复方林蛙油冲剂及其应用

摘要

本发明提供一种复方林蛙油冲剂及其应用，包含的原料为林蛙油、刺五加多糖、人参皂苷、越桔花色苷、绿原酸、维生素C、维生素E。本发明具有良好的抗氧化，抗辐射、抗超重、抗低压、抗疲劳、提高机体免疫力的良好效果。从整体水平可以提高动物的运动能力，提高空间辨别性学习记忆的能力；细胞超微结构观察证明，具有明显保护海马神经元线粒体和肝、脾细胞线粒体损伤的效应；从分子水平证实，具有影响基因表达，调节免疫因子，提高免疫力的效应。具有提高总抗氧化能力，提高抑制羟自由基能力的效应，具有降低血清甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的效应，具有提高血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的效应，还具有明显的减肥效应。

权利要求

1.一种复方林蛙油冲剂，其特征是：由如下重量份的原料组成：

2.根据权利要求1所述的复方林蛙油冲剂，其特征是：原料重量份为：

3.一种权利要求1或2所述的复方林蛙油冲剂在制备抗辐射损伤保健品或药品中的应用。

4.一种权利要求1或2所述的复方林蛙油冲剂在制备抗超重损伤保健品或药品中的应用。

说明书

复方林蛙油冲剂及其应用

技术领域

[0001] 本发明涉及一种营养保健品及其应用，尤其涉及含有林蛙油的复方冲剂及其应用。

背景技术

[0002] 林蛙油具有多种特殊的生物学功能，中医认为其具有滋阴补肾的功效，可以用于肾虚所致腰膝酸软、五心烦热，病后、产后体弱等，是一种极具开发前景的保健品。但对如何服用林蛙油所涉及的服用方式，服用剂量、与何种物质搭配服用，才能获得最佳效果等问题均未见有文献报道。民间通常是直接食用或用干燥林蛙油泡水服用，而林蛙油虽为公认的保健品，但因其所含成分复杂，如服用不当或搭配服用不当，不但起不到保健作用，还可能导致体内物质代谢紊乱，从而引起血脂含量异常等诸多不良后果。林蛙油为脂溶性物质，无论制成胶囊或饮品，均易受到氧化等破坏，而且还不利于保存和运输，也不利于服用后机体吸收。因此，筛选出最佳的林蛙油服用剂量、最佳的搭配组方、最佳的剂型、最佳的服用方式等，就成了林蛙油开发性研究的首要任务。

发明内容

[0003] 本发明目的在于克服上述不足之处，提供一种新的林蛙油复方冲剂，方便存储运输服用方便，服用效果好，更利于吸收。

[0004] 本发明的技术方案为：一种复方林蛙油冲剂，包括如下重量份的原料：

[0005] 林蛙油 20～200

[0006] 刺五加多糖 20～200

[0007] 人参皂苷 1～5

[0008] 越桔花色苷 20～200

[0009] 绿原酸 0.5～5

[0010] 维生素C 1～10

[0011] 维生素E 0.5～5

[0012] 所述复方林蛙油冲剂的最佳配比，包括如下重量份的原料：

[0013] 林蛙油 100

[0014] 刺五加多糖 50

[0015] 人参皂苷 2

[0016] 越桔花色苷 50

[0017] 绿原酸 2.5

[0018] 维生素C 5

[0019] 维生素E 2.5

[0020] 本发明的另一目的是提供一种上述复方林蛙油冲剂在制备抗辐射损伤保健品或药品中的应用。

[0021] 本发明还提供一种上述复方林蛙油冲剂在制备抗超重损伤保健品或药品中的应用。

[0022] 本发明的有益效果：

[0023] 本发明的复方林蛙油冲剂便于储存运输，按各成分的最佳比配，制成每袋含1.1g林蛙油(干重)的袋装颗粒剂，成人每天1袋，服用时用热水冲服。其配方合理，可适用于航天、航空、航海、雷达、微波、电子对抗等特殊人群，以及长期接受低强度电磁辐射等人群；还可作为老、中、青、少年的保健营养品，具有抗疲劳、抗辐射，增强机体抵抗力的作用。经过动物实验证明，本发明的配方对不同程度的微波辐射、超重环境、低压环境单因素和复合因素损伤都具有保护性效应，而动物实验证明最佳配比具有良好的抗氧化，抗辐射、抗超重、抗低压、抗疲劳、提高机体免疫力的良好效果。从整体水平可以提高动物的运动能力，提高空间辨别性学习记忆的能力；细胞超微结构观察证明，具有明显保护海马神经元线粒体和肝、脾细胞线粒体损伤的效应；从分子水平证实，具有影响基因表达，调节免疫因子，提高免疫力的效应。具有提高总抗氧化能力，提高抑制羟自由基能力的效应，具有降低血清甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的效应，具有提高血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的效应，还具有明显的减肥效应。

具体实施方式

[0024] 实施例1

[0025] 一种复方林蛙油冲剂，包括如下原料：

[0026] 林蛙油 20mg

[0027] 刺五加多糖 20mg

[0028] 人参皂苷 1mg

[0029] 越桔花色苷 20mg

[0030] 绿原酸 0.5mg

[0031] 维生素C 1mg

[0032] 维生素E 0.5mg

[0033] 实施例2

[0034] 一种复方林蛙油冲剂，包括如下原料：

[0035] 林蛙油 200mg

[0036] 刺五加多糖 200mg

[0037] 人参皂苷 5mg

[0038] 越桔花色苷 200mg

[0039] 绿原酸 5mg

[0040] 维生素C 10mg

[0041] 维生素E 5mg

[0042] 实施例3

[0043] 一种复方林蛙油冲剂，包括如下原料：

[0044] 林蛙油 100mg

[0045] 刺五加多糖 50mg

[0046] 人参皂苷 2mg

[0047] 越桔花色苷 50mg

[0048] 绿原酸 2.5mg

[0049] 维生素C 5mg

[0050] 维生素E 2.5mg

[0051] 实施例4复方林蛙油冲剂对超重环境下微波辐射大鼠血脂类含量的影响实验[0052] 实验材料与方法

[0053] 成年Wistar大鼠72只，雌雄各半，体重为180～220g，随机分为6组，每组12只(雌雄各半)。分别为空白对照组(对照组)、超重环境下微波辐射模型组(模型组)和超重环境下微波辐射后高、中、低剂量复方林蛙油冲剂防护组(IRJO 1、2、3组)、超重环境下微波辐射后角鲨烯防护组(实验4组)。复方林蛙油冲剂采用实施例3的配方制成，按大鼠体重100mg/kg/d、70mg/kg/d、40mg/kg/d三种林蛙油计量，配成高剂量、中剂量、低剂量。

[0054] 各组动物均用同一饲料平行饲养5天后开始实验，除对照组外，均采用先在+6G环2
境下适应5min后，紧接着在+6G环境下行200mW/cm 的微波辐射5min。对照组大鼠，则分别固定于关机状态下的动物离心机上10min。

[0055] 复方林蛙油冲剂防护组按分组设计分别配成冲剂2ml，灌胃1次/天，于微波辐射当天开始，连续灌胃12天。角鲨烯防护组，按大鼠每天每公斤体重为正常成人每天每公斤体重的5倍计量，配成2ml，灌胃1次/天，于微波辐射当天开始，连续灌胃12天。对照组动物和模型组，按每只2ml生理盐水灌胃/天，连续灌胃12天。各组动物均在实验前后称量体重。

[0056] 各组动物停止灌胃1天后，用10％水合氯醛麻醉，固定于大鼠实验操作台上，用手术剪打开腹腔，玻璃分针分离出腹主动脉，无菌注射器从腹主动脉抽血，离心分离血清，检测各项指标。

[0057] 结果

[0058] 测定大鼠血清甘油三脂，对照组大鼠的血清甘油三脂含量显著低于模型组、IRJO1，3组和角鲨烯组(P＜0.05)；IRJO2组还显著低于模型组和IRJO 3组(P＜0.05)；模型组还显著高于除实验3组外的其它各组(P＜0.05)。实验结果证明，超重环境和微波辐射协同作用，可显著升高大鼠血清甘油三脂含量；三种不同剂量的复方林蛙油冲剂和角鲨烯胶囊，对这种升高作用却有显著的抑制作用。

[0059] 血清HDL-C含量测定结果表明，IRJO 1组和IRJO 2组血清HDL-C含量，均显著高于其它各组(P＜0.05)，而对照组和IRJO 3组血清HDL-C含量显著低于IRJO 1、2、角鲨烯组(P＜0.05)。血清LDL-C含量测定结果表明，模型组大鼠血清LDL-C含量显著高于其它各组(P＜0.05)，而其它5组之间则无显著差异(P＞0.05)。超重环境和微波辐射协同作用，对大鼠血清HDL-C浓度也有升高效应，尤其对大鼠血清LDL-C浓度的升高更为显著。三种不同剂量的林蛙油冲剂和角鲨烯胶囊，对升高大鼠血清LDL-C浓度的效应，均有明显的抑制作用。高剂量和中剂量林蛙油冲剂还有显著升高大鼠血清HDL-C浓度的效应，[0060] 实验前后称量体重，复方林蛙油组和角鲨烯组均有显著抑制成年大鼠体重增长的效应。IRJO 1组和IRJO 3组大鼠的体重增长显著低于对照组和模型组(P＜0.05)，IRJO2组大鼠体重增长虽有较大降低趋势，但无显著性差异(P＞0.05)，而角鲨烯组大鼠的体重增长则显著低于3个不同剂量的林蛙油冲剂实验组(P＜0.05)，非常显著低于对照组和模型组(P＜0.01)。

[0061] 实施例5复方林蛙油冲剂对超重微波辐射小鼠免疫因子的影响实验[0062] 实验材料与方法

[0063] ICR小鼠30只随机分为3组，分别为对照组、超重微波辐射模型组(模型组)、超重微波辐射复方林蛙油冲剂组(林蛙油组)，每组10只。各组用同一饲料平行饲养5天后，对照组在正常环境中饲养，而模型组和林蛙油组均采用先在+8G超重环境下5分钟后，接着2
在+8G超重环境下实施200mW/cm 的微波辐射5分钟。林蛙油每天分别灌胃1ml实施例3的复方林蛙油冲剂，对照组和模型组每天灌胃1ml生理盐水，连续灌胃14天。实验结束时用乌拉坦麻醉，腹主动脉取血，测量IL-10、IFN-γ、TNF-α。

[0064] 结果

[0065] 小鼠血清中IL-10、IFN-γ、TNF-α变化情况见表1.

[0066] 表1各组小鼠血清中IL-10、IFN-γ、TNF-α的变化(pg/mL，x±s)

[0067]

[0068] 上述数据表明模型组小鼠血清中炎症因子TNF-α明显增高，显示感染性意外打击也可引起炎症因子的释放。林蛙油组与模型组相比较，血清TNF-α水平明显降低，IL-10水平明显增高；模型组的IFN-γ明显降低，林蛙油组又回升到正常值。IFN-γ是对机体损伤进行保护的重要因子，林蛙油在超重微波辐射时对机体损伤的保护可能是通过上调IL-10、IFN-γ，下调TNF-α而实现的。

[0069] 实施例6复方林蛙油冲剂对超重环境下微波辐射大鼠抗氧化效应的研究实验[0070] 实验材料与方法

[0071] 成年雌雄各半的Wistar大鼠共84只，随机分为6组，每组14只(雌雄各半)。分别为空白对照组(空白组)、超重辐射实验组(模型组)、高剂量复方林蛙油冲剂实验组(高量组)、中剂量复方林蛙油冲剂实验组(中量组)、低剂量复方林蛙油冲剂实验组(低量组)、角鲨烯对照实验组(角鲨烯组)。复方林蛙油冲剂采用实施例3的配方。

[0072] 各组动物由同一饲料平行饲养5天，模型组、高、中、低量组和角鲨烯组大鼠先在-2+6G超重环境下适应5min，接着在+6G超重环境下实施200mW/cm 的微波辐射5min，即为[7]
超重环境和微波辐射协同作用的动物损伤模型 ；高量组的大鼠按其每天每1000g体重
100mg林蛙油(干重)配成2.4ml溶液灌胃，连续12天；中量组的大鼠按其每天每1000g体重70mg林蛙油(干重)配成1.6ml溶液灌胃，连续12天；低量组的大鼠按其每天每1000g体重40mg林蛙油(干重)配成0.8ml溶液灌胃，连续12天；空白组和模型组的大鼠每天-1
2ml生理盐水灌胃，连续12天；角鲨烯组的大鼠依据其体重每天按成人量(60kg/500mg )的5倍配成水溶液灌胃，连续12天。

[0073] 各组大鼠均用10％水合氯醛麻醉，打开腹腔，分离腹主动脉，用无菌注射器从腹主动脉抽血，分离血清。测定各组大鼠血清T-AOC、T-SOD和抑制羟自由基的能力。

[0074] 结果

[0075] 实验结果表明，空白组、中量组和低量组的T-AOC活性显著高于模型组、高量组和角鲨烯组(P＜0.05)；而低量组活性最高，显著高于其他5组(P＜0.05)；模型组、高量组和角鲨烯组3组间差异不明显(P＞0.05)。空白组T-SOD显著低于模型组、高量组、中量组和低量组(P＜0.05)；而角鲨烯组又显著高于这4组(P＜0.05)，但这4组间差异不明显(P＞0.05)。空白组、模型组和高量组抑制羟自由基的能力显著高于中量组、低量组和角鲨烯组(P＜0.05)；模型组与空白组和高量组比较，虽有升高趋势但3组间无显著差异(P＞0.05)；中量组与低量组和角鲨烯组比较，虽有下降趋势但3组间也无显著差异。

[0076] 空白组T-AOC显著高于模型组，说明超重环境和微波辐射协同作用对大鼠机体抗氧化体系有明显的损伤作用。中、低量组T-AOC显著高于模型组，表明复方林蛙油冲剂对超重辐射损伤有保护性作用。高、中、低量组表明，低剂量组的保护性效应最好。角鲨烯组T-AOC低于模型组，说明角鲨烯对超重辐射大鼠机体抗氧化体系损伤未表现出保护性效应。

[0077] 模型组T-SOD活性显著高于空白组，这很有可能是由于超重环境和微波辐射的协同作用导致自由基升高刺激机体，使之增强其防御体系而发生的代偿性效应，同时刺激机体酶的基因表达加速所致。以林蛙油为主要成分的复方冲剂，表现出对大鼠血清T-SOD活性的增强趋势，但无显著差异。实验结果表明，角鲨烯组T-SOD活性虽然高于林蛙油复方冲剂组，但其总抗氧化能力却低于林蛙油复方冲剂的作用。

[0078] 模型组抑制羟自由基能力高于空白组，这很有可能是由于超重环境和微波辐射的协同作用导致自由基升高刺激机体使之增强其防御体系而发生的代偿性效应。因为机体的这种防御体系，主要是由酶促反应承担，机体对这种一次性的刺激，经过两周左右时间恢复，完全可以提高这种适用性防御能力。复方林蛙油冲剂表现出对大鼠血清抑制羟自由基能力的增强作用，尽管这种增强作用没有显著性差异，但高量组的增强作用较明显。角鲨烯组血清抑制羟自由基能力低于模型组，说明其对提高机体抗氧化能力作用不如林蛙油显著。

[0079] 复方林蛙油冲剂，可辅助增强机体T-AOC的活力和T-SOD的活力，还具有抑制羟自由基的能力，如果适量服用，很有可能具有防护超重环境和微波辐射对机体的损伤效应。

[0080] 实施例7复方林蛙油冲剂防护超重辐射对大鼠辨别性学习记忆的影响实验[0081] 实验材料和方法

[0082] 成年Wister大鼠56只，雌雄各半，随机分成4组，每组14只(雌雄各半)。分别为空白对照组、林蛙油实验组、超重辐射组、超重辐射林蛙油组。林蛙油为实施例3的复方林蛙油按大鼠每天1kg体重100mg林蛙油(干重)计量，配成水溶液3ml灌胃。

[0083] 各组动物用同一饲料平行饲养5天后，超重辐射组和超重辐射林蛙油组大鼠先在+6G超重环境下5min，接着在+6G超重环境下实施200mW/cm的微波辐射5min；然后林蛙油组和超重辐射林蛙油组大鼠每天3ml复方林蛙油冲剂灌胃，连续14天；空白对照组和超重辐射组大鼠每天3ml生理盐水灌胃，连续灌胃14天。

[0084] 采用成都泰盟科技有限公司提供的MT2200Mor2ris水迷宫实验系统进行隐匿平台搜索和探索实验。将各组动物连续灌胃复方林蛙油冲剂或生理盐水10天后，实施熟悉平台2次的训练，然后每只动物每天上、下午各训练1次，连续训练3天，分别得到潜伏期数据和探索实验数据。

[0085] 结果

[0086] 实验结果表明，超重辐射组大鼠的潜伏期时间，与林蛙油组大鼠比较显著延长(P＜0.05)，与空白对照组和超重辐射林蛙油组比较，虽有延长趋势但差异不明显(P＞0.05)；超重辐射组大鼠经过平台的次数明显低于空白对照组(P＜0.05)，与林蛙油组和超重辐射林蛙油组比较，虽有降低趋势但无明显差异(P＞0.05)；超重辐射组大鼠经过有效区的次数，与其他3组比较均虽无显著差异(P＞0.05)，但却有降低的趋势，见表2。

[0087] 表2实验大鼠的Morris水迷宫实验结果(x±s，n＝14)

[0088]组别 逃避潜伏期(秒) 经过平台次数 经过有效区次数
(次/2min内) (次/2min内)
空白对照组 86.54±22.13 3.79±1.29 5.43±4.43
林蛙油实验组 71.19±23.10 2.67±1.07 3.36±3.12
超重辐射组 2.41±3.53* 98.82±24.64* 1.14±1.19
超重辐射林蛙油组 86.82±20.51 2.86±1.48 5.79±4.51

[0089] *与对照组比较，P＜0.05

[0090] 实验结果表明，超重环境和200mW/cm的微波辐射双因素同时作用大鼠后，该组大鼠的潜伏期较其他3组大鼠延长，经过平台的次数也较其他3组大鼠减少，而经过有效区的次数也呈现出减少的趋势。这说明超重环境和微波辐射双因素协同作用，对大鼠的空间辨别性学习记忆能力有较严重的损伤效应。因为水迷宫实验是以观察海马功能为主要对象的实验指标，本实验所得数据表明由于超重环境和微波辐射协同作用后，大鼠的海马神经元受到损伤，从而导致其空间辨别性学习记忆功能受损所致。而使用复方林蛙油冲剂干预的大鼠，虽然同样受到超重环境和微波辐射双因素作用，但其潜伏期和经过平台的次数，均接近于空白对照组的水平。这说明以林蛙油为主要成分的复方林蛙油冲剂，具有良好的拮抗超重环境和微波辐射协同损伤大鼠空间辨别性记忆功能的效应；单纯林蛙油冲剂组大鼠的潜伏期与空白对照组相比也有缩短的趋势，这说明林蛙油很可能具有增强大鼠空间辨别性学习记忆的作用，特别是微波辐射，依据其强度和辐射时间的不同，分别可使生物体致死、致伤、致残。长期使用手机的青少年，因其长时间受到低强度的微波辐射，可出现嗜睡、疲劳、乏力、耳鸣、记忆力下降等现象。本实验结果证明，以林蛙油为主要成分配制的冲剂，具有较好的保护动物免受超重环境和微波辐射双因素协同对空间辨别性学习记忆的影响。

[0091] 实施例8复方林蛙油冲剂在超重微波环境下对大鼠肝超微结构的防护作用的实验

[0092] 实验材料和方法

[0093] Wastar大鼠84只，雌雄各半，体重250g±50g。随机分为6组，每组14只。分别为：A组：空白对照组(每天生理盐水3ml灌胃，连续14d)；B组：林蛙油组(每天复方林蛙[2]油冲剂水溶液3ml灌胃，连续14d)；C组：超重+辐射 组(6G超重环境下5分钟后，接着