一种甲磺酸胺银杏内酯B的高效液相—蒸发光检测分析方法

摘要

本发明是一种甲磺酸胺银杏内酯B的高效液相色谱-蒸发光分析检测方法分析方法，使用不同非极性的色谱柱，用一种或几种有机溶剂和1～100mmol/L缓冲盐溶液作为流动相，流动相流速为0.1-1.5ml/min，梯度洗脱，在蒸发光散射检测器检测(漂移管温度为30～45℃，载气压力为1.0～2.0bar)。对甲磺酸胺银杏内酯B原料药及其制剂进行鉴别、有关物质检查与含量测定，以控制其质量。

权利要求

1.一种甲磺酸氨银杏内酯B的高效液相-蒸发光分析检测方法，其特征是该方法采用蒸发光散射检测器，按反相色谱法进行梯度洗脱，采用反相色谱柱C18或者C8柱，HPLC具体设置如下：(1)分析柱：C18柱；流速：1.0mL/min；流动相条件：有机相是甲醇，水相是10mmol/L的甲酸溶液，以氨水调节pH值至9.0；梯度洗脱顺序为：时间/分钟水相/％ 有机相/％

0 70 30

5 70 30

10 20 80

40 20 80

或(2)分析柱：C8柱；流速：1.0mL/min；流动相条件：有机相是乙腈，水相：取甲酸

250μl，加水1000ml，以氨水调节pH值至10.0；梯度洗脱顺序：时间/分钟水相/％ 有机相/％

0 80 20

5 80 20

10 30 70

40 30 70

或(3)分析柱：C18柱；流速：1.5mL/min；流动相条件：有机相是乙腈，水相是100mmol/L的甲酸铵溶液，以氨水调节pH值至8.0；梯度洗脱顺序为：时间/分钟水相/％ 有机相/％

0 80 20

5 80 20

10 30 70

40 30 70

2.根据权利要求1所述的高效液相分析方法，蒸发光散射检测器的漂移管温度为

30-45℃，载气压力为1.0-2.0bar。

说明书

一种甲磺酸胺银杏内酯B的高效液相—蒸发光检测分析方

法

技术领域

[0001] 本发明涉及一种甲磺酸胺银杏内酯B的高效液相-蒸发光检测分析方法，对该药物的有关物质控制及药物质量标准的提高具有很好的作用，属于医药技术领域。 背景技术

[0002] 银杏，降痰、清毒、杀虫之功能，可治疗“疮疥疽瘤、乳痈溃烂、牙齿虫龋、小儿腹泻、赤白带下、慢性淋浊、遗精遗尿等症”。入肺经、益脾气、定喘咳、缩小便。银杏是广泛应用于心血管等中药复方中，其有效成分为脂溶性的二萜化合物和水溶性的黄酮类化合物。 [0003] 脂溶性银杏酮中主要有银杏黄酮、银杏内酯、白果内酯等成分。

[0004] 甲磺酸胺银杏内酯B原料为银杏内酯水的衍生物，提高了银杏内酯水的水溶性，其拮抗血小板活化因子的作用提高10倍以上。高效液相-蒸发光检测分析法对甲磺酸胺银杏内酯B有关物质的控制也未见有任何报道。

[0005] 蒸发光散射检测器(ELSD)的检测方法消除了常见于传统HPLC检测方法中的难点，它不同于紫外(UV)和荧光(FLD)检测器，ELSD的响应不依赖与样品的光学特性，任何挥发性低于流动相的样品均能被检测，不受其官能团的影响。ELSD的响应值与样品的质量成正比，因而能用于测定样品的纯度或者检测未知物。

[0006] 蒸发光散射检测器是一种通用型的检测器，可检测挥发性低于流动相的任何样品，而不需要样品含有发色基团。蒸发光散射检测器灵敏度比示差折光检测器高，对温度变化不敏感，基线稳定，适合与梯度洗脱液相色谱联用。

[0007] 高效液相梯度洗脱和ELSD的联用，可以检测出在紫外和荧光检测器中无法检测的杂质，反映甲磺酸胺银杏内酯B的真实杂质含量。梯度洗脱可以缩短试验周期，降低费用，节约能源，保护环境。

发明内容

[0008] 本发明提供一种甲磺酸胺银杏内酯B的高效液相-蒸发光检测分析方法，该方法体现是用一种流动相梯度洗脱的高效液相条件能更有效、科学、便捷的控制甲磺酸胺银杏内酯水药物原料及制剂的有关物质，为本药物有关物质的质量标准的提高提供了一个有效的方法。

[0009] 本发明的高效液相条件为：

[0010] 分析柱：反相色谱柱，C18柱或C8柱。

[0011] 流速：0.5ml/min-1.5ml/min

[0012] 流动相：有机相为甲醇、乙腈或两者的混合溶液；水相为1～100mmol/L的甲酸、氨水、甲酸铵等中的一种或几种的水溶液，pH值为8.0～10.0。

[0013] 梯度洗脱：在0分钟～40分钟内，有机相比例从20％变为80％。

[0014] 检测器：ELSD

[0015] 采用该液相色谱条件，能有效分析出甲磺酸胺银杏内酯B原料及制剂中的杂质，特别是用紫外或荧光检测器无法检测的杂质。具体实施例

[0016] 实施例1甲磺酸胺银杏内酯B的杂质检查高效液相-蒸发光检测分析与高效液相紫外(UV)分析比较。

[0017] 1)取本品(090201批)适量，以流动相配成5mg/ml的溶液，分别以UV和ELSD检测器进行杂质检查。

[0018] 分析柱：C18柱

[0019] 流速：1.0ml/min

[0020] 漂移管温度30℃，载气压力为1.0bar；

[0021] 流动相条件：有机相是甲醇，水相是10mmol/L甲酸铵缓冲液(pH8.0) [0022] 梯度洗脱在0分钟～3分钟时，有机相比例为20％，在3至40分钟时，有机相比例为80％。

[0023] 2)HPLC-UV等度检测条件如下：

[0024] 取本品(090201批)适量，以流动相配成5mg/ml的溶液，分别以UV和ELSD检测器进行杂质检查。

[0025] 分析柱：C18柱

[0026] 流速：1.0ml/min

[0027] 检测波长：210nm

[0028] 流动相条件：甲醇∶10mmol/L甲酸铵溶液(pH8.0)＝40∶60

[0029] 结果如下表，采用ELSD检测，能反映甲磺酸胺银杏内酯B中杂质的真实情况。 [0030]

[0031] 实施例2甲磺酸胺银杏内酯B原料杂质检查。

[0032] 取甲磺酸胺银杏内酯B(090201批)、注射用甲磺酸胺银杏内酯B(090201批)适量，流动相配成5mg/ml的溶液，以ELSD检测器进行杂质检查。

[0033] 分析柱：C18柱

[0034] 流速：1.0ml/min

[0035] 漂移管温度40℃，载气压力为1.5bar

[0036] 流动相条件：有机相是甲醇，水相是10mmol/L甲酸溶液(以氨水调节pH值至9.0)；

[0037] 梯度洗脱程序

[0038]