妇康丸中山茱萸的薄层色谱检测方法

摘要

本发明公开了妇康丸中山茱萸的薄层色谱检测方法，属于薄层色谱检测技术领域，检测过程按如下步骤操作：(1)称取熊果酸，加甲醇制成对照品溶液；(2)供试品溶液的制备；(3)阴性对照溶液的制备；(4)色谱识别，吸取步骤(1)、(2)、(3)制备的溶液在硅胶板上点样，在展开剂中展开，喷以硫酸乙醇溶液显色，作对比分析。本发明操作简单，可行性强，重复性好。

权利要求

1.妇康丸中山茱萸的薄层色谱检测方法，其特征在于检测过程按如下步骤操作：

(1)对照品溶液的制备：称取熊果酸对照品，加甲醇制成每1ml甲醇含1mg熊果酸的溶液；

(2)供试品溶液的制备：称取妇康丸5～10g，粉碎，加乙醇20～30ml，加热回流1～

2h，过滤，滤液蒸干，残渣加水15～20ml使之溶解，用乙醚洗涤至乙醚层无色，倾去乙醚层，用正丁醇洗涤水层2～4次，每次20～30ml，合并正丁醇提取液，用水洗涤2～4次，每次

15～20ml，倾去水层，将正丁醇层蒸干，残渣加乙醇1～2ml使之溶解，加入0.5～1g中性氧化铝，水浴上拌匀，干燥，装入一预先装填好的中性氧化铝柱顶部，以甲醇40～50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加0.5～1ml乙酸乙酯使之溶解，作为供试品分析液，所述妇康丸处方及处方量为：白术12重量份，党参12重量份，茯苓12重量份，苍术12重量份，川芎

12重量份，熟地黄12重量份，川牛膝12重量份，蒲黄12重量份，香附12重量份，蒸山茱萸

28重量份；

(3)阴性对照溶液的制备：按处方量药材同法制备对照药丸，按步骤(2)制备阴性对照分析液，所述对照药丸处方及处方量为：白术12重量份，党参12重量份，茯苓12重量份，苍术12重量份，川芎12重量份，熟地黄12重量份，川牛膝12重量份，蒲黄12重量份，香附12重量份；

(4)色谱识别：吸取步骤(1)、(2)、(3)制备的溶液在硅胶板上点样，在展开剂中展开，喷以硫酸乙醇溶液显色，根据步骤(2)制备的供试品溶液和步骤(3)制备的阴性对照溶液与步骤(1)制备的对照品溶液斑点同一Rf值处，作对比分析，所述展开剂为甲苯、乙酸乙酯、冰醋酸的混合液，混合液中各组分的体积比例为甲苯∶乙酸乙酯∶冰醋酸＝(20～

30)∶(6～10)∶1。

2.根据权利要求1所述的妇康丸中山茱萸的薄层色谱检测方法，其特征在于：所述步骤(2)中性氧化铝柱内径为10～15mm，填充的中性氧化铝为1～2g，200～300目。

3.根据权利要求1所述的妇康丸中山茱萸的薄层色谱检测方法，其特征在于：所述步骤(4)对照品溶液的点样量为2～3μl，供试品溶液和阴性对照溶液的点样量为4～6μl，展距为6～10cm。

4.根据权利要求1所述的妇康丸中山茱萸的薄层色谱检测方法，其特征在于：所述硅胶板为硅胶G板。

5.根据权利要求1所述的妇康丸中山茱萸的薄层色谱检测方法，其特征在于：所述的硫酸乙醇溶液浓度为30％，制备方法为：在烧杯中加入70ml乙醇，量取30ml浓硫酸沿烧杯壁缓慢加入，边加边搅拌。

6.根据权利要求1所述的妇康丸中山茱萸的薄层色谱检测方法，其特征在于：所述的显色是将30％硫酸乙醇溶液喷于硅胶板上，90～110℃加热至紫红色斑点清晰，日光下检视。

说明书

妇康丸中山茱萸的薄层色谱检测方法

技术领域

[0001] 本发明属于薄层色谱检测技术领域，具体涉及一种利用薄层色谱检测山茱萸中熊果酸的方法。

背景技术

[0002] 妇康丸是一种中成药，具有益气养血，行气化瘀的作用，用于产后气血不足，虚中加瘀，寒热错杂的肋腹胀痛，腹痛，头身疼痛，恶露不绝，血晕昏迷，大便秘结，无乳等症。山茱萸是方中臣药，含有熊果酸、齐墩果酸，山茱萸苷、苹果酸、没食子酸等，能固经止血，可用治妇女体虚、月经过多等症。现行的质量标准采用双波长扫描法测定山茱萸中熊果酸的含量，操作复杂，重复性差。《中国药典》采用薄层扫描法测定山茱萸药材熊果酸的含量，操作时间长，步骤烦琐，显色误差大，稳定性和重复性相对较差。

发明内容

[0003] 本发明要解决的技术问题是山茱萸药材熊果酸鉴定比较复杂，提供一种操作简单，可行性强的检测方法。

[0004] 本发明的内容为：妇康丸中山茱萸的薄层色谱检测方法，检测过程按如下步骤操作：

[0005] (1)对照品溶液的制备：称取熊果酸对照品，加甲醇制成每1ml甲醇含1mg熊果酸的溶液；

[0006] (2)供试品溶液的制备：称取妇康丸5～10g，粉碎，加乙醇20～30ml，加热回流1～2h，过滤，滤液蒸干，残渣加水15～20ml使之溶解，用乙醚洗涤至乙醚层无色，倾去乙醚层，用正丁醇洗涤水层2～4次，每次20～30ml，合并正丁醇提取液，用水洗涤2～4次，每次15～20ml，倾去水层，将正丁醇层蒸干，残渣加乙醇1～2ml使之溶解，加入0.5～1g中性氧化铝，水浴上拌匀，干燥，装入一预先装填好的中性氧化铝柱顶部，以甲醇40～50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加0.5～1ml乙酸乙酯使之溶解，作为供试品分析液；

[0007] (3)阴性对照溶液的制备：按处方量药材同法制备妇康丸(不含山茱萸)，按步骤(2)制备阴性对照分析液；

[0008] (4)色谱识别：吸取步骤(1)、(2)、(3)制备的溶液在硅胶板上点样，在展开剂中展开，喷以硫酸乙醇溶液显色，根据步骤(2)制备的供试品溶液和步骤(3)制备的阴性对照溶液与步骤(1)制备的对照品溶液斑点同一Rf值处，作对比分析。

[0009] 所述步骤(3)中性氧化铝柱内径为10～15mm，填充的中性氧化铝为1～2g，200～300目。

[0010] 所述步骤(4)对照品溶液的点样量为2～3μl，供试品溶液和阴性对照溶液的点样量为4～6μl，展距为6～10cm。

[0011] 所述展开剂为甲苯、乙酸乙酯、冰醋酸的混合液，混合液中各组分的体积比例为甲苯∶乙酸乙酯∶冰醋酸＝(20～30)∶(6～10)∶1。

[0012] 所述硅胶板为硅胶G板。

[0013] 所述的硫酸乙醇溶液浓度为30％，制备方法为：在烧杯中加入70ml乙醇，量取30ml浓硫酸沿烧杯壁缓慢加入，边加边搅拌。

[0014] 所述的显色是将30％硫酸乙醇溶液喷于板上，90～110℃加热至紫红色斑点清晰，日光下检视。

[0015] 本发明中，山茱萸的鉴定作了阴性对照试验，结果表明，妇康丸中其他药品不干扰山茱萸中熊果酸的鉴定。

[0016] 本发明的有益效果是操作简单，价格低廉，可行性强，重复性好，有利于推广。

具体实施方式

[0017] 下面通过实施例对本发明作详细说明，但并不以任何方式限制本发明。

[0018] 实施例1

[0019] 妇康丸中山茱萸的薄层色谱检测方法，检测过程按如下步骤操作：

[0020] (1)对照品溶液的制备：称取熊果酸对照品10mg，加入甲醇10ml，摇匀；

[0021] (2)供试品溶液的制备：称取妇康丸8g，粉碎，加乙醇25ml，加热回流1h，过滤，滤液蒸干，残渣加水15ml使之溶解，用乙醚洗涤至乙醚层无色，倾去乙醚层，用正丁醇洗涤水层3次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用水洗涤3次，每次15，倾去水层，将正丁醇层蒸干，残渣加乙醇1ml使之溶解，加入0.5g中性氧化铝，水浴上拌匀，干燥，装入一预先装填好的中性氧化铝柱顶部，中性氧化铝柱内径为10mm，填充的中性氧化铝为1g，200目，以甲醇40ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加0.5ml乙酸乙酯使之溶解，作为样品分析液；

[0022] (3)阴性对照溶液的制备：按处方量药材同法制备妇康丸(不含山茱萸)，按步骤(2)制备阴性对照分析液；

[0023] (4)色谱识别：吸取步骤(1)、(2)、(3)制备的溶液在硅胶G板上点样，对照品溶液的点样量为2μl，供试品溶液和阴性对照溶液的点样量为4μl，展距为6cm，在展开剂中展开，喷以体积分数为30％硫酸乙醇溶液，105℃热风加热至紫红色斑点清晰，日光下检视，根据步骤(2)制备的供试品溶液和步骤(3)制备的阴性对照溶液与步骤(1)制备的对照品溶液斑点同一Rf值处，作对比分析。

[0024] 所述展开剂为甲苯、乙酸乙酯、冰醋酸的混合液，混合液中各组分的体积比例为甲苯∶乙酸乙酯∶冰醋酸＝20∶6∶1。

[0025] 实施例1

[0026] 妇康丸中山茱萸的薄层色谱检测方法，检测过程按如下步骤操作：

[0027] (1)对照品溶液的制备：称取熊果酸对照品10mg，加入甲醇10ml，摇匀；

[0028] (2)供试品溶液的制备：称取妇康丸8g，粉碎，加乙醇25ml，加热回流1h，过滤，滤液蒸干，残渣加水15ml使之溶解，用乙醚洗涤至乙醚层无色，倾去乙醚层，用正丁醇洗涤水层3次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用水洗涤3次，每次15ml，倾去水层，将正丁醇层蒸干，残渣加乙醇1ml使之溶解，加入0.5g中性氧化铝，水浴上拌匀，干燥，装入一预先装填好的中性氧化铝柱顶部，中性氧化铝柱内径为10mm，填充的中性氧化铝为1g，200目，以甲醇40ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加0.5ml乙酸乙酯使之溶解，作为样品分析液；

[0029] (3)阴性对照溶液的制备：按处方量药材同法制备妇康丸(不含山茱萸)，按步骤(2)制备阴性对照分析液；

[0030] (4)色谱识别：吸取步骤(1)、(2)、(3)制备的溶液在硅胶G板上点样，对照品溶液的点样量为2μl，供试品溶液和阴性对照溶液的点样量为4μl，展距为6cm，在展开剂中展开，喷以体积分数为30％硫酸乙醇溶液，105℃热风加热至紫红色斑点清晰，日光下检视，根据步骤(2)制备的供试品溶液和步骤(3)制备的阴性对照溶液与步骤(1)制备的对照品溶液斑点同一Rf值处，作对比分析。

[0031] 所述展开剂为甲苯、乙酸乙酯、冰醋酸的混合液，混合液中各组分的体积比例为甲苯∶乙酸乙酯∶冰醋酸＝20∶6∶1。

[0032] 实施例2

[0033] 妇康丸中山茱萸的薄层色谱检测方法，检测过程按如下步骤操作：

[0034] (1)对照品溶液的制备：称取熊果酸对照品10mg，加入甲醇10ml，摇匀；

[0035] (2)供试品溶液的制备：称取妇康丸6g，粉碎，加乙醇20ml，加热回流1h，过滤，滤液蒸干，残渣加水16ml使之溶解，用乙醚洗涤至乙醚层无色，倾去乙醚层，用正丁醇洗涤水层2次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用水洗涤3次，每次20ml，倾去水层，将正丁醇层蒸干，残渣加乙醇2ml使之溶解，加入0.5g中性氧化铝，水浴上拌匀，干燥，装入一预先装填好的中性氧化铝柱顶部，中性氧化铝柱内径为12mm，填充的中性氧化铝为1g，200目，以甲醇40ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加0.5ml乙酸乙酯使之溶解，作为样品分析液；

[0036] (3)阴性对照溶液的制备：按处方量药材同法制备妇康丸(不含山茱萸)，按步骤(2)制备阴性对照分析液；

[0037] (4)色谱识别：吸取步骤(1)、(2)、(3)制备的溶液在硅胶G板上点样，对照品溶液的点样量为2μl，供试品溶液和阴性对照溶液的点样量为5μl，展距为6cm，在展开剂中展开，喷以体积分数为30％硫酸乙醇溶液，95℃热风加热至紫红色斑点清晰，日光下检视，根据步骤(2)制备的供试品溶液和步骤(3)制备的阴性对照溶液与步骤(1)制备的对照品溶液斑点同一Rf值处，作对比分析。

[0038] 所述展开剂为甲苯、乙酸乙酯、冰醋酸的混合液，混合液中各组分的体积比例为甲苯∶乙酸乙酯∶冰醋酸＝25∶6∶1。

[0039] 实施例3

[0040] 妇康丸中山茱萸的薄层色谱检测方法，检测过程按如下步骤操作：

[0041] (1)对照品溶液的制备：称取熊果酸对照品10mg，加入甲醇10ml，摇匀；

[0042] (2)供试品溶液的制备：称取妇康丸5g，粉碎，加乙醇20ml，加热回流1h，过滤，滤液蒸干，残渣加水15ml使之溶解，用乙醚洗涤至乙醚层无色，倾去乙醚层，用正丁醇洗涤水层2次，每次25ml，合并正丁醇提取液，用水洗涤3次，每次15ml，倾去水层，将正丁醇层蒸干，残渣加乙醇1ml使之溶解，加入0.5g中性氧化铝，水浴上拌匀，干燥，装入一预先装填好的中性氧化铝柱顶部，中性氧化铝柱内径为10mm，填充的中性氧化铝为1g，250目，以甲醇42ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加0.5ml乙酸乙酯使之溶解，作为样品分析液；

[0043] (3)阴性对照溶液的制备：按处方量药材同法制备妇康丸(不含山茱萸)，按步骤(2)制备阴性对照分析液；

[0044] (4)色谱识别：吸取步骤(1)、(2)、(3)制备的溶液在硅胶G板上点样，对照品溶液的点样量为2μl，供试品溶液和阴性对照溶液的点样量为6μl，展距为6cm，在展开剂中展开，喷以体积分数为30％硫酸乙醇溶液，100℃热风加热至紫红色斑点清晰，日光下检视，根据步骤(2)制备的供试品溶液和步骤(3)制备的阴性对照溶液与步骤(1)制备的对照品溶液斑点同一Rf值处，作对比分析。

[0045] 所述展开剂为甲苯、乙酸乙酯、冰醋酸的混合液，混合液中各组分的体积比例为甲苯∶乙酸乙酯∶冰醋酸＝24∶8∶1。

[0046] 实施例4

[0047] 妇康丸中山茱萸的薄层色谱检测方法，检测过程按如下步骤操作：

[0048] (1)对照品溶液的制备：称取熊果酸对照品20mg，加入甲醇20ml，摇匀；

[0049] (2)供试品溶液的制备：称取妇康丸9g，粉碎，加乙醇30ml，加热回流2h，过滤，滤液蒸干，残渣加水20ml使之溶解，用乙醚洗涤至乙醚层无色，倾去乙醚层，用正丁醇洗涤水层3次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用水洗涤3次，每次15ml，倾去水层，将正丁醇层蒸干，残渣加乙醇1ml使之溶解，加入1g中性氧化铝，水浴上拌匀，干燥，装入一预先装填好的中性氧化铝柱顶部，中性氧化铝柱内径为15mm，填充的中性氧化铝为1g，300目，以甲醇45ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加0.5ml乙酸乙酯使之溶解，作为样品分析液；

[0050] (3)阴性对照溶液的制备：按处方量药材同法制备妇康丸(不含山茱萸)，按步骤(2)制备阴性对照分析液；

[0051] (4)色谱识别：吸取步骤(1)、(2)、(3)制备的溶液在硅胶G板上点样，对照品溶液的点样量为2μl，供试品溶液和阴性对照溶液的点样量为6μl，展距为8cm，在展开剂中展开，喷以体积分数为30％硫酸乙醇溶液，105℃热风加热至紫红色斑点清晰，日光下检视，根据步骤(2)制备的供试品溶液和步骤(3)制备的阴性对照溶液与步骤(1)制备的对照品溶液斑点同一Rf值处，作对比分析。

[0052] 所述展开剂为甲苯、乙酸乙酯、冰醋酸的混合液，混合液中各组分的体积比例为甲苯∶乙酸乙酯∶冰醋酸＝30∶8∶1。

[0053] 实施例5

[0054] 妇康丸中山茱萸的薄层色谱检测方法，检测过程按如下步骤操作：

[0055] (1)对照品溶液的制备：称取熊果酸对照品20mg，加入甲醇20ml，摇匀；

[0056] (2)供试品溶液的制备：称取妇康丸8g，粉碎，加乙醇28ml，加热回流2h，过滤，滤液蒸干，残渣加水18ml使之溶解，用乙醚洗涤至乙醚层无色，倾去乙醚层，用正丁醇洗涤水层4次，每次25ml，合并正丁醇提取液，用水洗涤3次，每次20ml，倾去水层，将正丁醇层蒸干，残渣加乙醇1ml使之溶解，加入1g中性氧化铝，水浴上拌匀，干燥，装入一预先装填好的中性氧化铝柱顶部，中性氧化铝柱内径为15mm，填充的中性氧化铝为1g，300目，以甲醇45ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加0.5ml乙酸乙酯使之溶解，作为样品分析液；

[0057] (3)阴性对照溶液的制备：按处方量药材同法制备妇康丸(不含山茱萸)，按步骤(2)制备阴性对照分析液；

[0058] (4)色谱识别：吸取步骤(1)、(2)、(3)制备的溶液在硅胶G板上点样，对照品溶液的点样量为3μl，供试品溶液和阴性对照溶液的点样量为6μl，展距为10cm，在展开剂中展开，喷以体积分数为30％硫酸乙醇溶液，105℃热风加热至紫红色斑点清晰，日光下检视，根据步骤(2)制备的供试品溶液和步骤(3)制备的阴性对照溶液与步骤(1)制备的对照品溶液斑点同一Rf值处，作对比分析。