一种治疗肝纤维化的中药复方制剂及其制备方法

摘要

本发明公开了一种治疗肝纤维化的中药复方制剂，由三七、老鹳草、五味子、茜草按一定重量份配比所制成。其制法对处方中的三七、五味子和茜草三味药材加50-90%乙醇回流提取，提取液及药渣分别留存备用；将老鹳草和上述药渣合并后加水煎煮，滤过，滤液减压浓缩至相对密度至1.05-1.30，用95%乙醇调节醇浓度为55-85%，静置过夜，滤过，滤液与上述乙醇回流液合并，减压回收乙醇并浓缩至稠膏状，真空干燥后粉碎成细粉，添加不同剂型相应的辅料适量，用常规的制剂方法制成口服液、颗粒剂、片剂或胶囊剂。本中药复方制剂具有活血通络，化瘀散结的功效，经药效学试验结果表明本中药复方制剂之抗肝纤维化功效显著。

权利要求

1. 一种治疗肝纤维化的中药复方制剂，其特征在于它是由以下重量份配比的药材所制成的：三七:Γ3份，老鹳草：4〜6份，五味子:2〜4份，茜草:3〜5份。

2.根据权利要求1所述的中药复方制剂，其特征在于药材经提取后添加不同剂型相应的辅料，用常规的制剂方法制成口服液、颗粒剂、片剂或胶囊剂。

3. 一种制备权利要求1所述的中药复方制剂的方法，其特征在于制备步骤如下：(1)取三七、五味子、茜草3味药材加乙醇回流提取，提取液及药渣分别留存，备用；(2)取老鹳草和上述步骤（1)中的三七、五味子、茜草3味药材乙醇回流提取后的药渣， 加水煎煮，滤过，滤液减压浓缩后醇沉，静置过夜，滤过，滤液备用；(3)将步骤（1)的乙醇回流提取液和步骤（2)的醇沉液合并，滤液减压回收乙醇并浓缩，真空干燥，粉碎，再添加相应剂型的适量辅料制成颗粒剂、片剂、胶囊剂或将滤液减压浓缩，滤过，分装，灭菌，制成口服液。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于在步骤（1)中所述的乙醇浓度为 50-90%,回流提取2-3次，每次提取1-2小时。

5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于在步骤（2)中所述的加水煎煮为2-3 次，每次煎煮1-3小时，滤液减压浓缩的相对密度为1. 05-1. 30，65°C，醇沉浓度为55_85%。

6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于在步骤（3)中滤液在0. 07MPa、60-7(TC 条件下减压浓缩成至相对密度为1. 05-1. 30，65°C。

7.如权利要求1所述的中药复方制剂在制备治疗肝纤维化疾病药物中的应用。

说明书

一种治疗肝纤维化的中药复方制剂及其制备方法技术领域：[0001] 本发明属于中药制药技术领域，具体涉及一种治疗肝纤维化的中药复方制剂及其制备方法。背景技术：[0002] 肝纤维化是各种原因损伤肝脏，导致肝细胞炎变、坏死，肝内纤维结缔组织异常增生的病理过程，以细胞外基质（ECM)过量沉积为病理特征，是各种慢性肝病共有的病理改变，是个可逆的过程。晚期肝纤维化可导致肝硬化、门脉高压和肝功能衰竭。肝纤维化是对肝脏损伤所表现的“愈合反应”，其实质是肝脏胶原合成与分解平衡被破坏，致使肝细胞外基质（ECM)的过度沉积，并且发生组成改变或重构。因此，能否终止肝纤维化的进展甚或逆转至正常，是治疗各种慢性肝病的关键。能够引起慢性肝脏损伤的疾病基本均伴有不同程度的肝纤维化，最常见的诱因是慢性丙型和乙型肝炎，另外还有乙醇、血色病、空结肠吻合术、肝内胆汁淤积、机械性胆道梗阻等。[0003] 中医将慢性乙型肝纤维化主要分为5种类型：肝郁脾虚型、湿热中阻型、肝肾阴虚型、脾肾阳虚型、瘀血阻络型。研究发现肝郁脾虚型处于肝纤维化形成的初期阶段，湿热中阻型肝纤维化形成活跃，肝肾阴虚和脾肾阳虚型处于中期阶段，瘀血阻络型最高。[0004] 肝纤维化的防治是一个世界性难题，目前尚无特效治疗。现代肝病学奠基人Hans Popper教授指出：“谁能阻止或延缓肝纤维化的发生，谁就将治愈大多数慢性肝病。”遗憾的是，迄今为止尚没有一种药物被批准专门用于治疗肝纤维化。[0005] 现代医学治疗肝纤维化尚处于试验研究阶段，如干预某一发病环节，抗炎、抗氧化、抑制胶原合成、基因治疗。极少数用于临床的药物疗效并不理想或不良反应大难以接受。目前，尚无有效的抗肝纤维化的西药；传统中医药以整体观念、辨证论治为原则，通过活血化瘀、疏肝健脾、养阴清热、等方法治疗肝纤维化，具有较好的疗效。本发明的中药复方制剂具活血通络、化瘀散结之功效，治疗肝纤维化疗效显著。发明内容：[0006] 本发明的目的的在于提供一种安全、有效的治疗肝纤维化的中药复方制剂及其制备方法。该制剂的剂型为口服液、胶囊剂、片剂或颗粒剂。[0007] 本发明的目的是通过以下的技术方案来实现的：[0008] 一种治疗肝纤维化的中药复方制剂，其特征在于它是由以下重量份配比的药材所制成的：[0009] 三七：1〜3份，老鹳草：4〜6份，五味子：2〜4份，茜草：3〜5份。[0010] 药材经提取后添加不同剂型相应的辅料，用常规的制剂方法制成口服液、颗粒剂、 片剂或胶囊剂。[0011] 上述中药复方制剂的制备方法，其制备步骤如下：[0012] (1)取三七、五味子、茜草3味药材加乙醇回流提取，提取液及药渣分别留存，备[0013] (2)取老鹳草和上述三七、五味子、茜草3味药材乙醇回流提取后的药渣，加水煎煮，滤过，滤液减压浓缩后醇沉，静置过夜，滤过，滤液备用；[0014] (3)将步骤（1)的乙醇回流提取液和步骤（¾的醇沉液合并，滤液减压回收乙醇并浓缩，真空干燥，粉碎，再添加相应剂型的适量辅料制成颗粒剂、片剂、胶囊剂或将滤液减压浓缩，滤过，分装，灭菌，制成口服液。[0015] 在步骤（1)中所述的乙醇浓度为50-90%，回流提取2-3次，每次提取1_2小时。 在步骤O)中所述的加水煎煮为2-3次，每次煎煮1-3小时。滤液减压浓缩的相对密度为 1.05-1. 25 (65°C )，醇沉浓度为 55-85%。[0016] 在步骤（3)中滤液在0. 07MPa,60-70 °C条件下减压浓缩至相对密度为 1. 05-1. 30 (65 0C )。[0017] 上述的中药复方制剂在制备治疗肝纤维化疾病药物中的应用。[0018] 方解：该中药复方制剂由三七、老鹳草、五味子、茜草组成，其功效为活血通络，化瘀散结，主要治疗肝纤维化和痰癖互结证。[0019] 复方中参三七为君药，化瘀止血，改善肝脏微循环，减轻肝损伤，增加血流量，降低肝组织中MDA含量，增加SOD活性，发挥脂质过氧化作用，具有一定的降酶保肝作用，保护肝细胞，减少肝细胞变性、坏死；抑制HSC活化、增殖，减少胶原合成，下调TIMP-I及TIMP-I/ MMP-I，促进ECM降解，减少ECM沉积。[0020] 老鹳草为臣药，疏经、活血、清热、解毒、利湿，能抑制肝脏粒体和微粒体的脂质过氧化，并能降低血浆胆醇及GOT、GPT冰平，对于慢性肝炎患者出现的“湿热、淤滞、蕴结、气血不调”有较好的治疗作用。[0021] 五味子为佐药，五味悉俱，酸以入肝，滋肝养肾，咸以走肾，滋水涵木，肝肾同源，精血互资。具有护肝、促进肝脏合成蛋白和肝细胞再生的功能，并能增强肝脏的解毒功能。[0022] 茜草为使药，祛癖通络，除疲解热。茜草的甲醇提取物可抑制Ifep3B (人肝癌细胞株）细胞分泌HBAg，是抗HBV的有效成分，但对HepIBB细胞生存能力影响较小，亦无细胞毒作用。[0023] 总之，本发明的中药复方制剂依托于传统的中药医药文化，产品安全无毒，具活血通络、化瘀散结之功效，可用于治疗肝纤维化。本产品的研制将会给肝纤维化及各种肝病患者带来福音，给企业带来巨大的经济效益，同时亦将推动医药产业的迅速发展。具体实施方式：[0024] 下面通过实施例进一步说明本发明的中药复方制剂的制备及治疗肝纤维化的功效。[0025] 实施例1 ：“抗肝纤口服液”的制备[0026] 处方：三七1份，老鹳草4份，五味子2份，茜草3份；[0027] 制备步骤：⑴将三七、五味子、茜草药材加50%乙醇回流提取2次，每次提取2小时，提取液及药渣分别留存备用；[0028] (2)取老鹳草和上述步骤（1)提取后的药渣，加水煎煮2次，每次煎煮2小时，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1. 05 (650C )，用95 %乙醇调节醇浓度为65 %，静置过夜，滤过，滤液备用；[0029] (3)将上述步骤⑴的提取液和步骤（2)的醇沉液合并，滤液减压浓缩（0. 07MPa、 60-70 °C )至相对密度为1. 10 (65 °C )，加1 %阿斯巴甜，2 %柠檬酸，搅勻，静置12小时以上， 滤过，分装（每支10ml)，灭菌，即得。[0030] 实施例2 ：“抗肝纤颗粒”的制备[0031 ] 处方：三七2份，老鹳草5份，五味子3份，茜草4份；[0032] 制备步骤：⑴将三七、五味子、茜草药材加70%乙醇回流提取2次，每次提取2小时，提取液及药渣分别留存备用；[0033] (2)取老鹳草和上述提取后的药渣，加水煎煮3次，每次煎煮1小时，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1. 15 (650C )，用95 %乙醇调节醇浓度为75 %，静置过夜，滤过，滤液备用；[0034] (3)将上述步骤（1)的提取液和步骤（¾的醇沉液合并，滤液减压浓缩（0. 07Mpa、 60-70°C)至相对密度为1. 10(65°C)，搅勻，喷雾干燥，加入阿斯巴甜，干式制粒，以铝塑复合膜分装，每袋6g，即得。[0035] 实施例3 ：“抗肝纤胶囊”的制备[0036] 处方：三七3份，老鹳草6份，五味子4份，茜草5份；[0037] 制备步骤：⑴将三七、五味子、茜草药材加80%乙醇回流提取3次，每次提取1小时，提取液及药渣分别留存备用；[0038] (2)取老鹳草和上述提取后的药渣，加水煎煮2次，每次煎煮3小时，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1. 15 (650C )，用95 %乙醇调节醇浓度为80 %，静置过夜，滤过，滤液备用；[0039] (3)将上述步骤⑴的提取液和步骤（2)的醇沉液合并，滤液减压浓缩（0. 07Mpa、 60-70°C )至相对密度为1. 25 (65°C )，加入微晶纤维素、糊精适量，制软材，制颗粒，装入胶囊，每粒0. 35g，即得。[0040] 实施例4 “抗肝纤口服液”药效学初步研究[0041] 实验动物[0042] SD大鼠，雌雄不限，体重180〜200g，南京中医药大学实验动物中心提供。[0043] 实验用药物及试剂[0044] “抗肝纤口服液”，规格：10ml/支（相当于含生药20g)，南京中医药大学研制，批号：1011022 ；甲基亚硝胺（DMN)，上海泛柯生物科技有限公司；四氯化碳（CCL4),分析纯，上海长江化工厂；橄榄油，上海佳格食品有限公司；秋水仙碱，日本Sigma公司。[0045] 丙氨酸氨基转移酶（ALT)、天冬氨酸转氨酶（AST)试剂盒，四川迈克科技有限公司；透明质酸（HA)、层粘连蛋白（LN)、III型前胶原（PCIII)、IV型胶原（CIV)试剂盒，上海海军医学研究所生物技术中心；肝组织超氧化物歧化（SOD)、谷胱甘肽（GSH)、单胺氧化酶 (ΜΑΟ)、丙二醛（MDA)、一氧化氮（NO)以及抗超氧阴离子自由基："：：试剂盒，南京建成生物工程研究所。[0046] 实验1.对四氯化碳肝纤维化大鼠肝组织病理学的影响[0047] 雄性SD大鼠60只，体重190〜200g。除正常组皮下注射橄榄油（3mL/kg)外，其余各组均皮下注射40% CCL4(CCL4 ：橄榄油=2 ： 5)3mL/kg。每周两次，共6周，首次加倍。药物治疗组从造模当日分别给予“抗肝纤口服液”灌服，正常组和模型组均予等体积蒸馏水，每天1次灌胃，6周末一并处死取材。肝组织标本石蜡包埋，4 μ m厚连续切片备检。 [0048] 表1.各大鼠肝组织病理学变化比较±s)

[0050] 注：与模型对照组比较，< 0. 05，< 0. 01[0051] 实验2.对二甲基亚硝胺肝纤维化大鼠血清指标的影响[0052] 选健康的SD大鼠60只，随机分为6组：正常对照组、二甲基亚硝胺模型组（DMN 组）、秋水仙碱治疗组、“抗肝纤口服液”高、中、低剂量组。参照DMN诱导大鼠肝纤维化模型的方法，腹腔注射DMN，建立肝纤维化模型。正常对照组按aiil/kg腹腔注射生理盐水，其余各组按aiil/kg腹腔注射（5mg/L) DMN溶液，每周连续注射3d，共4周。实验第28天处死动物，进行血清学及肝组织学检查。观察血清肝纤维化指标ALT、AST、SOD、GSH、MAO、MDA、HA、 LN、PCIII、CIV的含量，结果如下。[0053] 1、对肝纤维化大鼠血清酶活性的影响[0054] 模型组与正常组比较，大鼠血清ALT、AST活性显著升高，给药组ALT、AST活性较模型组显著下降，肝功能明显改善。结果见表2。[0055] 表2.对肝纤维化大鼠血清酶活性的影响（n = 8，χ士 s)

[0057] 注：与模型对照组比较，* P < 0. 05，〃 P < 0. 01[0058] 2、对肝纤维化大鼠SOD、GSH、MAO、MDA含量的影响[0059] 模型组与正常组比较，大鼠血清SOD、GSH含量下降，MAO、MDA含量升高；给药组 SOD、GSH含量较模型组显著升高，MAO、MDA含量较模型组显著下降，结果见表3。[0060] 表3.对肝纤维化大鼠SOD、GSH, MAO, MDA含量的影响（n = 8，χ士s)[0061]

[0062][0063][0064]PCIII[0065]注：与模型对照组比较，* P < 0. 05，** P < 0. 01 3、对大鼠血清HA、LN、PCIII、CIV含量的影响模型组大鼠血清中HA、LN、PCIII、CIV含量显著升高，给药组大鼠血清HA、LN、 CIV含量明显降低，表明肝组织胶原增生受到明显抑制。结果见表4。 表4.对大鼠血清HA、LN、PCIII、CIV含量的影响（n = 8，χ士s)

[0068] 注：与模型对照组比较，* P < 0. 05，** P < 0. 01[0069] 4、对肝纤维化大鼠血清NO含量、抗O;活力的影响[0070] 模型组较正常组血清NO含量、抗O;活力下降，给药组与模型组比较血清NO含量、 抗…活力明显升高，结果见表5。[0071] 表5.对肝纤维化大鼠血清NO含量、抗…活力的影响（n = 8，χ士 s)[0072][0073]注：与模型对照组比较厂 "P < 0. 05广 P < 0. 01 结论：本发明中的中药复方制剂具有抗肝纤维化、改善肝功能的功效t