颗粒数。该类药物临床常用的有阿托伐他汀钙、辛伐他汀、洛伐他汀、普伐他汀钠等。

[0004] 阿司匹林在体内具有抗血栓的作用，它能抑制血小板的释放反应，抑制血小板的聚集，这与TXA2(血栓素A2)生成的减少有关。

[0005] 本发明是在第01131203.3号和第200410048292.2号专利的基础上进行的改进发明，在此全文引用该两专利文件记载的内容。

发明内容

[0006] 本发明目的是提供一种治疗心脑血管疾病的药物组合物，所述药物组合物由如下重量份的原料药制成：

[0007] 人参30-45水蛭57-85土鳖虫38-57乳香(制)12-18赤芍26-39降香13-20檀香12-18全蝎38-57蝉蜕38-57蜈蚣8-11冰片8-11酸枣仁(炒)25-38HMG-CoA还原酶选择性抑制剂2-20阿司匹林5-20。

[0008] 优选为：

[0009] 人参37.67水蛭71.06土鳖虫47.09乳香(制)15.41赤芍32.53降香16.27檀香15.41全蝎47.09蝉蜕47.09蜈蚣9.42冰片9.42酸枣仁(炒)31.68阿托伐他汀钙2阿司匹林7.5。

[0010] 或者：

[0011] 人参30水蛭85土鳖虫57乳香(制)12赤芍39降香13檀香18全蝎57蝉蜕38蜈蚣11冰片11酸枣仁(炒)25辛伐他汀5阿司匹林20。

[0012] 或者：

[0013] 人参45水蛭57土鳖虫38乳香(制)18赤芍26降香20檀香12全蝎38蝉蜕57蜈蚣8冰片8酸枣仁(炒)38洛伐他汀20阿司匹林5。

[0014] 或者：

[0015] 人参28水蛭68土鳖虫45乳香(制)16赤芍30降香16檀香16全蝎45蝉蜕45蜈蚣10冰片10酸枣仁(炒)29辛伐他汀15阿司匹林10。

[0016] 本发明药物组合物中HMG-CoA还原酶选择性抑制剂，除可优选为上述阿托伐他汀钙、辛伐他汀、洛伐他汀外，还可优选为普伐他汀钠或其它HMG-CoA还原酶选择性抑制剂，采用常规服用剂量即可。

[0017] 本发明药物组合物，可以分开服用，即不必制成同一制剂，同时服用上述药物即可达到预防和治疗目的。

[0018] 本发明的另一个目的是提供该药物组合物的药物制剂，该药物组合物剂型为胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂或丸剂。本发明药物组合物不限于胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂或丸剂，还可能制成其他剂型。

[0019] 本发明中药组合物还可以按常规的提取和制剂工艺，例如，范碧亭《中药药剂学》(上海科学出版社1997年12月第1版)记载的制备工艺，制成药剂学可接受的任意常规剂型，例如胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂、口服液或丸剂等。

[0020] 本发明的应用中，所述中药组合物为胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂、口服液或丸剂，为使上述剂型能够实现，需在制备这些剂型时加入药学可接受的辅料，例如：填充剂、崩解剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、甜味剂、矫味剂、防腐剂、基质等。填充剂包括：淀粉、预胶化淀粉、乳糖、甘露醇、甲壳素、微晶纤维素、蔗糖等；崩解剂包括：淀粉、预胶化淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠等；润滑剂包括：硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、滑石粉、二氧化硅等；助悬剂包括：聚乙烯吡咯烷酮、微晶纤维素、蔗糖、琼脂、羟丙基甲基纤维素等；粘合剂包括，淀粉浆、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素等；甜味剂包括：糖精钠、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矫味剂包括：甜味剂及各种香精；防腐剂包括：尼泊金类、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸及其盐类、苯扎溴铵、醋酸氯乙定、桉叶油等；基质包括：PEG6000，PEG4000，虫蜡等。

[0021] 本发明药物组合物制剂通过以下制备方法制成：

[0022] a)按比例称取原料药物；

[0023] b)药材粉碎工艺：

[0024] 将全蝎、水蛭、蜈蚣、土鳖虫和蝉蜕五种虫药经净选、水洗处理后和净选炮制后的乳香按处方配料，由粉碎机进行粉碎，药粉细度达到80目以上；粗粉后的药粉经各种超微粉碎技术进行超微粉碎，使药粉平均粒径小于100μm，得超微粉碎粉A；

[0025] c)提取浓缩工艺：

[0026] 降香和檀香先加水提取挥发油后，得挥发油B和提油水溶液C，赤芍和酸枣仁加水煎煮，水提液过滤，得水提液D，人参用乙醇提取后，醇提液回收乙醇后，浓缩得醇提浸膏E，人参药渣、降香和檀香药渣与提油水溶液C合并提取，得水提液F，水提液D与水提液F混和后浓缩成水提浸膏G；

[0027] d)制剂工艺：

[0028] 将超微粉碎粉A、挥发油B、醇提浸膏E、水提浸膏G、冰片细粉以及西药成分HMG-CoA还原酶选择性抑制剂和阿司匹林按常规方法制成胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂或丸剂。

[0029] 本发明药物组合物胶囊剂的制备方法优选为：

[0030] a)按比例称取原料药物；

[0031] b)药材粉碎工艺：

[0032] 将全蝎、水蛭、蜈蚣、土鳖虫和蝉蜕五种虫药经净选、水洗处理后和净选炮制后的乳香按处方配料，由粉碎机进行粉碎，药粉细度达到80目以上；粗粉后的药粉经各种超微粉碎技术进行超微粉碎，使药粉平均粒径小于100μm，得超微粉碎粉A；

[0033] c)提取浓缩工艺：

[0034] 降香和檀香先加水提取挥发油后再用水提取，得挥发油B和水溶液C，赤芍、酸枣仁(炒)，加水煎煮二次，第一次3小时，第二次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.20-1.25(60℃)的清膏，得水提液D，人参用70％乙醇加热回流提取二次，第一次3小时，第二次2小时，合并提取液，回收乙醇至无醇味，得醇提浸膏E；人参药渣、降香和檀香药渣与提油水溶液C合并提取，得水提液F，水提液D与水提液F混和后浓缩成水提浸膏G；

[0035] d)制剂工艺：

[0036] 将超微粉碎粉A以及西药成分HMG-CoA还原酶选择性抑制剂和阿司匹林加入沸腾制粒干燥机中，喷入醇提浸膏D与水提浸膏G制粒，整粒，加入冰片细粉，喷入挥发油B混匀，由胶囊充填机充填，制成胶囊。

[0037] 本发明还提供了该药物组合物在制备预防和治疗心脑血管疾病药物中的应用。优选为该药物组合物在制备预防和治疗心肌缺血性疾病药物中的应用或者该药物组合物在制备预防和治疗脑缺血性疾病药物中的应用。

[0038] 本发明药物为中西药复方制剂，中药成分益气通络，活血畅脉，有活血畅脉之佳效，无耗气伤血之弊端，气旺血行，络脉畅通，肢体得养，沉疴可起，现代药理研究证实，可有效保护血管内皮，西药中HMG-CoA还原酶选择性抑制剂调节血脂，防止动脉粥样硬化，阿司匹林抗凝，也可有效防止动脉血管硬化，但是单用中药疗效略显不足，单用HMG-CoA还原酶选择性抑制剂调节血脂，长期应用不但会产生较大副作用，如横纹肌溶解，还会因不能保护血管造成器质性病变，单用阿司匹林，也会产生出血倾向，长期应用对血管也可能造成损害，故中西药合并，可以很好的预防和治疗心脑血管疾病。中药成分保护血管内皮，保护血行通道；HMG-CoA还原酶选择性抑制剂减低血脂，防止血脂沉积；阿司匹林的抗凝作用可有效降低血液粘稠度，可称之为心脑血管疾病的预防和治疗的“金三角”。

[0039] 本发明药物组合物的用量，折算成原料药材的重量，为每次0.8-3克，每日服用2-4次，优选为每次1.11-2.22克，每日服用三次。

[0040] 为证实本发明药物组合物的疗效，进行如下动物试验：

[0041] 试验例1：

[0042] 1、材料与方法

[0043] 1.1主要药品与试剂

[0044] 本发明药物(按照实施例1的方法制备，河北以岭医药研究院有限公司提供)，本发明药物中中药(按实施例1方法制备，原料药中不加阿托伐他汀钙和阿司匹林，河北以岭医药研究院有限公司提供)；阿司匹林肠溶片(石药集团中诺药业有限公司)；阿托伐他汀钙片(辉瑞制药)；丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)南京建成生物试剂公司提供)；内皮素(ET-1)放免试剂盒(中国人民解放军总医院东亚放免所提供)；部分活化凝血活酶时间(PT)、凝血酶原时间(APTT)、凝血酶时间(TT)试剂盒(法国DIAGNOSTICA STAGO公司)；TC(总胆固醇)、TG(甘油三酯)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)(北京九强生物技术有限公司)；纤溶酶原激活剂(t PA)、纤溶酶原激活剂抑制物(PAI)测定试剂盒由上海太阳生物技术公司提供。

[0045] 1.2方法动物分组与给药：

[0046] 方法：采用食饵性高脂大鼠加局灶性脑缺血手术复制动物模型，检测各组大鼠血液中血脂指标、凝血及纤溶系统功能指标、内皮功能指标；并取脑组织，测定缺血梗塞范围。

[0047] 分组：健康SD雄性大鼠，108只，体重100-120g，北京维通利华实验动物中心提供(合格证号：SCXK(京)2002-0003)，随机分为9组，每组12只，分组如下：

[0048]

[0049] 采用食饵性高脂大鼠加局灶性脑缺血手术复制动物模型：大鼠先以高脂饲料喂养2周，经测定证实血脂异常增高后，于第二天开始药物给药，每天一次，共2周，末次给药30min后，进行局灶性脑缺血造模：大鼠用水合氯醛麻醉后，在眼眦和外耳道中线处剪一小口，暴露颞肌，用止血钳将颞肌夹开，向两侧分开，注意不要损伤面神经。暴露鳞状骨大部分，然后在颧弓和鳞状骨前联合的前下方约2mm钻孔，在手术显微下，用小号直纹钳开约2mm直径小颅窗，显露大脑中动脉。将吸有50％三氯化铁溶液(加稀盐酸呈酸性)10μl滴在小片滤纸上，敷在该段大脑中动脉处，放置约30分钟后中动脉变黑去掉滤纸，用生理盐水冲洗局部组织，逐层缝合后回笼饲养。假手术组除不进行三氯化铁处置外，其它均相同。
术后24h，颈动脉放血后，取脑、主动脉，进行检测。

[0050] 给药：给药组按上表的剂量给药，药物用0.5％羧甲基纤维素钠溶液(CMC-Na)配制成所需的浓度，以1ml/kg进行灌胃给药，假手术组和模型组给予等剂量0.5％CMC-Na灌胃。

[0051] 检测指标：1)血脂：取血，进行TC(总胆固醇)、TG(甘油三酯)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的检测。2)凝血及纤溶功能：取血，测定活化部分凝血活酶时间(PT)、凝血酶原时间(APTT)、凝血酶时间(TT)；采用发色底物法测定纤溶酶原激活剂(t PA)、纤溶酶原激活剂抑制物(PAI)活性；加入诱导剂ADP按比浊法测定血小板最大聚集率。3)内皮功能指标：取胸主动脉，匀浆，测定丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性，内皮素(ET-1)含量。4)缺血梗塞范围：取脑组织，冠状切片，脑片用红四氮唑(TTC)染色，正常组织经染色后呈红色，梗塞组织呈白色，挖下梗塞面积，以梗塞组织重量占全脑重量及手术侧半脑重量的百分比作为梗塞范围(％)。

[0052] 1.3统计学处理

[0053] 实验数据用均数±标准差(x±s)表示。采用SPSS11.0统计软件进行单因素方差分析(one-way ANOVA)，有显著差异者用最小显著差法(LSD)进行两两比较，以P＜0.05为有显著差异。

[0054] 2、结果

[0055] 2.1各组大鼠血脂指标的比较

[0056] 模型组与假手术组比较，TC、TG、LDL-C明显上升(P＜0.01)，HDL-C明显下降(P＜0.01)，各给药组与模型组比较，除B组外，其他各组均有显著差异(P＜0.01，P＜0.05)，其中，ABC组变化最为明显。其它各组与ABC组比较，ABC组降低TC显著优于A、B、C和AB、BC、AC联用组(P＜0.01，P＜0.05)。见表1。

[0057] 表1各组大鼠血脂指标的变化(X±SD，n＝12)

[0058]

[0059]

[0060] 注：模型组与假手术组比较，△△P＜0.01；给药组与模型组比较，**P＜0.01，*P＜0.05；其它给药组与ABC组比较，##P＜0.01，#P＜0.05

[0061] 2.2各组大鼠血凝及凝血纤溶系统功能指标的比较

[0062] 模型组与假手术组比较，PT、APTT、TT明显下降(P＜0.01)，B、AB、BC、ABC给药组与模型组比较，各指标均有显著差异(P＜0.01，P＜0.05)，其中ABC组变化最为明显。其它各组与ABC组比较，ABC组对PT、TT、APTT的延长作用显著优于A、C和AC联用组(P＜0.01)，对PT、TT明显优于B组(P＜0.01，P＜0.05)见表2。

[0063] 表2各组大鼠血凝指标的变化(X±SD，n＝12)

[0064]△△ ** *

[0065] 注：模型组与假手术组比较， P＜0.01；给药组与模型组比较，P＜0.01，P## #＜0.05；其它给药组与ABC组比较，P＜0.01，P＜0.05

[0066] 模型组与假手术组比较，t-PA明显下降、PAI明显上升(P＜0.01)，除C组外，其他各组与模型组比较均有显著差异(P＜0.01，P＜0.05)，其中ABC组变化最为明显。其它各组与ABC组比较，ABC组对PAI的降低作用显著优于A组(P＜0.05)见表3。

[0067] 模型组与假手术组比较，血小板聚集率显著增加(P＜0.01)，除C组外，其他各组与模型组比较均有显著差异(P＜0.01，P＜0.05)，其中ABC组变化最为明显。其它各组与ABC组比较，ABC组对血小板聚集率的降低作用显著优于A、C组(P＜0.01，P＜0.05)见表3。

[0068] 表3各组大鼠凝血纤溶系统、血小板聚集率的变化(X±SD，n＝12)

[0069]

[0070] 注：模型组与假手术组比较，△△P＜0.01；给药组与模型组比较，**P＜0.01，*P## #＜0.05；其它给药组与ABC组比较，P＜0.01，＜0.05

[0071] 2.3各组大鼠内皮功能指标的比较

[0072] 模型组与假手术组比较，NO水平、SOD活性明显下降(P＜0.01)，MDA、ET含量明显上升(P＜0.01)，各给药组与模型组比较，除B组外，其他各组均有显著差异(P＜0.01，P＜0.05)，其中ABC组变化最为明显。其它各组与ABC组比较，ABC组对NO、ET和SOD、MDA的改善显著优于B药单独使用(P＜0.01)，对血管组织的NO的升高优于A药单独使用和BC联用(P＜0.05)，对血管内皮素的降低明显优于C药(P＜0.05)。见表4。

[0073] 表4各组大鼠内皮功能指标的变化(X±SD，n＝12)

[0074]

[0075] 注：模型组与假手术组比较，△△P＜0.01；给药组与模型组比较，**P＜0.01，*P＜0.05；其它给药组与ABC组比较，##P＜0.01，#P＜0.05

[0076] 2.4各组大鼠脑梗塞范围的比较

[0077] 模型组与假手术组比较，脑梗塞范围明显上升(P＜0.01)，各给药组与模型组比较，除C组外，其他各组均有显著差异(P＜0.01，P＜0.05)，其中，ABC组变化最为明显。其它各组与ABC组比较，ABC组对大鼠心肌梗塞范围的减小明显优于其它各药单用或BC联合应用(P＜0.01，P＜0.05)见表5。

[0078] 表5各组大鼠梗塞范围的变化(X±SD，n＝12)

[0079]

[0080] 注：模型组与假手术组比较，△△P＜0.01；给药组与模型组比较，**P＜0.01，*P## #＜0.05；其它给药组与ABC组比较，P＜0.01，P＜0.05

[0081] 3、结论：

[0082] 本研究利用“高脂饮食+局灶性脑缺血”的方法建立了大鼠模型，结果发现，模型组大鼠血脂、血凝、纤溶系统、血小板聚集率、内皮功能指标均异常，给予本发明药物中中药治疗后能抑制血脂、血小板聚集、内皮功能指标的异常，减少脑梗塞范围；给予阿司匹林后能抑制血凝指标的异常；给予阿托伐他汀钙后能抑制血脂、内皮功能指标的异常；而给予本发明药物组合物后能明显抑制血脂、血凝、纤溶系统、血小板聚集内皮功能指标均异常，内皮功能指标的异常，减少脑梗塞范围，综合评价疗效明显优于其他各组，说明本发明药物在发挥各药单用时抗凝、抗脂，保护内皮功能作用的同时，使本发明药中中药、阿托伐他汀钙和阿司匹林的药理作用得到加强，而且最终发挥对缺血性脑血管病的最佳治疗作用。

[0083] 将试验例1中阿托法他汀钙用辛伐他汀代替，本发明药物用实施例2制得的药物体换取得相同的结果，同样将阿托法他汀钙用洛伐他汀代替，本发明药物用实施例3制得的药物替换也取得相同的结果。可见本发明中的西药降脂药适用于所有的HMG-CoA还原酶选择性抑制剂。

[0084] 试验例2：

[0085] 1、材料与方法

[0086] 1.1主要药品与试剂

[0087] 本发明药物(按照实施例1的方法制备，河北以岭医药研究院有限公司提供)，本发明药物中中药(按实施例1方法制备，原料药中不加阿托伐他汀钙和阿司匹林，河北以岭医药研究院有限公司提供)；阿司匹林肠溶片(石药集团中诺药业有限公司)；阿托伐他汀钙片(辉瑞制药)；丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)南京建成生物试剂公司提供)；内皮素(ET-1)放免试剂盒(中国人民解放军总医院东亚放免所提供)；部分活化凝血活酶时间(PT)、凝血酶原时间(APTT)、凝血酶时间(TT)试剂盒(法国DIAGNOSTICA STAGO公司)；TC(总胆固醇)、TG(甘油三酯)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)(北京九强生物技术有限公司)；纤溶酶原激活剂(t PA)、纤溶酶原激活剂抑制物(PAI)测定试剂盒由上海太阳生物技术公司提供。

[0088] 1.2方法动物分组与给药：

[0089] 方法：采用食饵性高脂大鼠加冠脉结扎手术复制动物模型，检测各组大鼠血液中血脂指标、凝血及纤溶系统功能指标、内皮功能指标；并取心肌组织，测定缺血范围。

[0090] 分组：健康SD雄性大鼠，108只，体重100-120g，北京维通利华实验动物中心提供(合格证号：SCXK(京)2002-0003)，随机分为9组，每组12只，分组如下：

[0091]

[0092] 采用食饵性高脂大鼠加冠脉结扎手术复制动物模型：大鼠先以高脂饲料喂养2周，经测定证实血脂异常增高后，于第二天开始药物给药，每天一次，共2周，末次给药
30min后，末次给药30min后，水合氯醛麻醉，沿左锁骨中线纵行切开皮肤约2cm，在第3、4肋间钝性分离肌层，打开胸腔，剪开心包，轻压右侧胸腔，暴露心脏，在肺动脉圆锥左缘、左心耳下缘1mm处经浅层心肌以0号线结扎左冠脉前降支(假手术组不结扎)，把心脏放回胸腔，迅速缝合胸腔。术后4h，颈动脉取血，取心脏、主动脉，进行检测。

[0093] 给药：给药组按上表的剂量给药，药物用0.5％羧甲基纤维素钠溶液(CMC-Na)配制成所需的浓度，以1ml/kg进行灌胃给药，假手术组和模型组给予等剂量0.5％CMC-Na灌胃。

[0094] 检测指标：1)血脂指标：取血，进行TC(总胆固醇)、TG(甘油三酯)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的检测。2)凝血及纤溶功能：取血，测定活化部分凝血活酶时间(PT)、凝血酶原时间(APTT)、凝血酶时间(TT)；采用发色底物法测定纤溶酶原激活剂(t PA)、纤溶酶原激活剂抑制物(PAI)活性；加入诱导剂ADP按比浊法测定血小板最大聚集率。3)内皮功能指标：取胸主动脉，匀浆，测定丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性，内皮素(ET-1)含量。4)心肌梗死范围：摘取新鲜心脏，置-4℃冷冻约1h后取出，沿房室沟从心尖到心基部平行将心室肌横切成厚约0.1cm的心肌片，TTC染色，染色后分离梗死区和非梗死区并称重，计算心肌梗死范围。

[0095] 1.3统计学处理

[0096] 实验数据用均数±标准差(X±S)表示。采用SPSS11.0统计软件进行单因素方差分析(one-way ANOVA)，有显著差异者用最小显著差法(LSD)进行两两比较，以P＜0.05为有显著差异。

[0097] 2、结果

[0098] 2.1各组大鼠血脂指标的比较

[0099] 模型组与假手术组比较，TC、TG、LDL-C明显上升(P＜0.01)，HDL-C明显下降(P＜0.01)，各给药组与模型组比较，除B组外，其他各组均有显著差异(P＜0.01，P＜0.05)，其中，ABC组变化最为明显。其它各组与ABC组比较，ABC组降低TC显著优于A、B、C和AB、BC联用(P＜0.01，P＜0.05)。见表6。

[0100] 表6各组大鼠血脂指标的变化(X±SD，n＝12)

[0101]△△ ** *

[0102] 注：模型组与假手术组比较， P＜0.01；给药组与模型组比较，P＜0.01，P## #＜0.05；其它给药组与ABC组比较，P＜0.01，P＜0.05

[0103] 2.2各组大鼠血凝指标的比较

[0104] 模型组与假手术组比较，PT、APTT、TT明显下降(P＜0.01)，B、AB、BC、ABC给药组与模型组比较，各指标均有显著差异(P＜0.01，P＜0.05)，其中，ABC组变化最为明显。其它各组与ABC组比较，ABC组对PT、TT、APTT的延长作用显著优于A、C和AC联用组(P＜0.01，P＜0.05)。见表6。

[0105] 模型组与假手术组比较，t-PA明显下降、PAI明显上升(P＜0.01)，除C组外，其他各组与模型组比较均有显著差异(P＜0.01，P＜0.05)，其中ABC组变化最为明显。其它各组与ABC组比较，ABC组对t-PA的作用显著优于C组(P＜0.05)，对PAI的作用显著优于A、B、C组以及二者合用组(P＜0.01)见表7。

[0106] 模型组与假手术组比较，血小板聚集率显著增加(P＜0.01)，除C组外，其他各组与模型组比较均有显著差异(P＜0.01，P＜0.05)，其中ABC组变化最为明显。其它各组与ABC组比较，ABC组对血小板聚集率的降低作用显著优于A、C组(P＜0.01，P＜0.05)见表7。

[0107] 表6各组大鼠血凝指标的变化(X±SD，n＝12)

[0108]△△ ** *

[0109] 注：模型组与假手术组比较， P＜0.01；给药组与模型组比较，P＜0.01，P## #＜0.05；其他给药组与ABC组比较，P＜0.01，P＜0.05

[0110] 表7各组大鼠凝血纤溶系统、血小板聚集率的变化(X±SD，n＝12)

[0111]

[0112] 注：模型组与假手术组比较，△△P＜0.01；给药组与模型组比较，**P＜0.01，*P＜0.05；其它给药组与ABC组比较，##P＜0.01，#P＜0.05

[0113] 2.3各组大鼠内皮功能指标的比较

[0114] 模型组与假手术组比较，血管组织NO水平、SOD活性明显下降(P＜0.01)，MDA、ET含量显著上升(P＜0.01)，各给药组与模型组比较，除B组外，其他各组均有显著差异(P＜0.01，P＜0.05)，其中ABC组变化最为明显。其它各组与ABC组比较，ABC组对NO、ET和SOD、MDA的改善显著优于B药单独使用(P＜0.01)，对血管组织的NO、SOD的升高和ET的抑制明显优于C药单独使用。(P＜0.05)。见表8。

[0115] 表8各组大鼠内皮功能指标的变化(X±SD，n＝12)

[0116]

[0117] 注：模型组与假手术组比较，△△P＜0.01；给药组与模型组比较，**P＜0.01，*P## #＜0.05；其他给药组与ABC组比较，P＜0.01，P＜0.05

[0118] 2.4各组大鼠心肌梗塞范围的比较

[0119] 模型组与假手术组比较，心肌梗塞范围明显上升(P＜0.01)，各给药组与模型组比较，除B组外，其他各组均有显著差异(P＜0.01，P＜0.05)，其中ABC组变化最为明显。其它各组与ABC组比较，ABC组对大鼠心肌梗塞范围的减小明显优于其它各药单用或联合应用(P＜0.01，P＜0.05)见表9。

[0120] 表9各组大鼠心肌梗塞范围的变化(X±SD，n＝12)

[0121]

[0122] 注：模型组与假手术组比较，△△P＜0.01；给药组与模型组比较，**P＜0.01，*P## #＜0.05；其它给药组与ABC组比较，P＜0.01，P＜0.05

[0123] 3、结论：

[0124] 本研究利用“高脂饮食+心肌缺血”的方法建立了高脂血症心肌缺血模型，模拟人类高脂血症所致内皮损伤、凝血功能异常，最终发展导致心肌缺血。实验结果表明，模型组高脂血症模型大鼠血脂、凝血、内皮功能指标均异常，给予本发明中中药治疗后能抑制血脂、纤溶系统、血小板聚集、内皮功能指标的异常，减少心肌梗塞范围；给予阿司匹林后能抑制血凝指标的异常；给予阿托伐他汀钙后能抑制血脂、内皮功能指标的异常；而给本发明药物组合物后能明显抑制血脂、血凝、纤溶、血小板、内皮功能指标的异常，显著减小急性心肌缺血导致的心肌梗塞范围，综合评价其效果明显优于其他各组，发挥出本发明药物中中药、阿托伐他汀钙、阿司匹林单独使用无法具备的综合疗效优势，疗效出现了明显的协同作用，说明本发明药物在抗凝、抗脂，保护内皮功能增强的同时，具备对心血管病急性事件的最佳防治作用。

[0125] 将试验例2中阿托法他汀钙用辛伐他汀代替，本发明药物用实施例2制得的药物体换取得相同的结果，同样将阿托法他汀钙用洛伐他汀代替，本发明药物用实施例3制得的药物替换也取得相同的结果。可见本发明中的西药降脂药适用于所有的HMG-CoA还原酶选择性抑制剂。

具体实施方式

[0126] 实施例1：

[0127] a)原料药配方为：

[0128] 人参39.6g 水蛭72.6g 土鳖虫46.2g 乳香(制)13.2g

[0129] 赤芍33g 降香13.2g 檀香13.2g 全蝎19.8g

[0130] 蝉蜕46.2g 蜈蚣6.6g 冰片10g 酸枣仁(炒)33g

[0131] 阿托伐他汀钙2g阿司匹林7.5g；

[0132] b)药材粉碎工艺：

[0133] 将全蝎、水蛭、蜈蚣、土鳖虫和蝉蜕五种虫药经净选、水洗处理后和净选炮制后的乳香按处方配料，由粉碎机进行粉碎，药粉细度达到80目以上；粗粉后的药粉经各种超微粉碎技术进行超微粉碎，使药粉平均粒径为30-40μm，得超微粉碎粉A；

[0134] c)提取浓缩工艺：

[0135] 降香和檀香先加水提取挥发油后再用水提取，得挥发油B和水溶液C，赤芍、酸枣仁(炒)，加水煎煮二次，每次3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.20-1.25(60℃)的清膏，得水提液D，人参用70％乙醇加热回流提取二次，每次3小时，合并提取液，回收乙醇至无醇味，浓缩至相对密度为0.9-1.1(60℃)的浸膏，得醇提浸膏E；人参药渣、降香和檀香药渣与提油水溶液C合并提取，得水提液F，水提液D与水提液F混和后浓缩成水提浸膏G；

[0136] d)制剂工艺：

[0137] 将超微粉碎粉A以及西药成分阿托伐他汀钙和阿司匹林加入沸腾制粒干燥机中，喷入醇提浸膏D与水提浸膏G制粒，整粒，加入冰片细粉，喷入挥发油B混匀，由胶囊充填机充填，制成胶囊。

[0138] 实施例2：

[0139] a)原料药配方为：

[0140] 人参37.67g 水蛭71.06g 土鳖虫47.09g 乳香(制)15.41g

[0141] 赤芍32.53g 降香16.27g 檀香15.41g 全蝎47.09g

[0142] 蝉蜕47.09g 蜈蚣9.42g 冰片9.42g 酸枣仁(炒)31.68g

[0143] 辛伐他汀5g 阿司匹林20g；

[0144] b)药材粉碎工艺：

[0145] 将全蝎、水蛭、蜈蚣、土鳖虫和蝉蜕五种虫药经净选、水洗处理后和净选炮制后的乳香按处方配料，由粉碎机进行粉碎，药粉细度达到80目以上；粗粉后的药粉经各种超微粉碎技术进行超微粉碎，使药粉平均粒径为20-30μm，得超微粉碎粉A；

[0146] c)提取浓缩工艺：

[0147] 降香和檀香先加水提取挥发油后再用水提取，得挥发油B和水溶液C，赤芍、酸枣仁(炒)，加水煎煮二次，第一次3小时，第二次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.20-1.25(60℃)的清膏，得水提液D，人参用70％乙醇加热回流提取二次，第一次3小时，第二次2小时，合并提取液，回收乙醇至无醇味，得醇提浸膏E；人参药渣、降香和檀香药渣与提油水溶液C合并提取，得水提液F，水提液D与水提液F混和后浓缩成水提浸膏G；

[0148] d)制剂工艺：

[0149] 将超微粉碎粉A以及西药成分辛伐他汀和阿司匹林加入沸腾制粒干燥机中，喷入醇提浸膏D与水提浸膏G制粒，整粒，加入冰片细粉，喷入挥发油B混匀，按常规方法制成1000片片剂。

[0150] 实施例3：

[0151] a)原料药配方为：

[0152] 人参45g 水蛭57g 土鳖虫38g 乳香(制)18g

[0153] 赤芍26g 降香20g 檀香12g 全蝎38g

[0154] 蝉蜕57g 蜈蚣8g 冰片8g 酸枣仁(炒)38g

[0155] 洛伐他汀5g 阿司匹林5g；

[0156] b)药材粉碎工艺：

[0157] 将全蝎、水蛭、蜈蚣、土鳖虫和蝉蜕五种虫药经净选、水洗处理后和净选炮制后的乳香按处方配料，由粉碎机进行粉碎，药粉细度达到80目以上；粗粉后的药粉经各种超微粉碎技术进行超微粉碎，使药粉平均粒径为50-60μm，得超微粉碎粉A；

[0158] c)提取浓缩工艺：

[0159] 降香和檀香先加水提取挥发油后再用水提取，得挥发油B和水溶液C，赤芍、酸枣仁(炒)，加水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.20-1.25(60℃)的清膏，得水提液D，人参用70％乙醇加热回流提取二次，每次2小时，合并提取液，回收乙醇至无醇味，得醇提浸膏E；人参药渣、降香和檀香药渣与提油水溶液C合并提取，得水提液F，水提液D与水提液F混和后浓缩成水提浸膏G；

[0160] d)制剂工艺：

[0161] 将超微粉碎粉A以及西药成分洛伐他汀和阿司匹林加入沸腾制粒干燥机中，喷入醇提浸膏D与水提浸膏G制粒，整粒，加入冰片细粉，喷入挥发油B混匀，按常规方法制成1000份颗粒剂。

[0162] 实施例4：

[0163] a)原料药配方为：