一种卷烟减害添加剂及其制备方法

摘要

本发明公开了一种卷烟减害添加剂，该添加剂包含植物提取物组合物，所述植物提取物组合物包含甘草总黄酮、银杏叶提取物、淫羊藿总黄酮和黄芪总苷。该添加剂添加于烟丝的添加比例为0.001-0.05％wt。该添加剂的组成比例为甘草总黄酮15-84％wt、银杏叶提取物15％-84％wt、淫羊藿总黄酮0.3-20％wt、黄芪总苷0.5-25％wt，并可进一步包含植物提取物麦冬总皂苷。该添加剂能够体外抑制作为烟气有害物质的多环芳烃、自由基等物质的生成，从而有效减少烟气对人群的危害。

权利要求

1.一种卷烟减害添加剂，包含植物提取物组合物，所述植物提取物组合物包含甘草总黄酮、银杏叶提取物、淫羊藿总黄酮和黄芪总苷，其特征在于：所述植物提取物组合物添加于烟丝的比例为0.001-0.05％wt，所述植物提取物组合物的组成比例为甘草总黄酮

15-84％wt、银杏叶提取物15％-84％wt、淫羊藿总黄酮0.3-20％wt、黄芪总苷0.5-25％wt；所述四种植物提取物组合物对作为烟气有害物质的自由基、多环芳烃化合物具有清除作用。

2.根据权利要求1所述卷烟减害添加剂，其特征在于：所述植物提取物组合物得组成比例为甘草总黄酮19-79％wt、银杏叶提取物19％-79％wt、淫羊藿总黄酮0.6-3％wt、黄芪总苷0.9-3％wt。

3.根据权利要求1或2所述的卷烟减害添加剂，其特征在于：所述植物提取物组合物的组成比例为甘草总黄酮20％wt、银杏叶提取物78.5％wt、淫羊藿总黄酮0.6％wt、黄芪总苷0.9％wt。

4.根据权利要求1或2所述的卷烟减害添加剂，其特征在于：所述植物提取物组合物的组成比例为甘草总黄酮78.5％wt、银杏叶提取物20％wt、淫羊藿总黄酮0.6％wt、黄芪总苷0.9％wt。

5.根据权利要求1或2所述卷烟减害添加剂，其特征在于：所述植物提取物组合物还包含麦冬总皂苷，添加麦冬总皂苷后，五种植物提取物组合对自由基和多环芳烃的清除作用比前述四种植物提取物组合的作用增强。

6.根据权利要求5所述卷烟减害添加剂，其特征在于：所述植物提取物组合物的组成比例为甘草总黄酮19.9％wt、银杏叶提取物78.0％wt、淫羊藿总黄酮0.6％wt、黄芪总苷

0.9％wt、麦冬总皂苷0.6％wt。

7.根据权利要求5所述卷烟减害添加剂，其特征在于：所述植物提取物组合物的组成比例为甘草总黄酮78.0％wt、银杏叶提取物19.9％wt、淫羊藿总黄酮0.6％wt、黄芪总苷

0.9％wt、麦冬总皂苷0.6％wt。

说明书

一种卷烟减害添加剂及其制备方法

技术领域

[0001] 本发明涉及烟用添加剂及其制备领域，尤其是涉及一种具有减害作用的植物提取物组合物卷烟减害添加剂。

背景技术

[0002] 卷烟烟气中的成分极为复杂，不仅对大气产生污染，也对人类健康产生了一定的危害。目前研究认为烟气中主要有害物质有多环芳烃和自由基等：多环芳烃属于很强的致癌物质；而自由基可直接和间接攻击细胞成分，是引起各种疾病的重要原因，同时自由基在高温下能不断聚合，形成不同的多环芳烃而危害人体健康。

[0003] 我国烟草业行业在减少烟气这些有害成分方面进行了大量研究，力求降低这些有害物质对健康的损害。目前这方面的研究主要涉及两个方面，一是传统的通过新工艺，新技术，新设备达到减害目的，如通过各种技术增加盘纸卷纸透气性；增加烟丝中膨胀丝，梗丝用量；采用纳米技术等方法增加滤嘴对有害物质的吸附等。二是通过在烟丝和滤嘴中增加来源于天然植物的添加剂，通过添加剂自身成分生物学作用或通过其对卷烟有害物质的吸附，降解的作用减轻这些有害物质对机体损伤。

[0004] 我国从上世纪中叶开始就开始进行中药类天然植物添加剂卷烟的研究开发。目前行业内采用的方法，一是传统的将单味药或提取物加入烟丝，二是将多种中药提取物或提取物的精制物加入烟丝或滤嘴。由此产生了一些有缓解烟害作用的香烟。但目前对于来源于中药植物成分的添加剂研究还更多局限于传统工艺提取物，较少涉及中药组分领域研究，对于中药组分配伍添加剂的使用更是未见报道。体健康的损害。

附图说明

[0005] 本发明的上述和/或附加的方面和优点从下面结合附图对实施例的描述中将变得明显和容易理解，其中：

[0006] 图1为甘草总黄酮、银杏叶提取物、淫羊藿总黄酮和黄芪总苷四组分配伍清除DPPH的回归方程和回归模型图表；

[0007] 图2为甘草总黄酮、银杏叶提取物、淫羊藿总黄酮和黄芪总苷四组分配伍清除多环芳烃的回归模型图表。

具体实施方式

[0008] 下面详细描述本发明的实施例。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的，仅用于解释本发明，而不能解释为对本发明的限制。

[0009] 实验例

[0010] 一、实验材料

[0011] (一)试剂

[0012] 蒽(Anthracene，99％)，美国ACROS ORGANICS产品；DPPH，美国SIGMA公司产品；羟自由基试剂盒，南京建成生物工程研究所产品；抗超氧阴离子自由基试剂盒，南京建成生物工程研究所产品；无水乙醇，国药集团化学试剂有限公司，分析纯；丙酮，北京化工厂，分析纯；乙酸(冰醋酸)，北京化工厂，分析纯。

[0013] (二)药品

[0014] 银杏叶提取物，24％黄酮，6％内酯，南京朗泽医药科技有限公司产品；甘草总黄酮，含量90％，河南倍特生物科技有限公司产品；麦冬总皂苷，含量90％。上海海灿生物科技有限公司产品；淫羊藿总黄酮，含量70％，南京朗泽医药科技有限因此需要提供一种能够添加于香烟中、对烟气中有害成分具有抑制作用的中药组分。

发明内容

[0015] 本发明的目的之一在于提供一种含植物提取物组合物的卷烟减害添加剂。

[0016] 根据本发明的目的之一，本发明的技术方案如下：

[0017] 一种卷烟减害添加剂，包含植物提取物组合物，所述植物提取物组合物包含甘草总黄酮、银杏叶提取物、淫羊藿总黄酮和黄芪总苷，其特征在于：所述植物提取物组合物添加于烟丝的比例为0.001-0.05％wt，所述植物提取物组合物的组成比例为甘草总黄酮15-84％wt、银杏叶提取物15％-84％wt、淫羊藿总黄酮0.3-20％wt、黄芪总苷0.5-25％wt。

[0018] 所述植物提取物组合物的组成比例为甘草总黄酮19-79％wt、银杏叶提取物19％-79％wt、淫羊藿总黄酮0.6-3％wt、黄芪总苷0.9-3％wt。

[0019] 所述植物提取物组合物的组成比例为甘草总黄酮20％wt、银杏叶提取物78.5％wt、淫羊藿总黄酮0.6％wt、黄芪总苷0.9％wt。

[0020] 所述植物提取物组合物的组成比例为甘草总黄酮78.5％wt、银杏叶提取物20％wt、淫羊藿总黄酮0.6％wt、黄芪总苷0.9％wt。

[0021] 进一步，所述植物提取物组合物还包含麦冬总皂苷。

[0022] 所述植物提取物组合物的组成比例为甘草总黄酮19.9％wt、银杏叶提取物78.0％wt、淫羊藿总黄酮0.6％wt、黄芪总苷0.9％wt、麦冬总皂苷0.6％wt。

[0023] 所述植物提取物组合物的组成比例为甘草总黄酮78.0％wt、银杏叶提取物19.9％wt、淫羊藿总黄酮0.6％wt、黄芪总苷0.9％wt、麦冬总皂苷0.6％wt。

[0024] 与现有技术相比，本发明的有益效果为：本发明所提供的卷烟减害添加剂对烟气有害物质多环芳烃、自由基具有体外清除作用，可有效降低和缓减对人公司产品；黄芪总苷，含量50％，南京朗泽医药科技有限公司。

[0025] (三)仪器

[0026] F7000荧光分光光度计，日本日立公司产品；

[0027] BT25S十万分之一电子分析天平，德国Sartorius公司产品；

[0028] DU730型蛋白核酸分析仪，美国BECKMAN公司产品；

[0029] SUMSUNG DI-S24型电热恒温水浴锅，上海森信实验仪器有限公司产品；

[0030] 中药组方优化软件(单机版)，中国中医科学院中药所提供

[0031] 二、实验方法

[0032] 1、配伍中每种中药组分高低剂量的确定：

[0033] 首先确定银杏叶提取物、甘草总黄酮、淫羊藿总黄酮和黄芪总苷这四味药的配伍比例：采用甘草与银杏叶合计占总量70％，黄芪总苷与淫羊藿合计占30％为标准，在总量恒定的前提下，以各组分原始药物在70％乙醇中的最大溶解度、IC50为依据，设计药物组分的高低剂量；根据清除DPPH和多环芳烃作用强度，采用均匀设计方法获得优化的四味药物配伍比例；然后在此基础上加入麦冬总皂苷，根据清除DPPH、羟基自由基、超氧阴离子自由基和多环芳烃的作用，综合优选出这五味药的最佳配比。

[0034] 2、均匀试验设计各中药组分水平数和各水平疏密程度的确定：

[0035] 中药水平数设计的多少，直接关系试验的次数和试验点选择的准确性。按照水平数应大于因素数2倍的均匀设计原则；首先，本实验针对4种中药组分，所以为4因素；总设计水平数为12，其中银杏叶提取物和甘草总黄酮药效作用较强，设计了12个水平数；淫羊藿总黄酮和黄芪总苷，受限于考察剂量范围较小，采用拟水平方式，设计6个剂量水平，循环一次达到12个水平。这样即与处方内其他药物的水平数保持一致。因此采用均匀设计4
表U12(12)进行剂量配比关系研究。剂量设计、均匀试验安排表见表1-2。

[0036] 表1 实验剂量设计表

[0037]

[0038] 表2 U12(124)均匀设计试验安排表

[0039]

[0040] 3检测方法：

[0041] 中药组分添加剂配伍体外清除DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基的研究采用分光光度法进行检测，清除多环芳烃的作用采用荧光分光光度法进行检测，具体实验研究方法如下：

[0042] (1)中药组分配伍清除DPPH自由基的测定方法：将DPPH用无水乙醇配置成质量-5浓度为25mg/L(约6.34×10 mol/L)备用。在试管中依次加入2ml DPPH溶液和0.5ml 70％醇溶液(样品溶解溶剂)，混匀后用1cm比色皿在517nm波长处测吸光值(A)，记为A0；加入2ml DPPH溶液和0.5ml待测中药组分试液，混匀后在黑暗处静置30min，测定记为Ai；加入2ml无水乙醇溶液和0.5ml待测中药组分试液，混匀后测定值，记为Aj，按下式计算自由基清除率。清除率(％)＝[1-(Ai-Aj)/A0]×100％。

[0043] (2)中药组分清除羟自由基和超氧阴离子自由基的测定方法：采用南京建成羟自由基和超氧阴离子自由基试剂盒测定，依据试剂盒说明书方法进行检测获得抑制率；

[0044] (3)中药组分清除多环芳烃蒽的检测方法：将蒽配置成质量浓度为0.5ug/ml的丙酮溶液使用。将中药提取物配成不同浓度的70％乙醇溶液。设置荧光分光光度计扫描参-1数：激发和发射单色仪狭缝带通宽度均为5nm，扫描速度240nm·min 。激发波长265nm，发射波长400nm。将试液倒入石英液池，置于仪器样品室。用1ml丙酮加1ml 70％乙醇调零。
检测添加中药配伍组分前后蒽荧光强度F的变化，计算药物的抑制率。

[0045] 三、实验结果

[0046] 1四味中药组分最佳剂量配比研究

[0047] 1.1四味中药组分配比清除DPPH自由基和多环芳烃作用的均匀设计研究[0048] 根据研究方法三的均匀试验设计，分别配置甘草总黄酮、银杏叶提取物、淫羊藿总黄酮和黄芪总苷这四味中药的十二个药物浓度初始母液，初始母液配制浓度见附表3；按表2所示分别取相应浓度水平的各药物组分母液按照1∶1∶1∶1进行混合，获得混合母液；按照反应体系药物反应终浓度DPPH恒定为0.05mg/ml、多环芳烃恒定为0.012mg/ml的标准，分别取这十二个混合母液相应体积，采用70％乙醇进行稀释，获得最终十二份混合待测液；检测甘草总黄酮、银杏叶提取物、淫羊藿总黄酮和黄芪总苷这四味中药不同配比十二个水平的DPPH和多环芳烃清除率，实验结果见表4。

[0049] 表3 四味中药组分初始配制浓度及组合表

[0050]

[0051] 表4 四味中药组分均匀设计实验组合对DPPH和多环芳烃的清除率[0052]实验组 DPPH清除率 多环芳烃清除率
合序号 (％) (％)
实验1 58.841±1.383 32.477±8.862
实验2 71.208±1.590 42.871±3.047
实验3 45.217±0.547 38.736±1.491
实验4 62.101±0.435 39.670±0.911
实验5 51.715±0.514 32.178±4.843
实验6 64.324±0.711 40.928±2.833
实验7 46.184±0.209 38.145±3.596
实验8 59.541±1.048 41.812±3.600
实验9 49.324±0.302 35.399±6.211
实验10 62.609±0.261 40.683±0.218
实验11 44.251±1.653 37.353±4.928
实验12 56.546±0.254 44.190±2.664

[0054] 1.2四味中药组分不同剂量配比清除DPPH自由基和多环芳烃作用的LARS(最小角回归)分析

[0055] 根据表6的实验结果，运用“中药组方优化软件”，采用改进最小角回归方法分别获得四组分配伍清除DPPH和多环芳烃的回归方程和回归模型图表，其中甘草总黄酮为X1，银杏叶提取物为X2，淫羊藿总黄酮为X3，黄芪总苷为X4，平均清除率为Y；结果见回归方程和附图1-2：

[0056] 1.2.1四组分配伍清除DPPH的回归方程和回归模型图表

[0057] Y＝ (1348.41024529341)*X1+(1902.85081030458)*X2+(0.432341713582079)*X3+(-20.861132023621)*X4+(-11511.5692665415)*X1*X2+(6495.11575739643)*X1*X3+(0)*X2*X3+(0)*X1*X4+(18840.5788500999)*X2*X4+(0)*X3*X4+(1287.76729516979)*X1*X1+(0)*X2*X2+(0)*X3*X3+(0)*X4*X4。

[0058] 1.2.2四组分配伍清除多环芳烃的回归方程和回归模型图表

[0059] Y ＝ (4344.30806655099)*X1+(3367.7600236284)*X2+(1932.36379982644)*X3+(-1025.30398350895)*X4+(0)*X1*X2+(0)*X1*X3+(85119.4913209487)*X2*X3+(0)*X1*X4+(0)*X2*X4+(1117335.08568284)*X3*X4+(28672.4751585725)*X1*X1+(40296.3665539673)*X2*X2+(0)*X3*X3+(0)*X4*X4

[0060] 1.3预测结果及验证实验：根据以上回归方程，分别获得这四味中药组分的自动优化配伍结果，结合实际生产，再次进行人工优化配伍结果，预测清除DPPH效果以实验13组合为最优，实验14组合次之；清除多环芳烃效果以实验13-1组合为最优，实验14-1组合次之；根据预测结果，进行了优化配伍组合和实际检测最佳组合清除DPPH和多环芳烃的验证实验；实验结果与通过LARS分析获得的预测结果完全一致。实验结果见表5-6：

[0061] 表5 四味中药组分均匀设计实验优化组合清除DPPH的预测和验证结果[0062]

[0063] 备注：上述剂量为原始药物配置浓度

[0064] 表6 四味中药组分均匀设计实验优化组合清除多环芳烃的预测和验证结果[0065]

[0066]

[0067] 备注：上述剂量为原始药物配置浓度

[0068] 2五味中药组分组合清除多种自由基和多环芳烃作用研究

[0069] 根据前期研究获得的银杏叶提取物、甘草总黄酮、淫羊藿总黄酮和黄芪总苷这四味中药的最优组合结果和实际生产设计要求，在上述研究基础上加入麦冬总皂苷，剂量为0.024mg/ml；添加麦冬总皂苷后，DPPH和多环芳烃清除率均比相应四味药物组合有所提高；根据清除DPPH、羟基自由基、超氧阴离子自由基和多环芳烃的综合作用，获得这五味药的最佳配比剂量为甘草总黄酮0.8mg/ml、银杏叶提取物3.144mg/ml、淫羊藿总黄酮0.024mg/ml、黄芪总苷0.036mg/ml和麦冬总皂苷0.024mg/ml。实验配置比例和结果见表
7-8；

[0070] 表7 五味中药组分均匀设计实验优化组合配置剂量比例

[0071]

[0072]

[0073] 备注：①上述剂量为原始药物配置浓度；②*四味药物组合+麦冬总皂苷[0074] 表8 五味中药组分均匀设计实验优化组合清除多种自由基和多环芳烃作用[0075]

[0076]

[0077] 备注：*四味药物组合+麦冬总皂苷

[0078] 四、结论

[0079] 选取甘草总黄酮、银杏叶提取物、淫羊藿总黄酮、黄芪总苷、麦冬总皂苷等五个中药组分，进行中药方剂组分清除自由基和清除多环芳烃作用最佳配伍和剂量关系的研究，结果表明：甘草总黄酮、银杏叶提取物、淫羊藿总黄酮和黄芪总苷的多种比例配伍均对自由基和多环芳烃有显著体外清除作用，且效果强于单味药组份。以清除DPPH为指标的最佳组合为甘草总黄酮0.8mg/ml、银杏叶提取物3.144mg/ml、淫羊藿总黄酮0.024mg/ml和黄芪总苷0.036mg/ml，组成比例为甘草总黄酮20％wt、银杏叶提取物78.5％wt、淫羊藿总黄酮0.6％wt、黄芪总苷0.9％wt；以清除多环芳烃为指标的最佳组合为甘草总黄酮3.144mg/ml、银杏叶提取物0.8mg/ml、淫羊藿总黄酮0.024mg/ml和黄芪总苷0.036mg/ml，组成比例为甘草总黄酮78.5％wt、银杏叶提取物20％wt、淫羊藿总黄酮0.6％wt、黄芪总苷0.9％wt。在此基础上，添加麦冬总皂苷0.024mg/ml于上述四味药物比例中，DPPH和多环芳烃清除率均比相应四味药物组合有所提高，组成比例为(1)甘草总黄酮19.9％wt、银杏叶提取物78.0％wt、淫羊藿总黄酮0.6％wt、黄芪总苷0.9％wt、麦冬总皂苷0.6％wt；

[0080] (2)甘草总黄酮78.0％wt、银杏叶提取物19.9％wt、淫羊藿总黄酮0.6％wt、黄芪总苷0.9％wt。以清除DPPH、多环芳烃、羟自由基和超氧阴离子自由基的综合作用为指标，该五味中药组分配伍后药效作用要强于单味药组分。

[0081] 实施例一

[0082] 称取20mg甘草总黄酮，78.5mg银杏叶提取物，0.6mg淫羊藿总黄酮，0.9mg黄芪总苷至无菌容器中，加入100ml 50％乙醇，搅拌使完全溶解；溶液过微孔滤膜；然后补足50％乙醇定容。将滤液均匀喷洒于10kg烟丝中，即得。

[0083] 实施例二

[0084] 称取392.5mg甘草总黄酮，100mg银杏叶提取物，3mg淫羊藿总黄酮，4.5mg黄芪总苷至无菌容器中，加入100ml 70％乙醇，搅拌使完全溶解；溶液过微孔滤膜；然后补足70％乙醇定容。将滤液均匀喷洒于10kg烟丝中，即得。

[0085] 实施例三

[0086] 称取520mg甘草总黄酮，400mg银杏叶提取物，50mg淫羊藿总黄酮，30mg黄芪总苷至无菌容器中，加入100ml 90％乙醇，搅拌使完全溶解；溶液过微孔滤膜；然后补足90％乙醇定容。将滤液均匀喷洒于10kg烟丝中，即得。

[0087] 实施例四

[0088] 称取2.85g甘草总黄酮，1.4g银杏叶提取物，500mg淫羊藿总黄酮，250mg黄芪总苷至无菌容器中，加入200ml 60％乙醇，搅拌使完全溶解；溶液过微孔滤膜；然后补足60％乙醇定容。将滤液均匀喷洒于10kg烟丝中，即得。

[0089] 实施例五

[0090] 称取30mg甘草总黄酮，168mg银杏叶提取物，1mg淫羊藿总黄酮，1mg黄芪总苷至无菌容器中，加入100ml 80％乙醇，搅拌使完全溶解；溶液过微孔滤膜；然后补足80％乙醇定容。将滤液均匀喷洒于10kg烟丝中，即得。

[0091] 实施例六

[0092] 称取76mg甘草总黄酮，316mg银杏叶提取物，4.4mg淫羊藿总黄酮，3.6mg黄芪总苷至无菌容器中，加入100ml 95％乙醇，搅拌使完全溶解；溶液过微孔滤膜；然后补足95％乙醇定容。将滤液均匀喷洒于10kg烟丝中，即得。

[0093] 实施例七

[0094] 称取500mg甘草总黄酮，1.3g银杏叶提取物，6mg淫羊藿总黄酮，194mg黄芪总苷至无菌容器中，加入200ml 65％乙醇，搅拌使完全溶解；溶液过微孔滤膜；然后补足65％乙醇定容。将滤液均匀喷洒于10kg烟丝中，即得。

[0095] 实施例八

[0096] 称取1.6g甘草总黄酮，2.2g银杏叶提取物，120mg淫羊藿总黄酮，80mg黄芪总苷至无菌容器中，加入250ml 55％乙醇，搅拌使完全溶解；溶液过微孔滤膜；然后补足55％乙醇定容。将滤液均匀喷洒于10kg烟丝中，即得。

[0097] 实施例九

[0098] 称取622mg甘草总黄酮，162mg银杏叶提取物，8mg淫羊藿总黄酮，8mg黄芪总苷至无菌容器中，加入100ml 75％乙醇，搅拌使完全溶解；溶液过微孔滤膜；然后补足75％乙醇定容。将滤液均匀喷洒于10kg烟丝中，即得。

[0099] 实施例十

[0100] 称取1.26g甘草总黄酮，225mg银杏叶提取物，4.5mg淫羊藿总黄酮，10.5mg黄芪总苷至无菌容器中，加入100ml 70％乙醇，搅拌使完全溶解；溶液过微孔滤膜；然后补足70％乙醇定容。将滤液均匀喷洒于10kg烟丝中，即得。

[0101] 实施例十一

[0102] 称取150mg甘草总黄酮，125mg银杏叶提取物，100mg淫羊藿总黄酮，125mg黄芪总苷至无菌容器中，加入100ml 65％乙醇，搅拌使完全溶解；溶液过微孔滤膜；然后补足65％乙醇定容。将滤液均匀喷洒于10kg烟丝中，即得。

[0103] 实施例十二

[0104] 称取199mg甘草总黄酮，780mg银杏叶提取物，6mg淫羊藿总黄酮，9mg黄芪总苷，6mg麦冬总皂苷至无菌容器中，加入100ml 90％乙醇，搅拌使完全溶解；溶液过微孔滤膜；
然后补足90％乙醇定容。将滤液均匀喷洒于10kg烟丝中，即得。

[0105] 实施例十三

[0106] 称取1.56g甘草总黄酮，398mg银杏叶提取物，12mg淫羊藿总黄酮，18mg黄芪总苷，12mg麦冬总皂苷至无菌容器中，加入100ml 85％乙醇，搅拌使完全溶解；溶液过微孔滤膜；
然后补足85％乙醇定容。将滤液均匀喷洒于10kg烟丝中，即得。