用于细胞内药物传递的星形聚合物纳米药物载体制剂及其制备方法

摘要

本发明公开了一种用于细胞内药物传递的星形聚合物纳米药物载体制剂，其特征在于所述纳米药物载体制剂以其组分的重量份数计包括：药物1～20重量份；两亲性星形嵌段共聚物10～200重量份；有机溶剂20～500重量份；所述载体中两亲性星形嵌段共聚物为含端羟基的星形脂肪族聚酯通过二硫键连接亲水段形成的两亲性星形嵌段共聚物。利用这种共聚物在水溶液中的自组装行为，采用透析法可以制备内部疏水层包裹药物的纳米颗粒。这种纳米药物载体进入细胞后，能利用肿瘤细胞内的还原性环境促使其亲水性壳层选择性地脱落，从而实现药物在肿瘤细胞内的定域释放。

权利要求

1.一种制备用于细胞内药物传递的星形聚合物纳米药物载体制剂的方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：

(1)将摩尔比为1∶40～800的多羟基小分子和脂肪族环酯单体加入到聚合管中，在无水无氧条件下，按照单体总摩尔量的0.01～1％加入催化剂辛酸亚锡，在氩气或氮气保护下，进行本体聚合或溶剂存在下的溶液聚合，聚合温度为70～150℃，聚合时间为6～48小时，将制得的聚合物沉淀，过滤，洗涤，真空干燥，得到含端羟基的星形脂肪族聚酯；

(2)将聚乙二醇单甲醚、二硫代二元酸、N，N-二环己基碳酰亚胺和4-二甲氨基吡啶DMAP按摩尔比例为1∶1～20∶1～20∶0.2～5的比例溶解在干燥的有机溶剂中，在

0～90℃条件下搅拌反应6～72小时；反应结束后，过滤除去沉淀物，浓缩反应溶液，然后将反应溶液倒入5～50倍量的石油醚或乙醚中，沉淀，过滤，真空干燥，得到含端羧基和二硫键的聚乙二醇单甲醚MPEG-SS-COOH；

(3)将含端羟基的星形脂肪族聚酯、含端羧基和二硫键的聚乙二醇单甲醚、N，N-二环己基碳酰亚胺和4-二甲氨基吡啶按1∶3～30∶3～30∶0.6～3的摩尔比例溶解在干燥的有机溶剂中，在0～90℃条件下搅拌反应6～72小时；反应结束后，过滤除去沉淀物，浓缩反应溶液，然后将反应溶液倒入5～50倍量的石油醚或乙醚中，沉淀，过滤；将得到的产物用甲醇和苯/正己烷混合溶剂萃取，收集苯/正己烷混合溶剂相，减压蒸馏除去溶剂后，得到聚乙二醇和脂肪族聚酯的两亲性星形嵌段共聚物；

(4)称取两亲性星形嵌段共聚物10-200份，药物1-20份，有机溶剂20-500份，将药物和高分子按比例完全溶解于有机溶剂中，形成透明的油相；将制得的溶液置于透析袋中，然后在10-500倍量的水中透析12-72小时，每2-6小时换透析液一次；透析结束后，将透析袋中形成的载药胶束水溶液制成所需剂型的制剂。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(1)中所述的多羟基小分子为具有三个以上羟基的小分子化合物，选自丙三醇、季戊四醇、双季戊四醇或环糊精。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(1)中所述的脂肪族环酯单体选自L-丙交酯、D-丙交酯、D，L-丙交酯、乙交酯、ε-己内酯、丁内酯、δ-戊内酯、γ-戊内酯、丙内酯、对二氧(杂)环己酮、1，5-二氧杂环戊酮或碳酸环丙酯中的一种或两种以上的任意组合。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(1)中所述制备的星形脂肪族聚酯分子量为1500～50000，步骤(2)中所述的聚乙二醇单甲醚分子量为500～10000。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(2)中所述的二硫代二元酸的结构通式为：HOOC-R-SS-R-COOH，其中R基团选自CH2、CH2CH2和CH2CH2CH2中的一种。

说明书

用于细胞内药物传递的星形聚合物纳米药物载体制剂及其

制备方法

技术领域

[0001] 本发明属于高分子材料和医学工程领域，具体涉及一种可用于细胞内药物传递的星形聚合物纳米药物载体及其制备方法。

背景技术

[0002] 癌症是一类严重危害人类健康的疾病，因而针对癌症治疗的研究工作一直是人们关注的热点。化学治疗是癌症治疗三大手段(化疗、放疗和手术切割)中最常用的一种方法，化疗对于癌症的治疗及控制癌细胞的转移具有重要意义，但是通过小分子直接给药方式实施的化疗也面临着问题，比如：裸露的药物在体内循环时具有很强的毒副作用；药物在体内的分布缺乏选择性；药物的生物利用度过低；多数抗肿瘤药物的水溶性较差；药物在体内新陈代谢快，半衰期短，体内浓度很快降低而影响疗效，故需要大剂量给药，而过高的药物浓度又会增强药物的副作用等。

[0003] 针对直接给药的这些缺点，药物载体开始被广泛研究。其中，利用两亲性共聚物在水溶液中形成的纳米胶束作为药物载体的研究备受人们的关注。在自组装形成胶束的过程中，两亲性聚合物的疏水链段会形成胶束的内核，亲水链段会形成胶束的外壳。胶束疏水的内核可以用来负载疏水性的抗肿瘤药物，降低药物在传递过程中的毒副作用。两亲性聚合物胶束具有亲水性且流动性很好的外壳，可以有效提高药物的水溶性，并且可以阻止肿瘤组织血管内皮细胞与疏水性药物间的疏水结合作用，从而使药物能利用肿瘤组织血管壁的高通透性顺利地进入肿瘤组织，提高药物的生物利用度。

[0004] 然而常规的聚合物纳米胶束作为药物载体也面临着一些不足。例如，化疗药物一般需要进入肿瘤细胞内后才能产生疗效，而传统纳米载体的药物释放行为在细胞内外的差异没有明显区别，药物较多在细胞外就已经释放，导致药物的生物利用度较低，副作用较大。即使目前研究中的靶向性和刺激响应型纳米胶束也不能区分细胞内和细胞外环境，因此研究能在肿瘤细胞内定域释放的智能型聚合物纳米胶束作为药物载体具有重大意义。

[0005] 二硫键(S-S)是一种对还原性环境非常敏感的弱共价键，利用二硫键连接的嵌段共聚物在还原性环境中会发生化学键(S-S)的断裂，各个链段会分裂成独立的聚合物链(Biomaterials，2009，30：6358-6366)。而肿瘤细胞中谷胱甘肽的浓度比正常细胞高，能够提供还原环境，使得S-S键发生断裂(Biomacromolecules，2010，11：848-854)。采用二硫键将嵌段共聚物的亲水链段和疏水链段连接起来，利用这种共聚物制备的胶束用作药物载体，当药物载体进入肿瘤细胞后，能够在细胞内还原性环境的影响下，胶束的亲水性壳层选择性地脱落，将包裹药物的内核裸露出来，从而实现细胞内的药物释放速度远远大于细胞外的释放速度，因此可以极大提高药物的生物利用度，提高肿瘤化疗的效果。

[0006] 聚乙二醇(PEG)具有优良的生物相容性和血液相容性、抗蛋白性，还具有良好的亲水性，并被美国FDA批准可用于人体。聚乙二醇与水接触时界面自由能低，在水中具有延展结构，因此具有非常高的链流动性，可提供一定的空间稳定效应，因而被广泛用作聚合物胶束中的亲水性组分。脂肪族聚酯，例如聚乙交酯(PGA)、聚丙交酯或聚乳酸(PLA)和聚己内酯(PCL)等，是目前应用广泛的一类生物可降解和可吸收材料。脂肪族聚酯具有低免疫性，良好的生物降解性和生物相容性，所以被广泛应用于生物医学和医药领域，如：骨折固定材料、手术缝合线、组织工程支架材料和药物缓控释载体材料等。星形聚合物由于其三维结构和独特的性质获得了人们的广泛关注，星形结构聚合物具有较小的流体力学体积，因而利用这种结构的两亲性共聚物制备的胶束也具有较低的临界胶束浓度(CMC)，从而有较好的胶束稳定性。进一步地，有些星形聚合物还能形成更加稳定的单分子胶束。这些共聚物胶束有望解决聚合物胶束在生理环境下易解体的问题，提高用作药物载体的纳米颗粒的稳定性(Macromolecules，1993，26：4324-4331；Pharmaceut Res，2006，23：1-30)。

发明内容

[0007] 本发明目的在于提供一种用于细胞内药物传递的星形聚合物纳米药物载体制剂，解决了现有技术中聚合物纳米胶束作为药物载体难以进入到靶细胞内释放导致药物的生物利用度较低，副作用较大等问题。

[0008] 为了解决现有技术中的这些问题，本发明提供的技术方案是：

[0009] 一种用于细胞内药物传递的星形聚合物纳米药物载体制剂，其特征在于所述纳米药物载体制剂以其组分的重量份数计包括：

[0010] 药物 1～20重量份；

[0011] 两亲性星形嵌段共聚物 10～200重量份；

[0012] 有机溶剂 20～500重量份；

[0013] 所述载体中两亲性星形嵌段共聚物为含端羟基的星形脂肪族聚酯通过二硫键连接亲水段形成的两亲性星形嵌段共聚物。

[0014] 优选的，所述有机溶剂选自丙酮、甲醇、乙醇、四氢呋喃、二氧六环、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二乙基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、二甲基亚砜的一种或两种以上的任意混合。

[0015] 优选的，所述药物选自阿霉素、紫杉醇、氟尿嘧啶、氨甲喋呤、喜树碱、它莫西芬、灰黄霉素、黄体酮、前列地尔、氯霉素、甲糖宁、利福平、表柔比星、普鲁泊福、卤泛曲林等中的一种或两种以上的任意组合。

[0016] 优选的，所述制剂的剂型为冻干粉针剂，所述制剂的粒径范围是10-200纳米。

[0017] 本发明还提供了一种制备用于细胞内药物传递的星形聚合物纳米药物载体制剂的方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：

[0018] (1)将摩尔比为1∶40～800的多羟基小分子和脂肪族环酯单体加入到聚合管中，在无水无氧条件下，按照单体总摩尔量的0.01～1％加入催化剂辛酸亚锡，在氩气或氮气保护下，进行本体聚合或溶剂存在下的溶液聚合，聚合温度为70～150℃，聚合时间为6～48小时，将制得的聚合物沉淀，过滤，洗涤，真空干燥，得到含端羟基的星形脂肪族聚酯；

[0019] (2)将聚乙二醇单甲醚、二硫代二元酸、N，N-二环己基碳酰亚胺和4-二甲氨基吡啶DMAP按摩尔比例为1∶1～20∶1～20∶0.2～5的比例溶解在干燥的有机溶剂中，在0～90℃条件下搅拌反应6～72小时。反应结束后，过滤除去沉淀物，浓缩反应溶液，然后将反应溶液倒入5～50倍量的石油醚或乙醚中，沉淀，过滤，真空干燥，得到含端羧基和二硫键的聚乙二醇单甲醚MPEG-SS-COOH；

[0020] (3)将含端羟基的星形脂肪族聚酯、含端羧基和二硫键的聚乙二醇单甲醚、N，N-二环己基碳酰亚胺和4-二甲氨基吡啶按按1∶3～30∶3～30∶0.6～3的摩尔比例溶解在干燥的有机溶剂中，在0～90℃条件下搅拌反应6～72小时。反应结束后，过滤除去沉淀物，浓缩反应溶液，然后将反应溶液倒入5～50倍量的石油醚或乙醚中，沉淀，过滤。将得到的产物用甲醇和苯/正己烷混合溶剂萃取，收集苯/正己烷混合溶剂相，减压蒸馏除去溶剂后，得到聚乙二醇和脂肪族聚酯的两亲性星形嵌段共聚物；

[0021] (4)称取两亲性星形嵌段共聚物10-200份，药物1-20份，有机溶剂20-500份，将药物和高分子按比例完全溶解于有机溶剂中，形成透明的油相；将制得的溶液置于透析袋中，然后在10-500倍量的水中透析12-72小时，每2-6小时换透析液一次；透析结束后，将透析袋中形成的载药胶束水溶液制成所需剂型的制剂。

[0022] 优选的，步骤(1)中所述的多羟基小分子为具有三个以上羟基的小分子化合物，选自丙三醇、季戊四醇、双季戊四醇或环糊精。

[0023] 优选的，步骤(1)中所述的脂肪族环酯单体选自L-丙交酯、D-丙交酯、D，L-丙交酯、乙交酯、ε-己内酯、丁内酯、δ-戊内酯、γ-戊内酯、丙内酯、对二氧(杂)环己酮、1，5-二氧杂环戊酮或碳酸环丙酯中的一种或两种以上的任意组合。

[0024] 优选的，步骤(1)中所述制备的星形脂肪族聚酯分子量为1500～50000，步骤(2)中所述的聚乙二醇单甲醚分子量为500～10000。

[0025] 优选的，步骤(2)中所述的二硫代二元酸的结构通式为：HOOC-R-SS-R-COOH，其中R基团选自CH2、CH2CH2和CH2CH2CH2中的一种。

[0026] 本发明技术方案通过多羟基小分子引发脂肪族环酯单体的开环聚合制备星形聚酯，然后利用二硫键将聚乙二醇连接到聚酯的分子链末端，形成两亲性的星形嵌段共聚物。利用这种共聚物在水溶液中的自组装行为，采用透析法可以制备内部疏水层包裹药物的纳米颗粒，用于实现抗癌药物在细胞的内定域释放。以多羟基小分子引发脂肪族环酯单体的开环聚合制备星形脂肪族聚酯；通过酯化反应在聚乙二醇单甲醚的羟基端连接上二硫键和羧基，然后将这种改性后的聚乙二醇与含端羟基的星形聚酯进行大分子间的酯化反应，得到两亲性的星形嵌段共聚物，这种共聚物的亲水链段与疏水链段由二硫键桥接。利用这种共聚物在水溶液中的自组装行为，采用透析法可以制备内部疏水层包裹药物的纳米颗粒。
这种纳米药物载体进入细胞后，能利用肿瘤细胞内的还原性环境促使其亲水性壳层选择性地脱落，从而实现药物在肿瘤细胞内的定域释放。

[0027] 本发明技术方案中进行制备可用于细胞内药物传递的星形聚合物纳米药物载体制剂时，可以采用如下步骤：

[0028] a)含端羟基的星形脂肪族聚酯的合成

[0029] 将干燥的多羟基小分子和脂肪族环酯单体按1∶40～800的摩尔比加入到聚合管中，在无水无氧条件下，按照单体总摩尔量的0.01～1％加入催化剂辛酸亚锡，在氩气或氮气保护下，进行本体聚合或溶剂(苯或甲苯)存在下的溶液聚合，聚合温度为70～150℃，聚合时间为6～48小时，将制得的聚合物沉淀，过滤，洗涤，真空干燥，得到含端羟基的星形脂肪族聚酯。

[0030] 以上反应的方程式如下(以六臂星形脂肪族聚酯的开环聚合为例)：

[0031]

[0032] b)含端羧基和二硫键的聚乙二醇单甲醚的合成

[0033] 将聚乙二醇单甲醚(MPEG)、二硫代二元酸(DTDA)、N，N-二环己基碳酰亚胺(DCC)和4-二甲氨基吡啶(DMAP)按1∶1～20∶1～20∶0.2～5的比例(摩尔比)溶解在干燥的有机溶剂(二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃或N，N-二甲基甲酰胺等)中，在0～90℃条件下搅拌反应6～72小时。反应结束后，过滤除去沉淀物，浓缩反应溶液，然后将反应溶液倒入5～50倍量的石油醚或乙醚中，沉淀，过滤，真空干燥，得到含端羧基和二硫键的聚乙二醇单甲醚(MPEG-SS-COOH)。

[0034] 以上反应的方程式如下：

[0035]

[0036] c)两亲性星形嵌段共聚物的合成

[0037] 将含端羟基的星形脂肪族聚酯、MPEG-SS-COOH、DCC和DMAP按1∶3～30∶3～30∶0.6～3的比例(摩尔比)溶解在干燥的有机溶剂(二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃或N，N-二甲基甲酰胺等)中，在0～90℃条件下搅拌反应6～72小时。反应结束后，过滤除去沉淀物，浓缩反应溶液，然后将反应溶液倒入5～50倍量的石油醚或乙醚中，沉淀，过滤。将得到的产物用甲醇和苯/正己烷混合溶剂(1～3∶1，v/v)萃取，其中甲醇被用来萃取除去过量未反应的MPEG-SS-COOH，收集苯/正己烷混合溶剂相，减压蒸馏除去溶剂后，得到粉末状固体产物即为聚乙二醇和脂肪族聚酯的两亲性星形嵌段共聚物。

[0038] 以上反应的方程式如下(以六臂星形聚合物为例)：

[0039]

[0040] d)纳米药物载体的制备：

[0041] 称取药物(如抗肿瘤药物喜树碱)1-20份，两亲性星形嵌段共聚物10-200份，有机溶剂20-500份，将药物和高分子按比例完全溶解于有机溶剂中，形成透明的油相；将制得的溶液置于透析袋中，然后在10-500倍量的水中透析12-72小时，每2-6小时换透析液一次。透析结束后，将透析袋中形成的载药胶束水溶液冻干成粉状固体，其粒径范围是10-200纳米。

[0042] 步骤中所述的多羟基小分子可以是但不局限于丙三醇、季戊四醇、双季戊四醇或环糊精等具有三个以上羟基的小分子化合物。所述的脂肪族环酯单体可以是但不局限于L-丙交酯、D-丙交酯、D，L-丙交酯、乙交酯、ε-己内酯、丁内酯、δ-戊内酯、γ-戊内酯、丙内酯、对二氧(杂)环己酮、1，5-二氧杂环戊酮或碳酸环丙酯中的一种或几种。所述的星形脂肪族聚酯分子量为1500～50000，步骤(b)中所述的聚乙二醇单甲醚分子量为500～10000。所述的二硫代二元酸(DTDA)结构HOOC-R-SS-R-COOH中的R基团可以是但不局限于CH2、CH2CH2和CH2CH2CH2中的一种。所述的有机溶剂可以是但不局限于丙酮、甲醇、乙醇、四氢呋喃、二氧六环、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二乙基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、二甲基亚砜，或它们的混合物。所述难溶于水的药物可以是但不局限于阿霉素、紫杉醇、氟尿嘧啶、氨甲喋呤、喜树碱、它莫西芬、灰黄霉素、黄体酮、前列地尔、氯霉素、甲糖宁、利福平、表柔比星、普鲁泊福、卤泛曲林等中的一种或几种。

[0043] 相对于现有技术中的方案，本发明的优点是：

[0044] 本发明技术方案采用的原料来源广泛，所用的聚乙二醇和环酯类单体均可工业化生产，合成方法简单易行；合成的星形嵌段共聚物同时具备两亲性、生物相容性、可降解和可吸收性质；由于星形聚合物较低的流体力学体积，利用这种星形共聚物制备的胶束，具有更好的胶束稳定性，有利于药物的包封和传递；共聚物的亲水段与疏水段通过二硫键连接，在肿瘤细胞内的还原性环境中能够断裂，从而实现负载药物的定域释放。

[0045] 综上所述，本发明提出了一种可用于细胞内药物传递的星形聚合物纳米药物载体的制备方法，所述的星形聚合物是由具有良好生物相容性的聚乙二醇和脂肪族聚酯组成的两亲性星形嵌段共聚物。其中，亲水性的聚乙二醇链段与疏水性的脂肪族聚酯链段之间由二硫键(S-S)连接。利用这种两亲性星形嵌段共聚物制备的胶束载体，在血液中具有比相应的线形共聚物胶束更好的稳定性，能够更好的保护和传递药物到达特定的肿瘤部位；当这种载药胶束进入肿瘤细胞后，在谷胱甘肽形成的还原性环境中，二硫键会发生断裂，从而造成胶束壳层亲水性聚乙二醇链段的选择性脱落，这时包裹药物的内核就会裸露出来，将药物定域的释放到肿瘤细胞内部，提高肿瘤化疗的效果。

附图说明

[0046] 下面结合附图及实施例对本发明作进一步描述：

[0047] 图1为实施例1制备的星形聚合物纳米药物载体的TEM照片。

具体实施方式

[0048] 以下结合具体实施例对上述方案做进一步说明。应理解，这些实施例是用于说明本发明而不限于限制本发明的范围。实施例中采用的实施条件可以根据具体厂家的条件做进一步调整，未注明的实施条件通常为常规实验中的条件。

[0049] 实施例1两亲性六臂星形嵌段共聚物纳米药物载体制剂的制备

[0050] a)将干燥的双季戊四醇和ε-己内酯按1∶120的摩尔比加入到聚合管中，在无水无氧条件下，按照单体总摩尔量的0.1％加入辛酸亚锡，在氮气保护下，在干燥的甲苯中进行溶液聚合，聚合温度为110℃，聚合时间为20小时，将制得的聚合物沉淀，过滤，洗涤，真空干燥，得到含端羟基的六臂星形聚己内酯(6sPCL)，数均分子量13000。

[0051] b)将分子量为2000的聚乙二醇单甲醚(MPEG)、二硫代二丙酸、N，N-二环己基碳酰亚胺(DCC)和4-二甲氨基吡啶(DMAP)按1∶5∶5∶1的比例(摩尔比)溶解在干燥的二氯甲烷中，在室温下搅拌反应48小时。反应结束后，过滤除去沉淀物，浓缩反应溶液，然后将反应溶液倒入20倍量的乙醚中，沉淀，过滤，真空干燥，得到含端羧基和二硫键的聚乙二醇单甲醚(MPEG-SS-COOH)。

[0052] c)将含端羟基的六臂星形聚己内酯(6sPCL)、MPEG-SS-COOH、DCC和DMAP按1∶9∶9∶0.8的比例(摩尔比)溶解在干燥的二氯甲烷中，在室温下搅拌反应72小时。反应结束后，过滤除去沉淀物，浓缩反应溶液，然后将反应溶液倒入20倍量的乙醚中，沉淀，过滤。将得到的产物用甲醇和苯/正己烷混合溶剂(1.3∶1，v/v)萃取，收集苯/正己烷混合溶剂相，减压蒸馏除去溶剂后，得到粉末状固体产物即为聚乙二醇和聚己内酯的两亲性星形嵌段共聚物(6sPCL-SS-PEG)。

[0053] d)称取50mg两亲性星形嵌段共聚物6sPCL-SS-PEG和10mg阿霉素，用60mL四氢呋喃溶解，室温下超声15min，使聚合物和药物充分分散和溶解，形成透明的有机相；将制得的有机相溶液置于透析袋中，然后在1L的水中透析24小时，每3小时换透析液一次。透析结束后，收集透析袋中形成的载药胶束水溶液，然后冷冻干燥20小时，得到粉末状固体。TEM照片显示纳米颗粒的平均粒径为32nm，粒子呈球形，分散比较均匀(见附图1所示)。

[0054] 实施例2两亲性四臂星形嵌段共聚物纳米药物载体制剂的制备

[0055] a)将干燥的季戊四醇和L-丙交酯按1∶70的摩尔比加入到聚合管中，在无水无氧条件下，按照单体总摩尔量的0.1％加入辛酸亚锡，在氮气保护下进行本体聚合，聚合温度为120℃，聚合时间为24小时，将制得的聚合物沉淀，过滤，洗涤，真空干燥，得到含端羟基的四臂星形聚乳酸(4sPLLA)，数均分子量9600。

[0056] b)将分子量为1500的聚乙二醇单甲醚(MPEG)、二硫二丁酸、DCC和DMAP按1∶4∶4∶1的比例(摩尔比)溶解在干燥的二氯甲烷中，在40℃下搅拌反应40小时。
反应结束后，过滤除去沉淀物，浓缩反应溶液，然后将反应溶液倒入25倍量的乙醚中，沉淀，过滤，真空干燥，得到含端羧基和二硫键的聚乙二醇单甲醚(MPEG-SS-COOH)。

[0057] c)将含端羟基的四臂星形聚乳酸(4sPLLA)、MPEG-SS-COOH、DCC和DMAP按1∶6∶6∶0.6的比例(摩尔比)溶解在干燥的氯仿中，在室温下搅拌反应60小时。反应结束后，过滤除去沉淀物，浓缩反应溶液，然后将反应溶液倒入25倍量的乙醚中，沉淀，过滤。将得到的产物用甲醇和苯/正己烷混合溶剂(1.5∶1，v/v)萃取，收集苯/正己烷混合溶剂相，减压蒸馏除去溶剂后，得到粉末状固体产物即为聚乙二醇和聚乳酸的两亲性星形嵌段共聚物(4sPLLA-SS-PEG)。

[0058] d)称取30mg两亲性星形嵌段共聚物4sPLLA-SS-PEG和8mg紫杉醇，用20mL N，N-二甲基甲酰胺和20mL四氢呋喃的混合溶剂溶解，室温下超声10min，使聚合物和药物充分分散和溶解，形成透明的有机相；将制得的有机相溶液置于透析袋中，然后在500mL的水中透析30小时，每4小时换透析液一次。透析结束后，收集透析袋中形成的载药胶束水溶液，然后冷冻干燥24小时，得到粉末状固体。TEM照片显示纳米颗粒的平均粒径为64nm，粒子呈球形，分散比较均匀。

[0059] 实施例3两亲性三臂星形嵌段共聚物纳米药物载体制剂的制备

[0060] a)将干燥的丙三醇和D，L-丙交酯按1∶50的摩尔比加入到聚合管中，在无水无氧条件下，按照单体总摩尔量的0.15％加入辛酸亚锡，在氮气保护下进行本体聚合，聚合温度为125℃，聚合时间为22小时，将制得的聚合物沉淀，过滤，洗涤，真空干燥，得到含端羟基的三臂星形聚乳酸(3sPLA)，数均分子量6800。

[0061] b)将分子量为5000的聚乙二醇单甲醚(MPEG)、二硫二丁酸、DCC和DMAP按1∶6∶6∶1的比例(摩尔比)溶解在干燥的四氢呋喃中，在35℃下搅拌反应45小时。
反应结束后，过滤除去沉淀物，浓缩反应溶液，然后将反应溶液倒入30倍量的石油醚中，沉淀，过滤，真空干燥，得到含端羧基和二硫键的聚乙二醇单甲醚(MPEG-SS-COOH)。

[0062] c)将含端羟基的三臂星形聚乳酸(3sPLLA)、MPEG-SS-COOH、DCC和DMAP按1∶4∶4∶0.3的比例(摩尔比)溶解在干燥的四氢呋喃中，在室温下搅拌反应70小时。反应结束后，过滤除去沉淀物，浓缩反应溶液，然后将反应溶液倒入40倍量的乙醚中，沉淀，过滤。将得到的产物用甲醇和苯/正己烷混合溶剂(2∶1，v/v)萃取，收集苯/正己烷混合溶剂相，减压蒸馏除去溶剂后，得到粉末状固体产物即为聚乙二醇和聚乳酸的两亲性星形嵌段共聚物(3sPLLA-SS-PEG)。

[0063] d)称取80mg两亲性星形嵌段共聚物3sPLLA-SS-PEG和20mg喜树碱，用100mL N，N-二甲基甲酰胺溶解，室温下超声15min，使聚合物和药物充分分散和溶解，形成透明的有机相；将制得的有机相溶液置于透析袋中，然后在1.5L水中透析48小时，每2.5小时换透析液一次。透析结束后，收集透析袋中形成的载药胶束水溶液，然后冷冻干燥18小时，得到粉末状固体。TEM照片显示纳米颗粒的平均粒径为110nm，粒子呈球形，分散比较均匀。

[0064] 实施例4两亲性四臂星形嵌段共聚物纳米药物载体制剂的制备

[0065] a)将干燥的季戊四醇、L-丙交酯和ε-己内酯按1∶40∶40的摩尔比加入到聚合管中，在无水无氧条件下，按照单体总摩尔量的0.2％加入辛酸亚锡，在氩气保护下进行本体聚合，聚合温度为125℃，聚合时间为22小时，将制得的聚合物沉淀，过滤，洗涤，真空干燥，得到含端羟基的聚乳酸与聚己内酯的四臂星形共聚物(4sPLACL)，数均分子量9600。

[0066] b)将分子量为3000的聚乙二醇单甲醚(MPEG)、二硫二乙酸、DCC和DMAP按1∶7∶7∶1的比例(摩尔比)溶解在干燥的四氢呋喃中，在25℃下搅拌反应60小时。
反应结束后，过滤除去沉淀物，浓缩反应溶液，然后将反应溶液倒入22倍量的石油醚中，沉淀，过滤，真空干燥，得到含端羧基和二硫键的聚乙二醇单甲醚(MPEG-SS-COOH)。

[0067] c)将含端羟基的四臂星形共聚物(4sPLACL)、MPEG-SS-COOH、DCC和DMAP按1∶7∶7∶0.7的比例(摩尔比)溶解在干燥的氯仿中，在40℃下搅拌反应36小时。反应结束后，过滤除去沉淀物，浓缩反应溶液，然后将反应溶液倒入23倍量的乙醚中，沉淀，过滤。将得到的产物用甲醇和苯/正己烷混合溶剂(1∶1，v/v)萃取，收集苯/正己烷混合溶剂相，减压蒸馏除去溶剂后，得到粉末状固体产物即为聚乙二醇和聚乳酸/聚己内酯共聚物的两亲性星形嵌段共聚物(4sPLACL-SS-PEG)。

[0068] d)称取40mg两亲性星形嵌段共聚物4sPLACL-SS-PEG和10mg氨甲喋呤，用50mL四氢呋喃溶解，室温下超声10min，使聚合物和药物充分分散和溶解，形成透明的有机相；将制得的有机相溶液置于透析袋中，然后在800mL水中透析30小时，每4小时换透析液一次。透析结束后，收集透析袋中形成的载药胶束水溶液，然后冷冻干燥28小时，得到粉末状固体。TEM照片显示纳米颗粒的平均粒径为92nm，粒子呈球形，分散比较均匀。

[0069] 实施例5两亲性六臂星形嵌段共聚物纳米药物载体制剂的制备

[0070] a)将干燥的双季戊四醇、D，L-丙交酯和乙交酯按1∶80∶40的摩尔比加入到聚合管中，在无水无氧条件下，按照单体总摩尔量的0.1％加入辛酸亚锡，在氩气保护下进行本体聚合，聚合温度为120℃，聚合时间为30小时，将制得的聚合物沉淀，过滤，洗涤，真空干燥，得到含端羟基的聚乳酸与聚乙交酯的六臂星形共聚物(6sPLGA)，数均分子量15000。

[0071] b)将分子量为6000的聚乙二醇单甲醚(MPEG)、二硫二乙酸、DCC和DMAP按1∶3∶3∶1的比例(摩尔比)溶解在干燥的四氢呋喃中，在45℃下搅拌反应30小时。
反应结束后，过滤除去沉淀物，浓缩反应溶液，然后将反应溶液倒入28倍量的乙醚中，沉淀，过滤，真空干燥，得到含端羧基和二硫键的聚乙二醇单甲醚(MPEG-SS-COOH)。

[0072] c)将含端羟基的六臂星形共聚物(6sPLGA)、MPEG-SS-COOH、DCC和DMAP按1∶10∶10∶1的比例(摩尔比)溶解在干燥的氯仿中，在45℃下搅拌反应48小时。反应结束后，过滤除去沉淀物，浓缩反应溶液，然后将反应溶液倒入30倍量的乙醚中，沉淀，过滤。将得到的产物用甲醇和苯/正己烷混合溶剂(1.7∶1，v/v)萃取，收集苯/正己烷混合溶剂相，减压蒸馏除去溶剂后，得到粉末状固体产物即为聚乙二醇和聚乳酸/聚乙交酯共聚物的两亲性星形嵌段共聚物(6sPLGA-SS-PEG)。

[0073] d)称取15mg两亲性星形嵌段共聚物6sPLGA-SS-PEG和4mg它莫西芬，用10mL丙酮与10mL四氢呋喃的混合溶剂溶解，室温下超声13min，使聚合物和药物充分分散和溶解，形成透明的有机相；将制得的有机相溶液置于透析袋中，然后在400mL水中透析36小时，每4小时换透析液一次。透析结束后，收集透析袋中形成的载药胶束水溶液，然后冷冻干燥26小时，得到粉末状固体。TEM照片显示纳米颗粒的平均粒径为67nm，粒子呈球形，分散比较均匀。

[0074] 上述实例只为说明本发明的技术构思及特点，其目的在于让熟悉此项技术的人是能够了解本发明的内容并据以实施，并不能以此限制本发明的保护范围。凡根据本发明精神实质所做的等效变换或修饰，都应涵盖在本发明的保护范围之内。