含有雪果提取物的组合物

摘要

本发明公开一种含有雪果提取物的组合物。其具有预防或改善皱纹、缓解或抑制炎症、美白、保湿、抗氧化、预防或改善老化的效果。

权利要求

1.一种皮肤皱纹预防或改善用组合物，其中，作为有效成分，含有雪果提取物，所述雪果包含选自白雪果(Symphoricarpos albus)、小叶雪果(Symphoricarpos microphyllus)、匍 枝 雪 果(Symphoricarpos mollis)、西 方 雪 果 (Symphoricarpos occidentalis)、小花雪果(Symphoricarpos orbiculatus)、山雪果(Symphoricarpos oreophilus)和毛核木(Symphoricarpos sinensis)中的一种以上。

2.一种炎症缓解或抑制用组合物，其中，作为有效成分，含有雪果提取物，所述雪果包含选自白雪果(Symphoricarpos albus)、小叶雪果(Symphoricarpos microphyllus)、匍 枝 雪 果(Symphoricarpos mollis)、西 方 雪 果 (Symphoricarpos occidentalis)、小花雪果(Symphoricarpos orbiculatus)、山雪果(Symphoricarpos oreophilus)和毛核木(Symphoricarpos sinensis)中的一种以上。

3.一种皮肤美白用组合物，其中，作为有效成分，含有雪果提取物，

所述雪果包含选自白雪果(Symphoricarpos albus)、小叶雪果(Symphoricarpos microphyllus)、匍 枝 雪 果(Symphoricarpos mollis)、西 方 雪 果 (Symphoricarpos occidentalis)、小花雪果(Symphoricarpos orbiculatus)、山雪果(Symphoricarpos oreophilus)和毛核木(Symphoricarpos sinensis)中的一种以上。

4.一种皮肤保湿用组合物，其中，作为有效成分，含有雪果提取物，

所述雪果包含选自白雪果(Symphoricarpos albus)、小叶雪果(Symphoricarpos microphyllus)、匍 枝 雪 果(Symphoricarpos mollis)、西 方 雪 果 (Symphoricarpos occidentalis)、小花雪果(Symphoricarpos orbiculatus)、山雪果(Symphoricarpos oreophilus)和毛核木(Symphoricarpos sinensis)中的一种以上。

5.一种抗氧化用组合物，其中，作为有效成分，含有雪果提取物，

所述雪果包含选自白雪果(Symphoricarpos albus)、小叶雪果(Symphoricarpos microphyllus)、匍 枝 雪 果(Symphoricarpos mollis)、西 方 雪 果(Symphoricarpos occidentalis)、小花雪果(Symphoricarpos orbiculatus)、山雪果(Symphoricarpos oreophilus)和毛核木(Symphoricarpos sinensis)中的一种以上。

6.一种皮肤老化预防或改善用组合物，其中，作为有效成分，含有雪果提取物，所述雪果包含选自白雪果(Symphoricarpos albus)、小叶雪果(Symphoricarpos microphyllus)、匍 枝 雪 果(Symphoricarpos mollis)、西 方 雪 果 (Symphoricarpos occidentalis)、小花雪果(Symphoricarpos orbiculatus)、山雪果(Symphoricarpos oreophilus)和毛核木(Symphoricarpos sinensis)中的一种以上。

7.根据权利要求1～6中任一项所述的组合物，其特征在于，以全部组合物的总重量为基准，含有0.1～30重量%的所述雪果提取物。

说明书

含有雪果提取物的组合物

技术领域

[0001] 本发明涉及含有雪果提取物的组合物。

背景技术

[0002] 人随着年龄的增加，会经历各种由内在、外在要素引起的变化。随年龄的增加，作为构成皮肤的物质的胶原蛋白、弹性蛋白、透明质酸以及糖蛋白的含量和排列会改变或减少，由于自由基以及活性有害氧而受到氧化胁迫。另外，已知因老化的进行或紫外线而增加炎症因子，通过这种炎症因子而使作为分解皮肤组织的酶的基质金属蛋白酶(MMP，Matrix metalloproteinase)的生物合成增加，且由iNOS(诱生型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase))所致的NO的生成增加。

[0003] 另一方面，人的肤色由多种要素来决定的。其中，重要的要素有：制造黑色素的黑色素细胞(melanocyte)的活力、血管的分布、皮肤的厚度以及类胡罗卜素、胆红素等人体内外的色素含有与否等。其中特别最重要的要素为在人体内的黑色素细胞中酪氨酸酶等多种酶作用下生成的称之为黑色素的黑色色素。因外部胁迫性刺激而在皮肤内生成的黑色素是在通过皮肤角质化而排出到外部之前即使胁迫消失也不会消失的稳定的物质。这种黑色素比所需生成更多时，会诱发痣、雀斑、或斑点等色素过度沉着症，带来美容方面的不太好的结果。

[0004] 另外，全方面存在于构成皮肤的细胞中，且用于调节能量动态平衡的因子-PPARγ在皮肤屏障功能的动态平衡的维持及复原、保湿功能、炎症治愈过程的表达中起到重要的作用。已知其通过多种机制 而与调节皮肤屏障的透过性、抑制表皮层增殖、表皮层的分化诱导等皮肤状态调节相关。由于这种特性，PPARγ不仅可以对炎症相关皮肤疾病，还能够对表皮层的过度增殖所致的牛皮癣、伤口治愈、粉刺等多种皮肤的疾病作为核心调节因子来发挥作用。

发明内容

[0005] 本发明的目的是提供一种含有雪果提取物而用于皱纹预防或改善、炎症缓解或抑制、美白、保湿、老化预防或改善的组合物。

[0006] 本发明的一实施方式是提供含有雪果提取物的组合物。

[0007] 在本发明的一实施方式中，上述组合物具有预防或改善皮肤皱纹的用途。

[0008] 在本发明的一实施方式中，上述组合物具有缓解或抑制炎症的用途。

[0009] 在本发明的一实施方式中，上述组合物具有皮肤美白用途。

[0010] 在本发明的一实施方式中，上述组合物具有皮肤保湿用途。

[0011] 在本发明的一实施方式中，上述组合物具有抗氧化用途。

[0012] 在本发明的一实施方式中，上述组合物具有预防或改善老化的用途。

[0013] 根据本发明的一实施方式的组合物含有雪果提取物作为有效成分，从而可具有预防或改善皱纹、缓解或抑制炎症、美白、保湿、抗氧化、预防或改善老化的效果。

附图说明

[0014] 图1为7种雪果提取物和维生素C的利用DPPH的抗氧化能力测定结果曲线图。

具体实施方式

[0015] 只要是从天然物质中提取其中的成分而得到的物质，不论提取方法或成分的种类，皆可包括在本说明书中所谓的“提取物”中。本说明书中的“提取物”是包括例如以下成分的广义的概念，即利用水或有机溶剂从天然物质中提取出的溶于溶剂中的成分；仅提取天然物质的特定成分，例如油等特定成分而得到的成分等。

[0016] 本说明书中所谓的“皮肤”是指覆盖动物体表的组织，其不仅指覆盖脸部或身体等体表的组织，还指包括头皮和毛发的最广义的概念。

[0017] 雪果(Snowberry)为雪果属(Symphoricarpos)的植物，其为忍冬科的落叶性灌木，包括约15个种类。除了一种，其余皆自然生长在北美洲和中美洲，其余一种的源产地为中国西部。还称之为白浆果(Waxberry)。具有1-2cm直径的果实柔和，根据种类从白色(例如白雪果)到粉红色(小叶雪果)、红色(小花雪果)以及带黑色色彩的紫色(毛核木)等分别表现出不同的颜色。雪果的代表性种类如下。

[0018] 白雪果(Common snowberry，Symphoricarpos albus)，

[0019] 墨西哥雪果(Mexican snowberry，Symphoricarpos mexicanus)，

[0020] 小叶雪果(Little leaf snowberry，Symphoricarpos microphyllus)，[0021] 匍枝雪果(Creeping snowberry，Symphoricarpos mollis)，

[0022] 西方雪果或薄叶西方雪果(Western snowberry or Wolfberry，Symphoricarpos occidentalis)，

[0023] 小花雪果(Coralberry，Symphoricarpos orbiculatus)，

[0024] 山雪果(Mountain snowberry，Symphoricarpos oreophilus)，

[0025] 圆叶雪果(Roundleaf snowberry，Symphoricarpos rotundifolius)，[0026] 毛核木(Chinese coralberry，Symphoricarpos sinensis)。

[0027] 本发明一实施方式公开含有雪果提取物作为有效成分的组合物。

[0028] 本发明一实施方式中，上述雪果包括所有种类的雪果。本发明的另一实施方式中，上述雪果包括选自白雪果(Symphoricarpos albus)、墨西哥雪果(Symphoricarpos mexicanus)、小 叶 雪 果(Symphoricarposmicrophyllus)、匍 枝 雪果(Symphoricarpos mollis)、西 方 雪果 (Symphoricarpos occidentalis)、小 花 雪果(Symphoricarpos orbiculatus)、山雪果(Symphoricarpos oreophilus)、圆叶雪果(Symphoricarposrotundifolius)和毛核木(Symphoricarpos sinensis)中的一种以上，但并非仅限与此。

[0029] 本发明的一实施方式中，上述雪果提取物可通过一般的方法提取雪果而得到。本发明的另一实施方式中，上述提取物可在含有水或酒精的有机溶剂中加热并提取雪果后，通过过滤以及减压浓缩工序而获得。本发明的又一实施方式中，对上述有机溶剂不进行特别限定，可以是C1～C5的低级醇。上述C1～C5的低级醇例如可以为选自甲醇、乙醇、异丙醇、正丙醇、正丁醇以及异丁醇中的任意一种或两种以上的混合溶剂。

[0030] 本发明的一实施方式中，以全部组合物的总重量为基准，上述雪果提取物可含有0.1～50重量％。本发明的另一实施方式中，以全部组合物的总重量为基准，上述雪果提取物可含有0.1～30重量％。本发明的又一实施方式中，以全部组合物的总重量为基准，上述雪果提取物可含有0.1～10重量％。以上述范围来含有的情况下，不仅适合达到本发明所要达到的效果，而且对组合物的稳定性以及安全性皆可满足，在性价比上使用上述范围也合适。

[0031] 本说明书中公开的组合物由于含有具有促进前胶原的生物合成、并阻碍MMP-1的生成的效果的雪果提取物，所以可预防或改善皮肤皱纹而抑制皮肤老化。

[0032] 另外，雪果提取物由于抑制NO的生成，所以含有雪果提取物的组合物能够缓解或抑制炎症，且预防或改善老化。

[0033] 雪果提取物通过抑制黑色素的生成，能够美白皮肤。因此含有雪果提取物的组合物能够以皮肤美白用途来使用。

[0034] PPARγ调节表皮角质形成细胞的分化和脂质代谢，从而引导正常表皮层的形成而维持表皮的动态平衡，因此PPARγ被活化时，可起到通过强化皮肤屏障功能而实现的皮肤内在保湿效果。雪果提取物由于活化这样的PPARγ，因此含有雪果提取物的组合物可具有皮肤保湿功能，进一步可预防或改善皮肤老化。

[0035] 根据本发明的一实施方式的组合物由于含有具有抗氧化功能的雪果提取物作为有效成分，因此可预防活化氧或紫外线等所致的细胞损伤，由此可预防或改善老化。

[0036] 本发明的一实施方式提供包含含有雪果提取物的组合物的化妆品组合物。根据它的化妆品的外形 含有化妆品学或皮肤科学上可接允许的介质或基质。它能够以适合局部使用的所有剂型，例如溶液、凝胶、固体、糊无水生成物、在水相中分散油相而获得的乳剂、悬浊液、微乳、微囊、微粒球、离子型(脂质体)及非离子型的小囊分散剂、或进一步包含泡沫(foam)或压缩的推进剂的气雾剂的形态来提供。这些组合物可以用本领域通常方法来制造。

[0037] 化妆品组合物还可以含有：脂肪物质、有机溶剂、溶解剂、浓缩剂、凝胶化剂、软化剂、抗氧化剂、悬浊化剂、稳定化剂、发泡剂(foamingagent)、芳香剂、表面活性剂、水、离子型或非离子型乳化剂、填充剂、金属离子密封剂、螯合剂、保存剂、维生素、阻断剂、湿润化剂、必要的油、染料、颜料、亲水性或亲油性活化剂、脂质小囊或化妆品学或皮肤科学领域通常使用的辅料。上述辅料的含量为在化妆品学或皮肤科学领域通常使用的量。

[0038] 上述化妆品组合物对其剂型没有特别的限定，可以制成如下剂型的化妆品：例如，可制成例如柔肤水、紧肤水、营养化妆水、营养霜、按摩霜、精华、眼霜、眼部精华、洁肤霜、洁肤泡沫、洁肤水、面膜、粉饼、体露、体霜、体油和体精华等。

[0039] 本发明的另一实施方式提供一种包含含有雪果提取物的组合物的药物组合物。这种药物组合物还可以含有防腐剂、稳定剂、水合剂或乳化促进剂、用于调节渗透压的盐和/或缓冲剂等药学辅料以及其它有治疗作用的物质，可通过一般的方法制成各种口服制剂或非口服制剂形态。

[0040] 上述口服制剂例如有片剂、丸剂、硬/软胶囊剂、液剂、悬浮剂、乳化剂、糖浆剂、粉剂、散剂、微粒剂、颗粒剂或微丸剂等，这些剂型除了有效成分之外还可包含表面活性剂、稀释剂(例如：乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、纤维素以及甘氨酸)、润滑剂(例如：二氧化硅、滑石、硬脂酸及其镁或钙盐、以及聚乙二醇)。片剂还可包含硅酸镁铝、淀粉糊、明胶、黄蓍胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠以及聚乙烯吡咯烷酮等粘合剂，并可以根据需要包含淀粉、琼脂、褐藻酸或其钠盐等崩解剂、吸水剂、着色剂、香味剂以及甜味剂等药剂学添加剂。上述片剂可通过通常的混合、制粒或包衣的方法来制造。

[0041] 另外，上述非口服给药制剂可以是例如注射剂、点滴剂、软膏、洗剂、凝胶、霜、喷雾剂、悬浮剂、乳剂、栓剂、贴剂等剂型，但并非仅限于此。

[0042] 本发明的上述药物组合物可通过口服或非口服例如直肠、局部、经皮、静脉内、肌肉内、腹腔内、皮下等给药。

[0043] 另外，上述有效成分的给药量根据接受治疗的对象的年龄、性别、体重、要治疗的特定疾病的病理状态以及严重度、给药途径或开处方之人的判断而不同。基于这种因素的给药量的确定是在本领域技术人员的能力范围之内。一般的给药量为0.001mg/kg/日～2000mg/kg/日、更优选为0.5mg/kg/日～2.5mg/kg/日。

[0044] 本发明的又一实施方式提供一种包含含有雪果提取物的组合物的保健食品组合物。对上述保健食品组合物的剂型没有特别限定，可制成例如片剂、颗粒剂、饮剂、焦糖、能量棒 等。各剂型的保健食品组合物除了有效成分之外，本领域技术人员可以毫无难度地将本领域通常使用的成分根据剂型或使用目的来进行适当选择并配合，且与其它原料一同使用时获得协同效果。

[0045] 上述有效成分的给药量的确定是在本领域技术人员的能力范围之内，药物的1日给药量根据需要给药的对象的健康状态、发病时期、年龄、并发症等多种因素而不同，但以成人为标准时，一般将1～500mg/kg、优选30～200mg/kg的上述组合物1日分1～2次进行给药，但上述给药量以任何方式都不限定本发明的范围。

[0046] 以下，通过实施例以及试验例来对本发明的构成以及效果进行更具体的说明。但这些实施例以及试验例仅仅是为了有助于理解本发明而以例示为目的提供，本发明的范围不被此限定。

[0047] [实施例]

[0048] 将白雪果、小叶雪果、匍枝雪果、西方雪果、小花雪果、山雪果以及毛核木等7种雪果用通常的方法进行提取而制造提取物后进行了如下实施例。

[0049] [试验例1]前胶原生物合成能力

[0050] 将采集人皮肤并直接经1次细胞培养而得的成纤维细胞以每孔106个的量接种在24孔中，培养到成长90％左右为止。将其用无血清培养基培养24小时后，将维生素C以及各雪果提取物溶解在无血清培养基中，以100ppm浓度进行处理，并在CO2培养箱中培养24小时。取它们的上清液，利用(I)型前胶原Elisa试剂盒(Procollagen type 1)检测前胶原的增减与否。在考虑到细胞毒性的浓度下进行了试验，将其结果显示在表1中。合成能力为将非处理组作为100而进行对比的结果。

[0051] [表1]

[0052]试验物质 合成能力(％)
非处理组 100
维生素C 128.5
白雪果(S.albus) 118.4
小叶雪果(S.microphyllus) 113.4
匍枝雪果(S.mollis) 117.1
西方雪果(S.occidentalis) 105.2
小花雪果(S.orbiculatus) 97.4
山雪果(S.oreophilus) 116.7
毛核木(S.sinensis) 104.5

[0053] 从上述表1可知，相比非处理组，大部分雪果提取物的前胶原合成能力都优异。因此，含有雪果提取物的组合物能够促进胶原蛋白的生成，从而缓解人体皮肤老化而发生的胶原蛋白减少现象。

[0054] [试验例2]胶原酶(MMP-1)抑制能力

[0055] 在含有包含2.5％的胎牛血清的DMEM(Dulbecco’s Modified Eagle’s Media)培养基的96孔平板培养板(96-well microtiter plate)中以5000细胞/孔(well)添加采集人体皮肤而直接进行1次细胞培养而得的成纤维细胞，培养到成长70～80％左右为止。然后，将维甲酸和各个雪果提取物以10ppm浓度处理24小时后，收集 细胞培养液。
将收集的细胞培养液利用可商业利用的胶原酶检测机构(美国Amersham pharmacia公司，Catalog#：RPN2610)测定了胶原酶生成程度。首先，在均匀涂覆有1次胶原酶抗体的96-孔板中添加收集的细胞培养液，在恒温箱中进行了3小时的抗原-抗体反应。3小时后，将结合有发色团的2次胶原抗体添加到96-孔板中，再反应15分钟。15分钟之后，添加显色物质，在室温中进行15分钟的显色，再添加1M的硫酸使反应(显色)停止，并使反应液带黄色。此时，黄色的程度随反应进行的程度而表现得不同。用吸光计在405nm下检测带黄色的96-孔板的吸光度，并根据下述式1计算出胶原酶的合成程度。此时将没有进行任何处理的组所收集的细胞培养液的反应吸光度作为对照组。在考虑了细胞毒性的浓度下进行了试验，将其结果显示在表2中。

[0056] [数学式1]

[0057] 胶原酶表达程度(％)＝(物质处理细胞组的吸光度/阴性对照组的吸光度)×100

[0058] [表2]

[0059]试验物质 胶原酶表达抑制程度(％)
非处理组 100
UV处理 152.4
维甲酸 84.3
白雪果(S.albus) 82.4
小叶雪果(S.microphyllus) 78.1
匍枝雪果(S.mollis) 103.5
西方雪果(S.occidentalis) 85.6
小花雪果(S.orbiculatus) 93.9
山雪果(S.oreophilus) 81.6
毛核木(S.sinensis) 101.5

[0060] 胶原酶表达的抑制越多百分比(％)越低，因此，如上述表2所示，表现出大部分的雪果提取物中的胶原酶即基质金属蛋白酶(MMP-1)被抑制的效果。即，含有雪果提取物的组合物可抑制由内在的老化或外部环境因素所致的皮肤组织分解酶即MMP-1的生物合成，从而可抑制皮肤内胶原蛋白的减少并改善皱纹。

[0061] [试验例3]抗炎活性测定(细胞-基础分析)

[0062] 将未经加工的246.7巨噬细胞系(从韩国细胞株银行购入)添加到DMEM培养基中，并添加10％FBS青霉素(100IU/ml)和链霉素(10μg/ml)后，在温度为37℃、5％CO2培5
养箱中培养细胞，然后向48孔平板以5×10 细胞/ml的密度将30μl进行分注，经24小时后将组分 按浓度分别进行处理。1小时后以1μg/ml的LPS进行处理，在18小
时后用格里斯试剂(Griess reagent)对培养基内产生的NO的量进行测定。将以10uM的地塞米松进行处理的组作为抑制NO产生的抗炎活性的阳性对照组，与标准品NaNO2的测定值进行比较而确定NO的量后，将其结果显示在表3中。

[0063] [表3]

[0064]

[0065] 如上述表3中所示，所有雪果提取物与阴性对照组相比皆能抑制NO的生成，因此可知具有抗炎的效果。

[0066] [试验例4]利用Melan-a细胞的黑色素生成抑制能力评价

[0067] 将Melan-a细胞(从英国St.George′s Hospital Medical School购入)用含有10％FBS的DMEM向6孔板(黑色素定量)以2×104细胞/孔(最终容积3ml)、向96孔板(MTT法)以2×103细胞/孔(最终容积200μl)进行添加，在37℃、5％CO2培养箱(MCO-20AIC，三洋)中培养24小时。培养后去掉培养基，将含有10％FBS、2μMα-MSH(黑色素细胞刺激素)、2mM茶碱的DMEM培养基作为新的培养基而使用，并向培养基添加实施例的各雪果提取物而处理了3天。在第5天去掉在6孔板中培养的培养基，用0.25％胰蛋白酶-EDTA(Sigma Chemical Co.)溶液处理而回收细胞粒(pellet)，并移到1.5ml试管中，以10000rpm离心分离10分钟而除去上清液。将获得的pellet在60℃干燥后，添加1NNaOH
100μl而溶解细胞内黑色素。将此溶液用PBS稀释后，在酶标仪475nm中测定吸光度而求得各试验物质的黑色素生成抑制率。将没有添加雪果提取物的细胞作为阴性对照组，将曲酸和美拉索尔孚( )作为阳性对照组。与阴性对照组中的黑色素含量比较，从而测定出雪果提取物的黑色素生成抑制程度，从而测定了美白效果。根据下述数学式2计算出黑色素生成抑制率，将其结果表示在表4中。

[0068] [数学式2]

[0069] 黑色素生成抑制率(％)＝(各试验物质的吸光度/阴性对照组的吸光度)×100[0070] [表4]

[0071]试验物质 浓度 黑色素生成抑制率(％)
非处理组 无添加 -
曲酸 100ppm 49.7％
美拉索尔孚 100ppm 72.8％
白雪果(S.albus) 100ppm 52.1％
小叶雪果(S.microphyllus) 100ppm 43.6％
匍枝雪果(S.mollis) 100ppm 29.8％
西方雪果(S.occidentalis) 100ppm 21.5％
小花雪果(S.orbiculatus) 100ppm 34.5％
山雪果(S.oreophilus) 100ppm 50.8％
毛核木(S.sinensis) 100ppm 32.4％

[0072] 如上述表4中所示，证实了大部分的雪果提取物中的黑色素生成抑制效果。由此可确认雪果提取物具有优异的美白效果。

[0073] [试验例5]PPARγ功效评价

[0074] 1)细胞培养

[0075] 将正常非洲绿猴的肾上皮细胞即CV-1细胞(从ATCC购入)添加到含有10％胎牛血清(Fetal Bovine Serum)和100unit/ml青霉素-链霉素(penicillin-streptomycin)的DMEM(Dulbecco Modified Eagle′s Medium)中，在37℃、5％ CO2中进行培养。

[0076] 2)质粒转染(plasmid transfection)

[0077] 质粒使用了如下3种：在一般的培养条件下也能表达PPARγ的PPARγ质粒；作为启动子具有与PPARs结合而活化的PPARs反应元件(PPARs Response Element，“PPRE”)、且在后面具有作为报告而发挥作用的萤火虫(firefly)荧光素酶(luciferase)基因的PPRE-Luc质粒；以及为了修正转染的值而使用的β-gal质粒。

[0078] 将CV-1细胞以5×104的浓度分注到24孔板，培养18～24小时，并将上述质粒和DMEM与PEI(Polyethylenimine)的1∶3(μg∶μl)混合液在常温下反应15分钟后，投入到各个孔内，以上述方式将质粒导入细胞内。

[0079] 3)PPAR-γ活性度测定

[0080] 向细胞导入质粒之后培养24小时而使其稳定之后，处理试验物质并再培养24小时。培养结束后将细胞用冷PBS清洗两次，对细胞以报告基因裂解缓冲液(reporter lysis buffer，Promega)进行15分钟的处理而破坏细胞。将如此获得的细胞溶出液移到微型管中，在4℃以12000rpm离心分离3分钟，分离细胞的残留物而得到纯的细胞溶出液。

[0081] 各试验组的PPAR-γ活性度通过向细胞溶出液以2∶1的比例混合荧光素酶底物(Luciferase substrate，Promega)，并用光度计测定产生的光的量而进行比较。另外，对细胞溶出液以等量的2×β-半乳糖苷酶检测缓冲液(2×β-galactosidase enzyme assay buffer，Promega)进行处理，并使其在37℃反应30分钟之后，测定420nm波长的吸光度。从而比较了各试验组的β-半乳糖苷酶活性度。将各试验组的PPAR-γ活性度分成各个β-半乳糖苷酶的活性度，根据质粒导入程度的差异进行了修正，并将此修正值利用MINITAB的该样本t检验而评价了活性的显著性。

[0082] [表5]

[0083]试验物质 浓度 活性度(％)
非处理组 无添加 100％
TGZ 5M 600％
白雪果(S.albus) 100ppm 263％
小叶雪果(S.microphyllus) 100ppm 139％
匍枝雪果(S.mollis) 100ppm 213％
西方雪果(S.occidentalis) 100ppm 183％
小花雪果(S.orbiculatus) 100ppm 152％
山雪果(S.oreophilus) 100ppm 235％
毛核木(S.sinensis) 100ppm 143％

[0084] 由表5可知，所有雪果提取物的PPARγ活性度比非处理组都优异，因此可证实皮肤保湿效果优异。

[0085] [试验例6]抗氧化(DPPH)功效评价

[0086] 将干燥重量为100g的实施例的雪果提取物溶于DMSO中，使浓度达到10％，并备用。作为阳性对照组，将维生素C溶于水中，使其浓度达到1％，并备用。将DPPH(1，1-二苯基-2-苦基肼(1，1-diphenyl-2-picrylhydrazyl))加入乙醇中，使其达到10μM的浓度，并备用。将上述提取物溶液和维生素C溶液用乙醇进行1/2分步稀释而制成5个浓度之后，将各个溶液10μl和DPPH溶液190μl混合，在37℃下培养30分钟。然后，在540nm测定OD值。将如此测定的值显示在图1中。图1中，Y轴的值相比于100小越小，意味着抗氧化能力越大。

[0087] 因此，可证实这些雪果的抗氧化功效比阴性对照组优异。

[0088] 下面说明根据本发明的组合物的剂型例子，但其可应用到各种剂型，这并非用来限定本发明，而是仅用于具体说明。

[0089] [剂型例1]柔肤水

[0090] 根据下述表6所记载的组成，用通常的方法制造了柔肤水。

[0091] [表6]

[0092]配合成分 含量(重量％)
实施例 0.1
甘油 3.0
丁二醇 2.0
丙二醇 2.0
羧基乙烯聚合物 0.1
PEG-12壬基苯基醚 0.2
聚山梨酸酯80 0.4
乙醇 10.0
三乙醇胺 0.1
防腐剂、色素、香料 适量
纯净水 余量

[0093] [剂型例2]营养化妆水

[0094] 根据下述表7所记载的组成，用通常的方法制造了营养化妆水。

[0095] [表7]

[0096]配合成分 含量(重量％)
实施例 0.1
甘油 3.0
丁二醇 3.0
丙二醇 3.0
羧基乙烯聚合物 0.1
蜂蜡 4.0
聚山梨酸酯60 1.5
辛酸/癸酸甘油三酯 5.0
角鲨烷 5.0
失水山梨醇倍半油酸酯 1.5
液体石蜡 0.5
鲸蜡硬脂醇 1.0
三乙醇胺 0.2
防腐剂、色素、香料 适量
纯净水 余量

[0097] [剂型例3]营养霜

[0098] 根据下述表8所记载的组成，用通常的方法制造了营养霜。

[0099] [表8]

[0100]配合成分 含量(重量％)
实施例 0.1
甘油 3.0
丁二醇 3.0
液体石蜡 7.0
β-葡聚糖 7.0
卡波姆 0.1
辛酸/癸酸甘油三酯 3.0
角鲨烷 5.0
鲸蜡硬脂基葡萄糖苷 1.5
失水山梨糖醇硬脂酸酯 0.4
聚山梨酸酯60 1.2
三乙醇胺 0.1
防腐剂、色素、香料 适量
纯净水 余量

[0101] [剂型例4]按摩霜

[0102] 根据下述表9所记载的组成，用通常的方法制造了按摩霜。

[0103] [表9]

[0104]配合成分 含量(重量％)
实施例 0.1
甘油 8.0
丁二醇 4.0
液体石蜡 45.0
β-葡聚糖 7.0
卡波姆 0.1
辛酸/癸酸甘油三酯 3.0
蜂蜡 4.0
鲸蜡硬脂基葡萄糖苷 1.5
失水山梨醇倍半油酸酯 0.9
凡士林 3.0
石蜡 1.5
防腐剂、色素、香料 适量
纯净水 余量

[0105] [剂型例5]面膜

[0106] 根据下述表10所记载的组成，用通常的方法制造了面膜。

[0107] [表10]

[0108]配合成分 含量(重量％)
实施例 0.1
甘油 4.0
聚乙烯醇 15.0
透明质酸提取物 5.0
β-葡聚糖 7.0
尿囊素 0.1
壬基苯基醚 0.4
聚山梨酸酯60 1.2
乙醇 6.0
防腐剂、色素、香料 适量
纯净水 余量

[0109] [剂型例6]皮肤外用制剂中的软膏

[0110] 根据下述表11所记载的组成，用通常的方法制造了软膏。

[0111] [表11]

[0112]配合成分 含量(重量％)
实施例 0.1
甘油 8.0
丁二醇 4.0
液体石蜡 15.0
β-葡聚糖 7.0
卡波姆 0.1
辛酸/癸酸甘油三酯 3.0
角鲨烷 1.0
鲸蜡硬脂基葡萄糖苷 1.5
失水山梨糖醇硬脂酸酯 0.4
鲸蜡硬脂醇 1.0
蜂蜡 4.0
防腐剂、色素、香料 适量
纯净水 余量

[0113] [剂型例7]散剂的制造

[0114] 实施例..................................100mg

[0115] 乳糖......................................100mg

[0116] 滑石......................................10mg

[0117] 油脂......................................5mg

[0118] 将上述成分进行混合后填充到密封袋而制造散剂。

[0119] [剂型例8]片剂的制造

[0120] 实施例.................................50mg

[0121] 玉米淀粉.............................100mg

[0122] 乳糖.....................................100mg

[0123] 硬脂酸镁.............................2mg

[0124] 维生素C.............................50mg

[0125] 将上述成分进行混合后，通过通常的片剂制造方法进行压片而制造片剂。

[0126] [剂型例9]胶囊剂的制造

[0127] 实施例..................................50mg

[0128] 玉米淀粉.............................100mg

[0129] 乳糖.....................................100mg

[0130] 硬脂酸镁.............................2mg

[0131] 维生素C.............................50mg

[0132] 丝氨酸.................................50mg

[0133] 通过通常的胶囊的制造方法，将上述成分进行混合后填充到明胶胶囊中而制造胶囊剂。

[0134] [剂型例10]液剂的制造

[0135] 实施例..................................100mg

[0136] 异构糖..................................10g

[0137] 甘露醇..................................5g

[0138] 维生素C..............................50mg

[0139] 丝氨酸..................................50mg

[0140] 油脂......................................适量

[0141] 纯净水..................................适量

[0142] 通过通常的液剂制造方法，向纯净水添加各个成分并溶解，并加入适量柠檬香后，混合上述成分。此后，加入纯净水，将总体积调节为100ml后，填充到褐色瓶中进行灭菌而制造液剂。

[0143] [剂型例11]保健食品的制造

[0144] 实施例.................................1000mg

[0145] 维生素混合物

[0146] 维生素A醋酸酯.................7μg

[0147] 维生素E..............................1.0mg

[0148] 维生素B1............................0.13mg

[0149] 维生素B2............................0.15mg

[0150] 维生素B6............................0.5mg

[0151] 维生素B12..........................0.2μg

[0152] 维生素C.............................10mg

[0153] 生物素.................................10μg

[0154] 烟酰胺.................................1.7mg

[0155] 叶酸.....................................5μg

[0156] 泛酸钙.................................0.5mg

[0157] 矿物质混合物

[0158] 硫酸亚铁.............................1.75mg

[0159] 氧化锌.................................0.82mg

[0160] 碳酸镁.................................25.3mg

[0161] 磷酸二氢钾.........................15mg

[0162] 磷酸氢钙..............................55mg

[0163] 枸橼酸钾..............................90mg

[0164] 碳酸钙..................................100mg

[0165] 氯化镁..................................24.8mg

[0166] 上述维生素和矿物质混合物的组成比是将比较适用于保健食品的成分作为优选的实施例进行了混合而组成，但将此配比任意改变来实施也无妨。另外，可以通过通常的保健食品的制造方法将上述成分进行混合后，制粒，并通过通常方法来用于保健食品组合物的制造中。

[0167] [剂型例12]保健饮品的制造

[0168] 实施例..................................1000mg

[0169] 枸橼酸..................................1000mg

[0170] 低聚糖..................................100g

[0171] 梅子浓缩液..........................2g

[0172] 牛磺酸..................................1g

[0173] 添加纯净水后的总量...........900ml

[0174] 通过通常的保健饮品的制造方法混合上述成分后，在85℃搅拌并加热约1小时。此后，将得到的溶液进行过滤并加入灭菌的2L容器中，密封灭菌后，冷藏保管，从而用于保健饮品组合物的制造中。

[0175] 组成比是将较为适于喜欢的饮品的成分作为优选实施例而进行混合的组成，但可根据需要的阶层、需要的国家，使用用途等地域性、民族性喜好度而将其组成比任意改变而实施也无妨。