水蛭用于改善黑眼圈或眼袋的应用、组合物及其制备方法

摘要

本发明属于化妆品领域，涉及水蛭的新应用，具体是以水蛭为主要原料，水蛭用于改善黑眼圈或眼袋的应用、组合物及其制备方法。为了更好的应用水蛭这一新用途，本发明提供了一种以水蛭为主要原料制备的用于改善或祛除黑眼圈和眼袋的组合物，该组合物主要活性成分为水蛭提取物、天然水蛭素与重组水蛭素中任意一种，可选择加入珍珠、决明子提取物、茯苓提取物中一种或几种组成复方，其重量配比为：其中，珍珠、决明子提取物、茯苓提取物中至少一种不为0。本发明利用水蛭用于改善或祛除黑眼圈和眼袋，作用明显，为公众提供了一种全新的选择。

权利要求

1.水蛭用于改善或祛除黑眼圈或眼袋的应用，其特征在于：采用水蛭的提取物、或天然水蛭素、或重组水蛭素。

2.根据权利要求1所述的水蛭用于改善或祛除黑眼圈或眼袋的应用，其特征在于：以水蛭提取物、天然水蛭素与重组水蛭素为主要活性成分，与珍珠、决明子提取物、茯苓提取物中的一种或任意组合共同组成活性成分，其重量配比如下：水蛭提取物、天然水蛭素或重组水蛭素5〜25份珍珠 0〜5份决明子提取物 0〜5份茯苓提取物 0〜5份；其中，珍珠、决明子提取物、茯苓提取物中至少一种不为0 ；水蛭提取物的制备方法为：取新鲜水蛭全体绞碎制成水蛭浆，按体积配比：水蛭浆1 份：浓盐酸0.01〜0. 1份、丙酮1〜10份的配料提取，取丙酮液，残渣再用丙酮浸提，过滤， 合并丙酮提取液，干燥即可；决明子提取物的制备方法为：取决明子药材，粉碎至粗粉，用60〜85%乙醇回流提取 2〜3次，每次6〜12倍量溶剂，提取时间为0. 5〜2. 5h，合并提取液，干燥即可；茯苓提取物的制备方法为：取茯苓药材，用药材6〜12倍量的60〜85%乙醇回流提取2〜3次，每次0. 5〜2. 5h，合并提取液，干燥即可。

3.根据权利要求2所述的水蛭用于改善或祛除黑眼圈或眼袋的应用，其特征在于：活性成分重量配比如下：水蛭提取物、天然水蛭素或重组水蛭素5〜25份珍珠 1〜5份决明子提取物 3〜5份茯苓提取物 3〜5份。

4.根据权利要求2或3所述的水蛭用于改善或祛除黑眼圈或眼袋的应用，其特征在于： 将活性成分加入常规辅料制成外用化妆品；外用化妆品中主要活性成分占外用化妆品的重量百分比为5-25%。

5.用于改善或祛除黑眼圈或眼袋的组合物，其特征在于：是以水蛭提取物、天然水蛭素与重组水蛭素为主要活性成分，与珍珠、决明子提取物、茯苓提取物中的一种或任意组合作为活性成分制成，活性成分是由如下重量配比的原料药制成：水蛭提取物、天然水蛭素或重组水蛭素5〜25份珍珠 0〜5份决明子提取物 0〜5份茯苓提取物 0〜5份；其中，珍珠、决明子提取物、茯苓提取物中至少一种不为0 ；所述水蛭提取物的制备方法为：取新鲜水蛭全体绞碎制成水蛭浆，按体积配比：水蛭浆1份：浓盐酸0. 01〜0. 1份、丙酮1〜10份的配料提取，取丙酮液，残渣再用丙酮浸提，过滤，合并丙酮提取液，干燥即可；所述决明子提取物的制备方法为：取决明子药材，粉碎至粗粉，用60〜85%乙醇回流提取2〜3次，每次6〜12倍量溶剂，提取时间为0. 5〜2. 5h，合并提取液，干燥即可；所述茯苓提取物的制备方法为：取茯苓药材，用药材6〜12倍量的60〜85%乙醇回流提取2〜3次，每次0. 5〜2. 5h，合并提取液，干燥即可。

6.根据权利要求5所述的用于改善或祛除黑眼圈或眼袋的组合物，其特征在于：活性成分由如下重量配比的原料药制成：水蛭提取物、天然水蛭素或重组水蛭素5〜25份珍珠 1〜5份决明子提取物 3〜5份茯苓提取物 3〜5份。

7.根据权利要求5或6所述的用于改善或祛除黑眼圈或眼袋的组合物，其特征在于： 加入常规辅料制成外用化妆品。

8.根据权利要求7所述的用于改善或祛除黑眼圈或眼袋的组合物，其特征在于：外用化妆品中水蛭提取物、或天然水蛭素、或重组水蛭素占外用化妆品的重量百分比为5-25%。

9.根据权利要求7所述的用于改善或祛除黑眼圈或眼袋的组合物，其特征在于：所述的外用化妆品为眼霜、眼部凝胶剂、眼膜、眼部按摩精油、眼部精华素。

10.用于改善或祛除黑眼圈或眼袋的组合物的制备方法，其特征在于：以水蛭提取物、 天然水蛭素与重组水蛭素为主要活性成分，与珍珠、决明子提取物、茯苓提取物中的一种或任意组合作为活性成分制成，活性成分是由如下重量配比的原料药制成：水蛭提取物、天然水蛭素或重组水蛭素5〜25份珍珠 0〜5份决明子提取物 0〜5份茯苓提取物 0〜5份；其中，珍珠、决明子提取物、茯苓提取物中至少一种不为0 ；所述水蛭提取物的制备方法为：取新鲜水蛭全体绞碎制成水蛭浆，按体积配比：水蛭浆1份：浓盐酸0. 01〜0. 1份、丙酮1〜10份的配料提取，取丙酮液，残渣再用丙酮浸提， 过滤，合并丙酮提取液，干燥即可；所述决明子提取物的制备方法为：取决明子药材，粉碎至粗粉，用60〜85%乙醇回流提取2〜3次，每次6〜12倍量溶剂，提取时间为0. 5〜2. 5h，合并提取液，干燥即可；所述茯苓提取物的制备方法为：取茯苓药材，用药材6〜12倍量的60〜85%乙醇回流提取2〜3次，每次0. 5〜2. 5h，合并提取液，干燥即可。

11.根据权利要求10所述的用于改善或祛除黑眼圈或眼袋的组合物的制备方法，其特征在于：活性成分由如下重量配比的原料制成：水蛭提取物、天然水蛭素或重组水蛭素5〜25份珍珠 1〜5份决明子提取物 3〜5份茯苓提取物 3〜5份。

说明书

水蛭用于改善黑眼圈或眼袋的应用、组合物及其制备方法

技术领域

[0001] 本发明属于化妆品领域，涉及水蛭用于改善黑眼圈或眼袋的应用，以及以水蛭为主要原料，用于改善黑眼圈或眼袋的组合物及其制备方法。

[0002] 水蛭是一味传统中药，史载于《神农本草经》，历代本草均有记述。中医认为它有破血、逐瘀通经的功能，历来用于治疗症瘕、痞块、血瘀闭经、跌打损伤。中国药典2000年版收载为水蛭科动物蚂蟥WhitmanpigraWhitman、7jC蛭Hinudenipponicaffhitman或柳叶蚂蟥WhitmaniaacranuIataWhitman的干燥体。水蛭中主要成分有：1、直接作用于凝血系统的成分，包括凝血酶抑制剂，以及其它抑制血液凝固的物质，如水蛭素（Hirudin)、菲牛蛭素 (Bufrudin)、森林山蛭素（Haemadin)等。2、其它蛋白酶抑制剂及其它活性成分，如溶纤素 (Hementerin)、待可森（Decorsin)等。3、其他成分：水蛭主含蛋白质，此外含有17种氨基酸，包括人体必需的8种氨基酸，还含有Zn、Mn、Fe、Co、Cr、Se、Mo、Ni等14种元素，还有吻蛭素、肝素、抗血栓素、氨基酸成分等营养成分。

[0003] 目前，已有较多化妆品中使用到水蛭的提取物或其主要成分水蛭素。如水蛭的提取物可用于祛斑、祛痘、润肤、嫩肤、美白、预防皮肤衰老、增强皮肤弹性之功效。

[0004] 由于黑眼圈及眼袋的形成原因较多，睡眠不足、疲劳、肾气虚损、精气不足均易出现黑眼圈与眼袋，而且二者常常同时出现，非常影响个人形象，但是现有方法对于改善和完全祛除黑眼圈和眼袋并不明显。现有报道中，尚未见单独应用水蛭于改善或祛除黑眼圈和眼袋的报道与应用。

发明内容

[0005] 本发明所解决的技术问题是提供一种水蛭的新用途，用于改善或祛除黑眼圈和眼袋。

[0006] 为了更好的应用水蛭这一新用途，本发明所解决的第二个技术问题是提供以水蛭为主要原料制备的用于改善或祛除黑眼圈和眼袋的组合物。本发明组合物主要活性成分为水蛭提取物、天然水蛭素与重组水蛭素中任意一种，可选择加入珍珠、决明子、茯苓中一种或几种组成作为活性成分形成复方。

[0007] 本发明组合物的活性成分重量配比如下：

[0008]

背景技术

水蛭提取物、天然水蛭素或重组水蛭素5〜25份
0〜5份。 种不为0。
0〜5份 0〜5份[0011] 优选重量配比为

[0012]水蛭提取物、天然水蛭素或重组水蛭素5〜25份
珍珠
决明子提取物茯苓提取物
5份 5份5份。

[0013] 本发明所采用的活性成分分别是：

[0014] 1、水蛭提取物的常规制备方法为：取新鲜水蛭全体绞碎制成水蛭浆，按体积配比： 水蛭浆1份：浓盐酸0. 01〜0. 1份、丙酮1〜10份的配料提取，取丙酮液，残渣再用丙酮浸提，过滤，合并丙酮提取液，干燥即可。

[0015] 2、天然水蛭素提取工艺为：取新鲜水蛭唾液，加入丙酮，冷却，取上清液离心，残渣加三氯乙酸溶解，取样上柱层析：

[0016] (1)阴离子交换柱层析：取适量DEAE-C52加蒸馏水使其膨胀，按常规方法依次用 NaOH-NaCl混合液、稀盐酸溶液及NaOH-NaCl混合液各浸泡30min后用蒸馏水洗涤至中性， 装柱后，用PH4. 6的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液平衡，上述三氯乙酸溶液上样进行梯度洗脱并用记录仪绘出洗脱曲线，分段收集洗脱液，将有活力部分集中于透析袋中用甘油浓缩，再用双缩脉法测总蛋白含量，继续以下的柱层析；

[0017] (2)凝胶过滤柱层析取适量的S印hadeX-G25加蒸馏水浸泡4h，按常规方法用 NaOH-NaCl混合液浸泡0. 5h，抽滤除去碱液并用蒸馏水洗涤至中性，加热煮沸除去气泡。装柱，用PH7. 4的缓冲液平衡，将上述有活力洗脱液的浓缩液上样、洗脱并用记录仪绘出洗脱曲线，分段收集有活力洗脱液；回收溶剂，干燥后即可。

[0018] 或直接购买市售产品。

[0019] 3、重组水蛭素（专利号：01105798. X)，其分子的第32至35位和第53至66位氨基酸序列为：Arg32-Gly33-Asp34-Ser35 ；Gln53-Gly54-Asp55-Phe56-Glu57-Pro58_Ile59 -Pro60-Glu61-Asp62-Ala63-Tyr64-Asp65-Glu66o

[0020] 4、决明子提取物的制备方法为：取决明子药材，粉碎至粗粉，用60〜85%乙醇回流提取2〜3次，每次6〜12倍量溶剂，提取时间为0. 5〜2. 5h，合并提取液，干燥即可。

[0021] 5、茯苓提取物的制备方法为：取茯苓药材，用药材6〜12倍量的60〜85%乙醇回流提取2〜3次，每次0. 5〜2. 5h，合并提取液，干燥即可。

[0022] 主药水蛭提取物、天然水蛭素与重组水蛭素能达到活血化瘀、畅通血脉的作用；配伍珍珠粉有清热泻火，养肝明目的作用，同时外用能在一定程度上达到物理遮盖黑眼圈、眼袋的作用；决明子主入肝经，能达到明目养目的作用；茯苓利水渗湿，能有效的对抗浮肿， 解决眼袋问题。水蛭、珍珠、决明子与茯苓的配伍使用，能达到畅通血脉、明目养目、利水消肿的作用，再配合健康的生活方式，对于改善或彻底祛除黑眼圈、眼袋具有良好的效果。

[0023] 利用水蛭用于改善或祛除黑眼圈和眼袋的新用途，采用水蛭为主要原料制成外用化妆品。可制成的化妆品有眼霜、眼部凝胶剂、眼膜、眼部按摩精油、眼部精华素等，可根据各自剂型的需要加入适当的辅料。

[0024] 本发明利用水蛭用于改善或祛除黑眼圈和眼袋，作用明显，为公众提供了一种全新的选择。 具体实施方式

[0025] 利用水蛭可改善或祛除黑眼圈和眼袋的新用途，发明人针对其有效浓度及具体剂型做了相关研究。

[0026] 本发明使用的主要原料及附加活性成分制备方法如下：

[0027] 1、水蛭提取物的常规制备方法为：取新鲜水蛭全体绞碎制成水蛭浆，按体积配比： 水蛭浆1份：浓盐酸0. 01〜0. 1份、丙酮1〜10份的配料提取，取丙酮液，残渣再用丙酮浸提，过滤，合并丙酮提取液，干燥即可。

[0028] 2、天然水蛭素提取工艺为：取新鲜水蛭唾液，加入丙酮，冷却，取上清液离心，残渣加三氯乙酸溶解，取样上柱层析：

[0029] (1)阴离子交换柱层析：取适量DEAE-C52加蒸馏水使其膨胀，按常规方法依次用 NaOH-NaCl混合液、稀盐酸溶液及NaOH-NaCl混合液各浸泡30min后用蒸馏水洗涤至中性， 装柱后，用PH4. 6的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液平衡，上述三氯乙酸溶液上样进行梯度洗脱并用记录仪绘出洗脱曲线，分段收集洗脱液，将有活力部分集中于透析袋中用甘油浓缩，再用双缩脉法测总蛋白含量，继续以下的柱层析；

[0030] (2)凝胶过滤柱层析取适量的S印hadeX-G25加蒸馏水浸泡4h，按常规方法用 NaOH-NaCl混合液浸泡0. 5h，抽滤除去碱液并用蒸馏水洗涤至中性，加热煮沸除去气泡。装柱，用PH7. 4的缓冲液平衡，将上述有活力洗脱液的浓缩液上样、洗脱并用记录仪绘出洗脱曲线，分段收集有活力洗脱液；回收溶剂，干燥后即可。

[0031] 或直接购买市售产品。

[0032] 3、重组水蛭素（专利号：01105798. X)，其分子的第32至35位和第53至66位氨基酸序列为：Arg32-Gly33-Asp34-Ser35 ；Gln53-Gly54-Asp55-Phe56-Glu57-Pro58_Ile59 -Pro60-Glu61-Asp62-Ala63-Tyr64-Asp65-Glu66o

[0033] 4、决明子提取物的常规制备方法为：取决明子药材，粉碎至粗粉，用60〜85% (ν/ ν)乙醇回流提取2〜3次，每次6〜12倍量溶剂，提取时间为0. 5〜2. 5h，回收溶剂后，干燥即可。优选乙醇浓度70〜80%，溶剂用量及提取时间以提取出较多干物质为佳。

[0034] 5、茯苓提取物的常规制备方法为：取茯苓药材，用药材6〜12倍量的60〜85% (ν/ν)乙醇回流提取2〜3次，每次0. 5〜2. 5h，合并提取液，干燥即可。优选乙醇浓度70〜 80 %，溶剂用量及提取时间以提取出较多干物质为佳。

[0035] 以下实例中均采用优选条件制备的水蛭提取物、天然水蛭素、重组水蛭素、决明子提取物、茯苓提取物。

[0036] 一、本发明活性成分量效关系的确定：

[0037]实验 1 ：

[0038] 将水蛭提取物、天然水蛭素和重组水蛭素不同浓度的水溶液单独使用在同一个测试者眼周皮肤上，每天早晚各使用一次，使用5周后，根据黑眼圈、眼袋祛除效果筛选产品中活性成分的有效浓度。

[0039] 测试结果见表1 ：

[0040](-)表示无明显效果[0041] (+)表示有效果

[0042] (++)表示有明显效果

[0043] (+++)表示有非常明显效果

[0044] 表1说明，采用不同浓度的水蛭药物的效果差异为：当浓度低于5%时，对眼周血流量几乎没有较大的改善，故祛黑眼圈和眼袋效果不明显；当浓度为5%以上时，血流量得到较大的改善，祛黑眼圈和眼袋效果明显；但当浓度增加到25%以上时，测试者反映会出现过分油腻的现象，使用时间较长后会产生脂肪粒。综上实验结果，最终选择5〜25% (g/ g)的浓度。

[0045] 表1单独使用水蛭中活性成分对黑眼圈、眼袋的作用效果表

[0046]序号 活性成分 溶液浓度％ (g/g) 黑眼圈祛除效果 眼袋祛除效果1 1 (-) (-)2 3 (-) (-)3 5 (+ ) (+ )4 水蛭提取物 10 (+ + ) (+ + )5 15 (+ + ) (+ + )6 20 (+ + ) (+ + )7 25 (+ + + ) (+ + + )8 30 (+ + + ) (+ + )9 1 (-) (-)10 3 (-) (-)11 5 (+ ) (+ )12 天然水蛭素 10 (+ + ) (+ + )13 15 (+ + ) (+ + )14 20 (+ + + ) (+ + + )15 25 (+ + + ) (+ + + )16 30 (+ + ) (+ + )17 1 (-) (-)18 3 (-) (-)19 5 (+ + ) (+ + )20 重组水蛭素 10 (+ + ) (+ + )21 15 (+ + + ) (+ + + )22 20 (+ + + ) (+ + + )23 25 (+ + + ) (+ + + )24 30 (+ + ) (+ + )

[0047]实验 2 ：

[0048] 由于实验1已经证实水蛭提取物、天然水蛭素和重组水蛭素在5〜25%浓度范围内有效，故选取有效浓度为10%的天然水蛭素溶液与珍珠粉、决明子提取物、茯苓提取物中的一种或任意混合制成相应浓度的水溶液，即溶液中天然水蛭素10% (g/g)、珍珠粉0-6% (g/g)、决明子提取物0-6% (g/g)、茯苓提取物0-6% (g/g)。观察其配伍关系对黑眼圈、眼袋疗效的影响情况。

[0049] 测试结果见表2:8[0050](-)表示无明显效果

[0051] (+)表示有效果

[0052] (++)表示有明显效果

[0053] (+++)表示有非常明显效果

[0054] 表2水蛭中活性成分与其他三种活性成分任意配伍后对黑眼圈、眼袋的作用效果表

[0055]

[0056] 结果发现，单独加入珍珠粉浓度在1 %以上，即可有效的增强疗效，而单独使用决明子提取物和茯苓提取物用量达到3%以上才能有效的增强疗效，而单独使用珍珠粉、决明子提取物和茯苓提取物浓度超过5%以上时，虽然也有一定的效果，但测试者反映吸收效果较差，故三种药物浓度不宜超过5%。同时加入珍珠粉、决明子提取物和茯苓提取物都可增强疗效，但与用量有一定关系。实验结果证明疗效活性成分的有效浓度范围为水蛭提取物、 天然水蛭素或重组水蛭素5〜25%，珍珠粉1〜5%，决明子提取物3〜5%，茯苓提取物 3〜5%较佳，即活性成分之间的重量配比关系优选：水蛭提取物、天然水蛭素或重组水蛭素5〜25份，珍珠粉1〜5份，决明子提取物3〜5份，茯苓提取物3〜5份。

[0057]实验 3 ：

[0058] 按照最佳配比关系随机选择水蛭提取物、天然水蛭素和重组水蛭素与珍珠粉、决明子提取物（表3中简称决明子）、茯苓提取物（表3中简称茯苓）不同比例，其改善黑眼圈和眼袋的对比情况见表3。

[0059] 表3水蛭中活性成分与其他三种活性成分最佳配备关系对黑眼圈、眼袋的作用效果表

[0060]

[0061] 实验结果表明，在最佳配比范围内随机选择四种成分的比例，均能得到较好的效果。

[0062] 二、本发明组合物的制备

[0063] 利用水蛭的新用途将其制成外用化妆品，其中主要活性成分（水蛭提取物、或天然水蛭素、或重组水蛭素）占外用化妆品的重量百分比为5-25% (g/g)。实施例1为实验 1中序号5的用量，实施例2为实验1中序号13的用量、实施例3为实验1中序号20的用量，实施例4为实验2中序号19的用量，实施例5为实验3中序号3的用量，实施例6为实验3中序号5的用量。

[0064] 1、仅采用水蛭为原料。

[0065] 以水蛭提取物、天然水蛭素与重组水蛭素为活性成分，加入常规辅料制成眼霜、眼部凝胶剂、眼膜、眼部按摩精油、眼部精华素等外用化妆品。如：

[0066] 实施例1 ：水蛭提取物眼部凝胶剂配方及其制备方法

[0067]

[0068] 制法：胶凝剂Carbopo 1940中加入去离子水溶胀，并强力搅拌使其溶解完全；用部分去离子水溶解保湿剂丙二醇，将溶胶液加入，并搅拌。当混合物溶解完全时加入水蛭提取物、辛酰基羟化小麦蛋白继续搅勻后，并加强搅拌直至均勻即可。

[0069] 实施例2 ：天然水蛭素眼霜配方及其制备方法[0070]

[0071] 制法：将A、B分别混合搅拌、加热至75°C，制成水相和油相，然后将B加入A中搅拌进行乳化，继续搅拌至室温。乳化完成后分装即得。

[0072] 实施例3 ：重组水蛭素眼膜配方及其制备方法

[0073]

[0074] 制法：将各组份混合均勻，静置，过滤，滤液浸渍涂布于无纺布面膜上即得。

[0075] 2、采用水蛭为主要原料，配伍珍珠、决明子、茯苓中的一种或任意混合，加入常规辅料制成眼霜、眼部凝胶剂、眼膜、眼部按摩精油、眼部精华素等外用化妆品。水蛭与珍珠、 决明子提取物、茯苓提取物的重量配比关系是：

[0076]水蛭提取物、天然水蛭素或重组水蛭素5〜25份珍珠 0〜5份
决明子提取物 0〜5份
茯苓提取物 0〜5份。

[0077] 珍珠、决明子提取物、茯苓提取物中至少一种不为0。如：

[0078] 实施例4 ：重组水蛭素眼部精华素配方及其制备方法

[0079]

[0080] 制法：取羟丙基纤维素加入纯化水溶胀后，在水浴上搅拌至完全溶解，加入重组水蛭素、决明子提取物、珍珠粉，搅拌均勻，加入甘油；另取羟苯乙酯溶于60°C纯化水中，加入到羟丙基纤维素溶液中，再加60°C纯化水至全量，搅拌均勻即可。

[0081] 3、采用水蛭为主要原料，配伍珍珠、决明子和茯苓，加入常规辅料制成眼霜、眼部凝胶剂、眼膜、眼部按摩精油、眼部精华素等外用化妆品。水蛭与珍珠、决明子、茯苓的重量配比为实验3中筛选处的最佳配比关系：

[0082]

[0083] 实施例5 ：水蛭提取物眼霜配方及其制备方法

[0084]组分 质量％ 精制水 52A 硬脂酸 6.0 水蛭提取物 15 决明子提取物 3 茯苓提取物 3B 丙二醇 5.0 角鲨烷单硬脂酸酯 8.0 十六醇 5.0 珍珠粉 3

[0085] 制法：将A、B分别混合搅拌、加热至85°C，并于搅拌下进行乳化。待乳化完成后， 混合均勻后，静止24h分装。

[0086] 实施例6 ：天然水蛭素眼部凝胶剂配方及其制备方法

[0087]13

[0088] 制法：将海藻酸钠加水溶解后，与甘油、天然水蛭素混合均勻，再加入决明子提取物、茯苓提取物、珍珠粉研磨混合，再将壳聚糖用乙酸溶液溶解，过滤出去不溶物，加入到海藻酸钠与甘油的药物混合物中，另取羟苯乙酯溶于60°C纯化水中，然后一次加入以上混合物，加速搅拌至成凝胶剂即可。

[0089] 三、应用实例

[0090] 注应用实例1-3的表4-8中：

[0091] 1、黑眼圈比色卡有1〜10个不同色度，可适用于任何人，分别表示了黑眼圈的不同深浅程度，数字越大，黑眼圈越严重。[1代表浅乳白色，2代表乳白色，3代表浅棕黄色，4 代表棕黄色，5代表浅黄棕色，6代表黄棕色，7代表浅黄褐色，8代表黄褐色，9代表浅黑褐色，10代表黑褐色。]

[0092] 2、眼袋面积的测量工具为精度士0. IOmm的游标卡尺，主要测量部位为长（平行于水平线测量数据）X宽（垂直于水平线测量数据）

[0093] 3、眼周血流量测量方法：选取受试者眼睑皮肤为观察部位，测试前30min受试者无剧烈活动。测试时局部70%乙醇消毒，使用双通道激光多普勒血流仪的皮肤表面探头测试各眼睑皮肤表面微血管血流灌注量。

[0094] 应用实例1 ：

[0095] 王女士，女，30岁，教师，因遗传因素和睡眠不佳导致的黑眼圈与眼袋，使用过多种眼部护理产品，一直改善不明显。两眼的黑眼圈与眼袋严重程度相似，使用实施例1所得水蛭提取物眼部凝胶剂与其他产品分别使用在左、右眼周，使用5周后，再将两眼使用产品互换，使用5周，比较结果见表4、5 ：

[0096] 表4水蛭提取物眼部凝胶剂效果比较（第1〜5周）1-1

[0097]

[0098] 表5水蛭提取物眼部凝胶剂效果比较（第6〜10周）1-2

[0099]

[0100] 由表4和5中数据可得知，水蛭提取物眼霜显效较快，而且与同类产品比较，祛黑眼圈和眼袋效果较好。

[0101] 应用实例2:

[0102] 李女士，女，28岁，医药代表，长期不良生活方式导致黑眼圈、眼袋严重，两眼的黑眼圈与眼袋严重程度相似，使用实施例2所得眼霜与其他产品分别使用在左眼与右眼周，使用5周后，再将两眼使用产品互换，使用5周，比较结果见表6、7 ： [0103] 表6天然水蛭素眼霜效果比较（第1〜5周）2_1

[0104]

[0105] 表7天然水蛭素眼霜效果比较（第6〜10周）2-2[0106

[0107] 由表6和表7中数据可得知，天然水蛭素眼霜对王女士的黑眼圈、眼袋具有较好的改善，且显效比同类产品快。

[0108] 应用实例3:

[0109] 姜先生，28岁，房产销售，长期抽烟、熬夜导致黑眼圈严重，易见眼袋，使用实施例5所得眼霜5周效果见表8 ：

[0110] 表8水蛭提取物眼霜效果比较3

[0111]

[0112] 由表8中数据可得知，使用实施例5水蛭提取物眼霜后，姜先生的黑眼圈和眼袋几乎完全消失了。

[0113] 综上，本发明利用水蛭用于改善或祛除黑眼圈和眼袋，作用明显，为公众提供了一种全新的选择。