环烯醚萜类化合物在制备治疗良性前列腺增生的药物中的用途

摘要

本发明公开了一种环烯醚萜类化合物在制备治疗良性前列腺增生的药物中的用途；所述的环烯醚萜类化合物是化合物D。该类化合物来源于败酱科植物。败酱科植物药用历史久远，安全性好。本发明化合物比原有的蜘蛛香植物提取物更加明确了药效物质，为制备市场前景良好的新的抗良性前列腺增生的药物提供了可能。

权利要求

1. 一种环烯醚萜类化合物在制备治疗良性前列腺增生药物中的用途；

所述的环烯醚萜类化合物是：

化合物D 。

说明书

环烯醚萜类化合物在制备治疗良性前列腺增生的药物中的

用途

[0001] 本申请是申请号：200810044328.8的专利申请的分案申请。原申请申请号：200810044328.8，申请日：2008年4月30日，发明名称：环烯醚萜类化合物在制备治疗良性前列腺增生的药物中的用途。

技术领域

[0002] 本发明涉及一类化合物的新用途，具体地，是环烯醚萜类化合物在制备治疗良性前列腺增生的药物中的用途，属药物领域。

背景技术

[0003] 随着社会老龄化进程的加快，许多老年疾病的发病率逐渐上升。其中，男性前列腺增生是发生几率较多的常见病之一。据统计分析，良性前列腺增生(BPH)患者约占老年男性的20％左右。其发病率也与种族、地区有一定关系，东方人的发生几率小于西方民族，国外BPH的发病率明显高于国内。一般有前列腺增生家族史的人群中发病率偏高，约占1/2以上。

[0004] 多年来的研究表明，良性前列腺增生发病机制与体内激素比例失调，双氢睾酮(DHT)在前列腺内聚积有关。前列腺增生后，可压迫腺体中的尿道，引起排尿困难，长期不能缓解易发生双侧输尿管、肾盂积水，病症晚期肾实质萎缩，可引起尿毒症。

[0005] 5α-还原酶是主要存在于前列腺、皮肤及肝组织内的一种特异性酶，通过催化睾酮(T)转换为二氢睾酮(DHT)，增强雄激素与其受体的作用，从而维持前列腺体的生长和发育。通常前列腺组织DHT水平高于T，但5α-还原酶表达过强或酶活性增强将导致前列腺过度增生，组织DHT水平异常升高。具有5α-还原酶抑制剂作用的药物通过降低前列腺组织和血清DHT水平而使前列腺重量降低。

[0006] 5α-还原酶活性依赖还原性辅酶II(NADPH)，其功能作用是催化NADPH的氢传递到底物睾酮(T)空间位阻较小的α面，产生被酶稳定的烯醇后再经质子化转变成双氢睾酮(DHT)，后者为睾酮的活性形式，为前列腺分化、生长发育所必需。在老年期，前列腺组织具有很高的5α-还原酶活性，DHT含量明显升高，是导致前列腺增生的重要因素。抑制5α-还原酶活性即能抑制DHT的生物合成，从而改善或减轻良性前列腺增生以及男性脱发等症状。因此，研究具有抑制5α-还原酶活性的药物对临床治疗良性前列腺增生具有重要意义。

[0007] 目前治疗良性前列腺增生市场药物种类虽然较多，但主要由α受体抑制剂、抗雄性激素药物和植物性药物三大类组成。

[0008] α-受体抑制剂：临床应用的α-受体抑制剂主要有：酚苄明、坦洛新、特拉唑嗪、多沙唑嗪、阿夫唑嗪等，在国外该类药物占据BPH市场中60％以上的份额，在我国约占30％左右，是前列腺增生市场中主要品种之一。其中，盐酸酚苄明属于非选择性α-肾上腺素受体抑制剂。该药能使收缩的前列腺肌体组织松弛，尿路梗塞得到显著缓解，具有见效快、持续时间短，效果好的特点。其不足之处是对少数心血管病人有一定的影响，限制了部分老年人的使用，影响了临床与市场推广。特拉唑嗪是第二代长效选择性α1-受体抑制剂，由美国雅培公司开发成功。特拉唑嗪对心肌磷酸二酯酶具有一定的活性，通过抑制血管平滑肌，使全身小动脉和小静脉血管舒张，达到减小血管阻力的目的，同时兼有调节血脂、降低总胆固醇和低密度脂蛋白等作用。盐酸坦洛新系第三代超选择性长效α1-受体抑制剂，亦称坦索罗辛，由日本山之内制药研发成功。该药能特异地抑制前列腺平滑肌的收缩，迅速缓解BPH临床症状，疗效好，不良反应更少，上市后销售额快速增长，是目前国内外畅销品种。

[0009] 抗雄性激素药物：主要包括：5α-还原酶抑制剂和雄性激素受体拮抗剂。该类药物能抑制双氢睾酮(DHT)浓度，提高前列腺素水平，使上皮及基质细胞萎缩，能有效减小增生的前列腺体积，从根本上改善增生症状。主要品种是非那雄胺、依立雄胺等。

[0010] 上述药物多具有一定的毒副作用，且价格较高。近年来，植物提取物在治疗良性前列腺增生方面逐渐展现优势。发明人已从败酱科缬草属植物蜘蛛香Valeriana jatamansi Jones.的根茎及根中筛选到了一种对良性前列腺增生有显著疗效的非极性溶剂提取物。为了使药效物质基础更加明确，发明人又进行了一系列的深入研究，取得了突破性进展。

发明内容

[0011] 本发明的方案是提供了环烯醚萜类化合物的新用途。本发明还提供了含有环烯醚萜类化合物的药物组合物。

[0012] 本发明提供了一种环烯醚萜类化合物在制备治疗良性前列腺增生的药物中的用途。

[0013] 其中，所述的环烯醚萜类化合物是如式Ⅰ所述：

[0014]

[0015] 式I

[0016] 式中R1为醛基及缩醛、羧基及C1-C6的酯/酰胺、甲基、羟甲基及C1-C6的醚/酯；

[0017] R2为醛基及缩醛、羧基及C1-C6的酯/酰胺、甲基、羟甲基及C1-C6的醚/酯；

[0018] 进一步优选地，所述的环烯醚萜类化合物是如式Ⅱ所述的化合物：

[0019]

[0020] 式中，R为饱和的含氧或含氮基团，即羟基及C1-C6的醚/酯或胺基及C1-C6的仲胺/酰胺。

[0021] 更进一步优选地，所述的环烯醚萜类化合物是如下式的化合物A：

[0022]

[0023] 其中，所述的环烯醚萜类化合物是如式Ⅲ所述：

[0024]

[0025] 式中R1为饱和的含氧或含氮基团，即羟基及C1-C6的醚/酯或胺基及C1-C6的仲胺/酰胺；

[0026] R2为醛基及缩醛、羧基及C1-C6的酯/酰胺、甲基、羟甲基及C1-C6的醚/酯；

[0027] R3为醛基及缩醛、羧基及C1-C6的酯/酰胺、甲基、羟甲基及C1-C6的醚/酯。

[0028] 进一步优选地，所述的环烯醚萜类化合物是如下式的化合物B：

[0029]

[0030] 其中，所述的环烯醚萜类化合物是如式Ⅳ所述：

[0031]

[0032] 式中R1为饱和的含氧或含氮基团，即羟基及C1-C6的醚/酯或胺基及C1-C6的仲胺/酰胺；

[0033] R2为醛基及缩醛、羧基及C1-C6的酯/酰胺、甲基、羟甲基及C1-C6的醚/酯；

[0034] R3为饱和的含氧或含氮基团，即羟基及C1-C11的醚/酯或胺基及C1-C11的仲胺/酰胺；

[0035] R4为饱和的含氧或含氮基团，即羟基及C1-C6的醚/酯或胺基及C1-C6的仲胺/酰胺；

[0036] R5为醛基及缩醛、羧基及C1-C11的酯/酰胺、甲基及卤素单(多)取代的甲基、羟甲基及C1-C11的醚/酯。

[0037] 其中，所述的环烯醚萜类化合物是如式Ⅴ所述：

[0038]

[0039] 式中R1为饱和的含氧或含氮基团，即羟基及C1-C6的醚/酯或胺基及C1-C6的仲胺/酰胺；

[0040] R2为醛基及缩醛、羧基及C1-C11的酯/酰胺、甲基、羟甲基及C1-C11的醚/酯；

[0041] R3为饱和的含氧、含氮基团，即羟基及C1-C6的醚/酯、胺基及C1-C6的仲胺/酰胺或为氢取代；

[0042] R4为饱和的含氧或含氮基团，即羟基及C1-C11的醚/酯(包括芳香酸和非芳香酸)或胺基及C1-C11的仲胺/酰胺(包括芳香酸和非芳香酸)；

[0043] R5为饱和的含氧、含氮基团，即羟基及C1-C6的醚/酯、胺基及C1-C6的仲胺/酰胺或为氢取代；

[0044] R6为醛基及缩醛、羧基及C1-C11的酯/酰胺、甲基、羟甲基及C1-C11的醚/酯。

[0045] 其中，所述的环烯醚萜类化合物是如式Ⅵ所述：

[0046]

[0047] 式中R1为饱和的含氧或含氮基团，即羟基及C1-C6的醚/酯或胺基及C1-C6的仲胺/酰胺；

[0048] R2为醛基及缩醛、羧基及C1-C6的酯/酰胺、甲基、羟甲基及C1-C6的醚/酯；

[0049] R3为饱和的含氧或含氮基团，即羟基及C1-C11的醚/酯或胺基及C1-C11的仲胺/酰胺；

[0050] R4为饱和的含氧或含氮基团，即羟基及C1-C6的醚/酯或胺基及C1-C6的仲胺/酰胺；

[0051] R5为醛基及缩醛、羧基及C1-C11的酯/酰胺、甲基及卤素单、多取代的甲基、羟甲基及C1-C11的醚/酯。

[0052] 进一步优选地，所述的环烯醚萜类化合物是：

[0053]

[0054] 本发明还提供了一种治疗良性前列腺增生的药物组合物，它是所述化合物为活性成分，加上药学上可接受的辅料或辅助性成份制备而成的药剂。

[0055] 其中，所述的药剂是口服制剂、外用制剂和注射制剂。

[0056] 本发明的化合物是从中药蜘蛛香(Valeriana jatamansi Jones.)提取分离得到的。蜘蛛香系败酱科(Valerianaceae)缬草属(Valeriana)植物，药用其根茎及根，药用历史久远。

[0057] 蜘蛛香的化学成分和药理活性国内外均有研究，已阐明的主要成分为环烯醚萜、倍半萜、生物碱和黄酮四大类。其中环烯醚萜类成分为蜘蛛香镇静催眠的主要活性成分。近年来，发明人经药理学研究发现，蜘蛛香有很好的抗良性前列腺增生的作用。

[0058] 发明人经过深入研究，发现蜘蛛香抗良性前列腺增生的药效物质主要集中在石油醚提取物和乙酸乙酯提取物中，经进一步提取分离，确定了药效物质为环烯醚萜类化合物。比原有的蜘蛛香提取物更加明确了药效物质，为制备药效物质基础明确，质量稳定可控，市场前景良好的新的抗良性前列腺增生的药物提供了可能。

[0059] 显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以作出其它多种形式的修改、替换或变更。

[0060] 以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例，凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

具体实施方式

[0061] 实施例1本发明化合物的制备和结构鉴定

[0062] 一、提取与分离

[0063] 蜘蛛香根茎粗粉(6kg)，以95％乙醇为溶剂，渗漉提取，收集渗漉液30L，减压浓缩得总浸膏1500g。总浸膏分散于500ml水中，依次用石油醚(60～90℃)、乙酸乙酯和正丁醇萃取，减压回收溶剂后，得到石油醚(60～90℃)萃取物290g，乙酸乙酯萃取物130g，正丁醇萃取物200g。

[0064] (一)对石油醚萃取物的进一步分离

[0065] 石油醚(60～90℃)萃取物100g，经硅胶柱层析(石油醚→石油醚/乙酸乙酯→乙酸乙酯→丙酮梯度洗脱)，粗分成204份。

[0066] PE51#～65#样品合并后，经硅胶柱层析(石油醚→石油醚/乙酸乙酯→乙酸乙酯# #→丙酮梯度洗脱)，分成49份。其中PE1-2 ～PE1-11 样品合并后，经硅胶柱层析(石油醚# #
→石油醚/丙酮→丙酮→甲醇梯度洗脱)，分成29份。PE1-30 ～PE1-32 析出黄色针晶，合并为PE1-(4)，经TLC制备(石油醚/丙酮2∶1)，得到黄色针晶PE1-(4)(12mg)，即化合物A。

[0067] PE107#～109#样品合并后，经硅胶柱层析(石油醚→石油醚/乙酸乙酯→乙酸乙#酯→丙酮梯度洗脱)，分成33份。其中PE3-9 析出针状晶体，经TLC检测，与PE1-(4)为同# #
一成分；PE3-16 析出针状晶体，经TLC检测，与PE116 为同一成分，即化合物B。

[0068] PE111#～115#样品合并后，经硅胶柱层析(石油醚→石油醚/乙酸乙酯→乙酸乙# #酯→丙酮梯度洗脱)，分成23份。其中PE4-14 析出针状晶体，经TLC检测，与PE116 为同一成分，即化合物B。

[0069] PE116#～120#析出针状晶体，过滤后重结晶，得PE116#(50mg)，即化合物B。

[0070] (二)对乙酸乙酯萃取物的进一步分离

[0071] 乙酸乙酯萃取物124g，经硅胶柱层析(石油醚→石油醚/丙酮→丙酮→甲醇梯度洗脱)，粗分成144份。

[0072] EA70#～85#样品合并后，经硅胶柱层析(石油醚→石油醚/丙酮→丙酮→甲醇梯# #度洗脱)，分成32份。其中EA-B-10 和EA-B-11 样品合并后，经反相硅胶柱层析，分成15# #
份，EA-B-A-7 析出针晶，经TLC检测，与PE116 为同一成分，即化合物B。

[0073] 另从乙酸乙酯部分，石油醚部分分得到化合物C、D。

[0074] 二、结构鉴定

[0075] 化合物1：PE1-(4)(即化合物A)：baldrinal黄色针状晶体，石油醚部分分得。1 13 [1]
H-NMR和 C-NMR数据与文献 报道的baldrinal一致。

[0076] C12H10O4，1H-NMR(CDCl3)δH：9.94(1H，s，H-10)，9.18(1H，s，H-1)，7.88(1H，s，H-3)，7.87(1H，d，J＝3.18Hz，H-7)，6.61(1H，d，J＝3.18Hz，H-6)，5.26(2H，s，H2-11)，2.12(3H，
13
s，H-13)；C-NMR(CDCl3)δC：185.0(C-10)，170.6(C-12)，150.7(C-1)，146.1(C-7)，
142.0(C-3)，133.7(C-5)，124.9(C-8)，123.0(C-9)，119.2(C-4)，109.4(C-6)，60.4(C-11)，
20.8(C-13).

[0077] 结构式：

[0078]#

[0079] 化合物2：PE116(即化合物B)：白色针状晶体，石油醚部分和乙酸乙酯部分均分得。+

[0080] C17H22O7，m.p.50～51℃(正己烷/丙酮).HRESIMS(m/z 361.1257[M+Na]).20
[α] D+74.19 ° (c 0.06，CHCl3).IR(KBr)νMAX：3450(OH)，1738(-CHO)，1663( ＞ C ＝-1
C-CHO)cm .-UV(Methanol)：λMAX＝277.6nm.

[0081] Table 1.NMR Data of compound PE116(600MHz，δin ppm，J in Hz)inCDCl3[0082]

[0083] 结构式：

[0084]

[0085] 化合物C：黄色粉末，乙酸乙酯部分分得。

[0086] 1H-NMR(CDCl3)δH：9.93(1H，s，H-10)，9.19(1H，s，H-1)，7.91(1H，s，H-3)，7.85(1H，d，J＝3.30Hz，H-7)，6.60(1H，d，J＝3.30Hz，H-6)，4.91(2H，s，H2-11).[0087] 结构式：

[0088]

[0089] 化合物D：白色针状晶体，石油醚部分分得。+ 1

[0090] C27H40O10，ESIMS(m/z 547[M+Na])；H-NMR(CDCl3)δH：6.68(1H，s，H-3)，6.24(1H，d，J＝10.1Hz，H-1)，5.77(1H，t，J＝2.7Hz，H-7)，5.47(1H，d，J＝2.7Hz，H-6)，4.71，4.65(各1H，AB，d，J＝12.4Hz，H2-11)，4.39，4.32(各1H，AB，d，J＝11.6Hz，H2-10)，
2.94(1H，dd，J1＝9.9Hz，J2＝2.3Hz，H-9)，2.35～2.04(9H，m，H2-15，H-16，H2-20，H-21，H2-25andH-26)，2.03(3H，s，H3-13)，0.99，0.96，0.93(各6H，d，J＝6.5Hz，H3-17，H3-18，H3-22，H3-23，H3-27and H3-28).

[0091] 结构式：

[0092]

[0093] 实施例2一种抗良性前列腺增生的胶囊剂的制备：

[0094] 取化合物A 1kg，化合物B 6kg，加入适量淀粉混合均匀，干法制粒，整粒后分装成胶囊，即得。

[0095] 以下通过活性试验证明本发明的有益效果。

[0096] 试验例1本发明化合物对5α-还原酶活性的抑制作用

[0097] 采用提取前列腺组织5α-还原酶的方法(参考文献：况刚等，一种非同位素5α-还原酶抑制剂体外筛选模型的建立和应用。中药药理与临床，2005；21：61-64)研究了蜘蛛香石油醚部分浸膏、蜘蛛香乙酸乙酯部分浸膏、化合物A、化合物B对5α-还原酶的抑制作用。具体操作分为两步：1)取大鼠前列腺组织，以1∶5(g/ml)比例加入预冷匀浆缓冲液(0.88M蔗糖，1.5mMCaCl2)，在玻璃匀浆器内匀浆，取上清液离心(10000×g)15分钟，收集上清液)进行蛋白质定量，以总蛋白含量计算表示酶量用于活性测定。酶活性测定反应体系为：酶提取液0.3mg，底物睾酮0.25μM，辅酶NADPH 1mM，阳性药物保列治60μM。取蜘蛛香样品各10mg，加入适量无水乙醇溶解，再加入磷酸氢钠缓冲液(PBS)配制成1mg/ml的工作溶液，取适量加入96孔反应板，按照上述反应体系分别将底物与各样品混匀，再加入酶溶液、NADPH，加入缓冲液补足反应体积为200μl，37℃条件下反应60分钟。2)选择AD公司提供的DHT定量检测试剂盒，该试剂是依据竞争ELISA检测原理，即游离DHT(如血清或前列腺组织中的DHT)与HRP(辣根过氧化物酶)标记的DHT竞争结合酶标板上的抗DHT抗体，当游离DHT减少，HRP-DHT结合量达到最大值，产生很强的颜色反应，当游离DHT增加时，HRP-DHT结合量下降，其颜色反应减弱，通过颜色反应所测定的吸光值(OD)，最终换算为DHT浓度。具体操作如下：分别吸取标准品、对照品以及上述反应液50μl/孔至AD公司提供的96孔酶标板内，各孔分别加入100μl HRP-DHT，室温放置60分钟，期间不断振荡，保证反应充分。以300μl/孔洗涤缓冲液洗板3次，加入150μl/孔HRP底物(TMB)，室温放置10-30分钟，直到标准品孔内液体颜色渐转为深蓝色后，再加入终止液50μl/孔，置酶标仪在450nm波长条件下测定吸光值。参照标准对照并按试剂盒提供的方法将吸光值进行转换，计算出各样品中产物DHT含量，即可判断5α-还原酶活性或药物对其活性的影响，结果见下表：

[0098]

[0099] 实验例2本发明化合物B(PE116#)对5α-还原酶活性的抑制作用实验方法与实验例1相同。

[0100]

[0101]