本发明涉及老鹰茶低醇发酵饮料的制备方法，本发明利用黑曲霉d2对老鹰茶进行固态发酵，使得茶叶中的营养物质破壁而出，然后用发酵茶粉配置液态培养基并接种酿酒酵母s1进行发酵，制成集茶香与醇香为一体的老鹰茶低醇发酵饮料。该饮料含多酚类化合物不低于0.075mg/mL，游离氨基酸不低于0.25mg/mL，乙醇0.5％-3.0％，总酸0.4％-0.6％；总砷(以As计)0.042μg/L，铅＜0.1mg/L，铜2.08mg/L，均达到茶饮料GB 19296-2003；微生物指标：杂菌总数≤100cfu/mL，大肠杆菌未检出；赭曲霉毒素未检出；老鹰茶低醇发酵饮料口感柔和，风味协调，为营养保健型饮料。
1.老鹰茶低醇发酵饮料的制备方法，其特征在于包括以下操作步骤：(1)、老鹰茶发酵茶粉制备：
利用黑曲霉(Aspergillus niger)d2对老鹰茶进行固态发酵，发酵条件为：老鹰茶5g，2
接种两块0.2cm 黑曲霉d2菌块，加水量10ml，发酵时间48h，发酵完成后灭菌并进行真空冷冻干燥，研磨过60目筛制得老鹰茶发酵茶粉；
所述黑曲霉d2菌块的制备：将黑曲霉d2转接至马铃薯葡萄糖液体培养基进行活化，然后吸取0.2ml菌液采用涂布法转接到马铃薯葡萄糖平板培养基上，25℃培养3d，制得黑曲霉d2菌块；
利用老鹰茶发酵茶粉配制液体培养基，培养基配方为：老鹰茶发酵茶粉0.1g，红枣
0.15-0.35g，葡萄糖4g，去离子水100ml，起始pH值为5.5，在121℃条件下灭菌20min制得液体发酵培养基；
液体发酵培养 基分装于250ml三角瓶中，装液量75ml，接种酿酒酵 母(Saccharomycescerevisiae)s1种子液进行发酵，接种量2ml，先置于摇床在160r/min、28℃条件下有氧发酵60h，然后用密封膜封口，置于恒温培养箱中22℃静置发酵72h，发酵完成后，离心去除酵母菌体并进行巴氏灭菌，得到老鹰茶发酵饮料；
所述酿酒酵母s1种子液的制备：将酿酒酵母s1转接至马铃薯葡萄糖液体培养基中进行活化，然后吸取0.2ml菌液采用涂布法转接到马铃薯葡萄糖平板培养基上，25℃培养2d，制2
得酿酒酵母s1菌块；然后取两块0.2cm 酿酒酵母s1菌块转接至酵母蛋白胨葡萄糖培养基(YPD)，在160r/min，25℃条件下培养36h，得到酿酒酵母s1种子液，所述种子液酵母菌含量8
2.根据权利要求1所述老鹰茶低醇发酵饮料的制备方法，其特征在于：所述培养基配方为：老鹰茶发酵茶粉0.1g，红枣0.15-0.35g，葡萄糖4g，麦芽糖1.5g，去离子水100ml，起始pH值为5.5，在121℃条件下灭菌20min制得液体发酵培养基。
3.根据权利要求1所述老鹰茶低醇发酵饮料的制备方法，其特征在于：所述红枣为去核切丝红枣。
老鹰茶低醇发酵饮料的制备方法
技术领域
[0001] 本发明属于发酵饮料生产技术领域，具体涉及利用老鹰茶为原料制备低醇发酵饮料的生产工艺。
背景技术
[0002] 老鹰茶亦称“白茶”，是我国南方少数民族长期饮用的一种植物代用茶，民间饮用历史悠久，在安徽皖南山区(宁国)资源丰富，富含黄酮类、矿质元素等物质，具有解毒消肿、明目益思、解表防暑等功效，且无毒副作用，为药食同源植物。茶叶微生物发酵是在以茶叶为主的基质中接种特定的微生物，通过它们的代谢等作用使茶叶发生深度的良性生理生化变化，茶叶经过微生物发酵后，不仅本身品质可以得到改善，还可以增添许多微生物代谢或微生物菌体本身等多种有效成分。茶叶中的多酚类化合物能够抑制大部分细菌及真菌的正常生长代谢，中国专利授权公告号1740309A提供了用酵母菌酿制乌龙茶提取液生产乌龙茶酒的技术，由于乌龙茶属于半发酵茶，多酚化合物含量低，因此酵母菌发酵效果好，但利用乌龙茶作为发酵基质成本过高，且所酿制的乌龙茶酒酒精度(12％-24％)较高，只能适合部分人群。老鹰茶中茶多酚含量丰富，利用单一酵母菌直接对老鹰茶提取液进行发酵效果欠佳，本文利用黑曲霉和酿酒酵母对老鹰茶进行固液联合发酵，制备新型老鹰茶低醇发酵饮料目前在国内外均无报道。
发明内容
[0003] 老鹰茶产品单一，利用酵母菌单一菌种发酵效果欠佳，本发明以老鹰茶为基质，将黑曲霉固态发酵与酿酒酵母液态发酵相结合，研制出一种新型老鹰茶低醇发酵饮料，并提供老鹰茶低醇发酵饮料的制备方法。
[0004] 本发明利用老鹰茶为原料制作低醇发酵饮料的生产工艺步骤如下：
[0005] (1)、老鹰茶发酵茶粉制备：
[0006] 利用黑曲霉(Aspergillus niger)d2对老鹰茶进行固态发酵，发酵条件为：老鹰茶2
5g，接种两块0.2cm 黑曲霉d2菌块，加水量10ml，发酵时间48h，发酵完成后灭菌并进行真空冷冻干燥，研磨过60目筛制得老鹰茶发酵茶粉；
[0007] 所述黑曲霉d2菌块的制备：将黑曲霉d2转接至马铃薯葡萄糖液体培养基进行活化，然后吸取0.2ml菌液采用涂布法转接到马铃薯葡萄糖平板培养基上，25℃培养3d，制得黑曲霉d2菌块；
[0008] (2)、液体发酵培养基制备：
[0009] 利用老鹰茶发酵茶粉配制液体培养基，培养基配方为：老鹰茶发酵茶粉0.1g，红枣0.15-0.35g，葡萄糖4g，去离子水100ml，起始pH值为5.5，在121℃条件下灭菌20min制得液体发酵培养基；
[0010] (3)、老鹰茶低醇发酵饮料制备：
[0011] 液体发酵培养基分装于250ml三角瓶中，装液量75ml，接种酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)s1种子液进行发酵，接种量2ml，先置于摇床在160r/min、28℃条件下有氧发酵60h，然后用密封膜封口，置于恒温培养箱中22℃静置发酵72h，发酵完成后，离心去除酵母菌体并进行巴氏灭菌，得到老鹰茶发酵饮料；
[0012] 所述酿酒酵母s1种子液的制备：将酿酒酵母s1转接至马铃薯葡萄糖液体培养基中进行活化，然后吸取0.2ml菌液采用涂布法转接到马铃薯葡萄糖平板培养基上，25℃培养2
2d，制得酿酒酵母s1菌块；然后取两块0.2cm 酿酒酵母s1菌块转接至酵母蛋白胨葡萄糖培养基(YPD)，在160r/min，25℃条件下培养36h，得到酿酒酵母s1种子液，所述种子液酵母菌
8
含量为1.822×10cfu/ml。
[0013] 所述另一种培养基配方为：老鹰茶发酵茶粉0.1g，红枣0.15-0.35g，葡萄糖4g，麦芽糖1.5g，去离子水100ml，起始pH值为5.5，在121℃条件下灭菌20min制得液体发酵培养基；
[0014] 所述红枣为去核切丝红枣。
[0015] 本发明利用黑曲霉d2对老鹰茶进行固态发酵，使得茶叶中的营养物质破壁而出，然后用发酵茶粉配置液态培养基并接种酿酒酵母s1进行发酵，制成集茶香与醇香为一体的老鹰茶低醇发酵饮料；该饮料含多酚类化合物不低于0.075mg/mL，游离氨基酸不低于0.25mg/mL，乙醇0.5％-3.0％，总酸0.4％-0.6％；总砷(以As计)0.042μg/L，铅＜0.1mg/L，铜2.08mg/L，均达到茶饮料GB 19296-2003；微生物指标：杂菌总数≤100cfu/mL，大肠杆菌未检出；赭曲霉毒素未检出；老鹰茶低醇发酵饮料口感柔和，风味协调，为营养保健型饮料。
具体实施方式
[0016] 下面结合实施例，对本发明作进一步地说明。
[0017] 实施例1：
[0018] 老鹰茶低醇发酵饮料的制备方法包括以下操作步骤：
[0019] (1)、材料预处理：
[0020] 将老鹰茶与红枣(去核切丝后)置于60℃烘箱中烘至恒重；黑曲霉(Aspergillus niger)d2：将黑曲霉d2从4℃冰箱取出，首先将其转接至马铃薯葡萄糖液体培养基进行活化，然后吸取0.2ml菌液涂布转接到马铃薯葡萄糖平板培养基上，25℃培养3d，得黑曲霉d2菌块；酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)s1：将酿酒酵母s1从4℃冰箱取出，与黑曲霉2
d2进行同样操作，25℃培养2d，得到酿酒酵母s1菌块，然后取两块0.2cm 酿酒酵母s1菌块转接至YPD中，在160r/min，25℃条件下培养36h，得到酿酒酵母s1种子液，通过菌体计数，
8
得出该种子液酵母菌含量为1.822×10cfu/ml。
[0021] (2)、老鹰茶发酵茶粉制备：
[0022] 称取5g经过预处理的老鹰茶，置于100ml三角烧瓶中，加入沸自来水10ml，冷却后2
接种两块0.2cm 黑曲霉d2菌块，于25℃发酵48h，向发酵物上喷洒95％酒精，于紫外灯下垂直距离20cm处灭菌5min，然后真空冷冻干燥24h，将干燥物粉碎过60目筛制成老鹰茶发酵茶粉。
[0023] (3)、液体发酵培养基制备：
[0024] 称取老鹰茶发酵茶粉1g，加入到煮沸的300ml去离子水中，保持15min，然后过
