包含二甲双胍和α-糖苷酶抑制剂的口服制剂及其制备方法

摘要

本发明提供了一种口服制剂，该组合物包含有通过将初级湿颗粒涂覆α-糖苷酶抑制剂和羟基丙基纤维素的混合水溶液而制备的二级湿颗粒，其中初级湿颗粒通过将包含二甲双胍和羟基丙基纤维素的混合粉末与作为粘结溶液的羟基丙基纤维素水溶液结合制成。此外，本发明提供了一种用于制备口服制剂的方法，包括以下步骤：将二甲双胍和羟基丙基纤维素的混合粉末注射到流化床成粒器中，并将羟基丙基纤维素的水溶液喷洒到混合粉末上以制造初级湿颗粒；并在流化床成粒器中将α-糖苷酶抑制剂和羟基丙基纤维素的混合水溶液喷洒到初级湿颗粒上以制造出二级湿颗粒。

权利要求

1.一种口服制剂，包括通过将初级湿颗粒涂覆α-糖苷酶抑制剂即伏格列波糖和羟基丙基纤维素的混合水溶液而制造的二级湿颗粒，其中初级湿颗粒通过将包含盐酸二甲双胍和羟基丙基纤维素的混合粉末与作为粘结溶液的羟基丙基纤维素水溶液结合制成，以100重量份的二甲双胍计，初级湿颗粒包含有1-50重量份的羟基丙基纤维素，且以100重量份的α-糖苷酶抑制剂计，α-糖苷酶抑制剂和羟基丙基纤维素的混合水溶液包含有

500-5000重量份的羟基丙基纤维素。

2.根据权利要求1所述的口服制剂，其特征在于，每剂量中盐酸二甲双胍的含量为

250-1000mg，伏格列波糖的含量为0.1-0.4mg。

说明书

包含二甲双胍和α-糖苷酶抑制剂的口服制剂及其制备方

法

技术领域

[0001] 本发明涉及一种包含二甲双胍和伏格列波糖的口服制剂，其中该口服制剂用于治疗II型糖尿病，并涉及它的制备方法。更具体地，本发明涉及一种口服制剂，其能够改善病人的服药适应性，因为它容易服用并且具有等于或大于二甲双胍与伏格列波糖作为单独制剂共同施用情况下的效果。

背景技术

[0002] 作为非胰岛素依赖性糖尿病的II型糖尿病，是最常见的一种代谢疾病，它在全球的患病率约为5%。此外，据预计，从现在到2010年间，II型糖尿病患病率会稳定上升到7%，从现在开始10年内，糖尿病病人总数将上升到约2倍。

[0003] II型糖尿病的病理生理学的特征在于胰岛素分泌机能障碍和胰岛素抗性。胰岛素抗性会从胰腺中的β-细胞中引起过高的胰岛素分泌，从而引起血胰岛素增多。血胰岛素增多在糖尿病诊断前就已存在，然后用作各种其他疾病的独立的风险因子。在该过程中，β-细胞的功能最后受到损害，从而引起胰岛素的缺乏。因此，将会发生特征在于受损的餐后葡萄糖耐量以及空腹的高血糖症的糖尿病。当糖尿病长时间持续时，最终将会发生各种慢性并发症，如微脉管并发症，例如视网膜变性、神经变性病和心脏病，或者大的动脉并发症，例如心血管动脉、脑血管动脉或外周动脉的并发症。慢性并发症使病人的生活质量恶化，并使死亡率大大增加。因此，糖尿病的管理在于防止慢性并发症，也就是说，延迟慢性并发症的发作和发展。

[0004] 由于糖尿病，有可能经历慢性并发症的糖尿病病人应该进行一系列的糖尿病治疗，以保持糖化血红蛋白（HbAlc）正常或几乎正常，以便它们将得到好的代谢调节。根据糖尿病控制和并发症试验以及英国前瞻性糖尿病研究（UKPDS）的结果，很好地表明血糖的严格控制会降低因糖尿病引发的慢性并发症的危险。然而，在临床实践中，许多II型糖尿病病人没能将血糖水平控制到低于美国糖尿病学会建议的目标水平。此外，UKPDS的分析结果表明，口服降血糖药的单一治疗的失效率随着时间增加，从而为了更有效地控制血糖，与其他试剂的联合治疗不可避免。

[0005] 在联合治疗中，即便是适当药物的选择也会分别根据个人的情况而有所不同，但考虑到互补效应，优选联合彼此具有不同机理的药物。在这方面，可以说α-糖苷酶抑制剂和二甲双胍的联合是理想的联合治疗，因为这一联合能够同时控制胰岛素抗性和餐后的血糖升高，这些是II型糖尿病的两种病理机理。实际上，根据许多的临床试验（Clinical therapeutics vol.25 No.12 2003, Diabetes Care vol.24 No.6 June 2001）可以证明，与每个单独治疗相比，α-糖苷酶抑制剂和二甲双胍的联合治疗在血糖的控制方面是有效的。

[0006] 然而，在临床实践中，对于至少两种口服降血糖药的联合治疗，病人难以持续很长时间。最后，在需要口服降血糖药联合治疗的大量II型糖尿病病人中，低的用药依从性是控制血糖失败的一个重要因素。

[0007] 因此，由两类口服降血糖药配制成一种制剂的复合物是便于服用的，因此，它能改善病人的用药依从性并成为用于长时间有效控制血糖的替代物。根据在口服降血糖药的联合治疗中用于比较病人对给药方式的依从性的研究，可以证明，单独服药的实验对象组的依从性仅仅为54%，而服用复合物的实验对象组的依从性为77%，因此，这种复合物优于简单的潜力的优势是，可为大量需要长时间联合治疗的II型糖尿病病人提供实际的好处。

[0008] 二甲双胍，一种用于糖尿病的双胍药物，以盐酸盐的形式销售，注册商标为格华止（Glucophage）。盐酸二甲双胍是一种药物，它能通过降低肝脏中的糖合成并最终增加吸收来提高胰岛素的敏感性。此外，它是具有50-60%口服生物利用度的药物，由于1.5-4.5小时的不同的生物半衰期，应该每天3次，重复服用500mg，以保持有效的血浆浓度。盐酸二甲双胍几乎主要被吸收到上部胃肠道中，并较少渗透到下部胃肠道如小肠、大肠、结肠等中。因此，包含二甲双胍的制剂不能迅速释放二甲双胍，然后随着时间流逝移动到胃肠道的下部，使得二甲双胍的生物利用度下降。

[0009] 此外，α-糖苷酶抑制剂，如伏格列波糖等，是一种用于非胰岛素依赖性糖尿病的药物，并通过与常规磺酰脲类的不同联合方式，通过胃肠道细胞中存在的抑制性α-糖苷酶抑制血糖向葡萄糖转变，显著抑制就在餐后的血糖的快速增长，从而具有优良的低血糖效果。此外，它能显示血糖的充分调节效果而没有低血糖症，从而增加病人的依从性。α-糖苷酶抑制剂也应该会抑制就在餐后的血糖浓度的急剧上升，从而它应从制剂中快速的释放，然后被吸收，以产生足够的效果。

[0010] 同时，在施用的药物量方面，二甲双胍非常高，达到每次250-1000mg，作为α-糖苷酶抑制剂的伏格列波糖非常低，为每次0.2-0.3mg。因此，当制备上述两种药的复合制剂时，药物之间的混合均匀度和溶解特性因少量的伏格列波糖难以表现出来，必要药物的吸收条件可根据药物的每种药物代谢动力学和药物动力学性能受到影响。

[0011] 因此，当制备包含至少两种口服低血糖药的复合制剂以增加病人服药的适应性，同时有效控制糖尿病病人的血糖时，有必要研制效果等于或大于二甲双胍和伏格列波糖作为单独药物共同施用的情况的制剂。

发明内容

[0012] 因此，本发明的目的是提供一种包含二甲双胍和α-糖苷酶抑制剂的口服制剂，其中，该口服制剂在药物之间具有均匀的混合度和溶解特性，且具有等于或大于每种药物作为单独药物共同施用的情况的效果。

[0013] 此外，本发明的目的是提供一种用于制备包含二甲双胍和α-糖苷酶抑制剂的口服制剂的方法。

[0014] 为了完成上述目的，本发明提供了一种口服制剂，其包含有通过用α-糖苷酶抑制剂和羟基丙基纤维素的混合水溶液涂覆初级湿颗粒制成的二级湿颗粒，其中，所述初级湿颗粒通过将包含二甲双胍和羟基丙基纤维素的混合粉末与用作粘结溶液的羟基丙基纤维素水溶液组合制成。

[0015] 此外，本发明提供了一种用于制备根据本发明的口服制剂的方法，包括：

[0016] 将二甲双胍和羟基丙基纤维素的混合粉末注射到流化床成粒器中，并将羟基丙基纤维素的水溶液喷洒到混合粉末上以制造初级湿颗粒；并在流化床成粒器中将α-糖苷酶抑制剂和羟基丙基纤维素的混合水溶液喷洒到初级湿颗粒上以制造出二级湿颗粒。

[0017] 下面将对本发明进行更详细的说明。

[0018] 根据本发明的口服制剂是一种包含二甲双胍和α-糖苷酶的制剂，并且是一种在二甲双胍和α-糖苷酶抑制剂之间表现出均匀混合度和溶解特性以及表现出效果等于或大于每种活性成分单独施用的情况的溶解模式的制剂。

[0019] 根据本发明的制剂的特征在于包含有通过用α-糖苷酶抑制剂和羟基丙基纤维素的混合水溶液涂覆初级湿颗粒制成的二级湿颗粒，其中所述初级湿颗粒通过将包含二甲双胍和羟基丙基纤维素的混合粉末与用作粘结溶液的羟基丙基纤维素水溶液相组合而制成，以具有如上所述的溶解模式。制剂不具有二甲双胍和α-糖苷酶抑制剂均匀分布在制剂中的形式，而是具有α-糖苷酶抑制剂均匀分布在二甲双胍中的形式，因为二甲双胍和羟基丙基纤维素均匀混合在初级湿颗粒中，并且每个颗粒涂覆有α-糖苷酶抑制剂和羟基丙基纤维素。因此，可以预期制剂之间的活性成分的混合度存在小的偏差。此外，α-糖苷酶抑制剂应该被涂覆到颗粒的外部，因为它在饭前服用，然后由于它具有的特性而应该显示出快速的效果，且作为亲水聚合物的羟基丙基纤维素和它一起分布，使得当施用时它能快速地从颗粒的外部崩解并释放，从而至少显示出单独施用复合制剂中的α-糖苷酶抑制剂的效果。在崩解包含α-糖苷酶抑制剂的涂层后，包含二甲双胍的初级湿颗粒也能快速崩解并与羟基丙基纤维素一起洗脱。因此，与最近市场上可购到的每种的单独制剂二甲双胍和α-糖苷酶抑制剂相比，根据本发明的口服制剂能够快速地分别释放组分，然后能在血液中被快速地吸收。

[0020] 为了制备用于本发明的口服制剂的初级湿颗粒和二级湿颗粒，能够使用药理学领域中通常使用的制备颗粒的方法。优选地，初级湿粒子可通过在喷洒羟基丙基纤维素的混合水溶液的同时在流化床成粒器中流化二甲双胍和羟基丙基纤维素的混合粉末制成，然后二级湿粒子可通过在流化床成粒器中将α-糖苷酶抑制剂和羟基丙基纤维素的混合水溶液用作粘结溶液喷洒到初级颗粒上制成。

[0021] 对于根据本发明的口服制剂，以100重量份的二甲双胍计，初级湿颗粒可包括1-50重量份的羟基丙基纤维素。以100重量份的α-羟基丙基纤维素计，α-糖苷酶抑制剂和羟基丙基纤维素的混合水溶液可包含有500-5000重量份的羟基丙基纤维素。以活性成分计，羟基丙基纤维素的量可根据需要的颗粒的大小和强度、需要粒子的比表面积、活性成分的量、需要活性成分的溶解速度等变化。

[0022] 根据本发明的口服制剂可以是二级颗粒原样的颗粒，并可以是更多制剂的类型，也就是说包含颗粒的胶囊或药片。根据药物学领域中通常使用的胶囊的制造方法，胶囊可通过将二级颗粒单独填充或者将二级颗粒与赋形剂如淀粉、乳糖、纤维素等一起填充在胶囊中制成。本发明的口服制剂优选是药片，药片可通过将二级颗粒与润滑剂压片来制成。润滑剂可选自硬脂酸镁、硬脂酸、棕榈酸、滑石、硬脂酸钙、巴西棕榈蜡和它们的组合。

[0023] 包含在本发明的口服剂量制剂中的作为活性成分的二甲双胍可以是二甲双胍或二甲双胍药学上可接受的盐，优选是盐酸二甲双胍。作为另一活性成分的α-糖苷酶抑制剂可以是阿卡波糖、米格列醇或伏格列波糖，但不限于此，优选是伏格列波糖。

[0024] 根据本发明的口服剂量制剂每剂量包括250-1000mg的盐酸二甲双胍和0.1-0.4mg的伏格列波糖，剂量可根据待制造的药物的强度适当增加或减少。为了每种组分的有效作用，口服制剂可在餐时或餐后服用。

[0025] 根据以下的实验实施例，能够证实的是，与传统的作为单独的二甲双胍制剂的格华止（glucophage）相比，根据本发明的口服剂量制剂在pH 1.2-7的介质中更加快速地释放二甲双胍，并释放等于或大于单一伏格列波糖制剂倍欣（basen）的伏格列波糖。此外，对于通过比格犬的生物利用度试验，能够证实的是，与格华止相比，根据本发明的口服剂量制剂具有等于或大于二甲双胍的生物利用度。因此，根据本发明的口服剂量制剂可以是用于控制血糖的复合制剂，该制剂能够显示出等于或大于每个活性成分作为单独药物共同施用情况的效果。

[0026] 本发明的另一方面中，本发明提供了一种用于制备根据本发明的口服制剂的方法，包括：

[0027] 将二甲双胍和羟基丙基纤维素的混合粉末注射到流化床成粒器中，并将羟基丙基纤维素的水溶液喷洒到混合粉末上以制造初级湿颗粒；

[0028] 在流化床成粒器中将α-糖苷酶抑制剂和羟基丙基纤维素的混合水溶液喷洒到初级湿颗粒上以制造出二级湿颗粒。

[0029] 使用用于制备初级湿颗粒和二级湿颗粒的流化床成粒器的颗粒制备在50-70℃的温度条件下进行。

[0030] 在制备初级湿颗粒和二级湿颗粒后，优选分别对它们筛分，以将75-500μm大小的粒子用于以下步骤。

[0031] 用于制备口服制剂的方法，还包括通过将上述制备的二级湿颗粒与用来制造药片的润滑剂一起压片来制备药片的步骤。

[0032] 润滑剂可选自硬脂酸镁、硬脂酸、棕榈酸、滑石、硬脂酸钙、巴西棕榈蜡和它们的组合，但不限于此。

[0033] 效果

[0034] 本发明可提供用于控制血糖的复合制剂，其中该复合制剂在制剂之间具有均匀的混合度和溶解速度，并且能够显示出等于或大于二甲双胍与α-糖苷酶抑制剂作为单独药物共同施用的情况的效果。复合制剂在控制长期所需的糖尿病的血糖方面非常有效，因为它能通过两种药物的共同施用有效控制糖尿病病人的血糖，以及能够增加病人服药的适应性。

附图说明

[0035] 图1是根据本发明的一实施方式的药片随着时间过去在水中的溶解试验结果的图示，使用格华止作为对照。

[0036] 图2是根据本发明的一实施方式的药片随着时间过去在pH6.8的磷酸盐缓冲液中的溶解试验结果的图示，使用格华止作为对照。

[0037] 图3是根据本发明的一实施方式的药片随着时间过去在pH4.0的醋酸盐缓冲液中的溶解试验结果的图示，使用格华止作为对照。

[0038] 图4是根据本发明的一实施方式的药片随着时间过去在pH 1.2的缓冲液中的溶解试验结果的图示，使用格华止作为对照。

[0039] 图5是在将根据本发明的一实施方式的药片通过口服施用给比格犬后随着时间过去二甲双胍的血浆浓度测量结果的图示，使用格华止作为对照。

[0040] 主要成分的详细说明

[0041] F0801：通过实施例7制成的药片 。

具体实施方式

[0042] 下面将参照下列实施例对本发明进行更详细地说明。然而，下述实施例仅用于阐述本发明，本发明的保护范围并不限制于此。

[0043] 实施例1：二甲双胍和伏格列波糖复合制剂的制备（1）

[0044] 300g的盐酸二甲双胍和36g的羟基丙基纤维素均匀混合；使用20目网孔筛分；加入到流化床成粒器中；然后在60℃预热10分钟。6g的羟基丙基纤维素溶解在120mL的水中，制备粘结溶液；粘结溶液以每分钟7mL的速度喷洒，由此制备初级颗粒；然后使用20目网孔筛分初级颗粒。

[0045] 0.18g的伏格列波糖和6g的羟基丙基纤维素通过充分搅拌溶解在120mL水中，然后充分喷洒到通过上述方式制成的颗粒上，以制备二级颗粒。通过使用20目网孔筛分二级颗粒，然后干燥，结束。

[0046] 实施例2：二甲双胍和伏格列波糖复合制剂的制备（2）

[0047] 300g的盐酸二甲双胍和36g的羟基丙基纤维素均匀混合；使用20目网孔筛分；加入到流化床成粒器中；然后在60℃预热10分钟。6g的羟基丙基纤维素溶解在120mL的水中，制备粘结溶液；粘结溶液以每分钟7mL的速度喷洒，由此制备初级颗粒；然后使用20目网孔筛分初级颗粒。

[0048] 0.12g的伏格列波糖和6g的羟基丙基纤维素通过充分搅拌溶解在120mL水中，然后喷洒到通过上述方式制备的颗粒上，以制备二级颗粒。通过使用20目网孔筛分二级颗粒，然后干燥，结束。

[0049] 实施例3：二甲双胍和伏格列波糖复合制剂的制备（3）

[0050] 300g的盐酸二甲双胍和36g的羟基丙基纤维素均匀混合；使用20目网孔筛分；加入到流化床成粒器中；然后在60℃预热10分钟。6g的羟基丙基纤维素溶解在120mL的水中，制备粘结溶液；粘结溶液以每分钟7mL的速度喷洒，由此制备初级颗粒；然后使用20目网孔筛分初级颗粒。

[0051] 0.36g的伏格列波糖和6g的羟基丙基纤维素通过充分搅拌溶解在120mL水中，然后喷洒到通过上述方式制成的颗粒上，以制备二级颗粒。通过使用20目网孔筛二次级颗粒，然后干燥，结束。

[0052] 实施例4：二甲双胍和伏格列波糖复合制剂的制备（4）

[0053] 300g的盐酸二甲双胍和36g的羟基丙基纤维素均匀混合；使用20目网孔筛分；加入到流化床成粒器中；然后在60℃预热10分钟。6g的羟基丙基纤维素溶解在120mL的水中，制备粘结溶液；粘结溶液以每分钟7mL的速度喷洒，由此制备初级颗粒；然后使用20目网孔筛分初级颗粒。

[0054] 0.24g的伏格列波糖和6g的羟基丙基纤维素通过充分搅拌溶解在120mL水中，然后喷洒到通过上述方式制成的颗粒上，以制备二级颗粒。通过使用20目网孔筛分二级颗粒，然后干燥，结束。

[0055] 实施例5：二甲双胍和伏格列波糖复合制剂的制备（5）

[0056] 将3g的硬脂酸镁润滑剂与通过实施例1制备的颗粒混合适当时间；然后压模成药片，药片具有椭圆形状，重量为585.3±30mg。每个药片包括平均0.3mg的伏格列波糖和500mg的盐酸二甲双胍。

[0057] 实施例6：二甲双胍和伏格列波糖复合制剂的制备（6）

[0058] 将3g的硬脂酸镁润滑剂与通过实施例2制备的颗粒混合适当时间；然后压模成药片，药片具有椭圆形状，重量为585.3±30mg。每个药片包括平均0.2mg的伏格列波糖和500mg的盐酸二甲双胍。

[0059] 实施例7：二甲双胍和伏格列波糖复合制剂的制备（7）

[0060] 将3g的硬脂酸镁润滑剂与通过实施例3制备的颗粒混合适当时间；然后压模成药片，药片具有椭圆形状，重量为292.8±15mg。每个药片包括平均0.3mg的伏格列波糖和250mg的盐酸二甲双胍。

[0061] 实施例8：二甲双胍和伏格列波糖复合制剂的制备（8）

[0062] 将3g的硬脂酸镁润滑剂与通过实施例1制备的颗粒混合适当时间；然后压模成药片，药片具有椭圆形状，重量为292.8±15mg。每种药片包括平均0.2mg的伏格列波糖和292.8±15mg的盐酸二甲双胍。

[0063] 试验实施例1

[0064] 基于格华止，对于由实施例7制备的药片进行溶解试验。溶解试验的条件如下：

[0065] 洗出液：纯水，pH 6.8的磷酸盐缓冲液，pH 4.0的醋酸盐缓冲液，pH 1.2的缓冲液。pH 1.2的缓冲液（用于崩解试验的第一溶液）通过将2.0g的NaCl溶解在7.0mL的c-HCl和水中成为1L，缓冲液是无色透明的，其pH约为1.2。pH 4.0的醋酸盐缓冲液（醋酸盐缓冲液）通过将0.05mol/L的醋酸溶液与0.05mol/L醋酸钠溶液（41:9）混合，然后调节到pH4.0制成。

[0066] 溶解设备：汉森溶解试验机（Hanson Dissolution Tester）(USA)[0067] 溶解速度：50 rpm

[0068] 溶解时间：60分钟

[0069] 试验液体的制备：10mL的洗出液在溶解试验开始后30分钟取出，然后用0.45μm膜过滤器过滤。5mL的第一滤液移出，然后取出5mL剩余液，加入到100mL体积的烧瓶中。通过用洗出液调整刻度线使用试验液。

[0070] 标准溶液的制备：准确称取50mg的标准品牌的二甲双胍，加入到20mL体积的烧瓶中，然后用洗出液调整刻度线。准确称取1mL的该溶液并添加到50mL体积的烧瓶中，然后用洗出液调整刻度线以用作标准溶液。

[0071] 操作：根据紫外线分光光度计方法分别在233nm处测量试验液和标准溶液的吸收度。

[0072] 根据上述溶解试验获得的结果显示在图1-4中。

[0073] 根据图1到图4，可以知道，与常规市售制剂的格华止相比，根据本发明的复合制剂能够在pH 1.2-7的介质中快速释放二甲双胍。

[0074] 试验实施例2：生物利用率测试

[0075] 生物利用度测试使用通过实施例5制备的药片进行，使用格华止作为对照并使用口服给药，如下：

[0076] 试验设备：

[0077] 涡旋混合器（Thermolyne，美国；37600型混合器）

[0078] 冷冻器（LASSELE Inc.；DY-110F）

[0079] 微型离心机（Hanil Co.，韩国；微型 17TR）

[0080] HPLC（SHISEIDO; NANOSPACE）

[0081] MS/MS (应用生物系统；API 5000)

[0082] 试验仪器

[0083] 分配器（Eppendorf）

[0084] 微量吸管（Gilson Co.，法国；P-20，P-100，P-200，P-1000）[0085] 试验方法

[0086] 原液的制备 ：在玻璃瓶中分别称量至少3mg的二甲双胍和IS（苯乙双胍），其中二甲双胍和IS（苯乙双胍）将用作标准材料，且5mL体积的小瓶用水和ACN清洗，然后干燥。然后，通过使用微量吸液管将它们溶解在甲醇中，浓度为1mg/1mL以用于试验。它们使用前在4℃保存。1mg/mL的二甲双胍原液用50%ACN稀释10倍，以制造出100μg/mol的原液，然后2倍稀释原液以制出50、25、12.5、6.25、3.13、1.56、0.78和0.39μg/mL的原液，以用于制备校准曲线。在那些原料溶液中，高、中、低浓度和LLQQ浓度用作验证样品。

[0087] 试验样品的预处理 ：10μL的IS（苯乙双胍，25ug/mL）加入到100μL的空白血浆中；通过使用涡流进行混合。然后，加入500μL的ACN，然后通过使用涡流混合。以13000rpm在离心机中使其于4℃离心分离5分钟，然后50μL的上层清液被移送到新管中；向其中加入500μL流动相；然后通过使用涡流混合1分钟。在离心分离（13000rpm，4℃，2分钟）并过滤（0.2um）后，用LC/MS/MS对其分析。

[0088] HPLC条件 ：

[0089] 柱-CAPCELL PAK CR 5u（50x2.00mm）

[0090] 柱温度-40℃

[0091] 洗出液-ACN（0.1%甲酸）：10mM乙酸铵（0.1%甲酸）-250:50

[0092] 流速-0.3mL/分钟

[0093] 注射体积-2 μL

[0094] 运行时间-3.0分钟

[0095] MS/MS条件 ：

[0096] 极性：ES+

[0097] 入口电压：10V

[0098] 去簇（declustering）电压：81v（二甲双胍），86v（苯乙双胍）[0099] 碰撞能量：35V（二甲双胍），25V（苯乙双胍）

[0100] 碰撞池出口电压：14V(二甲双胍)，10V (苯乙双胍)

[0101] 碰撞气体：10

[0102] 门帘气体：20

[0103] 离子源气体 1：50

[0104] 离子源气体 2：50

[0105] 离子喷电电压：5500

[0106] 温度：450℃

[0107] 通过根据上述条件的生物利用度试验获得的结果显示在图2中。

[0108] 根据图2中的结果，能够知道，根据本发明的复合制剂具有等于或大于常规市售制剂倍欣（Basen）的生物利用度。

[0109] 试验实施例3：稳定性试验

[0110] 用根据实施例5制造的药片、格华止和倍欣进行稳定性试验，使用如下的条件：

[0111] 试验条件：加速稳定性试验（45℃，75%）

[0112] 试验期：6个月

[0113] 试验方法：

[0114] 试验液的制备

[0115] 取出10片药片；精确加入200mL的流动相；摇动混合以完全崩解；然后离心。用0.45μm膜过滤器过滤上层清液。取出1mL的第一滤液，然后将以下溶液用作样品。

[0116] 标准溶液的制备

[0117] 精确称取约10mg的伏格列波糖用于定量分析，然后将其溶解到流动相中成为精确的20mL。然后分别称取2mL加入到100mL体积的烧瓶中，然后用流动相调节刻度线。

[0118] 液相色谱的操作条件

[0119] 检测器：荧光分光光度计（激发波长：350nm，发射波长：430nm）[0120] 柱：YMC-Pack 聚胺（4.6mm I.D. x 250mm L，5um）

[0121] 柱温度：25℃

[0122] 流动相：乙腈：磷酸钠缓冲液的混合溶液（pH 6.5）=1：1

[0123] 磷酸钠缓冲液（pH 6.5）的制备包括将500mL的通过将水加入到1.38g的磷酸二氢钠一水合物中溶解制备的溶液与通过将500mL的通过将水加入到1.42g的磷酸氢钠中溶解制备的溶液混合，然后将其pH调节为6.5。

[0124] 流速：调节保持伏格列波糖时间大约为15分钟。

[0125] 荧光试剂：6.25g的牛磺酸和2.56g的高碘酸钠溶解在水中成为1L。

[0126] 用于反馈线圈的恒温槽的温度：100℃

[0127] 用于反馈线圈的恒温槽的温度：25℃

[0128] 获得的结果显示在以下的表1中。

[0129] 表1

[0130]倍欣® 实施例5的制剂中的伏格列波糖 格华止® 实施例5的制剂中的二甲双胍开始 - 98.92 - -
应力试验4周 - 95.65 - -
加速试验2个月 - 97.54 - -
加速试验4个月 102.63 98.52 - -
加速试验6个月 102.20 98.79 97.47 98.41

[0131] 根据上述的表1，能够证实的是，在保存稳定性方面，根据本发明的制剂具有等于或大于每种组分的单一制剂的稳定性。