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2014-04-16

4-异丙苯基山梨醇化合物作为SGLT1抑制剂转让专利

申请号 : CN201080017787.2

文献号 : CN102414191B

文献日 :

基本信息:

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法律信息:

相似专利:

发明人 : 柿沼浩行 , 小桥阳平 , 长南具通 , 大井隆宏 , 盐泽史康 , 岩田由纪 , 川部宪一

申请人 : 大正制药株式会社

摘要 :

本发明提供4-异丙苯基山梨醇化合物，其在体内没有蓄积的倾向，并且通过葡萄糖在小肠的吸收抑制作用抑制SGLY1的活性以抑制餐后高血糖（或者葡萄糖耐量降低），因此，该化合物能够抑制糖尿病及代谢综合症的发病，或者能够治疗这些疾病。以下通式(I)表示的4-异丙苯基山梨醇化合物或其药学可接受的盐，其中R1表示氢原子等等，R2表示甲基基团等等，R3表示有氨基基团取代的C1-4的烷基基团等等，及R4表示氢原子等等。

权利要求 :

1.下式(I)表示的4-异丙苯基山梨醇化合物或其药学可接受的盐：[化1]

其中

R1表示氢原子或C1-4的烷基基团，R2表示氢原子或甲基基团，

R3表示“被氨基基团或者二-C1-4烷基氨基基团取代的C1-4的烷基基团”或者哌啶基基团，和R4表示氢原子、或可选择地，R3和R4与相邻的氮原子一起形成哌啶子基或哌嗪基团，其可以被C1-4烷基基团或二甲基氨基基团取代。

2.选自以下结构式的4-异丙苯基山梨醇化合物或其药学可接受的盐：[化2]

。

3.选自以下结构式的4-异丙苯基山梨醇化合物或其药学可接受的盐：[化3]

。

4.一种药物制剂，其含有如权利要求1-3任一项的4-异丙苯基山梨醇化合物或其药学可接受的盐作为活性成分。

5.一种钠离子依赖的葡糖转运蛋白1（SGLT1）活性的抑制剂，其含有如权利要求1-3任一项的4-异丙苯基山梨醇化合物或其药学可接受的盐作为活性成分。

6.一种改善餐后高血糖的药剂，其含有如权利要求1-3任一项的4-异丙苯基山梨醇化合物或其药学可接受的盐作为活性成分。

7.一种糖尿病预防或治疗药剂，其含有如权利要求1-3任一项的4-异丙苯基山梨醇化合物或其药学可接受的盐作为活性成分。

说明书 :

4-异丙苯基山梨醇化合物作为SGLT1抑制剂

技术领域

[0001] 本发明涉及4-异丙苯基山梨醇化合物，其具有涉及葡萄糖和半乳糖在小肠的吸收的钠离子依赖的葡糖转运蛋白1（为方便起见，以下简称为“SGLT1”）的特异抑制活性。 背景技术
[0002] 血糖水平常用于代谢征候的生物标记，且如果人们的空腹血糖水平超过126 mg/dL，就会被诊断为患有糖尿病。此外，即使空腹血糖水平在正常范围内，一些人餐后2小时的血糖水平会高达140-200 mg/dL，并被诊断为葡萄糖耐量降低(或餐后高血糖)。最新的流行病学研究报导葡萄糖耐量降低会增加心血管疾病的风险(参见NPL 1和NPL 2)。进一步地，有报导说运动疗法和/或药物疗法不仅抑制葡萄糖耐量降低向II型糖尿病的发展，而且显著抑制高血压的发病(参见NPL 3)。
[0003] 如前所述，餐后高血糖的抑制对于抑制糖尿病和/或代谢综合症的发病是很重要的，并且会相应增加对控制餐后高血糖药物的需要。
[0004] 作为改善餐后高血糖的药剂，α-葡萄糖苷酶抑制剂被广泛应用，其可以抑制糖水解酶，并因此延缓了糖从小肠的吸收。除了这些药剂以外，还研究了用于改善餐后高血糖的具有新机制的其它药剂。
[0005] 在哺乳动物小肠上皮组织上，钠离子依赖的葡糖转运蛋白1(SGLTl)被高频率地表达。已知SGLTl依赖于钠发挥作用，并且小肠的活性或半乳糖转运中起重要作用。基于这些发现，吡唑衍生物被报导具有抑制SGLT1活性的作用，并且因此抑制从食物中对葡萄糖的吸收，以及能够用于预防或治疗餐后高血糖 (参见PTL 1至PTL 6)。另一方面，钠离子依赖的葡糖转运蛋白2(SGLT2)在肾脏有高频率的表达，经肾小球过滤的葡萄糖会经SGLT2途径重吸收(参见NPL 4)。此外，有报导说通过抑制SGLT2的活性，进入尿液的糖排泄物诱导了降血糖作用(参见NPL 5)。SGLT2抑制剂具有能很好的降糖的特性以降低临时血糖水平，但是不同于SGLT1抑制剂，它们控制餐后高血糖的作用较低。进一步地，有报导说C-苯基山梨醇衍生物不仅能抑制SGLT1的活性，还同时能抑制SGLT2的活性(参见PTL 7)。 [0006] 另一方面，当包含改善餐后高血糖药剂的药物需要连续给药时，重要的是药物的治疗剂量和毒副作用剂量之间应有较宽的安全范围。特别是那些在体内有残留倾向的药物，控制所需治疗的剂量是困难的，因此在体内的药物残留会发展为过度的药物效果，导致不希望的毒性或副作用。例如，已知阳离子药物分子具有亲水基团(如叔胺)和疏水基团（如芳香环），其通过疏水键与磷脂结合，并被溶酶体摄取，并且因此在体内各个器官中蓄积。作为典型的例子，氯喹显示引起视网膜病变，而哌克昔林则由于其诱导肺和小脑的改变而引起神经病变的问题(参见NPL 6)。
[0007] 因此，我们希望药物在释放它们的效能后能尽快地从体内排泄。特别地，要求那些必须连续给药的改善餐后高血糖的药物不会在体内蓄积。
[0008] 引用列表
[0009] 专利文献
[0010] [PTL 1] 国际公布号WO2002/098893
[0011] [PTL 2] 国际公布号WO2004/014932
[0012] [PTL 3] 国际公布号WO2004/018491
[0013] [PTL 4] 国际公布号WO2004/019958
[0014] [PTL 5] 国际公布号WO2005/121161
[0015] [PTL 6] 国际公布号WO2004/050122
[0016] [PTL 7] 国际公布号WO2007/136116。
[0017] 非专利文献
[0018] [NPL 1] Pan XR, et al. Diabets Care, vol. 20, p. 537, 1997
[0019] [NPL 2] M Tominaga, et al. Diabets Care, vol. 22, p. 920, 1999[0020] [NPL 3] J.-L.Chiasson, et al. Lancent, vol. 359, p. 2072, 2002[0021] [NPL 4] E. M.Wright, Am.J. Physiol. Renal.Physiol.,vol.280, p. FlO,2001
[0022] [NPL 5] G. Toggenburger, et al. Biochem. Biophys. Acta., vol.688, p.557, 1982
[0023] [NPL 6] Folia Pharmacol. Jpn. vol. 113, p. 19, 1999。
[0024] 发明概述
[0025] 技术问题
[0026] 本发明的目的是提供具有对抗SGLT1的抑制效果的化合物或其盐，所述药物的治疗剂量和毒副作用剂量之间有较宽的安全范围以及含有这些药物的药物制剂。
[0027] 技术方案
[0028] PTL 7中披露的C-苯基山梨醇衍生物被发现具有在肾脏中残留而不排泄的倾向。基于该事实，本发明人付出诸多努力调查那些在体内不会蓄积的化合物。结果，本发明人发现,由以下通式(I)表示的4-异丙苯基山梨醇化合物，特别是通过向直接连接在糖基上的苯环引入异丙基基团，以及向其它苯环引入带有氨基基团的丁烯基团而获得的化合物，令人意外地在肾脏中没有残留体倾向。该发现使本发明得以完成。
[0029] 以下给出本发明的4-异丙苯基山梨醇化合物的具体实施例(这里称为“本发明化合物”)。
[0030] (1) 以下通式(I)表示的4-异丙苯基山梨醇化合物或其药学可接受的盐： [0031] [化1]
[0032]
[0033] 其中1
[0034] R 表示氢原子或C1-4的烷基基团，
[0035] R2 表示氢原子或甲基基团，
[0036] R3 表示“被氨基基团或二-C1-4烷氨基基团取代的C1-4的烷基基团”或哌啶基团，以及
[0037] R4 表示氢原子，或可选择地，R3和R4与相邻的氮原子一起形成哌啶子基或哌嗪基团，其可以被C1-4烷基基团或二甲氨基基团取代。
[0038] (2) 选自以下组的4-异丙苯基山梨醇化合物或其药学可接受的盐。 [0039] [化2]
[0040]
[0041] (3) 选自以下组的4-异丙苯基山梨醇化合物或其药学可接受的盐。 [0042] [化3]
[0043]
[0044] (4) 含有以上（1）至（3）所述任一项的4-异丙苯基山梨醇化合物或其药学可接受的盐作为活性成分的药物制剂。
[0045] (5) 钠依赖型葡萄糖转运载体1（SGLT1）活性抑制剂，含有以上（1）至（3）所述任一项的4-异丙苯基山梨醇化合物或其药学可接受的盐作为活性成分。
[0046] (6) 一种改善餐后高血糖的药剂，含有以上（1）至（3）所述任一项的4-异丙苯基山梨醇化合物或其药学可接受的盐作为活性成分。
[0047] (7) 一种预防或治疗糖尿病的药剂，含有以上（1）至（3）所述任一项的4-异丙苯基山梨醇化合物或其药学可接受的盐作为活性成分。
[0048] (8) 以上（1）至（3）所述任一项的4-异丙苯基山梨醇化合物或其药学可接受的盐在制备预防或治疗糖尿病的药物中的应用。
[0049] (9) 一种预防或治疗糖尿病的方法，包括给予哺乳动物治疗有效量的以上（1）至（3）所述任一项的4-异丙苯基山梨醇化合物或其药学可接受的盐。
[0050] 发明的有益效果
[0051] 本发明可提供4-异丙苯基山梨醇化合物，其能够抑制SGLT1活性并且在体内没有蓄积倾向。
[0052] 实施方案的描述
[0053] 这里所使用的术语和词组定义如下。
[0054] 术语“C1-4烷基基团”指的是直链或支链的有1-4个碳原子的烷基基团。例子包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基和叔丁基基团。
[0055] 术语“二-C1-4烷氨基基团”指的是由两个C1-4烷基基团取代的氨基基团。例子包括二甲基氨基和二乙基氨基基团。
[0056] 另外，术语“药学可接受盐”指的是，例如，碱金属盐、碱土金属盐、铵盐或烷基铵盐，或者是无机酸或有机酸盐。例子包括钠盐、钾盐、钙盐、铵盐、铝盐、三铵盐、甲酸盐、乙酸盐、丙酸盐、丁酸盐、己酸盐、辛酸盐、三氟乙酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、乙基琥珀酸盐、乳糖醛酸盐、葡萄糖酸盐、葡萄糖醛酸盐、葡庚糖酸盐、戊二酸盐、庚二酸盐、辛二酸盐、壬二酸盐、癸二酸盐、1,9-壬基二羟酸盐、十二烷双酸盐、十三烷双酸盐、十四烷双酸盐、十五烷双酸盐、十六烷双酸盐、十七烷双酸盐、苯甲酸盐、2-羟基苯甲酸盐、甲磺酸盐、乙基磺酸盐、羟乙基磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、1,5-萘十磺酸盐、月桂基硫酸盐、乳酸盐、马尿酸盐、延胡索酸盐、丙二酸盐、反式桂皮酸盐、苹果酸盐、天冬氨酸盐、谷氨酸盐、己二酸盐、半胱氨酸盐、N-乙酰半胱氨酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、磷酸盐、硫酸盐、氢碘酸盐、烟酸盐、草酸盐、苦味酸盐、硫氰酸盐、十一酸盐、丙烯酸盐聚合物，以及聚羧乙烯盐。
[0057] 词组“改善餐后高血糖的药剂”指的是抑制餐后高血糖并因此抑制餐后高血糖相关的疾病（例如糖尿病，代谢综合征）或治疗这些疾病的药物。在这里，术语“餐后高血糖”指的是餐后血中葡萄糖水平反常升高的状态，特别是指餐后两小时血中葡萄糖水平超140 mg/dl。
[0058] 本发明化合物的有用性将在以下详细描述(详细说明参见后面描述的检测实施例)。
[0059] 本发明的化合物具有很强的SGLT1抑制活性，并同时具有一定的SGLT2抑制活性，虽然很弱。而且，本发明的化合物具有和WO2007/136116中披露的化合物一样强的降血糖作用。进一步地，WO2007/136116中披露的化合物口服给药1 mg/kg的7天后还在肾脏中残留而没有被排泄掉，而本发明的化合物则显示出即使连续给药3天，剂量为3 mg/kg，仍令人意外地在接下来的2天里在肾脏中无残留的特性。
[0060] 因此，本发明的化合物在体内没有蓄积的倾向，并且几乎不会产生因连续给药而导致的毒副作用，并因此显示出作为药物制剂的特别良好的特性。
[0061] 当本发明化合物以药物制剂形式提供时，可以适当地使用各种诸如固体和溶液的剂型。在这种情况下，药学可接受的载体也可以结合使用。这样的载体的例子包括常用的赋形剂、填充剂、粘合剂、崩解剂、包衣剂、糖衣剂、pH调节剂、增溶剂或水性或非水性溶剂。本发明化合物及这些载体可以制成片剂、丸剂、胶囊剂、颗粒剂、粉剂、溶液剂、乳剂、悬浮剂或其它剂型。
[0062] 例如，本发明化合物可以用常规的固体制剂的制备方法和用于混合和压片的赋形剂制成口服片剂。
[0063] 而且，本发明化合物还可以包括如α-、β-或γ-环糊精或甲基环糊精以改善它们的溶解性。
[0064] 本发明化合物的剂量会依赖疾病或病症的情况、体重、年龄、性别、给药途径等变化。成人的每日剂量为0.1至1000 mg/kg体重，优选是0.1至200 mg/kg体重，更优选是0.1至10 mg/kg体重，以单剂剂型或分份剂型给予。
[0065] 作为本发明优选的具体实施方式，以下的化合物在实施例部分制备。 [0066] [化4]
[0067]
[0068] 通过以下一些实施例可进一步详细说明本发明化合物(I)是如何制备的，但不限于以下说明的特定情形。
[0069] 制备过程1
[0070] 本发明化合物(I)按以下方式合成。
[0071] 在下面的合成设计中，X表示乙酰基或C1-4烷基基团，R5代表R3或者氨基基团由叔3
碳酸丁酯(Boc)保护的R，其它基团定义如上所述。
[0072] [化5]
[0073]
[0074] (1)步骤1 (Heck反应)
[0075] 化合物(II) 和链烯烃羧酸(III)在钯催化剂、膦配基和适当的碱的存在下进行Heck反应得到化合物(IV)。所用钯催化剂的例子包括醋酸钯、四（三苯基膦）钯、二苯烯基丙酮钯、二(三苯膦)氯化钯、二(三环己基亚甲基膦)氯化钯，和活性炭钯。膦配基的例子包括三苯膦和三-O-甲苯基膦。同样地，所用合适的碱包括三乙胺、N-乙基-N,N-二异丙胺、碳酸钾、碳酸钙、碳酸铯和叔丁氧基钾。所用于反应的合适的溶剂的例子包括乙腈、甲苯和四氢呋喃。反应温度范围从0℃到回流温度，或也可以用微波加热。
[0076] (2)步骤2 (转变成氨基基团)
[0077] 化合物(IV)可以通过与胺（R5R4NH）的脱水反应浓缩得到化合物(V)。用于反应的优选的溶剂的例子包括氯仿、二氯甲烷和N,N-二甲基甲酰胺。用于反应的优选的脱水冷凝剂包括N,N'-二环已基碳二亚胺(DCC)、N-乙基-N'-3-二甲胺基丙基碳化二亚胺盐酸化物(EDC-HCl)、1,1'-羰二咪唑(CDI)，和EDC·HC1 /1-羟基苯并三唑一水合物(HOBt·H2O)。反应温度范围为0℃至60℃。
[0078] (3)步骤3（脱保护)
[0079] 化合物(V)中的Boc基团可以在酸性条件下去除，乙酰基(Ac)基团可以在碱性条件下去除，从而得到化合物(I)。Boc基团在有或没有溶剂（例如，二氯甲烷、氯仿、二氧六环）的情况下用盐酸或三氟乙酸处理。对于乙酰基基团，可以用碱处理，例如甲氧基钠、氢氧化钠、氢氧化锂、碳酸钾、碳酸铯或三乙胺。优选溶剂的例子包括甲醇、乙醇和含水甲醇。反应温度范围为 0℃至60℃。
[0080] 制备过程2
[0081] 本发明化合物(I)还可以通过以下所示的其它途径合成。在以下设计中，所有定义同上。
[0082] [化6]
[0083]
[0084] (4)步骤4 (Heck反应)
[0085] 化合物(II)和链烯烃羧酸(VI)可如制备过程1所示的Heck反应得到化合物(VII)。
[0086] (5)步骤5 (转变成氨基基团)
[0087] 化合物(VII)和胺(VIII)可以如制备过程1中的步骤2所示的脱水作用浓缩得到化合物(V)。
[0088] (6)步骤6(脱保护)
[0089] 以上所得的化合物(V)可以通过如制备过程1中的步骤3所示的脱保护反应转变成化合物(I)。
[0090] 制备过程3
[0091] 中间体(II)的制备过程
[0092] 制备本发明化合物(I)所需要的中间体(II)的制备如下说明。1 2
[0093] 在以下设计中，X 表示苯甲基基团或C1-4烷基基团，X 表示三甲基硅基团或C1-4烷基基团，其它定义如上。
[0094] [化7]
[0095]
[0096] (7)步骤7(偶合)
[0097] 化合物(IX)可以用有机金属试剂（例如，正-丁基锂、仲-丁基锂、叔-丁基锂）处理以制备芳香锂试剂。葡萄糖酸内酯(X)可以加入该试剂中得到化合物(XI)。可用于该反应的溶剂的例子包括四氢呋喃、二乙醚和甲苯。反应温度范围为-80℃至室温，优选是-78℃至-25℃。
[0098] (8)步骤8 (酸水解)
[0099] 化合物(XI)在酸性条件下在甲醇中去除甲硅烷基基团的同时，糖基团的1-位可以转变成甲基醚从而得到化合物(XII)。所用酸的例子包括盐酸、硫酸、甲磺酸、对-甲苯磺酸一水合物、吡啶对-甲苯磺酸、氟化氢吡啶和n-Bu4NF。虽然反应温度会依赖所用酸的类型而变化，但其范围为0℃至100℃，优选为25℃至80℃。
[0100] (9)步骤9(乙酰化)
[0101] 化合物(XII)的羟基基团可以用乙酰基基团保护，得到化合物(XIII)。化合物(XII)可以和例如醋酸酐或乙酰氯在适当的碱存在的溶剂中反应，得到化合物(XIII)。用于反应的适当溶剂的例子包括氯仿、二氯甲烷、二氧六环、乙酸乙酯、四氢呋喃和N,N-二甲基甲酰胺。优选的碱的例子包括三乙胺、三甲吡啶和吡啶。作为反应催化剂，4-二甲基氨基吡啶可以使用。反应温度范围为0℃至室温。
[0102] (10)步骤10(还原)
[0103] 化合物(XIII)可以和Et3SiH、i-Pr3SiH、t-BuMe2SiH或Ph2SiHCl 在Lewis酸存在下反应得到化合物(XIV)。用于反应的Lewis酸的例子包括BF3·Et2O、CF3COOH、InCl3、TiCl4、TMSOTf、对-甲苯磺酸和甲磺酸。溶剂的例子包括氯仿、二氯甲烷、甲苯、四氢呋喃、乙腈或它们的混合溶剂，优选的混合溶剂是和乙腈混合，如乙腈/氯仿、乙腈/二氯甲烷、乙腈/四氢呋喃、乙腈/四氢呋喃/甲苯，等等。反应温度范围为-60℃至25℃，优选为-30℃至25℃。
[0104] (11)步骤11(脱保护)
[0105] 当化合物(XIV)中的X1基团是苄基，脱苄基反应可以通过催化氢化法完成，使用氢气，催化剂，例如活性炭钯、氢氧化钯或活性炭铂钯。在它们中，活性炭钯或氢氧化钯是优选的催化剂。该反应使用的溶剂的例子包括甲醇、乙醇、异丙醇、乙酸乙酯、醋酸和它们的混合物。反应的温度范围为室温至回流温度，室温是优选的。
[0106] (12)步骤12(溴化)
[0107] 化合物(XIV)或上述步骤11得到的化合物可以和溴、N-溴代琥珀酰亚胺,溴化氢等在溶剂中反应得到化合物(XV)。该反应使用的溶剂的例子包括氯仿、二氯甲烷、醋酸、甲醇和N,N-二甲基甲酰胺。反应温度范围为0℃至室温。
[0108] (13)步骤13(脱保护)
[0109] 化合物(XV)中的乙酰基基团可以在碱性条件下去除得到化合物(XVI)。所用碱的例子包括甲氧基钠、氢氧化钠、氢氧化锂、碳酸钾、碳酸铯和三乙胺。优选溶剂的例子包括甲醇、乙醇和含水甲醇。反应的温度范围为0℃至60℃。
[0110] (14)步骤14(甲硅烷基化)
[0111] 化合物(XVI)中的羟基基团可以用甲硅烷基保护(例如三甲基甲硅烷基基团)得到化合物(XVII)。化合物(XVI)可以和氯化三甲基硅烷、氯化三乙基硅烷、氯化叔丁基甲硅烷等在适当的碱存在下在溶剂中得到化合物(XVII)。用于反应的溶剂的例子包括氯仿、二氯甲烷、二氧六环、乙酸乙酯、四氢呋喃和N,N-二甲基甲酰胺。优选的碱的例子包括三乙胺、三甲吡啶和吡啶。反应温度优选范围为0℃至室温。
[0112] (15)步骤15(偶合反应)
[0113] 化合物(XVII)可以用有机金属试剂处理(例如，正-丁基锂、仲-丁基锂、叔-丁基锂)以制备芳基锂试剂。乙醛(XVIII)可以加入该试剂中得到化合物(XIX)。反应所用的溶剂的例子包括四氢呋喃、二乙醚和甲苯。反应温度范围为-80℃至室温，优选为-78℃至-25℃。
[0114] (16)步骤16(酸水解)
[0115] 以上所得的化合物(XIX)可以通过酸水解反应转变成化合物(XX)，如制备过程3的步骤8所示。
[0116] (17)步骤17(乙酰化)
[0117] 以上所得的化合物(XX)可以通过制备过程3的步骤9所示的方法转变成化合物(XXI)。
[0118] (18)步骤18(还原)
[0119] 以上所得的化合物(XXI)可以通过制备过程3的步骤10所示的还原方法转变成中间体(II)。
[0120] 制备过程4
[0121] 中间体(II)的制备过程
[0122] 中间体(II)也能够通过以下所示的另一途径合成。在该途径中，步骤19至21可在一个反应罐中进行以减少反应步骤数。
[0123] 在以下的设计中，所有定义如上所述。
[0124] [化8]
[0125]
[0126] (19)步骤19(偶合)
[0127] 化合物(XXII)可以用有机金属试剂处理(例如，正-丁基锂、仲-丁基锂、叔-丁基锂)以制备芳基锂试剂。葡萄糖酸内酯(X)可以加入该试剂中得到化合物(XXIII)。反应所用的溶剂的例子包括四氢呋喃、二乙醚和甲苯。反应温度范围为-80℃至室温，优选为-78℃至-25℃。
[0128] (20)步骤20(甲硅烷基化)
[0129] 紧接着上述的步骤19，化合物(XXIII)中1位的羟基基团可以用甲硅烷基保护(例如三甲基甲硅烷基基团)。步骤19的反应溶液可以和氯化三甲基硅烷反应得到化合物(XXIV)。用于反应的溶剂和优选的反应温度同步骤19。
[0130] (21)步骤21(偶合)
[0131] 紧接着上述的步骤20，所得到的化合物(XXIV)可以用有机金属试剂处理(例如，正-丁基锂、仲-丁基锂、叔-丁基锂)以制备芳基锂试剂。乙醛(XXIII)可以加入该试剂中得到化合物(XXV)。反应所用的溶剂和温度同步骤19。
[0132] (22)步骤22(酸水解)
[0133] 上述得到的化合物(XXV)可以通过酸水解转变成化合物(XXVI)，如制备过程3的步骤8所示。
[0134] (23)步骤23(乙酰化)
[0135] 上述得到的化合物(XXVI)可以通过乙酰化反应转变成化合物(XXVII)，如制备过程3的步骤9所示。
[0136] (24)步骤24(还原)
[0137] 以上所得的化合物(XXVII)可以还原转变成化合物(XXVIII)，如制备过程3的步骤10所示。
[0138] (25)步骤25(乙酰化或烷基化)
[0139] 化合物(XXVIII)的羟基基团可以用乙酰基保护，或者烷基化(例如甲基化)制备成中间体(II)。化合物(XXVIII)可以和例如乙酸酐或乙酰氯在适当碱存在的溶剂中反应得到中间体(II)。反应所用溶剂的例子包括氯仿、二氯甲烷、二氧六环、乙酸乙酯、四氢呋喃和N,N-二甲基甲酰胺。所用碱的例子包括三乙胺、三甲吡啶和吡啶。作为催化剂，4-二甲氨基吡啶等可以被使用。反应温度范围优选为0℃至室温。可选择地，化合物(XXVIII)可以和碘甲烷、碘乙烷、2-碘丙烷等在适当碱存在的溶剂中反应得到中间体(II)。反应所用溶剂的例子包括氯仿、二氯甲烷、四氢呋喃、N,N-二甲基甲酰胺和丙酮。优选碱的例子包括碳酸钾和碳酸铯。实施例
[0140] 本发明将通过以下对照实施例、实施例和检测实施例更为详细地进一步加以说明，但是本发明将不会因此而受到限制。
[0141] 对照实施例1:中间体(A)的制备
[0142] [化9]
[0143]
[0144] (1)对照实施例1-1:化合物(Al)
[0145] [化10]
[0146]
[0147] 向3-异丙基酚(25.0 g, 0.184 mol)的乙酸(200 mL)溶液中加入碘酸钾(7.88 g, 0.0368 mol)的水(75 mL)悬浮液和碘(18.7 g,0.0736 mol)。反应混合物室温下搅拌20小时。再加入二乙醚(400 mL)和水(300 mL)后，分离出有机层。有机层用水、饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗，然后用无水硫酸镁干燥。过滤掉干燥剂后，减压蒸馏掉溶剂，所得残渣通过硅凝胶色谱柱纯化(己烷:乙酸乙酯= 95:5)，得到化合物(Al) (27.6 g, 57%)，为无色油状物。
1
[0148] H NMR (200 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.16-1.25 (m, 6H) 2.64-2.98 (m,1H) 5.21 (s, 1 H) 6.57 (dd, J=8.13, 2.20 Hz, 1 H) 6.88 (d, J=2.20 Hz,1H) 7.54 (d, J=8.13 Hz,1 H)。
[0149] (2)对照实施例1-2:化合物(A2)
[0150] [化11]
[0151]
[0152] 向化合物(Al) (26.5 g, 0.101 mol)和碳酸钾(20.9 g, 0.152 mol)的乙腈悬浮液中加入苄基溴(14.4 mL, 0.121 mol)并在室温下搅拌2小时，再加入甲醇(1.0 mL)，继续搅拌30分钟。过滤掉不溶物，滤液浓缩。所得残渣经硅胶柱色谱(己烷:乙酸乙酯=95:5)纯化，得到化合物(A2)(30.2 g,85%)，为无色油状物。
1
[0153] H NMR (200 MHz, 氯 仿 -d) δ ppm 1.21 (d, J=7.03 Hz, 6 H) 2.84 (sept,J=7.03 Hz, 1 H) 5.14 (s, 2 H) 6.62 (dd, J=8.35, 2.20 Hz, 1 H) 6.74 (d, J=2.20 Hz, 1 H) 7.23-7.58 (m, 5 H) 7.68 (d, J=8.35 Hz, 1 H)。
[0154] (3)对照实施例1-3: 化合物(A3)
[0155] [化12]
[0156]
[0157] 向化合物(A2) (30.2 g, 85.7 mmol)的THF (450 mL)溶液中在-78℃，氮气条件下滴加2.6 M 正丁基锂的己烷液(33 mL, 85.7 mmol)并在相同温度下搅拌15分钟。然后，用超过15分钟时间滴加2,3,4,6-四-O-三甲基硅-D-葡萄糖酸-l,5-内酯(40.0 g,85.7 mmol)的THF(230 mL)溶液，然后在相同温度下搅拌20分钟。向反应混合物中加入饱和氯化铵水溶液(150 mL)和水(100 mL)。该混合物加热至室温，随后用乙酸乙酯萃取两次。合并有机层，用盐水洗涤，无水硫酸镁干燥。过滤掉干燥剂后，减压蒸馏掉溶剂。
[0158] 所得残渣溶解于含有甲磺酸(2.9 g)甲醇溶液(840 mL)的溶液中，并在室温下搅拌14.5小时。用三乙胺(2.5 mL)中和后，反应混合物进行浓缩。
[0159] 所得残渣(46.4 g)溶解于吡啶(125 mL)中，冷却至4℃。向溶液中加入醋酸酐(75 mL)和4-二甲基氨基吡啶(102 mg, 0.835 mmol)，并在室温下搅拌19小时。加入冰水(500 mL)后，混合物用乙酸乙酯(500 mL)萃取两次。有机层合并，用饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，无水硫酸镁干燥。滤除干燥剂后，减压蒸馏去除溶剂，得到粗产物化合物(53 g)。
[0160] 在4℃和氮气条件下向该粗产物化合物的氯仿(250 mL)和乙腈(250 mL)溶液中加入Et3SiH (13.7 mL, 85.7 mmol)和BF3-Et2O (10.9 mL, 85.7 mmol)，在相同温度下搅拌1.5小时。反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液稀释，用氯仿萃取。有机层用盐水洗涤，无水硫酸镁干燥。滤除干燥剂，减压蒸馏去除溶剂，所得残渣经硅胶柱色谱(己烷:乙酸乙酯= 5:1 → 2:1)纯化，得到化合物(A3) (19.1 g, 40%; 4个步骤)，为淡黄色无定形物。 [0161] 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.21 (d, J=6.99 Hz, 6 H) 1.78 (s, 3 H) 2.01 (s, 6 H) 2.05 (s, 3 H) 2.86 (sept, J=6.99 Hz, 1 H) 3.80 (ddd, J=9.95,4.59, 2.25 Hz, 1 H) 4.06-4.13 (m, 1 H) 4.19-4.27 (m, 1 H) 4.96 (d, J=9.95 Hz,
1 H) 5.10 (s, 2 H) 5.16-5.25 (m, 1 H) 5.33 (t, J=9.17 Hz, 1 H) 5.40-5.49 (m,
1 H) 6.79 (d, J=1.40 Hz, 1 H) 6.85 (dd, J=7.93, 1.40 Hz, 1 H) 7.26-7.52 (m, 6 H)。
[0162] MS ESI/APCI Dual posi: 579[M+Na]+。
[0163] (4)对照实施例1-4:化合物(A4)
[0164] [化13]
[0165]
[0166] 向化合物(A3)(19.1 g, 34.3 mmol)的甲醇(200 mL)溶液中加入10%的活性碳钯(1.8 g)，在氢气条件下室温搅拌2小时。反应混合物通过硅藻土过滤后，减压蒸馏去除溶剂，所得残渣经硅胶柱色谱(己烷:乙酸乙酯= 2:1 → 1:1)纯化，得到化合物(A4)(12.3 g, 77%)，为无色无定形物。1
[0167] H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.20 (d, J=6.89 Hz, 6 H) 1.83 (s, 3 H) 2.01 (s, 3 H) 2.06 (s, 3 H) 2.12 (s, 3 H) 2.82 (sept, J=6.89 Hz, 1 H) 3.87 (ddd, J=9.60, 3.85, 2.25 Hz, 1 H) 4.14-4.21 (m, 1 H) 4.27-4.36 (m, 1 H) 4.59 (d, J=9.33 Hz, 1 H) 5.23-5.39 (m, 3 H) 6.70 (dd, J=7.93, 1.71 Hz, 1 H) 6.77 (d, J=1.71 Hz, 1 H) 6.80 (s, 1 H) 6.91 (d, J=7.93 Hz, 1 H)。+
[0168] MS ESI/APCI Dual posi: 489[M+Na]。-
[0169] MS ESI/APCI Dual nega: 501[M+Cl]。
[0170] (5)对照实施例1-5:化合物(A5)
[0171] [化14]
[0172]
[0173] 在室温下向化合物(A4)(12.3 g, 26.3 mmol)的醋酸(120 mL)溶液中滴加溴(4.2 g, 26.3 mmol)。反应混合物搅拌1.5小时，加入冰水(150 mL)。该反应混合物用乙酸乙酯萃取两次，合并的有机层用饱和碳酸氢钠水溶液、10%硫代硫酸钠水溶液和盐水洗涤，然后用无水硫酸镁干燥。滤除干燥剂后，减压蒸馏去除溶剂。所得残渣溶于2-丙醇(20 mL)中，而后滴加己烷(50 mL)。混合物在4℃下搅拌1小时，所得沉淀物过滤得到化合物(A5)(9.8 g, 68%)，为无色粉末。
[0174] 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.12-1.26 (m, 6 H) 1.89 (s, 3 H) 2.01 (s, 3 H) 2.07 (s, 3 H) 2.13 (s, 3 H) 3.22 (sept, J=6.74 Hz, 1 H) 3.87 (ddd, J=9.48, 3.73, 2.18 Hz, 1 H) 4.14-4.22 (m, 1 H) 4.28-4.36 (m, 1 H) 4.53 (d, J=9.33 Hz, 1 H) 5.16-5.39 (m, 3 H) 6.82 (s, 1 H) 7.14 (s, 1 H)。
[0175] MS ESI/APCI Dual posi: 567[M+Na]+, 569[M+2+Na]+。
[0176] MS ESI/APCI Dual nega: 579[M+C1]-, 581[M+2+Cl]-。
[0177] (6)对照实施例1-6:化合物(A6)
[0178] [化15]
[0179]
[0180] 向化合物(A5)(12.2 g, 22.3 mmol)的甲醇(120 mL)溶液中加入三乙胺(24 mL)和水(24 mL)。反应混合物室温下搅拌15小时，并进一步在50℃下搅拌10小时，然后减压蒸馏去除溶剂。
[0181] 所得残渣溶解于N,N-二甲基甲酰胺(106 mL)中，随后在4℃氮气条件下加入三乙胺(18.6 mL, 134 mmol)和三甲基氯硅烷(14.3 mL, 112 mmol)。反应混合物在4℃下搅拌1小时，随后再加入冰水(150 mL)。该混合物用甲苯萃取三次，合并有机层，用水、饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，无水硫酸镁干燥。过滤去除干燥剂后，减压蒸馏去除溶剂，得到化合物(A6) (17.4 g)，为油状物。该化合物不必纯化即可用于下步反应。
[0182] 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm -0.28 (s, 9 H) 0.08 (s, 9 H) 0.19 (s,9 H) 0.20 (s, 9 H) 0.29 (s, 9 H) 1.16 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.21 (d, J=6.84 Hz,
3 H) 3.17-3.37 (m, 1 H) 3.41-3.56 (m, 3 H) 3.62-3.72 (m, 1 H) 3.76-3.86 (m, 1 H) 4.46 (d, J=8.24 Hz, 1 H) 6.64 (s, 1 H) 7.47 (s, 1 H)。
[0183] (7)对照实施例1-7:化合物(A7)
[0184] [化16]
[0185]
[0186] 在-78℃氮气条件下用超过10分钟时间向化合物(A6)(13.4 g, 15.9 mmol)的THF(140 mL)溶液中滴加2.6 M 正丁基锂的己烷(7.7 mL, 20.0 mmol)液，并在相同温度下搅拌5分钟。然后，用超过15分钟时间滴加4-溴-2-甲基苯甲醛(3.2 g, 15.9 mmol)的THF(24 mL)溶液，并在相同温度下搅拌45分钟。向反应混合物中加入饱和氯化铵水溶液(100 mL)和水(100 mL)。该混合物加热至室温，用乙酸乙酯萃取两次。合并的有机层用盐水洗涤，无水硫酸镁干燥。滤除掉干燥剂，减压蒸馏去除溶剂。
[0187] 所得残渣溶解于含有甲磺酸(0.9 g)甲醇(200 mL)溶液的溶液中，室温下搅拌0.5小时。用三乙胺中和后，反就混合物浓缩。所得残渣经硅胶柱色谱(氯仿：甲醇= 10:1 - 8:1)纯化得到化合物(A7) (5.75 g, 73%)，为无色无定形物。
[0188] 1H NMR (600 MHz, 甲醇-d4) δ ppm 1.01 和 1.04 (各 d, J=6.88 Hz, 3 H)1.18 和 1.19 (各 d, J=6.88 Hz, 3 H) 2.24 和 2.26 (各 s, 3 H) 2.95-3.07 (m, 1 H) 3.35-3.69 (m, 5 H) 3.78-3.87 (m, 1 H) 4.37-4.50 (m, 1 H) 5.59 (s, 1 H) 6.80 (s, 1 H) 6.98- 7.10 (m, 2 H) 7.24-7.30 (m, 1 H) 7.33 (s, 1 H)。
[0189] MS ESI/APCI Dual posi: 479[M-OH]+, 481[M+2-OH]+。
[0190] (8)对照实施例1-8:中间产物(A)
[0191] [化17]
[0192]
[0193] 化合物(A7)(5.7 g, 11.5 mmol)溶解于吡啶(34 mL)中。向该溶液中加入醋酸酐(17 mL)和4-二甲基氨基吡啶(10 mg)，室温下搅拌0.5小时。然后再加入冰水(500 mL)，混合物用乙酸乙酯(500 mL)萃取两次。合并的有机层用饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，无水硫酸镁干燥。滤除干燥后，减压蒸馏去除溶剂，得到粗产物化合物(8.5 g)。
[0194] 在4℃和氮气条件下向该粗产物化合物(8.5 g)的氯仿(80 mL)和乙腈(80 mL)溶液中加入Et3SiH (2.7 mL, 17.0 mmol)和BF3-Et2O (2.2 mL, 17.0 mmol)。反应混合物加热至室温，并在相同温度下搅拌0.5小时。反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液稀释，并用氯仿萃取。有机层用盐水洗涤，无水硫酸镁干燥。滤除干燥剂后，减压蒸馏去除溶剂。所得残渣用4:1的己烷:乙酸乙酯混合物结晶，所得沉淀物过滤得到中间产物(A)(5.3 g, 68%)，为无色粉末。
[0195] 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.12 (d, J=6.68 Hz, 3 H) 1.14 (d, J=6.68 Hz, 3 H) 1.76 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.03 (s, 3 H) 2.06 (s, 3 H) 2.27 (s, 3 H)2.37 (s, 3 H) 2.93 (sept, J=6.68 Hz, 1 H) 3.76 (ddd, J=9.87, 4.51, 2.25 Hz, 1 H) 3.87 (s, 2 H) 4.06 (dd, J=12.51, 2.25 Hz, 1 H) 4.27 (dd, J=12.51, 4.51 Hz, 1 H) 4.49 (d, J=9.64 Hz, 1 H) 5.10- 5.33 (m, 3 H) 6.59 (d, J=8.39 Hz, 1 H) 6.97 (s, 1 H) 7.00 (s, 1 H) 7.20 (dd, J=8.39, 2.49 Hz, 1 H) 7.34 (d, J=2.49 Hz, 1 H)。
[0196] MS ESI/APCI Dual posi: 713[M+Na]+, 715[M+2+Na]+。
[0197] 可选择地，中间产物(A)也能通过以下的对照实施例1-9、1-10和1-11来合成。 [0198] (9)对照实施例1-9:化合物(A8)
[0199] [化18]
[0200]
[0201] 用超过32分钟时间在冰浴下向3-异丙基酚(160 g, 1.18 mol)的乙酸(1.6 L)溶液中滴加溴(469 g, 2.94 mol)的乙酸(320 mL)溶液，反应内部温度不超过19℃，而后在室温下搅拌1小时。再加入甲苯(1.6 L)后，在冰浴下滴加10%亚硫酸钠水溶液(1.0 L)，反应内部温度不超过20℃。分离有机层，用10%亚硫酸钠水溶液(1.0 L) 和 10%氯化钠水溶液(1.0 L)洗涤两次，无水硫酸镁干燥。滤除干燥剂后，减压蒸馏去除溶剂得到化合物(A8)(342 g, 99%)，为淡黄色油状物。
[0202] 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.21 (d, J=6.84 Hz, 6 H) 3.25 (sept, J=6.84 Hz, 1 H) 5.40 (s, 1 H) 6.96 (s, 1 H) 7.61 (s, 1 H)。
[0203] (10)对照实施例1-10:化合物(A9)
[0204] [化19]
[0205]
[0206] 向化合物(A8)(512 g, 1.74 mol)的氯仿(1.74 L)溶液中加入二异丙基乙胺(364 mL, 2.09 mol)，并用冰冷却。用超过60分钟时间滴加氯甲基甲醚(159 mL, 2.09 mol)，室温下搅拌1小时。反应混合物用冰冷却，滴加1 M氢氧化钠水溶液(1.5 L)。分离有机层，用1 M氢氧化钠水溶液(1.5 L)和水(1.5 L)洗涤，无水硫酸镁干燥。滤除干燥剂后，减压蒸馏去除溶剂。所得残渣经减压蒸馏(0.93至1.5 hpa, 122℃至137℃)纯化，得到化合物(A9)(548 g, 96%)，为淡黄油状物。1
[0207] H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.22 (d, J=6.84 Hz, 6 H) 3.28 (sept, J=6.84 Hz, 1 H) 3.52 (s, 3 H) 5.23 (s, 2 H) 7.06 (s, 1 H) 7.69 (s, 1 H)。 + +
[0208] MS ESI/APCI Dual posi: 339[M+H], 341[M+2+H]。
[0209] (11)对照实施例1-11:中间产物(A)
[0210] 在-86℃至-74℃和氩气条件下，用超过20分钟时间向化合物(A9) (210 g,0.621 mol)的THF (3.1 L)溶液中滴加2.76 M 正丁基锂的己烷(236 mL, 0.652 mol)溶液，并在相同温度下搅拌35分钟。然后，用超过38分钟时间滴加2,3,4,6-四-O-三甲基硅-D-葡萄糖酸-l,5-内酯(305 g, 0.652 mol)的THF(890 mL)溶液，并在相同温度下搅拌50分钟。进一步地用超过4分钟时间滴加三甲基氯硅烷(82.8 mL, 0.652 mmol)，并在相同温度下搅拌3小时。然后，用超过23分钟时间滴加2.76 M 正丁基锂的己烷(326 mL,
0.901 mol)溶液，并在相同温度下搅拌40分钟。最后，用超过43分钟时间滴加4-溴-2- 甲基苯甲醛(136 g, 0.683 mmol)的THF(890 mL)溶液，并在相同温度下搅拌35分钟。反应混合物用水(3.1 L)稀释，并加热至室温。再加入甲苯(3.1 L)后,有机层分离，减压蒸馏去除溶剂。
[0211] 所得残渣(633 g)用甲醇(3.1 L)溶解，并加入甲磺酸(4.03 mL, 0.0621 mol)，后加热回流1小时。反应混合物冷却至室温，用三乙胺(17.3 mL, 0.124 mol)中和后浓缩。浓缩产物(413 g)溶解于甲苯(1.1 L)，用水(1.65 L)洗涤三次。有机层用甲苯(0.55 L)稀释，并用1 M氢氧化钠水溶液(0.55 L)萃取。水层用甲苯(1.65 L)洗涤并用2 M盐酸水溶液(0.43 L)酸化。所得水层用甲苯(1.1 L)萃取。有贾层用10%氯化钠水溶液(1.1 L)洗涤，而后减压蒸馏去除溶剂。
[0212] 所得残渣(273 g)溶解于THF(1.01 L)中。向该溶液中加入二异丙基乙胺(776 mL, 4.53 mol)、醋酸酐(381 mL, 4.03 mol)和4-二甲基氨基吡啶(615 mg, 5.04 mmol)，并在室温下搅拌21小时。反应混合物用冰冷却，加入水(1.0 L)和甲苯(1.0 L)。分离有机层，并用饱和碳酸氢钠水溶液(1.0 L)洗涤, 减压蒸馏去除溶剂。
[0213] 所得残渣(390 g)溶解于乙腈(3.85 L)中。向该溶液中加入水(9.07 mL, 0.504 mol)和t-BuMe2SiH (334 mL, 2.02 mol)，用冰冷却，而后用超过30分钟时间滴加TMSOTf (392 mL, 2.17 mol)。在相同温度下搅拌1小时，用超过10分钟时间滴加醋酸酐(95.2 mL,1.01 mol)，并在相同温度下搅拌15分钟。向反应混合物中加入甲苯(3.85 mL)和3%碳酸氢钠水溶液(1.92 L)。分离有机层，并用3%碳酸氢钠水溶液(1.92 L)和10%氯化钠水溶液(1.92 L)洗涤，然后用无水硫酸镁干燥。滤除干燥剂后，减压蒸馏去除溶剂，所得残渣用
2-丙醇(1.42 L)结晶。所得沉淀过滤得到中间和物(A)(201 g, 47%; 4个步骤)，为无色粉末。
[0214] 对照实施例2:中间产物(B)的制备
[0215] [化20]
[0216]
[0217] (1)对照实施例2-1:化合物(Bl)
[0218] [化21]
[0219]
[0220] 向化合物(Al) (27.4 g, 0.104 mol)和碳酸钾(21.7 g, 0.156 mol)在乙腈(200 mL)的悬浮液中加入碘甲烷(9.8 mL, 0.156 mol)，并在40℃下搅拌2.5小时。再进一步加入碘甲烷(3.5 mL, 0.052 mol)，并在相同温度下搅拌1小时。滤除不溶物，滤液加乙酸乙酯稀释。有机层用水、10%硫代硫酸钠水溶液和盐水洗涤，然后用无水硫酸镁干燥。滤除干燥剂后，减压蒸馏去除溶剂。所得残渣经硅胶柱色谱(己烷→己烷：乙酸乙酯= 95:5)纯化得么化合物(Bl) (24.5 g, 85%)，为淡黄色油状物。
[0221] 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.24 (d, J=6.84 Hz, 6 H) 2.87 (sept, J=6.84 Hz, 1 H) 3.88 (s, 3 H) 6.58-6.65 (m, 1 H) 6.70 (d, J=1.87 Hz, 1 H) 7.65 (d, J=8.08 Hz, 1 H)。
[0222] MS ESI/APCI Dual posi: 277[M+H]+。
[0223] (2)对照实施例2-2:化合物(B2)
[0224] [化22]
[0225]
[0226] 在-78℃和氮气条件下向化合物(Bl)(24.5 g, 88.6 mmol)的THF(100 mL)溶液中滴加2.6 M 正丁基锂的己烷(34 mL, 88.6 mmol)溶液，并在相同的温度下搅拌5分钟。然后，用超过25分钟时间滴加2,3,4,6-四-O-三甲基硅-D-葡萄糖酸-l,5-内酯(37.6 g, 80.5 mmol)的THF (60 mL)溶液，并在相同温度下搅拌10分钟。向反应混合物中加入冰和水，混合物加热至室温，并用乙酸乙酯萃取。合并的有机层用盐水洗涤，无水硫酸镁干燥。滤除干燥剂后，减压蒸馏去除溶剂。
[0227] 所得残渣溶解于含有甲磺酸(1.55 g, 16.1 mmol)甲醇(380 mL)溶液的溶液中，并在室温下搅拌2小时。用三乙胺(11.2 mL, 80.5 mmol)中和后，反应混合物浓缩。 [0228] 所得残渣(30.2 g)溶解于吡啶(100 mL)中。向该溶液中加入醋酸酐(100 mL)并在室温下搅拌14小时。再加入冰水(400 mL)后, 混合物用乙酸乙酯(200 mL)萃取两次。合并的有机层用1 M盐酸水溶液、饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，无水硫酸镁干燥。滤除干燥剂后，减压蒸馏去除溶剂，所得残渣经硅胶柱色谱(己烷→巳烷:乙酸乙酯= 6:4)纯化，得到化合物(B2)(32.8 g, 80%; 3个步骤)，为淡黄色油状物。
[0229] 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.23 (d, J=6.92 Hz, 6 H) 1.84 (s, 3 H) 1.97 (s, 3 H) 2.06 (s, 3 H) 2.10 (s, 3 H) 2.87 (sept, J=6.92 Hz, 1 H) 3.32 (s, 3 H) 3.87 (s, 3 H) 4.04 (ddd, J=10.18, 4.74, 2.41 Hz, 1 H) 4.17-4.23 (m, 1 H) 4.28-4.36 (m, 1 H) 5.25 (dd, J=10.18, 9.40 Hz, 1 H) 5.36 (d, J=10.18 Hz, 1 H) 5.60 (dd, J=10.18, 9.40 Hz, 1 H) 6.74 (d, J=1.55 Hz, 1 H) 6.79 (dd, J=8.08,1.55 Hz, 1 H) 7.26-7.33 (m, 1 H)。
[0230] MS ESI/APCI Dual posi: 533[M+Na]+。
[0231] (3)对照实施例2-3:化合物(B3)
[0232] [化23]
[0233]
[0234] 向化合物(B2)(32.8 g, 64.0 mmol)的氯仿(150 mL)和乙腈(150 mL)溶液中，在4℃和氮气条件下加入Et3SiH (21 mL, 128 mmol)和BF3 Et2O (49 mL, 385 mmol)，并在相同温度下搅拌1小时。反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液稀释，用氯仿萃取。有机层用盐水洗涤，并用无水硫酸镁干燥。滤除干燥剂后，减压蒸馏去除溶剂，所得残渣经硅胶柱色谱(己烷:乙酸乙酯= 2:1)纯化得到化合物(B3)(22.9 g, 74%)，为淡黄色胶状物。
[0235] 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.22 (d, J=6.99 Hz, 6 H) 1.77 (s, 3 H)2.01 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.07 (s, 3 H) 2.87 (sept, J=6.96 Hz, 1 H) 3.80-3.87 (m, 1 H) 3.84 (s, 3 H) 4.09-4.16 (m, 1 H) 4.22-4.29 (m, 1 H) 4.88-4.95 (m, 1 H) 5.18-5.27 (m, 1 H) 5.32-5.38 (m, 2 H) 6.71 (d, J=1.55 Hz, 1 H) 6.83 (dd, J=7.93, 1.55 Hz, 1 H) 7.23-7.30 (m, 1 H)。
[0236] MS ESI/APCI Dual posi: 503[M+H]+。
[0237] MS ESI/APCI Dual nega: 515[M+C1]-。
[0238] (4)对照实施例2-4:化合物(B4)
[0239] [化24]
[0240]
[0241] 重复对照实施例1-5所示的步骤，以得到化合物(B4)(25.5 g, 96%)，为淡黄色无定形物，是将步骤中的化合物(A4)替换为化合物(B3)。1
[0242] H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.20 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.23 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.80 (s, 3 H) 2.01 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.09 (s, 3 H) 3.31 (sept, J=6.84 Hz, 1 H) 3.77-3.82 (m, 1 H) 3.83 (s, 3 H) 4.10-4.17 (m, 1 H) 4.22-4.30 (m, 1 H) 4.83 (d, J=9.48 Hz, 1 H) 5.17-5.38 (m, 3 H) 6.75 (s, 1 H) 7.49 (s, 1 H)。+ +
[0243] MS ESI/APCI Dual posi: 581[M+Na],583[M+2+Na]。
[0244] (5)对照实施例2-5:化合物(B5)
[0245] [化25]
[0246]
[0247] 重复对照实施例1-6所示的步骤，以得到化合物(B5)(30.3 g)，为棕色油状物，是将步骤中的化合物(A5)替换为化合物(B4)。该化合物无需纯化即可用于下面的反应。
[0248] 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm -0.32 (s, 9 H) 0.09 (s, 9 H) 0.18 (s,9 H) 0.20 (s, 9 H) 1.19 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.23 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 3.26-3.44 (m, 3 H) 3.52- 3.58 (m, 2 H) 3.65-3.75 (m, 3 H) 3.76-3.83 (m, 1 H) 3.80 (s, 3 H) 4.60 (d, J=8.55 Hz, 1 H) 6.72 (s, 1 H) 7.51 (s, 1 H)。
[0249] MS ESI/APCI Dual posi: 701[M+Na]+, 703[M+2+Na]+。
[0250] (6)对照实施例2-6:化合物(B6)
[0251] [化26]
[0252]
[0253] 重复对照实施例1-7所示的步骤，以得到化合物(B6) (14.7 g, 60%)，为棕色无定形物，是将步骤中的化合物(A6)替换为化合物(B5)。
[0254] 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.23 和 1.25 (各 d, J=6.84 Hz,6 H) 1.80 (s, 2 H) 2.27 和 2.29 (各 s, 3 H) 2.30-2.58 (m, 2 H) 2.82-3.06 (m, 2 H) 3.34 和3.35 (各 s, 3 H) 3.38-3.86 (m, 6 H) 4.56-4.73 (m, 1 H) 5.53 (d, J=3.11 Hz,1 H) 6.75-7.35(m, 5 H)。
[0255] MS ESI/APCI Dual posi: 493[M-OH]+, 495[M+2-OH]+。
[0256] (7)对照实施例2-7:中间产物(B)
[0257] [化27]
[0258]
[0259] 重复对照实施例1-8所示的步骤，以得到中间产物(B) (14.2 g, 88%)，为无色无定形物，是将步骤中的化合物(A7)替换为化合物(B6)。
[0260] 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.11 (d, J=6.68 Hz, 3 H) 1.14 (d, J=6.68 Hz, 3 H) 1.75 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.28 (s, 3 H)2.90 (sept, J=6.68 Hz, 1 H) 3.71-3.90 (m, 3 H) 3.86 (s, 3H) 3.85-3.87 (m, 1 H)
4.05-4.15 (m, 1 H) 4.19- 4.28 (m, 1 H) 4.77-4.85 (m, 1 H) 5.11-5.23 (m, 1 H)
5.26-5.37 (m, 2 H) 6.54 (d, J=8.24 Hz, 1 H) 6.81 (s, 1 H) 6.96 (s, 1 H) 7.17 (dd, J=8.24, 2.64 Hz, 1 H) 7.32 (d, J=2.64 Hz, 1 H)。
[0261] MS ESI/APCI Dual posi: 685[M+Na]+, 687[M+2+Na]+。
[0262] 对照实施例3:中间产物(C)的制备
[0263] [化28]
[0264]
[0265] 重复对照实施例1-7和1-8所示的步骤，以得到化合物(C) (2.26 g)，为淡黄色无定形物，是将步骤中的化合物(A6)替换为化合物(B5)，以及将4-溴-2-甲基苯甲醛替换为4-溴苯甲醛。
1
[0266] H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.04 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.09 (d,J=6.84 Hz, 3 H) 1.76 (s, 3 H) 2.01 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.06 (s, 3 H) 2.91-3.06 (m,1 H)3.80-3.88 (m, 4 H) 3.91 (d, J=5.13 Hz, 2 H) 4.06-4.18 (m, 1 H) 4.20-4.31 (m, 1 H) 4.82-4.93(m, 1 H) 5.15-5.43 (m, 3 H) 6.77 (s, 1 H) 6.92 (d, J=8.55 Hz,
2 H) 7.11 (s, 1 H) 7.36 (d,J=8.55 Hz, 2 H)。
[0267] 对照实施例4:中间产物(D)的制备
[0268] [化29]
[0269]
[0270] (1)对照实施例4-1:化合物(Dl)
[0271] [化30]
[0272]
[0273] 在氮气条件下向2,2-二甲基-3-丁烯酸(J. Org. Chem., vol. 65, p. 8402,2000) (5.42 g, 47.5 mmol)的氯仿(250 mL)溶液中加入草酰氯(4.43 mL, 49.9 mmol)和N,N-二甲基甲酰胺(3 drops)，并在室温下搅拌1.5小时。反应混合物随后用冰冷却，并加入三乙胺(19.9 mL, 143 mmol)和α-氨基异丁酸甲基酯的盐酸化物(10.9 g, 71.2 mmol)，而后室温下搅拌1小时。反应混合物用水稀释，用氯仿萃取。有机层用3 M盐酸水溶液、饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥。滤除干燥剂后，减压蒸馏去除溶剂，所得残渣经硅胶柱色谱(己烷→己烷:乙酸乙酯= 4:1)纯化，得到化合物(Dl)(9.38 g, 93%)，为无色粉末。
[0274] 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.27 (s, 6 H) 1.51 (s, 6 H) 3.73 (s, 3 H) 5.17-5.32 (m, 2 H) 6.02 (dd, J=17.56, 10.57 Hz, 1 H) 6.25 (br. s., 1 H)。 [0275] MS ESI/APCI Dual posi: 214[M+H]+。
[0276] (2)对照实施例4-2:中间产物(D)
[0277] [化31]
[0278]
[0279] 向化合物(Dl)(9.38 g, 43.9 mmol)的甲醇(20 mL)溶液中加入4 M氢氧化钠水溶液(16.5 mL, 66.0 mmol)，在室温下搅拌1小时。然后，反应混合物浓缩。所得残渣溶解于水中，用3 M盐酸水溶液中和。该混合物用乙酸乙酯萃取，合并的有机层用盐水洗涤，无水硫酸镁干燥。滤除干燥后，减压蒸馏去除溶剂，得到中间产物(D)(8.19 g, 94%)，为无色粉末。1
[0280] H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.29 (s, 6 H) 1.54 (s, 6 H) 5.16-5.36 (m, 2 H) 6.01 (dd, J=17.49, 10.65 Hz, 1 H) 6.14 (s, 1 H)。+ +
[0281] MS ESI/APCI Dual posi: 200[M+H], 222[M+Na]。-
[0282] MS ESI/APCI Dual nega: 198[M-H]。
[0283] 对照实施例5: 中间产物(E)的制备
[0284] [化32]
[0285]
[0286] 在氩气条件下，中间产物(A) (5.0 g, 7.23 mmol), 中间产物(D) (2.59 g, 13.0 mmol), 醋酸钯(II)(328 mg, 1.45 mmol),三-O-甲苯基膦(880 mg, 2.89 mmol)和三乙胺(3.0 mL, 9.00 mmol) 在乙腈(24 mL)中的悬浮液在微波辐射作用下在120℃温度下搅拌20分钟。反应混合物通过硅藻土过滤，乙酸乙酯洗涤。滤液减压浓缩，所得残渣经硅胶柱色谱(己烷:乙酸乙酯= 1:1 →乙酸乙酯)纯化得到中间产物(E) (4.59 g, 78%)，为淡黄色粉末。
[0287] 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.16, 1.18 (各 d, J=6.84 Hz, 各 3 H)1.40 (s, 6 H) 1.54-1.58 (m, 6 H) 1.76 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.03 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.28 (s, 3 H) 2.36 (s, 3 H) 2.98-3.10 (m, 1 H) 3.71-3.79 (m, 1 H) 3.94 (s, 2 H) 4.01-4.08 (m, 1 H) 4.24 (dd, J=12.43, 4.51 Hz, 1 H) 4.47 (d, J=9.17 Hz, 1 H) 5.07-5.32 (m, 3 H) 6.31 (d, J=16.32 Hz, 1 H) 6.35 (s, 1 H) 6.55 (d, J=16.32 Hz, 1 H) 6.77 (d, J=7.62 Hz, 1 H) 6.92 (s, 1 H) 6.99 (s, 1 H) 7.12-7.18 (m, 1 H) 7.26 (s, 1 H)。
[0288] MS ESI/APCI Dual posi: 810[M+H]+, 832[M+Na]+。
[0289] MS ESI/APCI Dual nega: 808[M-H]-。
[0290] 对照实施例6:中间产物(F)的制备
[0291] [化33]
[0292]
[0293] 重复对照实施例5的相同步骤以得到中间产物(F) (2.03 g, 87%)，为黄色粉末，将步骤中的中间产物(A)替换为中间产物(B)。
[0294] 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.17, 1.14 (各 d, J=6.99 Hz, 3 H) 1.38 (s, 6 H) 1.55 (s, 6 H) 1.76 (s, 3 H) 1.98 (s, 3 H) 2.04 (s, 6 H) 2.30 (s, 3 H)2.94-3.03 (m, 1 H) 3.76-3.83 (m, 1 H) 3.84-3.95 (m, 4 H) 4.06-4.15 (m, 1 H)
4.16-4.25 (m, 1 H) 4.81 (d, J=9.79 Hz, 1 H) 5.12-5.20 (m, 1 H) 5.23-5.35 (m,
2 H) 6.29 (s, 1H) 6.31 (d, J=16.32 Hz, 1 H) 6.52 (d, J=16.32 Hz, 1 H) 6.67 (d, J=8.08 Hz, 1 H) 6.81 (s, 1 H) 6.94 (s, 1 H) 7.06-7.14 (m, 1 H) 7.24 (s, 1 H)。 [0295] MS ESI/APCI Dual posi: 782[M+H]+, 804[M+Na]+。
[0296] MS ESI/APCI Dual nega: 780[M-H]-。
[0297] 对照实施例7:中间产物(G)的制备
[0298] [化34]
[0299]
[0300] 重复对照实施例5的相同步骤以得到中间产物(G)(854 mg, 60%)，为淡黄色无定形物，是将步骤中的中间产物(A)替换为中间产物(C)。
[0301] 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.08 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.12 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.38 (s, 6 H) 1.53 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 2.00 (s, 3 H) 2.05 (s, 6 H) 3.06 (sept, J=6.84 Hz, 1 H) 3.78-3.83 (m, 1 H) 3.84 (s, 3 H) 3.97 (s, 2 H)4.07-4.18 (m, 1 H) 4.17-4.27 (m, 1 H) 4.87 (dd, J=6.76, 2.88 Hz, 1 H) 5.16-5.25 (m, 1 H) 5.27-5.40 (m, 2 H) 6.18-6.33 (m, 2 H) 6.54 (d, J=16.48 Hz, 1 H) 6.77 (s, 1 H) 7.03 (d, J=8.08 Hz, 2 H) 7.10 (s, 1 H) 7.29 (d, J=8.08 Hz, 2 H)。 [0302] MS ESI/APCI Dual posi: 768[M+H]+, 790[M+Na]+。
[0303] MS ESI/APCI Dual nega: 766[M-H]-。
[0304] 对照实施例8:中间产物(H)的制备
[0305] [化35]
[0306]
[0307] 在氩气条件下，中间产物(A)(216 g, 0.312 mol), 2,2-二甲基-3-丁烯酸(53.4 g, 0.467 mol),醋酸钯(II)(3.50 g, 15.6 mmol), 三-O-甲苯基膦(9.48 g, 31.2 mmol)和三乙胺(86.9 mL, 0.623 mol)在乙腈(623 mL)中的悬浮液加热回流3小时。反应混合物冷却到室温，用氯仿(300 mL)和甲醇(100 mL)稀释，通过硅藻土过滤。滤液减压浓缩，所得残渣溶解于乙酸乙酯(1.32 L)中。该溶液用1 M盐酸水溶液(0.96 L)和10%氯化钠水溶液(1.2 L)洗涤，用无水硫酸镁干燥。滤除干燥剂后，滤液进一步用乙酸乙酯(1.2 L)稀释，再加入异丙胺(28.2 mL, 0.327 mol)。混合物在冰浴下搅拌1小时。所得沉淀物过滤得到中间产物(H)的异丙胺盐。该盐溶解于乙酸乙酯(1.2 L)和1 M盐酸水溶液(500 mL)中，搅拌30分钟。有机层分离，并用10%氯化钠水溶液(500 mL)洗涤，用无水硫酸镁干燥。滤除干燥剂后，减压蒸馏去除溶剂，得到中间产物(H) (207 g, 88%)，为无色无定形物。
[0308] 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.13 (d, J=6.80 Hz, 3 H) 1.14 (d, J=6.80 Hz, 3 H) 1.43 (s, 6 H) 1.76 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.03 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.28 (s, 3 H) 2.37 (s, 3 H) 2.98 (sept, J=6.80 Hz, 1 H) 3.70-3.80 (m, 1 H)3.91 (s, 2 H) 4.05 (dd, J=12.43, 2.18 Hz, 1 H) 4.28 (dd, J=12.43, 4.35 Hz, 1 H) 4.43-4.50 (m, 1 H) 5.11-5.20 (m, 1 H) 5.22-5.33 (m, 2 H) 6.33-6.49 (m, 2 H)
6.68 (d, J=7.93 Hz, 1 H) 6.96 (s, 1 H) 6.99 (s, 1 H) 7.06-7.14 (m, 1 H) 7.23 (d, J=1.40 Hz, 1 H)。
[0309] MS ESI/APCI Dual posi: 747[M+Na]+。
[0310] 对照实施例9:中间产物(I)的制备
[0311] [化36]
[0312]
[0313] 2-氨基异丁酸(150 g, 1.45 mol)溶解于水(2.2 L)中，并加入碳酸钠(465 g,4.39 mol)。反应混合物用冰冷却，然后用超过45分钟时间滴加氯甲酸苄基酯(227 mL,
1.60 mol)的1,4-二氧六环(0.63 L)溶液，内部温度不超过10℃。在室温下搅拌过夜，向反应混合物中加入水(3.5 L)和甲苯(1.0 L)。分离水性层，滴加浓盐酸(700 mL)直至体系pH值达到1。加入乙酸乙酯(1.0 L)并搅拌1小时。有机层分离，无水硫酸镁干燥。滤除干燥剂后，减压蒸馏去除溶剂。
[0314] 所得残渣(338 g)溶解于氯仿(1.7 L)中。在冰冷却下向该溶液中一份一份地加入N,N'-羰基二咪唑(CDI) (253 g, 1.56 mol)，内部温度不超过20℃。在室温下搅拌30分钟，反应混合物再次用冰冷却，并用超过25分钟时间滴加l,2-二氨基-2-甲基丙烷(138 g, 1.56 mol)。室温下搅拌过夜，加入10%碳酸钾水溶液(1.7 L)。分离有机层，无水硫酸镁干燥。滤除干燥剂后，减压蒸馏去除溶剂。
[0315] 所得残渣(417 g)溶解于THF (2.0 L)中。向该溶液中加入Boc2O (355 g, 1.63 mol)，并在室温下搅拌1.5小时。然后，向反应混合物中加入饱和碳酸氢钠水溶液(1.0 L)，分离有机层，无水硫酸镁干燥。滤除干燥剂后，减压蒸馏去除溶剂。
[0316] 所得残渣(549 g)溶解于甲醇(2.75 L)中。向该溶液中加入10%的氢氧化钯(27.5 g)，室温下，氢气条件下搅拌4.5小时。反应混合物通过硅藻土过滤后，减压蒸馏去除溶剂，所得残渣用2:1的庚烷:乙酸乙酯混合溶剂(1.75 L)结晶。所得沉淀过滤得到中间产物(I) (193 g, 53%; 4个步骤)，为无色粉末。
[0317] 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.27 (s, 6 H) 1.37 (s, 6 H) 1.43 (s,9 H) 1.53 (br. s, 2 H) 3.39 (d, J=6.53 Hz, 2 H) 4.78 (br. s, 1 H) 8.04 (br. s, 1 H)。
[0318] MS ESI/APCI Dual posi: 274[M+H]+, 296[M+Na]+。
[0319] MS ESI/APCI Dual nega: 3O8[M+C1]-。
[0320] 实施例1-1
[0321] [化37]
[0322]
[0323] 向中间产物(E)(200 mg, 0.25 mmol)，1-羟基苯并三唑一水合物(HOBt·H2O) (57 mg, 0.37 mmol)和N,N-二甲基乙二胺(65 mg, 0.74 mmol) 的N,N-二甲基甲酰胺(3.0 mL)溶液中加入N-乙基-N'-3-二甲基氨基丙基碳二亚胺盐酸化物(EDC·HC1) (71 mg,0.37 mmol)，并在室温下搅拌8小时。反应混合物倾入水中(50 mL)，并用乙酸乙酯(50 mL)萃取。有机层用盐水(20 mL)洗涤，无水硫酸镁干燥。滤除干燥剂后，减压蒸馏去除溶剂。
所得残渣经硅胶柱色谱(氯仿→ 氯仿:甲醇= 9:1)纯化，得到化合物(1-1) (132 mg,
61%)，为无色无定形物。
[0324] 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.13, 1.15 (各 d, J=6.92 Hz, 各 3 H)1.38 (s, 6 H) 1.53 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.03 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.23 (s, 6 H) 2.31 (s, 3 H) 2.37 (s, 3 H) 2.41 (t, J=5.67 Hz, 2 H)
2.90-3.03 (m, 1 H) 3.25-3.34 (m, 2 H) 3.71-3.80 (m, 1 H) 3.92 (s, 2 H) 4.05 (dd, J=12.59, 2.18 Hz, 1 H) 4.23-4.32 (m, 1 H) 4.44- 4.52 (m, 1 H) 5.11-5.20 (m, 1 H) 5.22-5.33 (m, 2 H) 6.33 (d, J=16.63 Hz, 1 H) 6.41 (br. s., 1 H) 6.51 (d, J=16.63 Hz, 1 H) 6.68 (d, J=7.77 Hz, 1 H) 6.77 (br. s., 1 H) 7.00 (s, 2 H)
7.12 (d, J=7.77 Hz, 1 H) 7.26 (s, 1 H)。
[0325] MS ESI/APCI Dual posi: 880[M+H]+, 902[M+Na]+。
[0326] MS ESI/APCI Dual nega: 914[M+C1]-。
[0327] 实施例1-2
[0328] [化38]
[0329]
[0330] 向化合物(1-1) (127 mg, 0.14 mmol)的甲醇(2.0 mL)溶液中加入甲醇钠(4.88 M/MeOH, 10 μL)，室温下搅拌1小时。加入少量干冰中和反应混合物，减压蒸馏去除溶剂。
[0331] 所得残渣经NH-型硅胶柱色谱(氯仿:甲醇= 9:1 → 6:4)纯化得到化合物(1-2) (77 mg, 80%)，为无色无定形物。1
[0332] H NMR (600 MHz, 甲醇-d4) δ ppm 1.10 (d, J=6.92 Hz, 6 H) 1.36 (s,6 H) 1.45 (s, 6 H) 2.23 (s, 6 H) 2.31 (s, 3 H) 2.40 (t, J=6.88 Hz, 2 H)
2.87-2.96 (m, 1 H) 3.28 (t, J=6.88 Hz, 2 H) 3.34-3.41 (m, 2 H) 3.43-3.50 (m, 1 H) 3.51-3.57 (m, 1 H) 3.67 (dd, J=12.15, 2.52 Hz, 1 H) 3.84 (d, J=11.46 Hz, 1 H) 3.89 (s, 2 H) 4.47 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.39 (d, J=16.05 Hz, 1 H) 6.50 (d, J=16.05 Hz, 1 H) 6.75 (d, J=8.25 Hz, 1 H) 6.80 (s, 1 H) 6.97 (s, 1 H) 7.11 (d, J=8.25 Hz, 1 H) 7.25 (s, 1 H)。
+
[0333] MS ESI/APCI Dual posi: 670[M+H]。- -
[0334] MS ESI/APCI Dual nega: 668[M-H], 7O4[M+C1]。
[0335] C37H55N3O8·1.4H2O的分析计算值: C, 63.94; H, 8.38; N, 6.05。实测值: C,64.13; H, 8.39; N, 5.88。
[0336] 实施例2-1
[0337] [化39]
[0338]
[0339] 重复实施例1-1相同的步骤，得到化合物(2-1) (103 mg, 47%)，为无色无定形物，是将步骤中的N,N-二甲基乙二胺替换为哌嗪。
[0340] 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.14, 1.16 (各 d, J=6.99 Hz, 各 3 H)1.38 (s, 6 H) 1.61 (s, 6 H) 1.71 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.12 (s,
3 H) 2.27 (s, 3 H) 2.79-2.87 (m, 4 H) 2.87-2.99 (m, 1 H) 3.56-3.66 (m, 4 H)
3.75-3.94 (m, 3 H) 4.12-4.20 (m, 1 H) 4.25-4.34 (m, 1 H) 4.44-4.52 (m, 1 H)
5.23-5.32 (m, 3 H) 6.30 (d, J=16.32 Hz, 1 H) 6.48 (d, J=16.32 Hz, 1 H) 6.53 (s,
1 H) 6.68 (d, J=7.77 Hz, 1 H) 6.88 (s, 1 H) 6.97 (s, 1 H) 7.05-7.12 (m, 1 H)
7.22 (s, 1 H)。
[0341] MS ESI/APCI Dual posi: 836[M+H]+, 858[M+Na]+。
[0342] MS ESI/APCI Dual nega: 834[M-H]-, 87O[M+C1]-。
[0343] 实施例2-2
[0344] [化40]
[0345]
[0346] 重复实施例1-2相同的步骤，得到化合物(2-2) (52 mg, 66%)，为无色无定形物，是将步骤中的化合物(1-1)替换为化合物(2-1)。
[0347] 1H NMR (600 MHz, 甲醇-d4) δ ppm 1.10 (d, J=6.42 Hz, 6 H) 1.36 (s, 6 H)1.44 (s, 6 H) 2.31 (s, 3 H) 2.70 (br. s, 4 H) 2.90-2.95 (m, 1 H) 3.36-3.39 (m, 2 H) 3.43-3.61 (m, 7 H) 3.65-3.69 (m, 1 H) 3.84 (d, J=11.92 Hz, 1 H) 3.88 (s, 2 H) 4.46 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.38 (d, J=16.05 Hz, 1 H) 6.47 (d, J=16.05 Hz, 1 H) 6.76 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 6.80 (s, 1 H) 6.95 (s, 1 H) 7.10 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 7.22 (s, 1 H)。
[0348] MS ESI/APCI Dual posi: 668[M+H]+, 690[M+Na]+。
[0349] MS ESI/APCI Dual nega: 666[M-H]-, 7O2[M+C1]-。
[0350] 实施例3-1
[0351] [化41]
[0352]
[0353] 重复实施例1-1相同的步骤，得到化合物(3-1) (135 mg, 61%)，为无色无定形物，是将步骤中的N,N-二甲基乙二胺替换为1-甲基哌嗪。
[0354] 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.13, 1.15 (各 d, J=6.84 Hz, 各 3 H)1.37 (s, 6 H) 1.60 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.03 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.27 (s, 3 H) 2.30 (s, 3 H) 2.33-2.41 (m, 7 H) 2.88-3.04 (m, 1 H)
3.60-3.70 (m, 4 H) 3.72-3.80 (m, 1 H) 3.92 (s, 2 H) 4.05 (dd, J=12.59, 2.33 Hz, 1 H) 4.27 (dd, J=12.59, 4.51 Hz, 1 H) 4.43.4.54 (m, 1 H) 5.10-5.20 (m, 1 H) 5.22-5.32 (m, 2 H) 6.31 (d, J=16.48 Hz, 1 H) 6.49 (d, J=16.48 Hz, 1 H) 6.68 (d, J=8.08 Hz, 1 H) 6.86 (s, 1 H) 7.00 (s, 2 H) 7.08-7.14 (m, 1 H) 7.24 (s, 1 H)。
[0355] MS ESI/APCI Dual posi: 892[M+H]+，914[M+Na]+。
[0356] MS ESI/APCI Dual nega: 926[M+C1]-。
[0357] 实施例3-2
[0358] [化42]
[0359]
[0360] 重复实施例1-2相同的步骤，得到化合物(3-2)(79 mg, 79%)，为无色无定形物，是将步骤中的化合物(1-1)替换为化合物(3-1)。
[0361] 1H NMR (600 MHz, 甲醇-d4) δ ppm 1.10 (d, J=6.88 Hz, 6 H) 1.37 (s, 6 H)1.44 (s, 6 H) 2.16 (s, 3 H) 2.22-2.38 (m, 7 H) 2.87-2.96 (m, 1 H) 3.35-3.41 (m,
2 H) 3.42- 3.51 (m, 2 H) 3.51-3.56 (m, 1 H) 3.56-3.71 (m, 5 H) 3.84 (d, J=12.38 Hz, 1 H) 3.88 (s, 2 H) 4.47 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.38 (d, J=16.51 Hz, 1 H) 6.46 (d, J=16.51 Hz, 1 H) 6.75 (d, J=8.25 Hz, 1 H) 6.80 (s, 1 H) 6.97 (s, 1 H) 7.09 (d, J=8.25 Hz, 1 H) 7.22 (s, 1 H)。
[0362] MS ESI/APCI Dual posi: 682[M+H]+, 704[M+Na]+。
[0363] MS ESI/APCI Dual nega: 680[M-H]-, 716[M+C1]-。
[0364] 实施例4-1
[0365] [化43]
[0366]
[0367]
[0368] 重复实施例1-1相同的步骤，得到化合物(4-1A)(87.9 mg, 38%)，为无色胶状物，以及得到化合物(4-1B)(42.9 mg, 19%)，为无色胶状物，是将步骤中的N,N-二甲基乙二胺替换为1-乙基哌嗪。
[0369] 化合物(4-1A)
[0370] 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.07 (t, J=7.23 Hz, 3 H) 1.12 - 1.16 (m, 6 H) 1.37 (s, 6 H) 1.61 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.03 (s, 3 H)2.05 (s, 3 H) 2.30 (s, 3 H) 2.34-2.44 (m, 9 H) 2.90-3.05 (m, 1 H) 3.60-3.72 (m,
4 H) 3.72-3.80 (m, 1 H) 3.92 (s, 2 H) 4.05 (dd, J=12.36, 1.94 Hz, 1 H) 4.27 (dd, J=12.36, 4.43 Hz, 1 H) 4.48 (d, J=9.79 Hz, 1 H) 5.15 (t, J=9.79 Hz, 1 H)
5.22-5.31 (m, 2 H) 6.31 (d, J=16.2 Hz, 1 H) 6.49 (d, J=16.2 Hz, 1 H) 6.68 (d, J=8.08 Hz, 1 H) 6.86-6.93 (m, 1 H) 7.00 (s, 2 H) 7.11 (d, J=8.08 Hz, 1 H) 7.24 (s, 1 H)。
[0371] MS ESI/APCI Dual posi: 907[M+H]+, 929[M+Na]+。
[0372] MS ESI/APCI Dual nega: 941[M+C1]-。
[0373] 化合物(4-1B)
[0374] 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.03-1.19 (m, 9 H) 1.37 (s, 6 H) 1.62 (s, 6 H) 1.71 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.12 (s, 3 H) 2.27 (s, 3 H)2.33-2.46 (m, 6 H) 2.93 (sept, J=6.76 Hz, 1 H) 3.58-3.71 (m, 4 H) 3.73-3.91 (m,
3 H) 4.12-4.21 (m, 1 H) 4.24-4.34 (m, 1 H) 4.48 (d, J=9.17 Hz, 1 H) 5.21-5.34 (m, 3 H) 6.30 (d, J=16.1 Hz, 1 H) 6.48 (d, J=16.1 Hz, 1 H) 6.53 (s, 1 H) 6.68 (d, J=7.93 Hz, 1 H) 6.88 (s, 1 H) 6.99 (s, 1 H) 7.08 (d, J=7.93 Hz, 1 H) 7.22 (s, 1 H)。
[0375] MS ESI/APCI Dual posi: 865[M+H]+, 887[M+Na]+。
[0376] MS ESI/APCI Dual nega: 899[M+C1]-。
[0377] 实施例4-2
[0378] [化44]
[0379]
[0380] 向化合物(4-1A) (87.9 mg, 0.0973 mmol)和化合物(4-1B) (42.9 mg, 0.0486 mmol)中加入三乙胺/水/甲醇(1/1/5, 5 mL)。反应混合物室温下搅拌过夜，减压蒸馏去除溶剂。所得残渣经硅胶柱色谱(氯仿→氯仿：甲醇= 8:2)纯化得到化合物(4-2) (79.2 mg, 78%)，为无色无定形物。
[0381] 1H NMR (600 MHz, 甲醇-d4) δ ppm 0.98 (t, J=7.23 Hz, 3 H) 1.10 (d, J=6.88 Hz, 6 H) 1.36 (s, 6 H) 1.44 (s, 6 H) 2.23-2.42 (m, 9 H) 2.85-2.99 (m, 1 H) 3.35-3.41 (m, 2 H) 3.42-3.48 (m, 1 H) 3.50-3.56 (m, 1 H) 3.55-3.71 (m, 5 H)3.81-3.90 (m, 3 H) 4.47 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.39 (d, J=16.1 Hz, 1 H) 6.46 (d, J=16.1 Hz, 1 H) 6.71-6.77 (m, 1 H) 6.80 (s, 1 H) 6.98 (s, 1 H) 7.09 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 7.22 (s, 1 H)。
[0382] MS ESI/APCI Dual posi: 696[M+H]+, 718[M+Na]+。
[0383] MS ESI/APCI Dual nega: 694[M-H]-。
[0384] C39H57N3O8·1,2H2O的分析计算值: C, 65.3; H, 8.34; N, 5.86。实测值: C,65.3; H, 8.36; N, 5.68。
[0385] 实施例5-1
[0386] [化45]
[0387]
[0388] 向中间产物(E) (205 mg, 0.253 mmol), HOBt-H2O (68 mg, 0.506 mmol)和4-二甲基氨基哌啶(65 mg, 0.506 mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(2.0 mL)溶液中加入EDC-HCl (97 mg, 0.506 mmol)，并在70℃下搅拌2小时。反应混合物倾入水中(50 mL)，乙酸乙酯(50 mL)萃取。有机层用盐水(20 mL)洗涤，无水硫酸镁干燥。滤除干燥剂后，减压蒸馏去除溶剂。所得残渣经硅胶柱色谱(氯仿→氯仿:甲醇= 3:1)纯化得到化合物(5-1) (80 mg, 34%)，为无色无定形物。1
[0389] H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.13 (d, J=6.76 Hz, 3 H) 1.15 (d, J=6.76 Hz, 3 H) 1.30-1.49 (m, 2 H) 1.38 (s, 6 H) 1.61 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 1.84 (d, J=12.75 Hz, 2 H) 1.99 (s, 3 H) 2.03 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.27 (s, 6 H) 2.30 (s, 3 H) 2.37 (s, 3 H) 2.81 (t, J=12.28 Hz, 2 H) 2.97 (sept, J=6.76 Hz, 1 H)3.76 (ddd, J=10.03, 4.66, 2.25 Hz, 1 H) 3.92 (s, 2 H) 4.05 (dd, J=12.43, 2.25 Hz, 1 H) 4.28 (dd, J=12.43, 4.66 Hz, 1 H) 4.33-4.53 (m, 3 H) 5.10-5.34 (m, 3 H) 6.31 (d, J=15.00 Hz, 1 H) 6.50 (d, J=15.00 Hz, 1 H) 6.68 (d, J=8.08 Hz, 1 H)
6.97-7.04 (m, 2 H) 7.11 (d, J=8.08 Hz, 1 H) 7.25 (s, 1 H)。
+
[0390] MS ESI/APCI Dual posi: 920[M+H]。-
[0391] MS ESI/APCI Dual nega: 954[M+C1]。
[0392] 实施例5-2
[0393] [化46]
[0394]
[0395] 重复实施例1-2相同的步骤得到化合物(5-2)(33 mg, 53%),为无色无定形物，是将步骤中的化合物(1-1)替换为化合物(5-1)。
[0396] 1H NMR (600 MHz, 甲醇-d4) δ ppm 1.08 (d, J=6.42 Hz, 6 H) 1.21-1.32 (m, 2 H) 1.35 (s, 6 H) 1.43 (s, 6 H) 1.73 (br. s., 2 H) 2.16 (s, 6 H) 2.28 (s, 3H) 2.28-2.37 (m, 1 H) 2.89 (sept, J=6.42 Hz, 1 H) 3.31-3.33 (m, 2 H) 3.44 (t, J=8.71 Hz, 1 H) 3.48-3.56 (m, 1 H) 3.66 (dd, J=11.92, 2.75 Hz, 1 H) 3.83 (d, J=11.92 Hz, 1 H) 3.86 (s, 2 H) 4.45 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.35-6.41 (m, 1 H)6.43-6.47 (m, 1 H) 6.72 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 6.78 (s, 1 H) 6.96 (s, 1 H) 7.08 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 7.21 (s, 1 H)。
[0397] MS ESI/APCI Dual posi: 710[M+H]+。
[0398] MS ESI/APCI Dual nega: 708[M-H]-。
[0399] C40H59N3O8·1.5H2O的分析计算值: C, 65.19; H, 8.50; N, 5.70。实测值: C,64.81; H, 8.46; N, 5.61。
[0400] 实施例6-1
[0401] [化47]
[0402]
[0403] 向中间产物(E) (680 mg, 0.746 mmol)的氯仿(5.0 mL)溶液中加入CDI (182 mg, 1.12 mmol)，在室温下搅拌1小时。然后，加入1,2- 二氨基-2-甲基丙烷(79 mg,0.895 mmol)，在室温下搅拌18小时。反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液稀释，用氯仿萃取两次。合并的有机层用无水硫酸钠干燥。滤除干燥剂后，减压蒸馏去除溶剂。所得残渣经硅胶柱色谱(氯仿→ 氯仿:甲醇= 85:15)纯化得到化合物(6-1) (140 mg, 21%)，为无色无定形物。
1
[0404] H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.11-1.17 (m, 6 H) 1.11 (s, 6 H) 1.39 (s, 6 H) 1.53 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.03 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H)2.31 (s, 3 H) 2.37 (s, 3 H) 2.89-3.05 (m, 1 H) 3.14 (d, J=5.91 Hz, 2 H) 3.76 (ddd, J=9.71, 4.51, 2.10 Hz, 1 H) 3.93 (s, 2 H) 4.05 (dd, J=12.51, 2.10 Hz, 1 H) 4.27 (dd, J=12.51, 4.51 Hz, 1 H) 4.49 (d, J=7.46 Hz, 1 H) 5.11-5.20 (m, 1 H)
5.23-5.31 (m, 2 H) 6.26 (s, 1 H) 6.29-6.38 (m, 1 H) 6.48- 6.57 (m, 1 H) 6.69 (d, J=7.93 Hz, 1 H) 6.97-7.03 (m, 3 H) 7.12 (d, J=7.93 Hz, 1 H) 7.25 (s, 1 H)。 +
[0405] MS ESI/APCI Dual posi: 880[M+H]。
[0406] 实施例6-2
[0407] [化48]
[0408]
[0409] 重复实施例1-2相同的步骤得到化合物(6-2)(104 mg, 98%),为无色无定形物，是将步骤中的化合物(1-1)替换为化合物(6-1)。
[0410] 1H NMR (600 MHz, 甲醇-d4) δ ppm 1.02 (s, 6 H) 1.05-1.10 (m, 6 H)1.35 (s, 6 H) 1.44 (s, 6 H) 2.29 (s, 3 H) 2.85-2.93 (m, 1 H) 3.09 (s, 2 H)
3.34-3.39 (m, 2 H) 3.42- 3.47 (m, 1 H) 3.52 (t, J=9.40 Hz, 1 H) 3.63-3.69 (m,
1 H) 3.80-3.85 (m, 1 H) 3.86 (s, 2 H) 4.46 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.35-6.41 (m,
1 H) 6.44-6.51 (m, 1 H) 6.73 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 6.78 (s, 1 H) 6.96 (s, 1 H)
7.06-7.10 (m, 1 H) 7.23 (s, 1 H)。
[0411] MS ESI/APCI Dual posi: 670[M+H]+, 692[M+Na]+。
[0412] MS ESI/APCI Dual nega: 668[M-H]-，7O4[M+C1]-。
[0413] 可选择地，化合物(6-2)也能够通过以下的实施例6-3和6-4来合成。 [0414] 实施例6-3
[0415] [化49]
[0416]
[0417] 向中间产物(H) (205 g, 0.273 mol), 中间产物(I) (97.0 g, 0.355 mol), HOBt·H2O (62.7 g, 0.410 mol)和三乙胺(114 mL, 0.819 mol)的N,N-二甲基甲酰胺(1.98 L)溶液中加入EDC-HCl (78.5 g, 0.410 mol)，并在室温下搅拌11小时。向反应混合物中加入甲苯(1.0 L)和10%氯化钠水溶液(2.0 L)，分离出有机层。水层用甲苯(1.0 L)萃取，合并的有机层用5%氯化钠水溶液(1.0 L)洗涤，无水硫酸镁干燥。滤除干燥剂后，减压蒸馏去除溶剂。所得残渣在50℃下溶解于2-丙醇(300 mL)中，滴加庚烷(2.7 L)。混合物在冰冷却下搅拌1小时，所得沉淀过滤得到化合物(6-3) (221 g, 83%)，为无色粉末。1
[0418] H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.13 (d, J=6.88 Hz, 3 H) 1.14 (d, J=6.88 Hz, 3 H) 1.26 (s, 6 H) 1.39 (s, 6 H) 1.44 (s, 9 H) 1.55 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.03 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.30 (s, 3 H) 2.37 (s, 3 H) 2.97 (sept, J=6.88 Hz, 1 H) 3.41 (d, J=5.60 Hz, 2 H) 3.72-3.80 (m, 1 H) 3.92 (s, 2 H) 4.05 (dd, J=12.43, 2.02 Hz, 1 H) 4.28 (dd, J=12.43, 4.51 Hz, 1 H) 4.45-4.52 (m, 1 H) 4.65 (s, 1 H) 5.11-5.19 (m, 1 H) 5.22-5.33 (m, 2 H) 6.29-6.39 (m, 1 H) 6.46-6.57 (m, 2 H) 6.69 (d, J=8.00 Hz, 1 H) 6.96-7.03 (m, 2 H) 7.11 (dd, J=8.00, 1.63 Hz, 1 H) 7.24-7.26 (m, 1 H) 7.59 (br. s, 1 H)。
[0419] 实施例6-4
[0420] 用超过10分钟时间，室温下向化合物(6-3) (220 g, 0.225 mol)的氯仿(3.0 L)溶液中滴加三氟乙酸(297 mL, 3.88 mol)，并在相同的温度下搅拌20小时。反应混合物用甲苯(3.0 L)稀释，并浓缩。浓缩产物溶解于乙酸乙酯(3.0 L)中，用10%碳酸钠水溶液(1.2 L)和盐水(1.0 L)洗涤，而后减压蒸馏去除溶剂。
[0421] 所得残渣(240 g)溶解于甲醇(1.5 L)中，用冰冷却，再加入三乙胺(0.3 L)和水(0.3 L)。室温下搅拌13小时后，再进一步加入甲醇(1.5 L)、三乙胺(0.3 L)和水(0.3 L)，再在室温下搅拌20小时。反应混合物浓缩并与甲醇共蒸发。所得残渣经NH-型硅胶柱色谱(乙酸乙酯:乙醇:水= 15:2:1 → 10:2:1)纯化，得到化合物(6-2) (129 g, 86%;2个步骤)，为无色无定形物。
[0422] 实施例7-1
[0423] [化50]
[0424]
[0425] 重复实施例1-1相同的步骤得到化合物(7-1)(112 mg, 74%),为无色无定形物，是将步骤中的中间产物(E)替换为中间产物(F)。
[0426] 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.12, 1.14 (各 d, J=6.84 Hz, 各 3 H)1.37 (s, 6 H) 1.51 (s, 6 H) 1.76 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.04 (s,
3 H) 2.23 (s, 6 H) 2.32 (s, 3 H) 2.41 (t, J=6.22 Hz, 2 H) 2.86-2.99 (m, 1 H)
3.25-3.33 (m, 2 H) 3.76-3.90 (m, 6 H) 4.07-4.15 (m, 1 H) 4.18-4.26 (m, 1 H)
4.76-4.85 (m, 1 H) 5.13-5.22 (m, 1 H) 5.26- 5.36 (m, 2 H) 6.31 (d, J=16.48 Hz,
1 H) 6.37 (s, 1 H) 6.50 (d, J=16.48 Hz, 1 H) 6.61-6.67 (m, 1 H) 6.81 (s, 1 H)
6.99 (s, 1 H) 7.06-7.12 (m, 1 H) 7.24 (s, 1 H)。
[0427] MS ESI/APCI Dual posi: 852[M+H]+。
[0428] MS ESI/APCI Dual nega: 886[M+C1]-。
[0429] 实施例7-2
[0430] [化51]
[0431]
[0432] 重复实施例1-2相同的步骤得到化合物(7-2)(69 mg, 78%)，为无色无定形物，是将步骤中的化合物(1-1)替换为化合物(7-1)。
[0433] 1HNMR (600 MHz, 甲醇-d4) δ ppm 1.13, 1.15 (各 d, J=6.84 Hz, 各 3 H)1.36 (s, 6 H) 1.45 (s, 6 H) 2.21 (s, 6 H) 2.32 (s, 3 H) 2.39 (t, J=6.88 Hz, 2 H) 2.93-3.02 (m, 1 H) 3.24-3.39 (m, 4 H) 3.42-3.48 (m, 1 H) 3.49-3.54 (m, 1 H)
3.58-3.65 (m, 1 H) 3.80-3.87 (m, 4 H) 3.91 (s, 2 H) 4.61 (d, J=9.63 Hz, 1 H)
6.39 (d, J=16.51 Hz, 1 H) 6.50 (d, J=16.51 Hz, 1 H) 6.73 (d, J=7.80 Hz, 1 H)
6.92 (s, 1 H) 7.08 (s, 1 H) 7.10 (d, J=7.80 Hz, 1 H) 7.25 (s, 1 H)。 [0434] MS ESI/APCI Dual posi: 684[M+H]+。
[0435] MS ESI/APCI Dual nega: 682[M-H]-，718[M+C1]-。
[0436] C38H57N3O8·1.7H2O的分析计算值: C, 63.88; H, 8.52; N, 5.88。实测值: C,63.84; H, 8.41; N, 5.75。
[0437] 实施例8-1
[0438] [化52]
[0439]
[0440] 重复实施例1-1相同的步骤得到化合物(8-1)(145 mg, 89%)，为无色无定形物，是将步骤中的中间产稀(E)替换为中间产物(F)，及N,N-二甲基乙二胺替换为N-叔丁氧基羰基乙二胺。
[0441] MS ESI/APCI Dual posi: 924[M+H]+, 946[M+Na]+。
[0442] MS ESI/APCI Dual nega: 958[M+C1]-。
[0443] 实施例8-2
[0444] [化53]
[0445]
[0446] 向化合物(8-1)的氯仿(3.0 ml)溶液中加入三氟乙酸(600 μL)并在室温下搅拌3小时。反应混合物减压浓缩，然后经硅胶柱色谱(氯仿:甲醇= 95:5 → 60:40)纯化得到化合物(8-2)(68 mg, 55%)，为无色无定形物。
[0447] 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.14, 1.16 (各 d, J=6.37 Hz, 各3 H)1.32 (s, 6 H) 1.42 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 1.98 (s, 3 H) 2.03 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.32 (s,3 H) 2.90-3.02 (m, 1 H) 3.22-3.34 (m, 2 H) 3.48-3.57 (m, 2 H) 3.76-3.96 (m, 6 H) 4.07-4.14(m, 1 H) 4.17-4.25 (m, 1 H) 4.79-4.87 (m, 1 H)
5.12-5.22 (m, 1 H) 5.24-5.36 (m, 2 H) 6.32 (s,1 H) 6.40 (d, J=16.63 Hz, 1 H)
6.51 (d, J=16.63 Hz, 1 H) 6.65 (d, J=8.55 Hz, 1 H) 6.82 (s,1 H) 6.96 (s, 1 H)
7.07-7.13 (m, 1 H) 7.28-7.31 (m, 1 H) 8.04 (br.s.,2 H)。
[0448] MS ESI/APCI Dual posi: 824[M+H]+, 846[M+Na]+。
[0449] MS ESI/APCI Dual nega: 858[M+C1]-。
[0450] 实施例8-3
[0451] [化54]
[0452]
[0453] 重复实施例1-2相同的步骤得到化合物(8-3)(22 mg, 44%)，为无色无定形物，是将步骤中的化合物(1-1)替换为化合物(8-2)。
[0454] 1H NMR (600 MHz, 甲醇-d4) δ ppm 1.13, 1.15 (各 d, J=6.84 Hz, 各 3 H)1.36 (s, 6 H) 1.45 (s, 6 H) 2.32 (s, 3 H) 2.63-2.71 (m, 2 H) 2.94-3.03 (m, 1 H)
3.23 (t, J=5.96 Hz, 2 H) 3.28-3.39 (m, 4 H) 3.43-3.48 (m, 1 H) 3.48-3.54 (m, 1 H) 3.62 (dd, J=12.15, 5.73 Hz, 1 H) 3.79-3.88 (m, 2 H) 3.92 (s, 2 H) 4.61 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.40 (d, J=16.51 Hz, 1 H) 6.50 (d, J=16.51 Hz, 1 H) 6.74 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 6.92 (s, 1 H) 7.07 (s, 1 H) 7.11 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 7.26 (s,
1 H)。
[0455] MS ESI/APCI Dual posi: 656[M+H]+。
[0456] MS ESI/APCI Dual nega: 654[M-H]-，69O[M+C1]-。
[0457] 实施例9-1
[0458] [化55]
[0459]
[0460] 重复实施例1-1相同的步骤得到化合物(9-1) (42 mg, 38%)，为无色无定形物，是将步骤中的中间产物(E)替换为中间产物(F)，和N,N-二甲基乙二胺替换为哌嗪。
[0461] 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.12, 1.14 (各 d, J=6.99 Hz, 各 3 H)1.37 (s, 6 H) 1.58 (s, 6 H) 1.76 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.32 (s, 3 H) 2.79-2.86 (m, 4 H) 2.88-2.99 (m, 1 H) 3.57-3.64 (m, 4 H) 3.76-3.95 (m, 6 H) 4.07-4.14 (m, 1 H) 4.18-4.26 (m, 1 H) 4.77-4.84 (m, 1 H) 5.13-5.22 (m, 1 H) 5.26-5.37 (m, 2 H) 6.29 (d, J=16.16 Hz, 1 H) 6.49 (d, J=16.16 Hz, 1 H) 6.64 (d, J=7.93 Hz, 1 H) 6.77-6.83 (m, 2 H) 6.99 (s, 1 H)
7.05-7.11 (m, 1 H) 7.22 (br.s.,1 H)。
[0462] MS ESI/APCI Dual posi: 850[M+H]+, 872[M+Na]+。
[0463] MS ESI/APCI Dual nega: 884[M+C1]-。
[0464] 实施例9-2
[0465] [化56]
[0466]
[0467] 重复实施例1-2相同的步骤得到化合物(9-2)(27 mg, 94%)，为无色无定形物，是将步骤中的化合物(1-1)替换为化合物(9-1)。
[0468] 1H NMR (600 MHz, 甲醇-d4) δ ppm 1.14, 1.16 (各 d, J=6.42 Hz, 各 3 H)1.36 (s, 6 H) 1.44 (s, 6 H) 2.32 (s, 3 H) 2.69 (br. s., 4 H) 2.95-3.03 (m, 1 H) 3.28-3.38 (m, 2 H) 3.42-3.52 (m, 2 H) 3.53-3.65 (m, 5 H) 3.80-3.84 (m, 1 H)
3.84 (s, 3 H) 3.92 (s, 2 H) 4.61 (d, J=9.17 Hz, 1 H) 6.39 (d, J=16.05 Hz, 1 H)
6.47 (d, J=16.05 Hz, 1 H) 6.74 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 6.92 (s, 1 H) 7.06 (s, 1 H)
7.10 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 7.22 (s, 1 H)。
[0469] MS ESI/APCI Dual posi: 682[M+H]+。
[0470] MS ESI/APCI Dual nega: 680[M-H]-，716[M+C1]-。
[0471] 实施例10-1
[0472] [化57]
[0473]
[0474] 重复实施例1-1相同的步骤得到粗产物化合物(10-1) (100 mg)，为无色无定形物，是将步骤中的中间产物(E)替换为中间产物(F)，和N,N-二甲基乙二胺替换为N-甲基哌嗪。该产物不必纯化即可用于下面的反应。1
[0475] H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.12 (d, J=8.5 Hz, 3 H) 1.15 (d, J=8.5 Hz, 3 H) 1.36 (s, 6 H) 1.56 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.04 (s, 6 H) 2.30 (s, 3 H) 2.32 (s, 3 H) 2.38-2.50 (m, 4 H) 2.85-3.02 (m, 1 H) 3.61-3.74 (m, 4 H) 3.76-3.84 (m,1 H) 3.81-3.96 (m, 1 H) 3.86 (s, 3 H) 4.07-4.15 (m, 1 H)4.18-4.27 (m, 1 H) 4.75-4.88 (m, 1 H) 5.11-5.24 (m, 1 H) 5.26-5.37 (m, 2 H)
6.22-6.38 (m, 1 H) 6.43-6.54 (m, 1 H) 6.59-6.70 (m,2 H) 6.81 (s, 1 H) 6.96-7.02 (m, 1 H) 7.04-7.12 (m, 1 H) 7.20-7.26 (m, 1 H)。
[0476] 实施例10-2
[0477] [化58]
[0478]
[0479] 重复实施例1-2相同的步骤得到化合物(10-2)(8.0 mg, 9%; 2个步骤)，为无色无定形物，是将步骤中的化合物(1-1)替换为化合物(10-1)。
[0480] 1H NMR (600 MHz, 甲醇-d4) δ ppm 1.09-1.16 (m, 6 H) 1.35 (s, 6 H) 1.42 (s, 6 H) 2.12-2.16 (m, 3 H) 2.23-2.33 (br. s., 4 H) 2.30 (s, 3 H) 2.92-3.01 (m, 1 H) 3.28 (s, 2 H) 3.30-3.38 (m, 1 H) 3.41-3.51 (m, 2 H) 3.55-3.66 (m, 5 H)3.78-3.86 (m, 4 H) 3.90 (s, 2 H) 4.59 (d, J=9.17 Hz, 1 H) 6.33-6.39 (m, 1 H)
6.42-6.47 (m, 1 H) 6.72 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 6.90 (s, 1 H) 7.04-7.11 (m, 2 H)
7.19-7.24 (m, 1 H)。
[0481] MS ESI/APCI Dual posi: 696[M+H]+, 718[M+Na]+。
[0482] MS ESI/APCI Dual nega: 694[M-H]-，73O[M+C1]-。
[0483] 实施例11-1
[0484] [化59]
[0485]
[0486] 重复实施例1-1相同的步骤得到化合物(11-1)(200 mg, 89%)，为淡黄色无定形物，是将步骤中的中间产物(E)替换为中间产物(F)，和N,N-二甲基乙二胺替换为1-乙基哌嗪。
[0487] 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.07 (t, J=7.23 Hz, 3 H) 1.11 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.14 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.36 (s, 6 H) 1.59 (s, 6 H) 1.76 (s, 3 H)1.99 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.32 (s, 3 H) 2.36-2.44 (m, 6 H) 2.93 (sept, J=6.84 Hz, 1 H) 3.61-3.71 (m, 4 H) 3.77-3.84 (m, 1 H) 3.83-3.94 (m, 5 H) 4.05-4.16 (m, 1 H) 4.18-4.27 (m, 1 H) 4.76-4.86 (m, 1 H) 5.14-5.23 (m, 1 H)
5.25-5.37 (m, 2 H) 6.29 (d, J=16.1 Hz, 1 H) 6.48 (d, J=16.1 Hz, 1 H) 6.64 (d, J=7.62 Hz, 1 H) 6.77-6.86 (m, 2 H) 6.99 (s, 1 H) 7.08 (d, J=7.62 Hz, 1 H) 7.22 (s, 1 H)。
[0488] MS ESI/APCI Dual posi: 879[M+H]+, 901[M+Na]+。
[0489] MS ESI/APCI Dual nega: 913[M+C1]-。
[0490] 实施例11-2
[0491] [化60]
[0492]
[0493] 重复实施例4-2相同的步骤得到化合物(11-2)(118 mg, 73%)，为无色无定形物，是将步骤中的化合物(4-1A)和(4-1B)替换为化合物物(11-1)。
[0494] 1H NMR (600 MHz, 甲醇-d4) δ ppm 0.97 (t, J=7.11 Hz, 3 H) 1.10-1.19 (m,6 H) 1.37 (s, 6 H) 1.45 (s, 6 H) 2.26-2.42 (m, 9 H) 2.97 (sept, J=6.76 Hz, 1 H) 3.32-3.40 (m, 2 H) 3.43-3.48 (m, 1 H) 3.48-3.55 (m, 1 H) 3.55-3.72 (m, 5 H)
3.79-3.89 (m, 4 H) 3.91 (s, 2 H) 4.61 (d, J=9.17 Hz, 1 H) 6.39 (d, J=16.5 Hz,
1 H) 6.46 (d, J=16.5 Hz, 1 H) 6.73 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 6.92 (s, 1 H) 7.04-7.14 (m, 2 H) 7.23 (s, 1 H)。
[0495] MS ESI/APCI Dual posi: 710[M+H]+, 732[M+Na]+。
[0496] MS ESI/APCI Dual nega: 744[M+C1]-。
[0497] C40H59N3O8·1.5H2O的分析计算值: C, 65.2; H, 8.48; N, 5.70。实测值: C,65.1; H, 8.38; N, 5.64。
[0498] 实施例12-1
[0499] [化61]
[0500]
[0501] 重复实施例5-1相同的步骤得到化合物(12-1)(55 mg, 40%)，为无色无定形物，是将步骤中的中间产物(E)替换为中间产物(F)。
[0502] 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.12, 1.14 (各 d, J=6.92 Hz, 各 3 H)1.28-1.47 (m, 8 H) 1.60 (s, 6 H) 1.73-1.89 (m, 5 H) 1.99 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.22-2.35 (m, 10 H) 2.73-2.99 (m, 3 H) 3.76-3.84 (m, 1 H)
3.84-3.90 (m, 5 H) 4.07-4.15 (m, 1 H) 4.18-4.26 (m, 1 H) 4.34-4.50 (m, 2 H)
4.75-4.86 (m, 1 H) 5.13-5.23 (m, 1 H) 5.26- 5.39 (m, 2 H) 6.30 (d, J=16.48 Hz,
1 H) 6.48 (d, J=16.48 Hz, 1 H) 6.63 (d, J=8.39 Hz, 1 H) 6.81 (s, 1 H) 6.94-7.01 (m, 2 H) 7.04-7.11 (m, 1 H) 7.23 (s, 1 H)。
[0503] MS ESI/APCI Dual posi: 892[M+H]+, 914[M+Na]+。
[0504] 实施例12-2
[0505] [化62]
[0506]
[0507] 重复实施例1-2相同的步骤得到化合物(12-2)(55 mg, 82%)，为无色无定形物，是将步骤中的化合物(1-1)替换为化合物(12-1)。
[0508] 1H NMR (600 MHz, 甲醇-d4) δ ppm 1.13, 1.15 (各 d, J=6.84 Hz, 各3 H)1.24-1.33 (m, 2 H) 1.37 (s, 6 H) 1.44 (s, 6 H) 1.75 (br. s, 2 H) 2.17 (s, 6 H) 2.30-2.39 (m,4 H) 2.93-3.01 (m, 1 H) 3.28-3.38 (m, 5 H) 3.43-3.47 (m, 1 H)
3.47-3.53 (m, 1 H) 3.62 (dd, J=12.15, 5.73 Hz, 1 H) 3.80-3.86 (m, 3 H) 3.91 (s,
2 H) 4.48 (br. s., 2 H) 4.61 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.40 (d, J=16.05 Hz, 1 H) 6.47 (d, J=16.05 Hz, 1 H) 6.73 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 6.92 (s,1 H) 7.06-7.11 (m, 2 H)
7.23 (s, 1 H)。
[0509] MS ESI/APCI Dual posi: 724[M+H]+, 746[M+Na]+。
[0510] MS ESI/APCI Dual nega: 722[M-H]-，758[M+C1]-。
[0511] C41H61N3O8·2.5H2O的分析计算值: C, 64.04; H, 8.65; N, 5.46。实测值: C,64.01; H, 8.38; N, 5.49。
[0512] 实施例13-1
[0513] [化63]
[0514]
[0515] 重复实施例6-1相同的步骤得到化合物(13-1)(1.98 g, 99%)，为无色无定形物，是将步骤中的中间产物(E)替换为中间产物(F)。
[0516] 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.10 (s, 6 H) 1.12 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.14 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.36 (s, 6 H) 1.56 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.04 (s, 6 H) 2.30 (s, 3 H) 2.85-3.02 (m, 1 H) 3.13 (d, J=5.91 Hz,2 H) 3.76-3.84 (m, 1 H) 3.81-3.96 (m, 1 H) 3.86 (s, 3 H) 4.07-4.15 (m, 1 H)
4.18-4.27 (m, 1 H) 4.75-4.88 (m, 1 H) 5.11-5.24 (m, 1 H) 5.26-5.37 (m, 2 H) 6.22-6.38 (m, 1 H) 6.43-6.54 (m, 1 H) 6.59-6.70 (m, 1 H) 6.81 (s, 1 H)
6.96-7.02 (m, 2 H) 7.04-7.12 (m, 1 H) 7.20-7.26 (m, 1 H)。
[0517] 实施例13-2
[0518] [化64]
[0519]
[0520] 重复实施例1-2相同的步骤得到化合物(13-2)(1.0 g, 65%)，为无色无定形物，是将步骤中的化合物(1-1)替换为化合物(13-1)。1
[0521] H NMR (600 MHz, 甲醇-d4) δ ppm 1.01 (s, 6 H) 1.09-1.15 (m, 6 H) 1.35 (s, 6 H) 1.43 (s, 6 H) 2.31 (s, 3 H) 2.91-3.00 (m, 1 H) 3.08 (s, 2 H) 3.27-3.36 (m, 5 H) 3.41- 3.46 (m, 1 H) 3.47-3.52 (m, 1 H) 3.60 (dd, J=11.92, 5.96 Hz,1 H) 3.80-3.84 (m, 4 H) 3.90 (s, 2 H) 4.59 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.36-6.41 (m,
1 H) 6.45-6.50 (m, 1 H) 6.71 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 6.90 (s, 1 H) 7.06 (s, 1 H)
7.07-7.10 (m, 1 H) 7.20-7.25 (m, 1 H)。
+
[0522] MS ESI/APCI Dual posi: 684[M+H]。- -
[0523] MS ESI/APCI Dual nega: 682[M-H]，718[M+C1]。
[0524] 实施例14-1
[0525] [化65]
[0526]
[0527] 重复实施例1-1相同的步骤得到化合物(14-1)(200 mg, quant.)，为淡黄色油状物，是将步骤中的中间产物(E)替换为中间产物(F)，和N,N-二甲基乙二胺替换为4-氨基-l-叔丁氧基羰基哌啶。
[0528] 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.11 (d, J=6.99 Hz, 3 H) 1.14 (d, J=6.99 Hz, 3 H) 1.25-1.33 (m, 2 H) 1.36 (s, 6 H) 1.45 (s, 9 H) 1.48 (s, 6 H) 1.77 (s,3 H) 1.79-1.93 (m, 2 H) 1.99 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.32 (s, 3 H) 2.90-2.98 (m, 3 H) 3.75-4.00 (m, 9 H) 4.07-4.15 (m, 1 H) 4.18-4.27 (m, 1 H) 4.79-4.86 (m, 1 H) 5.19 (d, J=10.10 Hz, 1 H) 5.26-5.35 (m, 2 H) 6.09 (s, 1 H) 6.26 (d, J=16.48 Hz, 1 H) 6.50 (d, J=16.48 Hz, 1 H) 6.65 (d, J=8.32 Hz, 1 H) 6.74-6.83 (m, 2 H) 6.99 (s, 1 H) 7.08 (dd, J=8.32, 2.72 Hz, 1 H) 7.22 (d, J=2.72 Hz, 1 H)。
[0529] MS ESI/APCI Dual posi: 965[M+H]+, 987[M+Na]+。
[0530] MS ESI/APCI Dual nega: 999[M+C1]-。
[0531] 实施例14-2
[0532] [化66]
[0533]
[0534] 向化合物(14-1) (185 mg, 0.192 mmol)的氯仿(2 mL)溶液中加入三氟乙酸(450 μL)。反应混合物在室温下搅拌2小时，减压蒸馏去除溶剂。向所得残渣中加入三乙胺/水/甲醇(1/1/5, 4 mL)，反应混合物室温下搅拌过夜。减压蒸馏去除溶剂，所得残渣经硅胶柱色谱(氯仿→氯仿:甲醇= 8:2)纯化得到化合物(14-2)(103 mg, 77%)，为无色无定形物。
[0535] 1H NMR (600 MHz, 甲醇-d4) δ ppm 1.14 (d, J=5.50 Hz, 3 H) 1.15 (d, J=5.50 Hz, 3 H) 1.27-1.35 (m, 2 H) 1.37 (s, 6 H) 1.45 (s, 6 H) 1.78 (d, J=11.46 Hz, 2 H) 2.33 (s, 3 H) 2.56-2.68 (m, 2 H) 2.95-3.03 (m, 3 H) 3.33-3.37 (m, 2 H) 3.43-3.48 (m, 1 H) 3.49- 3.53 (m, 1 H) 3.57-3.66 (m, 1 H) 3.68-3.75 (m, 1 H) 3.81-3.84 (m, 1 H) 3.85 (s, 3 H) 3.92 (s, 2 H) 4.61 (d, J=9.17 Hz, 1 H)6.34-6.43 (m, 1 H) 6.45-6.56 (m, 1 H) 6.74 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 6.92 (s, 1 H)
7.04-7.16 (m, 2 H) 7.26 (s, 1 H)。
[0536] MS ESI/APCI Dual posi: 696[M+H]+, 718[M+Na]+。
[0537] 实施例15-1
[0538] [化67]
[0539]
[0540] 重复实施例1-1相同的步骤得到化合物(15-1)(103 mg, 94%)，为无色无定形物，是将步骤中的中间产物(E)替换为中间产物(G)。
[0541] 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.05 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.10 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.38 (s, 6 H) 1.49 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 2.00 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.06 (s, 3 H) 2.46 (s, 6 H) 2.64-2.78 (m, 2 H) 3.04 (sept, J=6.84 Hz,1 H) 3.38-3.49 (m, 2 H) 3.78-3.83 (m, 1 H) 3.85 (s, 3 H) 3.87-4.04 (m, 2 H)
4.08-4.18 (m, 1 H) 4.18-4.30 (m, 1 H) 4.87 (d, J=9.48 Hz, 1 H) 5.16-5.27 (m, 1 H) 5.28-5.44 (m, 2 H) 6.35 (s, 1 H) 6.40-6.57 (m, 2 H) 6.77 (s, 1 H) 7.01 (d, J=8.24 Hz, 2 H) 7.13 (s, 1 H) 7.32 (d, J=8.24 Hz, 2 H) 7.40 (s, 1 H)。 [0542] MS ESI/APCI Dual posi: 839[M+H]+。
[0543] MS ESI/APCI Dual nega: 873[M+C1]-。
[0544] 实施例15-2
[0545] [化68]
[0546]
[0547] 重复实施例4-2相同的步骤得到化合物(15-2)(62.1 mg, 75%)，为无色无定形物，是将步骤中的化合物(4-1A)和(4-1B)替换为化合物(15-1)。1
[0548] H NMR (600 MHz, 甲醇-d4) δ ppm 1.07 (d, J=6.76 Hz, 3 H) 1.09 (d, J=6.76 Hz, 3 H) 1.36 (s, 6 H) 1.44 (s, 6 H) 2.23 (s, 6 H) 2.41 (t, J=6.88 Hz, 2 H) 3.10 (sept, J=6.76 Hz, 1 H) 3.26-3.30 (m, 2 H) 3.35-3.45 (m, 2 H) 3.45-3.52 (m, 1 H) 3.54-3.60 (m, 1 H) 3.62-3.69 (m, 1 H) 3.79-3.89 (m, 4 H) 3.99 (s, 2 H) 4.65 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.39 (d, J=16.51 Hz, 1 H) 6.52 (d, J=16.51 Hz, 1 H) 6.88 (s, 1 H) 7.07 (d, J=8.25 Hz, 2 H) 7.23 (s, 1 H) 7.31 (d, J=8.25 Hz, 2 H)。+
[0549] MS ESI/APCI Dual posi: 670[M+H]。-
[0550] MS ESI/APCI Dual nega: 7O4[M+C1]。
[0551] C37H55N3O8·1.0H2O的分析计算值: C, 64.6; H, 8.36; N, 6.11。实测值: C,64.5; H, 8.31; N, 6.02。
[0552] 实施例16-1
[0553] [化69]
[0554]
[0555] 重复实施例1-1相同的步骤得到化合物(16-1)(90 mg, 55%)，为无色无定形物，是将步骤中的中间产物(E)替换为中间产物(G)，和N,N-二甲基乙二胺替换为哌嗪。
[0556] 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.06 (d, J=6.6 Hz, 3 H) 1.11 (d, J=6.6 Hz, 3 H) 1.35 (s, 6 H) 1.77 (s, 6 H) 2.00 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.06 (s,3 H) 2.25 (br. s.,2 H) 2.78-2.88 (m, 4 H) 2.96-3.12 (m, 1 H) 3.55-3.65 (m,
4 H) 3.78-3.88 (m, 1 H) 3.85 (s,3 H) 3.88-4.04 (m, 2 H) 4.09-4.18 (m, 1 H)
4.20-4.30 (m, 1 H) 4.88 (d, J=9.48 Hz, 1 H) 5.15-5.27 (m, 1 H) 5.28-5.44 (m, 2 H) 6.22-6.33 (m, 1 H) 6.41-6.55 (m, 1 H) 6.72-6.85 (m, 2 H) 6.96-7.06 (m, 2 H)
7.14 (s, 1 H) 7.23-7.32 (m, 2 H)。
[0557] MS ESI/APCI Dual posi: 836[M+H]+。
[0558] 实施例16-2
[0559] [化70]
[0560]
[0561] 重复实施例1-2相同的步骤得到化合物(16-2)(52 mg, 70%)，为无色无定形物，是将步骤中的化合物(1-1)替换为化合物(16-1)。
[0562] 1H NMR (600 MHz, 甲醇-d4) δ ppm 1.06 (d, J=6.80 Hz, 3 H) 1.07 (d, J=6.80 Hz, 3 H) 1.34 (s, 6 H) 1.42 (s, 6 H) 2.67 (br. s., 4 H) 3.04-3.12 (m,1 H) 3.27-3.30 (m, 2 H) 3.33-3.38 (m, 2 H) 3.43-3.49 (m, 1 H) 3.50-3.61 (m, 3 H) 3.61-3.66 (m, 1 H) 3.80 (s,3 H) 3.83 (d, J=I 1.92 Hz, 1 H) 3.92-4.00 (m, 2 H) 4.63 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.33-6.39 (m,1 H) 6.44-6.49 (m, 1 H) 6.86 (s, 1 H)
7.06 (d, J=8.25 Hz, 2 H) 7.21 (s, 1 H) 7.27 (d, J=8.25 Hz, 2 H)。 [0563] MS ESI/APCI Dual posi: 668[M+H]+, 690[M+Na]+。
[0564] MS ESI/APCI Dual nega: 666[M-H]-，7O2[M+C1]-。
[0565] 实施例17-1
[0566] [化71]
[0567]
[0568] 重复实施例1-1相同的步骤得到化合物(17-1)(187 mg, 95%)，为无色无定形物，是将步骤中的中间产物(E)替换为中间产物(G)，和N,N-二甲基乙二胺替换为1-甲基哌嗪。
[0569] 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.05 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.10 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.36 (s, 6 H) 1.59 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 2.00 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H)2.06 (s, 3 H) 2.26 (s, 3 H) 2.32-2.40 (m, 4 H) 2.96-3.12 (m, 1 H) 3.59-3.71 (m, 4 H) 3.79-3.84 (m, 1 H) 3.85 (s, 3 H) 3.90-4.05 (m, 2 H) 4.10-4.16 (m, 1 H)
4.21-4.28 (m, 1 H) 4.87 (d, J=9.64 Hz, 1 H) 5.16-5.27 (m, 1 H) 5.29-5.44 (m, 2 H) 6.28 (d, J=16.4 Hz, 1 H) 6.49 (d, J=16.4 Hz, 1 H) 6.77 (s, 1 H) 6.83 (s, 1 H) 7.01 (d, J=8.08 Hz, 2 H) 7.13 (s, 1 H) 7.25-7.32 (m, 2 H)。
[0570] MS ESI/APCI Dual posi: 850[M+H]+。
[0571] MS ESI/APCI Dual nega: 884[M+C1]-。
[0572] 实施例17-2
[0573] [化72]
[0574]
[0575] 重复实施例4-2相同的步骤得到化合物(17-2)(127 mg, 84%)，为无色无定形物，是将步骤中的化合物(4-1A)和(4-1B)替换为化合物(17-1)。
[0576] 1H NMR (600 MHz, 甲醇-d4) δ ppm 1.05 (d, J=6.65 Hz, 3 H) 1.07 (d, J=6.65 Hz, 3 H) 1.36 (s, 6 H) 1.45 (s, 6 H) 2.14 (s, 3 H) 2.23-2.40 (m, 4 H)3.06-3.16 (m,1 H) 3.34-3.42 (m, 2 H) 3.46-3.52 (m, 1 H) 3.51-3.73 (m, 6 H)
3.79-3.91 (m, 4 H) 3.98 (s,2 H) 4.65 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.38 (d, J=16.1 Hz, 1 H) 6.48 (d, J=16.1 Hz, 1 H) 6.88 (s, 1 H) 7.08 (d, J=8.25 Hz, 2 H) 7.23 (s, 1 H) 7.29 (d, J=8.25 Hz, 2 H)。
[0577] MS ESI/APCI Dual posi: 682[M+H]+, 704[M+Na]+。
[0578] MS ESI/APCI Dual nega: 716[M+C1]-。
[0579] C38H 3O8·1.6H2O的分析计算值: C, 64.2; H, 8.25; N, 5.91。实测值: C, 64.3; H, 8.08; N, 5.89。
[0580] 检测实施例1
[0581] (1)稳定地表达人SGLT1的CHO-Kl细胞的产生
[0582] 使用lipofectamine 2000 (Invitrogen)将表达人SGLTl蛋白的质粒转染至CHO-Kl细胞中。在500 μg/mL遗传霉素存在下培养细胞以选择抗药株，随后在以下显示的系统中用糖摄取能力为指示进行筛选以获得SGLTl-表达细胞。
[0583] (2)稳定地表达人SGLT2的CHO-Kl细胞的产生
[0584] 方法A (参见WO2007/136116):使用lipofectamine 2000 (Invitrogen)将修饰成具有LeuGluSerArgGlyProVal连在羧基末端的表达人SGLT2蛋白的质粒转染至CHO-Kl细胞中。在500 μg/mL匀霉素B存在下培养细胞以选择抗药株，随后在以下显示的系统中用糖摄取能力为指示进行筛选以获得SGLT2-表达细胞。应用这些稳定表达细胞计算出的结果参见表1中的方法A。
[0585] 方法B: 使用lipofectamine LTX(Invitrogen)将表达人SGLT2蛋白的质粒转染至CHO-Kl细胞中。在1000 μg/mL遗传霉素存在下培养细胞以选择抗药株，随后在以下显示的系统中用糖摄取能力为指示进行筛选以获得SGLT2-表达细胞。应用这些稳定表达细胞计算出的结果参见表1中的方法B。
[0586] (3)稳定表达细胞中的钠依赖性糖摄取的抑制试验
[0587] 以上制备的稳定表达细胞用于以下检测试验。
[0588] 将预处理缓冲液(140 mM氯化胆碱，2 mM KCl，1 mM CaCl2, 1 mM MgCl2, 10 mM HEPES/5 mM Tris, pH 7.4)以体积200 μL加入到稳定表达SGLTl细胞中，或对于方法A以体积2 mL，对于方法B以体积200 μL加入到稳定表达SGLT2细胞中，孵化20分钟。去14
除预处理缓冲液，并用含有检测化合物(1 mM甲基α-D-吡喃葡萄糖苷(包含[ C]甲基α-D-吡喃葡萄糖苷), 140 mM NaCl, 2 mM KCl, 1 mM CaCl2, 1 mM MgCl2, 10 mM HEPES/5 mM Tris, p H 7.4)的摄取缓冲液替换，对方法B中的SGLT1和SGLT2，体积为75 μL，对方法A中的SGLT2，体积为200 μL。摄取反应在37℃下进行30分钟(SGLTl)或者60分钟(SGLT2)。反应后，细胞用洗涤缓冲液(10 mM甲基α-D-吡喃葡萄糖苷, 140 mM 氯化胆碱, 2 mM KCl, 1 mM CaCl2, 1 mM MgCl2, 10 mM HEPES/5 mM Tris, pH 7.4)洗涤两次，对于方法B中的SGLTl和SGLT2，体积为200 μL，或对于方法A中的SGLT2，体积为2 mL，随后溶解于0.25 M NaOH溶液(75 μL对于方法B中的SGLTl和SGLT2，或400 μL对于方法A中的SGLT2)。加入液体闪烁剂(Perkin Elmer)并和每个样本充分混和，而后使用β-射线分析仪测量放射性。对照组中，摄取缓冲液不含有检测化合物。此外，制备另一个含有氯化胆碱取代NaCl的摄取缓冲液用作基线摄取。
[0589] 对于IC50值的测定，检测化合物制备了6个适当的浓度，这些浓度用于检测50%抑制的糖摄取（IC50值）值，是相对于对照组（100%）的糖摄取值计算的。所得的检测结果参见表1。
[0590] [表1]
[0591]
[0592] 表1表明本发明的化合物具有强的SGLT1抑制活性，并且还具有一些SGLT2抑制活性，虽然比较弱。
[0593] 检测实施例2:在链唑霉素诱导的糖尿病模型鼠的降血糖作用的确定试验 [0594] (1)糖尿病模型鼠的制备
[0595] 7周龄的SD/IGS鼠(雄性, Charles River Laboratories Japan Inc.)禁食大约16小时，然后在乙醚麻醉下经尾静脉注射50 mg/kg链唑霉素(STZ)以制备糖尿病模型鼠。相似地，另外一组7周龄SD/IGS鼠也在乙醚麻醉下经尾静脉注射1.25 mmol/L柠檬酸的生理盐水(1 mL/kg)溶液以制备正常的对照组鼠。注射STZ或1.25柠檬酸的生理盐水溶液后一周后，鼠进行口服葡萄糖耐量试验。
[0596] (2)口服葡萄糖耐量试验(OGTT)
[0597] 糖尿病模型鼠禁食大约16小时后，药物组每只经口给药(1 mg/kg)，溶解于0.5%羧甲基纤维素钠(CMC)水性溶液中，而对照组只口服0.5%水性CMC溶液。所用药物为化合物10, 11和33，在WO07/136116中披露，及本发明的化合物1-2, 5-2, 6-2, 13-2和15-2。给药后，快速口服葡萄糖溶液(2 g/kg)，在6个点上收集血液：给药前(0小时)和口服给药后0.25, 0.5, 1, 1.5和2小时。
[0598] 非麻醉下使用涂覆肝素的血样收集管从每只鼠的尾静脉收集血样，并离心分离血浆。应用葡萄糖CII-Test Wako (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.,日本)测量血浆葡萄糖浓度。为确定降血糖的程度，每个测定的葡萄糖水平要减去给药前的血葡萄糖水平，直至每个药物组口服给药一个小时后，所得结果通过梯形法进行分析以计算出葡萄糖曲线下面积的增量(ΔAUC)，该增量表达了相对于对照组的ΔAUC的减少。
[0599] 所得结果参见表2和表3。
[0600] 检测实施例3
[0601] (1)口服给药后一周后WO07/136116中公开的化合物在肾脏中浓度的变化[0602] 7周龄的SD/IGS鼠(雄性，非禁食，Charles River Laboratories Japan Inc.)口服给药化合物10或33 (1 mg/kg)或化合物11 (0.3 mg/kg)制备成的0.5%水性CMC溶液。给药后的24、72和168小时，鼠经乙醚麻醉后经下腔静脉放血，处死后切除肾脏。用生理盐水洗净组织表面，称重，在冰冷却下用4倍体积的纯水匀化。每份匀浆中加入含有内标物的乙腈/甲醇溶液以去除蛋白，上清液随后用LC-MS/MS (Applied Biosystems API3000)处理。阳离子型电喷射离子化作用产生的药物衍生离子通过选择性反应监测仪进行检测。所得提取离子层析谱的峰面积通过加以内标法分析以计算匀浆液中的药物浓度。
[0603] 用于化合物10和33的内标物是(1S)-1,5-无水-l-[5-(4-乙氧基苄基)-2-甲氧基-4-甲苯基]-l-硫代-D-山梨醇，乙基-D5,而用于化合物11的内标物是化合物11(三羟基甲基-D6;-C(CD2OH)3)。
[0604] 所得实验结果参见表2。
[0605] (2)重复口服给药三天本发明化合物的肾脏浓度
[0606] 7周龄的SD/IGS鼠(雄性，非禁食，Charles River Laboratories Japan Inc.)连续三天每天一次口服给药本发明化合物1-2, 5-2, 6-2, 13-2 或15-2 (3 mg/kg)制备成的0.5%水性CMC溶液。最后给药后的48小时，鼠经异氟烷麻醉后经下腔静脉放血，处死后切除肾脏。用生理盐水洗净组织表面，称重，在冰冷却下用4倍体积的纯水匀化。每份匀浆中药物浓度的测定通过LC-MS/MS采用和检测实施例3（1）中相同的方法完成，使用化合物11为内标物。
[0607] 所得实验结果参见表3。
[0608] 表2
[0609] 现有技术中的化合物的糖耐量实验结果和肾脏浓度
[0610]
[0611] *表示平均值± S.D.，化合物11是以0.3 mg/kg口服给药。
[0612] $表示在链唑霉素(STZ)-诱导的糖尿病鼠和对照组比较的葡萄糖AUCo-1h的抑制作用，口服剂量为1 mg/kg。
[0613] #OGTT使用Sprague-Dawley鼠。
[0614] WO2007/136116中披露的化合物10、11和33如下所示。
[0615] [化73]
[0616]
[0617] 表3
[0618] 本发明的化合物的糖耐量实验结果和肾脏浓度
[0619]
[0620] *表示在STZ-诱导的糖尿病鼠和对照组比较的葡萄糖AUCo-1h的抑制作用，口服剂量为1 mg/kg。#
[0621] BLQ意思是低于定量值(5ng/g)。
[0622] WO2007/136116中披露的化合物显示出在口服给药1 mg/kg的糖耐量检测中强的降血糖作用。但是，在1 mg/kg口服给药后的 1、3和7天后，它们在肾脏中的浓度没有实质的减少，并且这些化合物在给药7天后有趋势在肾脏中蓄积而不被排泄(表2)。 [0623] 另一方面，本发明的化合物发现具有强的降血糖作用，和上面所述的现有技术的化合物相当。此外，本发明的化合物显示出在连续以3 mg/kg剂量给药三天的情况下，令人意外地在随后的两天中在肾脏中没有蓄积的特性(表3)。
[0624] 这个差异的一个可能的原因是本发明化合物几乎不会在小肠中被吸收，而且被吸收的化合物也会被排泄掉而在肾脏中没有残留。
[0625] 因此，本发明的化合物在体内没有蓄积趋势，也不可能由于连续给药而引起毒副作用，并因此在药物制备方面显现出特别优越的性能。
[0626] 工业实用性
[0627] 本发明能够提供改善餐后高血糖的药剂，其具有强的SGLT1抑制活性，并且在体内没有蓄积的趋势。本发明还在人类健康改善方面有所贡献，并且通过有效抑制SGLT1活