一种复方水蛭胶囊及其制备方法

摘要

本发明涉及一种复方水蛭胶囊及其制备方法，其特征在于：该胶囊内容物由水蛭提取物、果糖二磷酸钠和淀粉混合制备而成，首先在室温下从水蛭中提取水蛭提取物并与果糖二磷酸钠混合后，再加入适量赋形剂淀粉，制备成成品复方水蛭胶囊。本发明这种复方水蛭胶囊适用于血栓性心脑血管疾病的治疗和预防；具有养心健脑、强体保肝的功效，长期服用还可以预防冠心病、脑血栓、中风等症。

权利要求

1.一种复方水蛭胶囊，其特征在于：该胶囊内容物由水蛭提取物、果糖二磷酸钠和淀粉混合制备而成，各组分按重量计比例关系为：水蛭提取物80～120份，果糖二磷酸钠

80～360份，淀粉20～50份；

所述的复方水蛭胶囊的制备方法，按以下步骤进行：

（1）粗提：将水蛭的鲜活全体或干燥全体，洗净后放入匀浆器中打碎，取5～15kg，在室温下加入2500～7500ml的生理盐水，搅拌20～50分钟，冻溶4～8次，2～8℃静置18～

24小时，4000～6000转/分离心取上清液，并调节pH值为4～5后备用；

（2）向步骤（1）中取上清液后剩余的沉淀物中加入沉淀物质量4～6倍的质量浓度为

40～70%的乙醇，搅拌20～50分钟，离心取沉淀物备用；

（3）精制：向步骤（2）中备用的沉淀物中加入生理盐水溶解沉淀物，经高效色谱梯度洗脱，高效反相色谱柱阶式洗脱后，浓缩、除菌、过滤得滤液备用；

（4）将步骤（1）中备用的上清液与步骤（3）中备用的滤液合并，浓缩后，即得水蛭提取物待用；

（5）按权利要求1所述的比例取各原料备用，将步骤（4）中得到的水蛭提取物与淀粉按质量比1:0.2~0.5的比例混合均匀，制成湿颗粒，烘干后再与果糖二磷酸钠混合，水蛭提取物与果糖二磷酸钠的质量比为1:1~3；

（6）将步骤（5）中得到的混合物粉碎并过10～15目筛，在40～65℃条件下干燥，整粒、杀菌后装胶囊，经包装后即得复方水蛭胶囊成品。

2.根据权利要求1所述的一种复方水蛭胶囊，其特征在于：该胶囊内容物由水蛭提取物、果糖二磷酸钠和淀粉混合制备而成，各组分按重量计比例关系为：水蛭提取物90～110份，果糖二磷酸钠180～240份，淀粉30～40份。

3.根据权利要求1所述的一种复方水蛭胶囊，其特征在于：该胶囊内容物由水蛭提取物、果糖二磷酸钠和淀粉混合制备而成，各组分按重量计比例关系为：水蛭提取物100份，果糖二磷酸钠200份，淀粉35份。

4.根据权利要求1所述的一种复方水蛭胶囊的制备方法，其特征在于：步骤（1）中将水蛭的鲜活全体或干燥全体，放入匀浆器中打碎，取10kg，在室温下加入5000ml生理盐水，搅拌30分钟，冻溶6次，4℃静置20小时，5000转/分离心取上清液，调节pH值为4.8后备用。

5.根据权利要求1所述的一种复方水蛭胶囊的制备方法，其特征在于：步骤（2）中，向步骤（1）中取上清液后剩余的沉淀物中加入沉淀物质量5倍的质量浓度为55%的乙醇。

6.根据权利要求1所述的一种复方水蛭胶囊的制备方法，其特征在于：步骤（3）中，向步骤（2）中备用的沉淀物中加入生理盐水，生理盐水的加入量是沉淀物质量的4～6倍，溶解沉淀物，经阴离子交换柱高效色谱梯度洗脱，苯基柱高效反相色谱柱阶式洗脱后，再经阴离子交换柱浓缩、除菌、过滤得滤液备用。

7.根据权利要求1所述的一种复方水蛭胶囊的制备方法，其特征在于：步骤（5）中，水蛭提取物与淀粉的质量比为1:0.35，水蛭提取物与果糖二磷酸钠的质量比为1:2。

8.根据权利要求1所述的一种复方水蛭胶囊的制备方法，其特征在于：步骤（6）中，将步骤（5）中得到的混合物粉碎并过12目筛，在50℃条件下干燥，整粒时，再过8～10目筛，杀菌后装胶囊，经包装后即得复方水蛭胶囊成品。

说明书

一种复方水蛭胶囊及其制备方法

[0001] 技术领域：

[0002] 本发明属于医药领域，主要涉及一种复方水蛭胶囊及其制备方法，特别是涉及一种用于预防和治疗血栓性心脑血管疾病的复方水蛭胶囊以及其制备方法。

[0003] 背景技术：

[0004] 心脑血管疾病是一种严重威胁人类健康，特别是50岁以上中老年人的常见病，即使应用目前最先进、完善的治疗手段，仍可能有50%以上的脑血管意外幸存者生活不能完全自理，全世界每年死于心脑血管疾病的人数高达1500万人，居各种死因首位，心脑血管疾病已成为人类死亡病因最高的头号杀手，也是人们健康的“无声凶煞”。

[0005] 心脑血管疾病具有“发病率高、致残率高、死亡率高、复发率高、并发症多”即“四高一多”的特点，目前，我国心脑血管疾病患者已经超过2.7亿人。我国每年死于心脑血管疾病有近300万人，占我国每年总死亡病因的51%，而存活下来的患者中75%不同程度丧失劳动能力，40%重残。

[0006] 我国脑中风病人出院后第一年的复发率是30%，第五年的复发率高达59%，而二级预防做得较好的美国仅为10；由于我国医疗保险覆盖人群小，脑中风病人的复发率与国际平均水平相比要高出1倍多。

[0007] 治疗心脑血管疾病特别是血栓性心脑血管疾病的药物，普遍存在使用药材过多，副作用大、疗效一般等缺点，因此，研制出一种使用药材少、疗效好且毒副作用小的药物成为亟待解决的问题。

[0008] 发明内容：

[0009] 1、发明目的：

[0010] 本发明针对上述现有技术中药物配伍存在的缺陷，提供了一种复方水蛭胶囊及其制备方法，具有通经、活血、止痛等作用，能够改善心脑血管功能，标本兼治，特别是对血栓性心脑血管疾病疗效极佳，并对甲肝、乙肝等各种肝炎有较好的辅助治疗作用。

[0011] 2、技术方案：

[0012] 本发明是通过以下技术方案来实现的：

[0013] 一种复方水蛭胶囊，其特征在于：该胶囊内容物由水蛭提取物、果糖二磷酸钠和淀粉混合制备而成，各组分按重量计比例关系为：水蛭提取物80～120份，果糖二磷酸钠80～360份，淀粉20～50份。

[0014] 该胶囊内容物由水蛭提取物、果糖二磷酸钠和淀粉混合制备而成，各组分按重量计比例关系为：水蛭提取物90～110份，果糖二磷酸钠180～240份，淀粉30～40份。

[0015] 该胶囊内容物由水蛭提取物、果糖二磷酸钠和淀粉混合制备而成，各组分按重量计比例关系为：水蛭提取物100份，果糖二磷酸钠200份，淀粉35份。

[0016] 一种复方水蛭胶囊的制备方法，其特征在于：该方法按以下步骤进行：

[0017] （1）粗提：将水蛭的鲜活全体或干燥全体，洗净后放入匀浆器中打碎，取5～15kg，在室温下加入2500～7500ml的生理盐水，搅拌20～50分钟，冻溶4～8次，2～8℃静置18～24小时，4000～6000转/分离心取上清液，并调节PH值为4～5后备用。

[0018] （2）向步骤（1）中取上清液后剩余的沉淀物中加入沉淀物质量4～6倍的质量浓度为40～70%的乙醇，搅拌20～50分钟，离心取沉淀物备用。

[0019] （3）精制：向步骤（2）中备用的沉淀物中加入生理盐水溶解沉淀物，生理盐水的加入量是沉淀物质量的4～6倍，经阴离子交换柱高效色谱梯度洗脱，苯基柱高效反相色谱柱阶式洗脱后，再经阴离子交换柱浓缩、除菌、过滤得滤液备用。

[0020] （4）将步骤（1）中备用的上清液与步骤（3）中备用的滤液合并，浓缩后，即得水蛭提取物（液体）待用。

[0021] （5）按权利要求1所述的比例取各原料备用，将步骤（4）中得到的水蛭提取物与淀粉按质量比1:0.2～0.5的比例混合均匀，制成湿颗粒，烘干后再与果糖二磷酸钠混合，水蛭提取物与果糖二磷酸钠的质量比为1:1～3。

[0022] （6）将步骤（5）中得到的混合物粉碎并过10～15目筛，在40～65℃条件下干燥，整粒、杀菌后装胶囊，经包装后即得本发明复方水蛭胶囊成品。

[0023] 上述步骤（1）中将水蛭的鲜活全体或干燥全体，放入匀浆器中打碎，取10kg，在室温下加入5000ml生理盐水，限定这个浓度的原因是不会破坏水蛭中提取物的活性，搅拌30分钟，冻溶6次，4℃静置20小时，5000转/分离心取上清液，调节PH值为4.8后备用，当PH值为4.8时水蛭提取物的活性达到最佳。

[0024] 上述步骤（2）中，向步骤（1）中取上清液后剩余的沉淀物中加入沉淀物质量5倍的质量浓度为55%的乙醇。

[0025] 上述步骤（3）中，向步骤（2）中备用的沉淀物中加入生理盐水溶解沉淀物，生理盐水的加入量是沉淀物质量的4～6倍，经阴离子交换柱（ISN—5 Φ40×300mm）高效色谱梯度洗脱，苯基柱（ISB—10 Φ40×500mm）高效反相色谱柱阶式洗脱后，再经阴离子交换柱（ISN—20 Φ40×250mm）浓缩、除菌、过滤得滤液备用。

[0026] 上述步骤（5）中，水蛭提取物与淀粉的质量比为1:0.35，水蛭提取物与果糖二磷酸钠的质量比为1:2，采用这个比例配置可以促进水蛭和果糖二磷酸钠的协同作用，使临床效果达到最佳。

[0027] 上述步骤（6）中，将步骤（5）中得到的混合物粉碎并过12目筛，在50℃条件下干燥，整粒时，再过8～10目筛，杀菌后装胶囊，经包装后即得本发明复方水蛭胶囊成品。

[0028] 上述水蛭提取物为液体，其活性成分为水蛭素。

[0029] 上述生理盐水为质量分数0.9%的氯化钠水溶液。

[0030] 3、优点及效果：

[0031] 本发明提出的一种复方水蛭胶囊及其制备方法，具有如下优点：

[0032] 水蛭性寒、味咸、有毒，具有破血、通瘀、通经之功能，临床用于治疗症瘕、痞块、血瘀闭经、跌打损伤；经查大量文献报道以及临床试验证明，水蛭唾液中含有水蛭素，具有强力的抑制凝血酶作用，属一种强力高效抗凝血剂。实验表明，水蛭素对凝血酶的抑制作用具有很高的选择性和特异性，它仅抑制止血系统中的一种因子即凝血酶，并不干扰其他体液或细胞因子，其抑制作用也勿需其他凝固因子或血浆成分参加；水蛭素作用于血液凝固的开始阶段，防止纤维蛋白原断裂成纤维蛋白，阻止凝血酶对纤维蛋白的聚合，防止纤维蛋白-凝块形成，从而防止血液凝固。

[0033] 水蛭提取物中的有效活性成分为水蛭素，水蛭素抗凝血作用很强，很低剂量的水蛭提取物即能产生可以测量到的抗凝血作用，即能抑制静脉血栓形成并迅速使纤维蛋白原及血小板数恢复正常。人一次静注0.9mg水蛭提取物后再连续滴注0.6mg水蛭提取物/h，按75㎏体重计算，全身恒定的抑制凝血酶浓度可达50ng/ml（即约0.5抗凝血酶单位（AT-U）/ml）。这样一种抑制浓度已证明可足够防止动物模型实验性。果糖二磷酸钠（FDP）是一种生物活性物质，其生产过程需消耗ATP，在能量代谢过程中起重要作用。近年来大量的药理及临床试验证明，FDP能有效的活化脑细胞，（脑细胞活化剂）。增强脑细胞的供养能力，（心肌细胞增强剂）。并可作为肝细胞的免疫调节剂，（肝细胞活化剂）。其临床疗效如下：

[0034] 1.1：FDP在其代谢过程中可产生大量的ATP（能量合剂）给组织代谢提供能量。

[0035] 1.2：FDP在多种生化反应中产生作用，具有一定的生物活性，特别是具有维持肝脏正常功能的功效（解毒、蛋白质合成等）。

[0036] 1.3：FDP能增强脑细胞活力，改善大脑能量代谢。能减轻缺血性脑梗塞的神经症状；降低梗塞面积和缺血后能量消耗，保护脑组织。

[0037] 1.4：FDP有益于心肌的能量代谢，增强体力和耐力。能增加心肌供氧量；降低心肌耗氧量；减少急性心肌梗塞的面积，并有抗血小板聚集作用，对于某些心脑血管疾病的预防和治疗有较理想的作用。

[0038] 1.5：FDP对多种代谢性疾病，尤其是糖尿病等症具有辅助治疗作用。

[0039] 1.6：FDP还同时具有抗休克作用。

[0040] 本发明水蛭提取物的提取过程不需要复杂的条件，在室温下即可进行，简化了制备工艺，降低了制备成本；水蛭提取物适用于血栓性心脑血管疾病的治疗和预防，果糖二磷酸钠具有养心健脑、强体保肝的作用，二者结合恰好起到相辅相成的作用；单独使用水蛭或果糖二磷酸钠操作繁琐，成本高，很不方便，在保证不降低水蛭和果糖二磷酸钠的生物活性且具有稳定水蛭和果糖二磷酸钠生理作用的工艺基础上，将其做成复方，既方便了患者，也有利于发挥二者生理活性的协同作用，提高临床疗效，不仅避免了单独使用水蛭可能产生的副作用，还能起到保肝的作用；本发明这种复方水蛭胶囊适用于冠心病、心绞痛、心肌梗塞，并对甲肝、乙肝等各种肝炎有较好的辅助治疗作用；长期服用可预防冠心病、脑血栓、中风等症。

[0041] 附图说明：

[0042] 图1为本发明工艺流程图。

[0043] 具体实施方式：

[0044] 下面结合具体实施例对本发明作详细说明，但本发明的保护范围不仅限于下述的实施例。

[0045] 实施例1：

[0046] 一种复方水蛭胶囊，其特征在于：该胶囊内容物由水蛭提取物、果糖二磷酸钠和淀粉混合制备而成，各组分按重量计比例关系为：水蛭提取物100份，果糖二磷酸钠200份，淀粉35份。

[0047] 一种如上所述的复方水蛭胶囊的制备方法，其特征在于：该方法按以下步骤进行：

[0048] （1）粗提：将水蛭的鲜活全体或干燥全体，洗净后放入匀浆器中打碎，取10kg，在室温下加入5000ml生理盐水，搅拌30分钟，冻溶6次，4℃静置20小时，5000转/分离心取上清液，并调节PH值为4.8后备用；

[0049] （2）向步骤（1）中取上清液后剩余的沉淀物中加入沉淀物质量5倍的质量浓度为55%的乙醇，搅拌30分钟，离心取沉淀物备用；

[0050] （3）精制：向步骤（2）中备用的沉淀物中加入生理盐水溶解沉淀物，生理盐水的加入量是沉淀物质量的5倍，经阴离子交换柱（ISN—5 Φ40×300mm）高效色谱梯度洗脱，苯基柱（ISB—10 Φ40×500mm）高效反相色谱柱阶式洗脱后，再经阴离子交换柱（ISN—20 Φ40×250mm）浓缩、除菌、过滤得滤液备用；

[0051] （4）将步骤（1）中备用的上清液与步骤（3）中备用的滤液合并，浓缩后，即得水蛭提取物待用；

[0052] （5）按权利要求1所述的比例取各原料备用，将步骤（4）中得到的水蛭提取物与淀粉按质量比1:0.35的比例混合均匀，制成湿颗粒，烘干后再与果糖二磷酸钠混合，水蛭提取物与果糖二磷酸钠的质量比为1:2；

[0053] （6）将步骤（5）中得到的混合物粉碎并过12目筛，在50℃条件下干燥，整粒时再过10目筛，杀菌后装胶囊，经包装后即得本发明复方水蛭胶囊成品。

[0054] 实施例2：

[0055] 一种复方水蛭胶囊，其特征在于：该胶囊内容物由水蛭提取物、果糖二磷酸钠和淀粉混合制备而成，各组分按重量计比例关系为：水蛭提取物80份，果糖二磷酸钠80份，淀粉20份。

[0056] 一种如上所述的复方水蛭胶囊的制备方法，其特征在于：该方法按以下步骤进行：

[0057] （1）粗提：将水蛭的鲜活全体或干燥全体，洗净后放入匀浆器中打碎，取5kg，在室温下加入2500ml生理盐水，搅拌20分钟，冻溶4次，2℃静置18小时，4000转/分离心取上清液，并调节PH值为4.0后备用；

[0058] （2）向步骤（1）中取上清液后剩余的沉淀物中加入沉淀物质量4倍的质量浓度为40%的乙醇，搅拌20分钟，离心取沉淀物备用；

[0059] （3）精制：向步骤（2）中备用的沉淀物中加入生理盐水溶解沉淀物，生理盐水的加入量是沉淀物质量的4倍，经阴离子交换柱（ISN—5 Φ40×300mm）高效色谱梯度洗脱，苯基柱（ISB—10 Φ40×500mm）高效反相色谱柱阶式洗脱后，再经阴离子交换柱（ISN—20 Φ40×250mm）浓缩、除菌、过滤得滤液备用；

[0060] （4）将步骤（1）中备用的上清液与步骤（3）中备用的滤液合并，浓缩后，即得水蛭提取物待用；

[0061] （5）按权利要求1所述的比例取各原料备用，将步骤（4）中得到的水蛭提取物与淀粉按质量比1:0.25的比例混合均匀，制成湿颗粒，烘干后再与果糖二磷酸钠混合，水蛭提取物与果糖二磷酸钠的质量比为1:1；

[0062] （6）将步骤（5）中得到的混合物粉碎并过10目筛，在40℃条件下干燥，整粒时再过8目筛，杀菌后装胶囊，经包装后即得本发明复方水蛭胶囊成品。

[0063] 实施例3：

[0064] 一种复方水蛭胶囊，其特征在于：该胶囊内容物由水蛭提取物、果糖二磷酸钠和淀粉混合制备而成，各组分按重量计比例关系为：水蛭提取物90份，果糖二磷酸钠180份，淀粉30份。

[0065] 一种如上所述的复方水蛭胶囊的制备方法，其特征在于：该方法按以下步骤进行：

[0066] （1）粗提：将水蛭的鲜活全体或干燥全体，洗净后放入匀浆器中打碎，取8kg，在室温下加入4000ml生理盐水，搅拌25分钟，冻溶5次，3℃静置19小时，4500转/分离心取上清液，并调节PH值为4.2后备用；

[0067] （2）向步骤（1）中取上清液后剩余的沉淀物中加入沉淀物质量6倍的质量浓度70%的乙醇，搅拌20分钟，离心取沉淀物备用；

[0068] （3）精制：向步骤（2）中备用的沉淀物中加入生理盐水溶解沉淀物，生理盐水的加入量是沉淀物质量的6倍，经阴离子交换柱（ISN—5 Φ40×300mm）高效色谱梯度洗脱，苯基柱（ISB—10 Φ40×500mm）高效反相色谱柱阶式洗脱后，再经阴离子交换柱（ISN—20 Φ40×250mm）浓缩、除菌、过滤得滤液备用；

[0069] （4）将步骤（1）中备用的上清液与步骤（3）中备用的滤液合并，浓缩后，即得水蛭提取物待用；

[0070] （5）按权利要求1所述的比例取各原料备用，将步骤（4）中得到的水蛭提取物与淀粉按质量比1:1/3的比例混合均匀，制成湿颗粒，烘干后再与果糖二磷酸钠混合，水蛭提取物与果糖二磷酸钠的质量比为1:2；

[0071] （6）将步骤（5）中得到的混合物粉碎并过15目筛，在45℃条件下干燥，整粒时再过10目筛，杀菌后装胶囊，经包装后即得本发明复方水蛭胶囊成品。

[0072] 实施例4：

[0073] 一种复方水蛭胶囊，其特征在于：该胶囊内容物由水蛭提取物、果糖二磷酸钠和淀粉混合制备而成，各组分按重量计比例关系为：水蛭提取物120份，果糖二磷酸钠240份，淀粉48份。

[0074] 一种如上所述的复方水蛭胶囊的制备方法，其特征在于：该方法按以下步骤进行：

[0075] （1）粗提：将水蛭的鲜活全体或干燥全体，洗净后放入匀浆器中打碎，取13kg，在室温下加入6500ml生理盐水，搅拌45分钟，冻溶7次，7℃静置23小时，5800转/分离心取上清液，并调节PH值为4.6后备用；

[0076] （2）向步骤（1）中取上清液后剩余的沉淀物中加入沉淀物质量5倍的质量浓度50%的乙醇，搅拌40分钟，离心取沉淀物备用；

[0077] （3）精制：向步骤（2）中备用的沉淀物中加入生理盐水溶解沉淀物，生理盐水的加入量是沉淀物质量的5倍，经阴离子交换柱（ISN—5 Φ40×300mm）高效色谱梯度洗脱，苯基柱（ISB—10 Φ40×500mm）高效反相色谱柱阶式洗脱后，再经阴离子交换柱（ISN—20 Φ40×250mm）浓缩、除菌、过滤得滤液备用；

[0078] （4）将步骤（1）中备用的上清液与步骤（3）中备用的滤液合并，浓缩后，即得水蛭提取物待用；

[0079] （5）按权利要求1所述的比例取各原料备用，将步骤（4）中得到的水蛭提取物与淀粉按质量比1:0.4的比例混合均匀，制成湿颗粒，烘干后再与果糖二磷酸钠混合，水蛭提取物与果糖二磷酸钠的质量比为1:2；

[0080] （6）将步骤（5）中得到的混合物粉碎并过12目筛，在55℃条件下干燥，整粒时再过8目筛，杀菌后装胶囊，经包装后即得本发明复方水蛭胶囊成品。

[0081] 实施例5：

[0082] 一种复方水蛭胶囊，其特征在于：该胶囊内容物由水蛭提取物、果糖二磷酸钠和淀粉混合制备而成，各组分按重量计比例关系为：水蛭提取物100份，果糖二磷酸钠100份，淀粉50份。

[0083] 一种如上所述的复方水蛭胶囊的制备方法，其特征在于：该方法按以下步骤进行：

[0084] （1）粗提：将水蛭的鲜活全体或干燥全体，洗净后放入匀浆器中打碎，取6kg，在室温下加入3000ml生理盐水，搅拌35分钟，冻溶8次，5℃静置21小时，4800转/分离心取上清液，并调节PH值为4.5后备用；

[0085] （2）向步骤（1）中取上清液后剩余的沉淀物中加入沉淀物质量6倍的质量浓度65%的乙醇，搅拌35分钟，离心取沉淀物备用；

[0086] （3）精制：向步骤（2）中备用的沉淀物中加入生理盐水溶解沉淀物，生理盐水的加入量是沉淀物质量的4倍，经阴离子交换柱（ISN—5 Φ40×300mm）高效色谱梯度洗脱，苯基柱（ISB—10 Φ40×500mm）高效反相色谱柱阶式洗脱后，再经阴离子交换柱（ISN—20 Φ40×250mm）浓缩、除菌、过滤得滤液备用；

[0087] （4）将步骤（1）中备用的上清液与步骤（3）中备用的滤液合并，浓缩后，即得水蛭提取物待用；

[0088] （5）按权利要求1所述的比例取各原料备用，将步骤（4）中得到的水蛭提取物与淀粉按质量比1:0.5的比例混合均匀，制成湿颗粒，烘干后再与果糖二磷酸钠混合，水蛭提取物与果糖二磷酸钠的质量比为1:1；

[0089] （6）将步骤（5）中得到的混合物粉碎并过14目筛，在60℃条件下干燥，整粒时再过10目筛，杀菌后装胶囊，经包装后即得本发明复方水蛭胶囊成品。

[0090] 实施例6：

[0091] 一种复方水蛭胶囊，其特征在于：该胶囊内容物由水蛭提取物、果糖二磷酸钠和淀粉混合制备而成，各组分按重量计比例关系为：水蛭提取物110份，果糖二磷酸钠330份，淀粉22份。

[0092] 一种如上所述的复方水蛭胶囊的制备方法，其特征在于：该方法按以下步骤进行：

[0093] （1）粗提：将水蛭的鲜活全体或干燥全体，洗净后放入匀浆器中打碎，取12kg，在室温下加入6000ml生理盐水，搅拌40分钟，冻溶6次，6℃静置22小时，5500转/分离心取上清液，并调节PH值为4.9后备用；

[0094] （2）向步骤（1）中取上清液后剩余的沉淀物中加入沉淀物质量4倍的质量浓度60%的乙醇，搅拌45分钟，离心取沉淀物备用；

[0095] （3）精制：向步骤（2）中备用的沉淀物中加入生理盐水溶解沉淀物，生理盐水的加入量是沉淀物质量的6倍，经阴离子交换柱（ISN—5 Φ40×300mm）高效色谱梯度洗脱，苯基柱（ISB—10 Φ40×500mm）高效反相色谱柱阶式洗脱后，再经阴离子交换柱（ISN—20 Φ40×250mm）浓缩、除菌、过滤得滤液备用；

[0096] （4）将步骤（1）中备用的上清液与步骤（3）中备用的滤液合并浓缩后，即得水蛭提取物待用；

[0097] （5）按权利要求1所述的比例取各原料备用，将步骤（4）中得到的水蛭提取物与淀粉按质量比1:0.2的比例混合均匀，制成湿颗粒，烘干后再与果糖二磷酸钠混合，水蛭提取物与果糖二磷酸钠的质量比为1:3；

[0098] （6）将步骤（5）中得到的混合物粉碎并过11目筛，在65℃条件下干燥，整粒时再过9目筛，杀菌后装胶囊，经包装后即得本发明复方水蛭胶囊成品。

[0099] 实施例7：

[0100] 一种复方水蛭胶囊，其特征在于：该胶囊内容物由水蛭提取物、果糖二磷酸钠和淀粉混合制备而成，各组分按重量计比例关系为：水蛭提取物120份，果糖二磷酸钠360份，淀粉40份。

[0101] 一种如上所述的复方水蛭胶囊的制备方法，其特征在于：该方法按以下步骤进行：

[0102] （1）粗提：将水蛭的鲜活全体或干燥全体，洗净后放入匀浆器中打碎，取15kg，在室温下加入7500ml生理盐水，搅拌50分钟，冻溶8次，8℃静置24小时，6000转/分离心取上清液，并调节PH值为5.0后备用；

[0103] （2）向步骤（1）中取上清液后剩余的沉淀物中加入沉淀物质量5倍的质量浓度45%的乙醇，搅拌50分钟，离心取沉淀物备用；

[0104] （3）精制：向步骤（2）中备用的沉淀物中加入生理盐水溶解沉淀物，生理盐水的加入量是沉淀物质量的6倍，经阴离子交换柱（ISN—5 Φ40×300mm）高效色谱梯度洗脱，苯基柱（ISB—10 Φ40×500mm）高效反相色谱柱阶式洗脱后，再经阴离子交换柱（ISN—20 Φ40×250mm）浓缩、除菌、过滤得滤液备用；

[0105] （4）将步骤（1）中备用的上清液与步骤（3）中备用的滤液合并，浓缩后，即得水蛭提取物待用；

[0106] （5）按权利要求1所述的比例取各原料备用，将步骤（4）中得到的水蛭提取物与淀粉按质量比1:1/3的比例混合均匀，制成湿颗粒，烘干后再与果糖二磷酸钠混合，水蛭提取物与果糖二磷酸钠的质量比为1:3；

[0107] （6）将步骤（5）中得到的混合物粉碎并过13目筛，在50℃条件下干燥，整粒时再过9目筛，杀菌后装胶囊，经包装后即得本发明复方水蛭胶囊成品。

[0108] 为了确保临床用药的安全，在临床使用前对本发明进行了小鼠急性毒性试验：

[0109] （1）材料和方法

[0110] 受试动物为昆明种小白鼠，由我公司实验动物室供给，健康，体重20+1.0g，雌雄各半，随机分为三组，尾静脉注射组，皮下注射组和对照组，每组10只。

[0111] a) 尾静脉注射给药试验：

[0112] 动物及分组如上，取本发明复方水蛭胶囊的内容物混合均匀，精密称取0.25g（相当于20u）加氯化钠注射用水80ml充分溶解，取上清液，给药方法采用尾静脉注射法，隔夜禁食后给药。给药容积0.5ml／20g体重，给药剂量按人体最大给药剂量折算：（40u×9.01×20g）÷（60kg×1000）=0.12u，式中：u为活性单位，9.01为换算系数，20g为小白鼠重量，60kg为平均人体重量；0.12u即为20g重的小鼠每只的给药剂量，每只小鼠给药应为0.5ml，即0.5ml的药液相当于0.12u。观察给药后的反应及2天内的死亡率。

[0113] b) 小鼠皮下注射急性毒性试验：

[0114] 动物及分组同上，取本发明复方水蛭胶囊的内容物混合均匀，精密称取0.25g（相当于20u）加氯化钠注射用水80ml充分溶解，取上清夜，给药方法采用皮下法，隔夜禁食后给药，间隔1小时注射一次，连续注射4次。给药容积0.5ml／20g体重，给药剂量按人体最大给药剂量折算：（40u×9.01×20g）÷（60kg×1000）=0.12u，式中：u为活性单位，9.01为换算系数，20g为小白鼠重量，60kg为平均人体重量；0.12u即为20g重的小鼠每只的给药剂量，每只小鼠给药应为0.5ml，即0.5ml的药液相当于0.12u。观察给药后的反应及2天内的死亡率。

[0115] c）对照组：尾静脉与皮下注射均作对照实验，按尾静脉与皮下注射用药量给小鼠注射等量的生理盐水。

[0116] （2）结果和讨论：

[0117] 复方水蛭胶囊溶于水后为混悬液体，进行了尾静脉给药和小鼠皮下注射两种方法的试验，小鼠尾静脉注射和皮下注射给药组48小时内均存活，增重正常，未见异常体症。

[0118] 尾静脉注射无一切不适现象，一切良好，2天内体重增加，无一只死亡；将受试鼠处死进行系统剖解，各脏器未见明显病理改变。

[0119] 小鼠皮下注射四次，一切良好，2天内体重增加，无一只死亡；将受试鼠处死进行系统剖解，给药局部未见刺激，各脏器未见明显病理改变。

[0120] 对照组注射等量的生理盐水，观察2天，无不适及死亡现象，体重平均增加1g左右。

[0121] 综合上述结果可见，连续三批试制的复方水蛭胶囊，经急性毒性试验验证（最大给药剂量法），尾静脉注射人用量或皮下注射人用量对于健康小鼠是非常安全的，与对照组相比，增重显著，无一只有不适现象或死亡，将受试鼠处死进行系统剖解，各脏器未见明显病理改变，由此证明，本发明是非常安全可靠的。

[0122] 采用本发明进行临床用药，其中男50例，女30例，用于治疗65例，用于康复和预防15例，年龄最大75岁，年龄最小16岁，患者使用后，冠心病、心绞痛、心肌梗塞、脑血栓等症状均有不同程度的缓解，病情得到有效控制，对由上述疾病引起的头晕、耳鸣、头痛、记忆力减退、失眠等症状有很好的康复和预防作用。用法：治疗时，口服成人：一日2～3次，一次2～4粒；康复和预防时，一日2次，一次1～2粒，每粒0.25g。

[0123] 本发明这种复方水蛭胶囊内容物为白色或类白色颗粒或粉末。该复方水蛭胶囊适用于血栓性心脑血管疾病的治疗和预防；养心健脑、强体保肝，并适用于冠心病、心绞痛、心肌梗塞；脑萎缩，老年性痴呆，脑动脉硬化，脑血管病后遗症，脑外伤，神经官能症等疾病引起的头晕、耳鸣、头痛、记忆力减退、失眠等症，长期服用可预防冠心病、脑血栓、中风等症，对于严重患者疗效更为显著。

[0124] 水蛭的鉴别：水蛭唾液中含有溶于乙醇的水蛭提取物，取本品粉末1g，加乙醇5ml，超声处理15分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取水蛭对照药材1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷一乙酸乙酯(4：1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点；紫外光灯(365nm)下显相同的橙红色荧光斑点。

[0125] 检查水分，照水分测定法测定，不超过18.0％。

[0126] 总灰分不超过10.0％。

[0127] 酸不溶性灰分不超过2.0％。

[0128] 浸出物，照醇溶性浸出物测定法项下的热浸法测定，用稀乙醇作溶剂，不少于15.0％

[0129] 含量测定：取本品粉末(过三号筛)约1g，精密称定，精密加入0.9％氯化钠溶液5ml，充分搅拌，浸提30分钟，并时时振摇，离心，精密量取上清液100μl，置试管(10mm×100mm)中，加入含0.5％(牛)纤维蛋白原(以凝固物计)的三羟甲基氨基甲烷盐酸缓冲液(0.2mol／L三羟甲基氨基甲烷溶液25ml与0.1mol／L盐酸溶液约40ml，加水至100ml，调节pH值至7．4)200μl，摇匀，置水浴(37℃±0．5℃)中缓缓滴加每1ml中含40单位的凝血酶溶液(每分钟5μl，边滴加边轻轻摇匀)至凝固，记录消耗凝血酶溶液的体积，按下式计算：

[0130]

[0131] 式中：U--每1g含凝血酶活性单位，U／g；

[0132] C1--凝血酶溶液的浓度，μ／ml；

[0133] C2--供试品溶液的浓度，g／m1；

[0134] V1--消耗凝血酶溶液的体积，μl；

[0135] V2--供试品溶液的加入量，μl；

[0136] W--取样量。

[0137] 中和一个单位的凝血酶的量，为一个抗凝血酶活性单位。

[0138] 本品每1g含抗凝血酶活性不低于16.0U。

[0139] 果糖二磷酸钠，参照卫生部部颁标准（试行）的果糖二磷酸钠（C6H11Na3O12·8H2O）质量标准检查。

[0140] 鉴别：取本品适量，加水制成每ml含50mgFDP的溶液，作为供试品。另取二磷酸果糖对照品适量，用水制成每ml含50mg的溶液，作为对照品。以微精纤维素薄层板（层厚0.5mm高20cm）二块，分别点样，照中国药典2005版二部附录薄层色谱法项下操作，展开剂为正丁醇：丙酮：冰醋酸：10%氨水：水（35：15：20：7.5：22.5），展距为18cm，加热蒸发溶剂，一块喷以12.5%钼酸铵：浓盐酸：高氯酸：丙酮（8：3：3：86）的溶液，在365nm紫外光下-3
照射10分钟，应显蓝色（以示PO4 的存在）；另一块喷以2%苯胺溶液：2%二苯胺乙醇液：磷酸（4：4：1）溶液，经105℃加热10分钟，应显红棕色（鉴别糖的存在）。

[0141] 果糖二磷酸钠含量测定：

[0142] 1、对照品溶液：精密称取FDP对照品30mg于100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，备用。

[0143] 2、供试品溶液：精密称取装量差异项下的内容物适量（相当于30mgFDP），置100ml 量瓶中，加水溶解，稀释至刻度，过滤，滤液备用。

[0144] 3、测定方法：精取供试品液和对照品溶液各1ml，分别置10ml量瓶中，加8mol/L盐酸液5ml及2.5%二苯胺冰醋酸液2ml，摇匀，置稳定架上在96℃±1℃恒温水浴加热30分钟，并时时振摇，取出后迅速冷却至室温，用70%乙醇稀释至刻度，于640nm波长处测定吸收度，根据对照品及供试品的吸收度计算含量，为标示量的90.0%～110.0%。

[0145] 经检查，本品符合中国药典2005版二部附录胶囊剂项下的有关规定。

[0146] 本发明这种复方水蛭胶囊应用范围广泛，经试验对下述临床症状均可适用：

[0147] （1）冠心病、心绞痛、心肌梗塞；高脂血症；肺栓塞；心脏人工瓣膜置换术后。

[0148] （2）脑血栓、脑栓塞、脑动脉粥样硬化；短暂性脑缺血发作（TIA）；椎—基底动脉供血不足。

[0149] （3）血栓闭塞性脉管炎、血栓性静脉炎、预防术后血栓形成。

[0150] （4）急、慢性肾小球肾炎、肾病综合症、肾静脉血栓。

[0151] （5）视网膜血管阻塞眼底动脉硬化；突发性耳聋；糖尿病合并各种血管病变的治疗；高血糖、高血脂、血液流变学异常及血小板活化易引起血液高粘、高聚、高凝状态，造成组织缺血、缺氧，氧自由基生成增加，转而生成脂质过氧化物，激活抗凝因子而诱发血栓形成及微血管病变。