盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体固体制剂

摘要

本发明公开了一种盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体固体制剂及其制法，所述脂质体固体制剂包括：15份盐酸克林霉素棕榈酸酯、20-150份二鲸蜡磷酸酯、15-100份豆磷脂、10-50份胆固醇、15-120份吐温40、20-160份聚乙二醇600、和90-160份其它可药用辅料，该固体制剂可以为片剂、颗粒剂、胶囊剂等。本发明提供的脂质体固体制剂包封率高、粒径均匀、药物在血液循环中保留时间长，提高了制剂产品质量，减少了毒副作用，提高了生物利用度，并且制备方法的设备简单，易于操作，适合于工业化大生产。

权利要求

1.一种盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体固体制剂，其特征在于包括盐酸克林霉素棕榈酸酯、二鲸蜡磷酸酯、豆磷脂、胆固醇、吐温40、聚乙二醇600和其它可药用辅料，其中盐酸克林霉素棕榈酸酯、二鲸蜡磷酸酯、豆磷脂、胆固醇、吐温40、和聚乙二醇600的重量份数比例为：

2.根据权利要求1所述的盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体固体制剂，其特征在于所述的其它可药用辅料选自稀释剂、崩解剂、甜味剂、粘合剂、润滑剂及其组合，所述的其它可药用辅料的含量以重量份数计为90-160份。

3.根据权利要求1-2中任一项所述的盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体固体制剂，其特征为所述固体制剂为片剂、颗粒剂、胶囊剂。

4.根据权利要求3所述的盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体固体制剂，其中所述固体制剂的规格按克林霉素计为15mg、37.5mg、或75mg。

5.一种权利要求2-4中任一项所述的盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体固体制剂的制备方法，其特征在于包括如下步骤：(1)精密称取盐酸克林霉素棕榈酸酯、二鲸蜡磷酸酯、豆磷脂、胆固醇、吐温40、和聚乙二醇600，置于梨形瓶中，加入有机溶剂，混合均匀，置于旋转蒸发仪中20-120分钟蒸干成膜；

(2)向梨形瓶中加入缓冲溶液，旋转溶解30分钟，超声15-30分钟使溶液透明，0.45μm微孔滤膜过滤；

(3)将上述滤液置于-20℃冷冻5-12小时后取出，室温融化，再40kHz超声5-10分钟，喷雾干燥，即得盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体粉末；

(4)将盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体粉末和稀释剂、崩解剂、甜味剂混合，过80目筛混合均匀，加入粘合剂溶液制备软材，过20目筛制粒，干燥，得到干颗粒；

(5)将干颗粒和润滑剂混合均匀，过20目筛整粒；

(6)压片、填充胶囊或装袋，制得盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体固体制剂。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于所述有机溶剂选自异丙醇。

7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于所述缓冲溶液选自pH值为5.8的磷酸盐缓冲溶液。

说明书

盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体固体制剂

技术领域

[0001] 本发明涉及一种盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体固体制剂及其制法，属于医药技术领域。

背景技术

[0002] 盐酸克林霉素棕榈酸酯(CPH)是临床常用的抗生素，适于各科用药，它的化学名为6-(1-甲基-反-4丙基-L-2-吡咯烷甲酰胺基)-1-硫代-7(S)-氯-6，7，8-三脱氧-L-苏式-α-D-半乳辛吡喃糖苷-2-棕榈酸酯盐酸盐，结构式：

[0003]

[0004] 它是由克林霉素经化学修饰而得到，由于克林霉素味道极苦，制成棕榈酸酯后则苦味显著降低。CPH为一前体药物，口服给药后在体内很快水解出游离的克林霉素而起作用，其具有较高的抗菌作用，是林可霉素2-8倍，对许多革兰阳性需氧菌、厌氧杆菌、衣原体、支原体均有活性。临床上用于敏感菌引起的败血症、细菌性心内膜炎、呼吸道、软组织、骨关节、耳部、泌尿生殖系统感染，尤其是耐青霉素和红霉素而对本药敏感的细菌感染，以及对青霉素过敏的患者；此外，对各种厌氧菌感染尤为适合，尤其是厌氧菌引起的阴道炎、输卵管炎、盆腔腹膜炎、子宫内膜炎和盆腔术后合并感染，并广泛用于厌氧菌引起的溃疡，对各种类型的骨髓炎更有明显效果。

[0005] 盐酸克林霉素棕榈酸酯与盐酸克林霉素相比，适应症基本相同，但盐酸克林霉素味苦稳定性差，且盐酸克林霉素棕榈酸酯比盐酸克林霉素更容易吸收，胃肠道副作用更少，毒性更低，病人耐受性好。故本品是林可霉素系列抗生素的较好品种，也是小儿科用药的较好品种。目前，国内仅有盐酸克林霉素棕榈酸酯颗粒，盐酸克林霉素棕榈酸酯分散片和盐酸克林霉素棕榈酸酯干混悬剂面市，剂型单一，患者的选择面较小。

[0006] CN101152161A公开了一种盐酸克林霉素棕榈酸酯胶囊及其制造工艺，由药物颗粒和胶囊两大部分组成，药物颗粒由46％的有效活性成分、20-40％稀释剂、1-10％的崩解剂、1-10％的增溶剂、2-10％的包衣剂组成；CN100546572C公开了一种盐酸克林霉素棕榈酸酯软胶囊及其制造工艺，由药液和胶囊两大部分组成，药液含有盐酸克林霉素棕榈酸酯、可药用溶剂、基质、稳定剂，囊壳中含有明胺或阿拉伯胶、甘油、水、防腐剂和增塑剂；CN1559431A公开了一种盐酸克林霉素棕榈酸酯分散片及其制备方法，制备方法采用制粒工艺，同时加入辅料混合压制成片；然而传统方法方法制备的盐酸克林霉素棕榈酸酯制剂长期稳定型不理想，生物利用度低。

[0007] 脂质体是指将药物包封于类脂质双分子形成的薄膜中间所制成的超微型球状定向药物载体制剂，属于靶向给药系统的一种新剂型。脂质体作为药物载体，具有诸多优点：如脂质体既能包封脂溶性药物，又能包封水溶性药物；减轻变态反应和免疫反应；延缓释放，降低体内消除速度；能有效地保护被包裹药物，提高生物利用度；改变药物在体内的分布，并能靶向性释药，能降低药物的毒副作用；适合多途径给药等。

[0008] 脂质体主要作用机理是将药物粉末或溶液包裹在脂质体双层脂质膜所封闭的水相中或嵌入脂质体双层脂质膜中，这种微粒具有类细胞结构，进入人体内后被网状内皮系统吞噬而激活机体的自身免疫功能，并改变被包封药物的体内分布，使药物主要在肝、脾、肺和骨髓等组织器官中积蓄，从而提高药物的治疗指数，减少药物的治疗剂量和降低药物的毒性。

[0009] 如果能将盐酸克林霉素棕榈酸酯制成脂质体，则有望克服现有的盐酸克林霉素棕榈酸酯制剂存在的一系列问题，提高药物的溶解性和稳定性，延长药物在体内的保留时间，提高生物利用度，降低毒副作用，改进治疗速度和治疗效果。

[0010] 不过，制备脂质体的挑战在于选择适当的脂质体组成成分和制法。由于脂质体的性质如稳定性、包封率、起效时间、在体内的循环时间、生物利用度和毒副作用等与脂质体的组成直接地密切相关，而脂质体的组成与所要包封的药物性质直接地密切相关，因此，选择什么样的成分形成具有良好品质的盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体是亟待解决的课题。

[0011] CN101530393A公开了一种克林霉素磷酸酯脂质体冻干制剂，其特征在于主要由克林霉素磷酸酯、双肉豆蔻酸卵磷脂、胆固醇、抗氧剂和冻干支持剂经冻干制备而成。

[0012] CN101095659A公开了一种涉及克林霉素脂质体组合药物及其制备方法，其特征在于，所述脂质体组合药物是包裹有克林霉素与氟罗沙星、左氧氟罗沙星、环丙沙星中的任意一种或几种的任意比例混合物的脂质体。其中膜材料为大豆卵磷脂和二棕榈酰胆碱(3∶1)混合物0.05mol及胆固醇和β-谷甾醇(1∶1)混合物0.05mol。

[0013] 何剪太，《中国现代医学杂志》，2008年，18(1)公开了一种克林霉素磷酸酯脂质体，磷脂∶胆固醇为5∶1，磷脂∶克林霉素为5∶3，磷脂∶蔗糖为2∶1，粒径为210±34nm。

[0014] 申请人通过大量的实验发现，应用上述文献的处方，不能制备生质优良的盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体，申请人意外发现，通过本发明特定的赋形剂所制成的盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体固体制剂有效的克服了主药稳定性差的问题，同时提高了药物的溶出度，延缓释放，增加了药物在体内的保留时间。

发明内容

[0015] 本发明的目的在于提供一种盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体固体制剂，将盐酸克林霉素棕榈酸酯和二鲸蜡磷酸酯、豆磷脂、胆固醇、吐温40和聚乙二醇600一起制备成盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体粉末，再和其它可药用辅料制成固体制剂，极大地提高了盐酸克林霉素棕榈酸酯的溶出度和生物利用度，提高了制剂产品的质量，减少了毒副作用，延长了药物在体循环中分布的时间较长，疗效明显提高。

[0016] 本发明提供的盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体固体制剂，其特征在于包括盐酸克林霉素棕榈酸酯、二鲸蜡磷酸酯、豆磷脂、胆固醇、吐温40、聚乙二醇600和其它可药用辅料，其中盐酸克林霉素棕榈酸酯、二鲸蜡磷酸酯、豆磷脂、胆固醇、吐温40、和聚乙二醇600的重量份数比例为：

[0017]

[0018] 本发明提供的盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体固体制剂，优选地，其中盐酸克林霉素棕榈酸酯、二鲸蜡磷酸酯、豆磷脂、胆固醇、吐温40、和聚乙二醇600的重量份数比例为：

[0019]

[0020] 在本发明的一个优选实施方案中，所述的盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体固体制剂包括盐酸克林霉素棕榈酸酯15份、二鲸蜡磷酸酯40份、豆磷脂30份、胆固醇20份、30份吐温40、和40份聚乙二醇600。

[0021] 在本发明的另一个优选实施方案中，所述的盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体固体制剂包括盐酸克林霉素棕榈酸酯15份、二鲸蜡磷酸酯80份、豆磷脂50份、胆固醇40份、70份吐温40、和80份聚乙二醇600。

[0022] 在本发明的还一个优选实施方案中，所述的盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体固体制剂包括盐酸克林霉素棕榈酸酯15份、二鲸蜡磷酸酯60份、豆磷脂40份、胆固醇30份、50份吐温40、和60份聚乙二醇600。

[0023] 本发明提供盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体固体制剂，其中所述的其它可药用辅料在本发明上述脂质体固体制剂中的含量以重量份数计为90-160份，该重量份数是以相对于盐酸克林霉素棕榈酸酯15份计的，即15份盐酸克林霉素棕榈酸酯应用90-160份的其它可药用辅料；其中所述的其它可药用辅料选自稀释剂、崩解剂、甜味剂、粘合剂、润滑剂及其组合，每种辅料单独的具体用量可以由本领域技术人员根据各种辅料在固体制剂中的一般用量进行选择。

[0024] 本发明提供的盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体固体制剂为片剂或颗粒剂，其中所述固体制剂的规格按克林霉素计为15mg、37.5mg、75mg。

[0025] 本发明中，所述的稀释剂选自淀粉、乳糖、山梨醇、微晶纤维素、糊精中的一种或几种，优选为乳糖，其用量可以为所述固体制剂总重量的20-65％(w/w)。

[0026] 本发明中，所述的崩解剂选自低取代羟丙纤维素、羧甲基纤维素、羧甲淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮的一种或几种，优选交联聚维酮，其用量可以为所述固体制剂总重量的1.5-8％(w/w)。

[0027] 本发明中，所述的粘合剂选自聚维酮K30、淀粉浆、羟丙甲纤维素、羧甲基纤维素钠、乙基纤维素、阿拉伯胶、黄原胶中的一种或几种，优选为阿拉伯胶，其用量可以为所述固体制剂总重量的1-8％(w/w)。

[0028] 本发明中，所述的润滑剂选自硬脂酸镁、硬脂酸锌、滑石粉、微粉硅胶、聚乙二醇4000、硬脂酸中的一种或几种，优选为聚乙二醇4000。其用量可以为所述固体制剂总重量的
0.5-5％(w/w)。

[0029] 本发明中，所述的甜味剂选自蔗糖、阿斯帕坦、糖精钠、三氯蔗糖、甜菊糖苷、甜菊素中以及它们的组合，优选为甜菊糖苷。其用量可以为所述固体制剂总重量的0.1-5％(w/w)。

[0030] 本发明还提供了一种盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体固体制剂的制备方法，具体包括如下步骤：

[0031] (1)精密称取盐酸克林霉素棕榈酸酯、二鲸蜡磷酸酯、豆磷脂、胆固醇、吐温40、和聚乙二醇600，置于梨形瓶中，加入有机溶剂，混合均匀，置于旋转蒸发仪中20-120分钟蒸干成膜；

[0032] (2)向梨形瓶中加入缓冲溶液，旋转溶解30分钟，超声15-30分钟使溶液透明，0.45μm微孔滤膜过滤；

[0033] (3)将上述滤液置于-20℃冷冻5-12小时后取出，室温融化，再40kHz超声5-10分钟，喷雾干燥，即得盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体粉末；

[0034] (4)将盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体粉末和稀释剂、崩解剂、甜味剂混合，过80目筛混合均匀，加入粘合剂溶液制备软材，过20目筛制粒，干燥，得到干颗粒；

[0035] (5)将干颗粒和润滑剂混合均匀，过20目筛整粒；

[0036] (6)压片、装袋、填充胶囊，制得盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体固体制剂。

[0037] 本发明的制备方法中，所述的有机溶剂选自氯仿、乙醇、苯甲醇、甲醇、叔丁醇、正丁醇、异丙醇、丙酮、正己烷和二氯甲烷中的一种或几种，优选异丙醇，其中有机溶剂的用量没有特别要求，以能够完全溶解盐酸克林霉素棕榈酸酯、二鲸蜡磷酸酯、豆磷脂、胆固醇、吐温40、和聚乙二醇600为宜。

[0038] 本发明的制备方法中，所述的粘合剂溶液是粘合剂在一定浓度的乙醇中的溶液，所述乙醇可以选自10-60％的乙醇溶液，优选30％的乙醇溶液。

[0039] 本发明的制备方法中，所述的缓冲溶液选自磷酸盐缓冲液、枸橼酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液和碳酸盐缓冲液中的一种，优选pH为5.8的磷酸盐缓冲溶液。pH为5.8的磷酸盐缓冲溶液为药典规格的pH为5.8的磷酸二氢钾-磷酸氢二钾缓冲溶液。

[0040] 在本文中，如果没有特别地说明，含量或用量都以重量份计；如果没有特别地说明，所采用的装置、仪器、原料、物质、用量、方法、时间、温度及其它条件等都为本领域众所周知的，或者是本领域技术人员根据本申请的描述结合现有技术可以获得的。

[0041] 本发明人经过研究发现，二鲸蜡磷酸酯、豆磷脂、胆固醇组合具有较好的效果，其中二鲸蜡磷酸酯类似于“缓冲稳定剂”，起到调节膜结构的作用，使脂质体稳定性显著增强。

[0042] 在本发明的脂质体中，聚乙二醇600和吐温40用于调节脂质体的膜稳定性和通透性。

[0043] 在本发明的盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体中，使用吐温40来进一步改进脂质体膜的稳定性和包封率。吐温40是一种非离子表面活性剂，当用于磷脂和胆固醇组合磷脂形成的双层膜中时，不仅能进一步提高盐酸克林霉素棕榈酸酯的溶解性，从而提高包封率；而且能提高该双层膜之间的化学能，从而提高脂质体在水性液体中的化学稳定性，进而提高盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体的稳定性。

[0044] 不受理论限制，本发明人令人惊奇地发现，加入聚乙二醇600可以改变盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体的药学性质，聚乙二醇600有一定粘度和表面活性作用，可降低脂质体与胃肠道黏液之间的表面张力，促进药物进入胃肠黏膜，从而提高生物利用度和治疗效果。经研究，发明人发现聚乙二醇600优于聚乙二醇400、或聚乙二醇800等其他聚乙二醇。

[0045] 本发明提供的盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体固体制剂，极大提高了药物的稳定性、包封率，同时提高了药物的溶出度和生物利用度，减少了毒副作用，提高了制剂产品质量，疗效更显著。不受理论限制，本发明的脂质体固体制剂的优良性质可能是特定用量的二鲸蜡磷酸酯、豆磷脂、胆固醇、吐温40、和聚乙二醇600这五种材料对于具体药物盐酸克林霉素棕榈酸酯的共同和/或协同作用的结果。而应用本领域常用的其它膜材料磷脂(例如采用其中的一种或两种天然磷脂和合成磷脂)，和胆固醇与除了吐温40之外的其它表面活性剂的组合材料，按照本领域常规技术制备得到的盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体都会存在稳定性较差、包封率低等问题，尤其在高温40℃、相对湿度75％±5％加速试验下，这些缺点更为明显，既不利于贮存，也不利于临床应用。

附图说明

[0046] 图1是实施例1-3的样品与盐酸克林霉素棕榈酸酯游离药的体外释放曲线，其中水平轴表示小时为单位的时间，垂直轴表示盐酸克林霉素棕榈酸酯的累积释放百分数。

[0047] 图2是实施例1-3的样品与市售盐酸克林霉素棕榈酸酯片(上市例)的血药浓度与时间的关系曲线。

具体实施方式

[0048] 下面参照实施例进一步详细阐述本发明，但是本领域技术人员应当理解，本发明的范围并不限于这些实施例以及使用的制备方法。而且，本领域技术人员根据本发明的描述可以对本发明进行等同替换、组合、改良或修饰，所有这些都将包括在本发明的范围内。

[0049] 实旋例1盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体片

[0050] 处方(1000片)

[0051]

[0052] 制备工艺：

[0053] (1)精密称取15g盐酸克林霉素棕榈酸酯、40g二鲸蜡磷酸酯、30g豆磷脂、20g胆固醇、30g吐温40、40g聚乙二醇600，置于梨形瓶中，加入1000ml异丙醇，混合均匀，置于旋转蒸发仪中20分钟蒸干成膜；

[0054] (2)向梨形瓶中加入1000ml pH为5.8的磷酸盐缓冲溶液，旋转溶解30分钟，超声15分钟使溶液透明，0.45μm微孔滤膜过滤；

[0055] (3)将上述滤液置于-20℃冷冻5小时后取出，放置于室温下融化，再超声5分钟，喷雾干燥，即得盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体粉末；

[0056] (4)将盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体粉末和120g乳糖、20g交联聚维酮和2g甜菊糖苷混合，过80目筛混合均匀，加入含10％阿拉伯胶的30％的乙醇溶液100ml制备软材，过20目筛制粒，干燥；

[0057] (5)将干颗粒和5g聚乙二醇4000混合均匀，过20目筛整粒；

[0058] (6)压片，制得盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体片。

[0059] 实施例2盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体颗粒

[0060] 处方(1000袋)

[0061]

[0062] 制备工艺：

[0063] (1)称取37.5g盐酸克林霉素棕榈酸酯、200g二鲸蜡磷酸酯、125g豆磷脂、100g胆固醇、175g吐温40、200g聚乙二醇600，置于梨形瓶中，加入3000ml乙醇，置于旋转蒸发仪中120分钟蒸干成膜；

[0064] (2)向梨形瓶中加入2000ml pH为5.8的枸橼酸盐缓冲液，旋转溶解30分钟，超声30分钟使溶液透明，0.45μm微孔滤膜过滤；

[0065] (3)将上述滤液置于-20℃冷冻5小时后取出，融化，再超声10分钟，喷雾干燥，即得盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体粉末；

[0066] (4)将盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体粉末和240g乳糖、20g交联聚维酮和3g甜菊糖苷混合，过80目筛混合均匀，加入10％阿拉伯胶的30％的乙醇溶液120ml制备软材，过20目筛制粒，干燥；

[0067] (5)将干颗粒和10g聚乙二醇4000混合均匀，过20目筛整粒；

[0068] (6)装袋，制得盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体颗粒。

[0069] 实施例3盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体胶囊

[0070] 处方(1000粒)

[0071]

[0072] 制备工艺：

[0073] (1)称取37.5g盐酸克林霉素棕榈酸酯、150g二鲸蜡磷酸酯、100g豆磷脂、75g胆固醇、125g吐温40、150g聚乙二醇600，置于梨形瓶中，加入2000ml二氯甲烷，置于旋转蒸发仪中120分钟蒸干成膜；

[0074] (2)向梨形瓶中加入2000ml pH为5.8的磷酸盐缓冲液，旋转溶解30分钟，超声30分钟使溶液透明，0.45μm微孔滤膜过滤；

[0075] (3)将上述滤液置于-20℃冷冻5小时后取出，融化，再超声10分钟，喷雾干燥，即得盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体粉末；

[0076] (4)将盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体粉末和240g乳糖、20g交联聚维酮和1g甜菊糖苷混合，过80目筛混合均匀，加入10％阿拉伯胶的30％的乙醇溶液120ml制备软材，过20目筛制粒，干燥；

[0077] (5)将干颗粒和10g聚乙二醇4000混合均匀，过20目筛整粒；

[0078] (6)填充胶囊，制得1000粒盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体胶囊。

[0079] 对比例1-3

[0080] 分别选用本发明所选择组分之外的其它成分，如常用制备脂质体的卵磷脂，以及本发明组分的含量配比之外的其它组分的组合，进行对比例试验，其中对比例1按照CN101530393A实施例1的方法制备盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体，对比例2-3采用与实施例2-3中步骤(1)～(3)制备盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体相同的生产工艺制备盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体。

[0081] 各对比例的组分及含量如下表所示：

[0082] 表1对比例试验

[0083]

[0084] 其中，“/”表示未使用。

[0085] 按以上处方组分分别制备对比例1-3盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体。

[0086] 试验例1脂质体的考察

[0087] 将实施例1-3步骤(3)中和对比例1-3中所制备的适量脂质体粉末样品进行质量考察，主要进行脂质体形态观察、粒径测定和脂质体包封率测定。

[0088] 其中脂质体形态和粒径测定采用光学显微镜法和statistica5.0统计软件运算观察约1000粒求平均值。

[0089] 包封率测定为脂质体常规的测定，采用超滤法测定盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体的包封率。简言之，利用超滤法分离出游离药物；利用甲醇破坏脂质体以提取药物，然后以HPLC法与标准品对照进行含量测定，按照包封率公式计算出药物包封率。

[0090] 各项统计结果如下表

[0091] 表2脂质体的考察

[0092]

[0093] 渗漏率由公式Q渗％＝(W包-W贮)/W包×100％计算渗漏率。发明实施例1-3制备的样品渗漏率很低，小于3％或几乎没有渗漏现象，而对比例1-3制备的样品渗透率逐渐增大，渗漏率最高可达到约23％。

[0094] 以上结果充分说明了本发明实施例1-3制备的脂质体较对比例1-3制备的脂质体效果好，形态规则，粒径大小均一，包封率较高，渗漏率很低，证明了本发明的实际可行性。

[0095] 试验例2稳定性和溶出度考察

[0096] 将以上实施例制备的样品与上市的盐酸克林霉素棕榈酸酯片(重庆凯兴制药有限公司，批号：H20100812)在高温40℃、相对湿度75％的条件下6个月，进行加速试验考察，结果如表3。

[0097] 表3加速试验结果

[0098]

[0099] 由以上结果可知，加速6月时，上市制剂溶出度减小，含量降低，有关物质升高；而本发明的样品溶出度、含量和有关物质变化均不明显，充分说明本发明的产品较上市制剂有较高的稳定性。

[0100] 试验例3释放度试验考察

[0101] 精密称取盐酸克林霉素棕榈酸酯游离药和实施例1-3的样品各1g(以盐酸克林霉素棕榈酸酯的量为准)溶于10ml水中，精密吸取混悬液各2ml置于透析袋中扎紧，固定在溶出仪的搅拌桨上，释放介质为pH6.8的磷酸盐缓冲溶液(含0.25％的吐温20)100ml，水浴温度为37℃，搅拌转速为300rpm，分别于0.5、1、2、4、6、8、12、18、24h取样1ml，测定释放率，绘制释放曲线，结果如附图1中所示。

[0102] 结果表明，盐酸克林霉素棕榈酸酯游离药释放速度快，4小时达到93％以上；而本发明实施例1-3中所得盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体固体制剂释药缓慢，18小时才达到约90％，24小时释放完全，达到了缓释的效果。

[0103] 由试验结果可知实施例的脂质体固体制剂的稳定性和体外释放度优于对比例1-3和上市制剂，因此本发明的方法改进了制剂的稳定性和释放效果。

[0104] 试验例4血药浓度考察

[0105] 将40只大鼠随机分成4组，每组分别灌胃实施例1-3的样品、及市售盐酸克林霉素棕榈酸酯片(重庆凯兴制药有限公司，批号：H20100812)，灌胃量为15mg盐酸克林霉素棕榈酸酯的片剂、胶囊剂、干混悬剂或颗粒剂。给药后分别于0.5h、1h、1.3h、1.5h、2h、4h、8h、12h、20h和25h，采血，血样经处理后，以HPLC-MS法测定血药浓度。作出本发明的盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体固体制剂和市售的盐酸克林霉素棕榈酸酯片的平均血药浓度与时间的关系曲线，如图2。

[0106] 由图2可知，本发明盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体固体制剂释放缓慢，实施例1-3样品的生物利用度均高于市售片(图中上市例)的生物利用度。

[0107] 工业实用性

[0108] 由上述实施例以及实验例的结果可知，本发明的盐酸克林霉素棕榈酸酯脂质体固体制剂具有良好的外观，颗粒小，粒径均匀，包封率高，稳定性高，溶出性好，渗漏率低，在体内的停留时间长，生物利用度高，具有良好的工业应用价值。

[0109] 以上通过具体实施方式和实施例对本发明进行了详细说明，不过应理解，这些说明并不对本发明的范围构成任何限制，在不偏离本发明的精神和保护范围的情况下，可以对本发明的技术方案及其实施方式进行多种修饰、改进和替换，这些均因落入本发明的保护范围内。

[0110] 本申请中提及或引用的各个参考文献，在此全文引入作为参考。