应用丽蚜小蜂作为繁殖寄主生产浅黄恩蚜小蜂雄蜂的方法

摘要

本发明公开了一种应用丽蚜小蜂作为繁殖寄主生产浅黄恩蚜小蜂雄蜂的方法。浅黄恩蚜小蜂是控制国际性害虫烟粉虱的潜在理想天敌。在自然条件下，浅黄恩蚜小蜂雄蜂数量稀少，控制烟粉虱的能力被极大限制。雄蜂的生产和释放对发挥浅黄恩蚜小蜂控制粉虱的作用至关重要。本发明通过释放未交配的浅黄恩蚜小蜂雌蜂，选择三龄-预蛹阶段的丽蚜小蜂Encarsiaformosa作为繁殖雄蜂的次级寄主，实现了浅黄恩蚜小蜂雄蜂的优质、高效生产。应用本发明生产的浅黄恩蚜小蜂雄蜂具有发育历期短、羽化率高、个体大以及与雌蜂交配后可明显提高寄生数量等优点，可有效用于烟粉虱等粉虱害虫的生物防治。

权利要求

1.一种浅黄恩蚜小蜂雄蜂繁育方法，包括以下步骤：

1）寄主植物的培育

按照常规方法播种、育苗和定植寄主植物；在光照充足、环境条件可控的温室内培育寄主植物，当寄主植物生长至8-10片真叶时备用；

2）初级寄主的接种繁育

将备好的寄主植物放入粉虱繁育室，24h后，收卵结束，并将具粉虱卵的寄主植物转入昆虫发育室，12d后，当粉虱若虫发育至四龄初期时备用；

3）次级或二级寄主的繁育

将具四龄粉虱若虫的寄主植物移入繁蜂室，接入次级寄主蜂，48h后去除次级寄主蜂的成蜂，并将寄主植物转入昆虫发育室，7d后，检查次级寄主蜂的发育进度，当丽蚜小蜂发育至三龄幼虫-预蛹阶段时备用；

4）母代浅黄恩蚜小蜂的准备

将具四龄粉虱若虫的寄主植物移入繁蜂室，接入交配的浅黄恩蚜小蜂雌蜂，48h后去蜂，并将寄主植物转入昆虫发育室，13d后，羽化的寄生蜂全部为未交配的浅黄恩蚜小蜂处女蜂，这些未交配的雌蜂将直接用于寄生次级寄主来生产浅黄恩蚜小蜂的雄蜂；

5）浅黄恩蚜小蜂雄蜂的繁育

将上述（3）步骤具有三龄若虫-预蛹阶段丽蚜小蜂的寄主植物移入繁蜂室，同时将羽化时间< 24 h的未交配浅黄恩蚜小蜂雌蜂接入，接蜂数量为浅黄恩蚜小蜂：次级寄主 ≥

1：30，72h后去除浅黄恩蚜小蜂，9d后，镜检浅黄恩蚜小蜂雄蜂的发育进度，当黑蛹率高于

95%时，采摘植物叶片，制作蜂卡，包装储藏或直接与雌蜂田间释放应用。

2.如权利要求1所述浅黄恩蚜小蜂雄蜂繁育方法，其特征在于：步骤（3）所述次级或二级寄主的繁育，繁育的次级寄主为丽蚜小蜂。

3.如权利要求1所述浅黄恩蚜小蜂雄蜂繁育方法，其特征在于：步骤（3）所述次级或二级寄主的繁育，供浅黄恩蚜小蜂寄生生产雄蜂的丽蚜小蜂的发育阶段为三龄幼虫-预蛹。

4.如权利要求1所述的浅黄恩蚜小蜂雄蜂繁育方法，其特征在于：步骤（4）所述母代浅黄恩蚜小蜂的准备，用于寄生次级寄主生产雄蜂的母代全部为未交配的浅黄恩蚜小蜂雌蜂。

5.如权利要求1所述的浅黄恩蚜小蜂雄蜂繁育方法，其特征在于：步骤（5）所述浅黄恩蚜小蜂雄蜂的繁育，接蜂数量为浅黄恩蚜小蜂雌蜂：次级寄主≥ 1：30，接蜂时间为不低于

72h。

说明书

应用丽蚜小蜂作为繁殖寄主生产浅黄恩蚜小蜂雄蜂的方法

技术领域

[0001] 本发明涉及快速高效繁殖浅黄恩蚜小蜂雄蜂的方法，进一步讲是提供了一种应用丽蚜小蜂作为繁殖寄主生产浅黄恩蚜小蜂雄蜂的方法，属于农业害虫生物防治技术领域。

背景技术

[0002] 烟粉虱已成为农业生产上的国际性难题。这种害虫地位的上升主要与近年来B型烟粉虱Bemisia tabaci（又称银叶粉虱）的成功入侵有关。烟粉虱为害的寄主植物超过600余种，取食为害后不仅消弱作物的长势，还能引起植物的生理代谢失调如西葫芦银叶反应和番茄的不规则成熟。除此以外，还能造成更严重的间接为害，分泌的蜜露不仅影响植物的光合作用，还能滋生霉菌的生长，从而降低农产品的价格和品质。更重要的是，能作为媒介昆虫传播病毒病，引起植物病毒病害的大流行。目前这种害虫广泛分布于世界各地，已成为大田阔叶作物、蔬菜和园艺、园林生产上的最重要害虫之一。

[0003] 目前施用农药仍是控制粉虱类害虫的最重要方法。化学农药尤其是广谱高毒农药不仅直接威胁人类的健康，还严重污染环境。随着农药的大量使用，还引起害虫抗药性的不断上升以及天敌自然控制作用的严重消弱。长远来看，应用天敌昆虫的生物防治是治理这些害虫的必然趋势。特别是对于一些经济价值较高的蔬菜和园艺作物实行“以虫治虫”的生物防治变得更加现实可行。

[0004] 寄生蜂可以通过两种途径杀死寄主，一是寄生，将卵产于寄主体内或体外，通过幼虫取食最终杀死它们；另外一种是取食寄主，雌成蜂通过取食寄主体液和血淋巴从而杀死它们。利用恩蚜小蜂属(Encarsia)和浆角蚜小蜂属(Eretmocerus)寄生蜂防治粉虱的许多尝试均获得了一定的成功。从目前的应用现状来看，丽蚜小蜂E. formosa是商业化生产程度最高，并在温室条件下防治粉虱类害虫应用最为普遍的寄生蜂，这种寄生蜂被认为是控制温室白粉虱Trialeurodes vaporariorum 的最理想天敌，但该寄生蜂还不能有效地控制烟粉虱的发生和为害。浅黄恩蚜小蜂E. sophia是一种兼性超寄生蜂，与传统寄生蜂的繁殖方式不同，交配的雌蜂会将受精卵产于粉虱若虫体内，将来发育为雌虫，而未交配的雌蜂则通过寄生自己种内或近似种的雌性后代将来产生雄虫。研究结果表明，正常交配的浅黄恩蚜小蜂的寄生能力与丽蚜小蜂相当，但这种寄生蜂雌成蜂取食寄主的能力却为后者的三倍。综合来看，浅黄恩蚜小蜂控制烟粉虱的效果明显好于丽蚜小蜂，是目前防治国际性害虫烟粉虱的潜在理想天敌。但是，在自然条件下，浅黄恩蚜小蜂雄蜂的数量稀少，它们控制烟粉虱的能力被极大地限制。因此，雄蜂的生产和释放对于发挥浅黄恩蚜小蜂控制粉虱作用至关重要。

发明内容

[0005] 本发明提供一种应用丽蚜小蜂作为繁殖寄主生产浅黄恩蚜小蜂雄蜂的方法，为一种繁育浅黄恩蚜小蜂雄蜂的新技术，可为科学有效利用浅黄恩蚜小蜂治理烟粉虱害虫奠定良好基础。

[0006] 本发明采用的技术解决方案包括以下步骤：

[0007] （1）寄主植物的培育

[0008] 按照常规方法播种、育苗和定植寄主植物；在光照充足、环境条件可控的温室内培育寄主植物，当秧苗生长至具3片真叶时，单株定植于花盆内；当寄主植物生长至8-10片真叶时备用；

[0009] （2）初级寄主的接种繁育

[0010] 将备好的寄主植物放入粉虱繁殖间，并抖动饲养粉虱的寄主植物，使粉虱成虫扩散至新接入的植株上，24h后，收卵结束，并将具粉虱卵的寄主植物转入昆虫发育室（昆虫发育室环境条件为26-28℃，60-70% R.H.，14:10 L：D，下同），12d后，当粉虱若虫发育至四龄初期时备用；

[0011] （3）次级或二级寄主的繁育

[0012] 将具四龄粉虱若虫的寄主植物移入繁蜂室（环境条件为26-28℃，60-70% R.H.，14:10 L：D），接入次级寄主蜂成蜂（接蜂数量以蜂：若虫≥1:30为宜），48h后去除次级寄主蜂成蜂，并将寄主植物转入昆虫发育室；7d后，检查次级寄主蜂的发育进度，当寄生蜂发育至三龄幼虫-预蛹阶段时备用；

[0013] （4）母代浅黄恩蚜小蜂的准备

[0014] 将具四龄粉虱若虫的寄主植物移入繁蜂室，接入交配的浅黄恩蚜小蜂（雌、雄蜂按3:1混合接入），48h后去蜂（去蜂时，将寄主植物移入密闭室，药剂熏蒸3h，杀死遗留的寄生蜂），并将寄主植物转入昆虫发育室；13d后，羽化的寄生蜂全部为浅黄恩蚜小蜂处女蜂，这些未交配的雌蜂将直接用于寄生次级寄主来生产浅黄恩蚜小蜂的雄蜂；

[0015] （5）浅黄恩蚜小蜂雄蜂的繁育

[0016] 将上述（3）步骤具适龄次级寄主（三龄若虫-预蛹阶段丽蚜小蜂）的寄主植物移入繁蜂室，同时将初羽化（< 24 h）未交配的浅黄恩蚜小蜂雌蜂接入，接蜂数量为浅黄恩蚜小蜂：次级寄主 ≥ 1：30，72h后去除浅黄恩蚜小蜂；9d后，镜检浅黄恩蚜小蜂雄蜂的发育进度，当黑蛹率高于95%时，采摘植物叶片，制作蜂卡，包装储藏或直接与雌蜂田间释放应用。

[0017] 本发明所述的浅黄恩蚜小蜂雄蜂繁育方法，其特征在于：步骤（3）所述次级或二级寄主的繁育，繁育的次级寄主为丽蚜小蜂E. formosa。

[0018] 本发明所述浅黄恩蚜小蜂雄蜂繁育方法，其特征在于：步骤（3）所述次级或二级寄主的繁育，供浅黄恩蚜小蜂寄生生产雄蜂的丽蚜小蜂的发育阶段为三龄幼虫-预蛹。

[0019] 本发明所述的浅黄恩蚜小蜂雄蜂繁育方法，其特征在于：步骤（4）所述母代浅黄恩蚜小蜂的准备，用于寄生次级寄主生产雄蜂的母代全部为未交配的浅黄恩蚜小蜂雌蜂。

[0020] 本发明所述的浅黄恩蚜小蜂雄蜂繁育方法，其特征在于：步骤（5）所述浅黄恩蚜小蜂雄蜂的繁育，接蜂数量为浅黄恩蚜小蜂雌蜂：次级寄主≥ 1：30，接蜂时间为不低于72h。

[0021] 本发明的积极效果在于：烟粉虱是一种国际性重要害虫，目前还没有高效的寄生性天敌昆虫能控制其为害。综合寄生和取食寄主的防控效果，浅黄恩蚜小蜂被认为是控制烟粉虱的较理想寄生蜂，但是雄蜂的释放数量对其作用的发挥起着决定性的作用。本发明为一种繁育浅黄恩蚜小蜂雄蜂的新技术，可为科学有效利用浅黄恩蚜小蜂治理烟粉虱害虫奠定良好基础。

[0022] 附图说明

[0023] 图1为本发明生产繁殖主要流程图。

具体实施方式

[0024] 通过以下实施例进一步举例描述本发明，并不以任何方式限制本发明，在不背离本发明的技术解决方案的前提下，对本发明所作的本领域普通技术人员容易实现的任何改动或改变都将落入本发明的权利要求范围之内。

[0025] 实施例1

[0026] 以烟粉虱为寄主昆虫大量繁殖浅黄恩蚜小蜂雄蜂

[0027] 浅黄恩蚜小蜂雄蜂大量生产繁殖主要过程如图1所示，应用该发明生产10000头雄蜂的具体操作如下：

[0028] 1）寄主植物的培育

[0029] 按照常规方法播种、育苗和定植番茄。在光照充足、环境条件可控的温室内培育番茄植株，当秧苗生长至具3片真叶时，单株定植于花盆内（口径18cm，深12cm），共需10盆。当番茄生长至8-10片真叶时，去除心叶（有助于保留叶片的延展生长，且可防止植株徒长），当保留叶片生长至约8cm长时备用。

[0030] 2）初级寄主的接种繁育

[0031] 将备好的番茄植株放入烟粉虱繁殖间，并抖动饲养粉虱的寄主植物，使粉虱成虫扩散至新接入的植株上，24h后，抽检叶背的卵数，当叶背平均卵量高于200个时，收卵结束，并将具粉虱卵的番茄植物转入昆虫发育室（26-28℃，60-70% R.H.，14:10 L：D，下同）。12d后，当粉虱若虫发育至四龄初期时备用。

[0032] 3）次级（或二级）寄主的繁育

[0033] 将具四龄粉虱若虫的番茄植株移入繁蜂室（条件同昆虫发育室），接入丽蚜小蜂成蜂500头，48h后去除丽蚜小蜂成蜂，并将番茄植株转入昆虫发育室。7d后，检查丽蚜小蜂的发育进度，当寄生蜂发育至三龄幼虫-预蛹阶段时备用。

[0034] 4）母代浅黄恩蚜小蜂的准备

[0035] 取1盆具四龄粉虱若虫的番茄植株移入繁蜂室，接入交配的浅黄恩蚜小蜂50头，48h后去蜂（去蜂时，将寄主植物移入密闭室，药剂熏蒸3h，杀死遗留的寄生蜂），并将番茄植株转入昆虫发育室。13d后，羽化的约1000头寄生蜂全部为浅黄恩蚜小蜂处女蜂，这些未交配的雌蜂将直接用于寄生次级寄主来生产浅黄恩蚜小蜂的雄蜂。

[0036] 5）浅黄恩蚜小蜂雄蜂的繁育

[0037] 将上述（3）步骤具适龄次级寄主（三龄若虫-预蛹阶段丽蚜小蜂）的番茄植株移入繁蜂室，同时将上述（4）步骤羽化的浅黄恩蚜小蜂处女蜂接入，接蜂数量不低于500头，72h后去除浅黄恩蚜小蜂。9d后，镜检浅黄恩蚜小蜂雄蜂的发育进度，当黑蛹率高于95%时，采摘植物叶片，制作蜂卡，包装储藏或直接与雌蜂一同田间释放应用。经实验检测，利用丽蚜小蜂繁殖浅黄恩蚜小蜂雄蜂的羽化率高于80%。

[0038] 实施例2

[0039] 浅黄恩蚜小蜂对不同次级寄主的选择

[0040] 1 材料与方法

[0041] 1.1供试昆虫

[0042] 寄主昆虫：B型烟粉虱Bemisia tabaci (Gennadius)

[0043] 寄生蜂：浅黄恩蚜小蜂Encarsia sophia (Girault & Dodd)；丽蚜小蜂Encarsia formosa Gahan；暗黑浆角蚜小蜂Eretmocerus melanoscutus Zolnerowich & Rose。

[0044] 供试寄主植物

[0045] 甘蓝Brassica oleracea L. var. capitata。盆栽甘蓝生长至三片真叶时备用。

[0046] 试验方法

[0047] 1.3.1次级寄主选择试验

[0048] 当供试次级寄主浅黄恩蚜小蜂、丽蚜小蜂和暗黑浆角蚜小蜂雌蜂幼虫发育至三龄阶段时，将甘蓝叶片剪下并用脱脂棉包裹叶柄水培于60ml的量杯内。镜检去除未寄生的粉虱若虫和未达到发育阶段的寄生蜂个体，使每个叶片保留20个渴望阶段的寄生蜂幼虫个体，并将其放入透明的接蜂盒内。引入2头初羽化未交配的浅黄恩蚜小蜂雌蜂，48h后去蜂，6d后镜检各次级寄主被寄生的数量。10d后，每天记录各次级寄主上羽化的雄蜂数量，并测量雄蜂的大小（测量体长及头壳宽度），最终统计发育历期和羽化率。每个处理重复25次。

[0049] 不同次级寄主来源雄蜂的功能测定

[0050] 取1头初羽化未交配的浅黄恩蚜小蜂雌蜂，分别与1头不同来源的初羽化未交配的雄蜂配对，并将其接入叶片具有约60个三龄粉虱若虫的微虫笼内，每24h，将其转入具有相似数量粉虱若虫的微虫笼，直至雌蜂死亡，最终统计总寄生数量。每个处理重复20次。

[0051] 上述试验均在标准的人工气候室内进行（26-28 °C，60-70% R.H.和14: 10 L:D）。

[0052] 结果与分析

[0053] 研究结果表明，浅黄恩蚜小蜂雌蜂更偏好利用丽蚜小蜂作为产雄的次级寄主。当提供丽蚜小蜂、暗黑浆角蚜小蜂和本种内雌蜂幼虫作为产雄寄主时，寄生的百分率分别为76.2%、45.6%和26.6%。在以丽蚜小蜂作为产雄寄主时，浅黄恩蚜小蜂雄蜂发育地更快，且具有较高的羽化率（84%），羽化雄蜂明显较其它寄主上羽化个体更大。更重要的是，同其它来源雄蜂相比，当浅黄恩蚜小蜂雌蜂与用丽蚜小蜂繁育的雄蜂交配后，能寄生更多的烟粉虱若虫（78.5 vs 52.8-55.0）。

[0054] 综合来看，丽蚜小蜂是繁育浅黄恩蚜小蜂雄蜂最适合的次级寄主。