使用薯蓣皂素来改善与停经期症候群有关联的认知缺陷

摘要

本发明揭示薯蓣皂素可被用来改善与停经期症候群有关联的认知缺陷(诸如学习能力的下降)。

权利要求

1.一种薯蓣皂素用于制备一种用来改善具有心理症状的停经期或停经后期女性的学习能力的医药品或食品产品的用途。

2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述停经期或停经后期女性具有焦虑症状。

3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述薯蓣皂素的有效量是落在0.014g/天至3.5g/天的范围内。

4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述医药品是一种供口服投药的剂型。

5.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述医药品是一种供非经肠道投药的剂型。

说明书

使用薯蓣皂素来改善与停经期症候群有关联的认知缺陷

技术领域

[0001] 本发明是有关于使用薯蓣皂素来改善与停经期症候群(menopausal syndrome)有关联的认知缺陷(cognitive deficit)(诸如学习能力的下降)。

背景技术

[0002] 停经期(menopause)与女性体内循环的性激素(circulating sexual hormones)的快速减少有关联，并且意指女性的卵巢功能(ovarian function)逐渐衰退，最终导致月经终止(cessation of menstruation)的过渡期，而停经后期(postmenopause)则意指女性的卵巢功能在完全丧失之后的时期。停经期或停经后期的女性通常会出现停经期症候群(menopausal syndrome)，而停经期症候群的症状主要可区分成下列3大类：(1)生理症状(physiological symptom)，诸如热潮红(hot flushes)、阴道干燥(vaginal dryness)、疲劳(fatigue)、头痛(headaches)、体重增加(weight gain)、皮肤老化(skin aging)以及骨质疏松症(osteoporosis)；(2)心理症状(psychological symptom)，诸如焦虑(anxiety)以及忧郁(depression)；以及(3)认知缺陷(cognitiVe deficit)，诸如精神错乱(mental confusion)、记忆能力(memory ability)下降、学习能力(learning ability)下降、辨识能力(recognition ability)下降以及无法应对(inability to cope)。

[0003] 目前在停经期症候群的治疗上大多是使用激素替代疗法(hormone replacement treatment，HRT)，借由投药含有一或多种性激素的医药品给停经期或停经后期的女性来补充她们体内不足的性激素。然而，性激素的长期投药或过量使用可能会导致乳癌。相较于性激素，植物雌激素(phytoestrogens)[诸如异黄酮(isoflavone)]更为安全并且具有相似于人类雌激素(human estrogen)的效用，因而是一供用于HRT的更佳选择。

[0004] 山药(dioscorea)是一种常见的食物，它因为富含植物类固醇(phytosteroids)而长期被使用做为中草药，用以改善胃肠(gastrointestinal)、感觉(sensory)以及与性有关的功能(sexual-related functions)，同时也可改善停经后期的女性(postmenopausal women)的热潮红以及频尿(frequent urination)。另外，山药也被证实具有抗骨质疏松(anti-osteoporotic)、抗糖尿病(anti-diabetic)以及抗高胆固醇血症(anti-hypercholesterolemia)的活性。

[0005] 在Y.J.Ho et al.(2007)，Annals of General Psychiatry，6：21-28中，Y.J.Ho等人主要是探讨山药对于卵巢切除(OVX)的大鼠[ovariectomized(OVX)rats]的情绪行为(emotional behavior)以及脑中的IL-2位准的影响。实验结果显示，借由山药治疗可以回复OVX-诱发的焦虑(OVX-induced anxiety)以及在免疫神经功能(neuroimmunological function)上的变化。

[0006] 薯蓣皂素(diosgenin)是山药中主要的类固醇皂素(steroidal sapogenin)，它在化学结构上与性激素相似，因此已被广泛地使用做为类固醇激素(steroidal hormones)[诸如助孕酮(progesterone)、雌激素(estrogen)、罩固酮(testosterone)以及可体松(cortisone)]的前驱物(precursor)，它可以借由活体外化学修饰(in vitro chemical modification)而被制造成类固醇激素。

[0007] 近年来，有关于利用薯蓣皂素来治疗停经期症候群开始受到关注。例如，在K.Higdon et al.(2001)，Biomed Sci Instrum.，37：281-286中，K.Higdon等人在卵巢切除(OVX)的大鼠中诱发骨质疏松症，继而在骨质疏松症的临床征兆(clinical signs)出现之后以薯蓣皂素(diosgenin，DG)、去氢表雄脂酮(dehydroepiandrosterone，DHEA)或雌激素(estrogen，E)的持续递送(sustained delivery)来进行治疗。实验结果显示，在OVX之后的骨质流失(bone loss)可借由补充以持续位准(sustained levels)的DG、DHEA以及E而被显著地降低，并且不会危害其它的身体器官。

[0008] 在Y.Tada et al.(2009)，Steroids，74：504-511中，Y.Tada等人研究薯蓣皂素在对抗停经期之时的皮肤老化(skin aging)上的安全性以及效力(efficacy)。实验结果显示：薯蓣皂素的投药会回复在老化的皮肤中的角质细胞增生(keratinocyte proliferation)，因而可以改善在卵巢切除的小鼠(一种停经期的模型)中的表皮厚度(epidermal thickness)，但是不会改变脂肪累积的程度(degree of fat accumulation)。此外，薯蓣皂素也不会加速乳癌负担的小鼠(breast cancer-burdened mice)的肿瘤生长。
根据这些发现，薯蓣皂素被预期具有可用于缓解一与停经期症候群有关联的症状的潜力。

[0009] 经研究，申请人意外地发现：薯蓣皂素具有改善与停经期症候群有关联的认知缺陷(诸如学习能力的下降)的效用。

发明内容

[0010] 于是，在第一个方面，本发明提供一种用于改善一具有心理症状的停经期或停经后期女性的学习能力的组合物，其包含有一有效量的薯蓣皂素。

[0011] 在第二个方面，本发明提供一种用于改善一具有心理症状的停经期或停经后期女性的学习能力的方法，其包括对该停经期或停经后期女性投予(administering)一有效量的薯蓣皂素。

附图说明

[0012] 下面结合附图及实施例来对本发明进行详细说明，所以本发明在上述以及其它目的与特征，可借由参照下文的描述、随文检附的权利要求书和伴随的图式而变得更为明显，附图中：

[0013] 图1是一高架十字迷宫的立体图。

具体实施方式

[0014] 如本文中所用的，术语“停经期(menopause)”意指处于卵巢功能(ovarian function)开始衰退与月经终止(cessation of menstruation)之间的时期。术语“停经后期(postmenopause)”意指在女性的卵巢功能已完全丧失之后的时期。

[0015] 如本文中所用的，术语“停经期症候群(menopausal syndrome)”意指发生于停经期或停经后期的女性个体中的症状，这包括，但不限于：(1)生理症状(physiological symptom)，诸如热潮红(hot flushes)、阴道干燥(vaginal dryness)、疲劳(fatigue)、头痛(headaches)、体重增加(weight gain)、皮肤老化(skin aging)以及骨质疏松症(osteoporosis)；(2)心理症状(psychological symptom)，诸如焦虑(anxiety)以及忧郁(depression)；以及(3)认知缺陷(cognitive deficit)，诸如精神错乱(mental confusion)、记忆能力(memory ability)下降、学习能力(learning ability)下降、辨识能力(recognition ability)下降以及无法应对(inability to cope)。

[0016] 如此处所用的，术语“有效量(effective amount)”意指当一种依据本发明的含有薯蓣皂素的组合物被投予一需要该组合物来治疗的个体时，一足以提供所欲达致的治疗功效且不会对非标的组织或器官产生非所欲的严重危害的用量。该有效量会视下列因素而变化：要被治疗的疾病的严重性，投药途径，以及要被治疗的个体的体重、年龄、身体状况与反应。此一有效量可为熟习此技艺的人士来决定。如本文中所用的，“有效量”此术语可与“有效剂量(effective dose)”、“治疗有效量(therapeutically effective amount)”和“治疗有效剂量(therapeutically effective dose)”交换使用。

[0017] 处于停经期或停经后期的女性通常会因为蒙受停经期症候群而严重影响她们的健康以及日常生活作息。此外，个体的差异会使得这些女性在症状(symptom)以及病况(condition)程度上会有所不同。近年来，已有许多针对停经期症候群的药物被广泛地研究，但是目前临床上所使用的药物仍无法有效地改善所有与停经期或停经后期有关联的症状。因此，当今医药界皆致力于针对个体的差异以及各种与停经期症候群有关联的症状来开发有用的药物以供治疗或改善的目的。

[0018] 目前已知薯蓣皂素具有改善停经期所诱发的骨质疏松症以及回复在老化的皮肤中的角质细胞增生的效用。为了进一步探讨薯蓣皂素在治疗停经期症候群上的效用，申请人以卵巢切除(OVX)的大鼠[ovariectomized(OVX)rats]作为停经期或停经后期的动物模型并且借由高架十字迷宫试验(elevated plus-maze test)所测得的移动行为(locomotor behavior)而将牠们区分成具有或不具有焦虑症状的OVX大鼠。之后，将薯蓣皂素分别喂食给具有以及不具有焦虑症状的OVX大鼠，继而借由习得无助试验(learned helplessness test)来评估这些大鼠的学习能力。经由实验结果证实：薯蓣皂素可以显著地改善具有焦虑症状的卵巢切除的大鼠的学习能力。

[0019] 基于上述，薯蓣皂素被预期具有可用于改善一具有心理症状(特别是焦虑症状)的停经期或停经后期女性的学习能力的高潜力。于是，本发明揭示薯蓣皂素供应用于制备一用来改善一具有心理症状的停经期或停经后期女性的学习能力的医药品或食品产品的用途。

[0020] 因此，本发明提供一种用于改善一具有心理症状的停经期或停经后期女性的学习能力的组合物，其包含有一有效量的薯蓣皂素。

[0021] 依据本发明，该停经期或停经后期女性具有焦虑症状。

[0022] 依据本发明，该薯蓣皂素的有效量是落在0.014g/天至3.5g/天的范围内。在本发明的一个优选实施例中，该薯蓣皂素的有效量是落在0.14g/天至0.7g/天的范围内。

[0023] 依据本发明，该组合物可被制造成有如一医药品的形式。该医药品可利用熟习此技艺者所详知的技术而被制造成一适合于非经肠地道(parenterally)、局部地(topically)或口服地(orally)投药的剂型，这包括，但不限于，注射品(injection)[例如，无菌的水性溶液(sterile aqueous solution)或分散液(dispersion)]、无菌的粉末(sterile powder)、锭剂(tablet)、片剂(troche)、丸剂(pill)、胶囊(capsule)以及类似物。

[0024] 依据本发明的医药品可以一选自于由下列所构成的群组中的非经肠道途径来投药：腹膜内注射(intraperitoneal injection)、皮下注射(subcutaneous injection)、肌肉内注射(intramuscular injection)、静脉内注射(intravenous injection)、舌下投药(sublingual administration)以及穿皮投药(transdermal administration)。

[0025] 在本发明的一个优选实施例中，该医药品被制成适于舌下投药的剂型。在本发明的一个更优选实施例中，该医药品被制成适于穿皮投药的剂型。

[0026] 在本发明的另一个优选实施例中，该医药品被制成适于口服投药的剂型。

[0027] 依据本发明，该医药品可进一步包含有一被广泛地使用于药物制造技术的药学上可接受的载剂。例如，该药学上可接受的载剂可包含一或多种选自于下列的试剂：溶剂(solvent)、乳化剂(emulsifier)、悬浮剂(suspending agent)、分解剂(decomposer)、黏结剂(binding agent)、赋形剂(excipient)、安定剂(stabilizing agent)、螯合剂(chelating agent)、稀释剂(diluent)、胶凝剂(gelling agent)、防腐剂(preservative)、润滑剂(lubricant)、吸收延迟剂(absorption delaying agent)、脂质体(liposome)以及类似物。

[0028] 依据本发明，该组合物可被当作食品添加物(food additive)，借由以往方法于原料制备时被添加，或是于食品的制作过程中被添加，而与任一种可食性材料被配制成供人类与非人类动物摄食的食品产品。

[0029] 依据本发明，该食品产品的种类包括，但不限于：奶粉(milk powder)、饮料(beverages)、甜点(confectionery)、糖果(candies)、发酵食品(fermented foods)、烘培产品(bakery products)、动物饲料(animal feeds)、健康食品(health foods)以及膳食补充品(dietary supplements)。

[0030] 本发明也提供一种用于改善一具有心理症状的停经期或停经后期女性的学习能力的方法，其包括对该停经期或停经后期女性投药以一有效量的薯蓣皂素。

[0031] 依据本发明，该停经期或停经后期女性具有焦虑症状。

[0032] 依据本发明，薯蓣皂素的每日有效剂量通常是0.2mg/Kg体重至50mg/Kg体重，呈单一剂量或是分成数个剂量的形式，且可被口服地投药或非经肠地道投药。在本发明的一个优选实施例中，薯蓣皂素的每日有效剂量通常是2mg/Kg体重至10mg/Kg体重。

[0033] 本发明将就下面的实施例来作进一步说明，但应了解的是，该等实施例只是供例示说明用，而不应被解释为本发明的实施上的限制。

[0034] <实施例>

[0035] 实验材料：

[0036] 1.实验动物：

[0037] 在下面实施例中所使用的雌性Wistar大鼠(female Wistar rats)(8周大，体重约为264±2g)是购自于台湾的国家实验动物中心(National Laboratory Animal Center，R.O.C.)。所有的实验动物被饲养于一个光照与黑暗各为12小时(光线在早上7点开启)、室温维持在23±1℃以及相对湿度维持在55±5％的独立空调的动物房内，而且水分与饲料被充分地供给。

[0038] 在实验开始之前，各个动物被安抚(handled)以减低动物对于实验操作者以及实验环境的压力反应。在光线开启的第2小时之后，动物被个别地放在一干净的笼子中并且被运送至一具有一照度(illumination)为28～30lux的观察室(observation room)中进行实验，同时实验操作者会离开该观察室以避免在实验期间与动物互动(interaction)。有关实验动物的一切实验程序是由台湾的中山医学大学的动物管理委员会(Animal care Committee of Chung Shan Medical University)所认可，并依据美国国家卫生研究院(National Institutes of Health，NIH)的实验动物饲养管理及使用规范(Guide for the Care and Use of Laboratory Animals)来进行。

[0039] 2.制备含有薯蓣皂素的土司(diosgenin-containing toast)：

[0040] 首先，依据要被投药给大鼠的剂量(也就是，10、50或100mg/kg/天)来分别计算出所需的薯蓣皂素(diosgenin)(购自于sigma，USA)的重量，继而据此分别取既定重量(given weight)的薯蓣皂素来与1g的土司(toast)相混合，而得到含有薯蓣皂素的土司。所形成的含有薯蓣皂素的土司被拿来喂食给实验动物。

[0041] 3.高架十字迷宫(elevated plus-maze)：

[0042] 在下面实施例1中所使用的高架十字迷宫的结构被显示于图1中。该高架十字迷宫是呈十字型地由2个对置的开放臂(opposed open arms)11(50cm×10cm)、2个具有侧壁(side wall)而不具有顶盖(roof)的对置的封闭臂(enclosed arms)12(50cm×10cm×40cm)以及一位于中心的开放区域(open square)13(10cm×10cm)所组成，并且以一为50cm的距离而被设置在地板上方。另外，开放臂11以及封闭臂12分别以一虚拟线(virtual line)14而被区分为一近半部(proximal half)(接近该开放区域
13的部分)与一远半部(distal half)(远离该开放区域13的部分)。在各个实验动物被测试之前，该高架十字迷宫以20％乙醇予以彻底地清洗，继而予以彻底地干燥。

[0043] 4.穿梭箱(shuttle box)：

[0044] 在下面实施例1中所使用的穿梭箱是购自于AccuScan，USA，它是由2个相同的隔室(compartments)所组成，各个隔室具有一由不锈钢条(stainless steel bars)所制成的方格地板(grid floor)，并且借由一具有一中央门(central door)的壁(wall)而被分隔。该中央门可被关闭以分隔该2个隔室，或者被开启以容许实验动物从所在的隔室中穿越至另一个隔室。该穿梭箱可借由计算机控制来传送制约刺激(conditioned stimuli，CS)[一由音调(tone)(75db)以及光线(250lux)所构成的刺激，历时3秒]以及非制约刺激(unconditioned stimuli，UCS)[一脚电击(electric foot shock)(0.5mA)，历时10秒]。在各个实验动物被测试之前，该穿梭箱以20％乙醇予以彻底地清洗，继而予以彻底地干燥。

[0045] 一般实验方法：

[0046] 1.卵巢切除术(ovariectomy)：

[0047] 有关卵巢切除术是参考Y.J.Ho et al.(2007)(同上述)当中所述的方法来进行，并作部分修改。简言之，大鼠借由克他明(ketamine)(100mg/kg)或舒泰(zoletil)(2mg/kg)的肌肉内注射(intramuscular injection)而被麻醉。接着，将大鼠的腰区域(lumbar region)的背侧部分(dorsal part)进行剃毛(shaving)，然后以75％酒精予以消毒(disinfected)，继而以10％聚维酮碘(povidone iodine)予以彻底地消毒。之后，使用手术刀(surgical knife)将皮肤层(skin)切开而使得在皮肤层下方的腹膜(peritoneum)被显露出来，接着以该手术刀将腹膜切开以形成一长度约为1公分的切口(incision)，继而将卵巢移除并使用一4-O消毒缝合线(sterile suture)来缝合伤口。

[0048] 之后，各个大鼠立即被注射以盘尼西林-G普鲁卡因(Penicillin-Gprocaine)(0.2mL，20,000IU)，并且伤口以10％聚维酮碘予以消毒，俾以减低术后感染(post-operative infection)的机会。接着，将各个经卵巢切除的大鼠(ovariectomized rats)单独地放入塑料笼(plastic cages)中饲养并让牠们进行伤口愈合历时大约5天，继而将牠们随机地分组并转移至饲养笼(home cages)中。

[0049] 实施例1.薯蓣皂素对于具有焦虑症状(anxiety symptom)的卵巢切除(OVX)的大鼠[ovariectomized(OVX)rats]的学习能力(learning ability)的影响[0050] A.具有焦虑症状的卵巢切除的大鼠的筛选：

[0051] 实验方法：

[0052] 将雌性Wistar大鼠随机地分成实验组(n＝74)以及假手术组(n＝19)，其中实验组大鼠是依照上面“一般实验方法”的第1项「卵巢切除术」当中所述的方法来进行卵巢切除，而假手术组大鼠也被拿来进行相同的实验，不同之处在于：这些大鼠的卵巢没有被移除。

[0053] 在手术之后的第29天，各组大鼠被拿来进行下面的高架十字迷宫试验(elevated plus-maze test)，俾以了解卵巢切除对于大鼠移动行为(locomotor behavior)的影响并借此来判断牠们是否具有焦虑症状。

[0054] 有关高架十字迷宫试验是参考Y.J.Ho et al.(2007)(同上述)当中所述的方法来进行，并作部分修改。简言之，将大鼠放在高架十字迷宫的开放区域13上并且面向2个开放臂11中的一者，然后观察并记录牠的行为历时5分钟。在试验的期间，使用一被放置在高架十字迷宫上方的摄影机来监测并记录大鼠的行为，借此可得到下面的量测值：

[0055] (1)开放臂时间(open arm time)：大鼠进入并停留在开放臂11上的时间；

[0056] (2)封闭臂时间(enclosed arm time)：大鼠进入并停留在封闭臂12上的时间；

[0057] (3)开放臂活动量(open arm activity)：大鼠穿越开放臂11的虚拟线14的次数；

[0058] (4)封闭臂活动量(enclosed arm activity)：大鼠穿越封闭臂12的虚拟线14的次数；以及

[0059] (5)总臂活动量(total arm activity)：开放臂活动量与封闭臂活动量的总合。

[0060] 接着，将假手术组大鼠所测得的各项量测值进行统计运算，所得到的实验数据是以平均值±SEM来表示。之后，以假手术组大鼠所测得的开放臂时间的平均值作为一基准值，当实验组大鼠所测得的开放臂时间是低于该基准值时表示具有焦虑症状，相反地，若是高于该基准值，表示不具有焦虑症状。依据此方式，申请人进一步将实验组的大鼠区分成具有或不具有焦虑症状的OVX大鼠，继而将具有或不具有焦虑症状的OVX大鼠所测得的各项量测值分别进行统计运算，所得到的实验数据也以平均值±SEM来表示。

[0061] 之后，各组所获得的实验数据借由t-试验(t-tests)来作分析，俾以评估具有或不具有焦虑症状的OVX大鼠与假手术组大鼠之间的差异性，以及具有焦虑症状的OVX大鼠与不具有焦虑症状的OVX大鼠之间的差异性。若所得到的统计比对结果是p＜0.05，代表有统计学显著性(statistical significance)。

[0062] 结果：

[0063] 下面表1显示假手术组以及实验组大鼠借由高架十字迷宫试验所测得的移动行为。从表1可见，相较于假手术组以及不具有焦虑症状的OVX大鼠，具有焦虑症状的OVX大鼠在开放臂时间与开放臂活动量上都有显著的降低，而在封闭臂时间与封闭臂活动量上则有显著的增加。另外，相较于假手术组的大鼠，不具有焦虑症状的OVX大鼠在开放臂时间上有显著的增加，而在封闭臂时间上则有显著的降低。这个实验结果显示：卵巢切除会引起部分的大鼠出现焦虑症状。

[0064]

[0065] A.薯蓣皂素的喂食以及习得无助试验(learned helplessness test)：

[0066] 实验方法：

[0067] 在上面A项中从实验组大鼠中所筛选出的具有以及不具有焦虑症状的OVX大鼠分别被随机地分成4组，其中包括1个对照组以及3个实验组(也就是薯蓣皂素组1、2以及3)。薯蓣皂素组1、2以及3的OVX大鼠分别被喂食以在上面“实验材料”的第2项“制备含有薯蓣皂素的土司”当中所制得的含有薯蓣皂素的土司(剂量分别为10、50以及100mg/kg/天)，而对照组的OVX大鼠被喂食以不含有薯蓣皂素的土司。在连续喂食历时23天之后，各组大鼠被拿来进行下面的习得无助试验，俾以了解薯蓣皂素对于具有或不具有焦虑症状的OVX大鼠在面对压力时的学习能力(1earning ability)的影响。

[0068] 有关习得无助试验是参考W.F.Wang et al.(2007)，Chin.J.Physiol.，50：63-68以及Y.T.Lee et al.(2008)，Neuroreport，19：1243-1247当中所述的方法来进行，并作部分修改。简言之，令大鼠依照下列方式来进行实验：

[0069] (1)第1天期间(Day-1session)，无法逃脱的脚电击(inescapable foot shock)：将大鼠随意地放在穿梭箱的2个隔室的任一者中，继而容许大鼠透过开启的中央门来探索该2个隔室历时1分钟。之后，中央门被关闭，大鼠被进行40次无法逃脱的CS-UCS配对(inescapable CS-UCS pairings)的测试(trials)，每一次的无法逃脱的CS-UCS配对测试是先进行1次CS，继而为1次UCS，而各个无法逃脱的CS-UCS配对测试的平均间隔(mean interval)为60秒(范围落在50至70秒)；以及

[0070] (2)第2天期间(Day-2session)，可逃脱的脚电击(escapable foot shock)[也就是主动回避试验(active avoidance test)]：将大鼠随意地放在穿梭箱的2个隔室的任一者中，继而容许大鼠透过开启的中央门来探索该2个隔室历时1分钟。之后，大鼠被进行16次可逃脱的CS-UCS配对(escapable CS-UCS pairings)的测试，每一次的可逃脱的CS-UCS配对测试是先对大鼠进行1次CS，之后，依据大鼠的反应来分别进行下面3种测试：(1)若大鼠在接受CS的期间经由开启的中央门而从所在的隔室中穿越至另一个隔室内，CS立即停止并且不会进行UCS，此次可逃脱的CS-UCS配对测试即结束并且被记录为1次回避反应(avoidance response)，接着在一约为60秒的时间间隔之后，下一次的可逃脱的CS-UCS配对测试被起始；(2)若大鼠在接受CS的期间没有经由开启的中央门而从所在的隔室中穿越至另一个隔室内，UCS会在CS结束后立即开始，之后若大鼠在接受UCS的期间经由开启的中央门而从所在的隔室中穿越至另一个隔室内，此次可逃脱的CS-UCS配对测试即结束并且被记录为1次逃脱反应(escape response)，接着在一约为47-57秒的时间间隔之后，下一次的可逃脱的CS-UCS配对测试被起始；以及(3)若大鼠在接受1次CS以及1次UCS的期间当中都停留在原来所在的隔室中而没有穿越至另一个隔室内，在UCS结束之后，此次可逃脱的CS-UCS配对测试即结束并且被记录为1次失败反应(failure response)，接着在一约为47秒的时间间隔之后，下一次的可逃脱的CS-UCS配对测试被起始。在一总计为16次的可逃脱的CS-UCS配对测试中，回避、逃脱以及失败反应的次数分别被记录，若所测得的回避反应次数增加或逃脱反应次数降低表示大鼠学会做出一穿梭反应(shuttling response)以回避电击。

[0071] 所得到的实验数据是以平均值±SEM来表示。所有数据是借由单因子变异数分析(one-way analysis of variance，ANOVA)，继而以最小显著差(least-significant difference，LSD)来作分析，俾以评估各实验组与对照组之间的差异性。若所得到的统计比对结果是p＜0.05，代表有统计学显著性。

[0072] 结果：

[0073] 下面表2显示被喂食以薯蓣皂素的具有或不具有焦虑症状的OVX大鼠借由习得无助试验所测得的行为反应(behavioral response)。从表2可见，就具有焦虑症状的OVX大鼠而言，薯蓣皂素组1的OVX大鼠的回避反应次数相较于对照组的OVX大鼠所具者有增加，而薯蓣皂素组1以及2的OVX大鼠的逃脱反应次数相较于对照组的OVX大鼠所具者都有降低，其中薯蓣皂素组1的OVX大鼠的逃脱反应次数是最低的。另外，就不具有焦虑症状的OVX大鼠而言，薯蓣皂素组1、2以及3的OVX大鼠的回避以及逃脱反应次数相较于对照组的OVX大鼠所具者皆无明显的差异。这个实验结果显示：薯蓣皂素可以改善具有焦虑症状的OVX大鼠的学习能力。

[0074]

[0075] 于本案说明书中被引述的所有文献数据以及专利文件以它们的整体被并入本案作为参考数据。若有所冲突时，本案的详细说明(包含界定在内)将占上风。

[0076] 虽然本发明已参考上述特定的实施例被描述，明显地在不背离本发明的范围和精神之下可作出很多的修改和变化。因此意欲的是，本发明只受如随文检附的权利要求书所示者的限制。