一种食用菌中单糖、寡糖的检测方法

摘要

本发明提供了一种食用菌中单糖、寡糖种类和含量的检测方法，是通过离子色谱电化学检测手段进行测定分析的方法。此方法通过获得的离子色谱图谱，基于峰迁移时间及峰面积可鉴别食用菌中单糖种类及含量。本方法实现了对食用菌内单糖、寡糖成分的准确控制。

权利要求

1.一种食用菌中单糖、寡糖的检测方法，其特征在于：

(1)检测范围：对食用菌样品烘干后粉碎，粉碎后的样品于50℃水中超声提取葡萄糖、海藻糖、甘露糖、岩藻糖、甘露醇、果糖、以及核糖这七种单糖、寡糖，将稀释合适倍数后的糖提取液放入离子色谱仪进行分析，根据各峰的迁移时间以及峰面积判断不同食用菌中的单糖、寡糖种类及含量；

(2)检测条件：所述的离子色谱为DIONEX ICS-3000，柱子采用DIONEX公司CarboPac MA1柱，检测系统为电化学检测系统，检测过程中使用的流动相为去离子水和600mmol/L的氢氧化钠溶液，其比例为去离子水∶氢氧化钠溶液＝20∶80，与其他离子色谱分析方法相比能实现海藻糖和甘露醇的完全分离，将测得的糖的峰面积值代入标准曲线中可得到糖的含量。

2.根据权利要求1所述的食用菌中单糖、寡糖的检测方法，其特征在于：待检测的食用菌样品粉末仅需超声提取、稀释、过滤即可上机检测，无需对单糖、寡糖进行衍生处理。

说明书

一种食用菌中单糖、寡糖的检测方法

所属技术领域

[0001] 本发明涉及一种食用菌中单糖、寡糖的分离检测技术，具体涉及离子色谱对食用菌中七种单糖、寡糖的分离检测。

背景技术

[0002] 近年来随着人们对健康食品需求的增加，食用菌作为一类富含多种营养成分且风味独特的农产品逐渐受到人们的关注，其产量和消费量逐渐增加。糖作为食物中重要的营养成分，具有供给热能、维持血糖恒定、构成组织、保肝解毒、节约体内蛋白质的消耗、维持脂肪代谢等生理功能，糖的含量也标志着产品营养价值；同时糖也是食物中重要的风味物质，天然小分子糖的种类和含量直接决定了蔬菜、水果等众多食物的理化性质和色、香、味等感官品质，因此，单糖、寡糖的测定是食用菌分析中主要的项目之一。传统的单糖、寡糖含量的测定多采用纸色谱法、硅胶G薄层色谱法、衍生化气相色谱法、气相色谱-质谱法、直接示差折光检测或衍生光度检测的高效液相色谱法、毛细管电泳法进行单糖、寡糖组成分析。然而这些方法都存在操作复杂、需要衍生化处理、灵敏度较低和选择性差等缺点。离子色谱-电化学检测是近年来发展起来的仪器分析方法，可以直接分离分析测定氨基酸和糖类化合物，适用于单糖、寡糖、二糖、小分子寡糖的测定，其优势有样品前处理简单；无需衍生；
分析时间短；超小的样品进样体积；由于柱效高，可实现同一分离条件对多种样品中多组分的分析。

发明内容

[0003] 本发明的目的在于：针对目前食用菌中所含单糖、寡糖种类及含量检测存在的问题，提供一种单糖、寡糖快速检测方法。

[0004] 为实现上述发明目的，本发明采用如下技术方案：一种检测食用菌中单糖、寡糖的快速检测法，其特征是仪器选用戴安公司的ICS-3000型离子色谱仪，柱子选用戴安公司的MA1柱，流动相为去离子水和600mmol/L的氢氧化钠溶液，两者比例为20∶80，流速为0.4mL/min。将食用菌干样中的单糖、寡糖通过50℃超声提取溶于水相，然后稀释合适倍数后过滤上机分析，将获得的峰的迁移时间与标准品图谱比较，即可知道样品中含有的单糖、寡糖种类，将获得的峰面积带入各个单糖、寡糖的标准曲线即可知道单糖、寡糖的含量。

[0005] 本发明与其他离子色谱检测方式相比可同时检测七种单糖、寡糖，大大扩大了可检测的样品种类。同时本发明解决了海藻糖峰和甘露醇峰在其他离子色谱分离模式中不能完全分离的难题。常用的糖类离子色谱分析方法不能使海藻糖和甘露醇完全分离，这就造成了不能对同一产品中的这两种单糖准确定量的问题。本发明方法的建立使食用菌样品特别是双孢蘑菇样品中这两种糖的含量得以准确测定，能为样品的营养分析及检测提供准确的分析方法，本发明的这些特别之处在国内外文献中未见报道。

[0006] 本发明与其他离子色谱法的不同之处见表1：

[0007] 表1本发明与其他离子色谱方法的比较

[0008]本发明 其他离子色谱法
色谱柱 MA1 PA20
流动相使用NaOH浓度 600mM 200mM
流动相中去离子水与NaOH比例 20∶80 1∶99
能否使海藻糖与甘露醇完全分离 能 否
检测单糖种类 7种 3～5种
应用范围 食用菌、水果、蔬菜 水果、蔬菜

[0009] 检测对象：本发明主要针对食用菌中的单糖、寡糖进行检测，同时也可以对水果蔬菜中所含的单糖、寡糖进行检测。

[0010] 检测范围：本发明主要应用于双孢蘑菇、杏鲍菇、白灵菇等食用菌，也可应用于某些水果和蔬菜。

附图说明

[0011] 图1是七种单糖、寡糖2.5μg/mL浓度进样的离子色谱谱图。

具体实施方式

[0012] 取产地山东、浙江、武汉、上海和福建的五份双孢蘑菇样品，分别按下述操作过程进行分析检测。

[0013] 将样品70℃烘干粉碎。取0.1g干样，加入10ml去离子水，在50℃下超声提取一小时，将提取液进行1000倍稀释，稀释液经滤头过滤，取1ml滤液上机检测，检测结果见表2。

[0014] 表2不同产地双孢蘑菇干样中单糖、寡糖种类及含量检测结果

[0015]

[0016] 该方法在0.1μg/ml～20μg/ml范围内线性良好，七种糖标准曲线的R2在0.9975～0.9999之间，检出限为0.025μg/ml。

[0017] 本发明的保护范围并不限于实施例中所作的描述，不偏离本发明方案中心的修改都属于本发明的保护范围。