竹节参皂苷V的降血脂作用

摘要

竹节参皂苷V的降血脂用途，可与药学上可接受载体混合。

权利要求

1.竹节参皂苷V在制备降血脂的药物中的用途。

2.根据权利要求1中所述的用途，其特征在于主要是通过对胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白的降低作用，以及对高密度脂蛋白的升高作用达到的。

3.根据权利要求1中所述的用途，其特征在于竹节参皂苷V在制备预防和治疗高血脂症以及高血脂症导致的动脉粥样硬化和冠心病的药物中的用途。

4.根据权利要求1的用途，其特征在于其最终实施形式包括竹节参皂苷V与药学上可接受的载体或者常规食用辅料。

说明书

竹节参皂苷V的降血脂作用

技术领域

[0001] 本发明的涉及竹节参皂苷V的降血脂用途。

背景技术

[0002] 高脂血症(hyperlipidemias)主要是以血浆中胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)升高，高密度脂蛋白(HDL-C)降低为表现的一种血脂代谢紊乱状态，它是动脉粥样硬化(AS)和冠心病(CHD)等心脑血管疾病发生的重要危险因素。降低血脂可以延缓AS的进展，进而降低心脑血管疾病的发生率和死亡率。降低胆固醇(TC)可使冠心病的危险性相应降低。目前虽多种化学药物有明确的降脂作用，但长期应用多有不同程度的副作用。如他汀类药物长期用药，极易造成肝损伤，故研究开发疗效肯定毒副作用低的中药新药具有重要意义。

[0003] 而中医认为，高血脂症主要是由气滞血瘀和气滞痰浊造成的，临床上常通过通气化瘀，降浊化痰进行辨证施治。在用药上，中医常采用天然药食两用药材，因其具有降脂作用确切，毒副作用小，材料容易获得且价格便宜等优势，逐渐受到人们重视。然而，治疗高血脂症的中药常常是药味众多的汤药，服用携带均不方便。大量源于汤药的中成药也因为药味众多而难以控制质量。因此，人们期望通过对中医药的研究，从植物中找出单一的安全有效的活性部位或活性单体，用于高血脂症的治疗。

[0004] 竹节参为五加科人参属多年生草本植物Panax japonicus C1 A1 Meyl的干燥根。原是一种名贵的民间中草药，现已收载于《中华人民共和国药典》，药用功能类似人参和三七。竹节参生于山坡沟边、阴湿地区或岩石沟涧旁。主要分布于贵州、湖南、云南、安徽、江西、湖北等地。每年秋季采挖，除去茎叶，分出肉质根，将根茎除去外皮，晒干或阴干即可入药。始载于《本草纲目拾遗》。竹节参甘、微苦，温。具有活血化瘀、消肿止痛、滋补强壮等多种功效。既有类似人参的滋补强壮作用，又有类似三七的散瘀止痛、止血、祛痰作用，主要用于病后虚弱，劳嗽咳血，咳嗽痰多，跌打损伤。竹节参含有多种皂苷、挥发油、糖类和多种氨基酸。

[0005] 本发明要解决的技术问题是研究竹节参皂苷V的降血脂用途。为解决上述问题，提供技术方案如下。

[0006] 竹节参皂苷V在降血脂方面的运用。

[0007] 所述降血脂方面的运用包括对高血脂症及高血脂症导致的动脉粥样硬化和冠心病的预防和治疗。

[0008] 所述组合物包括竹节参皂苷V与药学上可接受的载体或者常规食用辅料。

[0009] 本发明对高血脂实验动物的TG、TC和LDL-C有显著的降低作用，对HDL-C有显著的升高作用。本发明包括用竹节参皂苷V与药学上可接受载体混合。

[0010] 药学上可接受的载体包括口服制剂辅料或胃肠外途径给药的辅料。给药途径可以是口服、注射、局部给药等。根据本发明的技术方案，该组合物可以是口服制剂或注射用制剂，其中口服制剂包括胶囊剂、软胶囊剂、颗粒剂、口服液、片剂、滴丸等。所用辅料包括：淀粉、蔗糖、乳糖、糖粉、葡萄糖、甘露醇、木糖醇、聚乙二醇、异丙醇、吐温-80、甘油、丙二醇、微晶纤维素钠、糊精、环糊精、氯化钠、维生素C、半胱氨酸、柠檬酸、硫代硫酸钠、亚硫酸钠、硬脂酸盐和明胶等常规辅料，制剂的后期制备工艺及设备均属制药领域的常规技术，本发明对此不作限定，故在此不予详述。

[0011] 本发明组合物口服给药的剂量为2-3次/天，0.25～0.50g/次。

[0012] 本发明竹节参皂苷V提取物是从天然的中药竹节参中提取得到的，竹节参是常用的中草药，有长期的中医用药经验，该药使用安全性高，无明显毒性作用记载。

[0013] 竹节参皂苷V具有确切的降低高血脂实验动物TG、TC和LDL-C的显著性作用，具有升高HDL-C的显著性作用，且不具有肝毒性，较之辛伐他定相对安全。因此，竹节参皂苷V有开发成降脂药物的前景。

[0014] 实施例一

[0015] 竹节参皂苷V的制备

[0016] 竹节参皂苷V的提取、纯化和制备：取竹节参粗粉，加入10倍量的60％的乙醇，浸泡2小时，水浴回流提取2小时，滤过，得滤液。药渣再用10倍量的60％的乙醇回流提取2次，每次2小时，滤过。合并3次滤液，减压回收乙醇至无醇味，配制成药材∶药液(g/ml)为0.5∶1的溶液。上已经处理好的HPD-100大孔树脂柱，依次用水、60％的乙醇洗脱。合并60％的乙醇洗脱液，回收溶剂至近干，经65℃减压干燥，得到竹节参总皂苷。竹节参总皂苷再经ADS-7大孔树脂柱纯化，收集50％-90％的乙醇洗脱液，减压回收乙醇，减压干燥，得竹节参皂苷V，其纯度大于90％。

[0017] 实施例二

[0018] 竹节参皂苷V的降血脂实验

[0019] 1.实验材料

[0020] 1.1药物及试剂：0.5％CMC-Na溶液，小鼠灌胃针管，离心管，新鲜鸡蛋若干只，辛伐他汀片(上海信谊万象药业股份有限公司，批号：080201)，血脂康胶襄(北京北大维信生物科技有限公司，批号：20080708)，甘油三酯测定试剂盒(北京北化康泰临床试剂有限公司，批号：20080610)，总胆固醇试剂盒(北京北化康泰临床试剂有限公司，批号：20080610)，低密度脂蛋白测定试剂盒(北京北化康泰临床试剂有限公司，批号：20080610)。竹节参皂苷V(Z1)为本实验室自制。

[0021] 1.2实验主要仪器：TDL80-2B型低速离心机，酶标仪，TGL-16高速台式冷冻离心机。

[0022] 1.3实验动物：昆明种小鼠，雌雄各半，体重18-22g。

[0023] 2.供试液样品

[0024] 实施例一中制备的竹节参皂苷V。

[0025] 3.试验样品液的配制

[0026] 3.175％蛋黄乳溶液制备：取新鲜鸡蛋若干只，底部开一小口空出蛋清，蛋黄2轻放于空烧杯中.将针管探入蛋黄薄膜内，吸取蛋黄液，置100ml的量筒中，量取75ml蛋黄液，以生理盐水稀释至刻度，用磁力搅拌器搅拌蛋黄乳溶液10分钟，使蛋黄乳溶液均匀，减小误差，造模时临时配制。

[0027] 3.2各供试样品液的配制：

[0028] 3.2-1.CMC-Na溶液的配制：精密称取5gCMC-Na，1000mL蒸馏水，配制成浓度为0.5％的CMC-Na溶液。

[0029] 3.2-2.血脂康药液的配制：精密称取5g内容物，以0.5％CMC-Na混悬，定容至100ml，配制成浓度为0.05g/ml的药液样品。

[0030] 3.2-3.辛伐他汀药液的配制：精密称取14g辛伐他汀片(含辛伐他汀70mg)，100ml0.5％CMC-Na混悬，配成浓度为0.0007g/ml药液样品。

[0031] 3.2-4.低剂量竹节参皂苷V药液的配制：精密称取0.375g竹节总皂苷V。100ml0.5％CMC-Na混悬，配制成浓度为0.00375g/ml的药液样品。

[0032] 3.2-5.高剂量竹节参皂苷V药液的配制：精密称取0.75g竹节参皂苷V，100ml0.5％CMC-Na混悬，配制成浓度为0.0075g/ml的药液样品。

[0033] 4.实验方法

[0034] 昆明种小鼠72只，18-22g，雌雄各半，随机分成6组，每组12只。分为正常空白对照组、高脂模型组、辛伐他汀阳性对照组、血脂康阳性对照组、竹节参皂苷V高剂量组，竹节参皂苷V低剂量组。灌胃给药。正常对照组和高脂模型组每日按0.2ml/10g灌胃0.5％CMCNa，给药组每日灌胃给予0.2ml/10g体积的相应药物，给药剂量分别为：血脂康对照组为1g/kg、辛伐他汀对照组为0.014g/kg、竹节参皂苷V高剂量组为0.15g/kg、竹节参皂苷V低剂量组为0.075/kg。共给药14天。最后一次给药2小时后，各组均腹腔注射75％蛋黄乳生理盐水溶液0.2ml/10g造成实验性高脂血症。小鼠造模20小时后，采用摘眼球采血法，离心分离血清，按照总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白，高密度脂蛋白试剂盒说明书操作，分别测定TC、TG、LDL-C和HDL-C的含量。实验结果如下表1-4所示。

[0035] 表1.竹节参皂苷V(ZV)对TG影响的实验结果(X±SD)

[0036]

[0037] 注：*表示模型与空白相比有显著性差异，**表示模型与空白相比有极显著性差▲ ▲▲异。 表示各给药组与模型组相比有显著性差异， 表示各给药组与模型组相比有极显著性差异。下同。

[0038] 表2.竹节参皂苷V(ZV)对TC影响的实验结果(X±SD)

[0039]

[0040] 表3.竹节参皂苷V(ZV)对LDL-C影响的实验结果(X±SD)

[0041]

[0042] 表4竹节参皂苷V(ZV)对HDL-C影响的实验结果(X±SD)

[0043]

[0044]

[0045] 5.结果与讨论

[0046] 模型与空白组相比，TG、TC、LDL-C的浓度均有极显著性升高(p＜0.01)，HDL-C浓度有显著性降低(p＜0.05)，结果表明实验动物造模成功。在TG的浓度变化方面，与模型组相比，血脂康组、辛伐他汀组、竹节参皂苷V高剂量组，均有极显著性降低作用(p＜0.01)；竹节参皂苷V低剂量组有显著性降低作用(p＜0.05)。在TC的浓度变化方面，与模型组相比，辛伐他汀组、竹节参皂苷V高剂量组，均有极显著性降低作用(p＜0.01)；而血脂康组、竹节参皂苷V低剂量组，具有显著性降低作用(p＜0.05)。在LDL-C的浓度变化方面，与模型组相比，血脂康组、辛伐他汀组、竹节参皂苷V高剂量组，均有极显著性降低作用(p＜0.01)，而竹节参皂苷V低剂量组，具有显著性降低作用(p＜0.05)。在HDL-C的浓度变化方面，与模型组相比，竹节参皂苷V高剂量组，有极显著性升高作用(p＜0.01)，而竹竹节参皂苷V低剂量组、辛伐他汀组，具有显著性升高作用(p＜0.05)，血脂康组没有显著性升高作用。

[0047] 实验结果显示，竹节参皂苷V具有确切的降低高血脂实验动物TG、TC和LDL-C的显著性作用，有升高HDL-C的显著性作用，具有治疗实验动物高血脂症的确切作用。

[0048] 实施例三

[0049] 竹节参皂苷V与辛伐他汀致肝损伤毒副作用比较

[0050] 1.实验材料

[0051] 1.1药品试剂

[0052] 辛伐他汀片(上海信谊万象药业股份有限公司，批号：080201)，谷丙转氨酶(ALT)临床诊断试剂盒(上海科欣生物技术研究所，批号20090401)，谷草转氨酶(AST)临床诊断试剂盒(上海科欣生物技术研究所，批号20090301)。

[0053] 1.2实验仪器

[0054] 721分光光度计(上海菁华仪器厂)，LXJ-II离心机(上海医用分析仪器厂)，Satrious电子天平(德国)；恒温水浴锅(上海亚荣生化仪器厂)；移液枪；，低温高速离心机(天美Z323K)。

[0055] 1.3实验动物

[0056] 昆明种雄性小白鼠，体重18～22g，由中国药科大学动物中心提供。

[0057] 2.实验样品的制备

[0058] 实施例一中制备的竹节参皂苷V。

[0059] 3.试验样品液的配制

[0060] 3.1.CMC-Na溶液的配制：精密称取5gCMC-Na，1000mL蒸馏水，配制成浓度为0.5％的CMC-Na溶液。

[0061] 3.2.阳性对照药辛伐他汀药液的配制：精密称取14g辛伐他汀片(含辛伐他汀70mg)，100ml的0.5％CMC-Na混悬，配成浓度为0.0007g/ml的药液样品。

[0062] 3.3.低剂量竹节参皂苷V药液的配制：精密称取0.375g竹节总皂苷V。100ml0.5％CMC-Na混悬，配制成浓度为0.00375g/ml的药液样品。

[0063] 3.4.高剂量竹节参皂苷V药液的配制：精密称取0.75g竹节参皂苷V，100ml0.5％CMC-Na混悬，配制成浓度为0.0075g/ml的药液样品。

[0064] 4.实验方法

[0065] 昆明种小鼠40只，18-22g，雌雄各半，随机分成4组，每组10只。分为正常空白对照组、辛伐他汀阳性对照组、竹节参皂苷V高剂量组、竹节参皂苷V低剂量组。灌胃给药。正常对照组每日按0.2ml/10g灌胃0.5％CMCNa，给药组每日灌胃给予0.2ml/10g体积的相应药物，给药剂量分别为：辛伐他汀对照组为0.014g/kg、竹节参皂苷V高剂量组为0.15g/kg、竹节参皂苷V低剂量组为0.075/kg。共给药14天。禁食16个小时后，于小鼠眼底静脉丛采血约0.5ml，分离血清(4000rp/min，10min，4℃)，利用试剂盒测定ALT、AST活力。

[0066] 5.结果与讨论

[0067] 表5.竹节参皂苷V(ZV)对ALT影响的测定结果(n＝10， )

[0068]*

[0069] 注：表示与正常组相比有显著性差异，P＜0.05。下同。

[0070] 表6.竹节参皂苷V(ZV)对AST的测定结果(n＝10， )

[0071]

[0072] ALT测定结果显示，与正常组比较，辛伐他汀，P＜0.05，有显著性差异.说明辛伐他汀有显著性的肝损伤作用，而竹节参皂苷V给药组则没有肝损伤作用.

[0073] ASL测定结果显示，与正常组比较，辛伐他汀，P＜0.05，有显著性差异.说明辛伐他汀有显著性的肝损伤作用，而竹节参皂苷V给药组则没有肝损伤作用.