一种原料为块菌和咖啡豆的食品的制备方法

摘要

本发明属于医药保健技术领域，本发明公开了一种原料为块菌和咖啡豆的保健食品的制备方法。本申请人通过多年研究，得到一种块菌与咖啡豆为原料的食品的制备方法，该方法得到的保健食品用于体虚多病、阳虚等方面的患者，具有很好的保健作用；通过药理试验表明，该食品具有很好的提高免疫力、抗疲劳等方面的作用。

权利要求

1.一种块菌和咖啡豆为原料食品的制备方法，其特征在于：

(1)菌种的制备

选取新鲜未成熟的块菌子囊果直接用刀划开，挑取中央健壮且未接触刀的组织块，直接接种到培养基平板，在20-25℃恒温黑暗中培养5-20天，然后将菌丝植入试管内的斜面培养基上，在20-30℃条件下进行菌丝培养，待菌丝布满斜面培养基后，即得菌种；

其中培养基为：其中百分数是指g/100ml，马铃薯10-20％，枸杞提取物10-20％，党参提取物5-10％，麦芽糖4-6％，蛋白胨0.4-0.6％，硫酸镁0.4-0.6％，琼脂1-3％，酵母膏

0.4-0.6％，磷酸二氢钾0.4-0.6％；用马铃薯煮汁，沸腾8-20分钟后，取滤液，将上述其他原料放入滤液中，边煮边搅，待全部溶解后，趁热灭菌，即得培养基；

(2)液体菌种培养

液体菌种分一级液体种子、二级液体种子，培养基均为：其中百分数是指g/100ml，蛋白胨1-3％，麦芽糖4-8％，党参提取物5-15％，枸杞提取物10-25％，磷酸氢二钾

0.4-0.6％，硫酸镁0.2-0.6％，马铃薯10-25％；培养基制备方法为：将马铃薯粉碎，加水提取得到提取液，与上述其余成份混合，定容，用氢氧化钠或盐酸调pH值到5.5-6.5，灭菌，即得；

将斜面菌种转接入装有培养基的摇瓶中，进行一级液体种子培养，培养温度为

20-30℃，摇床转速150-160转/分钟，培养时间4-6天，即得一级液体种子；

将培养好的一级液体种子转接到装有培养基的摇瓶中进行二级液体种子培养，二级液体种子的培养基配方与培养条件与一级液体种子相同，培养时间5-8天，即得二级液体种子；

(3)块菌深层发酵：

其中发酵罐培养基：其中百分数是指g/100ml，麦芽糖6-10％，蛋白胨2-4％，党参提取物4-10％，枸杞提取物8-20％，磷酸氢二钾0.5-0.8％，硫酸镁0.4-0.6％，马铃薯8-20％，调pH值为5.5-6.5；

将二级液体种子接种到装有上述培养基发酵罐中，接种量为5-15％，培养温度

20-30℃，搅拌转速170-190转/分钟，发酵24小时后，每隔16小时取发酵液样镜检，当每毫升培养液内含有800-1000个块菌菌株时，发酵培养结束，即得深层发酵块菌菌液；

(4)块菌发酵液与咖啡流浸膏的混配发酵：

将咖啡豆用石灰乳碱化，然后粉碎至45-55目，加入浓度为30％-70％的乙醇或加入乙酸乙酯，提取，提取液过滤，浓缩，得到咖啡豆浸膏，用注射用水将咖啡豆浸膏调至含水量

35-40％，以纳豆芽孢杆菌和嗜酸乳杆菌，以1∶1的比例进行混种发酵；将混种发酵咖啡流浸膏灭菌，将深层发酵得到的块菌菌液加入流浸膏中，其中深层发酵块菌菌液与混种发酵咖啡流浸膏按重量比1-300∶1-200混合；培养温度20-30℃，搅拌机转数150-160转/分钟，连续发酵6-9天，发酵结束后，将发酵液浓缩，干燥，制粒，封装即得最终产品。

2.根据权利要求1所述一种块菌和咖啡豆为原料食品的制备方法，其中块菌为黑孢块菌、中国块菌、印度块菌、白块菌或夏块菌中一种。

3.根据权利要求1所述的一种块菌和咖啡豆为原料食品的制备方法，其中(4)中将混种发酵咖啡流浸膏灭菌，将深层发酵得到的块菌菌液加入流浸膏中，培养温度20-30℃，搅拌机转数150-160转/分钟，连续发酵6-9天，培养3-5天后加入菠萝汁、橄榄汁、荔枝汁、香茅草汁、香兰叶汁、蓝莓汁、鲜牛奶的一种或几种。

4.根据权利要求1所述的一种块菌和咖啡豆为原料食品的制备方法，其中食品包括饮料。

说明书

一种原料为块菌和咖啡豆的食品的制备方法

技术领域

[0001] 本发明涉及医药保健技术领域，具体涉及一种原料为块菌和咖啡豆的保健食品的制备方法。

背景技术

[0002] 保健食品是食品的一个种类，具有一般食品的共性，又能调节人体的机能，适于特定人群食用，近年来世界各国保健食品发展的增长速度都很快，保健(功能)食品在欧美各国被称为“健康食品”，在日本被称为“功能食品”。我国保健(功能)食品的兴起是在20世纪80年代末90年代初，经过一、二代的发展，也将迈入第三代，即保健食品不仅需要人体及动物实验证明该产品具有某项生理调节功能，更需查明具有该项保健功能因子的结构、含量、作用机理以及在食品中应有的稳定形态。

[0003] 块菌是世界上最珍贵的食用菌之一，块菌含有丰富的营养物质，由中国药用真菌研究之父世界著名真菌学家刘波教授指导，以中国菌物学会理事长、食用菌教育部工程研究中心主任李玉教授为首席科学家的研究小组对块菌长达八年的专项研究表明：块菌含有丰富的蛋白质、18种氨基酸(包括人体不能合成的8种必需氨基酸)、不饱和脂肪酸、多种维生素、锌、锰、铁、钙、磷、硒等必需微量元素，以及鞘脂类、脑苷脂、神经酰胺、三萜、雄性酮、腺苷、松露酸、甾醇、块菌多糖、块菌多肽等大量的代谢产物，具有极高的营养保健价值。雄性酮有助阳、调理内分泌的显著功效；鞘脂类化合物在防止老年痴呆、动脉粥样硬化以及抗肿瘤细胞毒性方面有明显活性；多糖、多肽、三萜具有增强免疫力、抗衰老、抗疲劳作用等等。这些稀有天然化合物的存在构成了块菌神奇作用的物质基础。

[0004] 块菌的深入开发将成为保健食品的趋势。

发明内容

[0005] 基于上述原因，本申请人通过多年研究，得到块菌与咖啡豆配伍为原料开发出新一代保健食品的制备方法，本发明方法得到的食品用于体虚多病、阳虚等方面的患者，具有很好的保健作用；通过药理试验表明，本发明方法得到的食品具有很好的提高免疫力、抗疲劳等方面的作用。

[0006] 本发明通过下述技术方案实现的。

[0007] 一种块菌和咖啡豆为原料食品的制备方法：

[0008] (1)菌种的制备

[0009] 选取新鲜未成熟的块菌子囊果直接用刀划开，挑取中央健壮且未接触刀的组织块，直接接种到培养基平板，在20-25℃恒温黑暗中培养5-20天，然后将菌丝植入试管内的斜面培养基上，在20-30℃条件下进行菌丝培养，待菌丝布满斜面培养基后，即得菌种；

[0010] 其中培养基为(g/100ml)：马铃薯10-20％，枸杞提取物10-20％，党参提取物5-10％，麦芽糖4-6％，蛋白胨0.4-0.6％，硫酸镁0.4-0.6％，琼脂1-3％，酵母膏0.4-0.6％，磷酸二氢钾0.4-0.6％；用马铃薯煮汁，沸腾8-20分钟后，取滤液，将上述其他原料放入滤液中，边煮边搅，带全部溶解后，趁热灭菌，即得培养基；

[0011] (2)液体菌种培养

[0012] 液体菌种分一级液体种子、二级液体种子，培养基均为(g/100ml)：蛋白胨1-3％，麦芽糖4-8％，党参提取物5-15％，枸杞提取物10-25％，磷酸氢二钾0.4-0.6％，硫酸镁0.2-0.6％，马铃薯10-25％；培养基制备方法为：将马铃薯粉碎，加水提取得到提取液，与上述其余成份混合，定容，用氢氧化钠或盐酸调PH值到5.5-6.5，灭菌，既得；

[0013] 将斜面菌种转接入装有培养基的摇瓶中，进行一级液体种子培养，培养温度为20-30℃，摇床转速150-160转/分钟，培养时间4-6天，即得一级液体种子；

[0014] 将培养好的一级液体种子转接到装有培养基的摇瓶中进行二级液体种子培养，二级液体种子的培养基配方与培养条件与一级液体种子相同，培养时间5-8天，即得二级液体种子；

[0015] (3)块菌深层发酵：

[0016] 其中发酵罐培养基(g/100ml)：麦芽糖6-10％，蛋白胨2-4％，党参提取物4-10％，枸杞提取物8-20％，磷酸氢二钾0.5-0.8％，硫酸镁0.4-0.6％，马铃薯8-20％，调PH值为5.5-6.5；

[0017] 将二级液体种子接种到装有上述培养基发酵罐中，接种量为5-15％，培养温度20-30℃，搅拌转速170-190转/分钟，发酵24小时后，每隔16小时取发酵液样镜检，当每毫升培养液内含有800-1000个块菌菌株时，发酵培养结束，即得深层发酵块菌菌液；

[0018] (4)块菌发酵液与咖啡流浸膏的混配发酵：

[0019] 将咖啡豆用石灰乳碱化，然后粉碎至45-55目，加入浓度为30％-70％的乙醇或加入乙酸乙酯，提取，提取液过滤，浓缩，得到咖啡豆浸膏，用注射用水将咖啡豆浸膏调至含水量35-40％，以纳豆芽孢杆菌和嗜酸乳杆菌，以1∶1的比例进行混种发酵；将混种发酵咖啡流浸膏灭菌，将深层发酵得到的块菌菌液加入流浸膏中，其中深层发酵块菌菌液与混种发酵咖啡流浸膏按重量比1-300∶1-200混合；培养温度20-30℃，搅拌机转数150-160转/分钟，连续发酵6-9天，发酵结束后，将发酵液浓缩，干燥，制粒，封装既得最终产品。

[0020] 其中块菌为黑孢块菌、中国块菌、印度块菌、白块菌、夏块菌、松露中一种。

[0021] 其中(4)中将混种发酵咖啡流浸膏灭菌，将深层发酵得到的块菌菌液加入流浸膏中，培养温度20-30℃，搅拌机转数150-160转/分钟，连续发酵6-9天，培养3-5天后加入菠萝汁、橄榄汁、荔枝汁、香茅草汁、香兰叶汁，蓝莓汁的一种或几种。

[0022] 其中食品包括饮料。

[0023] 制备实施例

[0024] 实施例1

[0025] 一种块菌和咖啡豆为原料食品的制备方法：

[0026] (1)菌种的制备

[0027] 选取新鲜未成熟的块菌子囊果直接用刀划开，挑取中央健壮且未接触刀的组织块，直接接种到培养基平板，在20℃恒温黑暗中培养20天，然后将菌丝植入试管内的斜面培养基上，在20℃条件下进行菌丝培养，待菌丝布满斜面培养基后，即得菌种；

[0028] 其中培养基为(g/100ml)：马铃薯10％，枸杞提取物10％，党参提取物5％，麦芽糖4％，蛋白胨0.4％，硫酸镁0.4％，琼脂1％，酵母膏0.4％，磷酸二氢钾0.4％；用马铃薯煮汁，沸腾8分钟后，取滤液，将上述其他原料放入滤液中，边煮边搅，带全部溶解后，趁热灭菌，即得培养基；

[0029] (2)液体菌种培养

[0030] 液体菌种分一级液体种子、二级液体种子，培养基均为(g/100ml)：蛋白胨1％，麦芽糖4％，党参提取物5％，枸杞提取物10％，磷酸氢二钾0.4％，硫酸镁0.2％，马铃薯10％；培养基制备方法为：将马铃薯粉碎，加水提取得到提取液，与上述其余成份混合，定容，用氢氧化钠或盐酸调PH值到5.5，灭菌，既得；

[0031] 将斜面菌种转接入装有培养基的摇瓶中，进行一级液体种子培养，培养温度为20℃，摇床转速150转/分钟，培养时间4天，即得一级液体种子；

[0032] 将培养好的一级液体种子转接到装有培养基的摇瓶中进行二级液体种子培养，二级液体种子的培养基配方与培养条件与一级液体种子相同，培养时间5天，即得二级液体种子；

[0033] (3)块菌深层发酵：

[0034] 其中发酵罐培养基(g/100ml)：麦芽糖6％，蛋白胨2％，党参提取物4％，枸杞提取物8％，磷酸氢二钾0.5％，硫酸镁0.4％，马铃薯8％，调PH值为5.5；

[0035] 将二级液体种子接种到装有上述培养基发酵罐中，接种量为5-15％，培养温度20℃，搅拌转速170转/分钟，发酵24小时后，每隔16小时取发酵液样镜检，当每毫升培养液内含有800-1000个块菌菌株时，发酵培养结束，即得深层发酵块菌菌液；

[0036] (4)块菌发酵液与咖啡流浸膏的混配发酵：

[0037] 将咖啡豆用石灰乳碱化，然后粉碎至45-55目，加入浓度为30％的乙醇，提取，提取液过滤，浓缩，得到咖啡豆浸膏，用注射用水将咖啡豆浸膏调至含水量35％，以纳豆芽孢杆菌和嗜酸乳杆菌，以1∶1的比例进行混种发酵；将混种发酵咖啡流浸膏灭菌，将深层发酵得到的块菌菌液加入流浸膏中，其中深层发酵块菌菌液与混种发酵咖啡流浸膏按重量比1∶1混合；培养温度20℃，搅拌机转数150转/分钟，连续发酵6天，发酵结束后，将发酵液浓缩，干燥，制粒，封装既得最终产品。

[0038] 其中块菌为黑孢块菌、中国块菌、印度块菌、白块菌、夏块菌、松露中一种。

[0039] 其中食品包括饮料。

[0040] 实施例2

[0041] 一种块菌和咖啡豆为原料食品的制备方法：

[0042] (1)菌种的制备

[0043] 选取新鲜未成熟的块菌子囊果直接用刀划开，挑取中央健壮且未接触刀的组织块，直接接种到培养基平板，在25℃恒温黑暗中培养5天，然后将菌丝植入试管内的斜面培养基上，在30℃条件下进行菌丝培养，待菌丝布满斜面培养基后，即得菌种；

[0044] 其中培养基为(g/100ml)：马铃薯20％，枸杞提取物20％，党参提取物10％，麦芽糖6％，蛋白胨0.6％，硫酸镁0.6％，琼脂3％，酵母膏0.6％，磷酸二氢钾0.6％；用马铃薯煮汁，沸腾20分钟后，取滤液，将上述其他原料放入滤液中，边煮边搅，带全部溶解后，趁热灭菌，即得培养基；

[0045] (2)液体菌种培养

[0046] 液体菌种分一级液体种子、二级液体种子，培养基均为(g/100ml)：蛋白胨3％，麦芽糖8％，党参提取物15％，枸杞提取物25％，磷酸氢二钾0.6％，硫酸镁0.6％，马铃薯25％；培养基制备方法为：将马铃薯粉碎，加水提取得到提取液，与上述其余成份混合，定容，用氢氧化钠或盐酸调PH值到6.5，灭菌，既得；

[0047] 将斜面菌种转接入装有培养基的摇瓶中，进行一级液体种子培养，培养温度为30℃，摇床转速160转/分钟，培养时间6天，即得一级液体种子；

[0048] 将培养好的一级液体种子转接到装有培养基的摇瓶中进行二级液体种子培养，二级液体种子的培养基配方与培养条件与一级液体种子相同，培养时间5-8天，即得二级液体种子；

[0049] (3)块菌深层发酵：

[0050] 其中发酵罐培养基(g/100ml)：麦芽糖10％，蛋白胨4％，党参提取物10％，枸杞提取物20％，磷酸氢二钾0.8％，硫酸镁0.6％，马铃薯20％，调PH值为6.5；

[0051] 将二级液体种子接种到装有上述培养基发酵罐中，接种量为15％，培养温度30℃，搅拌转190转/分钟，发酵24小时后，每隔16小时取发酵液样镜检，当每毫升培养液内含有800-1000个块菌菌株时，发酵培养结束，即得深层发酵块菌菌液；

[0052] (4)块菌发酵液与咖啡流浸膏的混配发酵：

[0053] 将咖啡豆用石灰乳碱化，然后粉碎至45-55目，加入浓度为70％的乙醇，提取，提取液过滤，浓缩，得到咖啡豆浸膏，用注射用水将咖啡豆浸膏调至含水量40％，以纳豆芽孢杆菌和嗜酸乳杆菌，以1∶1的比例进行混种发酵；将混种发酵咖啡流浸膏灭菌，将深层发酵得到的块菌菌液加入流浸膏中，其中深层发酵块菌菌液与混种发酵咖啡流浸膏按重量比3∶1-2混合；培养温度30℃，搅拌机转数160转/分钟，连续发酵9天，发酵结束后，将发酵液浓缩，干燥，制粒，封装既得最终产品。

[0054] 其中食品包括饮料。

[0055] 实施例3

[0056] 一种块菌和咖啡豆为原料食品的制备方法：

[0057] (1)菌种的制备

[0058] 选取新鲜未成熟的块菌子囊果直接用刀划开，挑取中央健壮且未接触刀的组织块，直接接种到培养基平板，在23℃恒温黑暗中培养10天，然后将菌丝植入试管内的斜面培养基上，在25℃条件下进行菌丝培养，待菌丝布满斜面培养基后，即得菌种；

[0059] 其中培养基为(g/100ml)：马铃薯15％，枸杞提取物15％，党参提取物8％，麦芽糖5％，蛋白胨0.5％，硫酸镁0.5％，琼脂2％，酵母膏0.6％，磷酸二氢钾0.6％；用马铃薯煮汁，沸腾15分钟后，取滤液，将上述其他原料放入滤液中，边煮边搅，带全部溶解后，趁热灭菌，即得培养基；

[0060] (2)液体菌种培养

[0061] 液体菌种分一级液体种子、二级液体种子，培养基均为(g/100ml)：蛋白胨2％，麦芽糖6％，党参提取物10％，枸杞提取物20％，磷酸氢二钾0.5％，硫酸镁0.4％，马铃薯15％；培养基制备方法为：将马铃薯粉碎，加水提取得到提取液，与上述其余成份混合，定容，用氢氧化钠或盐酸调PH值到6.0，灭菌，既得；

[0062] 将斜面菌种转接入装有培养基的摇瓶中，进行一级液体种子培养，培养温度为25℃，摇床转速155转/分钟，培养时间5天，即得一级液体种子；

[0063] 将培养好的一级液体种子转接到装有培养基的摇瓶中进行二级液体种子培养，二级液体种子的培养基配方与培养条件与一级液体种子相同，培养时间6天，即得二级液体种子；

[0064] (3)块菌深层发酵：

[0065] 其中发酵罐培养基(g/100ml)：麦芽糖8％，蛋白胨3％，党参提取物8％，枸杞提取物15％，磷酸氢二钾0.7％，硫酸镁0.5％，马铃薯15％，调PH值为6.0；

[0066] 将二级液体种子接种到装有上述培养基发酵罐中，接种量为10％，培养温度25℃，搅拌转速180转/分钟，发酵24小时后，每隔16小时取发酵液样镜检，当每毫升培养液内含有800-1000个块菌菌株时，发酵培养结束，即得深层发酵块菌菌液；

[0067] (4)块菌发酵液与咖啡流浸膏的混配发酵：

[0068] 将咖啡豆用石灰乳碱化，然后粉碎至45-55目，加入浓度为50％的乙醇，提取，提取液过滤，浓缩，得到咖啡豆浸膏，用注射用水将咖啡豆浸膏调至含水量38％，以纳豆芽孢杆菌和嗜酸乳杆菌，以1∶1的比例进行混种发酵；将混种发酵咖啡流浸膏灭菌，将深层发酵得到的块菌菌液加入流浸膏中，其中深层发酵块菌菌液与混种发酵咖啡流浸膏按重量比1.5∶1混合；培养温度25℃，搅拌机转数155转/分钟，连续发酵7天，发酵结束后，将发酵液浓缩，干燥，制粒，封装既得最终产品。

[0069] 其中食品包括饮料。

[0070] 实施例4

[0071] 一种块菌和咖啡豆为原料食品的制备方法：

[0072] (1)菌种的制备

[0073] 选取新鲜未成熟的块菌子囊果直接用刀划开，挑取中央健壮且未接触刀的组织块，直接接种到培养基平板，在24℃恒温黑暗中培养15天，然后将菌丝植入试管内的斜面培养基上，在28℃条件下进行菌丝培养，待菌丝布满斜面培养基后，即得菌种；

[0074] 其中培养基为(g/100ml)：马铃薯15％，枸杞提取物18％，党参提取物7％，麦芽糖4％，蛋白胨0.6％，硫酸镁0.5％，琼脂3％，酵母膏0.4％，磷酸二氢钾0.5％；用马铃薯煮汁，沸腾16分钟后，取滤液，将上述其他原料放入滤液中，边煮边搅，带全部溶解后，趁热灭菌，即得培养基；

[0075] (2)液体菌种培养

[0076] 液体菌种分一级液体种子、二级液体种子，培养基均为(g/100ml)：蛋白胨3％，麦芽糖4％，党参提取物15％，枸杞提取物16％，磷酸氢二钾0.4％，硫酸镁0.5％，马铃薯16％；培养基制备方法为：将马铃薯粉碎，加水提取得到提取液，与上诉其余成份混合，定容，用氢氧化钠或盐酸调PH值到6.0，灭菌，既得；

[0077] 将斜面菌种转接入装有培养基的摇瓶中，进行一级液体种子培养，培养温度为25℃，摇床转速155转/分钟，培养时间5天，即得一级液体种子；

[0078] 将培养好的一级液体种子转接到装有培养基的摇瓶中进行二级液体种子培养，二级液体种子的培养基配方与培养条件与一级液体种子相同，培养时间7天，即得二级液体种子；

[0079] (3)块菌深层发酵：

[0080] 其中发酵罐培养基(g/100ml)：麦芽糖9％，蛋白胨2％，党参提取物9％，枸杞提取物12％，磷酸氢二钾0.6％，硫酸镁0.4％，马铃薯18％，调PH值为6；

[0081] 将二级液体种子接种到装有上述培养基发酵罐中，接种量为13％，培养温度28℃，搅拌转速185转/分钟，发酵24小时后，每隔16小时取发酵液样镜检，当每毫升培养液内含有800-1000个块菌菌株时，发酵培养结束，即得深层发酵块菌菌液；

[0082] (4)块菌发酵液与咖啡流浸膏的混配发酵：

[0083] 将咖啡豆用石灰乳碱化，然后粉碎至45-55目，加入加入乙酸乙酯，提取，提取液过滤，浓缩，得到咖啡豆浸膏，用注射用水将咖啡豆浸膏调至含水量36％，以纳豆芽孢杆菌和嗜酸乳杆菌，以1∶1的比例进行混种发酵；将混种发酵咖啡流浸膏灭菌，将深层发酵得到的块菌菌液加入流浸膏中，其中深层发酵块菌菌液与混种发酵咖啡流浸膏按重量比19∶9混合；培养温度26℃，搅拌机转数155转/分钟，连续发酵9天，发酵结束后，将发酵液浓缩，干燥，制粒，封装既得最终产品。

[0084] 其中食品包括饮料。

[0085] 药理试验例

[0086] 试验1提高免疫力试验

[0087] 试验动物：BALB/C雄性小鼠，体重18-20g。

[0088] 试验药物：

[0089] 药物1组：天然块菌；

[0090] 药物2组：实施例1得到产品。

[0091] 药物3组：实施例2得到产品。

[0092] 药物4组：实施例3得到产品。

[0093] 试验方法：取小鼠，随机分组，事先在小鼠造模为免疫力低下，正常组不造模，造模成功开始给药，对照组给予生理盐水0.2ml/20g。给药1-4组组灌胃给药，给药量3g原料/kg，连续给药30天，停药后24小时断头放血处死小鼠，在无菌条件下取出脾脏，用1640培6
养液(含10％小牛血清)制成脾细胞悬液，并将小鼠脾细胞调整到5×10 细胞/m1，加到96孔培养板中，每孔100ul，每个脾加双份(即一个加ConA，一个不加ConA)。ConA 20ul(浓度为100ug/ml)，1640培养液80ul，使每孔至200ul体积，于5％CO237℃恒温箱内培养72小时，终止培养前24小时，每孔加3H一TdR3.7×109(iucr)。用细胞收集器(TITERTEK CELL HARVESTER 550)收集细胞于49型玻璃纤维滤纸上，依次用蒸馏水、5％三氨醋酸、无水乙醇洗涤，将滤纸片置60℃温箱烘干，加到含5ml闪烁液的杯内，经液闪仪(BECKMEN LS 9800)测参入放射性活度(cpm)，然后计算刺激指数(SI)，即：SI＝加入ConA孔cpm/未加入ConA孔cpm。

[0094] 表1不同药物对免疫力低下小鼠脾淋巴细胞转化的影响

[0095]组别 刺激指数
正常组 0.698±0.121**
对照组 0.114±0.058