袪火消炎组合物及其制备方法和药用制剂

摘要

本发明涉及一种保健食品和功能食品，其目的是为了提供一种袪火消炎组合物及其制备和药用制剂。本发明包括按重量份计的以下组分：淡竹叶提取物：30-50份；杭白菊提取物：20-40份；其中：所述淡竹叶提取物中含10.0-15.0％质量百分数的总黄酮；所述杭白菊提取物中含0.3-1.0％质量百分数的绿原酸。本发明还包括袪火消炎组合物的制备方法，包含以下步骤：将淡竹叶提取物和杭白菊提取物分别过筛，得筛下物，按各组分比例称取筛下物，混合均匀，即得。

权利要求

1.一种袪火消炎组合物，其特征在于：由按重量份计的以下组分组成：

其中：所述淡竹叶提取物中含10.0-15.0%质量百分数的总黄酮；所述杭白菊提取物中含0.3-1.0%质量百分数的绿原酸；所述百合提取物是通过以下步骤获得的：（1）称取百合，在压力为0.1～0.15MPa，温度65～75℃的条件下，用8倍量水回流提取3次，每次提取3小时，每次所得提取液80目过滤，得到提取滤液，合并3次提取滤液；（2）将提取滤液浓缩干燥，得干粉；粉碎过80目筛即得百合提取物。

2.根据权利要求1所述的袪火消炎组合物，其特征在于：由按重量份计的以下组分组成：

3.一种权利要求1或2所述的袪火消炎组合物的制备方法，包含以下步骤：将淡竹叶提取物、杭白菊提取物、沙棘汁粉、百合提取物、雪梨汁粉、低聚木糖粉分别过40-80目筛，得筛下物，按权利要求1或2中各组分比例称取筛下物，混合均匀，即得。

4.一种药用制剂，其特征在于：包含如权利要求1或2所述的袪火消炎组合物，还包含药用辅料或载体，其中：袪火消炎组合物占药用制剂的20-40%质量百分数，余量为药用辅料或载体。

5.根据权利要求4所述的药用制剂，其特征在于：所述药用辅料或载体为麦芽糊精、木糖醇、赤藓糖醇、异麦芽酮糖醇、微晶纤维素、淀粉、蔗糖和/或硬脂酸镁其中一种或几种的混合物。

6.根据权利要求4或5所述的药用制剂，其中所述药用制剂的剂型包括：颗粒剂、粉剂、胶囊剂、片剂或丸剂。

说明书

袪火消炎组合物及其制备方法和药用制剂

技术领域

[0001] 本发明涉及一种保健食品和功能食品。

背景技术

[0002] 传统医学把大便干、尿黄、鼻腔、口腔黏膜、结膜等红、肿、胀、痛称为“上火”，现代医学则把红、肿、热、胀、痛的特征称为“炎症”。炎症是指具有血管系统的动物针对损伤因子所发生的复杂防御反应，其局部表现为红、肿、热、胀、痛，是由于局部血管扩张血流加快、充血，液体或白细胞成分等渗出造成的。炎症介质是由细胞合成释放或体液中血浆蛋白酶产生，是各种炎性细胞之间重要的信息传递者，在炎症的发生、发展过程中起介导作用，是炎症反应的主要分子机制。一氧化氮(NO)和TNF-α、活性氧自由基等都是较重要的促炎症因子，参与炎症和免疫反应等过程，与炎症程度呈正相关，临床上可作为判断疾病严重程度和疗效的指标。

[0003] 淡竹叶属清热药，味甘、辛、淡，寒。归心、胃、小肠经。具有清热泻火、除烦和利尿的作用，用于热病烦渴，心火上炎、口舌生疮和心热下移小肠，小便短赤、热淋涩痛等症。 [0004] 淡竹叶为禾本科植物淡竹(Phyllostachys glauca)的叶，具有清热泻火作用，善于清心泻火除烦，能清胃生津止渴。

[0005] 杭白菊有极高的药用价值，《本草纲目》中记述：菊能利五脉，调四肢，治头目风热，脑骨疼痛，养目血，去翳膜，主治风臃，能令头发不白等。常饮菊花茶，春暖去湿、夏暑解渴、秋日解燥、冬季清火，更能美容养颜、补血提神，增强生命活力，使人延缓衰老，更能使老年人延年益寿。民间历来有洗菊花浴、睡菊花枕的习惯。用菊花汤沐浴，能去痱爽身，嫩艳肌肤。给小孩睡菊枕，有防热疖，解疮毒之功。

[0006] 现代医学研究证明，杭白菊内含菊甙、氨基酸、黄酮类及多种维生素和微量元素，从而具有止痢、消炎、明目、降压、降脂、强身的作用，可用于治疗湿热黄疸、胃痛食少、水肿尿少等症。杭白菊提取物中含有菊甙、氨基酸、黄酮类及多种维生素和微量元素，不但具有对中枢神经有镇静作用、解热、增强毛细血管抵抗力、扩张冠状动脉等作用，还具有公认的袪火消炎作用。

[0007] 总黄酮是指黄酮类化合物，是一大类天然产物，广泛存在于植物界，是许多中草药的有效成分。绿原酸等多酚类物质被称为“第七类营养素”，被广泛用于保健行业。 发明内容

[0008] 本发明要解决的技术问题是提供一种袪火消炎组合物及其制备方法和药用制剂。 [0009] 一种袪火消炎组合物，包含按重量份计的以下组分：

[0010] 淡竹叶提取物：30-50份；

[0011] 杭白菊提取物：20-40份；

[0012] 其中：所述淡竹叶提取物中含10.0-15.0％(质量百分数)的总黄酮；所述杭白菊提取物中含0.3-1.0％(质量百分数)的绿原酸。

[0013] 本发明袪火消炎组合物，包含按重量份计的以下组分：

[0014] 淡竹叶提取物：40份；

[0015] 杭白菊提取物：30份。

[0016] 本发明还涉及上述袪火消炎组合物的制备方法，包含以下步骤：将淡竹叶提取物和杭白菊提取物分别过60目筛，得筛下物，按上述比例称取各组分筛下物，混合均匀，即得。

[0017] 本发明还涉及另一种袪火消炎组合物，包含按重量份计的以下组分： [0018] 淡竹叶提取物：30-50份；

[0019] 杭白菊提取物：20-40份；

[0020] 沙棘汁粉：10-20份；

[0021] 雪梨汁粉：6-12份；

[0022] 百合提取物：4-8份；

[0023] 低聚木糖粉：20-30份。

[0024] 其中：所述淡竹叶提取物中含10.0-15.0％(质量百分数)的总黄酮；所述杭白菊提取物中含0.3-1.0％(质量百分数)的绿原酸；所述百合提取物是通过以下步骤获得的：(1)称取百合，用8倍量水回流提取，过滤，得提取滤液；(2)将提取滤液浓缩干燥，得干粉，粉碎过筛即得百合提取物；所述沙棘汁粉是通过对沙棘进行压榨获得沙棘汁后，进行喷雾干燥所得；所述雪梨汁粉是通过对雪梨进行压榨获得雪梨汁后，进行喷雾干燥所得。 [0025] 本发明袪火消炎组合物，包含按重量份计的以下组分：

[0026] 淡竹叶提取物：40份；

[0027] 杭白菊提取物：30份；

[0028] 沙棘汁粉：15份；

[0029] 雪梨汁粉：9份；

[0030] 百合提取物：6份；

[0031] 低聚木糖粉：25份。

[0032] 本发明袪火消炎组合物，其中所述百合提取物是通过以下步骤获得的：(1)称取百合，在压力为0.1～0.15MPa，温度65～75℃的条件下，用8倍量水回流提取3次，每次提取3小时，提取液80目过滤，得提取滤液，合并三次所得的提取滤液；(2)将滤液浓缩干燥，得干粉；粉碎过80目筛即得百合提取物。

[0033] 本发明还涉及上述袪火消炎组合物的制备方法，包含以下步骤：将淡竹叶提取物、杭白菊提取物、沙棘汁粉、百合提取物、雪梨汁粉、低聚木糖粉分别过60目筛，得筛下物，按上述比例称取各组分筛下物，混合均匀，即得。

[0034] 一种药用制剂，包含上述袪火消炎组合物，还包含药用辅料或载体，其中：袪火消炎组合物占药用制剂的20-40％(质量百分数)，余量为药用辅料或载体。

[0035] 本发明药用制剂，其中所述药用辅料或载体包括：麦芽糊精、木糖醇、赤藓糖醇、异麦芽酮糖醇、微晶纤维素、淀粉、蔗糖和/或硬脂酸镁。

[0036] 本发明药用制剂，其中所述药用制剂的剂型包括：颗粒剂、粉剂、胶囊剂、片剂或丸剂。

[0037] 本发明袪火消炎组合物对LPS诱导RAW 264.7细胞释放NO有抑制作用，较高的抑制率可达40％以上；对LPS诱导RAW 264.7细胞释放TNF-α的也有较好的抑制效果，较高的抑制率可达60％以上；对DPPH·自由基的清除活性较好，较高的抑制率可达30％以上，因此，本发明的药用组合物及其制剂具有明确的袪火消炎的功效。

具体实施方式

[0038] 以下实施例所用的淡竹叶提取物中含12.5％(质量百分数)的总黄酮；所述杭白菊提取物中含0.50％(质量百分数)的绿原酸，淡竹叶提取物和杭白菊提取物均为市购产品。百合提取物是按以下步骤提取的：称取百合，在压力为0.1～0.15MPa，温度65～75℃的条件下，用8倍量水回流提取3次，每次提取3小时，提取液80目过滤，合并滤液；(2)将滤液浓缩干燥，得干粉；粉碎过80目筛即得百合提取物。所述沙棘汁粉是通过对沙棘进行压榨获得沙棘 汁后，进行喷雾干燥所得；所述雪梨汁粉是通过对雪梨进行压榨获得雪梨汁后，进行喷雾干燥所得。

[0039] 实施例1

[0040] 称取淡竹叶提取物40克、杭白菊提取物30克、沙棘汁粉15克、雪梨汁粉9克、百合提取物6克、低聚木糖粉25克，各原料过60目筛，取筛下物混合均匀，得粉剂混合物125克，记为组方1#。

[0041] 实施例2

[0042] 称取淡竹叶提取物30克、杭白菊提取物40克、沙棘汁粉10克、雪梨汁粉12克、百合提取物8克、低聚木糖粉20克，各原料过60目筛，取筛下物混合均匀，得粉剂混合物120克，记为组方2#。

[0043] 实施例3

[0044] 称取淡竹叶提取物50克、杭白菊提取物20克、沙棘汁粉20克、雪梨汁粉6克、百合提取物4克、低聚木糖粉30克，各原料过60目筛，取筛下物混合均匀，得粉剂混合物130克，记为组方3#。

[0045] 实施例4

[0046] 称取杭白菊提取物100克，原料过60目筛，取筛下物得单方杭白菊提取物100克，记为组方4#。

[0047] 实施例5

[0048] 称取淡竹叶提取物100克，原料过60目筛，取筛下物得单方淡竹叶提取物100克，记为组方5#。

[0049] 实施例6

[0050] 称取淡竹叶提取物40克、杭白菊提取物30克，各原料过60目筛，取筛下物混合均匀，得粉剂混合物70克，记为组方6#。

[0051] 实施例7

[0052] 称取淡竹叶提取物30克、杭白菊提取物40克，各原料过60目筛，取筛下物混合均匀，得粉剂混合物70克，记为组方7#。

[0053] 实施例8

[0054] 称取淡竹叶提取物50克、杭白菊提取物20克，各原料过60目筛，取筛下物混合均匀，得粉剂混合物70克，记为组方8#。

[0055] 实施例9

[0056] 称取淡竹叶提取物40克、杭白菊提取物30克、沙棘汁粉15克、雪梨汁粉9克、百合提取物6克、低聚木糖粉25克、麦芽糊精100克、异麦芽酮糖醇175克，以上各组分过60目筛，取筛下物混合均匀。添加20g纯化水作为粘合剂，湿法造粒，过20目筛，干燥至颗粒水分≤5％，即得颗粒型混合物400g。

[0057] 实施例10

[0058] 称取淡竹叶提取物40克、杭白菊提取物30克、沙棘汁粉15克、雪梨汁粉9克、百合提取物6克、低聚木糖粉25克、麦芽糊精174克，以上各组分过60目筛。另称取硬脂酸镁1克，先与上述称取的麦芽糊精混合均匀，得混合物1。再将混合物1与上述称取的淡竹叶提取物、杭白菊提取物、沙棘汁粉、百合提取物、雪梨汁粉、低聚木糖粉混合均匀，装硬胶囊，得规格为0.25克/粒的胶囊300克。

[0059] 实施例11

[0060] 称取淡竹叶提取物40克、杭白菊提取物30克、沙棘汁粉15克、雪梨汁粉9克、百合提取物6克、低聚木糖粉25克、微晶纤维素199克，以上各组分过60目筛，取筛下物混合均匀。添加4g食用酒精作为粘合剂，制粒，过20目筛，干燥得干颗粒，将此干颗粒与1克硬脂酸镁混合均匀，压片，得片重为0.50克的素片325克。

[0061] 实施例12

[0062] 一、总黄酮含量测定

[0063] 1方法提要

[0064] 黄酮分子中的酚羟基，如3-羟基与4-羰基或5-羟基与4-羰基或邻二羟基可与铝盐进行络合反应，在碱性条件下生成红色的络合物。样品用30％(体积百分数)的乙醇水溶液溶解，稀释至一定溶度后采用硝酸铝～亚硝酸钠比色法测定；用芦丁为对照进行定量，以芦丁计总黄酮含量，比色测定在芦丁浓度0.0075～0.060mg/mL范围内，其浓度与吸光度符合比尔定律。

[0065] 2试剂和材料

[0066] (a)试剂：亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、乙醇、甲醇，均为分析纯。 [0067] (b)芦丁(Rutin)标准品：纯度不低于95％。

[0068] (c)标准储备液：准确称取经105℃干燥至恒重的芦丁标准品15mg(精确至0.0001g)，用甲醇溶解并定容至100mL，混匀，置冰箱中保存。此溶液1mL含芦丁150μg。 [0069] 3仪器

[0070] 分光光度计；万分之一电子天平；移液枪或移液管、容量瓶等。

[0071] 4测定步骤

[0072] 4.1样品处理

[0073] 精密称取竹叶提取物样品100mg(精确至0.0001g)，用30％(体积百分数)乙醇水溶液溶解并定容至100mL，用定性滤纸过滤，即得试样溶液。

[0074] 4.2标准曲线的绘制

[0075] 准确吸取芦丁标准溶液0、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00mL，相当于芦丁0、75、150、300、450、600μg移入25mL刻度比色管中，加入30％(体积百分数)乙醇溶液至5mL，各加
0.05g/L亚硝酸钠溶液0.3mL，振摇后放置5min，加入0.1g/L硝酸铝溶液0.3mL摇匀后放置6min，加1.0mol/L氢氧化钠溶液4mL，用30％(体积百分数)乙醇定容至10mL，摇匀后放置10min；以零管为空白，用1cm的比色杯，在510nm的波长处测定吸光度，以吸收度为纵座标、芦丁含量为横座标绘制标准曲线或求取线性回归方程。

[0076] 4.3样品测定

[0077] 准确吸取试样溶液1mL，按上述标准曲线制作(4.2)中的操作步骤，于510nm处进行吸光度的测定。根据4，2所得标准曲线，求出相当于试样吸光度的芦丁浓度，根据吸取试样溶液的体积，得到吸取的试样溶液中芦丁含量，计为吸取的试样溶液中总黄酮含量。 [0078] 5结果计算

[0079] 按下式求出竹叶提取物样品中总黄酮质量百分数：

[0080]

[0081] 式中：

[0082] X1——为竹叶提取物样品中总黄酮质量百分数，单位为％；

[0083] m1——样品测定时，吸取的试样溶液中总黄酮含量(μg)；

[0084] m2——配制试样溶液时，称取的竹叶提取物质量(g)；

[0085] V1——样品测定时，吸取的试样溶液的体积(mL)；

[0086] V2——试样溶液的总体积(mL)。

[0087] 6允许差

[0088] 在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对值差值，应不超过算术平均值的5.0％，取两次平行测定的算术平均值为测定结果。

[0089] 二、绿原酸含量测定

[0090] 按照GB-T 22250《保健食品中绿原酸的测定》进行，按其中5.1.1的方法处理试样。

[0091] 实施例13

[0092] 取实施例1-8的组合物适量，以检测其对LPS(脂多糖lipopolysaccharide的缩写)诱导小鼠单核巨噬细胞(RAW 264.7细胞)释放一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的抑制效果，以及抑制DPPH·自由基(1，1-二苯基-2-三硝基苯肼)的效果为评价指标，评价各组合物样品。

[0093] 1、组合物对LPS诱导RAW 264.7细胞释放一氧化氮(NO)的抑制活性实验 [0094] 1.1样品及仪器：

[0095] 脂多糖、MTT购自Sigma公司；小鼠单核巨噬细胞RAW264.7购自中科院细胞库(ATCC)；RPMI 1640培养液、胎牛血清购自Hyclone公司；青霉素-链霉素双抗溶液为烟台赛尔斯生物技术有限公司产品；全自动酶标仪(美国，Biotek)；恒温CO2培养箱(美国，Thermo公司)。将上述组方1#、2#、3#、4#、5#、6#、7#、8#样品以DMSO溶解并稀释至表中的浓度，-20℃保存备用。

[0096] 1.2试验方法

[0097] 1.2.1小鼠单核巨噬细胞RAW 264.7培养：

[0098] 小鼠单核巨噬细胞RAW 264.7培养于含10％(体积百分数)热灭活(56℃灭活30min)胎牛血清(FBS)、100U/mL青霉素钠、100μg/mL链霉素的RPMI 1640培养液中，37℃、CO2浓度为5％(体积百分数)的恒温培养箱中孵育生长。

[0099] 1.2.2NO释放量的测定：

[0100] 由于NO极不稳定，在细胞培养上清液内很快代谢成亚硝酸基(NO2-)，采用Griess-法测定样品中NO2 的浓度作为衡量NO水平的指标。Griess试剂A：0.1％(质量百分数)的N-萘乙二胺盐酸盐水溶液；Griess试剂B：对氨基苯磺酰胺溶于5％(质量百分数)的硫酸水溶液中，使对氨基苯磺酰胺的质量百分数为1％；使用前将等体积的Griess试剂A和B混
5
合，得Griess试剂。用RPMI 1640培养液将小鼠巨噬细胞RAW 264.7稀释成5×10cells/mL的细胞悬浮液，接种于96孔细胞培养板中，每孔加入200μL细胞悬浮液。在37℃、CO2浓度为5％(体积百分数)的恒温培养箱中培养1h后，分别设置测试组、LPS组、空白对照组；设置测试组：每孔再加入LPS(终浓度1μg/mL)和表1中列出的不同浓度的测试组合物溶液0.4μL；设置LPS组：每孔再加入LPS(终浓度1μg/mL)，不加入测试组合物溶液；还设置空白对照组：每孔再加入DMSO，使其每个孔中的液体体积与LPS组和测试组的液体体积相等；每个样品4个平行孔。在37℃、CO2浓度为5％(体积百分数)的恒温培养箱中培养24h后吸取 培养液上清100μL至酶标板中，加入等体积的Griess试剂，25℃反应10min后测定540nm处的吸光值。用浓度分别为1、5、10、50μmol/L的NaNO2绘制标准曲线，根据-
NaNO2标准曲线计算细胞培养上清液中NO2 的浓度以及对NO释放的抑制率，抑制率计算公式为：

[0101]

[0102] 其中：[NO2-]LPS组为LPS组中测得NO2-浓度，[NO2-]空白对照组为空白对照组中测得- - -NO2 浓度，[NO2]测试组为测试组中测得NO2 浓度。

[0103] 1.3试验结果

[0104] 供试样品对LPS诱导RAW 264.7细胞释放NO有抑制作用，当样品浓度为100μg/mL时，1#和3#的抑制率大于40％，2#的抑制率大于30％，6#、7#、8#的抑制率大于25％，具体见表1。

[0105] 表1不同样品浓度对LPS诱导RAW 264.7细胞释放NO的抑制活性结果

[0106]

[0107] 注：将测试组的NO水平与LPS组比较，用x2检验，＊表示p＜0.05，差异显著，**表示p＜0.01，差异极显著；其中：空白对照组NO水平：0.47±021μmol/L，LPS组NO水平：12.39±1.06μmol/L。

[0108] 一氧化氮(NO)是较重要的促炎症因子，参与炎症和免疫反应等过程，与炎症程度呈正相关，临床上可作为判断疾病严重程度和疗效的指标。

[0109] 2、组合物对LPS诱导RAW 264.7细胞释放TNF-α的抑制活性实验

[0110] 2.1样品及仪器：

[0111] 脂多糖(LPS)购自Sigma公司；小鼠单核巨噬细胞RAW264.7购自中科院细胞库(ATCC)；RPMI 1640培养液、胎牛血清购自Hyclone公司；青霉素-链霉素双抗溶液、小鼠TNF-αELISA试剂盒为烟台赛尔斯生物技术有限公司产品；全自动酶标仪(美国，Biotek)；恒温CO2培养箱(美国，Thermo公司)。

[0112] 2.2试验方法

[0113] 2.2.1小鼠单核巨噬细胞RAW 264.7培养：

[0114] 小鼠单核巨噬细胞RAW 264.7培养于含10％(体积百分数)热灭活(56℃灭活30min)胎牛血清(FBS)、100U/mL青霉素钠、100μg/mL链霉素的RPMI 1640培养液中，37℃、CO2浓度为5％(体积百分数)的恒温培养箱中孵育生长。

[0115] 22.2TNF-α释放量的测定：

[0116] 用RPMI 1640培养液将小鼠巨噬细胞RAW 264.7稀释成5×105cells/mL的细胞悬浮液，接种于96孔细胞培养板中，每孔加入200μL细胞悬浮液。在37℃、CO2浓度为5％(体积百分数)的恒温培养箱中培养1h后，分别设置测试组、LPS组、空白对照组；设置测试组：每孔再加入LPS(终浓度1μg/mL)和表2列出的不同浓度的测试组合物溶液0.4μL；设置LPS组：每孔再加入LPS(终浓度1μg/mL)，不加入测试组合物溶液；还设置空白对照组：每孔再加入DMSO，使其每个孔中的液体体积与LPS组和测试组的液体体积相等；每个样品设3个平行孔。在37℃、CO2浓度为5％(体积百分数)的恒温培养箱中培养6h后吸取培养液上清，按照ELISA试剂盒说明书方法进行标准曲线绘制和样品测定。

[0117]

[0118] 其中：[TNF-α]LPS组为LPS组中测得NO2-浓度，[TNF-α]空白对照组为空白对照组中测- -得NO2 浓度，[TNF-α]测试组为测试组中测得NO2 浓度。

[0119] 2.3试验结果

[0120] 供试样品对LPS诱导RAW 264.7细胞释放TNF-α有抑制作用，当样品浓度为100μg/mL时，1#和2#的抑制率大于60％，6#和7#的抑制率大于50％，3#的抑制率大于
30％，具体见表2。

[0121] 表2不同样品浓度对LPS诱导RAW 264.7细胞释放TNF-α的抑制活性结果 [0122]

[0123] 注：将测试组的TNF-α水平与LPS组比较，用x2检验，＊表示p＜0.05，差异显**著，表示p＜0.01，差异极显著；其中：空白对照组TNF-α水平7.23±4.35pg/mL，LPS组TNF-α水平4.94±0.61ng/mL。

[0124] TNF-α是较重要的促炎症因子，参与炎症和免疫反应等过程，与炎症程度呈正相关，临床上可作为判断疾病严重程度和疗效的指标。

[0125] 3、对DPPH·自由基的清除活性实验

[0126] 3.1试验原理

[0127] DPPH·是一种稳定的有机自由基，其溶液具有特征的紫红色团吸收峰，当存在自由基清除剂时，由于与其单电子配对而使其吸收逐渐消失，其褪色程度与其所接受的电子数成定量关系，因而可用分光法进行定量分析，以分光光度法测定加入不同浓度的抗氧化剂或待测样品后的吸光度的分析法是一种筛选自由基清除剂的简便方法，在国外有着广泛的应用。

[0128] 3.2试验方法

[0129] 用无水乙醇配置不同浓度的DPPH·溶液，利用DPPH·溶液的特征紫红色团517nm-4的吸收峰，测定DPPH·的标准曲线。用无水乙醇配制浓度为2×10 mol/L的DPPH·溶液。
利用DPPH·溶液的特征紫红色团517nm的吸收峰，用酶标仪测定加入供试样品后，A517吸收的下降表示其对有机自由基的清除能力。于96孔酶标板中，设置测试组和空白对照组；设置测试组：每孔中加入190μL DPPH·溶液，10μL如表3所列浓度的测试组合物溶液(DMSO溶解)，反应总体积200μL；设置空白对照组：每孔中加入190μL DPPH·溶液，10μL供DMSO；每个样品设置3个平行孔，混合均匀后避光反应30min，测定517nm波长下吸光值。按照下列公式进行计算抗氧化物质的抑制率。

[0130]

[0131] 其中：[DPPH·]t＝0表示空白对照组中DPPH·自由基的起始浓度；[DPPH·]t表示测试组避光反应30min后测定的DPPH·自由基浓度。

[0132] 3.3试验结果

[0133] 供试样品具有清除DPPH·自由基的作用，当样品浓度为5mg/mL时，1#的抑制率大于 30％，2#、3#和6#的抑制率大于20％，具体见表3。

[0134] 表3不同样品浓度对DPPH·自由基的清除活性结果

[0135]