双孢菇蛋白酶解肽口服液的制备方法

摘要

本发明公开了一种双孢菇蛋白酶解肽口服液的制备方法，选择新鲜的双孢菇原料打浆得到双孢菇浆液，将双孢菇浆液置于酶解反应器中，准确称量酸性蛋白酶和木瓜蛋白酶加入水解反应器中，加热到50～60℃，调节pH值使其维持在4.5～5.5，搅拌下酶解5～6h，当蛋白质酶解到预定水解度65%时将蛋白酶灭活，离心、浓缩，再经过调配、澄清、灌装、灭菌后即可得到成品。本发明所得肽含量高，制得的口服液色泽金黄、口感好、无腥味，产品安全性好、营养价值高，工艺简单，操作容易，设备投资少，生产成本低的优点，适合于工业化生产。

权利要求

1.一种双孢菇蛋白酶解肽口服液的制备方法，其特征是包括以下步骤：

原料预处理：选择新鲜的双孢菇原料，将双孢菇原料切片后与水以1:1-1.5的比例混合，打浆得到双孢菇浆液；

酶解：将双孢菇浆液置于酶解反应器中，准确称量占双孢菇浆液质量0.55%～0.60%的酸性蛋白酶和0.20%～0.25%的木瓜蛋白酶加入水解反应器中，加热到50～60℃，调节pH值使其维持在4.5～5.5，搅拌下酶解5～6h；

灭酶：当蛋白质酶解到预定水解度65%时，停止搅拌，移出反应器，迅速升温到95℃，加热10min，将蛋白酶灭活；

离心分离：酶解液在4000 rpm离心20min，收集上清液，即为双酶复合水解所得的双孢菇混合肽；

浓缩：将离心收集的上清液进行旋转蒸发浓缩，使之体积减小到原来的1/2～1/4；

调配：以上所得的浓缩液中加入占浓缩液质量5～10%蔗糖、1～3%蜂蜜、0.2～0.3%柠檬酸、0.05～0.2%黄原胶和羧甲基纤维素钠，调配双孢菇蛋白酶解肽口服液；

澄清：将所得双孢菇蛋白酶解肽口服液中加入0.1～1%的食品级壳聚糖，高速搅拌均匀，再静置，自然澄清3～6h，得到澄清透明上清液后，进行灌装、灭菌，即可得到成品。

2.根据权利要求1所述的双孢菇蛋白酶解肽口服液的制备方法，其特征在于：在原料预处理时，将双孢菇原料切片后与水以1:1的比例混合，打浆2-3min，得到双孢菇浆液。

3.根据权利要求1或2所述的双孢菇蛋白酶解肽口服液的制备方法，其特征在于：在酶解时，将双孢菇浆液置于酶解反应器中，准确称量占双孢菇浆液质量0.58%的酸性蛋白酶和0.22%的木瓜蛋白酶加入水解反应器中，加热到55℃，用0.1M的HCl溶液调节pH值使其维持在5.0，酶解过程中要不断搅拌，并维持稳定的温度和pH值，酶解5～6h。

4.根据权利要求1或2所述的双孢菇蛋白酶解肽口服液的制备方法，其特征在于：浓缩时，将离心收集的上清液进行旋转蒸发浓缩，使之体积减小到原来的1/3。

5.根据权利要求3所述的双孢菇蛋白酶解肽口服液的制备方法，其特征在于：浓缩时，将离心收集的上清液进行旋转蒸发浓缩，使之体积减小到原来的1/3。

说明书

双孢菇蛋白酶解肽口服液的制备方法

技术领域

[0001] 本发明属于营养品和保健品技术领域，涉用一种以双孢菇为原料的口服液。

背景技术

[0002] 活性肽是当前国际药学和食品界热门的研究课题和极具发展前景的功能因子，既容易被人体吸收，又具有延缓衰老、抑制肿瘤、调节激素、提高免疫、抗菌、抗病毒、降血压和降血脂等功能。目前已经应用于生物制药、保健品、食品、生物试剂、动物饲料等领域，如胰岛素、脑活素、胶原肽、乳肽、鹿肽、大米肽、大豆肽、蛋清肽、血肽等。

[0003] 双孢菇是一种世界性栽培的重要食用菌，中国是世界上第一大双孢菇的生产国和出口国，但其深加工水平很落后，高附加值的产品几乎没有。双孢菇蛋白质含量居食用菌之首，每100g干菇蛋白质为38～40g，含有18种氨基酸，其中8种是人体必须的氨基酸，并且赖氨酸和亮氨酸含量相当丰富，还含有丰富的维生素B1、B2、C、D、P，具有降血脂、抗病毒、抗肿瘤、增强机体免疫力等保健功能。因此，用双孢菇生产富含活性肽保健品具有很好的商业价值和应用前景，但国内外关于双孢菇蛋白酶解肽及其产品尚未见报道。

发明内容

[0004] 本发明所要解决的技术问题是提供一种工艺简单、易控制的双孢菇蛋白酶解肽口服液的制备方法。

[0005] 解决以下问题，本发明采用的技术方案是：一种双孢菇蛋白酶解肽口服液的制备方法，包括以下步骤：

[0006] 原料预处理：选择新鲜的双孢菇原料，将双孢菇原料切片后与水以1:1-1.5的比例混合，打浆得到双孢菇浆液；

[0007] 酶解：将双孢菇浆液置于酶解反应器中，准确称量占双孢菇浆液质量0.55%～0.60%的酸性蛋白酶和0.20%～0.25%的木瓜蛋白酶加入水解反应器中，加热到50～60℃，调节pH值使其维持在4.5～5.5，搅拌下酶解5～6h；

[0008] 灭酶：当蛋白质酶解到预定水解度65%时，停止搅拌，移出反应器，迅速升温到95℃，加热10min，将蛋白酶灭活；

[0009] 离心分离：酶解液在4000 rpm离心20min，收集上清液，即为双酶复合水解所得的双孢菇混合肽；

[0010] 浓缩：将离心收集的上清液进行旋转蒸发浓缩，使之体积减小到原来的1/2～1/4；

[0011] 调配：以上所得的浓缩液中加入占浓缩液质量5～10%蔗糖、1～3%蜂蜜、0.2～0.3%柠檬酸、0.05～0.2%黄原胶和羧甲基纤维素钠，调配双孢菇蛋白酶解肽口服液；

[0012] 澄清：将所得双孢菇蛋白酶解肽口服液中加入0.1～1%的食品级壳聚糖，高速搅拌均匀，再静置，自然澄清3～6h，得到澄清透明上清液后，再进行灌装、灭菌，即可得到成品。

[0013] 做为优选的方案，在原料预处理时，将双孢菇原料切片后与水以1:1的比例混合，打浆2-3min，得到双孢菇浆液。

[0014] 做为优选的方案，在酶解时，将双孢菇浆液置于酶解反应器中，准确量取占双孢菇浆液质量0.58%的酸性蛋白酶和0.22%的木瓜蛋白酶加入水解反应器中，加热到55℃，用0.1M的HCl溶液调节pH值使其维持在5.0，酶解过程中要不断搅拌，并维持稳定的温度和pH值，酶解5～6h。

[0015] 做为优选的方案，浓缩时：将离心收集的上清液进行旋转蒸发浓缩，使之体积减小到原来的1/3。

[0016] 本发明以双孢菇为原料，采用复合酶生物酶解技术制备双孢菇肽口服液，该方法通过原料预处理，选择合适的酸性蛋白酶和木瓜蛋白酶进行水解，优化水解条件使蛋白质的水解率达到65%以上，再灭酶、离心分离、浓缩，所得产物采用Sephadex-50凝胶柱层析分析，所得肽分子量主要分布在600～3000D之间，制得的口服液色泽金黄、口感好、无腥味，产品安全性好、营养价值高。

[0017] 本发明所述方法的酶解反应条件温和，反应温度低，时间短，产物容易控制，整个生产过程无污染，产品安全性好，所得产品具有口感好、肽含量高、营养成分保存率高、易于消化吸收，可用于生物制药和营养保健品；并且具有工艺简单，操作容易，设备投资少，生产成本低的优点，适合于工业化生产。

具体实施方式

[0018] 实施例1

[0019] 原料预处理：选择新鲜的双孢菇原料，将双孢菇原料切片后与水以1:1的比例混合，打浆2-3min，得到双孢菇浆液。

[0020] 酶解：将双孢菇浆液置于酶解反应器中，准确称量占双孢菇浆液质量0.58%的酸性蛋白酶和0.22%的木瓜蛋白酶加入水解反应器中，加热到55℃，用0.1M的HCl溶液调节pH值使其维持在5.0，酶解过程中要不断搅拌，并维持稳定的温度和pH值，酶解5～6h。

[0021] 灭酶：当蛋白质酶解到预定水解度65%时，停止搅拌，移出反应器，迅速升温到95℃，加热10min，将蛋白酶灭活。

[0022] 离心分离：酶解液在4000 rpm离心20min，收集上清液，即为双酶复合水解所得的双孢菇混合肽。

[0023] 浓缩：将离心收集的上清液进行旋转蒸发浓缩，使之体积减小到原来的1/3。

[0024] 调配：以上所得的浓缩液中加入占浓缩液质量8%蔗糖、2%蜂蜜、0.2%柠檬酸、0.1%黄原胶和羧甲基纤维素钠（CMC—Na）的混合物，调配双孢菇蛋白酶解肽口服液。

[0025] 澄清：将所得双孢菇蛋白酶解肽口服液中加入0.5%的食品级壳聚糖，高速搅拌均匀，再静置，自然澄清3～6h，得到澄清透明上清液后，进行灌装、灭菌，即可得到成品。

[0026] 实施例2

[0027] 原料预处理：原料预处理：选择新鲜的双孢菇原料，将双孢菇原料切片后与水以1:1的比例混合，打浆得到双孢菇浆液。

[0028] 酶解：将双孢菇浆液置于酶解反应器中，准确称量占双孢菇浆液质量0.55%的酸性蛋白酶和0.20%的木瓜蛋白酶加入水解反应器中，加热到50℃，用0.1M的HCl溶液调节pH值使其维持在4.5，酶解过程中要不断搅拌，并维持稳定的温度和pH值，酶解5～6h。

[0029] 灭酶：当蛋白质酶解到预定水解度65%时，停止搅拌，移出反应器，迅速升温到95℃，加热10min，将蛋白酶灭活；

[0030] 离心分离：酶解液在4000 rpm离心20min，收集上清液，即为双酶复合水解所得的双孢菇混合肽；

[0031] 浓缩：将离心收集的上清液进行旋转蒸发浓缩，使之体积减小到原来的1/2；

[0032] 调配：以上所得的浓缩液中加入占浓缩液质量5%蔗糖、1%蜂蜜、0.2%柠檬酸、0.05%黄原胶和羧甲基纤维素钠（CMC—Na）的混合物，调配双孢菇蛋白酶解肽口服液；

[0033] 澄清：将所得双孢菇蛋白酶解肽口服液中加入0.1%的食品级壳聚糖，高速搅拌均匀，再静置，自然澄清3～6h，得到澄清透明上清液后，进行灌装、灭菌，即可得到成品。

[0034] 实施例3

[0035] 原料预处理：原料预处理：选择新鲜的双孢菇原料，将双孢菇原料切片后与水以1:1.5的比例混合，打浆得到双孢菇浆液。

[0036] 酶解：将双孢菇浆液置于酶解反应器中，准确称量占双孢菇浆液质量0.6%的酸性蛋白酶和0.25%的木瓜蛋白酶加入水解反应器中，加热到50℃，用0.1M的HCl溶液调节pH值使其维持在5.5，酶解过程中要不断搅拌，并维持稳定的温度和pH值，酶解5～6h。

[0037] 灭酶：当蛋白质酶解到预定水解度65%时，停止搅拌，移出反应器，迅速升温到95℃，加热10min，将蛋白酶灭活；

[0038] 离心分离：酶解液在4000 rpm离心20min，收集上清液，即为双酶复合水解所得的双孢菇混合肽；

[0039] 浓缩：将离心收集的上清液进行旋转蒸发浓缩，使之体积减小到原来的1/4；

[0040] 调配：以上所得的浓缩液中加入占浓缩液质量10%蔗糖、3%蜂蜜、0.3%柠檬酸、0.2%黄原胶和羧甲基纤维素钠（CMC—Na）的混合物，调配双孢菇蛋白酶解肽口服液；

[0041] 澄清：将所得双孢菇蛋白酶解肽口服液中加入1%的食品级壳聚糖，高速搅拌均匀，再静置，自然澄清3～6h，得到澄清透明上清液后，进行灌装、灭菌，即可得到成品。

[0042] 实施例4

[0043] 原料预处理：原料预处理：选择新鲜的双孢菇原料，将双孢菇原料切片后与水以1:1的比例混合，打浆得到双孢菇浆液。

[0044] 酶解：将双孢菇浆液置于酶解反应器中，准确称量占双孢菇浆液质量0.58%的酸性蛋白酶和0.20%的木瓜蛋白酶加入水解反应器中，加热到50℃，用0.1M的HCl溶液调节pH值使其维持在5，酶解过程中要不断搅拌，并维持稳定的温度和pH值，酶解5～6h。

[0045] 灭酶：当蛋白质酶解到预定水解度65%时，停止搅拌，移出反应器，迅速升温到95℃，加热10min，将蛋白酶灭活；

[0046] 离心分离：酶解液在4000 rpm离心20min，收集上清液，即为双酶复合水解所得的双孢菇混合肽；

[0047] 浓缩：将离心收集的上清液进行旋转蒸发浓缩，使之体积减小到原来的1/3；

[0048] 调配：以上所得的浓缩液中加入占浓缩液质量6%蔗糖、3%蜂蜜、0.2%柠檬酸、0.1%黄原胶和羧甲基纤维素钠（CMC—Na）的混合物，调配双孢菇蛋白酶解肽口服液；

[0049] 澄清：将所得双孢菇蛋白酶解肽口服液中加入0.4%的食品级壳聚糖，高速搅拌均