胸苷衍生物及其制备方法和其作为配体在制备肿瘤显像剂中的应用转让专利
申请号 : CN201110115436.1
文献号 : CN102219818B
文献日 : 2014-01-08
发明人 : 陆春雄 , 蒋泉福
申请人 : 江苏省原子医学研究所
摘要 :
本发明公开了一种胸苷衍生物，属于放射性药物化学和临床核医学技术领域。该衍生物分子式为N-{N’-[（2-巯基乙基氨基）乙酰基]-2-氨基乙基巯基-1-己酰胺基}-胸苷（简称NHT），本发明还提供了该胸苷衍生物的制备方法，以及其作为配体与99mTc形成络合物在制备肿瘤显像剂中的应用。99mTc-NHT中标记物99mTc的放射化学纯度高；脂水分配系数logP为0.76；稳定性好；动物试验安全性较高；肿瘤摄取的放射性（%ID/g）与肌肉摄取的放射性（%ID/g）、骨摄取的放射性（%ID/g）和血中的放射性（%ID/g）的比值分别为4.41、2.45和1.51，能作为新型的肿瘤显像剂用于肿瘤诊断。
权利要求 :
1.一种胸苷衍生物，其分子式为：N-{N’-[（2-巯基乙基氨基）乙酰基] -2-氨基乙基巯基-1-己酰胺基}-胸苷，具有如下的结构式： 。
2.权利要求1所述的胸苷衍生物的制备方法如下：
a）. 13.8 g 3’,5’-二（对甲基苯甲酰酯基）-胸苷通过以下步骤合成：将8gβ-胸苷和10gDMAP加入250mL二氯甲烷溶解，滴加10mL对甲基苯甲酰氯，滴毕，加热至回流直至反应溶液变澄清，将反应液冷却至室温，洗涤，有机相干燥浓缩后，重结晶，制得白色晶体状的产物；
b). 2.0gN-{[2-（2-（S-（4-甲氧基苄基）巯基）乙基氨基）乙酰基]-S-（4-甲氧基苄基）-2-氨基乙基巯基}-6-溴-1-己酰胺通过以下步骤合成：在通氮气条件下，将2gN-[2-（2-（S-（4-甲氧基苯基）巯基）乙基氨基）乙酰基]-S-（4-甲氧基苯基）-2-氨基乙基硫醇和0.6gDMAP溶于50mLCH2Cl2中，滴加1g6-溴己酰氯，滴毕，反应液温度逐渐升至室温，反应4小时后洗涤，将有机层干燥，浓缩后柱层析，得到的组分重结晶，制得白色固体的产物；
c)．0.27g N-{N’-[2-（2-（S-（4-甲氧基苄基）巯基）乙基氨基）乙酰基]-S-（4-甲氧基苄基）-2-氨基乙基巯基-1-己酰胺基}-3’,5’-二（对甲基苯甲酰酯基）-胸苷通过以下步骤合成：在通氮气条件下，将0.2g步骤a）中制得的产物、0.17g步骤b）中制得的产物和2gK2CO3加入50mL N，N-二甲基甲酰胺和丙酮的混合液中反应，将反应液冷却至室温，过滤，溶解，洗涤，将有机层干燥，浓缩后柱层析，得白色固体产物；
d).0.27gN-{N’-[2-（2-（S-（4-甲氧基苄基）巯基）乙基氨基）乙酰基]-S-（4-甲氧基苄基）-2-氨基乙基巯基-1-己酰胺基}-胸苷通过以下步骤合成：将c步骤制得的产物0.26g加入30mL 0.27mol/L的甲醇钠甲醇溶液，反应后蒸干甲醇，分出有机层，干燥，浓缩后柱层析，得白色泡沫状固体产物；
e).0.09gN-{N’-[（2-巯基乙基氨基）乙酰基] -2-氨基乙基巯基-1-己酰胺基}-胸苷的合成：在冰水浴条件下，将d）步骤制得的产物0.15g溶于5mL三氟乙酸中，加入0.17g醋酸汞和0.26mL苯甲醚，将反应液逐渐升至室温进行反应，抽干三氟乙酸，得深紫色油状物，干燥，用干燥乙醚洗涤，倾去乙醚，干燥,用15mL乙醇溶解干燥物，通硫化氢气体，离心,取出上清液浓缩，完成N-{N’-[（2-巯基乙基氨基）乙酰基] -2-氨基乙基巯基-1-己酰胺基}-胸苷的制备。
3.根据权利要求2所述的胸苷衍生物的制备方法，其特征在于：所述步骤a）中重结晶选用的溶剂是等体积的二氯甲烷和乙酸乙酯混合溶剂。
4.根据权利要求2所述的胸苷衍生物的制备方法，其特征在于：所述步骤b）中重结晶选用的溶剂是体积比为1：2的乙酸乙酯和石油醚混合溶剂。
5.权利要求1所述的胸苷衍生物作为配体在制备肿瘤显像剂中的应用。
99m
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：所述胸苷衍生物是用 Tc标记的。
99m
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：所述 Tc标记胸苷衍生物的过程是：取质量份数3份的NHT溶于乙醇中，加入800份的葡庚糖酸钠，80份的乙二胺四乙酸，15份的氯化亚锡和1mL 高锝酸溶液，所述高锝酸溶液的放射活性浓度为1mCi/mL，摇匀后密封，加
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热30分钟后取出冷却，即得 Tc-NHT。
说明书 :
胸苷衍生物及其制备方法和其作为配体在制备肿瘤显像剂
中的应用
技术领域
[0001] 本发明涉及放射性药物化学和临床核医学技术领域，特别涉及一种胸苷衍生物及其制备方法和其作为配体在制备肿瘤显像剂中的应用。
背景技术
[0002] 肿瘤是严重威胁人类生命的疾病之一，放射性核素显像可以反映肿瘤的生理、病理、代谢和功能的变化，且放射性核素显像是一种无创性检测方法，诸多优点使得放射性核素显像成为肿瘤诊断的主要方法。
[0003] 其中，放射性核素标记的核苷类是发展比较迅速的一类分子探针，如18F标记的胸18 18
腺嘧啶核苷类 F-FLT，F-FLT通过反映DNA的合成间接反映细胞的增殖。临床研究表明，
18
F-FLT在检测肿瘤细胞增殖方面如在胸部肿瘤、头颈部肿瘤、确定有无淋巴转移以及癌症
18
的诊断和分级方面有独特的应用前景。然而 F-FLT是正电子示踪剂，需要加速器产生氟
99m
（18），价格昂贵；相比之下，Tc具有半衰期短（6.02小时）、γ射线能量适宜（140千电子伏特）、可以从钼锝发生器方便获得、价格低廉等显著优点，是SPECT显像使用最普遍的放射性核素，因此，研制成功SPECT示踪剂，可以明显降低检查费用，减轻病人负担，有着重要的经济意义和社会意义。
腺嘧啶核苷类 F-FLT，F-FLT通过反映DNA的合成间接反映细胞的增殖。临床研究表明，
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F-FLT在检测肿瘤细胞增殖方面如在胸部肿瘤、头颈部肿瘤、确定有无淋巴转移以及癌症
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的诊断和分级方面有独特的应用前景。然而 F-FLT是正电子示踪剂，需要加速器产生氟
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（18），价格昂贵；相比之下，Tc具有半衰期短（6.02小时）、γ射线能量适宜（140千电子伏特）、可以从钼锝发生器方便获得、价格低廉等显著优点，是SPECT显像使用最普遍的放射性核素，因此，研制成功SPECT示踪剂，可以明显降低检查费用，减轻病人负担，有着重要的经济意义和社会意义。
发明内容
[0004] 本发明提供一种胸苷衍生物，其化学式为：N3-{N’-[（2-巯基乙基氨基）乙酰基]99m
-2-氨基乙基巯基-1-己酰胺基}-胸苷（简称NHT），其作为配体能与 Tc形成络合物用于
99m
制备肿瘤显像剂，本发明还涉及这种胸苷衍生物的制备方法，以及其作为配体与 Tc形成络合物在制备肿瘤显像剂中的应用。
-2-氨基乙基巯基-1-己酰胺基}-胸苷（简称NHT），其作为配体能与 Tc形成络合物用于
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制备肿瘤显像剂，本发明还涉及这种胸苷衍生物的制备方法，以及其作为配体与 Tc形成络合物在制备肿瘤显像剂中的应用。
[0005] 本发明的胸苷衍生物的分子式为：N3-{N’-[（2-巯基乙基氨基）乙酰基] -2-氨基乙基巯基-1-己酰胺基}-胸苷，具有如下的结构式：
[0006] 。
[0007] 它的制备方法如下：
[0008] a）. 13.8 g 3’,5’-二（对甲基苯甲酰酯基）-胸苷通过以下步骤合成：
[0009] 将8gβ-胸苷和10g N，N-二甲基-4-氨基吡啶（简称 DMAP）加入250mL二氯甲烷溶解，滴加10mL对甲基苯甲酰氯，滴毕，加热至回流直至反应溶液变澄清，将反应液冷却至室温，洗涤，有机相干燥浓缩后，重结晶，制得白色晶体状的产物；
[0010] b). 2.0gN-{[2-（2-（S-（4-甲氧基苄基）巯基）乙基氨基）乙酰基]-S-（4-甲氧基苄基）-2-氨基乙基巯基}-6-溴-1-己酰胺通过以下步骤合成：
[0011] 在通氮气条件下，将2gN-[2-（2-（S-（4-甲氧基苯基）巯基）乙基氨基）乙酰基]-S-（4-甲氧基苯基）-2-氨基乙基硫醇和0.6gDMAP溶于50mLCH2Cl2中，滴加1g6-溴己酰氯，滴毕，反应液温度逐渐升至室温，反应4小时后洗涤，将有机层干燥，浓缩后柱层析，得到的组分重结晶，制得白色固体的产物；
[0012] c)．0.27g N3-{N’-[2-（2-（S-（4-甲氧基苄基）巯基）乙基氨基）乙酰基]-S-（4-甲氧基苄基）-2-氨基乙基巯基-1-己酰胺基}-3’,5’-二（对甲基苯甲酰酯基）-胸苷通过以下步骤合成：
[0013] 在通氮气条件下，将0.2g步骤a）中制得的产物、0.17g步骤b）中制得的产物和2gK2CO3加入50mLDMF和丙酮的混合液中反应，将反应液冷却至室温，过滤，洗涤，将有机层干燥，浓缩后柱层析，得白色固体产物；
[0014] d).0.27gN3-{N’-[2-（2-（S-（4-甲氧基苄基）巯基）乙基氨基）乙酰基]-S-（4-甲氧基苄基）-2-氨基乙基巯基-1-己酰胺基}-胸苷通过以下步骤合成：
[0015] 将c步骤制得的产物0.26g加入30mL 0.27mol/L的甲醇钠甲醇溶液，反应1小时,蒸干甲醇，分出有机层，干燥，浓缩后柱层析，得白色泡沫状固体产物；
[0016] e).0.09gN3-{N’-[（2-巯基乙基氨基）乙酰基] -2-氨基乙基巯基-1-己酰胺基}-胸苷的合成：
[0017] 在冰水浴条件下，将d）步骤制得的产物0.15g溶于5mL三氟乙酸中，加入0.17g醋酸汞和0.26mL苯甲醚，将反应液逐渐升至室温进行反应，抽干三氟乙酸，得深紫色油状物，真空干燥，加入干燥乙醚，搅拌,倾去乙醚，真空干燥30分钟,用15mL乙醇溶解干燥物，通3
硫化氢气体，离心,取出上清液浓缩，完成N-{N’-[（2-巯基乙基氨基）乙酰基] -2-氨基乙基巯基-1-己酰胺基}-胸苷的制备。
硫化氢气体，离心,取出上清液浓缩，完成N-{N’-[（2-巯基乙基氨基）乙酰基] -2-氨基乙基巯基-1-己酰胺基}-胸苷的制备。
[0018] 优选地，步骤a中重结晶选用的溶剂是等体积的二氯甲烷和乙酸乙酯混合溶剂。
[0019] 优选地，步骤b中重结晶选用的溶剂是体积比为1比2的乙酸乙酯和石油醚混合溶剂。
[0020] 本发明还提出以上的胸苷衍生物作为配体在制备肿瘤显像剂中的应用。
[0021] 优选地，胸苷衍生物是用99mTc标记的。
[0022] 其中，99mTc标记胸苷衍生物的过程是：取质量份数3份的NHT溶于乙醇中，加入800份的葡庚糖酸钠，80份的乙二胺四乙酸，15份的氯化亚锡和1mL 高锝酸溶液（1mCi/
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mL）,摇匀后密封，加热30分钟后取出冷却，即得 Tc-NHT。
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mL）,摇匀后密封，加热30分钟后取出冷却，即得 Tc-NHT。
[0023] 实验表明，99mTc-NHT中标记物99mTc的放射化学纯度高，在95%以上；在pH7.0的磷酸缓冲液与正辛醇系统中脂水分配系数logP为0.76；放置6小时后，放射化学纯度还99m
在93%以上，说明 Tc-NHT在体外稳定性好，适于临床应用的需要；动物实验结果显示：
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Tc-NHT在正常小鼠体内代谢迅速，动物试验安全性较高；在注射肝癌HerpA荷瘤小鼠2小时后，荷瘤小鼠体内的肿瘤摄取的放射性（%ID/g）与肌肉摄取的放射性（%ID/g）、骨摄取的放射性（%ID/g）和血中的放射性（%ID/g）的比值分别为4.41，2.45和1.51，能作为新型的肿瘤显像剂用于肿瘤诊断。
在93%以上，说明 Tc-NHT在体外稳定性好，适于临床应用的需要；动物实验结果显示：
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Tc-NHT在正常小鼠体内代谢迅速，动物试验安全性较高；在注射肝癌HerpA荷瘤小鼠2小时后，荷瘤小鼠体内的肿瘤摄取的放射性（%ID/g）与肌肉摄取的放射性（%ID/g）、骨摄取的放射性（%ID/g）和血中的放射性（%ID/g）的比值分别为4.41，2.45和1.51，能作为新型的肿瘤显像剂用于肿瘤诊断。
附图说明
[0024] 图1 产物（1）的质谱图。
[0025] 图2 产物（2）的质谱图。
[0026] 图3 产物（3）的质谱图。
[0027] 图4 产物（4）的质谱图。
[0028] 图5 产物（5）的质谱图。
具体实施方式
[0029] NHT的化学结构式：
[0030]
[0031] NHT的反应方程式如下：
[0032] NHT的制备方法如下：
[0033] （1） 3’,5’-二（对甲基苯甲酰酯基）-胸苷（产物1）的合成：
[0034] 将8gβ-胸苷（33mmol）和10g DMAP（4.9mmol）加入到500mL三颈烧瓶中，加入250mL二氯甲烷，在搅拌条件下，滴加10mL对甲基苯甲酰氯，滴毕，加热至回流，继续搅拌反应，直至反应溶液变澄清，反应完全后，将反应液冷却至室温，分别用水、稀乙酸洗涤，分出有机层，将有机层用无水硫酸钠干燥浓缩后，用等体积的二氯甲烷和乙酸乙酯混合溶剂在室温重结晶3-4小时，制得13.8 g白色晶体状的产物1，产率为87.34%；熔点:202-204℃。
[0035] MS (m/z): 479(M+1), 501(M+Na)。
[0036] 1HNMR(CDCl3,δ):8.22(s,1H,CONH),7.93(t,4H,ArH), .29(t,4H,ArH),7.26(s,1H,CH-pyrimidinering),6.43-6.48(q,1H,CH-furanring),5.64(d,1H,CH-furan ring),4.64-4.81
[0037] (dd,2H,O-CH2-furan ring ), 4.52(q,1H, CH-furan ring ),2.70(m,1H, CH),2.43(d,6H, 2×Ar-CH3),2.28-2.33(m,1H,CH ), 1.62(s,3H, CH3-pyrimidine ring)。
[0038] （2） N-{[2-（2-（S-（4-甲氧基苄基）巯基）乙基氨基）乙酰基]-S-（4-甲氧基苄基）-2-氨基乙基巯基}-6-溴-1-己酰胺（产物2）的合成：
[0039] 在通氮气条件下，取2g N-[2-（2-（S-（4-甲氧基苯基）巯基）乙基氨基）乙酰基]-S-（4-甲氧基苯基）-2-氨基乙基硫醇，（4.6mmol）(制备方法见期刊《同位素》，2006(3): 150-153页，《一种^99Tc^m标记的5-HT1A受体显像剂的合成与标记》，作者：蒋泉福 吴春英 陆春雄 陈正平 王颂佩 张同兴 李晓敏)和0.6g DMAP（4.9mmol）溶于50mL CH2Cl2中，于0℃滴加1g 6-溴己酰氯（4.7mmol），滴毕，反应液温度逐渐升至室温，继续搅拌反应3-6小时, 分别加水和饱和NaHCO3溶液洗涤，分出有机层，将有机层用无水硫酸钠干燥，浓缩后过硅胶柱（展开剂为CH2Cl2），得到的组分用体积比是1比2的乙酸乙酯和石油醚混合溶液在室温重结晶3-4小时，制得2.0g 白色固体的产物2，熔点为79-81℃。
[0040] MS (m/z): 611,613 (M+1),633,635 (M+Na)。
[0041] 1HNMR (CDCl3,δ): 8.25(s,1H,CONH),7.25(m,4H, ArH), 6.85(m,4H,ArH),4.01(s,1H, COCH2-N), 3.89(s,1H,COCH2-N),3.76(s,6H,2×OCH3), 3.70 (s,2H,CH2-Ar),
3.68(m,2H, CH2-Ar), 3.40-3.48 (m,4H,2×N-CH2),3.30(s,2H,BrCH2), 2.50-2.61 (m,4H,2×CH2S ), 2.28-2.38 (m,2H,COCH2 ), 1.82(m,2H, CH2),1.60(m,2H, CH2 ),
1.45(m,2H, CH2)。
3.68(m,2H, CH2-Ar), 3.40-3.48 (m,4H,2×N-CH2),3.30(s,2H,BrCH2), 2.50-2.61 (m,4H,2×CH2S ), 2.28-2.38 (m,2H,COCH2 ), 1.82(m,2H, CH2),1.60(m,2H, CH2 ),
1.45(m,2H, CH2)。
[0042] （3） N3-{N’-[2-（2-（S-（4-甲氧基苄基）巯基）乙基氨基）乙酰基]-S-（4-甲氧基苄基）-2-氨基乙基巯基-1-己酰胺基}-3’,5’-二（对甲基苯甲酰酯基）-胸苷（产物3）的合成：
[0043] 在通氮气条件下，将0.2g产物1（0.42mmol），0.17g产物2(0.28mmol)和2gK2CO3（14.49mmol）加入到100mL烧瓶中，加入50mL等体积混合的 N，N-二甲基甲酰胺（DMF）和丙酮的混合液，于40-70℃搅拌反应18-24小时，将反应液冷却至室温，过滤，将滤液蒸干后用100mL乙酸乙酯溶解，加水洗涤，分出有机层，将有机层用无水Na2SO4干燥，浓缩过硅胶柱，展开剂为乙酸乙酯和石油醚的等体积混合物,得白色固体0.27g（产物3）,产率：96.4%。
[0044] MS (m/z):1009（M+1）。
[0045] 1HNMR (CDCl3, δ): 8.23(s,1H,CONH), 7.93(q,4H,ArH),7.22-7.23(m,8H,ArH), 7.20(s,1H, CH-pyrimidine ring ), 6.83(m,4H, ArH) ,
6.49(m,1H, CH-furan ring),5.62(d,1H, CH-furan ring), 4.64-4.78(dd,2H,
O-CH2-furan ring),4.51(d,1H, CH furan ring), 3.89(s,2H, COCH2-N), 3.86(s,2H, (CO)2N-CH2), 3.78(s,6H, 2×OCH3), 3.66(d,4H,2×CH2-Ar), 3.32-3.42(m,4H,
2×N-CH2), 2.69(dd,2H,CH2 furan ring), 2.49-2.60(m,4H, 2×CH2S), 2.42(d,6H,
2×Ar-CH3 ),2.22-2.32(m,2H, COCH2), 1.64(s,3H, CH3-pyrimidine ring),
1.56(m,4H,CH2CH2), 1.33-1.37(m,2H, CH2)。
6.49(m,1H, CH-furan ring),5.62(d,1H, CH-furan ring), 4.64-4.78(dd,2H,
O-CH2-furan ring),4.51(d,1H, CH furan ring), 3.89(s,2H, COCH2-N), 3.86(s,2H, (CO)2N-CH2), 3.78(s,6H, 2×OCH3), 3.66(d,4H,2×CH2-Ar), 3.32-3.42(m,4H,
2×N-CH2), 2.69(dd,2H,CH2 furan ring), 2.49-2.60(m,4H, 2×CH2S), 2.42(d,6H,
2×Ar-CH3 ),2.22-2.32(m,2H, COCH2), 1.64(s,3H, CH3-pyrimidine ring),
1.56(m,4H,CH2CH2), 1.33-1.37(m,2H, CH2)。
[0046] （4） N3-{N’-[2-（2-（S-（4-甲氧基苄基）巯基）乙基氨基）乙酰基]-S-（4-甲氧基苄基）-2-氨基乙基巯基-1-己酰胺基}-胸苷（产物4）的合成：
[0047] 取0.26g产物3（0.26mmol），加入30mL 0.27mol/L 的甲醇钠甲醇溶液，室温搅拌反应0.5-1小时,蒸干甲醇，加50mL水和50mL氯仿振荡，分出有机层，将有机层用无水Na2SO4干燥，浓缩过硅胶柱，展开剂为体积比为10:1的氯仿和甲醇混合物，得白色泡沫状固体0.16g（产物4）,产率：86.0%。
[0048] MS (m/z): 773(M+1),795 (M+Na)。
[0049] 1HNMR (CDCl3, δ): 8.32(s,1H,CONH), 7.33(s,1H, CH-pyrimidine ring ), 7.22(m,4H, ArH), 6.83(m,4H, ArH), 6.65(t,1H, CH-furan ring), 6.16(m,1H, CH-furan ring), 4.58(m,1H CH furan ring), 3.98(dd,2H,O-CH2-furan ring),3.93(m,2H,COCH2-N), 3.89(m, 2H,(CO)2N-CH2),3.78(s,6H, 2×OCH3), 3.65-3.68(m,4H,
2×CH2-Ar), 3.32-3.42(m,4H,2×N-CH2), 2.49-2.62(m,4H, 2×CH2S), 2.42(m,2H, CH2 furan ring), 2.25-2.32(m,2H, COCH2),2.22(m, 1H, CH2OH) 2.05(s,1H, CHOH),
1.91(s,3H, CH3-pyrimidine ring), 1.65(m,4H, CH2CH2), 1.35(m,2H, CH2)。
2×CH2-Ar), 3.32-3.42(m,4H,2×N-CH2), 2.49-2.62(m,4H, 2×CH2S), 2.42(m,2H, CH2 furan ring), 2.25-2.32(m,2H, COCH2),2.22(m, 1H, CH2OH) 2.05(s,1H, CHOH),
1.91(s,3H, CH3-pyrimidine ring), 1.65(m,4H, CH2CH2), 1.35(m,2H, CH2)。
[0050] （5） N3-{N’-[（2-巯基乙基氨基）乙酰基] -2-氨基乙基巯基-1-己酰胺基}-胸苷（产物5）的合成：
[0051] 在冰水浴条件下，将0.15g产物4（0.19mmol)溶于5mL三氟乙酸中，加入0.17g醋酸汞(0.53mmol)和0.26mL苯甲醚，反应液呈棕色，将反应液逐渐升至室温，在室温下继续搅拌30分钟，抽干三氟乙酸，得深紫色油状物，真空20-25℃干燥20-40分钟，用15mL干燥乙醚洗涤三次，每次在搅拌条件下洗涤10分钟，洗涤完成后倾去乙醚，真空20-25℃干燥20-40分钟,用15mL乙醇溶解干燥物，通硫化氢气体（用稀硫酸滴加到FeS中生成硫化氢）20-30分钟后，在4000转/分钟转速下离心5分钟,取出上清液浓缩，得淡黄色油状物3
（N-{N’-[（2-巯基乙基氨基）乙酰基] -2-氨基乙基巯基-1-己酰胺基}-胸苷）0.09g,产率68.7%。
（N-{N’-[（2-巯基乙基氨基）乙酰基] -2-氨基乙基巯基-1-己酰胺基}-胸苷）0.09g,产率68.7%。
[0052] MS (m/z): 533(M+1)。
[0053] 1HNMR (CDCl3, δ): 8.25(s,1H,CONH), 7.82(m, 1H, CH-pyrimidine ring),6.31(t, 1H, CH-furan ring), 4.37-4.42(m,1H,CH-furan ring), 4.16(s,1H,CH furan ring), 3.97(dd,2H, O-CH2-furan ring), 3.92(m,2H, COCH2-N), 3.73-3.80(m,
2H,(CO)2N-CH2), 3.61(m,2H, COCH2)), 3.5(m,1H,SH), 3.33-3.43(m,4H, 2×N-CH2),
3.22(m,1H,SH), 2.59-2.73(m,4H, 2×CH2S), 2.42-2.53(m,2H, CH2 furan ring),
2.16-2.33(m,2H, 2×CHOH), 1.91(s,3H, CH3-pyrimidine ring), 1.58-1.74(m,4H, CH2CH2),1.35-1.42(m,2H, CH2)。
2H,(CO)2N-CH2), 3.61(m,2H, COCH2)), 3.5(m,1H,SH), 3.33-3.43(m,4H, 2×N-CH2),
3.22(m,1H,SH), 2.59-2.73(m,4H, 2×CH2S), 2.42-2.53(m,2H, CH2 furan ring),
2.16-2.33(m,2H, 2×CHOH), 1.91(s,3H, CH3-pyrimidine ring), 1.58-1.74(m,4H, CH2CH2),1.35-1.42(m,2H, CH2)。
[0054] 99mTc-NHT的制备过程：
[0055] 取NHT30μg溶于30μL乙醇中，加入800μL 10mg/mL的葡庚糖酸钠，80μL10mg/mL的乙二胺四乙酸，15μL 10mg/mL的氯化亚锡和1mL 高锝酸溶液（1mCi/mL）,振荡
99m
摇匀后密封，于100℃加热30分钟后取出冷却，即得 Tc-NHT。其结构式为：
99m
摇匀后密封，于100℃加热30分钟后取出冷却，即得 Tc-NHT。其结构式为：
[0056] 。
[0057] 实验证明，99mTc-NHT的性能如下:
[0058] 1.99mTc-NHT的放射化学纯度在95%以上。
[0059] 将上述制备得到的99mTc-NHT在聚酰胺薄膜上点样，展开剂为甲苯：乙腈：甲醇99m
=3:1：1（体积比），实验结果见表1。计算得到 Tc-NHT的放射化学纯度在95%以上。
=3:1：1（体积比），实验结果见表1。计算得到 Tc-NHT的放射化学纯度在95%以上。
[0060] 表1
[0061]序号 99mTc-NHT的Rf 锝胶体的Rf 放射化学纯度
1 0.7-0.8 0-0.1 95.35%
2 0.7-0.8 0-0.1 95.56%
3 0.7-0.8 0-0.1 95.14%
4 0.7-0.8 0-0.1 96.13%
1 0.7-0.8 0-0.1 95.35%
2 0.7-0.8 0-0.1 95.56%
3 0.7-0.8 0-0.1 95.14%
4 0.7-0.8 0-0.1 96.13%
[0062] 2.99mTc-NHT的脂水分配系数：
[0063] 取50μL（30μCi）99mTc-NHT加入到含有3mL正辛醇和3mL的磷酸缓冲液（PBS，pH=7.4）的试管中，涡旋振荡3分钟，在4000转/分钟转速下离心5分钟，取出1mL正辛醇和1mLPBS，在γ-计数器上测量放射性计数，再取1mL正辛醇加入到含有2mL正辛醇和3mL PBS的试管中，重复操作至正辛醇的计数与PBS的计数的比值是一恒值。计算脂水分配系数logP=log[(正辛醇的计数)/(PBS的计数)]=0.76。
[0064] 3.99mTc-NHT的稳定性的测定：
[0065] 将制备得到的99mTc-NHT在25℃温度下放置不同时间后（0、1、2、3、4、5，、6小时）,99m
分别测定其放射化学纯度。实验结果表明，Tc-NHT 在放置6小时后，放射化学纯度还在
99m
93%以上，说明 Tc-NHT在25℃温度体外稳定性好，适于临床应用的需要。
分别测定其放射化学纯度。实验结果表明，Tc-NHT 在放置6小时后，放射化学纯度还在
99m
93%以上，说明 Tc-NHT在25℃温度体外稳定性好，适于临床应用的需要。
[0066] 4.99mTc-NHT在正常小鼠中的安全性实验：
[0067] 取10只ICR小鼠（体重18-20g），分成二组，一组每只注射99mTc-NHT 0.2mL(2mCi),另一组注射0.2mL生理盐水作对照。正常饲养48小时后，10小鼠均存活，与对照组相比，注99m 99m
射 Tc-NHT的一组无异常。若以人注射10mCi Tc-NHT,50kg体重计算,小鼠接受的剂量
99m
（mCi/kg）是人的500倍以上，说明 Tc-NHT的安全性比较高。
射 Tc-NHT的一组无异常。若以人注射10mCi Tc-NHT,50kg体重计算,小鼠接受的剂量
99m
（mCi/kg）是人的500倍以上，说明 Tc-NHT的安全性比较高。
[0068] 5.99mTc-NHT在荷瘤小鼠体内生物分布实验：
[0069] 取25只荷肝癌（HepA）小鼠，分成5组（每组5只），每只小鼠分别通过尾静脉注射99m
0.2mL(0.1mCi) Tc-NHT，每组小鼠分别在相应的时间点（5、30、60、120和180min）宰杀，取出相应的脏器（脑、心、肝、脾、肺、肾、肿瘤、肌肉、骨和血等），分别擦净后称重，在γ-计数器上测量放射性计数，计算每克脏器的放射性（%ID/g）。实验结果见表2。
0.2mL(0.1mCi) Tc-NHT，每组小鼠分别在相应的时间点（5、30、60、120和180min）宰杀，取出相应的脏器（脑、心、肝、脾、肺、肾、肿瘤、肌肉、骨和血等），分别擦净后称重，在γ-计数器上测量放射性计数，计算每克脏器的放射性（%ID/g）。实验结果见表2。
[0070] 表2 99mTc-NHT在荷肝癌（HepA）小鼠体内的生物分布（n=5）%ID/g
[0071]脏器 5min 30min 60min 120min 180min
脑 0.29±0.02 0.19±0.05 0.10±0.03 0.09±0.01 0.07±0.01
心 2.09±0.42 1.64±0.46 0.90±0.26 0.69±0.13 0.65±0.08
肝 28.10±0.45 22.23±0.66 18.11±1.75 15.22±1.70 11.25±0.46
脾 5.26±0.63 3.51±0.71 6.33±0.85 4.32±0.98 3.99±0.90
肺 7.02±0.76 6.89±0.53 5.24±0.23 4.61±0.95 3.89±0.70
肾 20.17±2.80 18.39±1.72 15.80±0.76 15.69±1.39 13.46±1.95
肿瘤 1.69±0.52 1.55±0.37 1.57±0.22 1.59±0.51 1.49±0.22
肌肉 0.78±0.13 0.55±0.17 0.40±0.07 0.36±0.13 0.28±0.05
骨 0.97±0.05 0.85±0.29 0.72±0.10 0.65±0.07 0.52±0.09
血 3.62±0.87 2.45±0.61 1.79±0.50 1.05±0.18 1.00±0.08
肿瘤/肌肉 2.18±0.34 2.80±0.33 3.91±0.37 4.41±0.32 5.37±0.65
肿瘤/骨 1.75±0.50 1.82±0.15 2.17±0.23 2.45±0.24 2.41±0.29
肿瘤/血 0.47±0.04 0.63±0.03 0.87±0.13 1.51±0.18 1.29±0.17
脑 0.29±0.02 0.19±0.05 0.10±0.03 0.09±0.01 0.07±0.01
心 2.09±0.42 1.64±0.46 0.90±0.26 0.69±0.13 0.65±0.08
肝 28.10±0.45 22.23±0.66 18.11±1.75 15.22±1.70 11.25±0.46
脾 5.26±0.63 3.51±0.71 6.33±0.85 4.32±0.98 3.99±0.90
肺 7.02±0.76 6.89±0.53 5.24±0.23 4.61±0.95 3.89±0.70
肾 20.17±2.80 18.39±1.72 15.80±0.76 15.69±1.39 13.46±1.95
肿瘤 1.69±0.52 1.55±0.37 1.57±0.22 1.59±0.51 1.49±0.22
肌肉 0.78±0.13 0.55±0.17 0.40±0.07 0.36±0.13 0.28±0.05
骨 0.97±0.05 0.85±0.29 0.72±0.10 0.65±0.07 0.52±0.09
血 3.62±0.87 2.45±0.61 1.79±0.50 1.05±0.18 1.00±0.08
肿瘤/肌肉 2.18±0.34 2.80±0.33 3.91±0.37 4.41±0.32 5.37±0.65
肿瘤/骨 1.75±0.50 1.82±0.15 2.17±0.23 2.45±0.24 2.41±0.29
肿瘤/血 0.47±0.04 0.63±0.03 0.87±0.13 1.51±0.18 1.29±0.17
[0072] 上表表明，99mTc-NHT在荷肝癌（HepA）小鼠体内的生物分布，其中（n=5）%ID/g。
[0073] 以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。