一种从野菊花中提取蒙花苷的方法

摘要

一种从野菊花中提取蒙花苷的方法，包括如下步骤：（1）原料预处理；（2）碱水提取；（3）醇沉；（4）石油醚萃取；（5）调酸；（6）大孔树脂吸附分离；（7）结晶与重结晶，干燥。本发明所得的野菊花提取物产品，经高效液相色谱法检测，其蒙花苷含量可达95%以上。

权利要求

1. 一种从野菊花中提取蒙花苷的方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）原料预处理：将干燥的野菊花除杂、切碎，使用去离子水常温浸泡5~10h，甩干水液后，备用；

（2）碱水提取：加入重量为野菊花原料干重6~10倍的质量浓度为2‰~8‰的碱水溶液，在70℃~80℃的条件下，浸泡提取≥2次，每次浸泡2~3h，过滤，得提取液；

（3）醇沉：将步骤（2）所得提取液蒸发浓缩至原提取液重的1/20~1/15，然后加入重量为所得浓缩液2~3倍的95%（体积）乙醇，在20℃~30℃下静置6~10h，过滤，得醇液；

（4）萃取：将步骤（3）所得醇液蒸发浓缩至原所得醇液量重的1/6~1/5，然后加入重量为所得浓缩液2~3倍的石油醚萃取≥2次，收集下层重液，上层轻液石油醚层回收；

（5）调酸：将步骤（4）所得重液蒸发浓缩至其重量的1/3~1/2后，向其中加入0.2~0.4 mol/L的酸溶液，调节pH至3~5后，冷却至10℃~20℃，静置10~20h，收集沉淀物；

（6）大孔树脂吸附分离：将步骤（5）所得沉淀物用相当于沉淀物重量8~12倍体积浓度为60%~80%的乙醇溶解，上大孔吸附树脂柱，流速为1.5~2.0倍柱体积/h，静置2~3h，使用

2~3倍柱体积去离子水进行洗脱后，再使用8~12倍柱体积的组合有机溶剂进行洗脱，收集有机溶剂洗脱液；

所述组合有机溶剂为甲醇-乙酸乙酯混合液，其中甲醇与乙酸乙酯重量配比为2~4:1；

（7）结晶与重结晶：将步骤（6）所得有机溶剂洗脱液蒸发浓缩、干燥后，使用重量为所得干物质10~15倍的组合有机溶剂溶解，并加温至40℃~60℃，保持此温度20~30min后，降温至5℃~10℃，静置10~15h，收集晶体，重结晶3~4次，干燥得成品；

所述组合有机溶剂为甲醇-乙酸乙酯-丙酮混合液，其中甲醇、乙酸乙酯、丙酮重量配比为1~2:1~2:1。

2.根据权利要求1所述的从野菊花中提取蒙花苷的方法，其特征在于：所述2‰~8‰的碱水溶液为氢氧化钠溶液、碳酸钠溶液或者氢氧化钙溶液。

3.根据权利要求1或2所述的从野菊花中提取蒙花苷的方法，其特征在于：所述

0.2~0.4mol/L的酸溶液为盐酸、硫酸或者磷酸溶液。

4.根据权利要求1或2所述的从野菊花中提取蒙花苷的方法，其特征在于：所述大孔吸附树脂为D101、D1300、HPD450或AB-8大孔吸附树脂。

说明书

一种从野菊花中提取蒙花苷的方法

技术领域

[0001] 本发明涉及一种蒙花苷的提取方法,尤其是涉及一种从野菊花中提取蒙花苷的方法。

背景技术

[0002] 目前关于蒙花苷的研究主要是对其药理方面的研究，不管是国内还是国外，对其提取工艺方面的研究报道较为罕见。CN101857621A于2010.10.13公开了一种从野菊花中提取蒙花苷的方法，其基本工艺流程是以干燥的野菊花为原料，经醇提、浓缩、pH值调节、大孔树脂吸附洗脱分离，收集洗脱液，再通过浓缩、干燥，得成品，成品蒙花苷含量50%以上。从其介绍的三个实施例看，蒙花苷含量最高的优选实施例3是“60%以上”（三个实施例均未提供具体检测数据），按照一般情况推断，应是在70%以下。产品纯度尚欠理想。

发明内容

[0003] 本发明要解决的技术问题是，提供一种产品中蒙花苷的含量可达95%以上的从野菊花中提取蒙花苷的方法。

[0004] 本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种从野菊花中提取蒙花苷的方法，包括以下步骤：

[0005] （1）原料预处理：将干燥的野菊花除杂、切碎，使用去离子水常温浸泡5~10h，甩干水液后，备用；

[0006] （2）碱水提取：加入重量为野菊花原料干重6~10倍的质量浓度为2‰~8‰的碱水溶液，在70℃~80℃的条件下，浸泡提取≥2次，每次浸泡2~3h，过滤，得提取液；

[0007] （3）醇沉：将步骤（2）所得提取液蒸发浓缩至原提取液重的1/20~1/15，然后加入重量为所得浓缩液2~3倍的95%（体积）乙醇，在20℃~30℃下静置6~10h，过滤，得醇液；

[0008] （4）萃取：将步骤（3）所得醇液蒸发浓缩至原所得醇液量重的1/6~1/5，然后加入重量为所得浓缩液2~3倍的石油醚萃取萃取≥2次，收集下层重液，上层轻液石油醚层回收；

[0009] （5）调酸：将步骤（4）所得重液蒸发浓缩至其重量的1/3~1/2后，向其中加入0.2~0.4 mol/L的酸溶液，调节pH至3~5后，冷却至10℃~20℃，静置10~20h，收集沉淀物；

[0010] （6）大孔树脂吸附分离：将步骤（5）所得沉淀物用相当于沉淀物重量8~12倍的浓度为60%~80%（体积）的乙醇溶解，上大孔吸附树脂柱，流速为1.5~2.0倍柱体积/h，静置2~3h，使用2~3倍柱体积去离子水进行洗脱后，再使用8~12倍柱体积的组合有机溶剂进行洗脱，收集有机溶剂洗脱液；

[0011] （7）结晶与重结晶：将步骤（6）所得有机洗脱液蒸发浓缩、干燥后，使用重量为所得干物质10~15倍的组合有机溶剂溶解，并加温至40℃~60℃，保持此温度20~30min后，降温至5℃~10℃，静置10~15h，收集晶体，重结晶3~4次，干燥得成品。

[0012] 进一步，所述2‰~8‰的碱水溶液优选氢氧化钠溶液、碳酸钠溶液或者氢氧化钙溶液。

[0013] 进一步，所述0.2~0.4mol/L的酸溶液优选盐酸、硫酸或者磷酸溶液。

[0014] 进一步，所述大孔吸附树脂优选D101、D1300、HPD450或AB-8大孔吸附树脂。

[0015] 进一步，所述步骤（6）洗脱时所用的组合有机溶剂可为甲醇-乙酸乙酯混合液，其中甲醇与乙酸乙酯重量配比为2~4:1。

[0016] 进一步，所述步骤（7）结晶时所用的组合有机溶剂可为甲醇-乙酸乙酯-丙酮混合液，其中甲醇、乙酸乙酯、丙酮重量配比为1~2:1~2:1。

[0017] 本发明所得的野菊花提取物产品，经高效液相色谱法检测，其蒙花苷含量可达95%以上。

具体实施方式

[0018] 以下结合实施例对本发明作进一步详细说明。

[0019] 实施例1

[0020] 本实施例是通过以下步骤来实现的：

[0021] （1）原料预处理：将100 kg干燥的野菊花除杂、切碎，使用600kg去离子水常温浸泡10h，甩干水液后，备用；

[0022] （2）碱水提取：使用1000kg 6‰的氢氧化钠溶液，在70℃~80℃的条件下，浸泡提取3次，每次浸泡2.5h，过滤，得提取液；

[0023] （3）醇沉：将步骤（2）所得提取液蒸发浓缩至199kg，然后加入400kg的95%（体积）乙醇，在20℃静置10h，过滤，得醇液；

[0024] （4）萃取：将步骤（3）所得醇液蒸发浓缩至102kg，使用300kg的石油醚萃取3次，收集下层重液，上层轻液石油醚层回收；

[0025] （5）调酸：将步骤（4）所得重液蒸发浓缩至34.5kg后，向其中加入0.2 mol/L的盐酸溶液，调节pH至3.5，冷却至10℃，静置20h后，收集沉淀物；

[0026] （6）大孔吸附树脂吸附分离：将步骤（5）所得沉淀物使用15kg的70%（体积）乙醇溶解，过HPD450大孔吸附树脂吸附，控制流速为1.5倍柱体积/h，静置3h，使用2倍柱体积去离子水进行洗脱后，再使用12倍柱体积的甲醇-乙酸乙酯（4:1）进行洗脱，收集甲醇-乙酸乙酯洗脱液；

[0027] （7）结晶与重结晶：将步骤（6）所得洗脱液蒸发浓缩、干燥后得干物595g，再使用6kg甲醇-乙酸乙酯-丙酮（1:1:1）溶解，并加温至55℃，保持此温度20min后，降温至5℃，静置15h，收集晶体，重结晶3次，干燥，得505g产品。

[0028] 经液相色谱法检测，所得产品中含蒙花苷95.40%。

[0029] 实施例2

[0030] 本实施例是通过以下步骤来实现的：

[0031] （1）原料预处理：将100 kg干燥的野菊花除杂、切碎，使用600kg去离子水常温浸泡10h，甩干水液后，备用；

[0032] （2）碱水提取：使用1000kg 2‰的氢氧化钙溶液，在70℃~80℃的条件下浸泡提取3次，每次浸泡2h，过滤，得提取液；

[0033] （3）醇沉：将步骤（2）所得提取液蒸发浓缩至149kg，然后加入400kg的95%乙醇，在20℃静置10h，过滤，得醇液；

[0034] （4）萃取：将步骤（3）所得醇液蒸发浓缩至105kg，使用300kg的石油醚萃取4次，收集下层重液，上层轻液石油醚层回收；

[0035] （5）调酸：将步骤（4）所得重液蒸发浓缩至52.5kg后，向其中加入0.2 mol/L的盐酸溶液，调节pH至3.5，冷却至10℃，静置20h后，收集沉淀物；

[0036] （6）大孔吸附树脂吸附分离：将步骤（5）所得沉淀物使用10kg的70%的乙醇（体积）溶解，过D101大孔吸附树脂吸附，控制流速为1.5倍柱体积/h，静置3h，使用2倍柱体积去离子水进行洗脱，再使用12倍柱体积的甲醇-乙酸乙酯（2:1）进行洗脱，收集甲醇-乙酸乙酯洗脱液；

[0037] （7）结晶与重结晶：将步骤（6）所得洗脱液蒸发浓缩、干燥后得干物564g，再使用9kg甲醇-乙酸乙酯-丙酮（2:2:1）溶解，并加温至55℃，保持此温度30min后，降温至5℃，静置15h，收集晶体，重结晶4次，干燥，得475g 产品。

[0038] 经液相色谱法检测，所得产品中含蒙花苷97.67%。

[0039] 实施例3

[0040] 本实施例是通过以下步骤来实现的：

[0041] （1）原料预处理：将100kg干燥的野菊花原料除杂、切碎，使用600kg去离子水常温浸泡10h，甩干水液后，备用；

[0042] （2）碱水提取：使用1000kg 4‰的碳酸钠溶液，在70℃~80℃的条件下提浸泡提取3次，每次浸泡3h，过滤，得提取液；

[0043] （3）醇沉：将步骤（2）所得提取液蒸发浓缩至167kg，然后加入420kg的95%乙醇，在20℃静置10h，过滤，得醇液；

[0044] （4）萃取：将步骤（3）所得醇液蒸发浓缩至107kg，使用275kg的石油醚萃取3次，收集下层重液，上层轻液石油醚层回收；

[0045] （5）调酸：将步骤（4）所得重液蒸发浓缩至51.5kg后，向其中加入0.2mol/L的硫酸溶液，调节pH至4，冷却至10℃，静置20h，收集沉淀物；

[0046] （6）大孔吸附树脂吸附分离：将步骤（5）所得沉淀物使用12kg的70%（体积）乙醇溶解，过HPD450大孔吸附树脂吸附，控制流速为1.5倍柱体积/h，静置3h后，使用2倍柱体积去离子水进行洗脱后，再使用12倍柱体积的甲醇-乙酸乙酯（2:1）进行洗脱，收集甲醇-乙酸乙酯洗脱液；

[0047] （7）结晶与重结晶：将步骤（6）洗脱液蒸发浓缩、干燥后得干物599g，再使用9kg甲醇-乙酸乙酯-丙酮（2:2:1）溶解，并加温至55℃，保持此温度20min后，降温至5℃，静置15h，收集晶体，重结晶3次，干燥，得487g产品。

[0048] 经液相色谱法检测，所得产品中含蒙花苷96.18%。

[0049] 实施例4

[0050] 本实施例是通过以下步骤来实现的：

[0051] （1）原料预处理：将100kg干燥的野菊花除杂、切碎，使用600kg去离子水常温浸泡10h，甩干水液后，备用；

[0052] （2）碱水提取：使用1000kg 4‰的氢氧化钠溶液，在70℃~80℃的条件下浸泡提取3次，每次浸泡3h，过滤，得提取液；

[0053] （3）醇沉：将步骤（2）所得提取液蒸发浓缩至181kg，然后加入400kg的95%乙醇，在20℃静置10h，过滤，得醇液；

[0054] （4）萃取：将步骤（3）所得醇液蒸发浓缩至103kg，使用300kg的石油醚萃取4次，收集下层重液，上层轻液石油醚层回收；

[0055] （5）调酸：将步骤（4）所得重液蒸发浓缩至43kg后，向其中加入0.2 mol/L的硫酸溶液，调节pH至3.8，冷却至10℃，静置20h后，收集沉淀物；

[0056] （6）大孔吸附树脂吸附分离：将步骤（5）所得沉淀物使用8kg的70%（体积）乙醇溶解，控制流速为1.5倍柱体积/h，过HPD450大孔吸附树脂吸附，静置3h，使用2倍柱体积去离子水进行洗脱后，再使用12倍柱体积的甲醇-乙酸乙酯（2:1）进行洗脱，收集甲醇-乙酸乙酯洗脱液；

[0057] （7）结晶与重结晶：将步骤（6）所得洗脱液蒸发浓缩、干燥后得干物613g，再使用9.5kg甲醇-乙酸乙酯-丙酮（1:1:1）溶解，并加温至55℃，保持此温度30min后，降温至
7℃，静置15h，收集晶体，重结晶3次，干燥，得491g产品。

[0058] 经液相色谱法检测，所得产品中含蒙花苷96.89%。

[0059] 实施例5

[0060] 本实施例是通过以下步骤来实现的：

[0061] （1）原料预处理：将100kg干燥的野菊花原料除杂、切碎，使用600kg去离子水常温浸泡10h，甩干水液后，备用；

[0062] （2）碱水提取：使用1000kg 3‰的碳酸钠溶液，在70℃~80℃条件下提取浸泡提取3次，每次浸泡3h，过滤，得提取液；

[0063] （3）醇沉：将步骤（2）所得提取液蒸发浓缩至175kg，然后加入400kg的95%乙醇，在20℃静置10h，过滤，得醇液；

[0064] （4）萃取：将步骤（3）所得醇液蒸发浓缩至110kg，使用300kg的石油醚萃取3次，收集下层重液，上层轻液石油醚层回收；

[0065] （5）调酸：将步骤（4）所得重液蒸发浓缩至51.5kg，向其中加入0.4 mol/L的盐酸溶液，调节pH至4.5，冷却至10℃，静置20h后，收集沉淀物；

[0066] （6）大孔吸附树脂吸附分离：将步骤（5）所得沉淀物使用7.5kg的70%（体积）乙醇溶解，过D1300大孔吸附树脂吸附，控制流速为1.5倍柱体积/h，静置2h，使用2倍柱体积去离子水进行洗脱后，再使用10倍柱体积的甲醇-乙酸乙酯（2:1）进行洗脱，收集甲醇-乙酸乙酯洗脱液；

[0067] （7）结晶与重结晶：将步骤（6）所得洗脱液蒸发浓缩、干燥后得干物644g，再使用8.5kg甲醇-乙酸乙酯-丙酮（1:2:1）溶解，并加温至55℃，保持此温度20min后，降温至
6℃，静置15h，收集晶体，重结晶4次，干燥，得496g产品。

[0068] 经液相色谱法检测，所得产品中含蒙花苷96.45%。

[0069] 实施例6

[0070] 本实施例是通过以下步骤来实现的：

[0071] （1）原料预处理：将100kg干燥的野菊花原料除杂、切碎，使用800kg去离子水常温浸泡10h，甩干水液后，备用；

[0072] （2）碱水提取：使用800kg5‰的氢氧化钠溶液，在70℃~80℃的条件下提浸泡提取