藿香正气片的检测方法

摘要

本发明涉及一种藿香正气片的检测方法，步骤是：采用薄层色谱法，鉴别藿香正气片处方中是否含有白芷、厚朴、苍术、紫苏叶油等成分，再以柚皮苷为对照品，通过液相色谱法检测藿香正气片处方中陈皮的含量。本发明按照国家药品标准提高行动计划中成药品种增修订项目任务表的具体要求，本发明对藿香正气片标准进行了提高、完善，原标准中只有厚朴的鉴别，在原标准基础上增加了白芷、苍术的薄层鉴别方法；以橙皮苷为对照品，制定了陈皮的含量测定方法，修订后的质量标准，提高了药品的质量控制。

权利要求

1.一种藿香正气片的检测方法，其特征在于：其方法的步骤是：

(1)薄层色谱法鉴别藿香正气片中是否含有白芷成分；

(2)薄层色谱法鉴别藿香正气片中是否含有厚朴成分；

(3)薄层色谱法鉴别藿香正气片中是否含有苍术成分；

(4)液相色谱法检测藿香正气片中陈皮含量；

所述白芷的薄层色谱鉴别的方法如下：

①供试品溶液的制备：取供试藿香正气片样品，除去包衣，研细，加乙醚30ml，浸渍1小时，不断振摇，离心，取上清液，挥去乙醚，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；

②对照品溶液的制备：取欧前胡素对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；

③薄层色谱条件及结果：薄层色谱试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各5-10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚∶乙醚＝3∶2为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，检视供试品色谱在与对照品色谱相应的位置上是否显相同颜色的荧光斑点，进而确定样品中是否含有白芷成分；

所述厚朴的薄层色谱鉴别的方法如下：

①供试品溶液的制备：取白芷鉴别中的供试品溶液，挥干醋酸乙酯，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；

②对照品溶液的制备：取厚朴酚及和厚朴酚对照品加无水乙醇制成每1ml各含1mg的溶液，作为对照品溶液；

③薄层色谱条件及结果：薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各5-10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚∶醋酸乙酯∶甲醇＝80∶20∶2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％的香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰，检视供试品色谱中在对照品色谱相应的位置上是否显相同颜色的斑点，进而确定供试中是否含有厚朴成分；

所述苍术的薄层色谱鉴别的方法如下：

①供试品溶液的制备：取供试藿香正气片样品，薄膜衣除去包衣，研细，加正己烷，超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加正己烷2ml使溶解，作为供试品溶液；

②对照药材溶液的制备：取苍术对照药材0.5g，加正己烷2ml，超声处理15分钟，滤过，滤液作为对照药材溶液；

③薄层色谱条件及结果：薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、对照药材溶液各5～

10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚∶乙酸乙酯＝20∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％的对二甲氨基苯甲醛的10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，检视供试品色谱中在与对照药材色谱相应的位置上是否显相同颜色的斑点，进而确定样品中是否含有苍术成分；

所述液相色谱法测定陈皮的含量的方法为：

①色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈∶0.05mol/L磷酸二氢钠溶液＝13∶70为流动相；检测波长为284nm；流速：1.0ml/min，柱温30℃，理论板数按橙皮苷峰计应不低于2000；

②对照药材溶液的制备：精密称取橙皮苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含橙皮苷

60μg的溶液，作为对照品溶液，入液相检测；

③供试品溶液的制备：取本品20片，薄膜衣片除去包衣，精密称定，研细，取0.75g，精密称定，置25ml具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，混匀，滤过，取续滤液，即得，入液相检测；

④结果分析：根据国家食品药品监督管理局试行标准WS-10057-2002藿香正气片含量项规定，本品每片含陈皮以橙皮苷的含量计，不得少于0.35mg，其中素片：每片重0.3g；薄膜衣片：每片重0.31g。

说明书

藿香正气片的检测方法

技术领域

[0001] 本发明属于中药技术领域，涉及中药的检测方法，尤其是一种藿香正气片的质量控制方法。

背景技术

[0002] 藿香正气片由苍术、陈皮、厚朴(姜制)、白芷、茯苓、大腹皮、清半夏、甘草浸膏、广藿香油、紫苏叶油组成，制备方法：以上十味，白芷和清半夏分别粉碎成细粉，过筛备用，陈皮提取挥发油与广藿香油、紫苏叶油混合后用乙醇适量溶解，备用；陈皮药渣水煎煮一次，时间为1小时，大腹皮、茯苓水煎煮两次，第一次2小时，第二次1小时，合并以上水煎液，滤过，滤液与甘草浸膏合并，浓缩至相对密度1.20～1.30(50～60℃)膏；白芷、苍术、厚朴用60％乙醇回流提取三次，第一次6小时，第二次4小时，第三次2小时，合并以上乙醇提取液，滤过，滤液回收乙醇，浓缩成膏；将水、醇浓缩膏合并，加入清半夏、白芷等细粉及辅料，混匀，制成颗粒，干燥，兑入广藿香油、紫苏叶油、陈皮油的醇溶液，混匀，压制成片，或包薄膜衣，即得。

[0003] 本品原为宋·和剂局方的“藿香正气散”，于1955年改制成片剂，1964年收入《天津市中成药规范》附本，1978年《天津市中成药规范》收载此药，1998年收入卫生部中药成方制剂第15册，由于本品为传统成方“藿香正气散”变更剂型，且与藿香正气水、藿香正气颗粒和藿香正气软胶囊等同名同方，故我厂认为本品不宜变更名称。

[0004] 目前国际上虽然尚无植物类中药的国际标准，但是美国、欧盟、我国及传统出口中药的东南亚地区均有提高中药标准的趋势，在此情况下，需要提出适合我国产品质量的标准以适应国际标准，我国有数千年的中药使用历史，世界各国在制订相应的植物药产品质量标准中多参考我国的中药标准，所以完善、提高中药的质量标准更已经迫在眉睫。

发明内容

[0005] 本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，提供一种能够定性、定量检测药物成分的藿香正气片的质量控制方法，本方法具有检测手段简单、检测结果准确的特点。

[0006] 本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

[0007] 一种藿香正气片的质量控制方法，步骤是：

[0008] (1)薄层色谱法鉴别藿香正气片中是否含有白芷成分；

[0009] (2)薄层色谱法鉴别藿香正气片中是否含有厚朴成分；

[0010] (3)薄层色谱法鉴别藿香正气片中是否含有苍术成分；

[0011] (4)液相色谱法检测藿香正气片中陈皮含量。

[0012] 而且，所述白芷的薄层色谱鉴别的方法如下：

[0013] ①供试品溶液的制备：取供试藿香正气片样品，除去包衣，研细，加乙醚30ml，浸渍1小时，不断振摇，离心，取上清液，挥去乙醚，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；

[0014] ②对照品溶液的制备：取欧前胡素对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；

[0015] ③薄层色谱条件及结果：薄层色谱试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各5-10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚∶乙醚＝3∶2为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，检视供试品色谱在与对照品色谱相应的位置上是否显相同颜色的荧光斑点，进而确定样品中是否含有白芷成分。

[0016] 而且，所述厚朴的薄层色谱鉴别的方法如下：

[0017] ①供试品溶液的制备：取白芷鉴别中的供试品溶液，挥干醋酸乙酯，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；

[0018] ②对照品溶液的制备：取厚朴酚及和厚朴酚对照品加无水乙醇制成每1ml各含1mg的溶液，作为对照品溶液；

[0019] ③薄层色谱条件及结果：薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各5-10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚∶醋酸乙酯∶甲醇＝80∶20∶2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％的香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰，检视供试品色谱中在对照品色谱相应的位置上是否显相同颜色的斑点，进而确定供试中是否含有厚朴成分。

[0020] 而且，所述苍术的薄层色谱鉴别的方法如下：

[0021] ①供试品溶液的制备：取供试藿香正气片样品，薄膜衣除去包衣，研细，加正己烷，超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加正己烷2ml使溶解，作为供试品溶液；

[0022] ②对照药材溶液的制备：取苍术对照药材0.5g，加正己烷2ml，超声处理15分钟，滤过，滤液作为对照药材溶液；

[0023] ③薄层色谱条件及结果：薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、对照药材溶液各5～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚∶乙酸乙酯＝20∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％的对二甲氨基苯甲醛的10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，检视供试品色谱中在与对照药材色谱相应的位置上是否显相同颜色的斑点，进而确定样品中是否含有苍术成分。

[0024] 而且，所述液相色谱法测定陈皮的含量的方法为：

[0025] ①色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈∶0.05mol/L磷酸二氢钠溶液＝13∶70为流动相；检测波长为284nm；流速：1.0ml/min，柱温30℃，理论板数按橙皮苷峰计应不低于2000；

[0026] ②对照药材溶液的制备：精密称取橙皮苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含橙皮苷60μg的溶液，作为对照品溶液，入液相检测；

[0027] ③供试品溶液的制备：取本品20片，薄膜衣片除去包衣，精密称定，研细，取0.75g，精密称定，置25ml具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，混匀，滤过，取续滤液，即得，入液相检测；

[0028] ④结果分析：根据国家食品药品监督管理局试行标准WS-10057(ZD-0057)-2002藿香正气片含量项规定，本品每片含陈皮以橙皮苷的含量计，不得少于0.35mg，其中素片：每片重0.3g；薄膜衣片：每片重0.31g。

[0029] 本发明的优点和积极效果是：

[0030] 1、按照国家药品标准提高行动计划中成药品种增修订项目任务表的具体要求，本发明对藿香正气片标准进行了提高、完善，在原标准中有只有厚朴的鉴别，在原标准基础上增加了白芷、苍术的薄层鉴别方法；以橙皮苷为对照品，制定了陈皮的含量测定方法，修订后的质量标准，提高了药品的质量控制。

[0031] 2、原标准中只有厚朴的薄层鉴别，不能很好的控制产品质量，本发明在原标准的基础上对处方中自芷、苍术、紫苏叶油、广藿香油均进行了薄层鉴别试验，筛选出重现性好、专属性强、斑点显色清晰、结果易判断的厚朴、白芷、苍术、紫苏叶油方法纳入标准中，是本重要制剂的鉴别更加准确。

附图说明

[0032] 图1为本发明白芷薄层色谱鉴别色谱图，从左至右依次为：1藿香正气片(批号0704001)，2藿香正气片(批号0704002)，3藿香正气片(批号0704003)，欧前胡素，藿香正气片白芷阴性样品；

[0033] 图2为本发明厚朴薄层色谱鉴别色谱图，从左至右依次为：1藿香正气片(批号0704001)，2藿香正气片(批号0704002)，3藿香正气片(批号0704003)，4厚朴对照品，5和厚朴对照品，6藿香正气片厚朴阴性样品；

[0034] 图3为本发明苍术薄层色谱鉴别色谱图，从左至右依次为：1藿香正气片(批号0704001)、2藿香正气片(批号0704002)、3藿香正气片(批号0704003)、苍术对照药材、5藿香正气片苍术阴性样品；

[0035] 图4为本发明紫苏叶油薄层色谱鉴别色谱图，从左至右依次为：1.紫苏叶油A，2.紫苏叶油B，3.紫苏叶油C，4.紫苏叶对照药材；

[0036] 图5为本发明橙皮苷对照品溶液；

[0037] 图6为本发明柚皮苷检测中阴性样品谱图；

[0038] 图7为本发明柚皮苷检测中供试样品藿香正气片(样品0704001)的检测色谱图。

具体实施方式

[0039] 下面结合实施例，对本发明进一步说明，下述实施例是说明性的，不是限定性的，不能以下述实施例来限定本发明的保护范围。

[0040] 藿香正气片的质量控制方法，其方法的步骤是：

[0041] (1)白芷的薄层色谱鉴别

[0042] ①供试品溶液的制备：取供试藿香正气片样品20片，除去包衣，研细，加乙醚30ml，浸渍1小时，不断振摇，离心，取上清液，挥去乙醚，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；

[0043] ②对照品溶液的制备：取欧前胡素对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；

[0044] ③阴性样品溶液的制备：按处方配比，取除去白芷其他味药材，按原药的制备工艺制成样品，再按上述供试品溶液制备方法制得阴性样品溶液；

[0045] ④薄层色谱条件及结果：照薄层色谱法(中国药典2005版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液、阴性对照品溶液以及对照品溶液各5-10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)∶乙醚＝3∶2为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性无干扰，检测结果见图1。

[0046] (2)厚朴的薄层色谱鉴别

[0047] ①供试品溶液的制备：取鉴别(1)项下的供试品溶液，挥干醋酸乙酯，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；

[0048] ②对照品溶液的制备：取厚朴酚及和厚朴酚对照品加无水乙醇制成每1ml各含1mg的溶液，作为对照品溶液；

[0049] ③阴性样品溶液的制备：按处方配比，取除去厚朴的其他味药材，按原药制备工艺制成样品，再按上述供试品溶液制备方法制得阴性样品溶液；

[0050] ④薄层色谱条件及结果：照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液、阴性样品溶液以及对照品溶液各5-10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)∶醋酸乙酯∶甲醇＝80∶20∶2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％的香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，且阴性无干扰，检测结果见图2。

[0051] (3)苍术的薄层色谱鉴别

[0052] ①供试品溶液的制备：取供试藿香正气片样品6片，薄膜衣除去包衣，研细，加正己烷20ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加正己烷2ml使溶解，作为供试品溶液。

[0053] ②对照药材溶液的制备：取苍术对照药材0.5g，加正己烷2ml，超声处理15分钟，滤过，滤液作为对照药材溶液。

[0054] ③阴性样品溶液的制备：按处方配比，取除去苍术的其他味药材，按原药制备工艺制成样品，再按上述供试品溶液制备方法制得阴性样品溶液。

[0055] ④薄层色谱条件及结果：照薄层色谱法(中国药典2005版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液、对照药材溶液各5～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)∶乙酸乙酯＝20∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％的对二甲氨基苯甲醛的
10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，且阴性无干扰，见图3。

[0056] (4)紫苏叶油的薄层色谱鉴别

[0057] ①对照品溶液的制备：另取紫苏叶对照药材0.7g，置500ml圆底烧瓶中，加水250ml，混匀，连接挥发油测定器，自测定器上端加水至刻度，并溢流入烧瓶中为止，再加石油醚(60℃～90℃)1.5ml，连接回流冷凝管，加热至沸，并保持微沸2小时，放冷，分取石油醚层作为对照品溶液；

[0058] ②供试溶液的制备：取供试藿香正气片样品按照方法①的方法制作供试品溶液；

[0059] ③照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60℃～90℃)∶乙酸乙酯＝19∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼试液，放置。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

[0060] (5)液相色谱法陈皮的含量测定

[0061] 色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈∶0.05mol/L磷酸二氢钠溶液＝13∶70为流动相，其中磷酸二氢钠溶液用磷酸调pH值至3；波长为284nm；流速：1.0ml/min，柱温30℃，理论板数按橙皮苷峰计应不低于2000；

[0062] ①对照药材溶液的制备：精密称取橙皮苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含橙皮苷60μg的溶液，作为对照品溶液，入液相检测，检测结果如图5所示；

[0063] ②阴性样品溶液的制备：按处方配比，取除陈皮外的其他药材，按原药制备工艺制成片剂，再按步骤①供试品溶液制备方法，制得阴性样品溶液，入液相检测，检测结果如图6所示；

[0064] ③供试品溶液的制备：取本品20片，薄膜衣片除去包衣，精密称定，研细，取0.75g，精密称定，置25ml具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，混匀，滤过，取续滤液，即得，入液相，检测结果如图7所示；

[0065] ④结果分析：阴性供试品溶液无橙皮苷干扰峰存在，该检测方法专属性好，根据国家食品药品监督管理局试行标准WS-10057(ZD-0057)-2002藿香正气片含量项规定，本品每片(素片：每片重0.3g；薄膜衣片：每片重0.31g)含陈皮以橙皮苷的含量计，不得少于0.35mg。