一种生长猪低氮排放日粮转让专利
申请号 : CN201110178956.7
文献号 : CN102217739B
文献日 : 2014-02-12
发明人 : 谯仕彦 , 张桂杰 , 宋青龙
申请人 : 中国农业大学
摘要 :
本发明公开了一种生长猪低氮排放日粮。该低氮排放日粮，含有蛋白质、赖氨酸、色氨酸、苏氨酸和含硫氨基酸；其中，所述低氮排放日粮的净能含量为2.30-2.45Mcal/kg，蛋白质含量为11.5-15.5％；所述低氮排放日粮中标准回肠可消化赖氨酸含量为0.9％-1.02％，标准回肠可消化色氨酸与赖氨酸的比例不低于0.23，标准回肠可消化苏氨酸与赖氨酸的比例不低于0.66，标准回肠可消化含硫氨基酸与赖氨酸的比例不低于0.61。本发明通过降低《猪饲养标准》(2004)中日粮配方中的粗蛋白水平，补充合成氨基酸，提高动物中氨基酸的吸收率，降低饲料成本，提高养猪业的经济效益；降低环境中氮的排放，可在一定程度上缓解蛋白质饲料缺乏的问题；且不影响生长猪的增重和其饲料转化率。
权利要求 :
1.一种生长猪低氮排放日粮，含有蛋白质、赖氨酸、色氨酸、苏氨酸和含硫氨基酸；其特征在于：所述低氮排放日粮的净能含量为2.30-2.45Mcal/kg，蛋白质含量为
11.5-15.5％；所述低氮排放日粮中标准回肠可消化赖氨酸含量为0.9-1.02％，标准回肠可消化色氨酸与标准回肠可消化赖氨酸的比例不低于0.23，标准回肠可消化苏氨酸与标准回肠可消化赖氨酸的比例不低于0.66，标准回肠可消化含硫氨基酸与标准回肠可消化赖氨酸的比例不低于0.61。
2.根据权利要求1所述的生长猪低氮排放日粮，其特征在于：所述低氮排放日粮的净能含量为2.40Mcal/kg，蛋白质含量为14％-14.8％；所述低氮排放日粮中标准回肠可消化赖氨酸含量为1.02％，标准回肠可消化色氨酸与标准回肠可消化赖氨酸的比例为0.23，标准回肠可消化苏氨酸与标准回肠可消化赖氨酸的比例为0.66，标准回肠可消化含硫氨基酸与标准回肠可消化赖氨酸的比例为0.61。
3.权利要求1或2所述生长猪低氮排放日粮的应用，其特征在于：所述生长猪低氮排放日粮作为20～50kg生长猪的日粮应用。
说明书 :
一种生长猪低氮排放日粮
技术领域
[0001] 本发明涉及一种生长猪低氮排放日粮。
背景技术
[0002] 据海关统计数字，2009-2010年度我国进口国外大豆总量达到5480万吨，蛋白质饲料资源的短缺严重影响了我国畜牧业的发展和经济效益。畜禽生产中氮排放带来的环保问题，在低碳背景下给畜牧业的发展增加了更加严峻的挑战。如何减少蛋白质饲料资源依赖于国外进口和减少畜禽生产中污染物的排放成为目前动物营养界公认的大问题之一。因此，在不影响养殖效益的前提下，做到节能减排，是当今畜牧业发展的大势所趋。所谓节能减排是指在提高能量饲料的利用效率的同时减少营养成分向环境中排放，从而减少排泄物对环境的污染，促进畜牧业与环境和谐发展。
[0003] 基于目前形势，有必要在现有的动物营养学理论的基础上，对理想蛋白质模式进行深入研究，从而提高饲料的利用率，降低对环境的污染。理想蛋白质模式是指饲料蛋白质中各种氨基酸含量与动物用于特定功能所需要的氨基酸量相一致。因此只要日粮提供合理的氨基酸，就可以满足动物的蛋白质需要(李德发，2003)。随着工业合成氨基酸的快速发展，饲料中添加合成氨基酸，促进各种氨基酸的均衡，提高蛋白质的利用率，使在保证最大生产效率的同时降低饲料工程中氮的排泄量成为可能。这也为发展低氮排放日粮，利用非常规饲料，促进新的饲料资源的合理开发利用提供无限希望。
[0004] 低氮排放日粮是指将日粮蛋白质水平在适用推荐标准基础上降低2～4个百分点，并添加适宜的合成氨基酸，以保持日粮中氨基酸的平衡，来降低氮排放的一种日粮(Kerr等，1995；Le Bellego等，2001；Kerr等，2003；Shriver等，2003)，即通常意义上的低蛋白日粮。上个世纪70年代，动物营养学家就已经开始了对猪低氮排放日粮的研究。理想氨基酸模型的建立，猪营养需要的不断完善，以及多种氨基酸工业化生产的实现，为使用合成氨基酸配制低氮排放日粮奠定了基础。发展低氮排放日粮，对于严重缺乏蛋白质资源的我国的具有重要的实践意义和广阔的应用前景。
[0005] 目前的研究中，主要集中在日粮蛋白水平的降低程度、合成氨基酸的添加量以及净能体系在低氮排放日粮的应用，关于低氮排放日粮中氨基酸需要量的研究较少。添加合成氨基酸的低氮排放日粮中氨基酸总浓度下降。一些非必需氨基酸，如缬氨酸、异亮氨酸成为限制性氨基酸，并且必需氨基酸之间的配比平衡也发生变化。因此，探讨商业猪场条件下，低氮排放日粮中生长猪氨基酸(含硫氨基酸、苏氨酸、色氨酸)的需要量，并对获得的氨基酸需要量模型进行验证，成为目前低氮排放日粮发展的重中之重，以期为低氮排放日粮的应用提供必要的理论和实践依据。
发明内容
[0006] 本发明的目的是提供一种生长猪低氮排放日粮。
[0007] 本发明所提供的生长猪低氮排放日粮，含有蛋白质、赖氨酸、色氨酸、苏氨酸和含硫氨基酸；其中，所述低氮排放日粮的净能含量为2.30-2.45Mcal/kg，蛋白质含量为11.5-15.5％；所述低氮排放日粮中标准回肠可消化赖氨酸含量为0.9-1.02％，标准回肠可消化色氨酸与赖氨酸的比例不低于0.23，标准回肠可消化苏氨酸与赖氨酸的比例不低于
0.66，标准回肠可消化含硫氨基酸与标准回肠可消化赖氨酸的比例不低于0.61。
0.66，标准回肠可消化含硫氨基酸与标准回肠可消化赖氨酸的比例不低于0.61。
[0008] 所述低氮排放日粮可作为20～50kg生长猪的日粮使用。
[0009] 本发明通过降低《猪饲养标准》(2004)中日粮配方中的粗蛋白水平，补充合成氨基酸，提高动物中氨基酸的吸收率，降低饲料成本，提高养猪业的经济效益；降低环境中氮的排放，可在一定程度上缓解蛋白质饲料缺乏的问题；且不影响生长猪的增重和其饲料转化率。饲喂试验表明，生长猪日粮中降低4个百分点蛋白水平，标准回肠可消化含硫氨基酸、苏氨酸、色氨酸与赖氨酸比例为0.61、0.66和0.23时，生长猪可以获得与正常蛋白日粮处理相似的生产性能，并且可以提高瘦肉率，提高日粮中氮的利用效率，极大的减少氮的排放。本发明提供的低氮排放日粮在一定程度上还有改善生长猪肠道健康状态的趋势。
附图说明
[0010] 图1为日粮标准回肠可消化色氨酸与赖氨酸比例与血清尿素氮折线和二次趋势图。
[0011] 图2为日粮标准回肠可消化色氨酸与赖氨酸比例与平均日增重的折线和二次趋势图。
[0012] 图3为日粮标准回肠可消化色氨酸与赖氨酸比例与增重耗料比的折线和二次趋势图。
[0013] 图4为日粮标准回肠可消化苏氨酸与赖氨酸比例与平均日增重的折线和二次趋势图。
[0014] 图5为日粮标准回肠可消化苏氨酸与赖氨酸比例与增重耗料比的折线和二次趋势图。
[0015] 图6为日粮标准回肠可消化苏氨酸与赖氨酸比例与血清尿素氮折线和二次趋势图。
[0016] 图7为日粮标准回肠可消化含硫氨基酸与赖氨酸比例与平均日增重的折线和二次趋势图。
[0017] 图8为日粮标准回肠可消化含硫氨基酸与赖氨酸比例与增重耗料比的折线和二次趋势图。
[0018] 图9为日粮标准回肠可消化含硫氨基酸与赖氨酸比例与血清尿素氮折线和二次趋势图。
具体实施方式
[0019] 下面通过具体实施例对本发明进行说明，但本发明并不局限于此。
[0020] 下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。
[0021] 实施例1、验证低氮排放日粮条件下生长猪标准回肠可消化色氨酸与赖氨酸最佳比例
[0022] 1.1试验动物与试验日粮
[0023] 试验采用完全随机设计。试验一选择平均初始体重为25.08±2.72kg的杜洛克×长白×大白三元健康生长猪180头，按体重相近和遗传基础相似的原则，随机分为3个处理，每个处理6个重复(栏)，每栏10头猪，公、母各半，试验期为35天。试验二则选择平均初始体重为24.74±2.38kg的杜洛克×长白×大白三元健康生长猪300头，分为5个处理，每个处理6个重复(栏)，每栏10头猪，试验期为35天。
[0024] 试验一对照组日粮粗蛋白质水平参照《猪饲养标准》(2004)推荐值设计，低氮排放日粮组A组SID Lys(标准回肠可消化赖氨酸率)为1.02与对照组一致，低氮排放日粮B组SID Lys为0.90。试验二日粮均为低氮排放日粮，日粮蛋白水平在《猪饲养标准》(2004)推荐的日粮蛋白水平上下调4个百分点，试验组日粮净能水平均为2.40Mcal/kg，SID Lys为0.90，以日粮标准回肠可消化氨基酸含量为基础补充蛋氨酸、苏氨酸、缬氨酸和异亮氨酸。
其它养分均满足或超过《猪饲养标准》(2004)推荐值。日粮配方和营养水平见表1。
其它养分均满足或超过《猪饲养标准》(2004)推荐值。日粮配方和营养水平见表1。
[0025] 1.2饲养管理
[0026] 试验在国家饲料工程技术研究中心试验猪场进行。试验猪饲养在封闭式猪舍内，水泥地面，通风良好。试验期间自由采食和饮水，按猪场常规程序进行消毒、驱虫和免疫。
[0027] 1.3检测指标与方法
[0028] (1)日粮成分
[0029] 日粮干物质、粗蛋白质、钙和总磷分别参照中华人民共和国国家标准GB/T6435-1986、GB/T6432-1994、GB/T6436-2002和GB/T6437-2002推荐的方法测定。
[0030] 日粮样品经40目粉碎后，分别在110℃下6mol/L盐酸水解24h和0℃下过甲酸氧化16h后经6mol/L盐酸水解24h用氨基酸自动分析仪(日立L-8800，日本)测定15种氨基酸和含硫氨基酸；用4mol/L氢氧化钠在110℃下水解22h后，使用高效液相色谱仪(岛津LC-10A，日本)测定色氨酸。
[0031] (2)生长性能
[0032] 分别于每个试验开始和结束时早晨空腹个体称重，以重复(栏)为单位记录耗料量，计算平均日增重、平均日采食量和增重耗料比。
[0033] (3)血液指标
[0034] 在每个试验结束时，每圈按耳标固定2头猪(每个处理12头猪)，用真空采血管分别从前腔静脉采血9mL，真空采血后，室温下倾斜放置30min，3,500r/min离心10min，分离血清，置于-20℃冷冻保存。
[0035] 采用试剂盒(C013-1，南京建成生物科技有限公司，中国)方法测定血清尿素氮。
[0036] 采用经典的茚三酮柱后衍生法原理应用氨基酸分析仪(Sykam S-433D，德国)锂柱系统测定血清氨基酸。取0.5mL血清于高速离心机专用离心试管中，加入1.5mL磺基水杨酸(10％)的锂缓冲溶液，充分振荡摇匀，置于0℃冰浴中存放10min，取出后离心，4℃下50,000r/min离心30min，取上清液，通过锂离子交换色谱柱并与茚三酮130℃下进行衍生反应，测定血清游离氨基酸浓度(Jones和Gilligan，1983，J.Chromatogr.266：471-482.)[0037] 1.4统计分析
[0038] 试验数据用Excel软件进行初步处理后，采用SAS 8.2的一般线性模型(general linear model，GLM)模型统计分析(SAS，2001)。试验一采用contrast程序对蛋白水平进行分析，P＜0.05作为差异显著并标注，试验二依据平均日增重、增重耗料比和血清尿素氮数据，利用折线模型和曲线模型求出最佳标准回肠可消化色氨酸与赖氨酸比例。
[0039] 1.5结果
[0040] 1.5.1日粮蛋白水平和赖氨酸水平对生长猪生长性能的影响
[0041] 试验一的结果表明(见表2)，与高蛋白的对照组相比，采食SID Lys水平为1.02处理的平均日增重、增重耗料比差异不显著(P＞0.05)，日粮蛋白质水平不影响平均日增重和增重耗料比。低氮排放B处理组的日增重、增重耗料比与另外两个处理组相比差异显著(P＜0.05)，三个不同处理之间平均日采食量差异不显著(P＞0.05)。试验一对照组日粮SID Lys为1.02，这一水平设置依据本课题组先前研究结果(鲁宁，2010，中国农业大学硕士学位论文)，生长猪采食日粮SID Lys水平为0.90处理组平均日增重和平均日采食量与SID Lys水平1.02处理组相比显著下降。Guzik等(2005，J Anim Sci.83：1303-1311)研究指出，日粮SID Lys水平为0.85对于商业猪场条件下20～50kg生长猪而言是缺乏的。这表明本研究中SID Lys水平为0.90时研究色氨酸需要量试验是合理的。此外，对于生长猪而言日粮蛋白质水平下降4个百分点补充合成氨基酸日粮不影响猪的生长性能，但是下调日粮赖氨酸水平生长性能下降显著。
[0042] 1.5.2低氮排放日粮不同标准回肠可消化色氨酸与赖氨酸比例对猪生长性能的影响
[0043] 随着低氮排放日粮的不断深入研究，在配制猪日粮时消化能体系缺点也逐渐暴露出来。主要原因是在配制低氮排放日粮(玉米-豆粕型)时，通常用玉米代替部分豆粕，虽然它们的消化能(DE)和代谢能(ME)非常接近，但玉米的净能含量比豆粕高0.7Mcal/kg，如果继续采用消化能或者代谢能体系则低估了日粮的能量利用效率，从而出现饲喂低蛋白日粮，猪胴体脂肪含量增加趋势的报道(Hahn等，1995，J.Anim.Sci.73：773-784；Jin等，1998，Asian-Aust.J.Anim.Sci.11：1-7)。净能体系是唯一在相同基础上表达能量需要和日粮能量价值的体系，采用净能体系配制低氮排放日粮才能更好地满足猪的生长需要。Le Bellego等(2002)指出，低氮排放日粮应用净能体系来配制，可以在一定程度上减少低氮排放日粮中的能量含量，避免能量的相对过剩，才能更好的满足猪的实际生长所需要的能值。本实验室先前的研究结果已经确定生长猪的最佳净能需要量为2.40Mcal/kg(易学武，
2009，中国农业大学博士学位论文)。
2009，中国农业大学博士学位论文)。
[0044] 试验二结果显示(表3)，低氮排放日粮中，随着日粮中SID Trp∶Lys比例的升高，生长猪生产性能差异显著(P＜0.05)，平均日增重、平均日采食量和增重耗料比随着SID Trp∶Lys比例的升高而增加(线性，P＜0.05；二次，P＜0.05)。SID Trp∶Lys比例高于0.16处理组的平均日增重、平均日采食量、增重耗料比高于SID Trp∶Lys为0.13和0.16处理组(P＜0.05)。
[0045] 1.5.3低氮排放日粮不同标准回肠可消化色氨酸与赖氨酸比例对猪血清尿素氮和游离氨基酸的影响
[0046] 低氮排放日粮不同SID Trp∶Lys比例对生长猪血清尿素氮和氨基酸含量的影响见表4。随着日粮中SID Trp∶Lys比例的升高，血清尿素氮含量显著下降(线性，P＜0.05；二次，P＜0.05)。血清色氨酸含量不同处理组件差异显著(P＜0.05)，血清色氨酸含量随着SID Trp∶Lys线性增加(P＜0.05)，二次效应与此一致(P＜0.05)。血清尿素氮水平与蛋白质代谢有密切关系，在日粮蛋白质含量稳定的情况下，血清尿素氮含量下降是蛋白质利用效率增加的结果。本试验中随着日粮SID Trp∶Lys比例的升高血清尿素氮水平呈现显著下降，这说明生长猪体内氨基酸利用率升高，血清尿素氮的变化及其与生长猪生产性能的变化相对应。血清支链氨基酸(亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸)和苯丙氨酸不同日粮处理之间差异显著(P＜0.05)，血清缬氨酸、苯丙氨酸和酪氨酸随SID Trp∶Lys比例上升呈现线性增加(P＜0.05)，血清缬氨酸浓度呈二次增加(P＜0.05)。色氨酸与大分子中性氨基酸和支链氨基酸竞争通过血脑屏障，色氨酸可能影响下丘脑五羟色胺的合成(Harper等，1983；Langer等，2000)。Henry等(1992)观察到日粮中色氨酸与其它大分子中性氨基酸比例由2.50％下降到1.78％时，生长猪平均日采食量下降了将近20％。本次试验为降低色氨酸与大分子中性氨基酸和支链氨基酸竞争的影响，日粮中避免了大分子中性氨基酸和支链氨基酸的过量，试验日粮中大分子中心氨基酸和支链氨基酸浓度保持一致。
[0047] 1.5.4生长猪低氮排放日粮标准回肠可消化最佳色氨酸与赖氨酸比例的折线模型和回归分析
[0048] 用于估测营养需要量的统计方法影响需要量的估测值，应用线性模型统计的结果往往小于二次回归模型估测的最佳营养需要量值。Eder等(2003)指出二次回归模型过高而不是过低估测了生长猪色氨酸需要量值。Burgoon等(1992)利用线性折线模型估测出了一个最低色氨酸需要量值。关于营养需要量估测的最佳统计模型一致存在争论(Robbins等，1979；Coma等，1995)。Pomar等(2003)论证了线性折线模型适用于单个动物，二次回归模型适用于群体动物。本次试验中，为减少统计模型带来的误差，最佳SID Trp∶Lys比例确定依据是线性模型和二次回归模型估测值的平均值。
[0049] 图1得到的是日粮标准回肠可消化色氨酸与赖氨酸比例与血清尿素氮的折线模型和二次回归趋势图，可以看出血清尿素氮最低浓度折点是日粮SID Trp∶Lys比例为2
21.4％时(平台值为117，R ＝0.87)，日粮SID Trp∶Lys比例二次最小数值的拐点为日
2
粮SID Trp∶Lys为24.0％(Y＝0.25(SID Trp∶Lys)-11.72(SID Trp∶Lys)+252.58，
2
R ＝0.83)。
21.4％时(平台值为117，R ＝0.87)，日粮SID Trp∶Lys比例二次最小数值的拐点为日
2
粮SID Trp∶Lys为24.0％(Y＝0.25(SID Trp∶Lys)-11.72(SID Trp∶Lys)+252.58，
2
R ＝0.83)。
[0050] 图2得到的是日粮SID Trp∶Lys比例与平均日增重的折线模型和二次回归趋势图，从图2可以看出，最小的折点是日粮SID Trp∶Lys比例为20.5％(平台值为701，2
R ＝0.86)，日粮SID Trp∶Lys比例二次最大数值的转折点为24.4％(Y＝-1.53(SID
2 2
Trp∶Lys)+69.37(SID Trp∶Lys)-88.54，R ＝0.82)。图3得到的是日粮标准回肠可消化色氨酸与赖氨酸比例与增重耗料比的折线模型和二次回归趋势图，可以得出最小的折
2
点是日粮SID Trp∶Lys为20.5％(平台值是0.455，R ＝0.84)，日粮SID Trp∶Lys
2
比例二次最大数值的转折点为24.5％(Y＝-0.0003(SIDTrp∶Lys)+0.0159(SID
2
Trp∶Lys)+0.2608，R ＝0.81)。综合上述结果可得出，低氮排放日粮条件下生长猪标准回肠可消化色氨酸与赖氨酸比例不能低于23％((20.5％+24.4％+24.5％)/3)。
R ＝0.86)，日粮SID Trp∶Lys比例二次最大数值的转折点为24.4％(Y＝-1.53(SID
2 2
Trp∶Lys)+69.37(SID Trp∶Lys)-88.54，R ＝0.82)。图3得到的是日粮标准回肠可消化色氨酸与赖氨酸比例与增重耗料比的折线模型和二次回归趋势图，可以得出最小的折
2
点是日粮SID Trp∶Lys为20.5％(平台值是0.455，R ＝0.84)，日粮SID Trp∶Lys
2
比例二次最大数值的转折点为24.5％(Y＝-0.0003(SIDTrp∶Lys)+0.0159(SID
2
Trp∶Lys)+0.2608，R ＝0.81)。综合上述结果可得出，低氮排放日粮条件下生长猪标准回肠可消化色氨酸与赖氨酸比例不能低于23％((20.5％+24.4％+24.5％)/3)。
[0051] 表1试验一与试验二日粮组成(饲喂基础)1
[0052]
[0053]
[0054] 注：1试验二以试验一低氮排放日粮B组为基础，试验二中其它日粮处理以合成色氨酸替代等量麸皮配制而成。
[0055] 2预混料为每千克日粮提供：维生素A，5,512IU；维生素D3，2,200IU；维生素E，64IU；维生素K3，2.2mg；维生素B12，27.6μg；核黄素，5.5mg；D-泛酸，13.8mg；烟酸，30.3mg；氯化胆碱，551mg；锰，40mg；铁，100mg；锌，100mg；铜，100mg；碘，0.3mg；硒，0.3mg。
[0056] 3净能按照Noblet等(1994，J.Anim.Sci.72：648-657)的方程计算得到。
[0057] 4采用INRA(2002，INRA Editions et AFZ，Paris，France.)氨基酸回肠标准可消化系数推算回肠标准氨基酸含量.
[0058] 表2日粮不同蛋白质和标准回肠可消化赖氨酸水平对生长猪生长性能的影响(试验一)
[0059]
[0060] 注：1平均标准误差。
[0061] 2处理是指所有试验处理组的效应，线性和二次指日粮不同标准回肠可消化赖氨酸水平的效应；同行肩标不同小写字母表示差异显著(P＜0.05)。
[0062] 表3低氮排放日粮条件下标准回肠可消化色氨酸与赖氨酸的不同比例对生长猪生长性能的影响(试验二)
[0063]
[0064] 注：1平均标准误。
[0065] 2处理是指所有试验处理组的效应，线性和二次指日粮标准回肠可消化色氨酸与赖氨酸不同比例的效应；同行肩标不同小写字母表示差异显著(P＜0.05)。
[0066] 表4低氮排放日粮标准回肠可消化色氨酸与赖氨酸不同比例对生长猪血清尿素氮和氨基酸含量的影响(试验二)1
[0067]
[0068] 注：1数值为每个处理组6个观察数据的平均值。同行肩标不同表示差异显著(P＜0.05)。2平均标准误。
[0069] 1.6小结
[0070] 在25～50kg生长猪，日粮蛋白质水平降低4个百分点，补充合适的必需氨基酸后，生长性能不受影响，赖氨酸水平显著影响猪的生长性能。
[0071] 采用折线模型和二次回归模型，以血清尿素氮、平均日增重和增重耗料比为衡量指标，得到生长猪低氮排放日粮条件下标准回肠可消化色氨酸与赖氨酸比例不宜低于23％。
[0072] 实施例2、验证了低氮排放日粮条件下生长猪标准回肠可消化苏氨酸与赖氨酸最佳比例
[0073] 1.1试验动物与试验日粮
[0074] 试验一选择平均初始体重为22.14±1.89kg的杜洛克×长白×大白三元健康生长猪144头，按体重相近和遗传基础相似的原则，随机分为3个处理，每个处理6个重复，每个重复(栏)8头猪，试验期为35d。试验二选择平均初始体重为22.65±2.64kg的杜洛克×长白×大白三元杂交生长猪300头，按体重相近和遗传基础相似的原则，随机分为5个处理，每个处理6个重复，每个重复(栏)10头猪，公、母各半，试验期为39d。
[0075] 试验一对照组日粮参照《猪饲养标准》(2004)推荐标准设计，试验组日粮均为低氮排放日粮，蛋白水平在对照组日粮蛋白质水平基础上降低4个百分点，以日粮标准回肠可消化氨基酸为基础补充赖氨酸、蛋氨酸、色氨酸、缬氨酸和异亮氨酸满足《猪饲养标准》(2004)推荐值，其余养分满足或超过《猪饲养标准》(2004)推荐值，低氮A组日粮SID Lys与对照组一致为1.02，低氮B组日粮SID Lys为0.90，试验一与试验二日粮净能水平统一为2.40Mcal/kg。试验二日粮标准回肠可消化赖氨酸含量设定依据试验一的结果(SID Lys为
0.90)，试验日粮SID Thr∶Lys比例分别为55、60、65、70和75％，日粮中蛋氨酸、色氨酸、缬氨酸和异亮氨酸按照理想氨基酸模型(NRC(1998)Natl.Acad.Press，Washington，DC.)的105％添加。试验日粮均为粉料。试验一、二的日粮配方和营养水平见表5。
0.90)，试验日粮SID Thr∶Lys比例分别为55、60、65、70和75％，日粮中蛋氨酸、色氨酸、缬氨酸和异亮氨酸按照理想氨基酸模型(NRC(1998)Natl.Acad.Press，Washington，DC.)的105％添加。试验日粮均为粉料。试验一、二的日粮配方和营养水平见表5。
[0076] 1.2饲养管理 同实施例1中1.2
[0077] 1.3检测指标与方法
[0078] (1)日粮成分 日粮干物质、粗蛋白质、钙、总磷和氨基酸的测定同实施例1中1.3。
[0079] (2)生长性能 分别于每个试验开始和结束时早晨空腹个体称重，以重复(栏)为单位记录耗料量，计算平均日增重、平均日采食量和增重耗料比。
[0080] (3)血液指标 在每个试验结束时，每圈按耳标固定2头猪(每个处理12头猪)，用真空采血管分别从前腔静脉采血9mL，真空采血后，室温下倾斜放置30min，3,500r/min离心10min，分离血清，置于-20℃冷冻保存。血清尿素氮和游离氨基酸含量的测定同试验实施例1中1.3中(3)。
[0081] 1.4统计分析 试验数据用Excel软件进行初步处理后，采用SAS 8.2的一般线性模型(general linear model，GLM)模型统计分析(SAS，2001)。在所有处理的方差分析中，试验单位为栏，试验一采用contrast程序对蛋白水平进行分析，P＜0.05作为差异显著并标注。利用线性和二次曲线多项式评估不同SID Thr∶Lys比例对平均日增重、增重耗料比、血清尿素氮和游离氨基酸的影响。依据平均日增重、增重耗料比和血清尿素氮数据，利用折线模型和曲线模型求出最佳标准回肠可消化苏氨酸与赖氨酸比例(Robbins等，2006，J.Anim.Sci.84(E Suppl.)：E155-E165.)。
[0082] 1.5结果
[0083] 1.5.1蛋白水平和标准回肠可消化赖氨酸水平对生长猪生长性能和血清尿素氮的影响
[0084] 整个试验期间，猪群健康状况良好。日粮蛋白质水平和标准回肠可消化赖氨酸水平对生长猪生长性能、血清尿素氮含量的影响见表6。如表所示，日粮蛋白质降低4个百分点并补充合成氨基酸与对照组一致，对生长猪平均日增重和增重耗料比无显著影响(P＞0.05)，日粮中标准回肠可消化赖氨酸水平由1.02下降至0.90，生长猪的平均日增重、增重耗料比显著下降(P＞0.05)，三个不同日粮处理之间生长猪的平均日采食量差异不显著(P＞0.05)。不同日粮处理之间血清尿素氮水平差异显著(P＜0.05)，日粮粗蛋白质水平下降4个百分点血清尿素氮水平显著下降(P＜0.05)，低氮排放日粮中标准回肠可消化赖氨酸水平处理组间血清尿素氮水平差异不显著(P＞0.05)。试验日粮蛋白质水平减低4个百分点后，血清尿素氮水平显著下降，造成这一结果的原因，一方面是猪采食低氮排放日粮对于日粮中氮的相对利用率提高，另一方面是低排放日粮中总氨基酸水平下降所致。
[0085] 1.5.2低氮排放标准回肠可消化苏氨酸与赖氨酸比例对生长猪生长性能、血清尿素氮和血清氨基酸含量的影响
[0086] 本研究是低氮排放日粮条件下20～50生长猪理想氨基酸模型研究工作的一部分。猪的实际生产日粮中，苏氨酸通常是位于赖氨酸之后是第二或者第三限制性氨基酸，苏氨酸在动物体内不能够合成，需要在日粮中平衡。先前已有诸多关于猪苏氨酸需要量研究的报道(NRC，1998，10th rev.ed.Natl.Acad.Press，Washington，DC)，但是鲜有低氮排放日粮中标准回肠可消化苏氨酸与赖氨酸比例的研究。低氮排放日粮SID Thr∶Lys不同比例对生长猪生长性能、血清尿素氮和氨基酸含量的影响见表7和8。
[0087] (1)生长性能 在试验四的低氮排放日粮中(见表7)，随着日粮中SID Thr∶Lys比例的升高，改善了生长猪的平均日增重(线性，P＜0.05；二次，P＜0.05)，而苏氨酸水平对平均采食量无显著影响(P＞0.05)，进而改善了饲料转化率(线性，P＜0.05；二次，P＜0.05)。以SID Thr∶Lys比例为70％的处理组平均日增重、增重耗料比最高。
[0088] (2)血清尿素氮和血清氨基酸含量 低氮排放日粮中，随SID Thr∶Lys比例的升高，不同处理组间血清尿素氮水平差异显著(P＜0.05)，呈现减少的趋势(线性，P＜0.05；二次，P＜0.05)，血清中苏氨酸浓度随SID Thr∶Lys比例的升高显著上升(线性，P＜0.05；二次，P＜0.05)，胱氨酸浓度呈现线性升高的趋势(P＜0.05)，血清赖氨酸、蛋氨酸和甘氨酸浓度随SID Thr∶Lys比例增加线性降低(P＜0.05)，血清中其它氨基酸浓度差异不显著(P＞0.05)。试验二中日粮苏氨酸水平影响了生长猪血清中甘氨酸的浓度显著上升，这是由于在动物体内苏氨酸能够转化成甘氨酸所致，粮中的苏氨酸至少有30％转化成甘氨酸，占体内整个甘氨酸合成的10％～50％。血清中赖氨酸、蛋氨酸浓度随日粮苏氨酸水平的升高而增加，这表明日粮苏氨酸浓度的上升，日粮中氨基酸更趋平衡，生长猪体内氨基酸的利用率上升，进入氨基酸代谢池内的氨基酸量减少，这与血清尿素氮反应的结果相一致。
[0089] 1.5.3生长猪低氮排放日粮最佳标准回肠可消化苏氨酸与赖氨酸比例的折线模型和回归分析
[0090] (1)以平均日增重和增重耗料比进行折线模型和回归分析
[0091] 对试验二的数据进行分析，图4得到的是日粮标准回肠可消化苏氨酸与赖氨酸比例与平均日增重的折线模型和二次回归趋势图。从图4可以看出，平均日增重对应的折2
点为日粮标准回肠可消化苏氨酸与赖氨酸比例为68.03(平台值为755.5，R ＝0.87)，日粮标准回肠可消化苏氨酸与赖氨酸比例二次最大数值的转折点为72.96(Y＝-0.23(SID
2 2
Thr∶Lys)+33.63(SID Thr∶Lys)-466.71，R ＝0.90)。图5得到的是日粮标准回肠可消化苏氨酸与赖氨酸比例与增重耗料比的折线模型和二次回归趋势图，可以看出，最小的折
2
点为日粮标准回肠可消化苏氨酸与赖氨酸比例为66.73(平台值为0.456，R ＝0.85)，日粮标准回肠可消化苏氨酸与赖氨酸比例二次最大数值的转折点为70.19(Y＝-0.00015(SID
2 2
Thr∶Lys)+0.02091(SIDThr∶Lys)-0.27172，R ＝0.88)。
点为日粮标准回肠可消化苏氨酸与赖氨酸比例为68.03(平台值为755.5，R ＝0.87)，日粮标准回肠可消化苏氨酸与赖氨酸比例二次最大数值的转折点为72.96(Y＝-0.23(SID
2 2
Thr∶Lys)+33.63(SID Thr∶Lys)-466.71，R ＝0.90)。图5得到的是日粮标准回肠可消化苏氨酸与赖氨酸比例与增重耗料比的折线模型和二次回归趋势图，可以看出，最小的折
2
点为日粮标准回肠可消化苏氨酸与赖氨酸比例为66.73(平台值为0.456，R ＝0.85)，日粮标准回肠可消化苏氨酸与赖氨酸比例二次最大数值的转折点为70.19(Y＝-0.00015(SID
2 2
Thr∶Lys)+0.02091(SIDThr∶Lys)-0.27172，R ＝0.88)。
[0092] (2)以血清尿素氮进行折线模型和回归分析
[0093] 图6得到的是日粮标准回肠可消化苏氨酸与赖氨酸比例与血清尿素氮的折线模型和二次回归趋势。从图6可以看出，最小的折点为日粮标准回肠可消化苏氨酸2
与赖氨酸比例为58.75(平台值为3.02，R ＝0.83)，日粮标准回肠可消化苏氨酸与赖
2
氨酸比例二次最大数值的转析点为64.65(Y＝0.0138(SID Thr∶Lys)-1.8503(SID
2
Thr∶Lys)+64.7297，R ＝0.85)。
与赖氨酸比例为58.75(平台值为3.02，R ＝0.83)，日粮标准回肠可消化苏氨酸与赖
2
氨酸比例二次最大数值的转析点为64.65(Y＝0.0138(SID Thr∶Lys)-1.8503(SID
2
Thr∶Lys)+64.7297，R ＝0.85)。
[0094] 表5试验三与试验四日粮组成(饲喂基础)
[0095]
[0096] 1试验四以试验三低氮排放日粮B组为基础，试验四中其它日粮处理以合成苏氨酸替代等量麸皮配制而成。
[0097] 2预混料为每千克日粮提供：维生素A，5,512IU；维生素D3，2,200IU；维生素E，64IU；维生素K3，2.2mg；维生素B12，27.6μg；核黄素，5.5mg；D-泛酸，13.8mg；烟酸，
30.3mg；氯化胆碱，551mg；锰，40mg；铁，100mg；锌，100mg；铜，100mg；碘，0.3mg；硒，0.3mg。
30.3mg；氯化胆碱，551mg；锰，40mg；铁，100mg；锌，100mg；铜，100mg；碘，0.3mg；硒，0.3mg。
[0098] 3净能按照Noblet等(1994)的方程计算得到。
[0099] 4采用INRA(2002)氨基酸回肠标准可消化系数推算回肠标准氨基酸含量。
[0100] 表6日粮不同蛋白质和标准回肠可消化赖氨酸水平对生长猪生长性能的影响(试验三)
[0101]
[0102] 注：1平均标准误。
[0103] 2处理是指所有试验处理组的效应，线性和二次指日粮标准回肠可消化苏氨酸与赖氨酸不同比例的效应；同行肩标不同小写字母表示差异显著(P＜0.05)。
[0104] 表7低氮排放日粮条件下标准回肠可消化苏氨酸与赖氨酸的不同比例对生长猪生长性能影响(试验四)
[0105]
[0106] 注：1平均标准误。
[0107] 2处理是指所有试验处理组的效应，线性和二次指日粮标准回肠可消化苏氨酸与赖氨酸不同比例的效应；同行肩标不同小写字母表示差异显著(P＜0.05)。
[0108] 表8低氮排放日粮标准回肠可消化苏氨酸与赖氨酸不同比例对生长猪血清尿素氮和氨基酸含量的影响1
[0109]
[0110] 注：1数值为每个处理组6个观察数据的平均值。同行肩标不同表示差异显著(P＜0.05)。
[0111] 2平均标准误。
[0112] 1.6小结
[0113] (1)在20～50kg的生长猪日粮中，降低4个百分点的蛋白水平，补充合适的必需氨基酸后，并不影响猪的生长性能，但是生长性能受日粮标准回肠可消化赖氨酸的影响。
[0114] (2)采用折线模型和二次回归模型分析，以平均日增重、增重耗料比作为评价指标时，得到生长猪低氮排放日粮最佳标准回肠可消化苏氨酸与赖氨酸比例是69.54％。以血清尿素氮作为评价指标时，得到生长猪最佳标准回肠可消化苏氨酸与赖氨酸比例是61.7％。综合生长性能和血清尿素氮的分析，生长猪低氮排放日粮中标准回肠可消化苏氨酸与赖氨酸比例不能低于65.62％。
[0115] 实施例3、验证低氮排放日粮条件下生长猪标准回肠可消化含硫氨基酸与赖氨酸最佳比例
[0116] 1.1材料与方法
[0117] 1.1.1试验动物与试验日粮
[0118] 试验采用单因子试验设计。选择平均初始体重为25.67±2.74kg的杜洛克×长白×大白三元健康育肥猪360头，按体重相近和遗传基础相似的原则，随机分为5个处理，每个处理6个重复，每个重复(栏)12头猪，公、母各半，试验期为25～50kg阶段。
[0119] 试验日粮均为低氮排放日粮，蛋白水平在《猪饲养标准》(2004)推荐的生长猪日粮粗蛋白水平基础下调4个百分点，日粮净能水平统一设置为2.40Mcal/kg，SID Lys水平均为0.90，苏氨酸、色氨酸、缬氨酸和异亮氨酸按照理想氨基酸模型的105％添加。其它营养素满足或超过《猪饲养标准》(2004)推荐量，试验日粮为粉料，日粮组成见表9，日粮营养水平见表9。
[0120] 1.1.2饲养管理
[0121] 试验在国家饲料工程技术研究中心试验猪场进行。试验猪饲养在半开放式猪舍内，水泥地面，通风良好。试验期间每天上午和下午各加料1次，自由采食和饮水，按猪场常规程序进行消毒、驱虫和免疫。
[0122] 1.1.3检测指标与方法
[0123] (1)日粮成分 日粮干物质、粗蛋白质、钙、总磷和氨基酸的测定同实施例1中1.3。
[0124] (2)生长性能 分别于每个试验开始和结束时早晨空腹个体称重，以重复(栏)为单位记录耗料量，计算平均日增重、平均日采食量和增重耗料比。
[0125] (3)血液指标 在每个试验结束时，每圈按耳标固定2头猪(每个处理12头猪)，用真空采血管分别从前腔静脉采血9mL，真空采血后，室温下倾斜放置30min，3,500r/min离心10min，分离血清，置于-20℃冷冻保存。
[0126] 血清尿素氮和游离氨基酸含量的测定同试验实施例1中1.3中(3)。
[0127] 1.2统计分析
[0128] 试验数据用Excel软件进行初步处理后，采用SAS 8.2的GLM模型统计分析(SAS，2001)。试验单位为栏。P＜0.05作为差异显著并标注。利用线性和二次曲线多项式评估不同SID TSAA∶Lys比例对平均日增重、增重耗料比、血清尿素氮和游离氨基酸的影响。依据平均日增重、增重耗料比和血清尿素氮数据，利用折线模型和曲线模型求出最佳标准回肠可消化含硫氨基酸与赖氨酸比例(Robbins等，2006，J.Anim.Sci.84(E Suppl.)：
E155-E165)。
E155-E165)。
[0129] 1.3结果
[0130] 考虑到日粮组成，对于生长猪而言蛋氨酸通常是日粮中第二或第三限制性氨基酸，因此猪商业日粮配方中通常会添加工业合成蛋氨酸。低氮排放日粮中由于豆粕用量的大幅度减少，必须补充足够的合成氨基酸以满足生长需要，因此，低氮日粮条件下确定最佳的蛋氨酸需要量，能够在满足生长性能的前提下，降低配方成本以获得更好的经济效益。
[0131] 1.3.1日粮标准回肠可消化含硫氨基酸与赖氨酸比例对生长猪生长性能的影响[0132] 整个试验期间，猪群健康状况良好。试验各组初始重差异不显著，标准回肠可消化含硫氨基酸与赖氨酸比例对生长猪生长性能影响见表10。
[0133] 生长猪平均日增重、增重耗料比随日粮标准回肠可消化含硫氨基酸与赖氨酸比例的升高显著增长(线性，P＜0.05；二次，P＜0.05)，平均日采食量没有受日粮标准回肠可消化含硫氨基酸与赖氨酸比例的影响，不同日粮处理之间差异不显著(P＞0.05)，生长性能以标准回肠可消化含硫氨基酸与赖氨酸比例为65％处理组最佳。
[0134] 1.3.2日粮标准回肠可消化含硫氨基酸与赖氨酸比例对生长猪血清尿素氮和游离氨基酸含量的影响
[0135] 低氮排放日粮标准回肠可消化含硫氨基酸与赖氨酸不同比例对生长猪血清尿素氮和游离氨基酸含量的影响见表11。
[0136] 不同日粮处理之间，生长猪血清尿素氮浓度差异显著(P＜0.05)，并呈现随日粮标准回肠可消化含硫氨基酸与赖氨酸比例升高而二次减少的趋势(P＜0.05)。血清中蛋氨酸浓度随日粮标准回肠可消化含硫氨基酸与赖氨酸比例的升高而增加(线性，P＜0.05；二次，P＜0.05)，胱氨酸浓度随日粮标准回肠可消化含硫氨基酸与赖氨酸比例的增加而线性增加(P＜0.05)，血清赖氨酸浓度随日粮标准可消化含硫氨基酸与赖氨酸比例的升高而减少(线性，P＜0.05；二次，P＜0.05)，其它氨基酸浓度不受日粮标准回肠可消化含硫氨基酸与赖氨酸比例的影响。
[0137] 血清尿素氮是氨基酸需要量试验的一个非常重要的生物学反应指标。Lewis等(1980)研究指出，随着氨基酸水平的提高，血清尿素氮的浓度持续降低，直到限制性氨基酸超过需要量。血清尿素氮是衡量机体蛋白质合成状况的重要反应指标，并且血清尿素氮水平与生长性能之间存在着内在联系。对于现代高瘦肉型猪，绝大部分增重来源于瘦肉沉积，由于日粮中氨基酸之间的比例不平衡，导致蛋白质合成受限，代谢过程中产生的过量氨基酸被分解为代谢终产物胺和二氧化碳，胺进入机体氮代谢池，哺乳动物体内脲的代谢状况可以通过血清尿素氮水平反映出来。低氮排放日粮中含硫氨基酸与赖氨酸比例由最佳值上升或降低，血清尿素氮水平上升，意味着氨基酸利用效率降低、蛋白质合成受限。本试验中，当最佳生产性能出现时对应着血清尿素氮水平最低，因此运用适宜的统计模型对这些生物学反应指标进行统计分析，估测最佳含硫氨基酸与赖氨酸比例是合理的。
[0138] 1.3.3生长猪低氮排放日粮最佳标准回肠可消化苏氨酸与赖氨酸比例的折线模型和回归分析
[0139] (1)以平均日增重和增重耗料比进行折线模型和回归分析
[0140] 对试验五的数据进行分析，图7得到的是日粮标准回肠可消化含硫氨酸与赖氨酸比例与生长猪平均日增重的折线模型和二次回归趋势。从图7可以看出，平均日增重对应的折线模型折点为日粮标准回肠可消化含硫氨酸与赖氨酸比例为60.62(平台值为2
758，R ＝0.94)，日粮标准回肠可消化含硫氨酸与赖氨酸比例二次回归转折点为63.77(Y
2 2
＝-0.28(SID TSAA∶Lys)+35.71(SID TSAA∶Lys)-413.26，R ＝0.98)。图8得到的是日粮标准回肠可消化含硫氨酸与赖氨酸比例与增重耗料比的折线模型和二次回归趋势图。
从图8可以看出，增重耗料比对应的折线模型最小的拐点为日粮标准回肠可消化苏氨酸与
2
赖氨酸比例为60.36(平台值为0.461，R ＝0.95)，日粮标准回肠可消化含硫氨基酸氨酸
2
与赖氨酸比例，二次回归曲线转折点为62.39(Y＝-0.0002(SID TSAA∶Lys)+0.0249(SID
2
TSAA∶Lys)-0.3247，R ＝0.98)。
758，R ＝0.94)，日粮标准回肠可消化含硫氨酸与赖氨酸比例二次回归转折点为63.77(Y
2 2
＝-0.28(SID TSAA∶Lys)+35.71(SID TSAA∶Lys)-413.26，R ＝0.98)。图8得到的是日粮标准回肠可消化含硫氨酸与赖氨酸比例与增重耗料比的折线模型和二次回归趋势图。
从图8可以看出，增重耗料比对应的折线模型最小的拐点为日粮标准回肠可消化苏氨酸与
2
赖氨酸比例为60.36(平台值为0.461，R ＝0.95)，日粮标准回肠可消化含硫氨基酸氨酸
2
与赖氨酸比例，二次回归曲线转折点为62.39(Y＝-0.0002(SID TSAA∶Lys)+0.0249(SID
2
TSAA∶Lys)-0.3247，R ＝0.98)。
[0141] (2)以血清尿素氮进行折线模型和回归分析
[0142] 图9得到的是日粮标准回肠可消化含硫氨酸与赖氨酸比例与血清尿素氮浓度的折线模型和二次回归趋势图。从图9可以看出，折线模型最小拐点为日粮标准回肠可消化2
含硫氨酸与赖氨酸比例为57.03(平台值为3.29，R ＝0.95)，日粮标准回肠可消化含硫氨
2
酸与赖氨酸比例二次回归趋势图拐点为61.52(Y＝0.0086(SID TSAA∶Lys)-1.0562(SID
2
TSAA∶Lys)+37.0214，R ＝0.97)。
含硫氨酸与赖氨酸比例为57.03(平台值为3.29，R ＝0.95)，日粮标准回肠可消化含硫氨
2
酸与赖氨酸比例二次回归趋势图拐点为61.52(Y＝0.0086(SID TSAA∶Lys)-1.0562(SID
2
TSAA∶Lys)+37.0214，R ＝0.97)。
[0143] 表9试验五日粮组成(饲喂基础)及其营养水平
[0144]
[0145]
[0146] 表10低氮排放日粮条件下标准回肠可消化含硫氨基酸与赖氨酸的不同比例对生长猪生长性能的影响(试验二)
[0147]
[0148] 注：1平均标准误。
[0149] 2处理是指所有试验处理组的效应，线性和二次指日粮标准回肠可消化含硫氨基酸与赖氨酸不同比例的效应；同行肩标不同小写字母表示差异显著(P＜0.05)。
[0150] 表11低氮排放日粮标准回肠可消化含硫氨基酸与赖氨酸不同比例对生长猪血清尿素氮和氨基酸含量的影响(试验五)
[0151]
[0152] 注：1平均标准误。
[0153] 2处理是指所有试验处理组的效应，线性和二次指日粮标准回肠可消化含硫氨基酸与赖氨酸不同比例的效应；同行肩标不同小写字母表示差异显著(P＜0.05)。
[0154] 1.4小结
[0155] 采用折线模型和二次回归模型分析，以平均日增重、增重耗料比作为评价指标时，得到生长猪低氮排放日粮最佳标准回肠可消化含硫氨基酸与赖氨酸比例是61.79％(采用折线模型和二次回归模型软件分析得到的)。以血清尿素氮作为评价指标时，得到生长猪最佳标准回肠可消化含硫氨基酸与赖氨酸比例是59.27％。综合生长性能和血清尿素氮的分析，生长猪低氮排放日粮中标准回肠可消化含硫氨基酸与赖氨酸比例不能低于61％。
[0156] 实施例4、采用本发明的低氮排放日粮饲喂生长猪的试验
[0157] 1.1试验动物与试验日粮
[0158] 试验选用初始体重为22.85±1.32kg的三元杂交猪(杜洛克×长白×大白)12头，随机分为对照组和低氮排放日粮组2个日粮处理，每个处理6个重复，每重复1头，试验期27天。对照组日粮蛋白质水平依据《猪饲养标准》(2004)推荐值，低氮排放日粮蛋白质水平在《猪饲养标准》(2004)推荐的基础上下调4个百分点，日粮净能水平统一为2.40Mcal/kg，标准回肠可消化赖氨酸水平为1.02，对照组蛋氨酸、苏氨酸和色氨酸满足理想氨基酸模型，低氮处理组标准回肠可消化含硫氨基酸、苏氨酸、色氨酸与赖氨酸比例满足0.61、0.66和0.23。日粮中不添加任何抗生素和促生长剂，试验日粮配方和营养水平见表12。
[0159] 表12试验日粮组成(饲喂基础)
[0160]
[0161]
[0162] 注：1预混料为生长猪每千克日粮提供：维生素A，5,512IU；维生素D3，2,200IU；维生素E，64IU；维生素K3，2.2mg；维生素B12，27.6μg；核黄素，5.5mg；D-泛酸，13.8mg；烟酸，30.3mg；氯化胆碱，551mg；锰，40mg；铁，100mg；锌，100mg；铜，100mg；碘，0.3mg；硒，0.3mg。
[0163] 2净能按照Noblet等(1994)的方程计算得到。
[0164] 3采用INRA(2002)氨基酸回肠标准可消化系数推算回肠标准氨基酸含量。
[0165] 1.2饲养管理
[0166] 试验于农业部饲料效价与安全监督检验测试中心畜禽试验基地(涿州)进行，采用全封闭式猪舍。猪舍温度、通风强度和湿度自动化控制，试验期间舍温恒定为23℃。生长3
猪单笼饲养，猪笼体积为1.25×0.55×0.8m，漏缝塑料地板，不锈钢可调式料槽，乳头式饮水器。试验采用粉料饲喂，自由采食和饮水，每日8:00和16:00加料两次。
猪单笼饲养，猪笼体积为1.25×0.55×0.8m，漏缝塑料地板，不锈钢可调式料槽，乳头式饮水器。试验采用粉料饲喂，自由采食和饮水，每日8:00和16:00加料两次。
[0167] 1.3检测指标与方法
[0168] (1)日粮成分
[0169] 日粮干物质、粗蛋白质、钙、总磷和氨基酸的测定同实施例1中1.3。
[0170] (2)生长性能
[0171] 分别于每个试验开始和结束时早晨空腹个体称重，以重复(栏)为单位记录耗料量，计算平均日增重、平均日采食量和增重耗料比。
[0172] (3)氮平衡指标
[0173] 在收集期内，每日8:00至24:00全收集粪尿。粪样的收集采用肛门全收粪法，在收集期内准确收集生长猪所排粪样，连续收集，随排随收，并放入-20℃冰箱中保存。收集期结束后，将3d的粪样称重、混合并用四分法取鲜粪样重的10％于65℃烘箱中烘干，回潮24h至恒重，粉碎过40目筛，用于测定粪氮含量。尿样的收集采用全收尿法，在收集期内准确收集生长猪所排尿样，向盛放尿样的塑料桶内加入20mL 10％的硫酸(98％的硫酸与水以体积比1∶9混合)固氮。每天量取所收集尿样的体积，充分混匀后再按5％取样，取样后放入-20℃冰箱中保存。收集期结束后，把3d所取的全部尿样充分混匀，用于测定尿氮含量。
[0174] 氮沉积量(g/d)＝氮摄入量-粪氮排放量-尿氮排放量
[0175] 氮消化率(％)＝氮吸收量÷氮摄入量×100
[0176] 氮沉积率(％)＝氮沉积量÷氮摄入量×100
[0177] (4)胴体品质
[0178] 试验结束后，将生长猪放血处死，去掉内脏、头(沿耳根后缘及下颌上第一条自然横轴线切下)、蹄(断离腕关节)和尾(紧贴肛门切除尾根)，测量胴体品质指标。胴体品质指标包括：热胴体重、眼肌高和宽、第10肋背膘厚，计算屠宰率、眼肌面积、无脂瘦肉量和瘦肉率。胴体品质指标测量及屠宰率、眼肌面积的计算方法参照《种猪生产性能测定规程》(NY/T822-2004)，无脂瘦肉量和瘦肉率的计算方法参照NPPC(1994)。
[0179] (4)肌肉品质
[0180] 生长猪屠宰后，在左半胴体倒数第3～4胸椎处向后取背最长肌20～30cm，测定肉品质指标。参照《猪肌肉品质测定技术规范》(NY/T 821-2004)操作测定pH值和失水率*(以滴水损失表示)。采用色差计(CHROMA METER CR-400型，日本)测定眼肌色差，其中L* * * * *
表示亮度，a 表示红度，b 表示黄度，根据所测的L、a 和b 值判断不同肉色的差别。
表示亮度，a 表示红度，b 表示黄度，根据所测的L、a 和b 值判断不同肉色的差别。
[0181] (5)血液指标
[0182] 同实施例1中1.3
[0183] (6)生长猪肠道消化酶活性测定
[0184] 蔗糖酶、乳糖酶、麦芽糖酶和胰蛋白酶活性采用试剂盒测定(A080-2，南京建成科技有限公司，中国)。根据Bradford法蛋白定量试剂盒的方法测定生长猪肠道黏膜含量。
[0185] (7)肠绒毛形态分析和观察
[0186] 十二指肠、空场和回肠肠段采用酒精脱水，二甲苯透明，石蜡包埋，切成6μm切片，HE染色(苏木精染核，伊红染胞质)，然后在每个部位组织切片上，选5个典型视野(绒毛完整且走向平直)用真彩图像分析软件采集图像，并测定绒毛高度和隐窝深度。
[0187] (8)挥发性脂肪酸的测定
[0188] 于试验第27d，将生长猪全部放血处死，收集盲肠、结肠和直肠肠段，纱布包好后，置于-80℃液氮中速冻，用于挥发性脂肪酸的测定(Franklin等，2002，J.Anim.Sci.80：2904-2910)。将食糜在常温下自然解冻，无菌称取盲肠、结肠和直肠的食糜样品1.5g左右与离心管中，并加入1.5mL的无菌水充分混合。将离心管在4℃的条件下(15000r/min)离心10min。取上清液1mL加入特制小瓶中，然后加入200μL的偏磷酸。小瓶冰浴30min后，在4℃的条件下(15000r/min)离心10min。然后使用5890 Hewlett a Packard气相色谱仪(Hewlett a Packard，Avondale，美国)进行VFA的测定。
[0189] (9)微生物菌群的测定
[0190] 于试验第27d，将生长猪全部放血处死，收集盲肠、结肠和直肠肠段，纱布包好后，置于-80℃液氮中速冻，用于微生物计数。将食糜在常温下自然解冻，无菌称取盲肠、结肠和-7直肠食糜样品0.5g左右，溶解与4.5mL的无菌生理盐水中，充分混合，然后逐级稀释至10 。
将平板培养基分成7个区并编号，取各稀释度的稀释液0.1mL接种到不同编号区上，进行培养，所有培养基置于37℃培养箱中，培养24～48h后计数，每个稀释度做平行重复的平板，以30～300个菌落的平板的稀释度作计数用。
将平板培养基分成7个区并编号，取各稀释度的稀释液0.1mL接种到不同编号区上，进行培养，所有培养基置于37℃培养箱中，培养24～48h后计数，每个稀释度做平行重复的平板，以30～300个菌落的平板的稀释度作计数用。
[0191] 总耗氧菌的总厌氧菌的培养基：脑心粉，37.0g/L；琼脂，15.0g/L pH，7.1～72。
[0192] 大肠杆菌的培养基选择麦康凯琼脂培养基：蛋白胨，20.0g/L；乳糖，10.0g/L；胆盐，5.0g/L；氯化钠，5.0g/L；中性红，0.075g/L；琼脂，20.0g/L；pH，7.4±0.2。
[0193] 罗式琼脂培养基用于乳酸杆菌的培养：胰蛋白胨，10.0g/L；酵母浸粉，5.0g/L；葡萄糖，20.0g/L；吐温80，1.0mL/L；磷酸二氢钾，6.0g/L；柠檬酸铵，2.0g/L；乙酸钠，17.0g/L；硫酸镁，0.575g/L；硫酸锰，0.12g/L；硫酸亚铁，0.034g/L；琼脂，20.0g/L；pH，5.4±0.2。
[0194] 双歧杆菌生化用基础培养基用于双歧杆菌的培养：蛋白胨10.0g/L；胰胨5g/L；吐温80，1mL/L；L-半胱氨酸0.2g/L；溴甲酚紫0.0224g/L；琼脂1.5g/L；硫酸镁0.2g/L；硫酸亚铁0.001g/L；氯化钠0.01g/L；硫酸锰0.00674g/L；pH，7.4±0.1。
[0195] 1.4统计分析
[0196] 试验数据用Excel软件进行初步处理后，采用SAS 8.2软件的ANOVA进行统计分析，P＜0.05为差异显著。
[0197] 1.5结果
[0198] 1.5.1低氮排放日粮对猪生长性能、氮平衡、胴体品质、肌肉品质和血清指标的影响
[0199] 低氮排放日粮对生长猪生长性能的影响见表13。试验各组初始重差异不显著(P＝0.53)。低氮排放日粮组平均日增重、平均日采食量和增重耗料比与对照组相比差异不显著(P＞0.05)。表14表明，采食低氮排放日粮的生长猪瘦肉率相比采食对照组的生长猪显著提高(P＜0.05)，背最长肌的亮度有下降趋势(P＝0.09)，其它胴体品质和肌肉品质指标差异不显著(P＞0.05)。低氮排放日粮对生长猪氮平衡的影响见表15，采食低氮排放日粮处理组的生长猪氮摄入量、粪氮、尿氮和总氮排放相比对照组显著下降(P＜0.05)，氮沉积率和氮消化率显著提高(P＜0.05)。表16表明，低氮排放处理组生长猪血清尿素氮与对照组相比显著下降(P＜0.05)，血清缬氨酸、亮氨酸和脯氨酸显著下降(P＜0.05)，血清中丝氨酸、苏氨酸、谷氨酰胺和牛磺酸浓度有下降趋势(P＝0.07)。
[0200] 表13低氮排放日粮对生长猪生长性能的影响
[0201]
[0202] 注1平均标准误。
[0203] 表14低氮排放日粮对生长猪胴体品质和肌肉品质的影响
[0204]
[0205] 注：1SEM：平均标准误。
[0206] 2 采 用NPPC(1994) 的 公 式 计 算：初 始 胴 体 无 脂 瘦 肉 量 ( 磅) ＝0.95×[-3.65+(0.418×活重，磅)]
[0207] 3采用NPPC(1994)的公式计算：胴体无脂瘦肉量(磅)＝0.95×[7.231+(0.437×热胴体重，磅)-(18.746×第10根肋骨处的脂肪厚度，英寸)+(3.877×第10根肋骨处的眼肌面积，平方英寸)]。
[0208] 4采用NPPC(1994)的公式计算：瘦肉率＝胴体无脂瘦肉量×100/热胴体重。
[0209] 5采用NPPC(1994)的公式计算：胴体无脂瘦肉增重(克/天)＝[(胴体无脂瘦肉量，克)-(初始胴体无脂瘦肉量，克)]/起止天数。
[0210] 表15低氮排放日粮对生长猪氮排放的影响
[0211]1
[0212] 注：SEM：平均标准误。
[0213] 表16低氮排放日粮对生长猪血清尿素氮和血清氨基酸含量的影响
[0214]
[0215] 注：1SEM：平均标准误。
[0216] 1.5.2低氮排放日粮对生长猪肠道菌群、后肠道挥发酸浓度和肠道形态的影响[0217] 从表17可见，采食低氮排放日粮的生长猪盲肠内大肠杆菌的数量显著下降(P＜0.05)，盲肠内乳酸杆菌的数量有上升的趋势(P＝0.07)，对于其它菌群和结肠与直肠内的菌群无显著影响(P＞0.05)。表18表明，采食低氮排放日粮处理组盲肠和结肠内丁酸浓度相比对照组而言显著上升(P＜0.05)，对于其它类挥发酸浓度影响不显著(P＞0.05)。表19显示，低氮排放日粮相比对照组，对生长猪十二指肠、空肠和回肠内黏膜含量无显著影响(P＞0.05)，对回肠内二糖酶(蔗糖酶、麦芽糖酶和乳糖酶)无显著影响(P＞0.05)。
由表20可见，与对照组相比，排放处理组回肠绒毛高度和绒毛高度与隐窝深度比值有增长趋势(P＝0.08；P＝0.06)。
由表20可见，与对照组相比，排放处理组回肠绒毛高度和绒毛高度与隐窝深度比值有增长趋势(P＝0.08；P＝0.06)。
[0218] 表17低氮排放日粮对生长猪肠道微生物菌群的影响(1g CFU/g)
[0219]
[0220] 注：a，b同一行的肩标不同为差异显著(P＜0.05)。
[0221] 1SEM：平均标准误。
[0222] 表18低氮排放日粮对生长猪后肠道挥发性脂肪酸浓度的影响(mmol/L)
[0223]
[0224]
[0225] 注：a，b同一行的肩标不同为差异显著(P＜0.05)。
[0226] 1SEM：平均标准误。
[0227] 表19低氮排放日粮对生长猪小肠黏膜蛋白含量和回肠内消化道酶活性的影响[0228]
[0229] 注：1SEM：平均标准误。
[0230] 表20低氮排放日粮对生长猪小肠绒毛形态的影响
[0231]
[0232] 1.6小结
[0233] 生长猪日粮中降低4个百分点蛋白水平，标准回肠可消化含硫氨基酸、苏氨酸、色氨酸与赖氨酸比例为0.61、0.66和0.23时，生长猪可以获得与正常蛋白日粮处理相似的生产性能，并且可以提高瘦肉率，提高日粮中氮的利用效率，极大的减少氮的排放。低氮排放日粮在一定程度上有改善生长猪肠道健康状态的趋势。