本发明涉及一种从藤茶中提取二氢杨梅素、藤茶多糖和藤茶多酚的方法，加工步骤中包含有：a.原料粉碎：将新鲜藤茶茎叶干燥、粉碎；b.浸提：热水提取、离心收集上清液；c.浓缩：将上清液I减压浓缩后，冷却静置，离心收集沉淀和上清液II；d.提取二氢杨梅素：将沉淀经重结晶真空干燥，得二氢杨梅素；e.加醇：将上清液II减压浓缩，醇沉，离心收集沉淀和上清液III；f.提取粗多糖：将沉淀经纯化、真空干燥或喷雾干燥，得藤茶多糖；g.提取藤茶多酚：将上清液III减压浓缩，以乙酸乙酯萃取、浓缩、干燥得藤茶多酚，或以AB-8树脂吸附、蒸馏水洗脱后，以乙醇洗脱收集洗脱液，浓缩、真空干燥得藤茶多酚。该方法成本低，产品得率较高环保，适合工业化连续生产，可实现藤茶资源的综合开发利用和经济效益的提高。
1.一种从藤茶中提取二氢杨梅素、藤茶多糖和藤茶多酚的方法，其特征在于加工步骤中包含有：a.原料粉碎：将新鲜藤茶茎叶干燥、粉碎；
b.浸提：用原料粉末∶清水以1∶8～12料液比，在温度为90～100℃浸泡30～
c.浓缩：将上清液I减压浓缩静置结晶，分别收集沉淀A和上清液II；
d.提取二氢杨梅素：将沉淀A加水重结晶处理，再对结晶物干燥，得二氢杨梅素产品；
e.加醇：将浓缩步骤的上清液II加入乙醇，边加乙醇边搅拌，静置后，分别收集沉淀B和上清液III；
f.提取粗多糖：将沉淀B经乙醇洗涤后，得藤茶水溶性粗多糖；
g.提取藤茶多酚：将加醇步骤的上清液III减压浓缩，回收乙醇，收集浓缩的水溶液，用乙酸乙酯萃取，再将乙酸乙酯萃取相浓缩、干燥可得到藤茶多酚产品；或将浓缩的水溶液，经AB-8大孔树脂吸附→洗脱去杂→洗脱，收集洗脱液并减压浓缩，回收乙醇，浓缩液干燥得到藤茶多酚产品。
2.按照权利要求1所述的一种从藤茶中提取二氢杨梅素、藤茶多糖和藤茶多酚的方法，其特征在于所述的加工步骤中包含有：a.原料粉碎：将新鲜藤茶茎叶干燥、粉碎；
b.浸提：用原料粉末∶清水以1∶8～12料液比，在温度为90～100℃浸泡30～
40min，趁热由滤布过滤后、再以4000rpm离心15min，收集上清液I，对滤渣重复提取1次，合并上清液I；
c.浓缩：将上清液I减压浓缩，在4℃下静置10-15小时，结晶后以4000rpm离心
d.提取二氢杨梅素：将沉淀A经2～3次加水重结晶处理，再对结晶物于35～45℃真空干燥，得二氢杨梅素产品；
e.加醇：将浓缩步骤的上清液II在50～60℃下减压浓缩至原体积的1/3～1/5，再加入3倍体积的95％乙醇，边加乙醇边搅拌，放置8～24h后，4000rpm离心15min，分别收集沉淀B和上清液III； f.提取粗多糖：将沉淀B经95％乙醇洗涤后，得藤茶水溶性粗多糖；
g.提取藤茶多酚：将加醇步骤的上清液III减压浓缩，回收乙醇，收集浓缩的水溶液，用乙酸乙酯萃取，再将乙酸乙酯萃取相浓缩、干燥可得到藤茶多酚产品；或将浓缩的水溶液，经AB-8大孔树脂动态吸附→蒸馏水洗脱去杂→70％乙醇液动态洗脱，或静置经AB-8树脂静态吸附→蒸馏水洗脱去杂→70％乙醇静态洗脱，收集洗脱液并减压浓缩，回收乙醇，浓缩液经低温真空干燥得到藤茶多酚产品。
3.按照权利要求2所述的一种从藤茶中提取二氢杨梅素、藤茶多糖和藤茶多酚的方法，其特征在于所述的加工步骤f.提取粗多糖中粗多糖可进一步进行纯化处理，粗多糖加水复溶→sevag法脱蛋白→用双氧水脱色→乙醇沉淀→离心，收集沉淀→加水复溶→乙醇沉淀→离心，收集沉淀于35～45℃真空干燥或加水溶解后喷雾干燥。
从藤茶中提取二氢杨梅素、藤茶多糖和藤茶多酚的方法
技术领域
[0001] 本发明属于天然产物提取技术领域，具体涉及一种从藤茶中提取二氢杨梅素、藤茶多糖和藤茶多酚的方法。
背景技术
[0002] 藤茶，一种以葡萄科蛇葡萄属植物——显齿蛇葡萄[Ampelopsis-grossedentata(Hand-Mazz)W.T.Wang]的嫩茎叶为原料制作的代用茶。该植物主要分布于湖北、湖南、广东、广西、江西、福建等省，资源丰富。民间对藤茶的传统应用历史和现代药理研究表明，藤茶中含有丰富的黄酮(以二氢杨梅素为主)、藤茶多糖、藤茶多酚等成分，并具有较强的抗氧化、降血糖等生物活性。目前关于藤茶生物活性成分的提取及生物活性研究主要集中在藤茶黄酮及其分离成分二氢杨梅素方面，相关的专利文献有：一种从藤茶中提取二氢杨梅素的方法CN200510032918.5，含有二氢杨梅素和杨梅素的组合物CN03138054.9，藤茶黄酮微囊的制备方法CN200510114557，等；非专利文献则较多(覃洁萍等，中国现代应用药学杂志，2000，No.3；李卫等，食品科学，2004，No.11，等)；其次是藤茶多糖方面的相关文献(罗祖友等，食品科学，2007，No.1，等)；关于藤茶多酚的研究报道不多(熊皓平等，中国食品学报，2004，No.3)。
[0003] 以藤茶为原料进行二氢杨梅素、藤茶多糖、藤茶多酚中的任何一种成分的单独提取，资源利用率不高，势必影响综合开发利用藤茶资源的经济效益。
发明内容
[0004] 本发明要解决的问题是提供一种采用同批原料分步提取分离二氢杨梅素、藤茶多糖和藤茶多酚的方法。
[0005] 本发明一种从藤茶中提取二氢杨梅素、藤茶多糖和藤茶多酚的方法，加工步骤中包含有：a.原料粉碎：将新鲜藤茶茎叶干燥、粉碎；b.浸提：用原料粉末∶清水以1∶8～12料液比，在温度为90～100℃浸泡30～40min，过滤收集上清液I；c.浓缩：将上清液I减压浓缩静置结晶，分别收集沉淀A和上清液II；d.提取二氢杨梅素：将沉淀A加水重结晶处理，再对结晶物干燥，得二氢杨梅素产品；e.加醇：将浓缩步骤的上清液II加入乙醇，边加乙醇边搅拌，静置后，分别收集沉淀B和上清液III；f.提取粗多糖：将沉淀B经乙醇洗涤后，得藤茶水溶性粗多糖；g.提取藤茶多酚：将加醇步骤的上清液III减压浓缩，回收乙醇，收集浓缩的水溶液，用乙酸乙酯萃取，再将乙酸乙酯萃取相浓缩、干燥可得到藤茶多酚产品；或将浓缩的水溶液，经AB-8大孔树脂吸附→洗脱去杂→洗脱，收集洗脱液并减压浓缩，回收乙醇，浓缩液干燥得到藤茶多酚产品。
[0006] 本发明一种从藤茶中提取二氢杨梅素、藤茶多糖和藤茶多酚的方法，其特征在于所述的加工步骤中包含有：a.原料粉碎：将新鲜藤茶茎叶干燥、粉碎；b.浸提：用原料粉末∶清水以1∶8～12料液比，在温度为90～100℃浸泡30～40min，趁热由滤布过滤后、再离心(4000rpm，15min)，收集上清液I，对滤渣重复提取1次，合并上清液I；c.浓缩：将上清液I减压浓缩，在4℃下静置10-15小时，结晶后以4000rpm离心15min，分别收集沉淀A和上清液II；d.提取二氢杨梅素：将沉淀A经2～3次加水重结晶处理，再对结晶物于
35～45℃真空干燥，得二氢杨梅素产品；e.加醇：将浓缩步骤的上清液II在50～60℃下减压浓缩至原体积的1/3～1/5，再加入3倍体积的95％乙醇，边加乙醇边搅拌，放置8～
24h后，4000rpm离心15min，分别收集沉淀B和上清液III；f.提取粗多糖：将沉淀B经95％乙醇洗涤后，得藤茶水溶性粗多糖；g.提取藤茶多酚：将加醇步骤的上清液III减压浓缩，回收乙醇，收集浓缩的水溶液，用乙酸乙酯萃取，再将乙酸乙酯萃取相浓缩、干燥可得到藤茶多酚产品；或将浓缩的水溶液，经AB-8大孔树脂动态吸附→蒸馏水洗脱去杂→70％乙醇液动态洗脱，或静置经AB-8树脂静态吸附→蒸馏水洗脱去杂→70％乙醇静态洗脱，收集洗脱液并减压浓缩，回收乙醇，浓缩液经低温真空干燥得到藤茶多酚产品。
[0007] 本发明一种从藤茶中提取二氢杨梅素、藤茶多糖和藤茶多酚的方法，在加工步骤f.提取粗多糖中粗多糖可进一步进行纯化处理，粗多糖加水复溶→sevag法脱蛋白→用双氧水脱色→乙醇沉淀→离心，收集沉淀→加水复溶→乙醇沉淀→离心，收集沉淀于35～45℃真空干燥或加水溶解后喷雾干燥。
[0008] 本发明与现有技术比较，由于采用同批原料分步提取分离多种成分的综合提取方法，该方法成本低，提取得率较高，环保，适合工业化连续生产，可实现藤茶资源的综合开发利用和经济效益的提高。
具体实施方式
[0009] 实施例1
[0010] 将新鲜藤茶茎叶干燥、粉碎制取原料粉末500g，加6L蒸馏水，加热至95℃下提取30min，趁热用100目双层滤布过滤后，再趁热离心(4000rpm，15min)，收集上清液I，对滤渣加蒸馏水4L，加热至95℃下重复提取1次，合并上清液I；将上清液I减压浓缩至1/3体积，充分冷却，在4℃下静置12小时，结晶后，离心(4000rpm，15min)，分别收集沉淀A和上清液II；沉淀A经2次加水重结晶处理，再对结晶物于40℃真空干燥，得二氢杨梅素，产品得率可达11％(二氢杨梅素作标样，硝酸铝-亚硝酸钠比色法测定，产品二氢杨梅素含量≥85％)；将上清液II在60℃下减压浓缩至原体积的1/4，再加入3倍体积的95％乙醇，边加乙醇边搅拌，放置24h后，离心(4000rpm，15min)，分别收集沉淀B和上清液III；沉淀B经95％乙醇洗涤后，加水复溶得多糖液，以sevag法脱蛋白，即以3∶1(v/v)的糖液∶混合液(4氯仿∶1正丁醇，v/v)脱蛋白1次，再调节多糖溶液pH至pH8，于50℃下滴加20％双氧水脱色后，加入3倍体积的95％乙醇沉淀多糖，离心，收集沉淀；再加水复溶后，加入3倍体积的95％乙醇沉淀多糖，离心，收集沉淀，于40℃真空干燥，得初步纯化的藤茶水溶性多糖，产品得率约4％(葡萄糖作标样，硫酸苯酚法测定，产品多糖含量约60％)；将上清液III经减压浓缩，回收乙醇，收集浓缩的水溶液，对水溶液用乙酸乙酯萃取(1∶1.2，V/V)，再将乙酸乙酯相减压浓缩，回收乙酸乙酯，浓缩物经真空干燥得到藤茶多酚，产品得率5％以上(没食子酸作标样，酒石酸亚铁比色法测定，产品多酚含量41％)。
[0011] 实施例2
[0012] 将新鲜藤茶茎叶干燥、粉碎制取原料粉末1000g，加入12L蒸馏水，加热至95℃下提取30min，趁热用100目双层滤布过滤后，再趁热离心(4000rpm，15min)，收集上清液I，对
