苯基咪唑并吡嗪类

摘要

根据通式I-V的6-苯基-咪唑并[1，2-a]吡嗪衍生物，其中，变量Q，R，Y1，Y2，Y3，Y4，n和m的定义如本文中所述，所述化合物抑制Btk。本文公开的化合物可以用于调节Btk的活性并且治疗与过度Btk活性相关的疾病。该化合物还可以用于治疗与异常B细胞增殖相关的炎性和自身免疫疾病如类风湿性关节炎。还公开了含有式I-V化合物和至少一种载体、稀释剂或赋形剂的组合物。

权利要求

1.一种式II的化合物，

其中：

1 2 3

R是-R-R-R ；

1 1’ 1’

R 是苯基，并且任选被R 取代；其中R 是C1-6烷基，羟基，C1-6羟烷基，C1-6烷氧基，卤素，硝基，氨基，氰基或C1-6卤代烷基；

2

R 是-C(＝O)或-(CH2)q；其中q是1，2或3；

3 4 4

R 是R ；其中R 是吗啉基，并且任选被一个或多个C1-6烷基，羟基，C1-6羟烷基，C1-6烷氧基，卤素，硝基，氨基，氰基或C1-6卤代烷基取代；

Q 是CH2；

1 1b 1b 1b’ 1b’每个Y 独立地是Y ；其中Y 是C1-6烷基，其任选被一个或多个Y 取代；其中Y 是羟基，C1-6烷氧基或卤素；

n 是0，1，2或3；

2 2b 2b 2b’ 2b’Y 是Y ；其中Y 是C1-6烷基，其任选被一个或多个Y 取代；其中Y 是羟基，C1-6烷氧基或卤素；

3

Y 是C1-6烷基，其中所述C1-6烷基任选被一个或多个取代基取代，所述取代基选自羟基，C1-6烷氧基，氨基和卤素；

m 是0或1；

Y4 是基团(a) 其中Y5是H，卤素，C1-6烷基或C1-6卤代烷基；或其药用盐。

2.根据权利要求1所述的式II的化合物，其中R2是-C(＝O)或-(CH2)q；其中q是1；并且R3是R4；其中R4是吗啉基，并且任选被一个或多个C1-6烷基取代；

Q 是CH2；

n 是0；

Y2 是Y2b；其中Y2b是任选被一个或多个Y2b’取代的C1-6烷基；其中Y2b’是羟基；

m 是0；

4 5

Y 是基团(a) 其中Y 是H。

3.一种药物组合物，其包含根据权利要求1-2中任何一项所述的式II的化合物且混合有至少一种药用载体或赋形剂。

4.一种药物组合物，其包含根据权利要求1-2中任何一项所述的式II的化合物且混合有至少一种药用载体或稀释剂。

5.根据权利要求1-2中任何一项的式II的化合物在制备用于治疗自身免疫病症的药物中的应用。

6.根据权利要求1-2中任何一项的式II的化合物在制备用于治疗炎性病症的药物中的应用。

7.根据权利要求1-2中任何一项的式II的化合物在制备用于治疗关节炎的药物中的应用。

8.根据权利要求1-2中任何一项的式II的化合物在制备用于抑制B细胞增殖的药物中的应用。

说明书

苯基咪唑并吡嗪类

[0001] 本发明涉及新型衍生物的应用，所述新型衍生物抑制布鲁顿酪氨酸激酶(Btk)并且可以用于治疗由异常B细胞活化导致的自身免疫疾病和炎性疾病。本文所述的新型6-苯基-咪唑并[1，2-a]吡嗪衍生物可以用于治疗关节炎。

[0002] Btk是酪氨酸激酶Tec家族的成员，并且显示是早期B细胞形成以及成熟B细胞活化和存活的关键调节剂(Khan等，Immunity 1995 3：283；Ellmeier等，J.Exp.Med.2000192：1611)。人的Btk突变导致病症X连锁丙球蛋白缺乏血症(XLA)(在Rosen等，New Eng.J.Med.1995 333：431和Lindvall等Immunol.Rev.2005 203：200中综述)。这些患者是免疫受损的，并且显示受损的B细胞成熟，降低的免疫球蛋白和外周B细胞水平，减少的不依赖T细胞的免疫应答以及在BCR刺激后的减弱的钙动用。

[0003] 关于Btk在自身免疫疾病和炎性疾病中的作用的证据已经由Btk-缺陷型小鼠模型提供。在系统性红斑狼疮(SLE)的临床前鼠模型中，Btk缺陷型小鼠显示疾病进展的显著改善。此外，Btk-缺陷型小鼠对胶原诱导的关节炎具有抗性(Jansson和Holmdahl Clin.Exp.Immunol.1993 94：459)。已经证明选择性Btk抑制剂在小鼠关节炎模型中的剂量依赖性功效(Pan等，Chem.Med Chem.2007 2：58-61)。

[0004] Btk还由除了B细胞之外可能涉及疾病过程的细胞表达。例如，Btk由肥大细胞表达并且Btk缺陷型骨髓来源的肥大细胞显示受损的抗原诱导的脱粒(Iwaki等J.Biol.Chem.2005 280：40261)。这显示Btk可以用于治疗病理性肥大细胞反应如变态反应和哮喘。此外，其中缺乏Btk活性的来自XLA患者的单核细胞显示在刺激后减少的TNFα生成(Horwood等J Exp Med 197：1603，2003)。因此，TNFα介导的炎症可以由小分子Btk抑制剂调节。此外，已经报道Btk在细胞凋亡中发挥作用(Islam和Smith Immunol.Rev.2000178：49)，并且因此Btk抑制剂对于治疗某些B细胞淋巴瘤和白血病将是有效的(Feldhahn等J.Exp.Med.2005 201：1837)。

[0005] 本发明提供式I-V的6-苯基-咪唑并[1，2-a]吡嗪，

[0006]

[0007] 其中：

[0008] R是H，-R1，-R1-R2-R3，-R1-R3或-R2-R3；

[0009] R1是芳基，杂芳基，环烷基或杂环烷基，并且任选被R1’取代；其中R1’是低级烷基，羟基，低级羟烷基，低级烷氧基，卤素，硝基，氨基，环烷基，杂环烷基，氰基或低级卤代烷基；

[0010] R2是-C(＝O)，-C(＝O)O，-C(＝O)N(R2’)，-(CH2)q或-S(＝O)2；其中R2’是H或低级烷基；并且q是1，2或3；

[0011] R3是H或R4；其中R4是低级烷基，低级烷氧基，氨基，芳基，芳基烷基，烷基芳基，杂芳基，烷基杂芳基，杂芳基烷基，环烷基，烷基环烷基，环烷基烷基，杂环烷基，烷基杂环烷基或杂环烷基烷基，并且任选被一个或多个低级烷基，羟基，氧代，低级羟烷基，低级烷氧基，卤素，硝基，氨基，氰基，低级烷基磺酰基或低级卤代烷基取代；

[0012] Q在式I中是CH或N；

[0013] 在式II和V中是CH2，CH(Y’)或NH；其中Y’是卤素，羟基或低级烷 基，其中所述低级烷基任选被一个或多个取代基取代，所述取代基选自羟基，低级烷氧基，氨基和卤素；

[0014] 每个Y1独立地是Y1a或Y1b；其中Y1a是卤素；并且Y1b是任选被一个或多个Y1b’取1b’
代的低级烷基；其中Y 是羟基，低级烷氧基或卤素；

[0015] n是0，1，2或3；

[0016] Y2是Y2a或Y2b；其中Y2a是H或卤素；并且Y2b是任选被一个或多个Y2b’取代的低级2b’
烷基；其中Y 是羟基，低级烷氧基或卤素；

[0017] Y3是卤素或低级烷基，其中所述低级烷基任选被一个或多个取代基取代，所述取代基选自羟基，低级烷氧基，氨基和卤素；

[0018] m是0或1；

[0019] Y4是Y4a，Y4b，Y4c或Y4d；其中

[0020] Y4a是H或卤素；

[0021] Y4b是任选被一个或多个取代基取代的低级烷基，所述取代基选自低级卤代烷基，卤素，羟基，氨基和低级烷氧基；

[0022] Y4c是任选被一个或多个取代基取代的低级环烷基，所述取代基选自低级烷基，低级卤代烷基，卤素，羟基，氨基和低级烷氧基；并且

[0023] Y4d是任选被一个或多个低级烷基取代的氨基；

[0024] 或其药用盐。

[0025] 在本发明的一个实施方案中提供式I的化合物。

[0026] 在式I的某些实施方案中，Q是N，m是0，n是0，Y2是羟甲基。

[0027] 在式I的某些实施方案中，Q是CH，m是0，n是0，Y2是羟甲基。

[0028] 在式I的某些实施方案中，Y4是基团(a) 其中Y5是H，卤素，低级烷基或低级卤代烷基。

[0029] 在式I的某些实施方案中，R是-R1-R2-R3；R1是苯基或吡啶基；R2是-C(＝O)；R3是R4；并且R4是吗啉或哌嗪，其任选被一个或多个低级烷基取代。

[0030] 在式I的某些实施方案中，Y4是基团(b) 其中Y5和Y6独立地是H或低级烷基。1 1 1’

[0031] 在式I的某些实施方案中，R是R ；并且R 是任选被R 取代的吡唑基。

[0032] 在式I的一个实施方案中，n是0且m是0。

[0033] 在式I的一个实施方案中，并且Q是N。

[0034] 在式I的一个实施方案中，Q是N，n是0且m是0。2

[0035] 在式I的一个实施方案中，Y 是羟甲基。2

[0036] 在式I的一个实施方案中，Q是N，并且Y 是羟甲基。2

[0037] 在式I的一个实施方案中，Q是N，Y 是羟甲基，n是0且m是0。

[0038] 在式I的一个实施方案中，Q是CH。

[0039] 在式I的一个实施方案中，Q是CH，n是0且m是0。2

[0040] 在式I的一个实施方案中，Q是CH，并且Y 是羟甲基。2

[0041] 在式I的一个实施方案中，Q是CH，Y 是羟甲基，n是0且m是0。2

[0042] 在式I的一个实施方案中，Y 是甲基。2

[0043] 在式I的一个实施方案中，Y 是羟乙基。2

[0044] 在式I的一个实施方案中，Y 是卤素。2

[0045] 在式I的一个实施方案中，Q是CH，Y 是甲基，n是0且m是0。2

[0046] 在式I的一个实施方案中，Q是CH，Y 是羟乙基，n是0且m是0。2

[0047] 在式I的一个实施方案中，Q是CH，Y 是卤素，n是0且m是0。2 4

[0048] 在式I的一个实施方案中，Q是CH，Y 是羟甲基，n是0，m是0，并且Y 是基团(a)，5
其中Y 是H，卤素，低级烷基或低级卤代烷基。
1 1 1’

[0049] 在式I的上述实施方案的另一个变体中，R是R ；并且R 是任选被R 取代吡唑基。

[0050] 在式I的一个实施方案中，Y4是低级烷基。

[0051] 在式I的一个实施方案中，Q是CH，Y2是羟甲基，n是0，m是0，并且Y4是低级烷基。

[0052] 在式I的上述实施方案的一个变体中，R是-R1-R2-R3；R1是苯基或吡啶基；R23 4 4
是-C(＝O)；R 是R ；并且R 是吗啉或哌嗪，其任选被一个或多个低级烷基取代。

[0053] 在式I的上述实施方案的另一个变体中，R是-R2-R3；R2是-C(＝O)NH；R3是H或4 4
R ；并且R 是低级烷基。

[0054] 在式I的一个实施方案中，Y4是基团(c) 其中Y5和Y6独立地是H，低级烷基或低级卤代烷基。

[0055] 在式I的一个实施方案中，Q是CH，Y2是羟甲基，n是0，m是0，并且Y4是基团(c)，5 6
其中Y 和Y 独立地是H，低级烷基或低级卤代烷基。

[0056] 在式I的上述实施方案的一个变体中，R是-R1-R2-R3；R1是苯基或吡啶基；R23 4 4
是-C(＝O)；R 是R ；并且R 是吗啉或哌嗪，其任选被一个或多个低级烷基取代。

[0057] 在式I的一个实施方案中，Y4是基团(b)，其中Y5和Y6独立地是H或低级烷基。

[0058] 在式I的一个实施方案中，Q是CH，Y2是羟甲基，n是0，m是0，并且Y4是基团(b)，5 6
其中Y 和Y 独立地是H或低级烷基。

[0059] 在式I的上述实施方案的一个变体中，R是-R2-R3；R2是-C(＝O)NH；R3是H或R4；4
并且R 是低级烷基。

[0060] 在式I的上述实施方案的另一个变体中，R是-R1-R2-R3；R1是苯基或吡啶基；R23 4 4
是-C(＝O)；R 是R ；并且R 是吗啉或哌嗪，其任选被一个或多个低级烷基取代。

[0061] 在式I的一个实施方案中，Q是N，Y2是羟甲基，n是0，m是0，并且Y4是基团(b)，5 6
其中Y 和Y 独立地是H或低级烷基。

[0062] 在式I的上述实施方案的一个变体中，R是-R1-R2-R3；R1是苯基或吡啶基；R23 4 4
是-C(＝O)；R 是R ；并且R 是吗啉或哌嗪，其任选被一个或多个低级烷基取代。

[0063] 在式I的一个实施方案中，Y4是基团(d) 其中Y5和Y6独立地是H，低级烷基或低级卤代烷基。2 4

[0064] 在式I的一个实施方案中，Q是CH，Y 是羟甲基，n是0，m是0，并且Y 是基团(d)，5 6
其中Y 和Y 独立地是H，低级烷基或低级卤代烷基。
1 2 3 1 2

[0065] 在式I的上述实施方案的一个变体中，R是-R-R-R ；R 是苯基或吡啶基；R3 4 4
是-C(＝O)；R 是R ；并且R 是吗啉或哌嗪，其任选被一个或多个低级烷基取代。
1 2 3 1

[0066] 在本发明的另一实施方案中提供式I的化合物，其中R是-R-R-R ；其中R 是芳2 3
基；R 是-C(＝O)；并且R 是杂环烷基。

[0067] 在本发明的另一实施方案中提供式I的化合物，其中Q是N。

[0068] 在本发明的另一实施方案中提供式I的化合物，其中n是0。2 2a 2b 2a

[0069] 在本发明的另一实施方案中提供式I的化合物，其中Y 是Y 或Y ；其中Y 是H；2b
并且Y 是低级烷基。

[0070] 在本发明的另一实施方案中提供式I的化合物，其中m是0。

[0071] 在本发明的另一实施方案中提供式I的化合物，其中Y4是Y4b；其中Y4b是低级烷基。

[0072] 在本发明的另一实施方案中提供式I的化合物，其中：

[0073] R是-R1-R2-R3；其中R1是芳基；R2是-C(＝O)；并且R3是杂环烷基；

[0074] Q是N；

[0075] n是0；

[0076] Y2是Y2a或Y2b；其中Y2a是H；并且Y2b是低级烷基；

[0077] m是0；并且

[0078] Y4是Y4b；其中Y4b是低级烷基。

[0079] 在本发明的一个实施方案中提供式II的化合物。

[0080] 在式II的某些实施方案中，Q是NH，n是0，m是0，并且Y2是羟甲基。

[0081] 在式II的某些实施方案中，Q是CH2，n是0，m是0，并且Y2是羟甲基。

[0082] 在式II的某些实施方案中，Y4是基团(a)，其中Y5是H，卤素，低级烷基或低级卤代烷基。

[0083] 在式II的某些实施方案中，R是-R1-R2-R3；R1是苯基或吡啶基；R2是-C(＝O)；R34 4
是R ；并且R 是吗啉或哌嗪，其任选被一个或多个低级烷基取代。

[0084] 在式II的某些实施方案中，R是R1；并且R1是任选被R1’取代的吡唑基。

[0085] 在式II的某些实施方案中，Y4是基团(b)，其中Y5和Y6独立地是H或低级烷基。

[0086] 在本发明的一个实施方案中提供式II的化合物，其中R是-R1-R2-R3，-R1-R32 3 1 1’ 1’
或-R-R ；其中R 是芳基，杂芳基，环烷基或杂环烷基，并且任选被R 取代；其中R 是低级烷基，羟基，低级羟烷基，低级烷氧基，卤素，硝基，氨基，环烷基，杂环烷基，氰基或低级卤代
2 2’ 2’
烷基；R 是-C(＝O)，-C(＝O)O，-C(＝O)N(R )，-(CH2)q或-S(＝O)2；其中R 是H或低
3 4 4
级烷基；并且q是1，2或3；并且R 是H或R ；其中R 是低级烷基，低级烷氧基，低级杂烷基，芳基，芳基烷基，烷基芳基，杂芳基，烷基杂芳基，杂芳基烷基，环烷基，烷基环烷基，环烷基烷基，杂环烷基，烷基杂环烷基或杂环烷基烷基，并且任选被一个或多个低级烷基，羟基，氧代，低级羟烷基，低级烷氧基，卤素，硝基，氨基，氰基，低级烷基磺酰基或低级卤代烷基取代。

[0087] 在式II的一个实施方案中，n是0且m是0。

[0088] 在式II的一个实施方案中，并且Q是NH。

[0089] 在式II的一个实施方案中，Q是NH，n是0且m是0。

[0090] 在式II的一个实施方案中，Y2是羟甲基。

[0091] 在式II的一个实施方案中，Q是NH，并且Y2是羟甲基。

[0092] 在式II的一个实施方案中，并且Q是CH2。

[0093] 在式II的一个实施方案中，Q是CH2，n是0且m是0。

[0094] 在式II的一个实施方案中，Q是CH2，并且Y2是羟甲基。

[0095] 在式II的一个实施方案中，Y2是甲基。

[0096] 在式II的一个实施方案中，Y2是羟乙基。

[0097] 在式II的一个实施方案中，Y2是卤素。

[0098] 在式II的一个实施方案中，Q是CH2，Y2是甲基，n是0且m是0。

[0099] 在式II的一个实施方案中，Q是CH2，Y2是羟乙基，n是0且m是0。

[0100] 在式II的一个实施方案中，Q是CH2，Y2是卤素，n是0且m是0。

[0101] 在式II的一个实施方案中，Y2是羟甲基，Q是CH2，n是0和m是0，并且Y4是基团5
(a)，其中Y 是H，卤素，低级烷基或低级卤代烷基。

[0102] 在式II的上述实施方案的一个变体中，R是-R1-R2-R3；R1是苯基或吡啶基；R23 4 4
是-C(＝O)；R 是R ；并且R 是吗啉或哌嗪，其任选被一个或多个低级烷基取代。

[0103] 在式II的上述实施方案的另一个变体中，R是-R2-R3；R2是-C(＝O)NH；R3是H或4 4
R ；并且R 是低级烷基。

[0104] 在式II的上述实施方案的再另一个变体中，R是R1；并且R1是任选被R1’取代的吡唑基。

[0105] 在式II的一个实施方案中，Y2是羟甲基，Q是NH，n是0和m是0，并且Y4是基团5
(a)，其中Y 是H，卤素，低级烷基或低级卤代烷基。

[0106] 在式II的一个实施方案中，Y2是羟甲基，Q是CH2，n是0和m是0，并且Y4是基团5
(a)，其中Y 是H，卤素，低级烷基或低级卤代烷基。

[0107] 在式II的一个实施方案中，Y4是低级烷基。

[0108] 在式II的一个实施方案中，Y2是羟甲基，Q是CH2，n是0和m是0，并且Y4是低级烷基。

[0109] 在式II的上述实施方案的一个变体中，R是-R1-R2-R3；R1是苯基或吡啶基；R23 4 4
是-C(＝O)；R 是R ；并且R 是吗啉或哌嗪，其任选被一个或多个低级烷基取代。

[0110] 在式II的上述实施方案的另一个变体中，R是-R2-R3；R2是-C(＝O)NH；R3是H或4 4
R ；并且R 是低级烷基。

[0111] 在式II的上述实施方案的再另一个变体中，R是R1；并且R1是任选被R1’取代的吡唑基。

[0112] 在式II的一个实施方案中，Y2是羟甲基，Q是NH，n是0和m是0，并且Y4是低级烷基。

[0113] 在式II的一个实施方案中，Y2是羟甲基，Q是CH2，n是0和m是0，并且Y4是低级烷基。

[0114] 在式II的一个实施方案中，Y2是羟甲基，Q是NH，n是0和m是0，并且Y4是低级烷基。

[0115] 在式II的一个实施方案中，Y4是基团(c)，其中Y5和Y6独立地是H，低级烷基或低级卤代烷基。

[0116] 在式II的一个实施方案中，Y2是羟甲基，Q是CH2，n是0和m是0，并且Y4是基团5 6
(c)，其中Y 和Y 独立地是H，低级烷基或低级卤代烷基。

[0117] 在式II的上述实施方案的一个变体中，R是-R1-R2-R3；R1是苯基或吡啶基；R23 4 4
是-C(＝O)；R 是R ；并且R 是吗啉或哌嗪，其任选被一个或 多个低级烷基取代。

[0118] 在式II的上述实施方案的另一个变体中，R是-R2-R3；R2是-C(＝O)NH；R3是H或4 4
R ；并且R 是低级烷基。

[0119] 在式II的上述实施方案的再另一个变体中，R是R1；并且R1是任选被R1’取代的吡唑基。

[0120] 在式II的一个实施方案中，Y2是羟甲基，Q是NH，n是0和m是0，并且Y4是基团5 6
(c)，其中Y 和Y 独立地是H，低级烷基或低级卤代烷基。

[0121] 在式II的一个实施方案中，Y4是基团(b)，其中Y5和Y6独立地是H或低级烷基。

[0122] 在式II的一个实施方案中，Y2是羟甲基，Q是CH2，n是0和m是0，并且Y4是基团5 6
(b)，其中Y 和Y 独立地是H或低级烷基。

[0123] 在式II的上述实施方案的一个变体中，R是-R1-R2-R3；R1是苯基或吡啶基；R23 4 4
是-C(＝O)；R 是R ；并且R 是吗啉或哌嗪，其任选被一个或多个低级烷基取代。

[0124] 在式II的上述实施方案的另一个变体中，R是-R2-R3；R2是-C(＝O)NH；R3是H或4 4
R ；并且R 是低级烷基。

[0125] 在式II的上述实施方案的再另一个变体中，R是R1；并且R1是任选被R1’取代的吡唑基。

[0126] 在式II的一个实施方案中，Y2是羟甲基，Q是NH，n是0和m是0，并且Y4是基团5 6
(b)，其中Y 和Y 独立地是H或低级烷基。

[0127] 在式II的一个实施方案中，Y4是基团(d)，其中Y5和Y6独立地是H，低级烷基或低级卤代烷基。

[0128] 在式II的一个实施方案中，Q是CH2，n是0和m是0，并且Y4是基团(d)，其中Y56
和Y 独立地是H，低级烷基或低级卤代烷基。

[0129] 在式II的上述实施方案的一个变体中，R是-R1-R2-R3；R1是苯基或吡啶基；R23 4 4
是-C(＝O)；R 是R ；并且R 是吗啉或哌嗪，其任选被一个或多个低级烷基取代。

[0130] 在式II的上述实施方案的另一个变体中，R是-R2-R3；R2是-C(＝O)NH；R3是H或4 4
R ；并且R 是低级烷基。

[0131] 在式II的上述实施方案的再另一个变体中，R是R1；并且R1是任选 被R1’取代的吡唑基。

[0132] 在式II的一个实施方案中，Q是NH，n是0和m是0，并且Y4是基团(d)，其中Y56
和Y 独立地是H，低级烷基或低级卤代烷基。

[0133] 在本发明的另一实施方案中提供式II的化合物，其中

[0134] R是-R1-R2-R3或-R1-R3；其中R1是芳基或杂芳基；R2是-C(＝O)或-(CH2)q；其中3 4 4
q是1；并且R 是R ；其中R 是氨基或杂环烷基，并且任选被一个或多个低级烷基取代；

[0135] Q是CH2；

[0136] n是0；

[0137] Y2是Y2b；其中Y2b是任选被一个或多个Y2b’取代的低级烷基；其中Y2b’是羟基；

[0138] m是0；

[0139] Y4是Y4c，其中Y4c是低级环烷基。

[0140] 在本发明的另一实施方案中提供式II的化合物，其中R是-R1-R2-R3或-R1-R3；其1 2 3 4 4
中R 是芳基或杂芳基；R 是-C(＝O)或-(CH2)q；其中q是1；并且R 是R ；其中R 是氨基或杂环烷基，并且任选被一个或多个低级烷基取代。

[0141] 在本发明的另一实施方案中提供式II的化合物，其中Q是CH2。

[0142] 在本发明的另一实施方案中提供式II的化合物，其中n是0。

[0143] 在本发明的另一实施方案中提供式II的化合物，其中Y2是Y2b；其中Y2b是任选被2b’ 2b’
一个或多个Y 取代的低级烷基；其中Y 是羟基。

[0144] 在本发明的另一实施方案中提供式II的化合物，其中m是0。

[0145] 在本发明的另一实施方案中提供式II的化合物，其中Y4是Y4c，其中Y4c是低级环烷基。

[0146] 在本发明的一个实施方案中提供式III的化合物。

[0147] 在式III的某些实施方案中，n是0，m是0，并且Y2是羟甲基。

[0148] 在式III的某些实施方案中，Y4是基团(a)，其中Y5是H，卤素，低级烷基或低级卤代烷基。

[0149] 在式III的某些实施方案中，Y4是基团(b)，其中Y5和Y6独立地是H或低级烷基。

[0150] 在式III的某些实施方案中，R是-R1-R2-R3；R1是苯基或吡啶基；R2是-C(＝O)；3 4 4
R 是R ；并且R 是吗啉或哌嗪，其任选被一个或多个低级烷基取代。

[0151] 在式III的某些实施方案中，R是R1；并且R1是任选被R1’取代的吡唑基。

[0152] 在式III的一个实施方案中，n是0且m是0。

[0153] 在式III的一个实施方案中，Y2是羟甲基。

[0154] 在式III的一个实施方案中，Y2是甲基。

[0155] 在式III的一个实施方案中，Y2是羟乙基。

[0156] 在式III的一个实施方案中，Y2是卤素。

[0157] 在式III的一个实施方案中，Y2是羟甲基，n是0，m是0，并且Y4是基团(a)，其中5
Y 是H，卤素，低级烷基或低级卤代烷基。

[0158] 在式III的上述实施方案的一个变体中，R是-R1-R2-R3；R1是苯基或吡啶基；R23 4 4
是-C(＝O)；R 是R ；并且R 是吗啉或哌嗪，其任选被一个或多个低级烷基取代。

[0159] 在式III的上述实施方案的另一个变体中，R是-R2-R3；R2是-C(＝O)NH；R3是H4 4
或R ；并且R 是低级烷基。

[0160] 在式III的上述实施方案的再另一个变体中，R是R1；并且R1是任选被R1’取代的吡唑基。

[0161] 在式III的一个实施方案中，Y4是基团(c)，其中，Y5和Y6独立地是H，低级烷基或低级卤代烷基。

[0162] 在式III的一个实施方案中，Y2是羟甲基，n是0，m是0，并且Y4是基团(c)，其中5 6
Y 和Y 独立地是H，低级烷基或低级卤代烷基。

[0163] 在式III的上述实施方案的一个变体中，R是-R1-R2-R3；R1是苯基或吡啶基；R23 4 4
是-C(＝O)；R 是R ；并且R 是吗啉或哌嗪，其任选被一个或多个低级烷基取代。

[0164] 在式III的上述实施方案的另一个变体中，R是-R2-R3；R2是-C(＝O)NH；R3是H4 4
或R ；并且R 是低级烷基。

[0165] 在式III的上述实施方案的再另一个变体中，R是R1；并且R1是任选被R1’取代的吡唑基。

[0166] 在式III的一个实施方案中，Y2是羟甲基，n是0，m是0，并且Y4是基团(b)，其中5 6
Y 和Y 独立地是H或低级烷基。

[0167] 在式III的上述实施方案的一个变体中，R是-R1-R2-R3；R1是苯基或吡啶基；R23 4 4
是-C(＝O)；R 是R ；并且R 是吗啉或哌嗪，其任选被一个或多个低级烷基取代。

[0168] 在式III的上述实施方案的另一个变体中，R是-R2-R3；R2是-C(＝O)NH；R3是H4 4
或R ；并且R 是低级烷基。

[0169] 在式III的上述实施方案的再另一个变体中，R是R1；并且R1是任选被R1’取代的吡唑基。

[0170] 在式III的一个实施方案中，Y4是基团(d)，其中Y5和Y6独立地是H，低级烷基或低级卤代烷基。

[0171] 在式III的一个实施方案中，Y2是羟甲基，n是0，m是0，并且Y4是基团(d)，其中5 6
Y 和Y 独立地是H，低级烷基或低级卤代烷基。

[0172] 在式III的上述实施方案的一个变体中，R是-R1-R2-R3；R1是苯基或吡啶基；R23 4 4
是-C(＝O)；R 是R ；并且R 是吗啉或哌嗪，其任选被一个或多个低级烷基取代。

[0173] 在式III的上述实施方案的另一个变体中，R是-R2-R3；R2是-C(＝O)NH；R3是H4 4
或R ；并且R 是低级烷基。

[0174] 在式III的上述实施方案的再另一个变体中，R是R1；并且R1是任选被R1’取代的吡唑基。

[0175] 在本发明的一个实施方案中提供式IV的化合物。

[0176] 在式IV的某些实施方案中，n是0，m是0，并且Y2是羟甲基。

[0177] 在式IV的某些实施方案中，Y4是基团(a)，其中Y5是H，卤素，低级烷基或低级卤代烷基。

[0178] 在式IV的某些实施方案中，Y4是基团(b)，其中Y5和Y6独立地是H或低级烷基。

[0179] 在式IV的某些实施方案中，R是-R1-R2-R3；R1是苯基或吡啶基；R2是-C(＝O)；R34 4
是R ；并且R 是吗啉或哌嗪，其任选被一个或多个低级烷基取代。

[0180] 在式IV的某些实施方案中，R是R1；并且R1是任选被R1’取代的吡 唑基。

[0181] 在式IV的一个实施方案中，n是0且m是0。

[0182] 在式IV的一个实施方案中，Y2是羟甲基。

[0183] 在式IV的一个实施方案中，Y2是甲基。

[0184] 在式IV的一个实施方案中，Y2是羟乙基。

[0185] 在式IV的一个实施方案中，Y2是卤素。

[0186] 在式IV的一个实施方案中，Y2是羟甲基，n是0，m是0，并且Y4是基团(a)，其中5
Y 是H，卤素，低级烷基或低级卤代烷基。

[0187] 在式IV的上述实施方案的一个变体中，R是-R1-R2-R3；R1是苯基或吡啶基；R23 4 4
是-C(＝O)；R 是R ；并且R 是吗啉或哌嗪，其任选被一个或多个低级烷基取代。

[0188] 在式IV的上述实施方案的另一个变体中，R是-R2-R3；R2是-C(＝O)NH；R3是H或4 4
R ；并且R 是低级烷基。

[0189] 在式IV的上述实施方案的再另一个变体中，R是R1；并且R1是任选被R1’取代的吡唑基。

[0190] 在式IV的一个实施方案中，Y4是基团(c)，其中Y5和Y6独立地是H，低级烷基或低级卤代烷基。

[0191] 在式IV的一个实施方案中，Y2是羟甲基，n是0，m是0，并且Y4是基团(c)，其中5 6
Y 和Y 独立地是H，低级烷基或低级卤代烷基。

[0192] 在式IV的上述实施方案的一个变体中，R是-R1-R2-R3；R1是苯基或吡啶基；R23 4 4
是-C(＝O)；R 是R ；并且R 是吗啉或哌嗪，其任选被一个或多个低级烷基取代。

[0193] 在式IV的上述实施方案的另一个变体中，R是-R2-R3；R2是-C(＝O)NH；R3是H或4 4
R ；并且R 是低级烷基。

[0194] 在式IV的上述实施方案的再另一个变体中，R是R1；并且R1是任选被R1’取代的吡唑基。

[0195] 在式IV的一个实施方案中，Y2是羟甲基，n是0，m是0，并且Y4是基团(b)，其中5 6
Y 和Y 独立地是H或低级烷基。

[0196] 在式IV的上述实施方案的一个变体中，R是-R1-R2-R3；R1是苯基或吡啶基；R23 4 4
是-C(＝O)；R 是R ；并且R 是吗啉或哌嗪，其任选被一个或 多个低级烷基取代。

[0197] 在式IV的上述实施方案的另一个变体中，R是-R2-R3；R2是-C(＝O)NH；R3是H或4 4
R ；并且R 是低级烷基。

[0198] 在式IV的上述实施方案的再另一个变体中，R是R1；并且R1是任选被R1’取代的吡唑基。

[0199] 在式IV的一个实施方案中，Y4是基团(d)，其中Y5和Y6独立地是H，低级烷基或低级卤代烷基。

[0200] 在式IV的一个实施方案中，Y2是羟甲基，n是0，m是0，并且Y4是基团(d)，其中5 6
Y 和Y 独立地是H，低级烷基或低级卤代烷基。

[0201] 在式IV的上述实施方案的一个变体中，R是-R1-R2-R3；R1是苯基或吡啶基；R23 4 4
是-C(＝O)；R 是R ；并且R 是吗啉或哌嗪，其任选被一个或多个低级烷基取代。

[0202] 在式IV的上述实施方案的另一个变体中，R是-R2-R3；R2是-C(＝O)NH；R3是H或4 4
R ；并且R 是低级烷基。

[0203] 在式IV的上述实施方案的再另一个变体中，R是R1；并且R1是任选被R1’取代的吡唑基。

[0204] 在本发明的一个实施方案中提供式V的化合物。

[0205] 在式V的某些实施方案中，m是0，n是0，并且Y2是羟甲基。

[0206] 在式V的某些实施方案中，Y4是基团(a)，其中Y5是H，卤素，低级烷基或低级卤代烷基。

[0207] 在式V的某些实施方案中，R是-R1-R2-R3；R1是苯基或吡啶基；R2是-C(＝O)；R34 4
是R ；并且R 是吗啉或哌嗪，其任选被一个或多个低级烷基取代。

[0208] 在式V的某些实施方案中，R是R1；并且R1是任选被R1’取代的吡唑基。

[0209] 在式V的某些实施方案中，Y4是基团(b)，其中Y5和Y6独立地是H或低级烷基。

[0210] 在式V的一个实施方案中，n是0且m是0。

[0211] 在式V的一个实施方案中，Q是CH2。

[0212] 在式V的一个实施方案中，Y2是羟甲基。

[0213] 在式V的一个实施方案中，Y2是羟甲基，Q是CH2，n是0且m是0。

[0214] 在式V的一个实施方案中，Y2是甲基。

[0215] 在式V的一个实施方案中，Y2是羟乙基。

[0216] 在式V的一个实施方案中，Y2是卤素。

[0217] 在式V的一个实施方案中，Y2是羟甲基，Q是CH2，n是0和m是0，并且Y4是基团5
(a)，其中Y 是H，卤素，低级烷基或低级卤代烷基。

[0218] 在式V的上述实施方案的一个变体中，R是-R1-R2-R3；R1是苯基或吡啶基；R23 4 4
是-C(＝O)；R 是R ；并且R 是吗啉或哌嗪，其任选被一个或多个低级烷基取代。

[0219] 在式V的上述实施方案的另一个变体中，R是-R2-R3；R2是-C(＝O)NH；R3是H或4 4
R ；并且R 是低级烷基。

[0220] 在式V的上述实施方案的再另一个变体中，R是R1；并且R1是任选被R1’取代的吡唑基。

[0221] 在式V的一个实施方案中，Y4是低级烷基。

[0222] 在式V的一个实施方案中，Y2是羟甲基，Q是CH2，n是0和m是0，并且Y4是低级烷基。

[0223] 在式V的上述实施方案的一个变体中，R是-R1-R2-R3；R1是苯基或吡啶基；R23 4 4
是-C(＝O)；R 是R ；并且R 是吗啉或哌嗪，其任选被一个或多个低级烷基取代。

[0224] 在式V的上述实施方案的另一个变体中，R是-R2-R3；R2是-C(＝O)NH；R3是H或4 4
R ；并且R 是低级烷基。

[0225] 在式V的上述实施方案的再另一个变体中，R是R1；并且R1是任选被R1’取代的吡唑基。

[0226] 在式V的一个实施方案中，Y4是基团(c)，其中Y5和Y6独立地是H，低级烷基或低级卤代烷基。

[0227] 在式V的一个实施方案中，Y2是羟甲基，Q是CH2，n是0和m是0，并且Y4是基团5 6
(c)，其中Y 和Y 独立地是H，低级烷基或低级卤代烷基。

[0228] 在式V的上述实施方案的一个变体中，R是-R1-R2-R3；R1是苯基或吡啶基；R23 4 4
是-C(＝O)；R 是R ；并且R 是吗啉或哌嗪，其任选被一个或多个低级烷基取代。

[0229] 在式V的上述实施方案的另一个变体中，R是-R2-R3；R2是-C(＝O)NH；R3是H或4 4
R ；并且R 是低级烷基。

[0230] 在式V的上述实施方案的再另一个变体中，R是R1；并且R1是任选被R1’取代的吡唑基。

[0231] 在式V的一个实施方案中，Y4是基团(b)，其中Y5和Y6独立地是H或低级烷基。

[0232] 在式V的一个实施方案中，Y2是羟甲基，Q是CH2，n是0和m是0，并且Y4是基团5 6
(b)，其中Y 和Y 独立地是H或低级烷基。

[0233] 在式V的上述实施方案的一个变体中，R是-R1-R2-R3；R1是苯基或吡啶基；R23 4 4
是-C(＝O)；R 是R ；并且R 是吗啉或哌嗪，其任选被一个或多个低级烷基取代。

[0234] 在式V的上述实施方案的另一个变体中，R是-R2-R3；R2是-C(＝O)NH；R3是H或4 4
R ；并且R 是低级烷基。

[0235] 在式V的上述实施方案的再另一个变体中，R是R1；并且R1是任选被R1’取代的吡唑基。

[0236] 在式V的一个实施方案中，Y4是基团(d)，其中Y5和Y6独立地是H，低级烷基或低级卤代烷基。

[0237] 在式V的一个实施方案中，Q是CH2，n是0和m是0，并且Y4是基团(d)，其中Y5和6
Y 独立地是H，低级烷基或低级卤代烷基。

[0238] 在式V的上述实施方案的一个变体中，R是-R1-R2-R3；R1是苯基或吡啶基；R23 4 4
是-C(＝O)；R 是R ；并且R 是吗啉或哌嗪，其任选被一个或多个低级烷基取代。

[0239] 在式V的上述实施方案的另一个变体中，R是-R2-R3；R2是-C(＝O)NH；R3是H或4 4
R ；并且R 是低级烷基。

[0240] 在式V的上述实施方案的再另一个变体中，R是R1；并且R1是任选被R1’取代的吡唑基。

[0241] 本发明提供一种选自由表I中的化合物组成的组中的化合物。在本发明的另一个实施方案中提供式II的化合物，所述式II的化合物选自表I中的化合物II-1，II-2，II-3和II-4。

[0242] 本发明提供一种用于治疗炎性和/或自身免疫病症的方法，该方法包括 向需要它的患者给药治疗有效量的式I-V中任何一个的Btk抑制剂化合物。

[0243] 本发明提供一种用于治疗关节炎的方法，该方法包括向需要它的患者给药治疗有效量的式I-V中任何一个的Btk抑制剂化合物。

[0244] 本发明提供一种用于治疗类风湿性关节炎的方法，该方法包括向需要它的患者给药治疗有效量的式I-V中任何一个的Btk抑制剂化合物。

[0245] 本发明提供一种用于治疗哮喘的方法，该方法包括向需要它的患者给药治疗有效量的式I-V中任何一个的Btk抑制剂化合物。

[0246] 本发明提供一种用于治疗狼疮的方法，该方法包括向需要它的患者给药治疗有效量的式I-V中任何一个的Btk抑制剂化合物。

[0247] 本发明提供一种抑制B-细胞增殖的方法，该方法包括向需要它的患者给药治疗有效量的上述式I’-V’中任何一个的Btk抑制剂化合物或其变体。

[0248] 本发明提供一种用于抑制Btk活性的方法，该方法包括给药上述式I’-V’中任何一个的Btk抑制剂化合物或其变体，其中所述Btk抑制剂化合物在Btk活性的体外生物化学测定中显示出50微摩尔浓度以下的IC50。

[0249] 在上述方法的一个变体中，所述Btk抑制剂化合物在Btk活性的体外生物化学测定中显示出100毫微摩尔浓度以下的IC50。

[0250] 在上述方法的一个变体中，所述化合物在Btk活性的体外生物化学测定中显示出10毫微摩尔浓度以下的IC50。

[0251] 本发明提供一种用于治疗炎性病症的方法，该方法包括向需要它的患者共同给药治疗有效量的抗炎化合物以及上述式I’-V’中任何一个的Btk抑制剂化合物或其变体。

[0252] 本发明提供一种用于治疗关节炎的方法，该方法包括向需要它的患者共同给药治疗有效量的抗炎化合物以及上述式I’-V’中任何一个的Btk抑制剂化合物或其变体。

[0253] 本发明提供一种用于治疗淋巴瘤或BCR-ABL1+白血病细胞的方法，该方法通过向需要它的患者给药治疗有效量的上述式I’-V’中任何一个的Btk抑制剂化合物或其变体。

[0254] 本发明提供一种药用组合物，所述的药用组合物包含上述式I’-V’中任何一个的Btk抑制剂化合物或其变体，且混合有至少一种药用载体、赋形剂或稀释剂。

[0255] 术语“如上文定义”是指如本文中或最宽权利要求提供的每个基团的最宽定义。在提供的所有的其它方面、变体和实施方案中，可以在每个实施方案中存在并且没有明确定义的取代基保留在本文中提供的最宽定义。

[0256] 通式I-V的化合物抑制布鲁顿酪氨酸激酶(Btk)。上游激酶对Btk的活化导致磷脂酶-Cγ的活化，所述磷脂酶-Cγ的活化又刺激促炎介体的释放。通式I-V的化合物，其在6-苯基-咪唑并[1，2-a]吡嗪环体系上结合下列取代的双环侧链：3，4-二氢-2H-异喹啉-1-酮，2，3-二氢-1H-喹唑啉-4-酮，2H-异喹啉-1-酮，3H-喹唑啉-4-酮，1H-喹啉-4-酮，2H-酞嗪-1-酮，3，4-二氢-2H-苯并[e][1，2]噻嗪1，1-二氧化物或3，4-二氢-2H-苯并[1，2，4]噻二嗪1，1-二氧化物，与没有所述双环侧链的类似物相比，显示出2
意想不到的增强的抑制活性。此外，在Y 是任选被羟基取代的低级烷基时，抑制活性得到
2
提高。在Y 是羟甲基时，抑制活性得到提高。式I-V的化合物可以用于治疗关节炎和其它抗炎和自身免疫疾病。因而根据式I-V的化合物可以用于治疗关节炎。式I-V的化合物可以用于抑制细胞中的Btk并且用于调节B-细胞发展。本发明还包括药物组合物，其包含式I-V的化合物并且混合有药用载体、赋形剂或稀释剂。

[0257] 如本文使用的，术语“一(a)”或“一(an)”种实体是指一种或多种该实体；例如，一种化合物指一种或多种化合物或至少一种化合物。因此，术语“一种(a)”(或“一种(an)”)，“一种或多种”和“至少一种”可以在本文中可交换使用。

[0258] 术语“如上文定义”是指如本文提供的每个基团的最宽定义。在下面提供的所有的其它实施方案中，可以在每个实施方案中存在并且没有明确定义的取代基保留在本文中提供的最宽定义。

[0259] 如在此说明书中使用的，不管在过渡性短语中或在权利要求的主体中，术语″包含″和″包括″应当被解释为具有开放式的含义。即，该术语应当被解释为与短语″至少具有″或″至少包括″同义。当在方法的上下文中使用时，术语″包含″是指该方法至少包括所述的步骤，但是可以包括另外的步骤。当在化合物或组合物的上下文中使用时，术语″包含″是指该化合物或组合物至少包括所述的特征或组分，但是还可以包括另外的特征或组分。

[0260] 如本文中所用的，除非另外具体指出，单词“或”的使用是“和/或”的“包括”意思，而不是“或/或”的“排它”意思。

[0261] 本文中使用的术语″独立地″是指变量被用于任何一种情况，而不考虑在相同的化合物内存在或不存在具有相同或不同定义的变量。因此，在其中R″出现两次并且被定义为″独立地为碳或氮″的化合物中，两个R″可以都是碳，两个R″可以都是氮，或者一个R″可以是碳并且另一个可以是氮。

[0262] 在描绘或描述本发明中采用的或要求保护的化合物的任何部分或式中，任何变量出现多于一次时，其在每一次出现时的定义独立于其在每一次另外出现时的定义。此外，取代基和/或变量的组合只有在这些化合物导致稳定的化合物的情况下是允许的。

[0263] 在键末端处的符号″*″或划过键的″------″分别是指官能团或其它化学4
部分与其作为分子一部分的分子的余下部分的连接点。因此，例如：MeC(＝O)OR，其中 或

[0264] 划入环体系中的键(与在明确的顶点处连接相反的)是指该键可以连接到任何适宜的环原子。

[0265] 如本文中所用的术语“任选的”或“任选地”是指随后描述的事件或情形可以、但不是必须发生，并且是指该描述包括事件或情形发生的情况，和它不发生的情况。例如，“任选取代的”是指任选取代的部分可以结合氢或取代基。

[0266] 短语“任选的键”是指该键可以存在或可以不存在，并且是指该描述包括单键、双键或叁键。如果取代基被指定为是″键″或″不存在″，则连接到该取代基上的原子直接连接。

[0267] 本文使用的术语″约″是指大致地、在…的附近、粗略地或大约。当术语″约″与一个数值范围一起使用时，它通过将边界延伸高于和低于所列出的数值而改变该范围。通常，本文使用的术语″约″将数值改变到高于和低于所述的值20％的方差。

[0268] 式I-V的某些化合物可以显示出互变异构现象。互变异构的化合物可以以两种或更多种可以相互转化的物种存在。质子转移的互变异构体由共价结合的氢原子在两个原子之间的迁移得到。互变异构体通常存在着平衡并且分离单个互变异构体的尝试通常制备出其化学和物理性质与化合物 的混合物一致的混合物。平衡的位置取决于在分子内的化学特征。例如，在许多脂族醛和酮如乙醛的情况下，酮形式占优势，而在酚类中，烯醇形式占优势。常见的质子转移的互变异构体包括酮/烯醇(-C(＝O)-CH-Δ-C(-OH)＝CH-)，酰胺/亚氨酸(-C(＝O)-NH-Δ-C(-OH)＝N-)和脒(-C(＝NR)-NH-Δ-C(-NHR)＝N-)互变异构体。后两种在杂芳基和杂环中是特别常见的，并且本发明包括化合物的所有互变异构形式。

[0269] 本文使用的技术和科学术语具有本发明所属技术领域内的技术人员所通常理解的含义，除非另外定义。本文参考本领域技术人员已知的各种方法和材料。列出药理学的通用原理的标准参考作品包括Goodman和Gilman的The Pharmacological Basis of Therapeutics，第10版，McGraw Hill Companies Inc.，New York(2001)。可以将本领域技术人员已知的任何适宜材料和/或方法用于实施本发明。但是，描述的是优选的材料和方法。在下面的说明和实施例中涉及的材料、试剂等可获自商业来源，除非另外指出。

[0270] 本文所述的定义可以被附加以形成化学上相关的组合，如“杂烷基芳基”，“卤代烷基杂芳基”，“芳基烷基杂环基”，“烷基羰基”，“烷氧基烷基”等。当术语“烷基”被用作另一个术语之后的后缀时，如在“苯基烷基”或“羟烷基”中时，它意在表示如上定义的烷基，其被一个至两个选自所述的另外具体标名的基团的取代基取代。因此，例如“苯基烷基”是指具有1至2个苯基取代基的烷基，并且因此包括苄基，苯基乙基和联苯基。“烷基氨基烷基”是具有1至2个烷基氨基取代基的烷基。“羟烷基″包括2-羟基乙基，2-羟基丙基，1-(羟甲基)-2-甲基丙基，2-羟基丁基，2，3-二羟基丁基，2-(羟甲基)，3-羟基丙基等。因而，如本文中所用的，术语“羟烷基”用来定义下面定义的杂烷基的子集。术语-(芳)烷基是指未取代的烷基或芳烷基。术语(杂(hetero))芳基或(杂(het))芳基是指芳基或杂芳基。

[0271] 如本文中所用的术语“酰基”表示式-C(＝O)R的基团，其中R是氢或如本文中定义的低级烷基。如本文中所用的术语″烷基羰基″表示式C(＝O)R的基团，其中R是如本文中定义的烷基。术语C1-6酰基是指基团-C(＝O)R，含6个碳原子。如本文中所用的术语″芳基羰基″表示式C(＝O)R的基团，其中R是芳基；如本文中所用的术语″苯甲酰基″是指其中R是苯基的″芳基羰基″。

[0272] 如本文中所用的术语“烷基”表示含有1至10个碳原子的未分支或支链的饱和一价烃残基。术语“低级烷基”表示含有1至6个碳原子的直链或支链烃残基。如本文中所用的″C1-10烷基″是指由1至10个碳构成的烷基。烷基的实例包括但不限于：低级烷基，包括甲基，乙基，丙基，异丙基，正丁基，异丁基，叔丁基或戊基，异戊基，新戊基，己基，庚基和辛基。

[0273] 当术语“烷基”被用作另一个术语之后的后缀时，如在“苯基烷基”或“羟烷基”中时，它意在表示如上定义的烷基，其被一个至两个选自所述的另外具体标名的基团的取代基取代。因此，例如“苯基烷基”表示基团R′R″-，其中R′是苯基，并且R″是如本文中定义的亚烷基，其中理解的是苯基烷基部分的连接点将在亚烷基上。芳基烷基的实例包括但是不限于苄基，苯基乙基，3-苯基丙基。术语“芳基烷基”或″芳烷基″被类似地解释，不同之处在于R′是芳基。术语″(杂)芳基烷基″或″(杂)芳烷基″被类似地解释，不同之处在于R′任选是芳基或杂芳基。

[0274] 如本文中所用的术语″亚烷基″(″alkylene″或″alkylenyl″)表示1至10个碳原子的二价饱和直链烃基(例如(CH2)n)或2至10个碳原子的支链饱和二价烃基(例如-CHMe-或-CH2CH(i-Pr)CH2-)，除非另外指出。除了在亚甲基的情况下之外，亚烷基的开放价态不连接到相同的原子上。亚烷基的实例包括但是不限于：亚甲基，亚乙基，亚丙基，2-甲基-亚丙基，1，1-二甲基-亚乙基，亚丁基，2-乙基亚丁基。

[0275] 如本文中所用的术语″烷氧基″表示-O-烷基，其中烷基如上定义，如甲氧基，乙氧基，正丙氧基，异丙氧基，正丁氧基，异丁氧基，叔丁氧基，戊氧基，己氧基，包括它们的异构体。如本文中所用的″低级烷氧基″表示具有如上面定义的″低级烷基″基团的烷氧基。如本文中所用的″C1-10烷氧基″是指-O-烷基，其中烷基是C1-10。

[0276] 如本文中所用的术语“烷氧基烷基”是指基团R′R″-，其中R′是如本文中定义的烷氧基，且R″是如本文中定义的亚烷基，其中理解的是烷氧基烷基部分的连接点将在亚烷基上。C1-6烷氧基烷基表示这样的基团，其中烷基部分包含1-6个碳原子，不包括在所述基团的烷氧基部分中的碳原子。C1-3烷氧基-C1-6烷基表示这样的基团，其中烷基部分包含1-6个碳原子，并且烷氧基是1-3个碳。实例是甲氧基甲基，甲氧基乙基，甲氧基丙基， 乙氧基甲基，乙氧基乙基，乙氧基丙基，丙氧基丙基，甲氧基丁基，乙氧基丁基，丙氧基丁基，丁氧基丁基，叔丁氧基丁基，甲氧基戊基，乙氧基戊基，丙氧基戊基，包括它们的异构体。

[0277] 如本文中所用的术语″羟烷基″表示如本文中定义的烷基，其中在不同碳原子上的1至3个氢原子被羟基代替。

[0278] 如本文中所用的术语″烷基磺酰基″和″芳基磺酰基″是指式-S(＝O)2R的基团，其中R分别是烷基或芳基，并且烷基和芳基如本文中定义。如本文中所用的术语“杂烷基磺酰基”在本文中表示式-S(＝O)2R的基团，其中R是如本文定义的“杂烷基”。

[0279] 如本文中所用的术语″烷基磺酰基氨基″和″芳基磺酰基氨基″是指式-NR′S(＝O)2R的基团，其中R分别是烷基或芳基，R′是氢或C1-3烷基，并且烷基和芳基如本文中定义。

[0280] 如本文中所用的术语“环烷基”是指含有3至8个碳原子的饱和碳环，即环丙基，环丁基，环戊基，环己基，环庚基或环辛基。如本文中所用的″C3-7环烷基″是指由在碳环中的3至7个碳构成的环烷基。

[0281] “芳基”是指单价环状芳族烃部分，其由单-、二-或三环芳环组成。芳基可以任选地如本文定义被取代。芳基部分的实例包括但不限于，任选取代的苯基，萘基，菲基，芴基，茚基，甘菊环基，氧联二苯基，联苯基，亚甲二苯基，氨基二苯基，二苯硫基，二苯磺酰基，二苯基亚异丙基，苯并二 烷基，苯并间二氧杂环戊烯基(benzodioxylyl)，苯并 嗪基，苯并 嗪酮基，苯并哌啶基(benzopiperadinyl)，苯并哌嗪基，苯并吡咯烷基，苯并吗啉基，亚甲二氧基苯基，亚乙二氧基苯基等。所述芳基可以任选稠合到环烷基或杂环烷基环上，如本文所定义。稠合到杂环烷基上的芳基的实例包括3，4-二氢-1H-喹啉-2-酮，3，4-二氢-2H-苯并[1，4] 嗪和1，2，3，4-四氢-异喹啉。优选的芳基包括任选取代的苯基和任选取代的萘基。

[0282] 如本文中所用的术语″杂芳基”或″杂芳族″是指5至12个环原子的单环或双环基团，其具有至少一个芳族环，每个环含有4至8个原子，结合有一个或多个N，O或S杂原子，其余环原子是碳，其中理解的是杂芳基的连接点将在芳族环上。如本领域中技术人员周知的，杂芳基环比它们的全碳副本具有更低的芳族特性。因此，对于本发明而言，杂芳基只需要具有 一定程度的芳族特性。杂芳基部分的实例包括具有5至6个环原子和1至3个杂原子的单环芳族杂环，包括但不限于，吡啶基，嘧啶基，吡嗪基，吡咯基，吡唑基，咪唑基， 唑(oxazol)，异 唑，噻唑，异噻唑，三唑啉，噻二唑和 二唑啉(oxadiaxoline)，它们可以任选被1个或多个，优选1或2个取代基取代，所述的取代基选自：羟基，氰基，烷基，烷氧基，硫代基团，低级卤代烷氧基，烷硫基，卤素，低级卤代烷基，烷基亚磺酰基，烷基磺酰基，卤素，氨基，烷基氨基，二烷基氨基，氨基烷基，烷基氨基烷基和二烷基氨基烷基，硝基，烷氧基羰基和氨基甲酰基，烷基氨基甲酰基，二烷基氨基甲酰基，芳基氨基甲酰基，烷基羰基氨基和芳基羰基氨基。双环部分的实例包括但不限于，喹啉基，异喹啉基，苯并呋喃基，苯并噻吩基，苯并 唑，苯并异 唑，苯并噻唑和苯并异噻唑。双环部分可以在任一环上任选取代；但是连接点在含有杂原子的环上。

[0283] 如本文中所用的术语″杂环烷基″，“杂环基”或″杂环″表示由一个或多个稠合环或螺环，优选1至2个环组成的一价饱和环状基团，每个环3至8个原子，其结合有一个或多个环杂原子(选自N，O或S(O)0-2)，并且其可以任选独立地被1个或多个，优选1个或2个取代基取代，所述的取代基选自：羟基，氧代，氰基，低级烷基，低级烷氧基，低级卤代烷氧基，烷硫基，卤素，低级卤代烷基，羟烷基，硝基，烷氧基羰基，氨基，烷基氨基，烷基磺酰基，芳基磺酰基，烷基氨基磺酰基，芳基氨基磺酰基，烷基磺酰基氨基，芳基磺酰基氨基，烷基氨基羰基，芳基氨基羰基，烷基羰基氨基，芳基羰基氨基，除非另外指出。杂环基的实例包括但不限于，氮杂环丁烷基，吡咯烷基，六氢氮杂 基，氧杂环丁烷基，四氢呋喃基，四氢噻吩基， 唑烷基，噻唑烷基，异 唑烷基，吗啉基，哌嗪基，哌啶基，四氢吡喃基，硫代吗啉基，奎宁环基和咪唑啉基。

[0284] 通 常 使 用 的 缩 写 包 括：乙 酰 基 (Ac)，偶 氮 二 异 丁 腈(azo-bis-isobutyrylnitrile)(AIBN)，大气压(Atm)，9-硼杂双环[3.3.1]壬烷(9-BBN或BBN)，叔丁氧羰基(Boc)，焦碳酸二叔丁酯(di-tert-butyl pyrocarbonate)或boc酸酐(BOC2O)，苄基(Bn)，丁基(Bu)，化学文摘登记号(CASRN)，苄氧羰基(CBZ或Z)，羰基二咪唑(CDI)，1，4-二氮杂双环[2.2.2]辛烷(DABCO)，三氟化二乙氨基硫(DAST)，二亚苄基丙酮(dba)，1，5-二氮 杂双环[4.3.0]壬-5-烯(DBN)，1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)，N，N′-二环己基碳二亚胺(DCC)，1，2-二氯乙烷(DCE)，二氯甲烷(DCM)，偶氮二羧酸二乙酯(DEAD)，偶氮二羧酸二异丙酯(DIAD)，氢化二异丁基铝(DIBAL或DIBAL-H)，二异丙基乙胺(DIPEA)，N，N-二甲基乙酰胺(DMA)，4-N，N-二甲基氨基吡啶(DMAP)，N，N-二甲基甲酰胺(DMF)，二甲亚砜(DMSO)，1，1′-双-(二苯基膦基)乙烷(dppe)，1，1′-双-(二苯基膦基)二茂铁(dppf)，1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDCI)，乙基(Et)，乙酸乙酯(EtOAc)，乙醇(EtOH)，2-乙氧基-2H-喹啉-1-羧酸乙酯(EEDQ)，二乙醚(Et2O)，O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’N’-四甲基脲 六氟磷酸盐乙酸(HATU)，乙酸(HOAc)，1-N-羟基苯并三唑(HOBt)，高压液相色谱(HPLC)，异丙醇(IPA)，六甲基二硅氮化锂(lithium hexamethyl disilazane)(LiHMDS)，甲醇(MeOH)，熔点(mp)，MeSO2-(甲磺酰基或Ms)，甲基(Me)，乙腈(MeCN)，间氯过苯甲酸(MCPBA)，质谱(ms)，甲基叔丁基醚(MTBE)，N-溴琥珀酰亚胺(NBS)，N-羧基酸酐(NCA)，N-氯琥珀酰亚胺(NCS)，N-甲基吗啉(NMM)，N-甲基吡咯烷酮(NMP)，氯铬酸吡啶 (PCC)，重铬酸吡啶 (PDC)，苯基(Ph)，丙基(Pr)，异丙基(i-Pr)，磅/平方英寸(psi)，吡啶(pyr)，室温(rt或RT)，叔丁基二甲基甲硅烷基或t-BuMe2Si(TBDMS)，三乙胺(TEA或Et3N)，2，2，6，6-四甲基哌啶1-氧基(TEMPO)，三氟甲磺酸根或CF3SO2-(Tf)，三氟乙酸(TFA)，1，1′-双-2，2，6，6-四甲基庚烷-2，6-二酮(TMHD)，O-苯并三唑-1-基-N，N，N′，N′-四甲基脲 四氟硼酸盐(TBTU)，薄层色谱(TLC)，四氢呋喃(THF)，三甲代甲硅烷基或Me3Si(TMS)，一水合对甲苯磺酸(TsOH或pTsOH)，4-Me-C6H4SO2-或甲苯磺酰基(Ts)，N-氨基甲酸乙酯-N-羧基酸酐(UNCA)。当用于烷基部分时，包括前缀正(n)，异(i-)，仲(sec-)，叔(tert-)和新(neo)的常规命名法具有它们的惯用含义(Rigaudy和Klesney，Nomenclature in Organic Chemistry(有机化学中的命名法)，IUPAC 1979Pergamon Press，牛津)。

[0285] 如本文中所用的术语“关节炎”表示急性风湿性关节炎，慢性风湿性关节炎，衣原体性关节炎(chlamydial arthritis)，慢性吸收性关节炎，乳糜性关节炎(chylous arthritis)，基于肠疾病的关节炎，丝虫性关节炎(filarial arthritis)，淋病性关节炎，痛风性关节炎，血友病性关节炎，增殖性关节炎， 幼年慢性关节炎，莱姆关节炎，新生驹关节炎(neonatal foal arthritis)，小结状关节炎(nodular arthritis)，褐黄病性关节炎，银屑病关节炎或化脓性关节炎，或需要以足以抑制BTK的剂量向哺乳动物给药治疗有效剂量的式I-V化合物的相关疾病。

[0286] 本发明的化合物可用于治疗患有自身免疫病症或紊乱的受治者。如本文中所用的术语″自身免疫病症″和类似术语表示由动物免疫系统造成的疾病、紊乱或病症。自身免疫紊乱是动物自身免疫系统错误地攻击自身，从而以动物自身的细胞、组织和/或器官为靶标的那些疾病。例如，自身免疫反应针对的是多发性硬化中的神经系统和节段性回肠炎中的肠。在其它自身免疫紊乱如系统性红斑狼疮(狼疮)中，影响的组织和器官在患有相同疾病的个体中可能不同。一个狼疮患者可能受影响的是皮肤和关节，而另一个则可能受影响的是皮肤、肾和肺。最终，由免疫系统对某些组织的损害可能是永久性的，如I型糖尿病中胰的产生胰岛素的细胞的破坏那样。采用本发明的化合物和方法可以改善的具体的自身免疫紊乱包括但不限于：神经系统的自身免疫紊乱(例如，多发性硬化，重症肌无力，自身免疫性神经病如吉-巴综合征(Guillain-Barre)和自身免疫性葡萄膜炎)，血液的自身免疫紊乱(例如，自身免疫溶血性贫血，恶性贫血和自身免疫性血小板减少症)，血管的自身免疫紊乱(例如，颞动脉炎，抗磷脂(anti-phospholipid)综合征，血管炎(vasculitides)如韦格纳肉芽肿病和贝赫切特病)，皮肤的自身免疫紊乱(例如，银屑病，疱疹样皮炎(dermatitis herpetiformis)，寻常性天疱疮和白癜风)，胃肠系统的自身免疫紊乱(例如，节段性回肠炎，溃疡性结肠炎，原发性胆汁性肝硬化和自身免疫性肝炎)，内分泌腺的自身免疫紊乱(例如，1型或免疫-介导的糖尿病，格雷夫斯病.桥本甲状腺炎，自身免疫性卵巢炎和睾丸炎，和肾上腺自身免疫紊乱)；和多器官的自身免疫紊乱(包括结缔组织和肌骨系统疾病)(例如，类风湿性关节炎，系统性红斑狼疮，硬皮病，多肌炎，皮肌炎，脊柱关节病如强直性脊柱炎和舍格伦综合征)或需要以足以抑制BTK的剂量向哺乳动物给药治疗有效剂量的式I-V化合物的相关疾病。另外，其它免疫系统介导的疾病，如移植-对-宿主疾病和变应性紊乱，也包括在本文中的免疫紊乱的定义中。因为许多免疫紊乱是由炎症造成的，所以在被认为是免疫紊乱和炎性紊乱的紊乱之间有一些重叠。 出于本发明的目的，在这种重叠的紊乱的情况下，其可以被认为是免疫紊乱或炎性紊乱。本文中的″免疫紊乱的治疗″是指向患有免疫紊乱、有这种疾病的症状或易患这种疾病的受治者给药本发明的化合物或组合物，其目的是治愈、减轻、改变、影响或预防所述自身免疫紊乱、其症状或患这种病的倾向。

[0287] 如本文中所用的术语“哮喘”表示以可逆的气道阻塞、气道炎症和对多种刺激的增加的气道反应性为特征的肺部疾病、紊乱或病症。

[0288] 术语“治疗”(″treat″，″treatment″或″treating″)是指治疗性治疗和预防性或防范性措施，其中受治者被防止或减缓(减轻)不希望有的生理变化或紊乱，如癌症的发展或扩散。有益的或需要的临床结果包括但不限于：症状的缓和，疾病范围的缩小，疾病状态的稳定(即，不恶化)，疾病进展的延迟或减缓，疾病状态的改善或减轻，以及缓解(无论是部分还是全部)，无论可检测的或不可检测的。″治疗″还可以表示与如果不接受治疗所预期的存活时间相比，延长的存活时间。需要治疗的那些受治者包括已经患有所述病症或紊乱的那些以及易于患所述病症或紊乱的那些或想要预防所述病症或紊乱的那些。例如，治疗炎性病症表示减小炎症的范围或严重性。减小可以表示但不限于炎症的完全消除。例如，如通过本文公开的或本领域已知的任何合适的测量技术或测定法所确定的，与未治疗的或对照受治者相比，所述的减小可以包括减小5％，10％，20％，30％，40％，50％，
60％，70％，80％，90％或100％或之间的任何点。

[0289] 在下面的表中提供由本发明包含并且在本发明范围内的代表性化合物的实例。提供下面的这些实施例和制备以使本领域的技术人员能够更清楚地理解并且实践本发明。它们不应当被认为是限制本发明的范围，而仅为示例性的并且是其代表。

[0290] 通常，本文中使用的命名法基于AUTONOMTM v.4.0，一种用于产生IUPAC系统命名的Beilstein Institute计算机化的系统。如果在描绘的结构和给出该结构的名称之间有差异，则描绘的结构将给予更大的权重。此外，如果结构或结构的一部分的立体化学没有用例如粗体或虚线指示，则所述结构或结构的一部分将解释为包含其全部立体异构体。

[0291] 表I描述了根据通式II的6-苯基-咪唑并[1，2-a]吡嗪衍生物的实例：

[0292] 表I.

[0293]

[0294]

[0295] 本文中描述的6-苯基-咪唑并[1，2-a]吡嗪衍生物是激酶抑制剂，特别是Btk抑制剂。这些抑制剂可以用于治疗哺乳动物中的一种或多种响应激酶抑制的疾病，包括响应Btk抑制和/或B-细胞增殖的抑制的疾病。不希望束缚于任何特定的理论，相信本发明化合物与Btk的相互作用导致Btk活性的抑制，并因此得到这些化合物的药学应用。因此，本发明包括用于治疗具有响应Btk活性的抑制和/或抑制B-细胞增殖的疾病的哺乳动物，例如人的方法，该方法包括：向具有这样的疾病的哺乳动物给药有效量的至少一种在本文中提供的化学实体。可以在实验上例如通过测定化合物的血液浓度，或理论上通过计算生物利用度，确定有效浓度。除了Btk之外，还可能受到影响的其它激酶包括但不限于，其它酪氨酸激酶和丝氨酸/苏氨酸激酶。

[0296] 激酶在控制基本细胞过程如增殖、分化和死亡(细胞凋亡)的信号传导路径方面起着显著的作用。异常的激酶活性已经暗示于各种疾病中，所述的疾病包括多种癌症、自身免疫和/或炎性疾病和急性发炎反应。激酶在关键细胞信号传导路径中的多面性作用提供识别靶向激酶和信号传导路径的新药物的显著机会。

[0297] 一个实施方案包括用于治疗具有自身免疫和/或炎性疾病或响应Btk活性和/或B-细胞增殖的抑制的急性发炎反应的患者的方法。

[0298] 使用根据本发明的化合物和组合物可以影响的自身免疫和/或炎性疾病包括但不限于：银屑病，变态反应，节段性回肠炎，肠易激综合征，舍格伦病，组织移植物排斥反应和移植器官的超急性排斥反应，哮喘，系统性红斑狼疮(和相关的肾小球肾炎)，皮肌炎，多发性硬化，硬皮病，血管炎(ANCA-相关的和其它的血管炎)，自身免疫溶血性和血小板减少性症状，古德帕斯综合征(和相关的肾小球肾炎和肺出血)，动脉粥样硬化，类风湿性关节炎，慢性的特发性血小板减少性紫癜(ITP)，艾迪生病，帕金森病，阿尔茨海默病，糖尿病，脓毒性休克和重症肌无力。

[0299] 本文中包括的是治疗方法，其中将本文中提供的至少一种化学实体与抗炎药组合给药。抗炎药包括但不限于：NSAID，非特异性和COX-2特异性环氧合酶酶抑制剂，金化合物，皮质类固醇类，甲氨蝶呤，肿瘤坏死因子(TNF)受体拮抗剂，免疫抑制剂和甲氨蝶呤。

[0300] NSAID的实例包括但不限于，布洛芬，氟比洛芬，萘普生和萘普生钠，双氯芬酸，双氯芬酸钠和米索前列醇的组合，舒林酸，苯 丙酸，二氟尼柳，吡罗昔康，吲哚美辛，依托度酸，非诺洛芬钙，酮洛芬，萘丁美酮钠，柳氮磺吡啶，托美丁钠和羟氯喹。NSAID的实例还包括COX-2特异性抑制剂如塞来考昔，伐地考昔，芦米考昔和/或艾托考昔。

[0301] 在一些实施方案中，抗炎药是水杨酸酯或盐。水杨酸酯或盐包括但不限于乙酰基水杨酸或阿斯匹林，水杨酸钠和胆碱以及水杨酸镁。

[0302] 抗炎药还可以是皮质类固醇类。例如，皮质类固醇类可以是可的松，地塞米松，甲泼尼龙，泼尼松龙，泼尼松龙磷酸钠，或泼尼松。

[0303] 在另外的实施方案中，抗炎药是金化合物如金硫丁二钠或金诺芬。

[0304] 本发明还包括其中抗炎药是代谢抑制剂如二氢叶酸还原酶抑制剂如甲氨蝶呤或二氢乳清酸盐脱氢酶抑制剂如来氟米特的实施方案。

[0305] 本发明的其它实施方案涉及其中至少一种抗炎化合物是抗-C5单克隆抗体(如依库珠单抗或培克珠单抗)，TNF拮抗剂如依那西普(entanercept)或英利昔单抗的组合，所述英利昔单抗是一种抗-TNFα单克隆抗体。

[0306] 本发明的再其它的实施方案涉及其中至少一种活性药是免疫抑制剂化合物如选自甲氨蝶呤，来氟米特，环胞素，他克莫司，硫唑嘌呤和吗替麦考酚酯中的免疫抑制剂化合物的组合。

[0307] 表达BTK的B-细胞和B-细胞前体已经暗示于B-细胞恶性的病理学中，B-细胞恶性包括但不限于B-细胞淋巴瘤，淋巴瘤(包括何杰金和非-何杰金淋巴瘤)，毛细胞淋巴瘤，多发性骨髓瘤，慢性的和急性的髓细胞源性白血病和慢性的和急性的淋巴细胞白血病。

[0308] 已经表明BTK是在B-系淋巴样细胞中Fas/APO-1(CD-95)死亡诱导信号传导复合物(DISC)的抑制剂。白血病/淋巴瘤细胞的命运可能在于由DISC活化的半胱天冬蛋白酶的反向前细胞凋亡作用和包括BTK和/或其底物的上游抗细胞凋亡调节机理之间的平衡(Vassilev等，J.Biol.Chem.1998，274，1646-1656)。

[0309] 还发现BTK抑制剂可以用作化学敏化剂，因此可以用于与其它化学治疗药组合，所述的化学治疗药特别是诱导细胞凋亡的药。可以与化学敏化BTK抑制剂组合使用的其它化学治疗药的实例包括拓扑异构酶I抑制剂(喜树碱或托泊替康)，拓扑异构酶II抑制剂(如道诺霉素和依托泊苷)，烷化剂(如环磷酰胺，美法仑和BCNU)，微管蛋白导向的药剂(如泰素和长春碱)和生物制剂(例如抗体如抗CD20抗体，IDEC 8，免疫毒素和细胞因子)。

[0310] Btk活性已经与一些表达由部分染色体9和22的易位导致的bcr-abl融合基因的白血病相关。这些异常通常在慢性髓细胞源性白血病中观察到。Btk本质上由bcr-abl激酶磷酸化，这引发在bcr-abl细胞中防止细胞凋亡的下游生存信号(Feldhahn等，J.Exp.Med.2005201(11)：1837-1852)。

[0311] 可以以广泛种类的口服剂型和载体配制本发明的化合物。口服可以是片剂，包被片剂，糖衣丸，硬和软明胶胶囊，溶液，乳剂，糖浆或混悬剂的形式。在其它给药途径中，当由包括持续(静脉内滴注)局部肠胃外，肌内，静脉内，皮下，透皮(其可以包含渗透增强剂)，含服，经鼻，吸入和栓剂给药的其它给药途径给药时，本发明的化合物是有效的。优选的给药方式通常是使用常规日剂量方案进行口服，所述日剂量方案可以根据痛苦的程度和患者对活性成分的反应进行调节。

[0312] 本发明的一种化合物或多种化合物以及它们的药用盐，与一种或多种常用赋形剂，载体或稀释剂一起可以被置于药物组合物和单位剂量的形式中。药物组合物和单位剂型可以包括常规比例的常用的成分，存在另外的活性化合物或要素，或不存在另外的活性化合物或要素，并且所述单位剂 型可以包含与所意欲使用的日剂量范围相当的任何适合的有效量的活性成分。所述药物组合物可以以固体如片剂或填充胶囊，半固体，粉末剂，持续释放制剂或液体如溶液，混悬剂，乳剂，酏剂或填充胶囊使用，进行口服应用；或以用于直肠或阴道施用的栓剂形式使用；或以用于肠胃外使用的无菌可注射溶液的形式使用。典型的制剂包含约5％到约95％的一种活性化合物或多种活性化合物(w/w)。术语“制剂”或“剂型”意欲包括活性化合物的固体和液体制剂，并且本领域的技术人员将理解活性成分可以根据靶器官或组织并且根据需要的剂量和药物代谢动力学参数而以不同制剂存在。

[0313] 术语“赋形剂”用于本文时指用于制备药物组合物的、通常是安全无毒并且没有生物学上或其它方面不适宜的化合物，并且包括可用于兽医应用以及人药物应用的赋形剂。本发明的化合物可以单独施用，但是通常与一种或多种根据意欲给药的途径和标准的药物实践选择的适合的药物赋形剂、稀释剂或载体混合施用。

[0314] “药用的”是指其可以用于制备通常安全、无毒并且在生物学上和其它方面都没有不适宜的药物组合物，并且包括其对于兽医以及人类药物用途是可接受的。

[0315] 活性成分的“药用盐”形式也可以在开始赋予活性成分需要的药物代谢动力学性质，所述药物代谢动力学性质在非盐形式中是缺乏的，并且就其体内治疗活性而论，可能甚至正面影响活性成分的药效学。短语化合物的“药用盐”指药物学上可接受的并且具有母体化合物的需要的药理活性的盐。所述盐包括：(1)酸加成盐，与无机酸如盐酸，氢溴酸，硫酸，硝酸，磷酸等形成；或与有机酸如乙酸，丙酸，己酸，环戊烷丙酸，羟基乙酸，丙酮酸，乳酸，丙二酸，琥珀酸，苹果酸，马来酸，富马酸，酒石酸，柠檬酸，苯甲酸，3-(4-羟基苯甲酰)苯甲酸，肉桂酸，扁桃酸，甲磺酸，乙磺酸，1，2-乙二磺酸，2-羟基乙磺酸，苯磺酸，4-氯苯磺酸，2-萘磺酸，4-甲苯磺酸，樟脑磺酸，4-甲基二环[2.2.2]-辛-2-烯-1-羧酸，葡糖庚酸，3-苯基丙酸，三甲基乙酸，叔丁基乙酸，月桂基硫酸，葡萄糖酸，谷氨酸，羟基萘甲酸，水杨酸，硬脂酸，粘康酸等形成；或(2)当在母体化合物中存在的酸质子被金属离子例如碱金属离子，碱土离子或铝离子替换时形成的盐；或 与有机碱如乙醇胺，二乙醇胺，三乙醇胺，氨丁三醇，N-甲基葡糖胺等配位形成的盐。

[0316] 固体形式制剂包括粉末，片剂，丸剂，胶囊，扁囊剂，栓剂和可分散的细粒。固体载体可以是一种或多种物质，其也可以充当稀释剂，调味剂，增溶剂，润滑剂，悬浮剂，粘合剂，防腐剂，片剂崩解剂或包封材料。在粉末中，所述载体通常是细碎固体，其是与细碎活性成分的混合物。在片剂中，活性成分通常与具有必要的结合能力的载体以适合比例混合，并且被压制成需要的形状和大小。适合的载体包括但不限于碳酸镁，硬脂酸镁，滑石，糖，乳糖，果胶，糊精，淀粉，明胶，黄蓍胶，甲基纤维素，羧甲基纤维素钠，低熔点蜡，可可脂等。除了活性成分之外，固体形式的制剂可以包含着色剂，香料，稳定剂，缓冲剂，人工和天然的甜味剂，分散剂，增稠剂，溶解剂等。

[0317] 液体制剂也适合于口服施用，所述液体制剂包括液体制剂，包括乳剂，糖浆，酏剂，水溶液，水性混悬剂。这些包括固体形式制剂，意欲将其在即将使用前转化为液体形式制剂。乳剂可以以溶液形式例如以丙二醇水溶液的形式制备或可以包含乳化剂，如卵磷脂，去水山梨糖醇单油酸酯，或阿拉伯胶。可以通过将活性成分溶解在水中并加入适合的着色剂，香料，稳定剂和增稠剂来制备水溶液。可以通过将细碎的活性成分与粘性物质如天然或合成的树胶，树脂，甲基纤维素，羧甲基纤维素钠及其它的熟知的悬浮剂一起分散在水中来制备水性混悬剂。

[0318] 本发明的化合物可以配制用于肠胃外施用(例如通过注射例如推注，或连续输注)并且可以以单位剂型在安瓿，预装注射器，小体积的输注液中或在多剂量容器中与加入的防腐剂一起存在。所述组合物可以采用这样的形式，如在油性或水性赋形剂中的混悬剂，溶液或乳剂形式，例如在水性聚乙二醇中的溶液。油性或非水性载体，稀释剂，溶剂或赋形剂的实例包括丙二醇，聚乙二醇，植物油(例如橄榄油)和可注射有机酯(例如油酸乙酯)，并且可以包含配制剂如防腐剂，湿润剂，乳化剂或悬浮剂，稳定剂和/或分散剂。备选地，所述活性成分可以以粉末形式存在，所述粉末通过无菌分离灭菌固体获得或通过从溶液中冻干获得，其在使用前用适合的赋形剂例如无菌的无热原的水进行重构。

[0319] 可以配制本发明的化合物，作为软膏、乳膏或洗剂，或作为透皮贴片用于给表皮的局部给药。软膏和乳膏例如可以用水性或油性基质，在加入适宜的增稠剂和/或胶凝剂的情况下配制。洗剂可以用水性或油性基质配制，并且通常也将含有一种或多种乳化剂、稳定剂、分散剂、混悬剂、增稠剂或着色剂。适宜于口中局部给药的制剂包括：锭剂，其在调味基质中包含活性成分，所述的调味基质通常是蔗糖和阿拉伯胶或黄蓍胶；软锭剂，其在惰性基质中包含活性成分，所述的惰性基质如明胶和甘油或蔗糖和阿拉伯胶；以及漱口药，其在适宜液体载体中包含活性成分。

[0320] 可以将本发明的化合物配制作为栓剂施用。首先将低熔点蜡，如脂肪酸甘油酯或可可脂的混合物融化，并且例如通过搅拌均匀分散活性成分。接着，将融化的均匀混合物倾入合宜尺寸的模具中，使其冷却并且固化。

[0321] 可以将本发明的化合物配制用于阴道施用。阴道栓剂，棉球，乳膏剂，凝胶，糊剂，泡沫或喷雾剂除了活性成分外，还包含如本领域已知是合适的载体。

[0322] 可以配制本发明的化合物用于经鼻给药。由常规装置例如用滴管、吸管或喷雾器将溶液剂或混悬剂直接施用至鼻腔。制剂可以以单剂量或多剂量形式提供。在滴管或吸管的后一种情况下，这可以通过患者给药适宜的、预定体积的溶液剂或混悬剂来实现。在喷雾器的情况下，这可以通过例如计量的喷雾泵来实现。

[0323] 可以配制本发明的化合物用于气雾剂给药，特别是对呼吸道给药，并且包括鼻内给药。该化合物通常具有小的粒子大小，例如约五(5)微米或更小。这样的粒子大小可以通过本领域中已知的方式获得，例如通过微粉化获得。将活性成分提供在具有适宜推进剂的加压容器中，所述的推进剂如氯氟烃(CFC)，例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷或二氯四氟乙烷，或二氧化碳或其它适宜的气体。气雾剂还可以方便地含有表面活性剂如卵磷脂。药物的剂量可以通过计量阀来控制。备选地，活性成分可以以干粉的形式提供，例如化合物在适宜粉末基质中的粉末混合物，所述的粉末基质如乳糖、淀粉、淀粉衍生物如羟丙基甲基纤维素和聚乙烯吡咯烷酮(polyvinylpyrrolidine)(PVP)。粉末载体将在鼻腔中形成凝胶。粉末组合物可以以单位剂量形式存在，例如在如明胶的胶囊或药筒中，或泡眼包装中， 这些包装中的粉末剂可以通过吸入器给药。

[0324] 当需要时，可以用适合于活性成分的持续或控制释放施用的肠溶衣制备制剂。例如，本发明的化合物可以在透皮或皮下药物递送装置中配制。当所述化合物的持续释放是需要的时并且当患者顺应治疗方案是重要的时，这些递送系统是有利的。在透皮递送系统中的化合物经常附着于皮肤粘附性固体支持物。目的化合物还可以与渗透增强剂例如月桂氮 酮(1-十二烷基氮杂-环庚-2-酮)组合。将持续释放递送系统通过外科手术或注射皮下插入皮下层。皮下植入物在脂溶性膜例如硅橡胶或可生物降解的聚合物例如聚乳酸(polyactic acid)中包封化合物。

[0325] 在<雷明顿：药物科学和实践(Remington：The Science and Practice of Pharmacy)1995，由Martin编辑，Mack出版公司，第19版，Easton，宾夕法尼亚州>中描述了适合的制剂以及药物载体，稀释剂和赋形剂。有经验的制剂科学家可以在本发明说明书教导的范围内改变制剂以提供多种制剂，其用于给药的具体途径，而不使本发明的组合物不稳定或有损它们的治疗活性。

[0326] 使本发明的化合物在水或其它赋形剂中的溶解度增高的它们的修饰，例如可以容易地通过较小的修饰(形成盐，酯化等)实现，这都在本领域普通技能的范围内。也在本领域普通技能范围内的是，改变给药途径和具体化合物的剂量方案从而使本发明化合物的药物代谢动力学在患者中获得最大的有益效果。

[0327] 用于本文时，术语″治疗有效量″是指减轻个体中的疾病的症状所需要的量。在每个具体病例中，根据个体需要调整剂量。取决于多种因素，该剂量可以在广泛范围内改变，所述因素如待治疗的疾病的严重性，患者的年龄和一般健康状况，治疗患者的其它药物，给药的途径和形式，和涉及的执业医生的偏好和经验。对于口服给药，在每天约0.01和约1000mg/kg体重之间的日剂量应该在单一治疗和/或组合治疗情况中是适合的。优选的日剂量在每天约0.1和约500mg/kg体重之间，更优选在每天0.1和约100mg/kg体重之间，最优选在每天1.0和约10mg/kg体重之间。因此，对于给药给70kg的人，剂量范围是约7mg到0.7g/天。日剂量可以以单一剂量或以分剂量进行给药，典型地在1-5个剂量/天。一般而言，用 比化合物的最佳剂量少的较小剂量开始治疗。随后，通过小增量增加剂量直到达到个体患者的最佳效果。治疗本文所述疾病的本领域普通技术人员能够不经过过度实验和根据个人的知识经验和本申请的公开内容来确定本发明化合物对于给定疾病和患者的治疗有效量。

[0328] 药物制剂优选为单位剂量形式。在这种形式下，将制剂再分成含有适宜量的活性成分的单位剂量。单位剂量形式可以是包装制剂，该包装含有离散量的制剂，如小包片剂、胶囊和在管瓶或安瓿中的粉剂。此外，单位剂量形式可以是胶囊、片剂、扁囊剂或锭剂本身，或者它可以是适宜数量的包装形式的这些中的任何一种。实施例

[0329] 通用方案1.

[0330]

[0331] 实施例1：二乙基-(5-硝基-吡啶-2-基)-胺

[0332] 将2-溴-5-硝基吡啶(4.0g，19mmol)，二乙胺(1.5g，20mmol)，TBAI(0.33g，0.9mmole)和碳酸钾(2.7g，20mmol)在DMSO(40ml)中的悬浮液在50℃保持3h，然后在rt保持16h。将悬浮液在乙酸乙酯和盐水之间分配。将有机层用硫酸钠干燥和真空浓缩。残余物从甲醇重结晶，提供2.0g(54％收率)的所需产物。

[0333] 实施例2：N*2*，N*2*-二乙基-吡啶-2，5-二胺

[0334] 将固体10％Pd/C(0.1g)快速加入到已经用氮气充分鼓泡的二乙基-(5-硝基-吡啶-2-基)-胺(实施例1)(1g，5.1mmol)在MeOH(50mL)中的溶液中。将混合物置于真空下5min，之后，将其与H2气球密接并且在rt保持2h。将Pd催化剂过滤，真空浓缩滤液，并且将残余物用色谱法纯化，提供0.8g(97％)的所需产物。

[0335] 实施例3：N*5*-(6-溴-咪唑并[1，2-a]吡嗪-8-基)-N*2*，N*2*-二乙基-吡啶-2，5-二胺

[0336] 将6，8-二溴-咪唑并[1，2-a]吡嗪(0.4g，1.44mmol)，N*2*，N*2*-二乙基-吡啶-2，5-二胺(实施例2)(0.239g，1.44mmol)，碳酸钾(0.198，1.44mmol)和DMF(5mL)的混合物在氩气气氛下于100℃保持3h。将混合物冷却并且在乙酸乙酯和盐水之间分配。将有机层用硫酸钠干燥和真空浓缩。残余物通过色谱法(30％乙酸乙酯/己烷-100％乙酸乙酯)纯化，提供0.250g(48％收率)的所需产物。

[0337] 实施例4：6-环丙基-2-{3-[8-(6-二乙基氨基-吡啶-3-基氨基)-咪唑并[1，2-a]吡嗪-6-基]-2-羟甲基-苯基}-3，4-二氢-2H-异喹啉-1-酮(II-4)

[0338] 将N*5*-(6-溴-咪唑并[1，2-a]吡嗪-8-基)-N*2*，N*2*-二乙基-吡啶-2，5-二胺(实施例3)(0.1g，0.27mmol)和乙酸2-(6-环丙基-1-氧代-3，4-二氢-1H-异喹啉-2-基)-6-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-苄酯(0.128g，
0.27mmol)放入DME(2mL)中。向上述混合物中加入碳酸钠(0.085g， 0.81mmole)和水(2mL)，并且将混合物用氩气充分鼓泡。然后将Pd(PPh3)4(0.015，0.014mmole)一次性加入，并且将反应混合物在100℃保持4h。在冷却后，将混合物在乙酸乙酯和盐水之间分配，用乙酸钠干燥有机层，并且在真空中除去挥发物。残余物用硅胶制备型TLC纯化，提供+
0.085g(55％收率)的所需产物。(M+H) ＝574。

[0339] 实施例5：(6-溴-咪唑并[1，2-a]吡嗪-8-基)-(6-吗啉-4-基-吡啶-3-基)-胺[0340] 按照实施例3中所述的方法合成所需的化合物，使用6-吗啉-4-基-吡啶-3-基胺，以52％的收率得到标题化合物，为黄色固体。

[0341] 实施例6：6-环丙基-2-{2-羟甲基-3-[8-(6-吗啉-4-基-吡啶-3-基氨基)-咪唑并[1，2-a]吡嗪-6-基]-苯基}-3，4-二氢-2H-异喹啉-1-酮(II-3)

[0342] 按照实施例4中所述的方法合成所需的化合物，使用(6-溴-咪唑并[1，2-a]吡嗪-8-基)-(6-吗啉-4-基-吡啶-3-基)-胺(实施例5)，以39％的收率得到标题化合+物，为黄色固体。(M+H) ＝588.6。

[0343] 实施例7：(6-溴-咪唑并[1，2-a]吡嗪-8-基)-(4-吗啉-4-基甲基-苯基)-胺[0344] 按照实施例3中所述的方法合成所需的化合物，使用4-吗啉-4-基甲基-苯胺，以27％的收率得到标题化合物，为黄色固体。

[0345] 实施例8：6-环丙基-2-{2-羟甲基-3-[8-(4-吗啉-4-基甲基-苯基氨基)-咪唑并[1，2-a]吡嗪-6-基]-苯基}-3，4-二氢-2H-异喹啉-1-酮(II-2)

[0346] 按照实施例4中所述的方法合成所需的化合物，使用(6-溴-咪唑并[1，2-a]吡嗪-8-基)-(4-吗啉-4-基甲基-苯基)-胺(实施例7)，以40％的收率得到标题化合物，+为黄色固体。(M+H) ＝601.7。

[0347] 实施例9：6-环丙基-2-(2-羟甲基-3-{8-[4-(吗啉-4-羰基)-苯基氨基]-咪唑并[1，2-a]吡嗪-6-基}-苯基)-3，4-二氢-2H-异喹啉-1-酮(II-1)

[0348] 按照实施例4中所述的方法合成所需的化合物，使用[4-(6-溴-咪唑并[1，2-a]吡嗪-8-基氨基)-苯基]-吗啉-4-基-甲酮，以44％的收率得到标题化合 物，为黄色固+体。(M+H) ＝615.7。

[0349] 通用方案2.

[0350]

[0351] 实施例10：4-(6-溴-咪唑并[1，2-a]吡嗪-8-基氨基)-苯甲酸

[0352] 将在NMP(12mL)中的6，8-二溴-咪唑并[1，2-a]吡嗪(6.19g，22.4mmol)和对氨基苯甲酸(3.07g，22.4mmol)在100℃保持3h。加入DCM(200mL)，并且将得到的固体过滤，用DCM洗涤，并且真空干燥，得到6.33g(85％)的所需产物。

[0353] 实施例11：[4-(6-溴-咪唑并[1，2-a]吡嗪-8-基氨基)-苯基]-(4-甲基-哌嗪-1-基)-甲酮

[0354] 向4-(6-溴-咪唑并[1，2-a]吡嗪-8-基氨基)-苯甲酸(实施例10)(6.29g，18.9mmol)和六氟磷酸(苯并三唑-1-基氧基)三(二甲基氨基) (9.18g，20.8mmol)中加入DMF(55mL)和1-甲基哌嗪(7.56g，75.5mmol)。在rt搅拌1h后，用水(450mL)稀释反应物。将得到的固体过滤，用水洗涤并且真空干燥，得到6.23g(79％)的所需产物。

[0355] 实施例12：{4-[6-(3-氨基-2-甲基-苯基)-咪唑并[1，2-a]吡嗪-8-基氨基]-苯 基}-(4-甲基-哌嗪-1-基)-甲酮

[0356] 将在DME(8mL)和水(4mL)中的[4-(6-溴-咪唑并[1，2-a]吡嗪-8-基氨基)-苯基]-(4-甲基-哌嗪-1-基)-甲酮(实施例11)(1.62g，3.90mmol)，2-甲基-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-苯胺(1.00g，4.29mmol)，Pd(PPh3)4(450mg，
0.39mmol)和碳酸钠(1.24g，11.7mmol)在微波反应器中于170℃保持12.5min。在乙酸乙酯和水之间分配反应混合物。将乙酸乙酯层用盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥，真空浓缩，并且用急骤色谱(7％甲醇/DCM)纯化，得到908mg(53％)的所需产物。

[0357] 实施例13：2-氨基-4-叔丁基-N-(2-甲基-3-{8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-羰基)-苯基氨基]-咪唑并[1，2-a]吡嗪-6-基}-苯基)-苯甲酰胺

[0358] 将在DMF(2mL)中的{4-[6-(3-氨基-2-甲基-苯基)-咪唑并[1，2-a]吡嗪-8-基氨基]-苯基}-(4-甲基-哌嗪-1-基)-甲酮(实施例12)(200mg，0.45mmol)，2-氨基-4-叔丁基苯甲酸(96mg，0.50mmol)，六氟磷酸(苯并三唑-1-基氧基)三(二甲基氨基) (203mg，0.50mmol)和三乙胺(156mg，1.54mmol)在rt保持24h，然后在60℃保持24h。加入水(50mL)，并且将得到的固体过滤，用水洗涤，和用急骤色谱(7％甲醇/DCM)纯化，得到63mg(0.10mmol)的所需产物。

[0359] 实施例14：7-叔丁基-3-(2-甲基-3-{8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-羰基)-苯基氨基]-咪唑并[1，2-a]吡嗪-6-基}-苯基)-3H-喹唑啉-4-酮(I-2)

[0360] 将在原甲酸三乙酯(2mL)中的2-氨基-4-叔丁基-N-(2-甲基-3-{8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-羰基)-苯基氨基]-咪唑并[1，2-a]吡嗪-6-基}-苯基)-苯甲酰胺(实施例13)(21mg，0.034mmol)在回流保持20分钟。将溶液冷却和真空浓缩。向残余物中加入DCM(2mL)和TFA(通过吸管加入8滴)，并且将溶液在rt保持20min。用饱和碳酸氢钠水溶液碱化得到的混合物，并且将溶液在乙酸乙酯和水之间分配。将有机层用盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥，真空浓缩，并且用制备型TLC(10％甲醇/DCM)纯化，得到3.8mg(18％)的所需+产物。(M+H)627.2。

[0361] 实施例15：7-叔丁基-3-(2-甲基-3-{8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-羰基)-苯基氨基]-咪唑并[1，2-a]吡嗪-6-基}-苯基)-1H-喹唑啉-2，4-二酮

[0362]

[0363] 将2-氨基-4-叔丁基-N-(2-甲基-3-{8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-羰基)-苯基氨基]-咪唑并[1，2-a]吡嗪-6-基}-苯基)-苯甲酰胺(实施例13)(23mg，0.037mmol)在DCM(2mL)中的溶液用20％光气的甲苯溶液(0.02mL 0.03mmol)在rt处理。在搅拌15分钟后，将溶液在乙酸乙酯和碳酸氢钠水溶液之间分配。将有机层用盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥，真空浓缩，并且用制备型TLC(10％甲醇/DCM)纯化，得到5.6mg(43％)的所需产物。+
(M+H)643.3。

[0364] 通用方案3.

[0365]

[0366] 实施例16：2-(3-溴-2-甲基-苯基)-3-(3-二甲基氨基-苯基氨基)-丙烯酸乙酯

[0367] 将(3-溴-2-甲基-苯基)-乙酸苄酯(421mg，1.32mmol)溶解在甲酸乙酯(2.5mL，31mmol)中。加入氢化钠(95％，67mg，2.6mmol)。在搅拌30分钟后，将其用1M HCl水溶液猝灭。将其在乙酸乙酯和水之间分配。将乙酸乙酯层用水洗涤，用盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥并且真空浓缩。

[0368] 将该物质的一部分和N，N-二甲基-苯-1，3-二胺(96mg，0.70mmol)在1mL乙醇中搅拌18小时。将其真空浓缩并且用急骤色谱(5至20％乙酸乙酯/己烷梯度洗脱)纯化，得到2-(3-溴-2-甲基-苯基)-3-(3-二甲基氨基-苯基氨基)-丙烯酸乙酯(164mg，0.407mmol)。MS(ESI)405.0(M+H)+。

[0369] 实施例17：3-(3-溴-2-甲基-苯基)-7-二甲基氨基-1H-喹啉-4-酮

[0370]

[0371] 向2-(3-溴-2-甲基-苯基)-3-(3-二甲基氨基-苯基氨基)-丙烯酸乙酯(实施例16)(100mg，0.248mmol)中加入4g多磷酸。将其在140℃搅拌10分钟。加入50ml水并且搅拌混合物。将得到的沉淀物过滤和用水洗涤。滤液用10％甲醇/DCM溶液萃取。有机层用无水硫酸镁干燥和真空浓缩。将得到的残余物与沉淀物合并，并且用急骤色谱(2至5％甲醇/DCM梯度洗脱)纯化，得到3-(3-溴-2-甲基-苯基)-7-二甲基氨基-1H-喹+啉-4-酮(22mg，0.062mmol)。MS(ESI)357.0(M+H)。

[0372] 通用方案4.

[0373]

[0374] 通用方案5.

[0375]

[0376] 实施例18：4-溴-2-(2-溴-乙基)-苯磺酰氯

[0377]

[0378] 将氯磺酸(17mL)滴加到0℃的1-溴-3-(2-溴-乙基)-苯(5g，19mmol)中。将混合物在0℃搅拌1h，然后在rt再搅拌3h。将混合物缓慢倾倒入冰-水中并且用二氯甲烷萃取，将合并的有机层在减压下蒸发，得到4.3g的粗制4-溴-2-(2-溴-乙基)-苯磺酰-氯，将其直接用于下一反应。MS(ESI)342.9(M-Cl+OH)。

[0379] 实施例19：布鲁顿酪氨酸激酶(Btk)抑制测定33

[0380] 该测定是通过过滤捕获放射性 P磷酸化产物。Btk，生物素化的SH2肽底物(Src同源性)与ATP的相互作用导致肽底物的磷酸化。生物素化的产物是结合的链霉抗生物素蛋白琼脂糖珠。所有结合的、放射性标记的产物通过闪烁计数器检测。

[0381] 测定的板是96-孔聚丙烯(Greiner)和96孔1.2μm亲水性PVDF过滤板(Millipore)。在此处报道的浓度是最终测定浓度：在DMSO(Burdick和 Jackson)中的10-100μM化合物，5-10nM Btk酶(His-标记的，全长)，30μM肽底物(生物素-Aca-AAAEEIYGEI-NH2)，100μM ATP(西格玛(Sigma))，8mM咪唑(西格玛，pH 7.2)，8mM甘油-2-磷酸(西格玛)，200μM EGTA(罗氏诊断(Roche Diagnostics))，1mM MnCl2(西
33
格玛)，20mM MgCl2(西格玛)，0.1mg/ml BSA(西格玛)，2mM DTT(西格玛)，1μCi P ATP(Amersham)，20％链霉抗生物素蛋白琼脂糖珠(Amersham)，50mM EDTA(Gibco)，2M NaCl(Gibco)，2M NaCl w/ 1％磷酸(Gibco)，microscint-20(铂尔金爱尔默(Perkin Elmer))。

[0382] 使用从标准的96孔板测定模板产生的数据，从每个化合物的10个数据点计算IC50测定值。在每个板上测试一种对照化合物和七种未知抑制剂，每个板进行两次。典型地，以半对数(half-log)稀释化合物，从100μM开始并且以3nM结束。对照化合物是星形孢菌素。在不存在肽底物时计数背景。在存在肽底物时，测定总活性。使用下列方法来测定Btk抑制。

[0383] 1)样品制备：将测试化合物以半对数增量，在测定缓冲液(咪唑，甘油-2-磷酸，EGTA，MnCl2，MgCl2，BSA)中稀释。

[0384] 2)珠制备

[0385] a.)通过在500g离心漂洗珠

[0386] b.)用PBS和EDTA重构所述珠以产生20％珠浆状物33

[0387] 3)在30℃预温育不含底物的反应混合物(测定缓冲液，DTT，ATP，P ATP)和具有33
底物的混合物(测定缓冲液，DTT，ATP，P ATP，肽底物)达15分钟。

[0388] 4)为了起始测定，在室温预温育10μL在酶缓冲液(咪唑，甘油-2-磷酸，BSA)中的Btk和10μL的测试化合物达10分钟。

[0389] 5)将30μL不含有或含有底物的反应混合物加入到Btk和化合物中。

[0390] 6)在30℃温育50μL的总测定混合物达30分钟。

[0391] 7)将40μL的测定物转移到过滤板中的150μL珠浆状物中来终止反应。

[0392] 8)在30分钟后，用下列步骤洗涤过滤板：

[0393] a.3x250μL NaCl

[0394] b.3x250μL NaCl，其包含1％磷酸

[0395] c.1x250μL H2O

[0396] 9)在65℃干燥板1小时或在室温干燥板过夜

[0397] 10)加入50μL microscint-20并且在闪烁计数器上计数33P cpm。

[0398] 从以cpm表示的原始数据计算百分比活性

[0399] 百分比活性＝(样品-bkg)/(总活性-bkg)x100

[0400] 使用一位点(one-site)剂量反应S形曲线模型从百分比活性计算IC50

[0401] y＝A+((B-A)/(1+((x/C)D))))

[0402] x＝化合物(cmpd)浓度，y＝％活性，A＝min，B＝max，C＝IC50，D＝1(希尔(hill)斜率)

[0403] 代表性的结果在下面表II中：

[0404] 表II.

[0405]化合物 Btk抑制IC50(μM)
II-1 0.025
II-2 0.037

[0406] 实施例20：在Ramos细胞中抑制B-细胞活化-B细胞FLIPR测定

[0407] 通过测定测试化合物对于抗-IgM刺激的B细胞应答的影响，证明本发明的化合物对B-细胞活化的抑制。

[0408] B细胞FLIPR测定是测定潜在抑制剂对于由抗-IgM抗体刺激导致的细胞内钙增加的影响的、基于细胞的功能方法。将Ramos细胞(人Burkitt’s淋巴瘤细胞系.ATCC-No.CRL-1596)培养在生长培养基(下述)中。在测定前一天，将Ramos细胞重悬浮在新鲜的生6
长培养基(与上相同)中并且以0.5x10/mL的浓度放置在组织培养瓶中。在测定当天，对
6
细胞计数并且将其以1x10/mL的浓度放入在组织培养瓶中补充了1μM FLUO-3AM(TefLabs目录号0116，在无水DMSO和10％嵌段聚醚酸(Pluronic acid)中制备)的生长培养基中，并且在37℃(4％CO2)温育1小时。为了去除细胞外染料，通过离心(5分钟，1000rpm)收
6 5
集细胞，并以1x10 细胞/mL重悬浮在FLIPR缓冲液(下述)中，接着以1x10 细胞/孔分配在96孔聚-D-赖氨酸包被的黑色/透明的板(BD目录号356692)中。加入从100μM到
0.03μM范围内的各个浓度(7个浓度，下面详述)的测试化合物，并且使其与细胞一起在室 温温育30分钟。通过加入10μg/mL抗-IgM(Southern Biotech，目录号2020-01)刺激
2+
Ramos细胞Ca 信号传导，并且在FLIPR(Molecular Devices，使用具有在480nM激发的氩激光器的CCD照相机捕获96孔板的图像)上测量。

[0409] 介质/缓冲液：

[0410] 生长培养基：RPMI 1640培养基，其含有L-谷氨酰胺(Invitrogen，目录号61870-010)，10％胎牛血清(FBS，Summit Biotechnology目录号FP-100-05)；1mM丙酮酸钠(Invitrogen目录号11360-070)。

[0411] FLIPR缓冲液：HBSS(Invitrogen，目录号141175-079)，2mM CaCl2(西格玛，目录号C-4901)，HEPES(Invitrogen，目录号15630-080)，2.5mM丙磺舒(西格玛，目录号P-8761)，0.1％BSA(西格玛，目录号A-7906)，11mM葡萄糖(西格玛，目录号G-7528)

[0412] 化合物稀释细节：

[0413] 为了获得100μM的最高最终测定浓度，将24μL的10mM化合物贮存溶液(在DMSO中制备)直接加入576μL的FLIPR缓冲液。将测试化合物稀释在FLIPR缓冲液中(使用-4 -5 -6Biomek 2000自动移液器)得到下列稀释方案：赋形剂，1.00x10 M，1.00x10 ，3.16x10 ，-6 -7 -7 -8
1.00x10 ，3.16x10 ，1.00x10 ，3.16x10 。

[0414] 使用最大-最小统计(使用Molecular Devices FLIPR对照和统计输出软件，从由加入所述刺激抗体导致的峰减去静止的基线)报道钙的细胞内增加。使用非线性曲线拟合(GraphPad Prism软件)确定IC50。

[0415] 实施例21：小鼠体内胶原诱导的关节炎(mCIA)

[0416] 在第0天，将小鼠用II型胶原在完全弗氏佐剂(CFA)中的乳剂注射，在尾巴基部或在背部上的几个位置皮内注射(i.d.)。在胶原免疫之后，动物将在约21至35天出现关节炎。关节炎的发作通过在第21天系统给药在不完全弗氏佐剂(IFA；i.d.)中的胶原而同步(增强)。在第20天之后每天检查动物轻微关节炎(1或2分；参考下面的评分描述)的任何发作，这是增强的信号。在增强后，将小鼠评分并且将候选的治疗剂以预定的时间(典型地2-3周)和剂量给药频率剂量给药，每天一次(QD)或每天两次(BID)。

[0417] 实施例22：大鼠体内胶原诱导的关节炎(rCIA)

[0418] 在第0天，将大鼠用II型牛胶原在不完全弗氏佐剂(IFA)中的乳剂注射，在背部上的几个位置皮内注射(i.d.)。在约第7天在尾巴基部或背部的备选位点提供胶原乳剂的加强注射(i.d.)。在初始胶原注射之后的12-14天通常观察到关节炎。从第14天起，如下面所述(关节炎的评价)可以评价动物的关节炎的进展。将动物用候选的治疗剂以预防的方式，开始于二次激发时剂量给药，并且以预定的时间(典型地2-3周)和剂量给药频率剂量给药，每天一次(QD)或每天两次(BID)。

[0419] 实施例23：关节炎的评价：

[0420] 在两种模型(实施例38和39)中，使用评分系统对爪和肢关节的炎症发展进行定量，所述的评分系统包括按照下面所述的标准对4个爪的评估：

[0421] 评分：1＝爪或一个趾的肿胀和/或发红。

[0422] 2＝两个或更多个关节肿胀。

[0423] 3＝爪的全部肿胀，涉及多于两个关节。

[0424] 4＝整个爪和趾的严重关节炎。

[0425] 如下进行评估：在第0天进行基线测量，在第一个征候或肿胀时再次开始，每周可达三次，直至实验结束。通过将四个单爪评分加和来获得每只小鼠的关节炎指数，得出每只动物的最大分数为16。

[0426] 实施例24：大鼠体内哮喘模型

[0427] 将雄性棕挪威(Brown-Norway)大鼠用在0.2ml明矾中的100μg OA(卵清蛋白)每周i.p.致敏一次，致敏三周(第0，7和14天)。在第21天(最后致敏后一周)，将大鼠用赋形剂或化合物制剂皮下q.d.剂量下药，0.5小时后进行OA气溶胶激发(1％OA，历时45分钟)并且在激发4或24小时后终止。在处死时，从所有动物收集血清和血浆用于分别进行血清学研究和PK。插入气管套管并且将肺用PBS灌洗3X。分析BAL流体的总白细胞数并且计数不同白细胞。细胞等份试样(20-100μl)中的总白细胞数是通过Coulter Counter确定的。对于差别白细胞计数，将50-200μl样品在Cytospin 中离心并且用Diff-Quik将载玻片染色。采用标准形态学标准，在光学显微镜下计数单核细胞、嗜酸性粒细胞、中性白细胞和淋巴细胞的比例，并且用百分比表示。Btk的代表性抑制剂显示：OA致敏的和激发的大鼠的BAL中总白细胞计数与对照水平相比下降。

[0428] 用于经由几种途径给药的目标化合物的药物组合物如在此实施例中所述制备。

[0429] 实施例25：：药物组合物

[0430] 用于口服给药的组合物(A)

[0431]

[0432] 成分 ％重量/重量

[0433]

[0434] 活性成分 20.0％

[0435] 乳糖 79.5％

[0436] 硬脂酸镁 0.5％

[0437]

[0438] 将这些成分混合，并且分配在胶囊中，每个胶囊含有约100mg；一个胶囊接近于总的每日剂量。

[0439] 用于口服给药的组合物(B)

[0440]

[0441] 成分 ％重量/重量

[0442]

[0443] 活性成分 20.0％

[0444] 硬脂酸镁 0.5％

[0445] 交联羧甲纤维素钠 2.0％

[0446] 乳糖 76.5％

[0447] PVP(聚乙烯吡咯烷酮) 1.0％

[0448]

[0449] 将这些成分混合，并且使用溶剂如甲醇造粒。然后将制剂干燥，并且用合适的压片机形成为片剂(含有约20mg的活性化合物)。

[0450] 用于口服给药的组合物(C)

[0451]

[0452] 成分 ％重量/重量

[0453]

[0454] 活性化合物 1.0g

[0455] 富马酸 0.5g

[0456] 氯化钠 2.0g

[0457] 羟苯甲酸甲酯 0.15g

[0458] 羟苯甲酸丙酯 0.05g

[0459] 粒状糖 25.5g

[0460] 山梨糖醇(70％溶液) 12.85g

[0461] Veegum K(范德比尔特公司) 1.0g

[0462] 调味剂 0.035ml

[0463] 着色剂 0.5mg

[0464] 蒸馏水 适量至100ml

[0465]

[0466] 将这些成分混合，形成口服给药的混悬剂。

[0467] 肠胃外制剂(D)

[0468]

[0469] 成分 ％重量/重量

[0470]

[0471] 活性成分 0.25g

[0472] 氯化钠 适量以等渗

[0473] 注射用水 100ml

[0474]

[0475] 将活性成分溶解在部分注射用水中。然后在搅拌下加入足够量的氯化钠，以使溶液等渗。用剩余的注射用水将该溶液补足重量，用0.2微米膜过滤器过滤，并且在无菌条件下包装。

[0476] 栓剂制剂(E)

[0477]

[0478] 成分 ％重量/重量

[0479]

[0480] 活性成分 1.0％

[0481] 聚乙二醇1000 74.5％

[0482] 聚乙二醇4000 24.5％

[0483]

[0484] 在蒸气浴上将这些成分一起熔化并且混合，倾倒入容纳2.5g总重量的模具中。

[0485] 局部制剂(F)

[0486]

[0487] 成分 克

[0488]

[0489] 活性化合物 0.2-2

[0490] 司盘60 2

[0491] 吐温60 2

[0492] 矿物油 5

[0493] 矿脂 10

[0494] 羟苯甲酸甲酯 0.15

[0495] 羟苯甲酸丙酯 0.05

[0496] BHA(丁基化的羟基苯甲醚) 0.01